CN106138259B - 一种治疗风热感冒的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属医药技术领域，具体是涉及一种治疗风热感冒的中药组合物，该组合物是由如下原料制备而成的：柴胡1‑3份、葛根2‑4份、黄芩1‑3份、石膏3‑5份、青蒿2‑4份、白芍1‑3份、炙甘草0‑2份。本发明公开了该组合物的合剂的制备方法。

Description

一种治疗风热感冒的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明属医药技术领域，具体是涉及一种治疗风热感冒的中药组合物，以及该组合物的制备方法。

背景技术

感冒在西医又称为急性上呼吸道感染，是系指自鼻腔至喉部之间的急性炎症的总称。由流感病毒引起的为流行性感冒，由其他病毒(多达一百多种，以鼻病毒、冠状病毒最常见)引起的为普通感冒。临床表现以鼻塞、咳嗽、头痛、恶寒发热、全身不适为其特征。

当有受凉、淋雨、过度疲劳等诱发因素，使全身或呼吸道局部防御功能降低时，原已存在于上呼吸道或从外界侵入的病毒或细菌可迅速繁殖，引起发病，尤其是老幼体弱或有慢性呼吸道疾病如鼻旁窦炎、扁桃体炎者，更易罹病。

祖国医学早在《内经》时期已有类似病证的记载。如《素问·热论》“今夫热病者，皆伤寒之类也。”到了清代，“感冒”的内容逐渐扩大，如《医宗金鉴·幼科杂病心法要诀》中，即将“伤风”、“伤寒”、“感冒夹惊”等列于“感冒门”下；而《儿科醒·表论》则不再云“伤风”、“伤寒”，而统称“四时感冒”。

中医临床对感冒的治疗采取分型论治，主要分为以下几个临床证型。

(1)风寒感冒：恶寒重、发热轻、无汗或微汗、肢体酸痛、头痛、鼻塞严重、流清涕、喉痒、咳嗽、咳痰(痰液稀薄且色白)、喜热饮、舌苔薄白而滑、脉浮紧。

(2)风热感冒：发热重、微恶风寒、有汗或汗出不畅、头胀痛、咳嗽咳痰(痰黏或黄)、咽燥红干痛、流黄浊涕、口渴欲饮、舌苔微黄、脉浮数。

(3)暑湿感冒：身热不畅、微恶寒、汗少或汗出热不解、肢体酸重或疼痛、头重胀痛、咳嗽痰黏、流清涕、心烦倦怠、口渴、口中黏腻、胸闷、呕恶、小便黄少、腹泻、舌苔薄黄而腻、脉濡数。

(4)气虚感冒：身体虚弱、恶寒较甚、发热出汗、身热倦怠、短气乏力、咳嗽、呼吸短促、咳痰无力、头痛头晕、胸闷、舌苔薄白、脉浮虚或脉浮无力。

(5)血虚感冒：平素即阴血亏虚，外感后身热头痛、恶寒无汗、鼻塞喷嚏、头晕、面色不华、唇甲色淡、心悸、流清涕、咳嗽声重、颈项拘紧、肢体酸痛、手足麻木、肌肤枯燥、目涩眼干、视物昏花、舌苔淡白、脉细或浮而无力。

(6)阴虚感冒：平素体阴虚，外感后发热、微恶风寒、头痛、汗少或盗汗、口干咽燥、干咳少痰、五心烦热、腰膝酸软、头晕耳鸣、足跟疼痛、舌质红、舌苔薄白或少苔、脉细数或浮数。

(7)阳虚感冒：平素体阳虚，外感后头痛、恶寒发热、寒重热轻、鼻塞流清涕、无汗肢冷、神疲倦卧、面色苍白、腰膝酸冷、语声低微、咳痰稀薄、气逆而喘、小便频数、腹泻、舌体胖嫩、舌质淡或有红痕、苔白滑、脉弱或浮大无力。

中医治疗感冒历史悠久，理论阐述深刻，有效方药不胜枚举，但由于罹患感冒者众多，纵有诸多治疗感冒的中成药面市，仍不能满足广大病患者需求，因此，我们将经长期临床实践，总结出治疗感冒的有效经验方，制成口服液制剂，为更多的感冒患者解除病痛。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种治疗风热感冒的中药组合物，本发明目的之二是提供该组合物的制备方法。

