CN106132419A - 以性类固醇前体结合serm的雄性激素缺乏症或疾病的治疗 - Google Patents

以性类固醇前体结合serm的雄性激素缺乏症或疾病的治疗 Download PDF

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Abstract

预防、减轻或消除在易受影响的温血动物中(包含人类)男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和与低血清睾酮及/或低DHEA或低雄性激素的疾病的发生率的新型方法，包含施用性类固醇前体，特别是脱氢表雄酮(DHEA)和选择性雌激素受体调节剂(SERM)(特别是阿考比芬(acolbifene))、抗雌激素或两者的前体药。症状或疾病是性欲减退、勃起功能障碍、疲劳、失去能量、抑郁症、骨质流失、肌肉损失、肌肉无力、脂肪堆积、记忆丧失、认知减退、阿尔茨海默氏病、痴呆、体毛脱落、生育问题、失眠、男性乳房发育症、贫血、潮热、盗汗、幸福感下降、肥胖、骨质疏松症、高胆固醇血症、高脂血症、动脉粥样硬化、高血压、胰岛素抗性、心血管疾病及第二型糖尿病。本发明还揭露了用于传递活性组分及试剂盒的药学组合物。

Description

以性类固醇前体结合SERM的雄性激素缺乏症或疾病的治疗
技术领域
本发明是关于伴随着一种或多种典型是归因于男性性腺功能低下或低睾酮的症状低总雄性激素的新型治疗。与1990年相比，超过65岁的人口数增加了超过10倍(Shiqehara and Namiki 2011)。在老化的过程中，低睾酮常伴随着幸福感下降、抑郁症、性欲降低并增加了勃起功能障碍(Lunenfeld and Nieschlaq 2007)。与老化相关的血清睾酮水平的下降被称作迟发性性腺功能低下(late-onset hypogonadism，LOH)(Wang.Nieschlaq et al.2009b)。除了如报导指出的低于2.0-3.5ng/mL的低血清睾酮以外，男性性腺功能低下的诊断通常合并症状。
低于某睾酮水平而发生雄性激素缺乏和不良的健康结果的精确阈值仍然未知且可能是与年龄相关的(Kelleher，Conway et al.2004；Zitzmann，Faber et al.2006； Hail.Esche et al.2008)。
在3.0ng睾酮/mL的阈值下，远低于此值会发生症状(Kelleher，Conway et al.2004；Zitzmann.Faber et al.2006；Bhasin，Cunningham et al.2010)。美国内分泌学会的指导方针定义LOH为低于2.0ng/mL血清睾酮以及一个或多个体征和典型性腺功能减退症的症状(Bhasin，Cunningham et al.2006)。美国男科协会(The American Society ofAndrology)建议有症状男性体内具有低于3.0ng/mL(American Society of Andrology 2006)。另一方面，根据国际社会老年男性(nternational Society for the Study of theAging Male，ISSAM)的研究，有症状的老年男性若具有低于3.50ng睾酮/mL应被认为是性腺机能减退(Wang，Nieschlaq et al.2009a)。
同时，低于什么睾酮浓度施用睾酮可以改善结果并不明确，并且会随着个体以及目标器官而变化。因此，可得的证据并没有支持低于任意阈值的睾酮水平在临床上会发生雄性激素缺乏，以及藉此确诊患者患有性腺功能减退(Bhasin，Cunningham et al.2006)。
低体力活力和低血清睾酮之间的相关性重现性低(Xu.Gouras et al.1998；Travison，Morlev et al.2006)。如上所述，不同雄性激素-相关的目标可能存在不同的阈值(Bhasin.Woodhouse et al.2005；Gray，Singh et al.2005；Zitzmann，Faber et al.2006；Shiqehara and Namiki 2011)。
在本发明的基础的新型组分是应该考虑分离或结合自与症状类似归因于性腺机能减退的低血清的低胞外围形成雄性激素。因此，脱氢表雄酮(DHEA)衍生的雄性激素代谢物，特别是雄酮葡糖苷酸(ADT-G)可如所述测定(Labrie，Belanger et al.2006)。脱氢表雄酮(DHEA)和雄性激素代谢葡萄糖醛酸苷的正常值，即ADT-G(总生雄性徵性能androgenicity的估计值)以及其它雄性激素和代谢产物中可见(Labrie，Cusan et al.2009；Labrie 2010b；Ohlsson，Labrie et al.2010；Labrie 2011；O′Connor，Lee et al.2011)。正常的睾酮的血清DHEA低于2.0ng/mL值可被认为是低的，然血清睾酮的浓度必须考虑，以及低总生雄性徵性能症状是因为低睾酮及/或低DHEA的结合，而造成低雄性激素的代谢产物反应的低总生雄性徵性能。血清ADT-G低于25ng/mL可以被认为是低总过低生雄性徵性能hypoandrogenicity的参数(Labrie，Diamond et al.1997b)。
男性性腺功能低下可以代表精子缺乏或睾丸分泌睾酮缺乏。此第二部分将涉及本发明中的内容(更多细节请见Corona.Rastrelli et al.2012)。
通常情况下，迟发性性腺功能低下(LOH)出现在老年男性结合了低血清睾酮与过低生雄性徵性能的一种或多种症状。然而，由于雄性激素总量的50％来自DHEA，低DHEA与性腺功能减退症状的低睾酮水平低有关。
性腺功能减退和/或低周雄性激素形成的标志和症状可以是用于治疗的适当条件。游离睾酮也可根据Vermeulen的公式www.issam.ch/freetesto.htm测量，但通常不是非常详细。
除了睾酮，睾丸通过芳香酶的动作分泌雌性激素雌酮和雌二醇(图1)。由垂体前叶分泌的黄体生成素(LH)是由GnRH(Gonadotropin-Releasing Hormone)脉冲式分泌刺激，从下丘脑同时兼具睾酮、雌二醇在对LH的分泌下丘脑-垂体水平发挥全球性的抑制作用(Corona，Rastrelli et al.2012)。L H随后由间质细胞在睾丸分泌睾酮(图1)。
美国内分泌学会的指导方针仅对具有“一致的症状和体征及明确的低血清睾酮水平”的男性建议睾酮治疗。然而，只有一半接受睾酮替代疗法的男性被诊断为男性性腺功能低下。实际上，34％是治疗疲劳、31％是勃起功能障碍和12％是对性心理功能障碍(Baillarqeon，Urban et al.2013)。
如上所述，必须考虑的是男性中的总雄性激素有高达50％是在局部外周组织中由脱氢表雄酮产生，这随着年龄下降，平均年龄在75岁以上的男性减少幅度高达80％(Labrie，Belanger et al.1997b)，这解释了为何低DHEA至少与低血清睾酮的同等作用，以解释迄今为止在归因于男性性腺功能低下的症状和体征(Labrie.Belanger et al.1997a)。
内分泌学会对睾酮治疗有临床实践指南，即睾酮治疗的男性雄激素缺乏综合征(2006；revised 2010)于www.ehdocrine.org。它包括对前列腺特异抗原的排除标准和PSA后续指导的修改建议。
低睾酮会伴随以下任何的体征或症状或其组合：
-性欲减退(对性的兴趣)
-勃起困难(勃起功能障碍)
-疲劳及缺乏能量(失去能量、能量失去)
-抑郁症
-骨质流失(骨头矿物密度减少并且增加骨折风险)
-肌肉损失、肌肉无力
-体毛脱落
-生育问题
本发明还提供了额外的益处，例如治疗或减少患上以下医疗问题的风险的可能性，亦即，高胆固醇血症、高脂血症、动脉粥样硬化、高血压、早老性痴呆、记忆丧失、认知减退、痴呆症、失眠、心血管疾病、胰岛素抗性、2型糖尿病和肥胖(尤其是腹部肥胖)(Comhaire 2000；Ding，Song et al.2006；Khaw，Dowsett et al.2007；Bassil，Alkaade et al.2009： Zitzmann 2009)。
男性低血清睾酮与低肌肉质量、肌力下降和移动性差有关(Roy.Blackman et al.2002：Schaap，Pluiim et al.2005)。补充健康老年男性睾酮增加肌肉质量和力量以及腿部力量，这对移动性是重要因素(Bhasin.Storer et al.1996：Sih，Morlev et al.1997： Snyder，Peachey et ai.1999；Storer，Magliano et al.2003；Bhasin，Woodhouse et al.2005；Page，Amorv etal.2005)。
在老年男性缺乏雄性激素的症状/迹象在内分泌学会的临床实践指南中的规定(Bhasin.Cunningham et al.2006)。
(Bhasin，Cunningham et al.2006)
老化本身往往与男性性功能下降相关(Vermeulen 2003；Ebert，Jockenhovel et al.2005)。
男性性腺功能低下的诊断可以通过ANDROTEST的帮助(Corona.Jannini et al.2006；Corona.Mannucci et al.2006)。鉴别诊断也可通过以下所提供的信息有所帮助(Corona.Rastrelli et al.2012)。LOH被定义为与低于3.2ng/mL的整体睾酮水平相关的至少三个性症状的出现(Wu，Taiar et al.2010)。在40岁至79岁的3369随机男子的人群样本中进行的这项研究中，在血清睾酮方面有症状的或无症状的男性之间的差异是最小的。一种可能的解释可能是，如上所述，血清睾酮不是雄性激素活性的唯一来源，如上所述，高达50％的雄性激素来自DHEA(Labrie.Dupont et al.1985：Labrie 2011)。
在雄性性行为中睾酮的生理作用是知之甚少。许多研究尝试建立男性性行为和血清睾酮浓度之间的关联性但得到相互矛盾的结果。血清睾酮水平与勃起功能障碍之间有广大的变化(Salmimies，Kockott et al.1982；Gooren1987；Bhasin，Cunningham et al.2006：Traish，Guay et al.2009)。然而，在评价男性性功能障碍时，低血清睾酮已成为标准的临床实践。
迟发性性腺功能减退的男性诊断可以通过问卷调查得到帮助，虽然总的临床表现的临床评价是非常重要的。可以使用(但不限于)的方法包括老年男性雄激素缺乏(Androgen Deficiency in Aging Males，ADAM)(Morlev，Charlton et ai.2000)、老年男性症状(Aging Males Symptoms，AMS)评定量表(Moore，Huebier et al.2004)和马萨诸塞州男性老龄化研究(Massachusetts Male Ageing Study，MMAS)调查问卷(Smith.Feldman et al.2000)。诊断可以通过简明性功能库存得到帮助(Brief Sexual FunctionInventory，BSFI)(O′Leary，Fowler et ai.1995)。办法涵盖性欲(两项)、勃起(三项)、射精(两项)，在每区(三项)和总体满意度(一项)的问题的看法。
有用于治疗男性性腺功能低下的新兴药物(见以下两个最近的回顾：(Corona， Rastrelli et al.2012；Kim，Crosnoe et al.2013))。除了现有的外源性睾酮治疗，还有选择性雌激素受体调节剂(SERM)的临床数据。SERM结合与雌二醇竞争的下丘脑和垂体的雌性激素受体。下丘脑雌二醇抑制作用的中和增加GnRH(促性腺激素释放激素)，其刺激LH分泌，其由睾丸增加睾酮的生产。已执行了几项关于克罗米芬(clomiphene citrate)的研究。克罗米芬在血液中如同睾酮凝胶(Taylor and Levine 2010)增加血清睾酮水平。克罗米芬改善性腺功能减退男性的性功能(Guay，Jacobson et al.2003)。克罗米芬改善性腺功能减退男性的睾酮-雌二醇比(Shabsiqh.Kang et al.2005)。克罗米芬增加性腺机能减退的年轻男性的循环睾酮并且改善几个性腺功能减退的相关症状(如性欲减退、精神不振)(Katz， Nabulsi et al.2012)。
正在开发恩氯米芬(Enclomiphene)(Androxal；Repros)用于男性性腺功能低下和不育。专利文献还表明SERM或抗雌激素对于男性雄激素缺乏可能有用，包括男性性腺功能低下(US 2006/0293294、US 2009/0215733、WO 01/91744、WO 03/072092、WO 2006/024689和WO 2013/123218)以及和其它活性试剂的组合(US 2007/0078091和WO 2013/130832)。其它类的化合物也建议用于治疗男性性腺机能减退，即促进性腺激素、5α-还原酶抑制剂、睾酮的前体、非可芳香化的雄性激素、芳香酶抑制剂、选择性雌性激素受体β激动剂和选择性雄性激素受体调节剂(SARM)。促进性腺激素治疗是少数次级性腺功能减退男性不孕的有效治疗之一(Liu，Baker et al.2009；Farhat.Al-zidiali et al.2010)。人绒毛膜促性腺激素是LH类似物，其刺激间质细胞生产睾酮，它可以从尿以及重组来源得到。
具体地，治疗包括施用性类固醇在带有细胞特异性选择性雌激素受体调节剂(SERM)的组合的前体，特别是阿考比芬。
本发明还提供试剂盒和药物组合物用于实施前述的组合。
已知的是，大量的疾病、病症和不良的症状对于施用外源性激素或其前体有良好的反应。例如，雌性激素被认为可减少骨质流失的速率，而雄性激素已经显示出通过刺激骨形成来构建骨质量。
在性腺机能减退男性长期用睾酮治疗可改善代谢综合征。它降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇，甘油三酯(triglycerides)和增加高密度脂蛋白胆固醇水平。它也降低了血糖水平(Traish，Haider et al.2013)。
以双氢睾酮(dihydrotestosterone，DHT)治疗2年对前列腺体积没有影响，但减少脂肪量、增加肌肉量、抑制血清睾酮、降低脊柱骨密度，可能是由于抑制LH的分泌。许多其他研究已经显示雄性激素替代疗法对于前列腺体积或泌尿症状的无显着变化(Sih，Morlev et al.1997；Kenny，Prestwood et al.2001；Marks.Mazer et al.2006：Saad，Gooren et al.2008；Takao，Tsuiimura et al.2009)。在10年的研究中，口服十一酸睾酮(testosterone undecanoate)对前列腺的大小没有增加，也没有癌症的证据(1994 Gooren)。
在性腺功能减退男性中，观察到下尿路症状的改善(Pechersky.Mazurov etal.2002)，回顾请见(Amano，Imao et al.2010；Shiqehara and Namiki 2011)。8个月以口服十一酸睾酮替代剂量为40至160mg/天，并没有改变前列腺大小也未显示排尿症状恶化(Franchi F.Luisi M et al.1978)。每周注射100mg庚酸睾酮(testosterone enanthate)3个月的研究同样没有改变前列腺体积或交排尿残气量(Tenover 1992)。
在另一项研究中，8个月的雄性激素替代疗法增加前列腺体积18％而尿流率数据没有变化(Holmang.Marin et al.1993)。在另一项研究中观察到的，前列腺体积没有差异(Behre，Bohmever et al.1994)。
降低性欲和勃起功能障碍被认为是男性性腺机能减退的最明显症状(Harman.Metter et al.2001；Matsumoto 2002)。在麻州男性老龄化研究中，在40岁至70岁，完全勃起功能障碍的患病率从5％增加了3倍到15％(Morlev 2003)。
另一方面，在欧洲男性老龄化研究(European Male Aging Study，EMAS)发现低血清睾酮和症状晨勃差、性欲低下和勃起功能障碍(睾酮为2.3到3.7ng/mL)的相关性，导致迟发性性腺功能减退(LOH，Late-Onset Hypogonadism)的定义中具有3症状和低于3.2ng/mL或每公升11nmole血清睾酮的男性(Wu.Taiar et al.2010)。睾酮控制促性腺激素分泌、性成熟过程中男性化、诱导和维护精子生成以及性欲和性功能。
从雄性激素衍生的两种雌性激素和雄性激素本身上对GnRH/LH分泌(图1)造成负面影响。雌二醇是GnRH的/LH分泌的有效抑制剂，虽然其在血液中的浓度低许多。
血清睾酮水平显着的随着昼夜和周期律动的节奏、阵发式分泌、测量的结果而变化。睾酮浓度可能由疾病和某些药物(如阿片类药物(opiates)和糖皮质激素(glucocorticoids))而影响。
在对超过65岁患有慢性疾病和在行动上不便的男性的TOM试验中，相对于安慰剂组，睾酮凝胶报导了两倍的不良事件(AEs)(Basaria.Coviello et al.2010)。在相对小群(行动不便的老年男性的睾酮，TOM)的209名男性，其血清睾酮介于1.0至3.5ng/mL，并具有患上慢性疾病，即高血压、高血脂、糖尿病和肥胖有高患病率，睾酮凝胶组较高的心血管事件则停止了试验。睾酮治疗相较于安慰剂组，出现了腿压和胸部压强度以及负重爬楼梯的改进(Basaria，Coviello et ai.2010).睾酮治疗的男性出现心血管不良事件的风险更大。
睾酮替代疗法也与因为精子数量下降以及睾丸变小的副作用有关。
注射睾酮具有成本低的优点，然其在每周、每两周或长期给药方案中有非生理性波峰和波谷水平的缺点。
在一组8709退伍军人管理局病人血清睾酮＜3.0ng/mL，在中位数为531天后，1223人开始睾酮治疗(Vigen，O′Donnell et al.2013)。在这回顾性观察研究中，在对照组睾酮治疗组的3年的死亡率分别为15.4％vs 18.5％。如前所述，”这个信号警示了睾酮处方…”(Cappola 2013)。
然而，除了TOM试验，睾酮治疗试验的荟萃分析并未证明心血管不良事件(Calof， Singh et al.2005；Haddad，Kennedy et al.2007；Femandez-Balsells，Murad et al.2010)。
睾酮替代疗法与增加性功能和情绪相关(Seftel，Mack et al.2004；Wang， Cunningham et al.2004)。
