CN106135002A - 一种红豆杉的组织培育方法 - Google Patents

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    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture

Abstract

本发明公开了一种红豆杉的组织培育方法，包括以下步骤：（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，经过消毒在B5培养基中培养15‑20天，形成10‑12cm的组织，选取中间5‑6cm进行下一步培养；（2）将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12‑14h/d，直到长出3cm的主根。本发明提供的一种红豆杉的组织培育方法，选用东北红豆杉新生枝条的中层细胞，紫杉醇含量丰富，并且中层细胞增殖能力旺盛，使得红豆杉的组织培育周期短，成活率高；选用的培养基简单易得，适合大规模培育红豆杉幼苗。

Description

一种红豆杉的组织培育方法
技术领域
本发明属于植物培育技术领域，具体涉及一种红豆杉的组织培育方法。
背景技术
从红豆杉植物中提取的紫杉醇是近年来开发的一种新型抗癌药物，对癌症有较好的治疗效果，同时红豆杉是国家一级保护濒危珍惜物种，尤其是野生红豆杉已经被滥砍滥伐消耗殆尽。由于市场上对抗癌药物的巨大需求，红豆杉的人工种植显得尤为重要。
目前红豆杉的人工培育方法主要分为三种:先育种植法、组织培养法、人工扦插法。采用先育种植法和人工扦插法会受到种苗资源的限制，加之发芽率和成活率低，生长周期缓慢，严重影响红豆杉的产业化生产。组织培养法利用植物细胞的全能性和可克隆性，适合大批量的生产和培育特定的植物组织和幼苗。为了满足市场对于红豆杉的大规模需求，采用合适的组织培养法大规模快速培育红豆杉幼苗显得格外重要。
发明内容
本发明所要解决的技术方案是提供一种红豆杉的组织培育方法，具有周期短，成活率高、适合大规模培育的优良特点。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种红豆杉的组织培育方法，其中，包括以下步骤：
（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，经过消毒在B5培养基中培养15-20天，形成10-12cm的组织，选取中间5-6cm进行下一步培养；
（2）将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12-14h/d，直到长出3cm的主根。
上述的红豆杉的组织培育方法，其中，所述消毒先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭。
上述的红豆杉的组织培育方法，其中，所述B5培养基中含有0.3-0.5mg/L的1-萘乙酸和1.3-1.5%的水解络蛋白，并且保持温度为20-22℃，室内湿度为60-62%。
上述的红豆杉的组织培育方法，其中，所述生根培养基中含有2-3mg/L的1-萘乙酸，1-2mg/L的吲哚乙酸，0.5-1.0mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸。
本发明相比现有技术的有益效果为：选用东北红豆杉新生枝条的中层细胞，紫杉醇含量丰富，并且中层细胞增殖能力旺盛，使得红豆杉的组织培育周期短，成活率高；选用的培养基简单易得，适合大规模培育红豆杉幼苗。
具体实施方式
为了加深对本发明的理解，下面结合具体实施例进一步阐述本发明，以下实施例仅用来解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
实施例1
（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭进行消毒；在B5培养基中加入0.3mg/L的1-萘乙酸和1.5%的水解络蛋白，并且保持温度为20℃，室内湿度为62%，将消毒后的组织切片在上述B5培养基中培养15天，形成12cm的组织，选取中间5cm进行下一步培养；
（2）在生根培养基中加入2mg/L的1-萘乙酸， 2mg/L的吲哚乙酸，0.5mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间14h/d，直到长出3cm的主根。
实施例2
（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成1cm的组织切片，先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭进行消毒；在B5培养基中加入0.5mg/L的1-萘乙酸和1.3%的水解络蛋白，并且保持温度为22℃，室内湿度为60%，将消毒后的组织切片在上述B5培养基中培养20天，形成10cm的组织，选取中间6cm进行下一步培养；
（2）在生根培养基中加入3mg/L的1-萘乙酸，1mg/L的吲哚乙酸， 1.0mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12h/d，直到长出30mm的主根。
实施例3
（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭进行消毒；在B5培养基中加入0.4mg/L的1-萘乙酸和1.4%的水解络蛋白，并且保持温度为21℃，室内湿度为61%，将消毒后的组织切片在上述B5培养基中培养17天，形成11cm的组织，选取中间5-6cm进行下一步培养；
（2）在生根培养基中加入2.5mg/L的1-萘乙酸，1.5mg/L的吲哚乙酸，0.7mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸；将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间13h/d，直到长出3cm的主根。
本发明的有益效果为：（1）选用东北红豆杉新生枝条的中层细胞，紫杉醇含量丰富，并且中层细胞增殖能力旺盛，使得红豆杉的组织培育周期短，成活率高；（2）选用的培养基简单易得，适合大规模培育红豆杉幼苗。
应该理解的是，本发明的实施例仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (4)