本发明的组合物技术方案如下：

柴胡1-3份、葛根2-4份、黄芩1-3份、石膏3-5份、青蒿2-4份、白芍1-3份、炙甘草0-2份。

本发明的组合物优选技术方案如下：

柴胡2份、葛根3份、黄芩2份、石膏4份、青蒿3份、白芍2份、炙甘草1份。

本发明的组合物制备方法的技术方案如下：

以上七味药材，将柴胡、青蒿提取挥发油，提取后的水溶液另器收集；石膏加水先煎，黄芩置沸水杀酶，再与提取挥发油后的药渣及其余三味共煎煮，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至相对密度约1.09(60℃)，离心，取清液浓缩，至相对密度约1.20(60℃)，加水至1000ml，二次离心，加入挥发油、聚山梨酯80、山梨酸钾、阿司帕坦，并加水调整总量，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

上述制备方法中，柴胡、青蒿加6-10倍量水，水蒸气蒸馏4-6小时，获得挥发油。

上述制备方法中，石膏先煎10-50分钟，黄芩煮沸杀酶10分钟后，加柴胡、青蒿提取挥发油后的药渣及其余药材，加6-10倍量水，煎煮1-3次，每次1-2小时，合并煎液，滤过。

上述制备方法中，浓缩为减压浓缩，温度为60-90℃。

上述制备方法中，挥发油和聚山梨酯80以质量比1∶(2-4)比例混合，山梨酸钾用量0.2％-0.3％(W/V)。

上述制备方法中，阿司帕坦用量为0.15-0.2％(W/V)。

上述制备方法中，柴胡、青蒿加6倍量水，水蒸气蒸馏4小时，获得挥发油。

上述制备方法中，石膏先煎30分钟，黄芩煮沸杀酶10分钟后，加柴胡、青蒿提取挥发油后的药渣及其余药材，加10倍量水，煎煮2次，每次1小时，合并煎液，滤过。

上述制备方法中，浓缩为减压浓缩，温度为70℃。

上述制备方法中，挥发油和聚山梨酯80以质量比1∶3比例混合，山梨酸钾用量优选0.27％(W/V)。

上述制备方法中，阿司帕坦用量为0.15％(W/V)。

本发明的优点：

本组合物以柴胡、葛根为君药，柴胡性微寒、味苦、辛、归肝经、胆经，解表透热，葛根，性凉、气平、味甘，清热解表、解肌止痛，二药针对外感风热之邪共为君药；黄芩清上焦热邪、石膏泻阳明之火、生津止渴、青蒿解表透热，助君药清热解表作用，共为臣药；白芍、甘草二药酸甘化阴，防热邪伤阴，且甘草具有调和诸药之功，为佐使之品。全方共奏辛凉透表，解肌清热，主要用于外感风热所致上呼吸道感染的治疗，症见发热、头痛等。

本发明组合物是针对外感风热所致上呼吸道感染的治疗，症见发热、头痛、咽喉肿痛等，治疗小儿及成人外感风寒，入里化热所致发热，头痛，咽喉肿痛等症状，可取得较好的效果。

本组合物治疗30对风热感冒患者的临床研究，研究将60例风热感冒患者随机分为试验组与对照组各30例，试验组给予口服本组合物治疗，对照组给予清开灵口服液，疗程3d；评价本组合物治疗风热感冒的临床有效性及安全性。结果试验组中医证候临床总有效率为93.33％，对照组为73.33％，实验组明显高于对照组；两组开始退热时间本组合物为2.69±1.32小时，清开灵口服液为4.17±4.31小时，实验组优于对照组；在体温恢复平均时间方面，本组合物为20.13±4.3小时，清开灵口服液组为39.87±8.6小时。

结论：本组合物对急性上呼吸道感染(风热感冒)疗效确切，在总有效率、开始退热时间、体温恢复时间三个指标方面显著优于清开灵口服液，且无不良事件发生。

药理、毒理研究也证明，本发明组合物治疗风热感冒，在主要疗效指标：解热、镇痛、抗炎、抗病毒抗菌方面，整体评价优于阳性对照药清开灵口服液。急毒和长毒试验，证明未发现任何毒副作用。