除了改善性功能(Wang，Swerdloff et al.2000；Isidori，Giannetta et al.2005：Bolona.Uraaa et al.2007)，对缺乏雄性激素男性施用睾酮增加骨密度(Snyder， Peachey et al.2000；Isidori，Giannetta et al.2005)增加无脂肪体重(Isidori，Caprio et al.1999；Snyder，Peachey et al.2000；Isidori，Giannetta et al.2005)及强度(Sih， Morlev et al.1997)，改善胰岛素抗性(Jones and Saad 2009；Jones，Arver et al.2011)以及改善血脂(Marin，Holmanq et al.1993；Jones and Saad 2009；Jones，Arver et al.2011)。
睾酮替代疗法一个显着问题是，它抑制睾丸内源性睾酮分泌并可能导致无精子症或精子的损害，如美国食品和药物管理局认可标记所指示者(Kim.Crosnoe et al.2013)。外源睾酮抑制下丘脑-垂体-睾丸轴并且可导致不育。肌肉注射睾酮甚至被研究作为避孕剂(Liu，Swerdloff et al.2006)。在本发明中，通过使用SERM避免低睾丸睾酮形成继发于抑制LH分泌，特别是阿考比芬(acolbifene)刺激LH的分泌，而不是阻断内源性LH和，其次，睾酮分泌。
发明概要
本发明的一目的是提供预防、减轻或消除因为低睾酮及/或低雄激素生成的男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率的方法。
另一目的是提供预防、减轻或消除以下发生率的方法：性欲减退、勃起功能障碍、疲劳、失去能量、抑郁症、骨质流失、肌肉损失、肌肉无力、脂肪堆积、记忆丧失、认知减退、阿尔茨海默氏病、痴呆、体毛脱落、生育问题、失眠、男性乳房发育症、贫血、潮热、盗汗、幸福感下降、肥胖、骨质疏松症、高胆固醇血症、高脂血症、动脉粥样硬化、高血压、胰岛素抗性(insulin resistance)、心血管疾病及第二型糖尿病。
另一目的是提供可降低男性患者罹患乳癌风险的方法。
另一目的是提供用于以上方法的试剂盒和药学组合物。优选的，这些制品是封装以指引利用这些内容来预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率。
另一目的是提供适用于上述方法的试剂盒及药学组合物。优选的，这些制品是封装以指引所述组合物用于预防、减轻或消除以下发生率的方法：性欲减退、勃起功能障碍、疲劳、失去能量、抑郁症、骨质流失、肌肉损失、肌肉无力、脂肪堆积、记忆丧失、认知减退、阿尔茨海默氏病、痴呆、体毛脱落、生育问题、失眠、男性乳房发育症、贫血、潮热、盗汗、幸福感下降、肥胖、骨质疏松症、高胆固醇血症、高脂血症、动脉粥样硬化、高血压、胰岛素抗性(insulin resistance)、心血管疾病及第二型糖尿病。
在另一实施例中，本发明提供了预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率的方法，所述方法包含施予有此需要的男性患者所述预防、减轻或消除有效治疗量的性类固醇前体或其前药与有效治疗量的选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药。
优选的，所述性类固醇前体是选自于由以下所组成的群组：脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone)、硫酸脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone sulfate)、雄甾-5-烯-3β，17β-二醇(androst-5-ene-3β，17β-diol)、4-雄甾烯-3，17-二酮(4-androstene-3，17-dione)及任何上述附加剂的前药。
优选的，所述选择性雌激素受体调节剂是选自于以下所包含的群组：他莫西芬(Tamoxifen)、托瑞米芬(Toremifene)、CC 8490、SERM 3471、HMR 3339、HMR 3656、雷洛昔芬(Raloxifene)、LY 335124、LY 326315、阿佐昔芬(Arzoxifene)(LY 353381)、哌喷昔芬(pipendoxifene)(ERA 923)、巴多昔芬(Bazedoxifene)(TSE 424，WAY 140424)、欧波利亚(Oporia)(拉索昔芬(Lasofoxifene))、EM-652、EM-800、EM-652-HCI(阿考比芬(acolbifene)，EM-1538)、4-羟基-他莫西芬(4-hydroxy-Tamoxifen)、4-羟基-托瑞米芬(4-hydroxy-Toremifene)、屈洛昔芬(Droloxifene)、LY 335563、GW-5638、艾多昔芬(Idoxifene)、左美洛昔芬(Levormeloxifene)、磷酸二氢(E)-4-[1-[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基]-2-[4-(1-甲基乙基)苯基]-1-丁烯基]苯酚(Iproxifen)(TAT-59)、奥培米芬(Ospemifene)(FC 1271)、非培米芬(Fispemifene)、苯并二氢吡喃(星克罗曼，Centchroman)、CHF 4227、LY 2066948、LY 2120310、司韦芬(Sivifene)、SR 16234、克罗米芬(Clomiphene)、恩氯米芬(Enclomiphene)、珠氯米芬(Zuclomiphene)、GW 7603、BL 3040、SRI 16158、SR 16157、SRI 16137、SR 16137、Rad 1901、(+)-3-(4-羟基苯基)-2-[4-]2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-4-(三氟甲基)-2H-1-苯并吡喃-7-醇((+)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]phenyl]-4-(trifluoromethyl)-2H-1-benzopyran-7-ol)、芬吗瑞乐(Femarelle)、萘福昔定(Nafoxidine)及4-羟基-n-去甲基他莫昔芬(Endoxifen)。
优选的，所述抗雌激素是选自于以下所包含的群组：Faslodex(福美斯坦)(ICI182780、氟维司群(fulvestrant)、7α-[9-(4，4，5，5，5-五氟-苯基磺酰基)壬基]雌-1，3，5(10)-三烯-3，17-β-二醇)(7α-[9-(4，4，5，5，5-pentafluoro-pentylsulphinyl)nonyl]oestra-1，3，5(10)-triene-3，17(β-diol)))、ICI 164384、CH 4893237、ZK 246965及SH646。。
优选的，所述选择性雌激素受体调节剂具有以下所组成的群组中之一的化学式：
其中R1及R2分别为氢、羟、卤素、C1-C6烷基或在体内转化成羟的基团；
其中Z是缺少的或选自于由以下所组成的群组：-CH2-、-O-、-S-及-NR3-(R3是氢或C1-C6烷基)；
其中R100是将L与B-环以4-10个居间原子(interveningatoms)隔开的二价基团；
其中L是选自于-SO-、-CON＜、-N＜及-SON＜的群组的二价或三价基团；
其中G1是选自于以下所组成的群组：氢、C1至C5烃、与G2结合的二价基团并且L是5至7元杂环及上述卤代或未饱和的衍生物；
其中G2是缺少的或选自于以下所组成的群组：氢、C1至C5烃、与G1结合的二价基团并且L是5至7元杂环及上述卤代或未饱和的衍生物；
其中G3是选自于以下所组成的群组：氢、甲基、乙基及三氟甲基；
或其药学上可接受的盐，
其中D是-OCH2CH2N(R3)R4(R3及R4分别选自于C1-C4烷基所组成的群组或R3、R4及其所结合的N共同形成以下所组成的群组的环结构：吡咯啶基、2，2-二甲基吡咯啶基、2-甲基吡咯啶基、哌啶子基(piperidino)、六亚甲基亚胺基(hexamethyleneimino)及吗啉)；
其中R1及R2分别选自于以下所组成的群组：氢、羟、卤素、C1-C6烷基或在体内转化成羟的基团；
其中G3是选自于以下所组成的群组：氢、甲基、乙基及三氟甲基。
或其药学上可接受的盐；
其中在2号碳上具有S绝对构型的光学活性的苯并吡喃化合物；
其中R1及R2分别选自于以下所组成的群组：羟、卤素、C1-C6烷基或在体内转化成羟的基团；
其中R3是选自于以下所组成的群组：饱和、未饱和或取代的吡咯啶基(pyrrolidinyl)，饱和、未饱和或取代的吡啶子基(piperidino)，饱和、未饱和或取代的哌啶基(piperidinyl)，饱和、未饱和或取代的吗啉，含氮环状基团以及NRaRb(Ra及Rb分别为氢、直链或支链C1-C6烷基、直链或支链C2-C6烯基或直链或支链C2-C6炔基)；
其中选自于以下所组成的群组的酸的盐：醋酸、己二酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、反丁烯二酸(延胡索酸，fumaric acid)、氢碘酸、氢溴酸、盐酸、氢氯噻嗪酸(hydrochlorothiazide acid)、羟基萘甲酸(naphthoic acid)、乳酸、马来酸、甲基磺酸、甲基硫酸、1，5-萘二磺酸(1，5-naphthalenedisulfonic acid)、硝酸、棕榈酸(十六酸，palmitic acid)、特戊酸(叔戊酸，pivalic acid)、磷酸、丙酸、丁二酸、硫酸、酒石酸、对苯二甲酸、对甲苯磺酸及戊酸(valeric acid)。
在另一实施例中，本发明提供了还包含施用有效治疗量的人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin)以作为联合治疗的一部份的方法。
在另一实施例中，本发明提供了药学组合物，包含：
a)药学上可接受的赋形剂，稀释剂或载体；
b)有效治疗量的至少一个性类固醇前体或其前药；及
c)有效治疗量的至少一个选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药。
在另一实施例中，本发明提供了丸剂、片剂、胶囊、凝胶、胚珠(ovule)、乳膏剂、直肠栓剂及注射，包含：
a)药学上可接受的赋形剂，稀释剂或载体；
b)有效治疗量的至少一个性类固醇前体或其前药；及
c)有效治疗量的至少一个选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药。
在另一实施例中，本发明提供了试剂盒，包含第一容器，其内含有药物制剂，所述药物制剂含有有效治疗量的至少一个性类固醇前体或其前药，且所述试剂盒还包含第二容器，其内含有药物制剂，所述药物制剂含有有效治疗量的至少一个选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药，以作为联合治疗的一部份。
在另一实施例中，本发明关于预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率的方法，其藉由提升需要所述预防、减轻或消除的患者的体内选自于由以下所组成的群组的水平：脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone)(DHEA)、硫酸脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone sulfate)(DHEA-S)、雄甾-5-烯-3β，17β-二醇(androst-5-ene-3β，17β-diol)(5-diol)及4-雄甾烯-3，17-二酮(4-androstene-3，17-dione)，并且还包含施予所述患者有效治疗量的至少一个选择性雌激素受体调节剂、抗雌激素或其前药，以作为联合治疗的一部份。
在另一实施例中，本发明关于预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率的方法，其藉由选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素的作用提升需要所述预防、减轻或消除的患者的体内循环睾丸睾酮的水平，并且还包含施予所述患者有效治疗量的至少一个性类固醇前体或其前药，以作为联合治疗的一部份。
在另一实施例中，本发明关于预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率的方法，其藉由提升选自于由以下所组成的群组：雄酮葡萄糖醛酸苷(androsterone glucuronide)(ADT-G)、雄甾酮-3α-17β-二醇-3-葡萄糖醛酸苷(androsterone-3α-17β-diol-3-glucuronide)(3α-diol-3G)及雄甾酮-3α-17β-二醇-17-葡萄糖醛酸苷(androsterone-3α-17β-diol-17-glucuronide)(3α-diol-17G)，所述方法包含施予需要所述预防、减轻或消除的所述男性患者有效治疗量的至少一个性类固醇前体或其前药与有效治疗量的选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药。
本处所使用的”纯选择性雌激素受体调节剂(pure SERM)”代表选择性雌激素受体调节剂于乳房、子宫组织内在生理或药学浓度下无雌激素活性。
在另一实施例中，本发明提供了试剂盒，包含第一容器，其内含有有效治疗量的至少一个性类固醇前体并且还包含第二容器，其内含有有效治疗量的至少一个选择性雌激素受体调节剂。
在另一实施例中，本发明在容器内提供了药学组合物，包含：
a)药学上可接受的赋形剂，稀释剂或载体；
b)有效治疗量的至少一个性类固醇前体；及
c)有效治疗量的至少一个选择性雌激素受体调节剂。
在另一实施例中，本发明在容器内预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率的方法，所述方法包含施予有此需要的男性患者所述预防、减轻或消除有效治疗量的性类固醇前体(precursor)或其前药(prodrug)与有效治疗量的选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药，其中所述选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素刺激黄体生成素分泌以增加循环睾酮的水平。
在另一实施例中，本发明提供了药学组合物，用以预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率，包含：
a)药学上可接受的赋形剂，稀释剂或载体；
b)至少一个性类固醇前体或其前药；及
c)至少一个选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药；
其中所述药学组合物以封装提供，以指引所述组合物用于预防、减轻或消除至少一个男性雄激素缺乏症状或疾病。
在另一实施例中，本发明提供了试剂盒，用以预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率，包含(i)第一容器，其内含有至少一个性类固醇前体或其前药；(ii)第二容器，其内含有至少一个选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药；及(iii)使用试剂盒以预防、减轻或消除至少一个男性雄激素缺乏症状或疾病的指示。
优选的，所述性类固醇前体是脱氢表雄酮且所述选择性雌激素受体调节剂是阿考比芬。
本文所使用的，化合物“与”其他化合物施用至患者，是指与其他化合物的施用足够近而使患者同时获得两种化合物的生理效应，即使化合物不是在接近的时间上施用。当化合物做为联合疗法的一部份而施用时，彼此之间一起施用。本处所述的较佳的SERM(阿考比芬)较佳的是与性类固醇前体脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone)、硫酸脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone sulfate)、雄甾-5-烯-3β，17β-二醇(androst-5-ene-3β，17β-diol)或4-雄甾烯-3，17-二酮(4-androstene-3，17-dione)施用，特别是脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone)。
申请人相信，将性类固醇前体加入阿考比芬的治疗将增加细胞内睾酮的水平(如前列腺癌患者所证明者，其细胞内雄性激素，特别是双氢睾酮(dihydrotestosterone)来自内源性DHEA)(Labrie，Dupont et al.1985；Labrie，Cusan et al.2009；Labrie 2011))。
本文所使用的，SERM是指在乳房组织中作为雌性激素受体拮抗剂(抗雌激素)的化合物，还提供了对骨组织和血清胆固醇水平(亦即，通过降低血清胆固醇)的雌性激素或类雌激素作用。在体外或在人或老鼠乳腺组织中(特别是如果化合物作为对人类乳腺癌细胞的抗雌激素)作为雌性激素受体拮抗剂的非类固醇化合物有可能用作SERM。反过来说，类固醇抗雌激素倾向不用做SERM因为在血清胆固醇倾向不显示有益作用。我们测试并且发现可用做SERM的非类固醇抗雌激素包含：EM-800、EM-652.HCI、雷洛昔芬(Raloxifene)、他莫西芬(Tamoxifen)、4-羟基-他莫西芬(4-hydroxy-Tamoxifen)、托瑞米芬(Toremifene)、4-羟基-托瑞米芬(4-hydroxy-Toremifene)、屈洛昔芬(Droloxifene)、LY 353381、LY 335563、GW-5638、拉索昔芬(Lasofoxifene)、巴多昔芬(Bazedoxifene)(TSE 424；WAY 140424；WAY140424；1-[[4-[2-(六氢-1H-氮杂-1-基)乙氧基]苯基]甲基]-2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1H-吲哚-5-醇)(1-[[4[2-(hexahydro-1 H-azepin-1-yl)ethoxy]phenyl]methyl]-2-(4-hydroxyphenyl)-3methyl-1H-indol-5-ol)))、哌喷昔芬(pipendoxifene)(ERA 923；2-(4-羟基苯基)-3-甲基-1-[[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]甲基]-H吲哚醇)(2-(4-hydroxyphenyl)-3-methyl-1-[[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]phenyl]methyl]-H-indol-ol)))、奥培米芬(Ospemifene)及艾多昔芬(Idoxifene)，然并不限于这些化合物。