1.一种红豆杉的组织培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）选取东北红豆杉新生枝条的中层细胞，处理成2cm的组织切片，经过消毒在B5培养基中培养15-20天，形成10-12cm的组织，选取中间5-6cm进行下一步培养；
（2）将上述愈伤组织移植到生根培养基中进行生根培养，并且前3天保持黑暗环境，3天之后，保持光照时间12-14h/d，直到长出3cm的主根。
2.根据权利要求1所述的红豆杉的组织培育方法，其特征在于，所述消毒先用3%的高锰酸钾进行擦拭，再用90%的乙醇溶液擦拭。
3.根据权利要求1所述的红豆杉的组织培育方法，其特征在于，所述B5培养基中含有0.3-0.5mg/L的1-萘乙酸和1.3-1.5%的水解络蛋白，并且保持温度为20-22℃，室内湿度为60-62%。
4.根据权利要求1所述的红豆杉的组织培育方法，其特征在于，所述生根培养基中含有2-3mg/L的1-萘乙酸，1-2mg/L的吲哚乙酸，0.5-1.0mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108841778A (zh) * 2018-04-28 2018-11-20 大连普瑞康生物技术有限公司 一种红豆杉细胞组织培养物

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01317397A (ja) * 1988-03-08 1989-12-22 Daicel Chem Ind Ltd ファイトエクダイステロイドの製法とファイトエクダイステロイド含有誘発根及びカルス
US6692963B1 (en) * 2001-06-19 2004-02-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Method of reproducing plants by somatic embryogenesis
CN103039365A (zh) * 2013-01-18 2013-04-17 通化师范学院 一种东北红豆杉试管内一步成苗方法
CN104620985A (zh) * 2015-02-03 2015-05-20 北华大学 东北红豆杉组织培养快速繁殖方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01317397A (ja) * 1988-03-08 1989-12-22 Daicel Chem Ind Ltd ファイトエクダイステロイドの製法とファイトエクダイステロイド含有誘発根及びカルス
US6692963B1 (en) * 2001-06-19 2004-02-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Method of reproducing plants by somatic embryogenesis
CN103039365A (zh) * 2013-01-18 2013-04-17 通化师范学院 一种东北红豆杉试管内一步成苗方法
CN104620985A (zh) * 2015-02-03 2015-05-20 北华大学 东北红豆杉组织培养快速繁殖方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALTAF HUSSAIN ET AL.: "IN VITRO CALLOGENESIS AND ORGANOGENESIS IN TAXUS WALLICHIANA ZUCC. THE HIMALAYAN YEW", 《PAK. J. BOT.》 *
孙兴志: "《长白山林业产业实用技术》", 31 December 2010, 中国林业出版社 *
张凤梅: "野生东北红豆杉不同部位和不同生长季节叶中紫杉醇含量测定", 《首都医药》 *
王水等: "云南红豆杉的组织培养及植株再生", 《云南植物研究》 *
金贞兰等: "不同培养基对东北红豆杉愈伤组织诱导的影响", 《安徽农业科学等》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108841778A (zh) * 2018-04-28 2018-11-20 大连普瑞康生物技术有限公司 一种红豆杉细胞组织培养物
CN108841778B (zh) * 2018-04-28 2022-05-17 大连普瑞康生物技术有限公司 一种红豆杉细胞组织培养物

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