发明附图

图1组合物合剂制备工艺流程图

具体实施方式

实施例1

制法：以上七味，将柴胡、青蒿水蒸气蒸馏提取挥发油(加6倍量水，提取4h)，蒸馏后的水溶液另器收集；石膏加水先煎30分钟，黄芩置沸水杀酶10分钟，再与蒸馏后的药渣及其余三味加10倍量水共煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至1g药材/ml(相对密度约1.09，60℃)，离心，取清液浓缩，至相对密度约1.2(60℃)，加水至1000ml，二次离心。将挥发油(按挥发油∶聚山梨酯80＝1∶3混合，搅拌均匀)、山梨酸钾0.27％(W/V)、阿司帕坦0.15％(W/V)加入药液中，加水调整总量至1000ml，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

实施例2

制法：以上七味，将柴胡、青蒿水蒸气蒸馏提取挥发油(加6倍量水，提取6h)，蒸馏后的水溶液另器收集；石膏加水先煎10分钟，黄芩置沸水杀酶10分钟，再与蒸馏后的药渣及其余三味加10倍量水共煎煮一次，2小时，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至1g药材/ml(相对密度约1.09，60℃)，离心，取清液浓缩，至相对密度约1.2(60℃)，加水至1000ml，二次离心。将挥发油(按挥发油∶聚山梨酯80＝1∶2混合，搅拌均匀)、山梨酸钾0.27％(W/V)、阿司帕坦0.15％(W/V)加入药液中，加水调整总量至1000ml，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

实施例3

制法：以上七味，将柴胡、青蒿水蒸气蒸馏提取挥发油(加10倍量水，提取4h)，蒸馏后的水溶液另器收集；石膏加水先煎30分钟，黄芩置沸水杀酶10分钟，再与蒸馏后的药渣及其余三味加6倍量水共煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至1g药材/ml(相对密度约1.09，60℃)，离心，取清液浓缩，至相对密度约1.2(60℃)，加水至1000ml，二次离心。将挥发油(按挥发油∶聚山梨酯80＝1∶4混合，搅拌均匀)、山梨酸钾0.27％(W/V)、阿司帕坦0.15％(W/V)加入药液中，加水调整总量至1000ml，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

实施例4

制法：以上七味，将柴胡、青蒿水蒸气蒸馏提取挥发油(加6倍量水，提取6h)，蒸馏后的水溶液另器收集；石膏加水先煎50分钟，黄芩置沸水杀酶10分钟，再与蒸馏后的药渣及其余三味加8倍量水共煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至1g药材/ml(相对密度约1.09，60℃)，离心，取清液浓缩，至相对密度约1.2(60℃)，加水至1000ml，二次离心。将挥发油(按挥发油∶聚山梨酯80＝1∶3混合，搅拌均匀)、山梨酸钾0.2％(W/V)、阿司帕坦0.2％(W/V)加入药液中，加水调整总量至1000ml，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

实施例5

制法：以上七味，将柴胡、青蒿水蒸气蒸馏提取挥发油(加10倍量水，提取4h)，蒸馏后的水溶液另器收集；石膏加水先煎20分钟，黄芩置沸水杀酶10分钟，再与蒸馏后的药渣及其余三味加10倍量水共煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至1g药材/ml(相对密度约1.09，60℃)，离心，取清液浓缩，至相对密度约1.2(60℃)，加水至1000ml，二次离心。将挥发油(按挥发油∶聚山梨酯80＝1∶2混合，搅拌均匀)、山梨酸钾0.27％(W/V)、阿司帕坦0.15％(W/V)加入药液中，加水调整总量至1000ml，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

实施例6

制法：以上七味，将柴胡、青蒿水蒸气蒸馏提取挥发油(加8倍量水，提取5h)，蒸馏后的水溶液另器收集；石膏加水先煎30分钟，黄芩置沸水杀酶10分钟，再与蒸馏后的药渣及其余三味加8倍量水共煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至1g药材/ml(相对密度约1.09，60℃)，离心，取清液浓缩，至相对密度约1.2(60℃)，加水至1000ml，二次离心。将挥发油(按挥发油∶聚山梨酯80＝1∶4混合，搅拌均匀)、山梨酸钾0.3％(W/V)、阿司帕坦0.2％(W/V)加入药液中，加水调整总量至1000ml，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