然而，我们还发现所有的SERM不以相同的方式反应并可以分成两个子类：“纯SERM”及“混合SERM”。因此，一些SERM，例如EM-800和EM-652.HCI在生理或药理浓度下于乳腺癌和子宫内膜组织没有雌性激素活性并且在老鼠内有高胆固醇血症和高甘油三酯血症的效果。这些SERM可称作“纯SERM”。理想的SERM是EM-652.HCI种类的纯SERM因为其对于乳腺有潜力以及有纯抗雌性激素活性。其他，例如雷洛昔芬(Raloxifene)、他莫西芬(Tamoxifen)、屈洛昔芬(Droloxifene)、4-羟基-他莫西芬(1-(4-dimethylaminoethoxyphenyl)-1-(4-hydroxylphenyl)-2-phenyl-but-1-ene)、托瑞米芬(Toremifene)、4-羟基-托瑞米芬([(Z)-(2)-2-[4-(4-chloro-1-(4-hydroxyphenyl)-2-phenyl-1-butenyl)phenoxy]-N，N-dimethylethana mine))、LY 353 381、LY 335 563、GW-5638、拉索昔芬(Lasofoxifene)、艾多昔芬(Idoxifene)、巴多昔芬(Bazedoxifene)及奥培米芬(Ospemifene)在乳腺癌和子宫内膜有一些雌性激素活性。此第二系列的SERM可称为“混合的SERMs”。此“混合的SERMs”的不想要的雌性激素活性可以通过加入纯“的SERM”抑制，如图2和3的体外试验以及图4中乳腺癌的体内测试。由于裸鼠内人乳腺癌移植是人类乳腺癌的最接近的模型，因此我们比较了单独使用以及联合使用EM-800和他莫西芬(Tamoxifen)对ZR-75-1乳腺癌移植的裸鼠成长的影响。
在一实施例中，本发明使用具有以下分子结构的选择性雌激素受体调节剂
其中R1及R2分别为氢、羟或在体内转化成羟的基团，且n是1或2。
申请人认为本发明的SERM作为乳腺癌中纯抗雌激素是重要的，因为SERM必须抵消雌性激素潜在的副作用，特别是那些由性类固醇的外源前体形成，其可以增加组织的增生。具体地，申请人认为本发明的苯并吡喃衍生物在2位具有2S绝对构型并比其外消旋混合物更适合。因此，在US6,060,503，其公开了用有光学活性的并具有2S构型的苯并吡喃抗雌激素来治疗雌激素加剧的乳腺癌和子宫内膜癌，并且这些化合物显示比外消旋混合物更有为有效。
工业上较难获得醇的2S结构的对映异构体，申请人相信低于10％，较佳地低于5％，更佳地低于2％重量百分比的2R对映异构体的污染是较佳的。
活性药学成分的前药形式在所属技术领域中是习知的。见，如H.Bundgaard″5.Design and Application of Prodrugs”(在由P.Krogsgaard-Larsen andH.Bundgaard；Harwood Academic Publishers GmbH，Chur，Switzer land，1991编辑的DrugDesign and Development的教科书中)，上述内容引用为参考。特别的是，如第114页所定义的前药：前药是母药分子药学上的非活性衍生物，其需要在体内透过自发或酶促转化以释放活性药物，其改善了母药分子的传递性质。在本发明中，性类固醇前体的前药是3-及/或7-羟基及/或3-及/或7-酮基的衍生物，并且选择性雌激素受体调节剂的前药和抗雌激素是羟基的衍生物。羟基的前药形式是酯、碳酸酯、磷酸酯、醚和α-酰氧基烷基醚，而酮基的前药形式是缩酮、亚胺、烯醇酯、恶唑烷和噻唑烷，然并不限于这些示例(见第154页)。前述SERMEM-800(双酯衍生物，特戊酸)是EM-652的前药(Gauthier，Caron et al.1997)。
血清睾酮在早上较高，入睡后减少到最低浓度(Trenell，Marshall et al.2007)。血清睾酮应该在治疗第1及第2个月以及之后的每3个月侦测(在治疗医师判断其频率下)，以确保血清睾酮适当增加。DHEA应该进行相似的量测。血清DHEA也如生物节律是在早晨最低。为了正确的比较，较佳的是在不同治疗时间下一天的同一时间量测睾酮以及DHEA，即第1及第2个月以及之后每3个月。
附图说明
图1是下丘脑-垂体-睾丸和下丘脑-垂体-肾上腺轴的示意图。GnRH促性腺激素-释放激素；CRH，肾上腺皮质激素-释放激素；LH，促黄体激素；ACTH，促肾上腺皮质激素；脱氢表雄酮，DHEA；雌二醇，E2；双氢睾酮，DHT；睾酮，testosterone。
图2显示增加EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)、(Z)-4-OH-他莫昔芬、(Z)-4-OH-托瑞米芬和雷洛昔芬的浓度在人子宫内膜癌lshikawa细胞对碱性磷酸酶活性的影响。在存在或缺乏1.0nM E2下接触增加浓度的化合物5天后量测碱性磷酸酶活性。数据被表示为平均值±SEM表示。当SEM与标记重迭时，仅显示标记(Simard，Sanchez et a l.1997)。
图3显示出(Z)-4-OH-他莫昔芬、(Z)-4-OH-托瑞米芬、屈洛昔芬和雷洛昔芬对碱性磷酸酶活性的刺激效果被人子宫内膜癌lshikawa细胞内抗雌激素EM-800(阿考比芬的前体，游离盐)封锁。在存在或缺乏30或100nM EM-800下接触3或10nM的化合物5天后量测碱性磷酸酶活性。碱性磷酸酶活性5天暴露于所示化合物的3或10nM的在30或100纳米的EM-800的存在或不存在下进行测量。数据被表示为平均值±SD，数据为16个孔中除了对照组以外的8个孔(Simard，Sanchez et al.1997)。
图4表明他莫昔芬对人乳腺癌ZR-75-1异种移植物的成长的刺激作用完全被同时施用的EM-652.HCl(阿考比芬)给药阻止。阿考比芬本身的纯抗雌激素活性在缺乏他莫西芬下对肿瘤生长没有影响。
图5是肾上腺和胞类固醇合成途径的示意图，DHEA，脱氢表雄酮；DHEA-S、DHEA-硫酸盐；DHT，双氢睾酮；HSD，羟基类固醇脱氢酶。
图6是69-80岁的去势(n＝34)的男士和的55-65岁的完整的绝经后妇女(n＝377)在男性睾酮(A)、总雄性激素(ADT-G、3α-diol-3G和3α-diol-17G的总和)(B)和E1S(C)的血清浓度的比较(Labrie，Belanger et al.2006；Labrie.Cusan et al.2009)。
图7显示了单独以脱氢表雄酮(DHEA)或者与氟他胺或EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)共同施用于被切除卵巢的老鼠12个月对骨小梁体积的影响。加入完整的动物以作为额外的对照。数据显示为平均值±SEM**P＜0.01相较于OVX对照。
图8显示了单独以脱氢表雄酮(DHEA)或者与氟他胺或EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)共同施用于被切除卵巢的老鼠12个月对骨小梁数量的影响。加入完整的动物以作为额外的对照。数据显示为平均值±SEM**P＜0.01相较于OVX对照。
图9显示了以下各组的胫骨干骺端：完整对照(A)、卵巢切除对照(B)、与单独以DHEA治疗的被切除卵巢的老鼠(C)或以DHEA与氟他胺共同施用的被切除卵巢的老鼠(D)或以DHEA与EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)共同施用的被切除卵巢的老鼠(E)。请留意在被切除卵巢的对照动物(B)中骨小梁(T)数量的减少，以及在DHEA治疗后(C)，骨小梁体积(T)被诱导而造成显着的增加。加氟他胺至DHEA则部分地阻止了DHEA对于骨小梁数量的效果(D)，而DHEA和EM-8000(阿考比芬的前药，游离盐)的组合提供了对与卵巢切除相关的骨质流失完整的保护。Modified trichrome Masson-Goldner，magn.x80.T：Trabeculae，GP：Growth Plate。
图10显示了以单独或联合以DHEA(10mg，经皮，每日一次)或EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)(75μg，口服，每日一次)治疗9个月后对于老鼠中血清甘油三酯(A)和胆固醇水平(B)的影响。数据表示为平均值±SEM。**：P＜0.01实验相较于OVX对照。
图11显示了以增加EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)或雷洛昔芬(Raloxifene)剂量(0.01、0.03、0.1、0.3及1mg/kg)治疗37周对于被切除卵巢的老鼠中总血清胆固醇水平的影响。与完整的老鼠以及接受17β-雌二醇(E2)植入物的被切除卵巢的老鼠比较；**P＜0.01实验相较于OVX对照老鼠。
图12是男性中性类固醇的睾丸和肾上腺来源以及加入阿考比芬雌性激素在对LH分泌的下丘脑-垂体水平的抑制的效果的示意图。ACTH，促肾上腺皮质激素；CRH，肾上腺皮质激素-释放激素；DHEA，脱氢表雄酮；DHT，双氢睾酮；E2，17β-雌二醇；LH，促黄体激素；GnRH，促性腺激素-释放激素。
图13：雄性食蟹猴(cynomolgus monkeys)用口服给药2.5、10或40mg阿考比芬/天剂量13周。对照组的猴子仅被施以溶媒(0.4％甲基纤维素)。在研究结束时，使用经过验证的气相色谱质谱法测定血清睾酮浓度。结果表示为每组4只猴子的平均值±SEM。P值(相对于对照组)假设变异数相同用双t试验检验。
图14：雄性食蟹猴用口服给药3.13、12.5或50mg EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)/天剂量共52周。对照组的猴子仅被施以溶媒(0.4％甲基纤维素)。在研究结束时，使用经过验证的气相色谱质谱法测定血清睾酮浓度。结果表示为每组5只猴子(EM-800研究)的平均值±SEM。P值(相对于对照组)假设变异数相同用双t试验检验。
图15显示抗雌激素对ZR-75-1的肿瘤生长的影响。以抗雌激素他莫昔芬、EM-652.HCl(阿考比芬)和他莫昔芬及EM-652的组合治疗161天，对于去卵巢裸鼠体内的人类ZR-75-1乳腺肿瘤成长的影响。肿瘤大小表示为初始肿瘤区域(第1天＝100％)的百分比。数据表示为平均值±SEM(N＝18-30肿瘤/组)；##p＜0.01相对于EM-652.HCl(阿考比芬)；**p＜0.01相对于OVX。抗雌激素每天在缺乏雌酮刺激下以口服给药一次，剂量为200μg/老鼠。
图16显示了每日以增加的口服或经皮施用于皮肤的剂量的抗雌激素CS-115-1(EM-343)和EM-762治疗9天对子宫重量的影响，其同时每天以皮下注射雌酮治疗2次。
图17显示了口服施用9天增加浓度的EM-652.HCl(阿考比芬)、拉索昔芬(游离碱，活性和非活性对映体)和雷洛昔芬与雌酮对被切除卵巢的老鼠的子宫重量的影响，当中老鼠被同时施于雌酮。*P＜0.05，**P＜0.01相对于E1-处理的对照。
图18显示口服施用9天1μg和10μg的EM-652.HCl(阿考比芬)、拉索昔芬(游离碱，活性和非活性对映体)和雷洛昔芬对被切除卵巢的老鼠的子宫重量的影响。**p＜0.01与OVX对照组。
图19显示抗雌激素对ZR-75-1的肿瘤生长的影响。在雌酮刺激下以7种抗雌激素治疗161天，对于去卵巢裸鼠体内的人类ZR-75-1乳腺肿瘤成长的影响。肿瘤大小表示为初始肿瘤区域(第1天＝100％)的百分比。数据表示为平均值±SEM(n＝18-30肿瘤/组)；##p＜0.01相对于EM-652.HCl(阿考比芬)；**p＜0.01相对于OVX。抗雌激素每天在以皮下0.5厘米含有1∶25的雌性激素和胆固醇的硅橡胶植入物的雌酮刺激下以口服给药一次，剂量为50μg/老鼠。
图20显示抗雌激素对ZR-75-1的肿瘤生长的影响。以7种抗雌激素治疗161天，对于去卵巢裸鼠体内的人类ZR-75-1乳腺肿瘤成长的影响。肿瘤大小表示为初始肿瘤区域(第1天＝100％)的百分比。数据表示为平均值±SEM(n＝18-30肿瘤/组)；##p＜0.01相对于EM-652.HCl(阿考比芬)；**p＜0.01相对于OVX。抗雌激素每天在缺乏雌酮刺激下以口服给药一次，剂量为100μg/老鼠。
图21显示脱氢表雄酮和SERM阿考比芬组合在各种因素下的效果。添加阿考比芬的脱氢表雄酮会治疗或减少低雄性激素的负面影响。
具体实施方式
DHEA的有益效果
我们觉得，对于称为內在分泌(intracrinology)的雄性激素和雌性激素在外周靶组织的形成和作用(Labrie 1991；Labrie，Simard et al.1992a；Labrie，.Simard et al.1992b；Labrie.Simard et al.1994；Labrie，Durocher et al.1995；Luu-The，Dufort et al.1995；Labrie，Simard et al.1996b；Labrie，Belanger et al.1997a；Labrie.Belanger et al.1997b；Labrie，Diamond et al.1997b；Labrie，Luu-The et al.1997)的认知的增加及我们最近的观察指出，在老鼠切除卵巢后雄性激素相较于雌性激素在预防骨质流失扮演较主要的作用(Martel，Sourla et al.1998)以及绝经后妇女相似情况的观察(Labrie.Diamond et al.1997a)，已经铺平性类固醇替代疗法和老化领域及时和潜在高度显着进展的道路。这些可能性得到我们所观察到的支持。
本发明因而是根据我们在男性和女性在性类固醇生理上的了解所取得的最新进展(Labrie 1991；Labrie，Simard et al.1992a；Labrie，Simard et al.1992b； Labrie.Simard et al.1994；Labrie，Durocher et al.1995；Luu-The，Dufort et al.1995；Labrie，Simard et al.1996b；Labrie，Belanger et al.1997a；Labrie，Belanger et al.1997b；Labrie.Diamond et al.1997b；Labrie.Luu-The et al.1997)。
男性的雄性激素持在30岁以后会逐步减少，同时血清DHEA及DHEA-S的浓度也会降低(Labrie，Belanger et al.1997b)。因为血清DHEA与高达50％的外周组织的雄性激素相关(Labrie，Dupont et al.1985：Labrie.Cusan et al.2009；Labrie 2010b；Labrie 2011)，由DHEA随着年纪造成雄性激素的减少在LOH(Late Onset Hypogonadism)的出现上扮演重要的角色并且所有前述问题均与低雄性激素有关。
DHEA，在男性胞机制(intracrine mechanisms)制造的周边雄性激素的重要来源
在动物物种中，人类与一些其他灵长类动物是独特的，具有分泌大量的无活性前体类固醇DHEA和DHEA-S的肾上腺，DHEA和DHEA-S被转换成在末梢组织有效的雄性激素和/或雌性激素。值得注意的是，人除了拥有非常复杂的内分泌和旁分泌系统，在很大程度上依靠在末梢组织形成性类固醇(Labrie.Dupont et al.1985；Labrie，Belanger et al.1988；Labrie 1991；Labrie，Belanger et al.1997a)(图1、2和5)。
在男性中，95％(或更多)由去势诱导血清睾酮，以及雄性激素的一部分消除的临床晚期前列腺癌的益处(Huggins and Hodges 1941)，导致错误地认为去势消除95％(或更多)雄性激素和使单独去势被视为前列腺癌的适当治疗。
在男性中，发现雄激素的25-50％被留在去势后的前列腺(Labrie.Dupont et al.1985；Belanger，Belanger et al.1989；Nishivama，Hashimoto et al.2004；Mostaghel，Page et al.2007)。这解释了为何加入纯(非类固醇)抗雄激素以去势达到更为完整的阻挡雄性激素的效果，并且已显示第一个在延长寿命的前列腺癌的治疗(Labrie， Dupont et al.1982；Labrie，Dupont et al.1985；Caubet，Tosteson et al.1997；Prostate Cancer Triallists′Collaborative Group 2000；Labrie.Belanger et al.2005)。残留在去势后相对高含量的雄性激素也解释了为什么在局部阶段开始时联合雄性激素封锁或睾丸和肾上腺起源的雄性激素的封锁的治疗可以让大部分的患者治愈(Labrie，Candas et al.2002；Akaza 2006；Ueno，Namiki et al.2006)，从而清楚地表明男性源外或源内的睾丸雄性激素的重要作用。
在外围靶组织，上腺前体类固醇DHEA转化成雄性激素和/或雌性激素取决于各种类固醇和代谢酶的表达和这些组织中每一细胞的代谢酶。在男性和女性肾上腺前体性类固醇的高分泌速率和实验室中使用的所有动物模型(如大鼠、小鼠、豚鼠和其他，但不包括猴子)是完全不同的。动物模型中，性类固醇的分泌发生只在性腺(Labrie，Dupont et al.1985；Labrie，Belanger et al.1988；Belanger，Belanger et al.1989；Labrie.Belanger et al.1997a)。
在周边组织由肾上腺来源的DHEA制成的雄性激素睾酮和DHT以及E2在他们的生产地、同一细胞内发挥作用(图5)。这种复杂的机制允许需要这些性激素的特定组织内的细胞保持雌性激素和/雄性激素的生物活性水平，而相同的类固醇在血液中以很低的水平泄漏，从而避免其他组织受到潜在的负面影响。在其细胞-特异的局部形成以及提供予当地细胞的即时可用性，睾酮和DHT(最有活性的天然雄性激素)以及E2被灭活并在相同的细胞中转化成水溶性葡糖苷酸或硫酸酯衍生物，然后可以定量地扩散到全身循环而可在被肾脏排除以前透过质谱法(Labrie，Belanger et al.2006)而测定。
应当指出的是，内分泌形成雄性激素和雌性激素的重要性延伸到非恶性疾病，例如痤疮、皮脂溢、多毛症和雄性激素性脱发以及骨质疏松和萎缩的外阴阴道(Cusan，Dupont et al.1994；Labrie，Belanger et al.1997a；Labrie，Archer et al.2009b；Labrie， Archer et a1.2009a；Labrie.Archer et al.2009c)。几乎所有的组织都拥有不同程度的类固醇合成酶，而其可转换DHEA。然而，每一组织拥有高度组织特异性的类固醇合成酶和类固醇灭活酶，这还需要需要试验证实。
当睾酮的血清水平在被去势的69-80岁的男性中降低97.4％(Labrie，Cusan et al.2009)，雄性激素的代谢物的总和，循环中唯一正确和有效的总的雄激素活性的参数(Labrie.Belanger et al.2006)，只减少58.9％(Labrie，Cusan et al.2009)，从而指出在完全消除睾丸的雄性激素后雄性激素非常重要的部分(41.1％)仍留在男性体内。这些数据与前列腺内DHT浓度相符，在各种研究中，平均39％的DHT在去势后仍留在前列腺，亦即45％(Labrie.Dupont et al.1985)、51％(Belanger，Brochu et al.1986)、25％(Nishivama， Hashimoto et al.2004)以及35％(Mostaqhel.Page et al.2007)(见Labrie 2010b的图4)。
随着对肾上腺来源的雄性激素在男性中的重要意义的认识，感兴趣的是，比较在完整的绝经后妇女测定与上述男性相同的类固醇类的血清水平数据。从图6A及6B中可见，睾酮和总雄激素代谢物的血清水平在去势的男性和相当年龄的绝经后妇女几乎重叠。最有趣的是，也可以看出，雌酮硫酸盐(E1S)的血清水平也是相当的(图6C)。也可以看出，E1和E2的血清水平也是可比的，从而表明男性和女性肾上腺来源的雌性激素在数量上的相似(Labrie.Cusan et al.2009)。
上述总结的数据显示，在69-80岁的男性中，在缺乏睾丸的情况下，～40％的雄性激素在外周组织制造。因为从三十岁开始，随着年纪的增长，血清DHEA显着的下降(Labrie， Dupont et al.1985)，而睾丸分泌雄性激素仅稍微降低，有可能的是，肾上腺来源相较于较小的年龄有更大的相对和绝对重要性。
如上所述，外周目标组织内性类固醇的本地合成和作用被称为内在分泌(intracrinology)(Labrie，Belanger et al.1988：Labrie 1991)。本领域最新和快速的进展透过厘清大部分的组织-特异基因的结构而成为可能，其编码局部外周组织内负责将DHEA-S和DHEA转变成雄性激素及/或雌性激素的类固醇合成酶(Labrie，Simard et al.1992a；Labrie.Suqimoto et al.1992；Labrie.Durocher et al.1995；Luu-The，Zhang et al.1995：Labrie，Simard et al.1996a；Labrie.Luu-The et al.1997)(图5)。
在人体性激素生理上，DHEA和DHEA-S的重要性可由以下说明，估计高达50％的总雄性激素是来自这些肾上腺类固醇前体所得到的(Labrie，Dupont et al.1985：Belanger， Brochu et al.1986；Labrie，Belanger et al.1993)。
关于乳腺癌，DHEA是众所皆知的预防老鼠二甲蒽乳腺肿瘤的发展(Luo，Sourla et al.1997)以及抑制其成长(Li，Yan et al.1993)，此外，还抑制裸鼠中人乳腺癌移植的增长(请见示例1及(Couillard，Labrie et al.1998))。因此，相反于产生刺激作用的雌性激素和孕激素，DHEA有望抑制妇女乳腺癌的发展和生长。
除了在我们先前的研究所表明，补充生理量外源性的DHEA允许雄性激素及雌性激素仅在适当的包含特定类固醇合成酶的目标组织的生物合成。这样合成的活性雄性激素及雌性激素留在原细胞内而仅有少量泄漏而进入血液循环。
事实上，施用DEHA的最显着的效果是在DHT的代谢物的葡糖苷酸衍生物的循环水平，即ADT-G和3α-二醇-G，这些代谢产物被在外围胞组织本地生产，并且具备相应的类固醇合成酶以从肾上腺前体DHEA和DHEA-S合成DHT，并在之后进一步将DHT代谢成无活性的结合物(Labrie1991；Labrie，Simard et al.1996a)。在靶组织雄性激素的这种局部的生物合成和行动使其它组织不会暴露于雄性激素，从而最大限度的减少不希望的男性化或其它与雄性激素相关的副作用的风险。这同样适用于雌性激素，虽然我们认为还没有可靠的总雌性激素分泌(相当于雄性激素的葡糖苷酸)的参数。
DHEA、肌肉和无脂肪体重
由于60-70岁男性的雄性激素的40-50％来自肾上腺DHEA(Labrie，Cusan et al.2009)，合理的认为肾上腺DHEA具有比得上睾丸睾酮在控制男性肌肉质量和力量的重要性。
毫无疑问，雄性激素在肌肉生长，发育和功能上发挥主导作用。雄激素增加在正常男性的肌肉质量是公知的(Bhasin，Storer et al.1996；Bhasin.Woodhouse et al.2001)，这种效果使得国际奥委会发出雄性激素的禁令。事实上，体育兴奋剂的主要形式仍然是蛋白同化雄性激素的滥用(androgenicanabolic abuse)。在适宜的剂量，外源性雄性激素加强男女运动员的肌肉和力量(Handelsman 2006)。结果是，自70年代初，外源性雄性激素在男性和女性运动中已被禁止使用。
中老年男性和女性血清中DHEA的明显下滑，导致了一个建议：一系列的与老化有关的变化，包括肌肉质量和强度的损失，可能是由于随着年龄DHEA下降而造成(Labrie， Belanger et al.1998；Lamberts 2003)。DHEA在啮齿动物身体组成的有益效果是公知的(Taqliaferro.Davis et al.1986；Han，Hansen et al.1998)。在男性中观察到的几个年龄有关的变化，尤其是肌肉和骨量丢失，以及类似于在雄性激素缺乏所观察到的性功能和在脂肪量增加(Matsumoto 2002；Morlev and Perry 2003)。
基于横截面数据，在70岁的最大肌力是在30岁中发现高峰肌肉力量的30-50％(Murray and Pitt 1985；Kallman，Plato et al.1990)。年龄相关的肌肉力量丧失似乎与肌肉的减小的横截面面积相关联(Larsson，Grimbv et al.1979；Kallman，Plato et al.1990)。年龄相关的肌肉减少将增加跌倒、骨折、伤残和威胁生命的并发症的风险(Evans 1997；Frontera，Hughes et al.2000；Melton，Khosla et al.2000；Hughes，Frontera et al.2002；Iannuzzi-Sucich.Prestwood et al.2002)。
以下研究使用了显然过低剂量的睾酮(Elashoff，Jacknow et al.1991)，最近一系列的研究已经明确证实雄性激素对肌肉大小和强度的剂量反应的刺激作用(Bhasin， Storer et al.1996；Bhasin.Storer et al.1997；Bross，Casaburi et al.1998；Bhasin， Wood house et al.2001；Storer，Maqliano et al.2003；Bhasin，Woodhouse et al.2005)比较增加睾酮剂量对60-75岁和19-35岁的男性雄激素敏感的参数的疗效。所有的人都用GnRH激动剂治疗以消除内源性和可变水平的睾丸雄性激素。20周每周庚酸睾酮(testosterone enanthate)的剂量分别为25、50、125、300和600mg。在年轻人和老人所观察到的作用呈现剂量相关的。在无脂肪量和肌肉强度的增加与睾酮剂量呈正相关，在老年和年轻男性间没有不同。最好的容忍是用125mg的剂量达到，此剂量给予高的正常血清睾酮水平、低的不良反应水平并增加了无脂肪组织和肌肉力量(Bhasin.Woodhouse et al.2005)。雄性激素对肌肉的影响在具有性腺机能减退的男性中(Bhasin，Storer et al.1997；Snyder，Peachey et al.2000)以及接受糖皮质激素治疗的男性中(Crawford.Liu et al.2003)是公认的。
在一项558名20-95岁男性的研究中，血清DHEA-S被发现是60-79岁男性的肌肉强度及质量的独立预测因子(Valenti.Denti et al.2004)。这结果与另一显示血清DHEA-S与肌肉强度关联性的研究吻合(Kostka，Arsac et al.2000：Bonnefov，Patricot et al.2002)。
6或12个月的每日施用剂量50或100mg的DHEA分别提高中老年男性伸膝的力量(Yen，Morales et al.1995)。然而，对于60-80岁女性施用DHEA则无明显效果，然其实验数量较小。施用DHEA增加肌肉质量可见(Yen，Morales et al.1995；Diamond，Cusan et al.1996；Morales，Haubrich et al.1998；Gebre-Medhin.Husebve et al.2000；Villareal，Holloszv et al.2000；Gordon.Grace et al.2002；Johannsson.Burman et al.2002)，而其他研究在女性中则无明显效果(Yen，Morales et al.1995；Callies， Fassnacht et al.2001；Percheron，Hoorel et al.2003)。
无脂肪体重(lean body mass)已报道可由DHEA治疗而增加(Diamond，Cusan et al.1996；Morales，Haubrich et al.1998；Gebre-Medhin.Husebve et al.2000；Viliareal.Holloszv et al.2000；Nair，Rizza et al.2006；Gurnell.Hunt et al.2008)。
姿势失衡、跌倒与老化过程中的髋部骨折有关(Cummings and Nevitt 1989)。事实上，据估计，在老年人骨折中的80％是发生在没有外围骨质疏松症的老年人上(Siris， Chen et al.2004)。这些数据强调通过保持肌肉和力量预防老年人跌倒的重要意义(Chang，Morton et al.2004)。骨折有很大一部分来自由于肌肉和力量的损失的跌倒，这应该是可以通过适当的DHEA置换來达到一定程度的预防。
雄性激素和雌性激素在骨生理的作用
雄性激素对骨生理主导作用是有据可查(Labrie.Diamond et al.1997b；Martel.Sourla et al.1998)。事实上，无论是睾酮和DHT增加的转录α(I)类成骨细胞骨肉瘤内的细胞溶胶原mRNA(Benz.Haussier et al.1991)。DHT治疗也已证明刺激去卵巢老鼠软骨内成骨发育(Kapur and Reddi 1989)。此外，绝经后妇女24个月的治疗期内，透过雌性激素+睾酮植入物比单独施用E2其腰椎、股骨粗隆和全身的骨密度测量增加更多。
此外，在骨质疏松症中，报导了合成类固醇防止骨损失(Henneman and Wallach 1957)。相似的，皮下E2和睾酮植入物被发现比口服雌激素更有效地预防绝经后妇女的骨质疏松症(Savvas.Studd et al 1988)。尽管在该研究中观察到的差异已被归因于雌性激素给药路径的差异，差异的原因很可能是睾酮的作用。以骨形成增加指数而言，绝经后妇女接受甲基睾酮加雌性激素与单用雌激素相比，其增加血清骨钙素，这是骨形成指标(Raisz.Wiita et al.1996)。对血清骨钙素类似的刺激作用已在绝经后妇女12个月的经皮DHEA治疗观察到(Labrie，Diamond et al.1997a)。此外，雄性激素治疗，与癸酸诺龙(nandrolone decanoate)观察，已发现增加绝经后妇女的椎骨骨密度(Need，Horowitz et al.1989)。虽然雄性激素由于其在绝经后妇女独特的作用获得越来越多的支持，使用睾酮会观察到男性化效果(Burger，Hailes et al.1984；Studd，Collins et al.1987)。
我们显示了DHEA在雌性老鼠(Luo，Sourla et al.1997)以及绝经后妇女发挥了有益的效果(Labrie，Diamond et al.1997a)。因此，在完整的雌性老鼠中，以DHEA治疗会增加总骨架、腰椎和股骨的骨密度(BMD)(图7、8及9)。
这显示了SERM雷洛昔芬(Raloxifene)和托瑞米芬(Toremifene)增加骨密度(Smith 2006)。克罗米芬(clomiphene citrate)则显示血清睾酮以及性腺功能减退的症状/体征的正面结果(Shabsigh.Kang et al.2005；Whitten，Nanqia et al.2006)。
DHEA及腹部肥胖
腹部肥胖与胰岛素抗性、第二型糖尿病及动脉粥样硬化相关(Shimokata.Tobin et al.1989：Cefalu.Wang et al.1995：Ferrannini，Natali et al.1997；Kopelman 2000)。在其他因素中，荷尔蒙的变化，尤其是肾上腺的DHEA及DHEA-S分泌的减少被认为是涉及的因素(Tchernof，Labrie et al.1996)。在小鼠和大鼠模型中，施用DHEA减少了饮食所致肥胖的内脏脂肪堆积(Yen.Allan et al.1977；Cleary and Zisk 1986：Mohan，Ihnen et al.1990：Hansen，Han et ai.1997)。观察到DHEA减少随着年纪而发生的胰岛素阻抗的有益效果。
在一项研究中，绝经后妇女接受了DHEA乳膏12个月，我们发现胰岛素抵抗下降而皮下脂肪在大腿的水平也降低(Diamond.Cusan et al.1996)。此外，每日施用50mgDHEA于65-78岁的男性及女性6个月，腹部内脏脂肪在女性下降了10.2％而男性为7.4％(Villareal and Holioszv 2004)。在相同研究中，腹部皮下脂肪在女性和男性下降了6％。此外，血清胰岛素对葡萄糖耐受性试验的响应下降了13％，而在葡萄糖反应则没有变化，从而使得施用DHEA可以改善胰岛素敏感指数34％。在DHEA作用的改进也在中年患有高胆固醇血症男性发现(Kawano.Yasue et al.2003)。
在一项先前相同群组的研究中，施用DHEA6个月会减少总身体脂肪质量1.4kg，而无脂肪质量则增加0.9kg(Villareai，Holioszv et al.2000)。
在36周招募1353老年男性的25个随机小规模临床试验中，DHEA与脂肪量的减少有关，其严格按照其转换成相关的具有生物活性的雄性激素代谢产物(Corona，Rastrelli et ai.2013)。对血脂和血糖代谢、骨骼、性功能和生活质量无显着效果。
DHEA与性功能
基于社区的研究表明，妇女自我报告的性功能障碍的范围是从8％至50％。事实上，妇女自三十岁起以及去卵巢后，性欲低下和性功能障碍增加(Laumann，Paik et al.1999)(Nathorst-Boos and von Schoultz 1992)。心理和健康因素与低觉醒和低性欲相关(Dennerstein，Dudley et al.1997)，人们相信低雄性激素发挥独立的作用(Bachmann.Bancroft et al.2002；Miller.Rosner et al.2004)。
雄性激素已知在妇女觉醒、乐趣以及性高潮的容易性和强度扮演重要角色。雄激素也参与神经肌肉平滑肌的肿胀并提高润滑的响应(Basson2004)。
此外，将雄性激素加入ERT或HRT的详细益处为总体幸福感、精力、情绪和一般生活质量(Sherwin and Gelfand 1985；Sherwin 1988)。在加入雄性激素至雌性激素替代疗法(ERT)后，已经观察到改善了的主要心理和心身症状，即易怒、紧张、记忆和失眠(Notelovitz.Watts et al.1991)。
性欲和/或性生活满意度的丧失是早期绝经后常见的。加入雄性激素的激素替代疗法(HRT)已知具有对这些问题的有益作用。(Shifren.Braunstein et al.2000)发现通过贴片透皮施用睾酮改善手术绝经的妇女性生活的频率、愉悦和心情。每天300μg剂量的睾酮可见效果，此剂量使血清睾酮达至正常上限水平。睾酮治疗也已研究了在非雄性激素缺乏的妇女所抱怨的性欲降低(Goldstat.Briqanti et al.2003)。这些睾酮的治疗与安慰剂相比改善了性欲、性功能以及生活质量。相似的，在有正常水平的雄性激素的绝经期妇女，加甲基睾酮的雌性激素与单独使用雌性激素相比，增加了性欲和频率(Lobo，Rosen etal.2003)。在女性性兴趣、欲望的功能减退，雄性激素治疗已经被建议用于治疗具有参考范围的较低游离血清睾酮水平(Bachmann，Bancroft et al.2002)。事实上，有增加睾酮的使用以治疗性欲障碍(HSDD)(Sherwin and Gelfand 1987；Davis，McCloud et al.1995：Shifren，Braunstein et al.2000；Goldstat.Briqanti et al.2003)。这些随机临床试验表明，睾酮对有HSDD的女性而言是有效的。
肾上腺来源的雄激素缺乏本质的一个明显的例子是由肾上腺皮质功能不全。(Arlt，Callies et al.1999)研究指出4个月内每天50mg DHEA及安慰剂对于有肾上腺皮质功能不全的效果。DHEA治疗将在低正常范围的血清睾酮提高。此类治疗增加性的想法、兴趣和满意度的频率。幸福感、抑郁和焦虑也有所改善。在每天施用高剂量DHEA 300mg的研究中，其对于色情影片在心理(p，0.016)和物理(＜0.030)上有更大的意识(Hackbert and Heiman2002)。
因为现在可以理解到血清睾酮并不能反映全雄性激素池(Labrie，Belanger et al.2006)，不意外的是，睾酮需要被增加至超生理水平以提高性功能，因为血清水平只代表总雄性激素的部分，其高达50％于细胞内做出而无法反映出循环睾酮水平。
由于雄性激素出现在女性性功能障碍如此重要，实际上100％的雄性激素的妇女起源自DHEA(Labrie 2010a；Labrie.Martel et al.2011)并且妇女获益于收用DHEA(Labrie.Archer et al.2009a)，这是合理的认为，在存在或缺乏低血清睾酮下在有性欲减退和性功能障碍(或其他雄性激素缺乏症状)的症状男性施用DHEA，将自施用DHEA获得类似的有益效果。
DHEA和心血管疾病
有令人信服的证据表明雄性激素对男性心血管疾病(CVD)具有有益的作用(Alexandersen.Haarbo et al.1996；Anker，Chua et al.1997)(Beer.Jakubowicz et al.1996；Anker.Clark et al.1997；Hak，Witteman et ai.2002)。这与高血清DHEA与降低死亡率及CVD相符(Alexandersen，Haarbo et al.1996)。