实施例7

制法：以上七味，将柴胡、青蒿水蒸气蒸馏提取挥发油(加8倍量水，提取5h)，蒸馏后的水溶液另器收集；石膏加水先煎40分钟，黄芩置沸水杀酶10分钟，再与蒸馏后的药渣及其余三味加6倍量水共煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液与上述蒸馏后的水溶液合并，浓缩至1g药材/ml(相对密度约1.09，60℃)，离心，取清液浓缩，至相对密度约1.2(60℃)，加水至1000ml，二次离心。将挥发油(按挥发油∶聚山梨酯80＝1∶3混合，搅拌均匀)、山梨酸钾0.2％(W/V)、阿司帕坦0.15％(W/V)加入药液中，加水调整总量至1000ml，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

第一部分本发明组合物合剂的制备工艺研究

1.挥发油提取条件筛选

1.1加水量考察

按处方比例称取柴胡100g、青蒿150g，分别加6倍量水、8倍量水、10倍量水，按挥发油测定甲法操作，以提油量为指标，直至挥发油不再增加为止，结果表明，加水量对挥发油提取率无明显影响。

1.2提油时间考察

按处方比例称取柴胡100g、青蒿150g，加6倍量水提取挥发油，记录不同时间的挥发油量，直至挥发油不再增加为止，结果提取4小时以后，挥发油的量不再增加。

2.水提取条件预实验

处方：柴胡6g，葛根9g，黄芩6g，石膏12g，青蒿9g，白芍6g，炙甘草3g。

2.1预试验

按4倍处方量称取药材，平行两份。柴胡、青蒿先提取挥发油(加6倍量水提取4h)，滤过保留药渣；石膏先煎30分钟，黄芩煮沸杀酶10分钟，加柴胡、青蒿药渣及其余药材，加水至10倍量，提取3次，每次1小时，每次提取液分开保留，测定黄芩苷转移率、得膏率。结果见表1-1。

表1-1 水提工艺预试验

从结果可知，10倍水提取3次，黄芩苷转移率可达到90％左右，得膏率可达28％，其中第三次提取液黄芩苷转移率仅占4％，得膏率仅占3％，表明有效成分主要集中在前二次提取液中。

2.2最佳提取工艺考察

2.2.1正交试验考察及方差分析

为得到最佳工艺，在预试验基础上选取加水量、煎煮次数、煎煮时间为考察因素，每因素取3个水平进行L₉(3⁴)正交试验，因素水平表见1-2。

表1-2 因素水平表

按5倍处方量称取药材。柴胡、青蒿先提取挥发油(加6倍量水提取4h)，滤过保留药渣；石膏先煎30分钟，黄芩煮沸杀酶10分钟，加柴胡、青蒿药渣及其余药材，根据因素水平表安排试验，选用黄芩苷转移率、得膏率为指标进行综合评价，将两个指标的权重系数分别定为80％、20％。

综合评分(％)＝黄芩苷转移率×80/最大转移率+得膏率×20/最大得膏率。

正交实验结果见表1-3，方差分析见表1-4。

表1-3 正交试验结果

表1-4 方差分析表

结果分析：由正交试验数据直观分析可知，以综合评分为指标，影响因素顺序为B＞A＞C，即煎煮次数＞加水量＞煎煮时间；方差分析结果表明，A、B因素均有极显著性影响，C因素无显著性影响，从以上结果确定柴胡等药材的提取工艺为A₃B₃C₁：即加10倍量水，提取3次，每次1.0小时。由正交试验和预试验数据，煎煮次数为显著影响因素，但第二次煎煮之后，有效成分基本转移完全，第三次煎煮液中，有效成分转移及出膏已经很少，相比较于前两次可以忽略。为节省提取时间，提取次数宜定为2次。综上所述，最佳提取工艺为加10倍量水，提取2次，每次1.0小时。