临床试验建议男性的睾酮替代疗法可以帮助有心绞痛且睾酮缺乏的男性(English，Steeds et al.2000；Malkin，Pugh et al.2004)、充血性心脏衰竭(Pugh.Jones et al.2004；Malkin，Pugh et al.2006)及第2型糖尿病(Kapoor，Malkin et al.2005；Kapoor.Goodwin et al.2006)。此外，在人类中，数据表明，DHEA抑制动脉粥样硬化(Eich， Nestler et al.1993；Kurzman.Panciera et al.1998；Havashi，Esaki et al.2000； Komesaroff 2008)、降低心血管疾病风险指标(Mortola and Yen 1990；Beer，Jakubowicz et al.1996)并且改善血管内皮功能(Kawano，Yasue et al.2003；Williams，Dawood et al.2004)。在灵长类动物中，也已经观察到DHEA对动脉粥样硬化的保护作用(Christopher- Henninqs，Kurzman et al.1995)，并且特别是在兔子中(Gordon，Bush et al.1998；Eich， Nestler et al.1993)。
除了TOM试验，一系列的试验的荟萃分析并未显示心血管的不良影响(Calof， Singh et al.2005；Haddad.Kennedy et al.2007；Femandez-Balsells，Murad et al.2010)。Shores et al，2012观察到以睾酮治疗的病人在死亡风险上39％的减少以及减少20％的心脏疾病的发生率(Shores，Smith et al.2012)。
在不良于行的老年男性的睾酮(TOM)测试中，经历了心血管事件的男性在血清游离睾酮水平上相较于未经历者有较大的提升(Basaria，Davda et al.2013)。
低血清DHEA-S已被发现与心血管事件的发生率正相关(Mitchell，Sprecher et al.1994)。血管造影冠状动脉狭窄的程度(Herrington，Gordon et al.1990)和发生率(Herrington，Naniee et al.1996)，从而表明DHEA-S对心血管疾病有保护作用。此外，低血清睾酮已经与男性的冠心病风险增加有关(Turhan，Tulunav et al.2007)而低DHEA水平已报道易患CVD而早期死亡(Barrett-Connor.Khaw et al.1986；Tivesten，Vandenput et al.2009；Ohlsson.Labrie et al.2010)。
DHEA及脑
除了传统绝经症状(Raven and Hinson 2007)，DHEA随着年龄增长的下降被认为与认知损失和认知功能丧失有关(Flood and Roberts 1988；Grimlev Evans，Maiouf et al.2006)。
提出了DHEA在阿尔茨海默氏病引起的神经元损伤的病因及治疗的作用(Simpkins.Green et al.1997；Weill-Engerer.David et al.2002；Yau，Rasmuson et al.2003)。海马是参与学习、认知和记忆脑区。这个脑区域显示在老化过程中和在阿尔茨海默病明显变化(Beck and Handa 2004)。雌性激素和DHEA可在大脑局部形成雌激素已经显示出增强记忆和学习功能(McEwen.Gould et al.1995；Fov 2001；Vallee.Mavo et al.2001V)。有研究表明，DHEA-S可以影响脑功能和积极影响存储器情绪和精力和间接身体活动(Wolkowitz.Reus et al.1999；Hunt，Gurnell et al.2000；Huppert and Van Niekerk 2001)。
人类的长期记忆可由DHEA治疗改善(Barrett-Connor and Edelstein1994)。另外，部分缺乏雄性激素的老年男性每天口服施用25mg DHEA 12个月改善了情绪、疲劳以及关节疼痛(Genazzani，Inqlese et al.2004)。
已经提出雄性激素对抑郁、记忆力减退、认知和脑细胞失去活性激素的角色(Azad.Pitale et al.2003；Haiszan，MacLuskv et al.2007；Almeida，Yeap et al.2008)。雌性激素也可以在脑中从DHEA合成，并且显示对于阿尔茨海默病，记忆丧失和认知的丧失的益处(Rocca.Bower et al.2007)。三荟萃分析显示绝阿尔茨海默氏病的风险经后服用雌激素的妇女降低20至40％(Yaffe 1998；Hoqervorst，Williams et al.2000；LeBlanc， Janowskv et al.2001)。雌性激素减少在脑中的β-淀粉样蛋白沉积，而孕激素具有相反的效果(Xu，Gouras et al.1998；Huang，Guan et al.2004)。现在有临床研究确凿的证据，有对雌激素对神经保护(Rocca，Bower et al.2007)、心血管疾病(Manson，Bassuk et al.2006)和总体死亡率(Rocca.Grossardt et al.2006)的有益作用的关键年龄窗口。
雌性激素缺乏和认知障碍或痴呆之间的关联通过实验而支持。其中雌性激素改善去卵巢老鼠的海马树突棘的突触形成(McEwen and Alves1999；Monk and Brodatv 2000)。此外，雌性激素改善脑血流和葡萄糖代谢并且它可以作为抗氧化剂(Gibbs and Aaaarwal 1998；McEwen and Alves 1999：Monk and Brodatv 2000)。雌激素也被发现，从诱导细胞内钙的升高和从造成线粒体损伤防止B-淀粉样蛋白1-42(Chen，Nilsen et al.2006；Morrison，Brinton et al.2006)。
越来越多的证据建议了性类固醇的角色，亦即雌性激素和睾酮于脑中的神经保护作用(Pike，Carroll et al.2009)。从细胞培养和动物研究的数据支持睾酮作为神经保护(Holland，Bandelow et al.2011)并且相同数据建议这对较老男性认知上的有益效果(Tan and Pu 2003)。在最近的临床研究中，睾酮减少海马细胞中神经元和血管老化(Ota， Akishita et al.2012)并且减少认知衰退。
与对照组相比，在阿尔茨海默氏症的老年男性中发现较低的血清睾酮水平(Hoqervorst，Bandelow et al.2004)。
低DHEA于长寿
低DHEA-S与低长寿相关(Kushnir，Blamires et al.2010；Labrie2010b：Arauio and Wittert 2011：Traish.Kang et al.2011；Magqi.Buvat et al.2013)。
DHEA其他潜在的有益效果
随着老化，肾上腺减少70至95％DHEA及DHEA-S的生成，导致外周靶组织内雄性激素和雌性激素生成的剧烈减少，这与年龄相关疾病的发病机制相关，例如胰岛素抵抗(Coleman，Leiter et al.1982；Schriock，Buffington et ai.1988)以及肥胖(Nestler， Barlascini et al.1988：MacEwen and Kurzman 1991：Tchernof.Despres et al.1995)。DHEA还被发现发挥在一系列动物模型(Schwartz.Pashko et al.1986：Gordon.Shantz et al.1987；Li，Yan et al.1993)的抗血管生成活性。DHEA还显示了(Suzuki，Suzuki et al.1991)、在真菌和病毒的体内和体外疾病中(Rasmussen.Arrowood et ai.1992)的免疫调节作用，包含HIV(Henderson.Yana et al.1992)。另一方面，已经描述了DHEA对于绝经后妇女免疫系统的刺激(Casson，Andersen et ai.1993)。
DHEA和脂质
已经报导施用不同剂量的DHEA不同时间之后，总和高密度脂蛋白(HDL)胆固醇小但显着的下跌(Nestler，Barlascini et al.1988；Mortola and Yen 1990：Arlt，Callies et al.1999；Barnhart，Freeman et al.1999；Petri，Lahita et al.2002：Petri，Mease et al.2004)，而在其他研究中，除了总和高密度脂蛋白胆固醇以外，低密度脂蛋白(LDL)胆固醇也下降了(Gebre-Medhin，Husebve et al.2000：Dhatariva.Biqelow et al.2005)。在先前的研究中，每天以剂量50mg(Arlt，Cajlies et al.1999；Barnhart，Freeman et ai 1999：Hunt.Gurnell et al.2000)、4-6g的10％DHEA膏(Labrie.Beianqer et al.1997a)、1600mg(Mortola and Yen 1990)或25mg(Casson，Santoro et al.1998)施用DHEA，会使血清HDL胆固醇少量地减少，并且在其他研究中，50mg/天(Morales.Nolan et al.1994： Barnhart，Freeman et al.1999；Villareal，Holioszv et al.2000)或25mg/天(Kawano， Yasue et al.2003；Lovas，Gebre-Medhin et al.2003)则无显着效果。
相反于雌性激素，DHEA不会增加甘油三酯(Diamond，Cusan et al.1996)。事实上，甘油三酯的减少常见于DHEA(Lasco.Frisina et al.2001；Chang.Lan et al.2002；Dhatariva.Bigelow et al.2005)。也报导了增加HDL及减少LDL胆固醇(Lasco，Frisina et al.2001)，而只有总胆固醇减少被报导(Libe，Barbetta et al.2004；Williams，Dawood et al.2004)。DHEA施用于绝经后妇女被报导是减少血清载脂蛋白A(Apolipoprotein A)并且增加HDL胆固醇(Casson，Santoro et al.1998；Morales，Haubrich et al.1998)。DHEA被发现减少血清Lp(A)(Barnhart.Freeman et al.1999)，是对于CVD(Lobo 1991)有益的效果。
在雄性激素影响下，因为甘油三酯及HDL胆固醇水平的减少，被认为是因为增加肝脂酶活性导致增加高密度脂蛋白的清除(Haffner，Kushwaha et al.1983；Hazzard， Haffner et al.1984；Kantor.Bianchini et al.1985)。增加的胆固醇逆向转运(透过增加HDL间隙去除外周组织的胆固醇)似乎和降低HDL和甘油三酯水平相关，而非降低HDL生产(Wu and von Eckardstein 2003)。DHEA相对小(若存在)的对整体胆固醇、HDL胆固醇和有时LDL胆固醇的抑制效果，还涉及DHEA衍生的雄性激素对肝脂酶活性的影响，从而损害肝细胞胆固醇的形成(Tan.Shiu et al.1998)。
共识是，DHEA对于血脂只有小而无临床上明显的效果(Arlt，Justl et al.1998；Morales，Haubrich et al.1998；Gebre-Medhin，Husebve et al.2000；Lasco.Frisina et al.2001；Poretskv，Brillon et al.2006；Gurnell.Hunt et al.2008；Lovas and Husebve 2008)。然而，根据我们的临床研究，显示了对血清甘油三酯的抑制效果而对于胆固醇则无影响(图10)，而EM-800(阿考比芬前药，游离盐)则减少血清甘油三酯(图10)及胆固醇(图10及11)。
DHEA的益处：雌性激素类似物及雄性激素效果的组合
本发明是基于在男性和女性中的性类固醇生理学的了解所取得的最新进展，以及对于女性在绝经期不仅因为卵巢分泌雌性激素被剥夺而失去雌性激素，还多年暴露于雄性激素的认知。事实上，正常妇女产生相当于男性分泌的雄性激素约50％的量的雄性激素(Labrie，Belanger et al.1997a)。男性和女性雄性激素池从30岁逐渐减小，而DHEA和DHEA-S的血清浓度也同时下降(Labrie，Belanger et al.1997b)。加入像阿考比芬的SERM是增加睾酮的血清水平(图12)、对骨损失的保护以及其他施用SERM的益处。在图12中，DHEA和阿考比芬的效果的示意图以GnRH/LH分泌雌性激素的负反馈效应呈现，如进一步于图13及14，从雄性食蟹猴所获得者，观察到增加血清睾酮水平的增加。
阿考比芬增加人的LH分泌，其通过在有晚期乳腺癌绝的经前妇女6个月每天口服施用20mg的阿考比芬血清E2水平从222至2030pg/mL的增加而确定。
阿考比芬的有益效果
如图15所示，大约100％他莫西芬对肿瘤成长的刺激效果被在同时的EM-652.HCl的治疗下被阻止(阿考比芬)。EM-652.HCl依其纯抗雌激素活性而对于裸鼠中的人类乳腺癌细胞ZR-75-1异种移植的成长没有任何刺激效果。
我们还注意到，SERM对于血清胆固醇的有益效果和对骨头的雌性激素或类性激素的效果的关联性。SERM也对高血压、胰岛素抵抗、糖尿病和肥胖症有有益效果(尤其是腹部肥胖)。不希望受理论的束缚，相信SERM，多数较佳的是有两个芳香环，其透过一或二个居间碳原子连接，并且预期会借助于分子的上述部分与雌性激素受器反应。较佳的SERM有支链，会选择性地造成在乳腺癌和子宫中拮抗性质而对其他组织没有拮抗性。因此，SERM会在乳腺癌中作为抗雌激素，而令人惊讶的是，在骨头以及血液(其血脂以及胆固醇受影响)是作为雌性激素(或提供类雌性激素活性)。对胆固醇和血脂的有利影响是对动脉粥样硬化的有利效果，其被认为是不利地、受胆固醇和脂质的不当水平影响(图10及11)。
心血管症状、阿尔茨海默氏病、认知功能和失眠损失与位于中央神经系统的特定雌性激素受体有关。可能的是，降低脑中雌性激素(或雄性激素)水平可以解释部分的情形。外源性雌激素，特别是那些(例如雌二醇)透过施用性类固醇前体所形成者，其可穿过血脑屏障并结合到雌性激素受体的，以恢复正常的雌性激素作用。另一方面，本发明的SERM，特别是阿考比芬家族，如图8所是无法穿过血脑屏障。因此，它们无法拮抗脑雌性激素的正面作用，但可以拮抗脑雌性激素在胸部的负面作用，认定此组合(SERM+性类固醇前体)对于治疗及降低获得上述情形的风险特别有吸引力。
如前所述，雄性激素作用也被认为与所有这些症状有关。事实上，DHEA可以根据生理需要在大脑中同时提供雌性激素和雄性激素。
结合性类固醇前体和SERM或抗雌激素的整体添加的好处
在任何参数上，EM-652(阿考比芬)无观察到不良效应，而它应该标记为对男子女性型乳房，乳腺癌和骨质疏松症的预防和治疗有益。
本处所讨论的较佳的SERM或抗雌激素关于：(1)所有本发明所述的易受感的疾病；(2)治疗性和预防性应用；以及(3)较佳的药学组合物及试剂盒。
需要治疗或减少给定疾病的发病风险的患者是诊断出这些疾病或者可能感染这些疾病的人。
除了另外说明，本发明活性化合物(浓度以及施用模式)的较佳剂量在治疗和预防目的上是相同的。无论所治疗的疾病为盒，所讨论的每一活性组成物的剂量而是相同的(或疾病发作的可能性被降低)。
除了当另有说明或者根据上下文明显表示，如示例中所示，本文的剂量是指未受药用赋形剂、稀释剂、载体或其它成分影响的活性化合物的重量，虽然这些额外的成分是所欲包含者。在制药工业中通常使用的任何剂型(胶囊剂、丸剂、片剂、注射剂等)适用于本发明使用，并且术语“赋形剂”、“稀释剂”或“载体”如通常包括这样的非活性成分，在本产业内与活性成分一起在这样的剂型。例如，可包括典型的胶囊剂、丸剂、肠溶包衣、固体或液体稀释剂或赋形剂、调味剂、防腐剂、或类似物。
本处所讨论的任何疗法所使用的所有活性成分可以制成包含一或多种其他活性成分的要学组合物。可选的，它们可以各自单独施用但在时间上足够同时，使得患者最终提了血液水平或者另外同时享受每一活性成分(或策略)的益处。在本发明部分较佳实施例中，例如，一个或多个活性组成是制成单一药物组合物。在本发明其他实施例中，提供了包含至少两个单独的容器而每一容器的组成物相异，在全部或部分，从至少一个其它容器的相对于其中所含的活性成分的内容。
本文所讨论的联合疗法也包括使用一种活性成分(联合疗法的)在制备用于治疗(或降低风险)疾病的药物的用途，而治疗或预防还包含本发明联合疗法的另一活性成分。举例而言，在一实施例中，本发明提供了使用SERM于药物制备的用途，以与性类固醇前体在体内治疗任何本发明认为此联合疗法有效的疾病。
骨密度(BMD)量测的限制是已知的。举例而言，BMD量测在以类固醇抗雌激素ICI182780(Wakelinq 1993)对老鼠的治疗中没有发现改变，而在形态计量学(形态计量学)则发现了抑制(Gallagher，Chambers et al.1993)。他莫西芬(Tamoxifen)也有相似差异的报导(Jordan，Phelps et al.1987；Sibonqa，Evans et al.1996)。
应当指出的是，骨密度降低并不是与骨强度下降有关的唯一异常。因此，分析不同化合物和治疗诱导的骨代谢的生化参数的改变，以获得更多其作用的认识是重要的(表2)。
特别重要的是，DHEA和阿考比芬联合疗法在生化重要常数的骨生成上有未预期的有益效果。事实上，单独使用DHEA不会影响尿羟脯氨酸/肌酐比值，骨吸收标记。进一步而言，在每日血钙或磷排泄上无法侦测DHEA的效果(Luo，Sourla et ai.1997)。EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)减少48％尿羟脯氨酸/肌酐比值，而与DHEA相似，EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)对于血清碱性磷酸酶活性没有影像，骨生成标记，而DHEA则增加此数值75％(Luo.Sourla et al.1997)。
一未预期的效果是DHEA及EM-800的联合疗法相关的尿羟脯氨酸/肌酐比值，是骨吸收标记，当DHEA及EM-800联合施用时，其减少了69％，这数值与单独使用EM-800的48％抑制单独使用DHEA则没有效果，这在统计学上有差异(p＜0.01)。因此，增加DHEA至EM-800在骨吸上增加了50％EM-800(阿考比芬的前药，游离盐)的抑制效果。最重要的是，另一增加DHEA至EM-800未预期的效果分别是尿钙的减少(从23.17±1.55至3.71±0.75μmmol/24h/100g(p＜0.01))以及55％尿磷的减少(从132.7±6.08至59.06±4.76μmmol/24h/100g(p＜0.01))(Luo，Sourla et ai 1997)。
重要的是，阿考比芬和DHEA对去卵巢老鼠的12个月的联合治疗对骨形态具有有利影响。骨小梁体积对于骨骼强度特别重要，并且防止骨折(图7)。因此，在上述研究中，单独以DHEA治疗，在去卵巢老鼠中胫骨骨小梁体积从4.1±0.7％增加到11.9±0.6％(p＜0.01)，而加入EM-800至DHEA进一步增加骨小梁体积至14.7土1.4％，此数值与完整的对照组相近(图7)。
在去卵巢老鼠的0.57±0.08每mm的数值中，以DHEA治疗相较于去卵巢对照组增加了137％骨小梁数量(图8)。DHEA的刺激效果达到1.27±0.1每mm，而同时以EM-800及DHEA的治疗相较于单独使用DHEA则额外增加了28％(p＜0.01)的骨小梁数量(图8)。同样地，加入EM-800至DHEA的治疗导致额外15％(p＜0.05)骨小梁间距的减少，相较于单独使用DHEA，从而导致这数值与完整的对照组没有差异。
作为补充在图7和8提出的数字数据，图9说明了在卵巢切除处理动物DHEA诱导的在胫骨干骺端骨小梁体积的增加(C)与卵巢切除对照组(B)的比较，以及在加入氟他胺(氟他胺)至DHEA治疗后，DHEA刺激效果的部分抑制(D)。另一方面，与EM-800一起施用DHEA则会完全防止卵巢切除引发的骨量减少(E)，其骨小梁体积则与完整的对照组(A)相当。
表2
表3
单独以脱氢表雄酮(DHEA)治疗或与氟他胺(flutamide，FLU)或EM-800共同施用12个月对于骨标志物和血脂的影响
*p＜0.05；**p＜0.01，实验相对于OVX对照组
在骨形态上，DHEA的刺激作用对雄激素组分的重要性由DHEA在骨形成和骨吸收的影响上得到支持。血清碱性磷酸酶的浓度，骨形成的标志(Lauffenburqer，Olah et al.1977；Meunier，Sajson et al.1987)从OVX对照组的51±4IU/L增加至DHEA-治疗动物的201±25IU/L，亦即展示了对DHEA在骨生成上的刺激效果(表3)。FLU在此参数上反转DHEA了65％的刺激效果，而EM-800则无明显效果。另一方面，因为胶原降解期间释放的羟脯氨酸并未在胶原蛋白的合成再次利用，这是胶原代谢或破骨细胞骨吸收的一个有用的标志。在本研究中，尿羟脯氨酸/肌酐比值从对照组的11.7±1.2μmol/mmol减少至DHEA-治疗老鼠的7.3±1.0μmol/mmol(p＜0.05)(表3)。在此参数上施用FLU完全防止了DHEA的抑制效果，而EM-800则在统计学上对于DHEA没有任何显着的影响效果。
进一步而言，血清胆固醇透过DHEA治疗，通过联合治疗与单纯抗雄激素FLU中和的效果，而从2.29±0.16至1.78±0.16mmol/l减少22％。另一方面，添加纯抗雌激素EM-800进一步降低血清胆固醇至0.63±0.09mmol/l(p＜0.01)，而达到65％的抑制效果。在血清甘油三酯水平方面，在任何使用的治疗中并未观察到统计上明显的改变。
有趣的是，EM-800(阿考比芬(acolbifene)的前药，游离盐)对血清胆固醇的强效抑制效果不会被同时治疗的DHEA阻止(Luo.Sourla et al.1997)。
松质骨的强度和随后的断裂阻力不仅取决于松质骨的总量也对小梁微结构，如由数量、尺寸和小梁的分布确定。失去卵巢功能的绝经后妇女伴随着总骨小梁体积显着的降低(Melsen，Melsen et al.1978；Kleerekoper，Villanueva et al.1985)，主要是数量的减少，并且在程度较轻下，小梁宽度的减少(Weinstein and Hutson 1987)。
为了便于本发明的组合疗法，任何本处所表示的内容，本发明考虑包含单独的SERM及性类固醇前体的药物组合物以同时施用。组成物可以是适于施用的传统方式，包含但不限于为口服施用、皮下注射、肌内注射或经皮给药。在其他实施例中，提供了包含单独或在同一容器内的一或多种SERM及性类固醇前底的试剂盒。试剂盒可包括适用合于口服给药的材料，例如片剂、胶囊剂、糖浆剂等，和用于经皮给药的材料，例如，软膏、洗剂、凝胶、乳膏、缓释贴片等。
申请人认为，SERM或抗雌激素及性类固醇前体的施用在治疗及/或降低上述症状上有效用。本发明的活性成分(无论为SERM、抗雌激素或前体或其他)可以制成并以不同方式施用。根据本发明，当一起施用时，活性成分可以同时或者分开的施用。
较佳的，透皮或黏膜的活性成分为0.01％至5％的DHEA或5-二醇。
SERM可以经皮施用代表阿考比芬类似物在子宫重量上拮抗雌二醇刺激相当的功效，无论阿考比芬类似物是以口服或者经皮给药予老鼠(图16)。
当配制成软膏剂、乳液、凝胶、乳膏、或栓剂或类似物，活性化合物与合适的载体混合，其可兼容于人的皮肤或粘膜，并且增强所述化合物透过皮肤或黏膜的经皮或经粘膜的渗透。合适的载体是本领域所熟知的，并且包含但不限于为Klucel HF and Glaxal base。一些是商业上可得的，例如Glaxal base可购自Glaxal Canada Limited Company。其他合适的媒介物可见Koller and Buri，S.T.P.Pharma(Kroller and Buri 1987)。较佳的，在所使用的浓度下活性成分在环境温度是可溶于载体。载体有足够的黏性来将抑制剂维持在组成物施用的皮肤或粘膜的局部区域，而足够的时间下不会运行或蒸发而可允许前体实质性的穿过皮肤或粘膜的局部区域并进入血流，其所造成所希望的临床效果的地方。体通常是几种组分的混合物，例如药学上可接受的溶剂和增稠剂。有机和无机溶剂的混合物可以帮助亲水和亲脂的溶解性，例如水和醇类，例如乙醇。
当作为胚珠或直肠栓剂或类似配制，活性化合物与这与人类的直肠黏膜兼容的合适的载体混合。较佳的载体是硬脂肪(饱和脂肪酸甘油酯的混合物)，特别是的Witepsol，以及专门的Witepsol H-15基(购自Medisca，Montreal，Canada)。可以使用任何其它亲脂性基，如Fattibase、Wecobee、可可脂、可可油或的Witepsol基的其他组合。
较佳的性类固醇前体是脱氢表雄酮(DHEA)(可以购自例如Proquina，Orizaba，Veracruz，Mexico)。
所述载体还可以包括在化学以及医学领域中各种用在软膏剂，洗剂和栓剂的添加剂。例如，可以存在香料、抗氧化剂、香料、胶凝剂、增稠剂，例如羧甲基纤维素、表面活性剂、稳定剂、润肤剂、着色剂和其它类似试剂。
根据本发明的治疗，其适用于无限期延续。SERM、抗雌激素化合物及性类固醇前体可以透过口服路径施用，并且可以用传统药学赋形剂制造成片剂或胶囊以口服给药，例如喷雾干燥的乳糖、微晶纤维素及硬脂酸镁。
活性物质可以通过与固体粉状载体物质混合加工成片剂或糖衣丸芯，如柠檬酸钠、碳酸钙或磷酸二钙，且粘合剂例如为聚乙烯吡咯烷酮、明胶或纤维素衍生物，可能也增添润滑剂，例如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠、″Carbowax″或聚乙二醇。当然，在口服形式的情形下，也可以加入口味改善物质。
进一步的形式，人们可以使用插塞胶囊，例如硬明胶以及封闭软胶囊，其包括软化剂或增塑剂，例如甘油。较佳的，插塞胶囊含有粒状形式的活性物质，例如与填料混合，如乳糖、蔗糖、甘露醇、淀粉，如马铃薯淀粉或支链淀粉、纤维素衍生物或高度分散的硅酸。在软明胶胶囊，较佳的，活性物质溶解或悬浮在合适的液体，如植物油或液体聚乙二醇。
乳液、软膏、凝胶或乳膏应该彻底搓揉进入皮肤，而无清楚可见的多余部分，并且在大部分的经皮渗透发生前不应清洗此区域的皮肤，较佳的是至少4小时，并且更加的是至少6小时。
根据习知技术，经皮贴剂可以用来传递前体。这通常是应用在较长的时间，例如1至4天，但其一般语活性成分接触一较小的表面积，以令活性成分的传送缓慢而恒定。
本发明已经发展并且有多个经皮传药系统正在使用，其适于用来传递活性成分。释放率通成是由基质扩散或者是控制膜中的活性成分的通道所控制。
在机械方面，经皮装置是本领域所熟知的，并且例如在美国专利5,162,037，5,154,922，5,135,480，4,666,441，4,624,665，3,742,951，3,797,444，4,568,343，5,064,654，5,071,644，5,071,657中所描述，这些揭露内容通过引用并入本文。其他的背景技术由欧洲专利European Patent 0279982以及英国专利申请British Patent Application2185187提供。
装置可以是本领域所熟知的任何一般型态，包含粘合剂基质和贮库型透皮传送装置。装置可以包含含药基质结合纤维，其溪熟活性组分及/或。在储型器件，储存件可以由载体和活性成分不可渗透的高分子膜所定义。
在经皮装置，装置本身将活性成分与所想要的局部皮肤表面接触。在这装置中，载体对于活性成分的粘性相较于乳膏或凝胶则较少关注。经皮系统的溶剂系统可以包含，例如油酸、直链醇乳酸和二丙二醇或其它本领域所熟知的溶剂系统。活性成分可以溶解于或着悬浮于载体。
为了固定到皮肤上，经皮贴剂可以安装在中间打孔的外科胶带上。粘合剂较佳的由剥离衬垫覆盖，以使用前保护。一般适于释放的材料包含聚乙烯和涂布聚乙烯的纸，并且较佳的是涂布聚硅氧烷以便于移除。为了应用此装置，简单地剥离衬里并且粘合剂附着到患者的皮肤。在美国专利United States Patent 5,135,480中，此揭露内容通过引用并入本文，并且描述了具有非黏合手段已将装置确保于皮肤的替代设备。
只有SERM、抗雌激素和性类固醇前体是必须依照此方式以足够让血液血清的每一浓度达到所欲水平的剂量施用。根据本发明的联合治疗，SERM的浓度是维持在所欲的参数内，并且性类固醇前体的浓度是维持在所欲的参数内。
一较佳的性类固醇前体是DHEA，即使如以下所述DEHA-S及其类似物根据下述理由是特别有效的。
本发明的选择性雌激素受体调节剂具有以下特征的分子结构：a)间隔1至2的居间碳原子的两个芳香环，两个芳香环被羟基或在体内转化成羟的基团取代或未取代；以及b)具有芳香环及三级胺功能或其盐类的支链。
本发明一较佳的SERM是阿考比芬(acolbifene)：
阿考比芬(acolbifene)(又称作EM-652.HCl；EM-1538)是强大的抗雌激素EM-652的盐酸盐。这揭露于美国专利US patent 6,710,059 B1。另一较佳的SERM是拉索昔芬(Lasofoxifene)(Oporia；CP-336，156；(-)-cis-(5R，6S)-6-phenyl-5-[4-(2-pyrrolidin-1-ylethoxy)phenyl]-5，6，7，8-tetrahydronaphthalen-2-ol，D-(-)-tartrate salt)(可从Pfizer Inc.，USA获得)。
另一个较佳的抗雌激素是Wyeth Ayers(USA)发展的巴多昔芬(Bazedoxifene)(TSE 424；WAY-TSE 424；WAY 140424；1-[[4-[2-(hexahydro-1H-azepin-1-yl)ethoxy]phenyl]methyl]-2-(4-hydroxy phenyl)-3-methyl-1H-indol-5-ol，acetate)，其也揭露于JP10036347(美国家用产品公司)并且被美国批准用于预防绝经后骨质疏松以及WO 97/32837描述的非类固醇雌性激素衍生物。本发明其他较佳的SERM包含他莫西芬(Tamoxifen)((Z)-2-[4-(1，2-diphenyl-1-butenyl)phenoxy]-N，N-dimethylethanamine)(可从Zeneca，UK取得)、托瑞米芬(Toremifene)((Z)-2-[4-(4-Chloro-1，2-diphenyl-1-butenyl)phenoxy]-N，N-dimethylethanamine))(可从Orion，Finland取得，商标为Fareston or Schering-Plough)、Eli Lilly and Co.，USA的屈洛昔芬(Droloxifene)((E)-3-[1-[4-[2-(Dimethylamino)ethoxy]phenyl]-2-phenyl-1-butenyl]phenol)、雷洛昔芬(Raloxifene)(([2-(4-hydroxyphenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl][4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]phenyl]-methanone hydrochloride))、LY 335124、LY 326315、LY335563(6-hydroxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]phenoxyl]-2-(4-hydroxyphenyl)benzo[b]thiopene hydrochloride)和阿佐昔芬(Arzoxifene)(LY 353381，6-hydroxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]phenoxyl]-2-(4-methoxyphenyl)benzo[b]thiophenehydrochloride)。其他较佳的SERM是艾多昔芬(Idoxifene)((E)-1-[2-[4-[1-(4-Iodophenyl)-2-phenyl-1-butenyl]phenoxy]ethyl]pyrrolidine)(SmithKline Beecham，USA)、左美洛昔芬(Levormeloxifene)(3，4-trans-2，2-dimethyl-3-phenyl-4-[4-(2-(pyrrolidin-1-yl)ethoxy)phenyl]-7-methoxychroman)(Novo Nordisk，A/S，Denmark)，其揭露于Shalmi et al.WO 97/25034、WO 97/25035、WO 97/25037、WO 97/25038；及Korsgaard et al.WO 97/25036、GW5638(如Willson et al.，1997所述)及吲哚衍生物(如Miller et al.，EP 0802183A1所揭露)。还包含Taiho(Japan)的Iproxifen磷酸二氢(E)-4-[1-[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基]-2-[4-(1-甲基乙基)苯基]-1-丁烯基]苯酚(TAT 59；(E)-4-[1-[4-[2-(dimethylamino)ethoxy]phenyl]-2-[4-(1-methylethyl)phenyl]-1-butenyl]phenol dihydrogen phosphate)、Orion-Farmos Pharmaceutica，Finland的奥培米芬(Ospemifene)(FC 1271；((Z)-2-[4-(4-chloro-1，2-diphenyl-1-butenyl)phenoxyl]ethanol)、Sanofi-Aventis(France)的SERM 3471、HMR 3339及HMR 3656、Wyeth-Ayers发展的哌喷昔芬(pipendoxifene)(ERA 923)、WO 97/3283所述的非类固醇雌激素的衍生物、QuatRx(USA)发展的非培米芬(Fispemifene)及美国Celgene发展的CC 8490。
如制造商推荐的，任何根据所需功效使用的SERM都可以使用。适当的剂量是所属技术领域所熟知的。根据本发明，可以使用任何其他商用非固醇类抗雌激素。任何具有与SERM相似活性(范例：雷洛昔芬(Raloxifene)可以使用)。
根据本发明，当使用口服施用时，对平均体重的人而言，SERM施用的较佳剂量是每天0.01至5mg/kg体重(较佳的，0.1至1.0mg/kg)，与以每天5mg/kg，特别是每天10mg/kg分成二等分，或者是当使用肠胃施用(即肌内，皮下或经皮给药)时，对平均体重的人而言，SERM施用的较佳剂量是每天0.003至3.0mg/kg体重(较佳的，0.015至0.3mg/kg)，与以每天1.5mg/kg，特别是每天3.0mg/kg分成二等分。较佳的，SERM是以如下所述药学上可接受的稀释剂或载体一起施用。
本发明的一个较佳的抗雌激素是氟维司群(fulvestrant)(Faslodex；ICl 182780；7a-[9-(4，4，5，5，5-pentafluoro-pentylsulphinyl)nonyl]oestra-1，3，5(10)-triene-3，17p-diol)，其每月以250mg的剂量肌内施用，其可自AstraZeneca Canada Inc.，Mississauga，Ontario，Canada获得。其他较佳的抗雌激素是Schering AG，Germany的SH646。
对于本文所建议的所有剂量，主治医师应监测患者个体回应，并相应地调整剂量。
示例
示例1
本发明优选化合物的合成的示例。
阿考比芬(acolbifene)(S)-(+)-7-羟基-3-(4′-羟基苯基)-4-甲基-2-(4”-(2”’-哌啶子基)苯基)-2H-1-苯并吡喃盐酸盐(((S)-(+)-7-hydroxy-3-(4′-hydroxyphenyl)-4-methyl-2-(4，，-(2″′-pipe ridinoethoxy)phenyl)-2H-1-benzopyran hydrochloride)，EM-01538，(EM-652.HCl)的合成
流程图1
步骤A(Step A)：BF3 Et2O、甲苯；100℃；1小时。
步骤C(Step C)：3，4-二氢吡喃(3，4-dihydropyran)、对甲苯磺酸一水合物(p-toluenesulfonic acid monohydrate、乙酸乙酯；25℃氮气下、16小时，然后于异丙醇结晶。
步骤D，E.和F(Steps D，E.and F)：
(1)哌啶、甲苯，Dean&Stark apparatus，氮气下回流；
(2)1，8-二氮杂双环[5，4，0]十一碳-7-烯(1，8-diazabicyclo[5，4，0]undec-7-ene)，二甲基甲酰胺，回流3小时；
(3)CH3MgCl，四氢呋喃，-20至0℃然后室温24小时；
步骤G.H(Steps G.H)：(1S)-(+)-10-樟脑磺酸((1S)-(+)-10-camphorsulfonicacid)、丙酮、水、甲苯，室温，48小时。
步骤HH(Step HH)：95％乙醇，70℃，然后室温3天。