3.药液纯化工艺研究

3.1水提液浓缩工艺考察

浓缩是中药制剂原料成型前处理的重要单元操作。中药水提液常用的浓缩方法主要有常压浓缩和减压浓缩。常压浓缩是料液在一个大气压下进行浓缩的方法。该方法设备简单，但对热敏性有效成分破坏较多，应用较少；减压浓缩是在密闭的容器内，抽真空降低内部压力，使料液的沸点降低而进行浓缩的方法。该方法可以有效防止或减少热敏性有效成分破坏损失，并能不断排除溶剂蒸汽，有利于蒸发顺利进行，提高生产效率。同时可以回收溶剂，应用较普遍。现采用减压浓缩，并对浓缩温度进行考察，以优选浓缩工艺条件。

取水提液适量，分别于60、70、80、90℃条件下进行减压浓缩(真空度-0.09～-0.095MPa。)至相对密度1.09(60℃测)，并加水至1g药材/ml浓度，记录不同温度下所用浓缩时间。取样适量，测定黄芩苷转移率，结果见表1-5。

表1-5 减压浓缩工艺考察数据

试验结果表明，减压浓缩温度对黄芩苷转移率影响较大；同时，随着温度的升高，浓缩时间缩短。综合考虑黄芩苷转移率和浓缩效率，确定减压浓缩温度为70℃。

3.2去杂工艺筛选

口服液应澄清，为除去杂质，试验对纯化工艺进行了筛选、优化，最终确定了纯化工艺。

试验过程：将提取液减压浓缩至1g药材/ml、2g药材/ml两种浓度，分别进行5000rpm×15min离心、60％醇沉、70％醇沉处理。

离心液，取上清液加水至离心前药液体积，混匀即可；醇沉液，醇沉24小时后过滤，回收乙醇至无醇味，并加水至醇沉前药液体积，混匀。比较不同纯化工艺中黄芩苷转移率、出膏率、pH及冰箱冷藏7天(4℃)后的稳定性，见表-6。

表1-6 纯化工艺筛选结果表

由以上结果比较可知，相同药液浓度条件下，离心法对黄芩苷含量及出膏率影响较小，且稳定性较好，因此选用离心法进行药液纯化。

4.制剂成型工艺研究

4.1挥发油加入方式

本方含少量挥发油，约为成品的0.04％，与水提药液不相容，拟加少量聚山梨酯80，使其与药液混合均匀。为使挥发油加入药液后仍保持澄清，对聚山梨酯80用量进行了筛选，取相同量挥发油加不同量聚山梨酯80，并加水至同样体积，搅拌均匀，观察效果，并考察灭菌后效果，见表1-7。

表1-7 挥发油加入方式考察表

根据试验结果，聚山梨酯80用量为挥发油的2倍、3倍或者4倍(W/W)均可，3倍时效果较好，故选取挥发油和聚山梨酯80以1∶3比例混合，搅拌均匀，加入药液中即可。

4.2防腐剂种类及用量选择

药液中含有聚山梨酯80，拟选择山梨酸钾作为防腐剂。相对于其他常用防腐剂，山梨酸钾与聚山梨酯80的络合作用较小，尤其适合在含有聚山梨酯80的液体制剂中使用。

合剂通则要求山梨酸使用量需小于0.3％；而本品聚山梨酯80溶液中，山梨酸用量不小于0.2％方有防腐作用。综合考虑防腐要求，选择山梨酸钾使用量为0.27％(以山梨酸计约为0.2％)。

4.3矫味剂的选择及用量

4.3.1矫味剂的选择

本品药材提取物中含有挥发油，气芳香、味辛凉，苦、涩，如不加矫味剂，则可能影响病人对药物的依从性和顺应性，从而影响到药品的治疗效果。因此，需加入一定量的甜味剂，我们拟选择常用的阿司帕坦为本品的甜味剂。阿司帕坦俗称蛋白糖，是新型高效的甜味剂，甜度是蔗糖的200倍，甜味与蔗糖相近，在pH3～5环境下稳定，在食品生产中有广泛的应用。据文献报道，阿司帕坦具有低热、高甜、无毒、不致肥胖、不引起龋齿等优点，使用安全可靠。