步骤HHR(Step HHR)：母液及步骤HH洗液的回收
(S)-10-樟脑磺酸((S)-10-camphorsulfonic acid)，回流；36小时，然后室温16小时。
步骤I(Step I)：
(1)二甲基甲酰胺(DMF aq.)、碳酸钠(Na2CO3)、乙酸乙酯(ethyl acetate)；
(2)乙醇、稀释HCl；
(3)水。
2-四氢吡喃氧基-4-羟基-2′-(4”-四氢吡喃基氧基苯基)乙酰苯(2-tetrahydropyranyl oxy-4-hydroxy-2′-(4″tetrahydropyranyl oxy phenyl)acetophenone)(4)的合成。2，4-二羟基-2′-(4”-羟基苯基)乙酰苯3(97.6g，0.4mole)(可购自Chemsyn Science Laboratories，Lenexa，Kansas)的悬浮液在3，4-二氢吡喃(218mL，3.39mole)和乙酸乙酯(520mL)下于约25℃以对甲苯磺酸一水合物(0.03g，0.158mmole)处理。在氮气以及无外界加热下搅拌反应混合物约16小时。然后以碳酸氢钠(1g)及氯化钠(5g)水溶液(100mL)清洗混合物。分层并且以盐水(20mL)清洗有机层。每一清洗后再以50mL乙酸乙酯萃取。合并所有的有机层并且通过硫酸钠过滤。在常压下移除溶剂(约600mL)，并且加入异丙醇(250mL)。在常压下蒸除加入的溶剂(约275mL)，并且加入异丙醇(250mL)。将溶液冷却并搅拌至25℃，然后在约12小时候，过滤结晶的固体，以异丙醇清洗并干燥。
4-羟基-4-甲基-2-(4′-[2“哌啶子基]-乙氧基)苯基-3-(4”’-四氢吡喃基氧基)苯基-7-四氢吡喃氧基苯并二氢吡喃(10)(4-hydroxy-4-methyl-2-(4′-[2″-piperidino]-ethoxy)phenyl-3-(4′″-tetrahydropyranyl oxy)phenyl-7-tetrahydropyranyl oxy-chromane)(10)的合成。2-四氢吡喃氧基-4-羟基-2′-(4”-四氢吡喃基氧基苯基)乙酰苯(2-tetrahydropyranyl oxy-4-hydroxy-2′-(4″tetrahydropyranyl oxy phenyl)acetophenone)4(1kg，2.42mole)、4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯甲醛(4-[2-(1-piperidino)ethoxy]benzaldehyde)5(594g，2.55mole)(可从available from Chemsyn ScienceLaboratories，Lenexa，Kansas获得)及哌啶(82.4g，0.97mole)(可从Aldrich ChemicalCompany Inc.，Milwaukee，Wis.获得)的溶液在氮气下以Dean&Stark apparatus于甲苯(8L)回流直到收集到一当量的水(44mL)。透过常压蒸馏从溶液中移除甲苯(6.5L)。加入二甲基甲酰胺甲苯(6.5L)及1，8-二氮杂双环[5.4，0]十一-7-烯(110.5g，0.726mole)。在常温下溶液搅拌约8小时，以将chalcone 8异构化成chalcone 9，并且加入水及冰(8L)及甲苯(4L)。分层并且以水(5L)清洗甲苯层。合并的洗涤水用甲苯(3×4L)萃取。合并的甲苯萃取液以盐水(3x4L)清洗并且在常压下浓缩至5.5L，接着冷却至-10℃。在持续透过通入外界氮气冷却以及搅拌下，加入3M的氯化甲基镁THF(2.5L，7.5mole)(可从Aldrich ChemicalCompany Inc.，Milwaukee，Wis.获得)溶液，维持在低于0℃。待加入所有的Grignard试剂，移除外界冷却并且让溶液回温至室温。混合物在此温度下搅拌24小时。混合然后冷却至约-20℃并且持续外界冷却以及搅拌，缓慢加入饱和氯化铵溶液(200mL)，温度维持在低于20℃。混合物搅拌2小时然后加入饱和氯化铵溶液(2L)以及甲苯(4L)并且搅拌5分钟。分层并且以甲苯萃取水层(2x4L)。合并的甲苯萃取液以稀释的盐酸清洗直到溶液成为匀相，然后以盐水清洗(3x4L)。甲苯溶液最后在常压下浓缩至2L。直接用于下一步骤。
(2R，S)-7-羟基-3-(4′-羟基苯基)-4-甲基-2-(4”-[2″′-哌啶子基]乙氧基)苯基)-2H-1-苯并吡喃(1S)-10-樟脑磺酸盐(±12)((2R，S)-7-hydroxy-3-(4’-hydroxyphenyl)-4-methyl-2-(4″-[2”’-piperidino]ethoxy)phenyl)-2H-1-benzopyran(1S)-10-camphorsulphonic acid salt(±12))的合成。(2R，S)-7-羟基-3-(4′-羟基苯基)-4-甲基4-羟基-4-甲基-2-(4′-[-2”-哌啶子基]-乙氧基)-苯基-3-(4”’-四氢丙炔氧基(苯基-7-四氢吡喃氧基苯并二氢吡喃(4-hydroxy-4-methyl-2-(4′-[-2″-piperidino]-ethoxy)-phenyl-3-(4″’-tetrahydro propynyloxy)phenyl-7-tetrahydropyranyl oxychromane)(10)的甲苯溶液加入丙酮(6L)、水(0.3L)以及(S)-10-樟脑磺酸(561g，2.42mole)(可从Aldrich Chemical Company Inc.Milwaukee Wis获得)，混合物在氮气下搅动48小时，然后过滤(2R，S)-7-羟基-3-(4′-羟基苯基)-4-甲基-2-(4”-[2”’-哌啶子基]乙氧基)苯基)-2H-苯并吡喃(1)-10-樟脑磺酸盐((2R，S)-7-hydroxy-3-(4′-hydroxyphenyl)-4-methyl-2-(4″-[2′″-piperidino]ethoxy)phenyl)-2H-benzopyran(1S)-10-camphorsulphonic acid salt)(12)固体，以丙酮清洗并干燥(883g)。此材料在为纯化下用于下一步骤(HH)。
(2S)-7-羟基-3-4′-羟基苯基)-4-甲基-2-(4”-[2”’-哌啶子基]乙氧基)苯基)-2H-1-苯并吡喃(1S)-10-樟脑磺酸盐(13，(+)-EM-652(1S)-CSA盐)((2S)-7-hydroxy-3-(4′-hydroxyphenyl)-4-methyl-2-(4″-[2″′-piperidino]ethoxy)phenyl)-2H-1-benzopyran(1S)-10-camphorsulphonic acid salt(13，(+)-EM-652(1S)-CSA salt))的合成。(2R，S)-7-羟基-3-(4′-羟基苯基)-4-甲基-2-(4”-[2”’-哌啶子基]乙氧基)苯基)-2H-苯并吡喃(1)-10-樟脑磺酸盐((2R，S)-7-hydroxy-3-(4′-hydroxyphenyl)-4-methyl-2-(4″-[2′″-piperidino]ethoxy)phenyl)-2H-benzopyran(1S)-10-camphorsulphonic acidsalt)±12的悬浮液(759g)于乙醇中加热搅拌至70℃直到固体溶解。溶液冷却搅拌至室温，然后加入少数晶种(2S)-7-羟基-3-(4’羟苯基)-4-甲基-2-(4”-[2”’-哌啶子基]乙氧基)苯基)-2H-1-苯并吡喃(1)-10-樟脑磺酸盐((2S)-7-hydroxy-3-(4’-hydroxyphenyl)-4-methyl-2-(4”-[2”’-piperidino]ethoxy)phenyl)-2H-1-benzopyran(1S)-10-camphorsulphonic acid salt)13。溶液在室温下搅拌共3天。过滤晶体，以95％乙醇清洗并且干燥(291g，76％)。产物de为94.2％并且纯度为98.8％。
(S)-(+)-7-羟基-3-(4′-羟基苯基)-4-甲基-2-(4”-(2”’-哌啶子基)苯基)-2H-1-苯并吡喃盐酸盐(((S)-(+)-7-hydroxy-3-(4′-hydroxyphenyl)-4-methyl-2-(4，，-(2″′-piperidinoethoxy)phenyl)-2H-1-benzopyran hydrochloride)，EM-01538，(EM-652.HCl)的合成。化合物13(EM-652-(+)-CSA盐，500mg，0.726mmol)的悬浮液在二甲基甲酰胺(11μL，0.15mmol)以0.5M碳酸钠水溶液(7.0mL，3.6mmol处理，并且搅拌15分钟。悬浮液以乙酸乙酯(7.0mL)处理并且搅拌4小时。有机相使用饱和碳酸钠水溶液(2x5mL)以及盐水(1x5mL)清洗，以硫酸镁干燥，浓缩。乙醇(2mL)中所产生的粉红色泡沫(EM-652)的溶液以2当量的盐酸(400μL，0.80mmol)处理，搅拌1小时，使用蒸馏水(5mL)处理，并且搅拌30分钟。过滤所得到的悬浮液，使用蒸馏水(5mL)清洗，在空气以及高真空(65℃)下干燥，获得乳脂状粉末(276mg，77％)。精致灰白色粉末；Scanning Calorimetry：熔点发生在219℃，ΔH＝83J/g；[α]24 D＝154°于10mg/mL甲醇；1H NMR(300MHz(CD3OD)δ(ppm)1.6(broad，2H，H-4”’)，1.85(broad，4H，H-3””and 5””)，2.03(s，3H，CH3)，3.0 and 3.45(broad，4H，H-2””and 6””)，3.47(t，J＝4.9Hz，2H，H-3”’)，4.26(t，J＝4.9Hz，2H，H-2”’)，5.82(s，1H，H-2)，6.10(d，J＝2.3Hz，1H，H-8)，6.35(dd，J＝8.4，2.43Hz，1H，H-6)，6.70(d，J＝8.6Hz，2H，H-3′，and H-5′)，6.83(d，J＝8.7Hz，2H，H-3”and H-5″)，7.01(d，J＝8.5Hz，2H，H-2’and H-6’)，7.12(d，J＝8.4Hz，1H，H-5)，7.24(d，J＝8.6Hz，2H，H-2”and H-6”)；13C RMN(CD3OD，75MHz)δppm14.84，22.50，23.99，54.78，57.03，62.97，81.22，104.38，109.11，115.35，116.01，118.68，125.78，126.33，130.26，130.72，131.29，131.59，134.26，154.42，157.56，158.96，159.33.元素组成：C，H，N，Cl：理论；70.51，6.53，2.84，7.18，％，实际：70.31，6.75，2.65，6.89％。
示例2
材料及方法
动物
体重18-20g的雌性BALB/c老鼠(BALB/cAnNCr IBR)从Charles-River，Inc.(St-Constant，Quebec，Canada)获得，并且以每笼5只安置在控制的环境(温度(23±1℃)及光照(12小时光照12小时黑暗，在07：15开灯))。老鼠自由采食喂食啮齿动物食物和自来水。在异氟烷麻醉下通过双边侧面切口将动物切除卵巢(OVX)并随机分配到10只动物的组别。十只老鼠保持完好作为对照。
治疗
在第一个实验中，测试的化合物(图17和18)，亦即EM-652 HCl(阿考比芬(acolbifene))、拉索昔芬(Lasofoxifene)(游离盐，活性和非活性消旋物)和雷洛昔芬(Raloxifene)每天以灌胃方式口服给药1、3或10μg/动物的剂量共9天，在卵巢切除2天后开始。在第二个实验中(表4)，TSE 424每天以灌胃方式口服给药1、3、10或30μg/动物的剂量共9天，在卵巢切除2天后开始。在二实验中，为了评价抗雌激素活性，在卵巢切除后5天开始施用雌酮(E1，0.06μg，s.c.注射，每天2次)，并且施用共6天。化合物溶解于乙醇(4％最终浓度)并且施用于0.4％甲基纤维素。在9天内，完整及OVX对照组的老鼠则单独接受载体(4％乙醇-0.4％甲基纤维素)。在卵巢切除后11天，动物腹主动脉进行放血处死。子宫和阴道迅速解剖、称重，并保持在10％的缓冲福尔马林中，以用于进一步的组织学检查。
条文1：结果
实验1
如图17所示，每日口服施用1μg、3μg及10μg EM-652 HCl(阿考比芬(acolbifene))分别造成24％、48％及72％雌酮刺激子宫重量(对于所有剂量相较于对照组p＜0.01)的抑制，而雷洛昔芬(Raloxifene)在相同剂量下则在此参数造成6％(NS)、14％(p＜0.01)及43％(p＜0.01)的抑制。另一方面，拉索昔芬(Lasofoxifene)(作为游离碱)在最低剂量下没有抑制效果，而其在每日3μg及10μg剂量下造成25％(p＜0.01)及44％(p＜0.01)雌酮刺激子宫重量的抑制。施用拉索昔芬(Lasofoxifene)的非活性消旋物在任何剂量下都没有抑制效果。
当化合物每日以1μg及10μg单独施用(缺乏雌酮)于被切除卵巢的老鼠，两个剂量下EM-652 HCl对于子宫重量没有显着的刺激效果，而拉索昔芬(Lasofoxifene)及雷洛昔芬(Raloxifene)则分别造成93％(p＜0.01)及85％(p＜0.01)子宫重量的刺激(图18)，这代表后者的雌性激素效果。相似的，EM-652 HCl对于阴道重量没有显着的刺激效果(图18)，而拉索昔芬(Lasofoxifene)及雷洛昔芬(Raloxifene)则分别造成73％(p＜0.01)及56％(p＜0.01)阴道重量的刺激(图18)。另一方面，拉索昔芬(Lasofoxifene)的非活性消旋物对于子宫及阴道重量没有刺激效果。
实验2：
如表4所示，每日口服施用1μg、3μg、10μg或30μg TSE 424分别造成12％(NS)、47％、74％及94％雌酮刺激子宫重量(对于3最高剂量vs E1对照组p＜0.01)的抑制。当化合物每日以3μg及30μg单独施用(缺乏雌酮)于被切除卵巢的老鼠，两个剂量下TSE 424对于子宫重量没有显着的刺激效果。
表4
增加TSE 424浓度口服施用至被切除卵巢的老鼠9天同时施用/不施用雌酮对子公众量的影响
示例3
骨质流失失，血脂和全身脂肪的预防效果
动物及治疗
在治疗开始，使用10-12周龄、体重约220-270克的雌性Sprague-Dawley老鼠(Crl：CD(SD)Br)(Charles River Laboratory，St-Constant，Canada)。开始实验的至少1周前，将动物驯化的环境条件(温度：22±3℃；湿度：50±20％；12小时光照12小时黑暗，在07∶15开灯)。动物单独饲养，并允许自由饮用自来水和认证的颗粒状啮齿动物饲料(Lab Diet5002，Ralston Purina，St-Louis，MO)。实验是根据CCAC指南实验动物护理和使用在由加拿大委员会动物护理(CCAC)以及协会评估和实验动物保健的认证(AAALAC)批准的动物设施进行。
在第一个实验中，154只老鼠每14只随机分配至11组，各自如下1)完整的对照组；2)OVX对照组；3)OVX+E2(1mg/kg)；4)OVX+EM-652.HCl(2.5mg/kg)；5)OVX+E2+EM-652.HCl；6)OVX+脱氢表雄酮(DHEA；80mg/kg)；7)OVX+DHEA+EM-652.HCl；8)OVX+DHEA+E2；9)OVX+DHEA+E2+EM-652.HCl；10)OVX+GW 5638；11)OVX+E2+GW5638。在研究的第1天，各组的动物在异氟烷麻醉下进行双侧卵巢切除术(OVX)。DHEA以50％乙醇-50％丙二醇溶液局部施用于背部皮肤，而其他测试的化合物分别悬浮在0.4％甲基纤维素通过口服管饲法施用。治疗在研究的第2天开始，每天执行一次共3月。
在第二个实验中，132只老鼠每14或15之随机分配至9组，各自如下1)完整的对照组；2)OVX对照组；3)OVX+普力马林(Premarin)(0.25mg/kg)；4)OVX+EM-652.HCI(2.5mg/kg)；5)OVX+普力马林+EM-652.HCI；6)OVX+TSE 424(2.5mg/kg)；7)OVX+普力马林+TSE 424；8)OVX+lasofoxifene(tartrate salt；racemate；2.5mg/kg)；9)OVX+普力马林+lasofoxifene。在研究的第1天，各组的动物在异氟烷麻醉下进行双侧卵巢切除术。测试的化合物分别悬浮在0.4％甲基纤维素通过口服管饲法施用。治疗在研究的第2天开始，每天执行一次共26周。在两个实验中，没有接收到测试品动物用单独的适当手段在同一时期进行处理。
骨密度测量
在治疗后3个月(实验1)或26周(实验2)，使用双能X线骨密度腰椎吸收仪(DEXA；QDR4500A，Hologic，Waltham，MA)及Regional High Resolution Scan software扫描异氟烷麻醉下的每只老鼠。测定骨密度腰椎(BMD)(椎骨L2至L4)和总体组合物(脂肪百分比)。
血清试验
在治疗后3个月(实验1)或26周(实验2)，从禁食过夜动物颈静脉收集血液样品(异氟烷麻醉下)。样品用于血清制备并且在-80℃下冻结直至测定。血清胆固醇水平和碱性磷酸酶活性(ALP)利用Boehringer Mannheim Diagnostic Hitachi 911 Analyzer(Boehringer Mannheim Diagnostic Laboratory Systems)测定。
统计分析
数据表示为平均±SEM。统计学意义根据Duncan-Kramer{Kramer，1956#37421多重范围试验测定。
结果
如表5所示，在卵巢切除后3个月后，腰椎骨密度较完整对照组(P＜0.01)较完整对照组(P＜0.01)降低10％。在所用的剂量中，单独施用雌二醇和EM-652.HCl防止腰椎骨密度流失分别达98％(p＜0.01)和65％(p＜0.05)，而同时用E2和EM-652.HCl治疗则防止OVX诱导的腰椎骨密度流失达61％(P＜0.05)。另一方面，单独施用DHEA防止腰椎骨密度流失达43％(P＜0.05)，而与DHEA+E2+EM-652.HCl的联合治疗则防止OVX诱导的腰椎骨密度流失达91％并使得骨密度值与完整的对照组无差异。
在表6，在卵巢切除后26周后，腰椎骨密度较完整对照组(P＜0.01)降低18％，单独施用EM-652.HCl、TSE 424和拉索昔芬分别防止腰椎骨密度损失54％、62％、49％和61％(P均＜0.01vs OVX对照)。加入普力马林至EM-652.HCl、TSE424和拉索昔芬的腰椎骨密度损失并未与单独施用这些SERM的值有明显差异(表6)。类似地，加入DHEA至E2或EM-652。盐酸.HCl完全防止的OVX引起腰椎骨密度的下降(表5)。DHEA对骨密度的积极效果也通过其对血清碱性磷酸酶活性效应得到支持(ALP)，在DHEA、DHEA+EM-652.HCl、DHEA+E2-和DHEA+E2+EM-652.HCl中的骨形成标记和ALP活性翻转分别从OVX对照动物的73±6IU/L增加至224±18IU/L、290±27IU/L、123±8IU/L和61±20IU/L(全部p＜0，01)，从而表明DHEA对骨形成(表7)有刺激作用。