另外，口服液中也常用氯化钠作为矫味剂，将溶液调到略咸，以消除不良味道，我们在此也考察氯化钠的矫味效果。

4.3.2矫味剂的用量

为了改善口服液的口感，我们在药液中加入不同量的阿司帕坦或者氯化钠，用不同口感的人员进行试验，评分标准为：1分，不能接受；2分，不大能接受；3分，勉强接受；4分，能接受；5分，比较喜欢。选取3个样品，请10人评分，具体见表1-8。

表1-8 矫味剂选择表

结果分析：结合口味评分结果，选择阿司帕坦作为矫味剂，用量为0.15％(W/V)。

第二部分药效学试验结果

1试验目的观察本发明组合物的有效性。

2.试验材料

1.1受试药物

按照实施例1制备(二次离心后，离心液继续浓缩至相对密度约1.25(60℃)，浓缩液减压干燥(60℃)，粉碎，再喷入挥发油，装入密闭容器中)干浸膏；性状：棕黄色粉末。临床人用量为9.6g干膏/60kg/d。

1.2阳性对照药

1.2.1利巴韦林颗粒：性状：白色颗粒。规格：50mg/袋。

1.2.2阿莫西林胶囊：规格：0.5g/粒。

1.2.3阿斯匹林肠溶片：规格：0.1g/片；性状：肠衣溶片，除去包衣后显白色。

1.2.4柴葛解肌汤古方按古法制备。

1.2.5清开灵口服液：规格：10ml/支。

1.3试验动物

1.3.1小鼠：体内抗病毒体重为14±1g，体内抑菌试验体重为18±1g，其他试验用20±2g。

1.3.2家兔：雌雄各半，普通级，体重2.0～2.5kg。

1.4细菌菌种

金黄色葡萄球菌(标准株26003)-80℃冰箱保存。

1.5病毒毒株

甲型H1N1流感病毒FM1株；副流感病毒仙台株，-80℃冰箱保存。

1.6试验试剂及仪器

配备相应的试剂及仪器。

2.方法及结果

2.0剂量设计

2.0.1本发明组合物干膏：人临床用量为9.6g干膏/60kg体重/d，即0.16g干膏/kg体重/d；小鼠试验用量为1.76g干膏/kg/d；家兔试验用量为0.48g干膏/kg/d。

2.0.2利巴韦林颗粒：人临床用量为450mg/60kg/d，换算成小鼠等效剂量为82.5mg/kg。

2.0.3阿莫西林胶囊：人临床用量为2.0g/60kg，试验时换算成小鼠等效剂量为370mg/kg/d。

2.0.4阿司匹林肠溶片：根据本试验室常规用量，小鼠用量为300mg/kg/d、家兔用量为100mg/kg/d。

2.0.5古方组：柴葛解肌汤与本方折合原药材用量相等。

2.0.6清开灵口服液：人临床用量为60ml/60kg/d，试验时换算成小鼠等效剂量为11ml/kg/d，家兔等效剂量为3ml/kg/d。

2.1解热试验(对内毒素致家兔发热模型的解热作用)

内毒素配置：试验前配置成250ng/ml/kg剂量。

家兔的选择：家兔进入实验室后，分别在试验前2天及试验当天晨测基础肛温，选择三次基础肛温值在38.0～39.0℃之间且每次波动在0.3℃以内的家兔用于试验。

试验方法：取体温合格的家兔，根据试验当天基础肛温值均匀分组，分别为正常对照组、模型对照组、阿司匹林对照组、古方对照组、清开灵口服液对照组及本发明组合物组，每组6只。各给药组按5ml/kg灌胃给药1次，正常对照和模型对照组在同等情况下灌胃蒸馏水。灌胃1h后除正常对照组外其余各组按体重值耳缘静脉注射内毒素1ml/kg进行造模。分别测定造模后1h、2h、3h、4h的肛温，以不同时间肛温与基础肛温之差值为体温变化的指标，结果采用组间比较t检验进行统计学处理。体温检测完后，处死家兔，取下丘脑，采用酶联免疫试剂盒检测各组家兔下丘脑中PGE2、AVP和cAMP的含量。

表2-1结果显示：在内毒素致家兔发热模型上，阿司匹林组、本发明组合物组在造模后1h、2h、3h对家兔具有明显的解热作用，与模型组比较有显著性差异，古方组、清开灵组未见显著性差异。

表2-1 本发明组合物对内毒素致家兔发热模型体温的影响

注：与正常组比较##P＜0.01；与模型对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01。

2.2镇痛试验(对热板致小鼠疼痛模型的影响)

动物筛选：取雌性小鼠体重20±2g，每次放1只在热板上，自放入到出现舔足所需的时间(秒)做为该鼠的正常痛阈值。凡舔足时间小于5秒、大于30秒或跳跃者弃之不用。重复测定动物正常痛阈值，取2次痛阈值的均值做为该鼠给药前的痛阈值。

试验方法：取合格小鼠，按痛阈值均匀随机分为模型对照组、阿司匹林对照组、古方对照组、清开灵对照组及本发明组合物，每组10只。结果采用组间比较t检验进行统计学处理。

表2-2 本发明组合物对热板致小鼠疼痛模型的影响

与自身给药前比较：*P＜0.05；**P＜0.01。

表2-2结果显示：本发明组合物小鼠痛阈值明显升高，其中本发明组合物给药后1h、2h、3h与空白对照组比较均有显著性差异；古方组、清开灵组药后1小时有显著性差异，药后2、3小时未见显著性差异。说明柴葛口服液中剂量组比清开灵组镇痛时间更持久，且镇痛强度优于古方和清开灵。

2.3抗炎试验(对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响)

取小鼠60只，按体重随机分为空白对照组、模型对照组、阿司匹林对照组、古方对照组、清开灵口服液对照组及本发明组合物组，每组10只，各给药组按0.2ml/10g灌胃给药1次，对照组在同等条件下给药蒸馏水灌胃。末次给药1小时后，各鼠尾静脉注射0.5％伊文思兰液体0.1ml/10g，除正常对照组外，其余各组随即腹腔注射1％的醋酸0.2ml/只，20分钟后脱臼处死动物，用6ml的生理盐水冲洗腹腔，反复轻揉腹部20次，吸出洗涤液4ml，3000rpm离心15分钟，取上清液于630nm处测光密度值，结果采用组间比较t检验进行统计学处理。

表2-3 本发明组合物对小鼠毛细血管通透性的影响

与空白对照组比较：##P＜0.01；与模型对照组比较：**P＜0.01，*P＜0.05。

表2-3结果显示：本发明组合物组、阿司匹林组、古方组、清开灵组能显著抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增高，与模型对照组比较具有显著性差异。

2.4对流感病毒感染小鼠肺炎模型的影响

取ICR小鼠按体重等级随机分为7组，分别为正常对照组、模型对照组、利巴韦林对照组、清开灵口服液对照组、本发明组合物组，每组10只，雌雄各半。除正常对照组外，将小鼠用乙醚轻度麻醉，以15个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染，每只35ul。感染当天开始给药，每次按0.2ml/10g体重灌胃，每天1次，连续4天，正常对照组和模型对照组在同等条件下蒸馏水灌胃。第5天给药1小时后称重、眼眶取血，分离血清，解剖，称肺重，计算肺指数及肺指数抑制率。结果采用组间比较t检验进行统计学处理。

肺指数＝肺湿重(g)/体重(g)

表2-4 本发明组合物对流感病毒感染正常小鼠肺炎模型的影响

注：与正常组比较##P＜0.01；与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

表2-4结果显示：利巴韦林组、古方组、本发明组合物组能降低流感病毒感染正常小鼠肺炎模型的肺指数，与模型对照组比较具有显著性差异，清开灵组未见显著性差异。

2.5对金黄色葡萄球菌感染小鼠的死亡保护作用

感染菌液的制备：取金黄色葡萄球菌接种于营养肉汤培养液中，37℃培养16小时。细菌比浊浓度为9×10⁸个细菌/ml。

动物感染及分组：取ICR小鼠，按体重等级随机分组，分别为模型对照组、阿莫西林对照组、古方对照组、清开灵对照组、本发明组合物组，每组20只，雌雄各半。分组后各给药组灌胃给药，0.2ml/10g，1次/日，连续3天，模型对照组在同等情况下给蒸馏水。第3天给药前1小时各组动物腹腔注射9×10⁸个菌/ml的菌液，0.2ml/只进行造模。感染后每日观察动物的死亡情况，连续14天，记录死亡数，计算死亡率、保护率、平均存活天数及生命延长率。结果采用卡方检验及T检验进行统计学处理。

死亡率＝死亡数/动物总数

表2-5 本发明组合物对金葡菌感染小鼠死亡的保护作用

与模型对照组比较：**P＜0.01*P＜0.05。

表2-5结果显示：采用金黄色葡萄球菌感染正常小鼠2周内，模型组动物死亡率为90％，平均存活天数为2.55天；阿莫西林组、本发明组合物组、古方组、清开灵组动物的死亡数均明显降低，各组均能明显延长感染小鼠存活天数，与模型对照组比较具有显著性差异；本发明组合物组作用均优于清开灵组。

3.结论

综上，本发明组合物治疗风热感冒，在主要疗效指标：解热、镇痛、抗炎、抗病毒抗菌方面，整体评价优于阳性对照药清开灵口服液，该药的上市可为风热感冒患者提供一个新的更好的选择，具有较大临床应用价值。

Claims (10)

1.一种治疗风热感冒的中药组合物，其特征是由以下原料制备而成的：柴胡1-3份、葛根2-4份、黄芩1-3份、石膏3-5份、青蒿2-4份、白芍1-3份、炙甘草0-2份。

2.如权利要求1所述一种治疗风热感冒的中药组合物，其特征是由以下原料制备而成的：柴胡2份、葛根3份、黄芩2份、石膏4份、青蒿3份、白芍2份、炙甘草1份。

3.如权利要求1或2所述的一种治疗风热感冒的中药组合物的制备方法，其特征是将柴胡、青蒿提取挥发油，提取后的水溶液另器收集；石膏加水先煎，黄芩置沸水杀酶，再与提取挥发油后的药渣及其余三味共煎煮，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至60℃相对密度1.09，离心，取清液浓缩，至60℃相对密度1.20，加水至1000ml，二次离心，加入挥发油、聚山梨酯80、山梨酸钾、阿司帕坦，并加水调整总量，搅匀，冷藏静置24h，过滤，灌装，灭菌，即得。

4.如权利要求3所述的一种治疗风热感冒的中药组合物的制备方法，其特征是柴胡、青蒿加6-10倍量水，水蒸气蒸馏4-6小时，获得挥发油；石膏先煎10-50分钟，黄芩煮沸杀酶10分钟，加提取挥发油后的药渣及其余药材，加6-10倍量水，煎煮1-3次，每次1-2小时，合并煎液，滤过；浓缩为减压浓缩，温度为60-90℃；挥发油和聚山梨酯80以质量比1∶(2-4)比例混合，山梨酸钾用量0.2％-0.3％；阿司帕坦用量为0.15-0.2％。

5.如权利要求4所述的一种治疗风热感冒的中药组合物的制备方法，其特征是柴胡、青蒿加6倍量水，水蒸气蒸馏4小时，获得挥发油。

6.如权利要求4所述的一种治疗风热感冒的中药组合物的制备方法，其特征是石膏先煎30分钟，黄芩煮沸杀酶10分钟后，加柴胡、青蒿提取挥发油后的药渣及其余药材，加10倍量水，煎煮2次，每次1小时，合并煎液，滤过。

7.如权利要求4所述的一种治疗风热感冒的中药组合物的制备方法，其特征是，减压浓缩温度为70℃。

8.如权利要求4所述的一种治疗风热感冒的中药组合物的制备方法，其特征是，挥发油和聚山梨酯80以质量比1∶3比例混合。

9.如权利要求4所述的一种治疗风热感冒的中药组合物的制备方法，其特征是，山梨酸钾用量0.27％。

10.如权利要求3所述的一种治疗风热感冒的中药组合物的制备方法，其特征是，阿司帕坦用量为0.15％。

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