除了对骨损失的预防效果，施用EM-652.HCl、TSE424、拉索昔芬、GW5638、DHEA和E2对总的身体脂肪比例和血脂一些有益的作用。卵巢切除后三个月后，身体的总脂肪增加了22％(P＜0.05；表7)。施用EM-652.HCl完全防止了OVX诱导的脂肪率增加，而加入DHEA及/或E2至SERM则导致脂肪比率值低于完整的对照动物所观察到的。卵巢切除后26周后，在施用普力马林、EM-652.HCl、TSE 424或拉索昔芬则将雌性激素缺乏诱导的40％的脂肪增加分别逆转为74％、78％、75％和114％，而加入普力马林至SERM则完全预防OVX诱导的脂肪增加。
如表7所示，卵巢切除后三个月后，观察到OVX对照组老鼠的血清胆固醇水平较完整的对照组(P＜0.01)增加了22％。事实上，血清胆固醇从在完整的动物的2.01±0.11mmol/L增加至OVX对照的2.46V0.08mmol/L。单独施用E2或DHEA分别降低血清胆固醇水平1.37±0.18mmol/L和1.59±0.10mmol/L，而单独施用EM-652.HCl或与E2和/或DHEA组合施用导致胆固醇水平相较于完整的动物(2.01±0.11mmol/L)显着低级(间为0.65～0.96mmol/L)。同样地，GW5638、TSE424拉索昔芬(lasofoxifene)的单独或与E2或普力马林组合施用完全防止对的OVX诱导的血清胆固醇水平的增加，并导致数值比在完整的动物中还低(表7和8)。
表5
在单独或联合以雌二醇、EM-652.HCl、GW 5638或DHEA治疗去卵巢雌性老鼠3月对预防骨质流失的影响
*p＜0.5；**p＜0.01，实验相对于OVX对照老鼠
表6
在单独以普力马林、EM-652.HCI、TSE 424或拉索昔芬或和普力马林治疗去卵巢雌性老鼠26周对预防骨质流失的影响
p*＜0.01，实验相对于OVX对照老鼠
表7
在单独或联合以雌二醇、EM-652.HCI、GW 5638或DHEA治疗去卵巢雌性老鼠3月对身体脂肪比例、血清胆固醇水平和碱性磷酸酶活性的影响
*p＜0.5；**p＜0.01，实验相对于OVX对照老鼠
表8
在单独以普力马林、EM-652.HCI、TSE 424或拉索昔芬或和普力马林治疗去卵巢雌性老鼠26周对身体脂肪比例、血清胆固醇水平和碱性磷酸酶活
性的影响
*p＜0.5；**p＜0.01，实验相对于OVX对照老鼠
示例4
在施用EM-652.HCI阿考比芬(acolbifene)、TSE 424及ERA-923单独及与DHEA于去卵巢雌性老鼠后对于骨丢失的预防效果
动物及治疗
在治疗开始，使用10-12周龄、体重约220-270克的雌性Sprague-Dawley老鼠(Crl：CD(SD)Br)(Charles River Laboratory，St-Constant，Canada)。开始实验的至少1周前，将动物驯化的环境条件(温度：22±3℃；湿度：50±20％；12小时光照12小时黑暗，在07∶15开灯)。动物单独饲养，并允许自由饮用自来水和认证的颗粒状啮齿动物饲料(Lab Diet5002，Ralston Purina，St-Louis，MO)。实验是根据CCAC指南实验动物护理和使用在由加拿大委员会动物护理(CCAC)以及协会评估和实验动物保健的认证(AAALAC)批准的动物设施进行。
126只老鼠每14只随机分配至9组，各自如下1)完整的对照；2)OVX对照；3)OVX+EM-652.HCl(2.5mg/kg)；4)OVX+TSE-424(EM-4803，2.5mg/kg)；5)OVX+ERA-923(EM-3527，2.5mg/kg)；6)OVX+脱氢表雄酮(DHEA；80mg/kg)；7)OVX+DHEA+EM-652.HCI；8)OVX+DHEA+TSE-424；9)OVX+DHEA+ERA-923。在研究的第1天，各组的动物在异氟烷麻醉下进行双侧卵巢切除术(OVX)。DHEA以50％乙醇-50％丙二醇溶液局部施用于背部皮肤，而进行测试的SERM分别悬浮在0.4％甲基纤维素通过口服管饲法施用。治疗在研究的第2天开始，每天执行一次共5周。
骨密度测量
治疗5周后，异氟烷麻醉下使用双能X线骨密度扫描及Regional High ResolutionScan software每只老鼠的腰椎、股骨及胫骨(DEXA；QDR 4500A，Hologic，Waltham，MA)。测定骨密度腰椎(BMD)(L2椎体至L4)、股骨远端干骺端(DFM)和胫骨干骺端(PTM)。
统计分析
数据表示为平均±SEM。统计学意义根据Duncan-Kramer{Kramer，1956#37421多重范围试验测定。
如表9所示，5周卵巢切除后，卵巢切除对照动物的腰椎骨密度比完整对照减少9％。单独施用SERM：EM-652.HCl、TSE-424或ERA-923分别预防腰椎骨密度损失86％、53％及78％。另一方面，单独施用DHEA防止腰椎骨密度损失44％，而同时使用DHEA+EM-652.HCl、DHEA+TSE-424或DHEA+ERA-923完全阻止OVX诱导的腰椎骨密度损失，并导致并导致腰椎骨密度损失值均较完整的对照动物中所观察到的高。相似的结果可在腰椎骨密度损失94％、105％及105％。
卵巢切除5周后，股骨远端干骺端(DFM)的骨密度减少了10％(表9)。单独施用SERM：EM-652.HCl、TSE-424或ERA-923分别预防了股骨远端干骺端的骨密度的损失95％、70％及83％。另一方面，单独施用脱氢表雄酮防止股骨远端干骺端骨密度损失71％，而同时使用DHEA+EM-652.HCl、DHEA+TSE-424或DHEA+ERA-923完全阻止OVX诱导在远端干骺端的骨密度损失，并导致并导致DFM BMD值均较完整的对照动物中所观察到的高。相似的结果可在胫骨干骺端骨密度获得(表9)。
表9
在以5周SERM单独或与DHEA结合施用治疗后对于去卵巢雌鼠骨质流失预防的影响：EM-652.HCI、TSE-424及ERA-923
实验5
本发明化合物对人类子宫内膜腺癌lshikawa细胞内碱性磷酸酶活性的影响
材料
储备细胞培养的维持
来自高分化子宫内膜腺癌源性人类Ishikawa细胞系由Erlio Gurpide博士提供，The Mount Sinai Medical Center，New York，NY。Ishikawa细胞系常规保持在Eagle氏最低必需培养基(MEM)，其含有5％(v/v)FBS(胎牛血清)和补充有100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素、0.1mM非必需氨基酸溶液。细胞在37℃下放置在Falcon T75烧瓶，密度为1.5x 106细胞。
细胞培养实验
在实验的开始24小时前，邻近汇合lshikawa细胞系的培养基用新鲜的无雌激素基础培养基(EFBM)由1∶1(v)的无酚红的Ham′s F-12和Dulbecco氏改良的Eagle氏培养基(DMEM)混合物，补充有用葡聚糖包被的活性炭处理两次100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素、2mM谷氨酰胺和5％FBS以除去内源性类固醇。然后将细胞用0.1％胰酶(Sigma)和0.25mM的HEPES收集，再悬浮于EFBM并接种在Falcon 96，以及在2.2×104细胞/孔密度的100μL平底微量滴定板，并使其附着于板的表面24小时。此后，将培养基用含有终体积200μL化合物的所示浓度的新鲜EFBM取代。细胞培养五天，48小时后更换培养基。
碱性磷酸酶检测
在培养期结束时，倒置微滴定板，并且滗析生长培养基。将培养板通过孔以200μLPBS(0.15MNaCI，10mM磷酸钠，pH 7.4)润洗。然后从板移除PBS，小心留下一些残余的PBS，并再重复一次洗涤过程。然后将缓冲盐水倾析，并且反相板在纸巾轻轻吸干。然后更换盖，将培养板置于-80℃15分钟，随后在室温下解冻10分钟。然后将板置于冰上，并加入50μL含有5mM磷酸对硝基苯酯、0.24mMMgCI2和1M二乙醇胺(pH9.8)的冰冷溶液。然后将板加热到室温，并产生黄色的对硝基苯基(8分钟)。板以酶联免疫吸附试验板计数器(BIO-RAD，型号2550EIA计数器)在405nm侦测。
计算
剂量-反应曲线及IC50是透过加权迭代非线性最小平方回归计算。
*％1nM E2刺激＝
OD 405nm化合物基线/OD 405nm1nM E2-OD 405nm化合物基线
还请见Labrie et al.1999。
实验6
EM-652、HCI阿考比芬、TSE 424及拉索昔芬对人类乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响
方法：
储备细胞培养的维持
人类乳腺癌MCF-7细胞从美国典型培养物保藏中心#HTB22的传代147获得并且在不含酚红的Dulbecco氏改良Eagle′s-Ham的F12培养基、上述悬浮液和5％的FBS常规培养。上面的MCF-7人乳腺癌细胞系和5％FBS是来自一个白人69岁的女病人的胸腔积液。MCF-7细胞在传代148-165之间使用并且每周传代培养。
细胞增殖研究
在对数生长期后期的细胞用0.1％胰酶(Sigma)收集并再悬浮在含有50ng牛胰岛素/mL和5％(V/V)FBS的适当培养基，以葡聚糖涂覆的活性炭处理两次以内源性的类固醇治疗。细胞在24孔Falcon塑料培养板(2cm2/孔)在所指示的密度铺板并使其附着在板的表面72小时。此后，培养基用指定浓度的新鲜培养基替换，其含有在存在或缺乏E2下从99％再蒸馏乙醇的1000×储备液稀释的化合物。控制细胞只有接收乙醇载体(0.1％的乙醇，v/v)。细胞在在指定的时间间隔培养，且每2天或3天更换培养基。细胞数量通过DNA含量测量来确定。
计算及统计分析
剂量-反应曲线及IC50是透过加权迭代非线性最小平方回归计算。所有结果是以平均±SEM表示。
表11
实验1
实验2
示例7
EM-652.HCl(阿考比芬)、他莫西芬、托瑞米芬、屈洛昔芬、艾多昔芬、GW-5638和雷洛昔芬对裸鼠中人类ZR-75-1乳腺癌生长的影响的比较
本示例的目的是比较EM-652.HCl和其他6种口服抗雌激素(SERM)在良好表征的性激素敏感的ZR-75-1乳腺癌移植瘤切除卵巢的裸鼠生长的激动和拮抗作用。
材料及方法
人类ZR-75-1乳腺癌细胞
从美国典型培养物保藏中心(Rockville，MD)取得ZR-75-1人类乳腺癌细胞并且在不含酚红的RPMI-1640培养基培养。细胞补充了2mM L-谷氨酰胺、1mM丙酮酸钠、100IU青霉素/mL，100μg链霉素/mL和10％(v/v)胎牛血清并且在37℃、95％/5％CO2的空气/潮湿气氛培养。细胞每周传代并用0.083％胰酶/0.3mM EDTA在85-90％汇合收获。
动物和肿瘤接种
纯合型雌性nu/nu Br无胸腺小鼠(28-42日龄)从Charles River，Inc.(Saint-Constant，Quebec，Canada)获得。小鼠(每笼5只)被安置在装有空气过滤器盖的乙烯基笼中，其保持在层流气流罩并且维持在病原体限制性条件下维持。光照期间为12小时光照和12小时黑暗(在07∶15开灯)。笼、寝具和食品(Agway Pro-Lab R-M-H Diet#4018)使用前高压灭菌。水以高压灭菌并使其自由摄取。在异氟烷诱导的麻醉下切除双侧卵巢。在卵巢切除时，雌二醇(E2)的植入物插入皮下刺激初始的肿瘤生长。E2以1厘米长包含0.5cm的1∶10(w/w)雌二醇和胆固醇的混合物的硅橡胶管(内径：0.062英寸；外径：0.095英寸))准备。卵巢切除一周后，2×106 ZR-75-1(传代93)细胞通过2.5厘米长的22号针于每个卵巢切除(OVX)小鼠的两个侧腹部皮下接种0.1mLRPMI-1640的培养基+30％基质胶。四周后，在所有动物中，E2植入物由相同尺寸(E1：chol，1∶25，w∶w)含有雌酮的植入物取代。随机化和治疗则于一周后开始。
治疗
在治疗开始的前一天，有ZR-75-1肿瘤、平均面积24.4±0.4mm2(5.7mm2至50.7mm2)的255只老鼠随机分配至17组(关于肿瘤尺寸)，每一组别包含15只老鼠(总共29或30肿瘤)。17组中包含2对照组(OVX及OVX+雌酮)、7组补充雌酮植入物并与抗雌激素治疗而另外8组则单独接受抗雌激素。然后，卵巢切除对照组(OVX)以及单独接受抗雌激素得组别的雌酮植入物自动物分离。此后每6周变化其他含有含雌酮植入物的9组。EM-652HCI、雷洛昔芬、屈洛昔芬、艾多昔芬及GW 5638在肿瘤学和分子内分泌学研究中心的药物化学分部合成。他莫西芬从Plantex(Netanya，Israel)购买而托瑞米芬从Orion(Espoo，Finland)购买。在雌酮的刺激下，抗雌激素每天以口服50μg(平均2mg/kg)的剂量悬浮于0.2mL的0.4％(w/v)甲基纤维素。在缺乏雌酮的刺激下，每一抗雌激素动物以口服方式每日以200μg(平均8mg/kg)治疗。二对照组的动物单独接受0.2mL的媒介物。每个月制备适当浓度的抗雌激素悬浮液，储存于4℃并且在不断搅拌下使用。粉末库存在4℃(艾多昔芬、雷洛昔芬、托瑞米芬、GW 5638、屈洛昔芬)或者在室温(他莫西芬、EM-652.HCI)被气密保存。
肿瘤测量和剖检
纪录二垂直的直径并且使用公式：L/2×W/2×π计算肿瘤面积。在治疗第一天量测的直径作为100％。
在治疗161天时，剩下的动物用异氟烷麻醉并放血处死。为了进一步表征雌性激素和抗雌激素的作用，立即从结缔组织和脂肪组织中取出并称重雌性激素-反应的组织，例如子宫和阴道。子宫是准备以Image Pro-Plus(Media Cybernetics，Maryland，USA)执行影像分析来评估子宫内膜厚度。简言之，子宫是固定在10％福尔马林并包埋于石蜡。分析老鼠子宫的苏木和曙红染色的切片。每一子宫分析4张影像(2/子宫角)。量测每一组别中所有动物的平均上皮细胞高度。
反应标准
若在实验过程中发生，肿瘤反应在研究结束或者动物死亡时评估。在这种情形下，对肿瘤反应分析而言，只有研究存活超过实验(84天)一半的老鼠的数据。简言之，完全消退即代表这些肿瘤在实验结束后无法侦测；部分消退则对应相对于其原始尺寸消退≥50％的肿瘤；稳定反应涉及消退≤50％或进展≤50％的肿瘤；且进展涉及相对于其原始尺寸进展≥50％的肿瘤。
统计分析
根据ANOVA重复测量从第1天至第161天总肿瘤表面积的变化进行分析。模型包含了治疗、时间及时间-治疗交互作用影响再加上说明随机化地层的样木。在161天，不同处理效果的重要性由此透过时间-治疗交互作用进行测试。残值分析说明原有规模的测量与ANOVA或任何尝试的转换的分析并不搭配。因此，级别被选来分析。对上皮厚度治疗的效果透过包含ANOVA还包括随机地层进行评估。使用最小二乘法的统计方法进行后验两两比较。
总体1型误差率控制在5％以宣示的差异的重要性。所有计算是使用Proc MIXED在SAS软件(SAS Institute，Carry，NC)上执行。
结果
对ZR-75-1肿瘤成长的拮抗作用
在23周的治疗过程中，单独使用雌酮(OVX+E1)会造成ZR-751-1肿瘤尺寸的增加(图19)。以每天50μg剂量施用纯抗雌激素EM而*HCl(阿考比芬(acolbifene))至雌酮刺激的老鼠则完全防止了肿瘤的成长。事实上，不只防止了肿瘤的成长，在治疗23周以后肿瘤尺寸较开始治疗的初始值减少26％(p＜0.04)。以EM-652*HCl治疗所得到的数值与单独卵巢切除(OVX)后所观测者在统计上并无差别，其肿瘤尺寸较初始肿瘤尺寸减少61％。在相同剂量(50μg)及治疗期间下，其他六个抗雌激素并未较初始肿瘤尺寸减少。这些组别的肿瘤较OVX对照组及EM-652*HCl治疗组(p＜0.01)明显的大。事实上，与预处理值相比，以屈洛昔芬(Droloxifene)、托瑞米芬(Toremifene)、GW 5638、雷洛昔芬(Raloxifene)、他莫西芬(Tamoxifen)及艾多昔芬(Idoxifene)治疗23周造成平均肿瘤尺寸分别较预处理值高478％、230％、227％、191％、87％及86％(图19)。
对ZR-75-1肿瘤成长的激动作用
在每天以200μg剂量的他莫西芬治疗161天后，在缺乏雌酮补充下，平均肿瘤尺寸增加到超过基线196％(p＜0.01vs OVX)(图20)。另一方面，以艾多昔芬治疗的老鼠的平均肿瘤尺寸增加(125％)(p＜0.01)而以托瑞米芬治疗的老鼠的平均肿瘤尺寸增加86％(p＜0.01)(图20)。将200μgEM-652*HCl加至200μg他莫西芬完全抑制了单独使用他莫西芬所观察到的扩散(图15)。另一方面，在实验的最后，单独以EM-652.HCI(p＝0.44)、雷洛昔芬(p＝0.11)、屈洛昔芬(p＝0.36)或GW 5638(p＝0.17)治疗相较于OVX对照组并未明显改变ZR-75-1肿瘤的尺寸(图20)。
抗雌激素对于子宫内膜上皮细胞厚度的影响
子宫内膜上皮细胞的高度是以子宫内膜中每一化合物激动作用和拮抗作用最直接的参数量测。
在雌酮刺激下每日50μg抗雌激素对于子宫上皮细胞厚度的影响
在50μg的口服剂量下，EM-652*HCI(阿考比芬)抑制雌酮对上皮高度的刺激作用达70％。所测试的其他六个抗雌激素的有效性则明显较低(p＜0.01)。事实上，屈洛昔芬、GW5638、雷洛昔芬、他莫西芬、托瑞米芬及艾多昔芬抑制雌酮的刺激达分别达17％、24％、26％、32％、41％及50％(表12)。
在缺乏雌酮刺激下每日200μg抗雌激素对于子宫上皮细胞厚度的影响
在缺乏雌酮刺激下，EM-652*HCI及屈洛昔芬是上皮细胞高度的化合物(分别为114％及101％的OVX对照组值)。他莫西芬(155％)、托瑞米芬(135％)及艾多昔芬(176％)对子宫上皮高度有显着的刺激(p＜0.01vs OVX对照组)(表12)。每一抗雌激素的激动作用和拮抗作用依据子宫上皮细胞厚度所观测的模式以子宫和阴道重量测量(未显示数据)。
表12
示例8
14C-EM-800(20mg/kg)至雌鼠的单口服剂量后于脑中的放射性
示例8是老鼠在14C-EM-800(20mg/kg)的单口服剂量后的放射性，本发明的SERM。基于比较目的，其包含了这些动物的血液、血浆、肝及子宫的值(表14)。组织分布及14C-EM-800(20mg/2mL/kg)至雄性及雌性Long-Evans大鼠的单口服剂量后的排泄放射性。这些数字指出，在Long-Evans雌鼠中，源自药物的总放射性非常低(ng当量/g组织)并且在剂量12小时候未被侦测。在2小时的时候，脑中的放射性较肝低412、较子宫低21倍、较血液低8.4倍并且较血浆低13倍。因为未知比例的总脑放射性被血液放射性污染，表13中所显示的脑放射性值是高估的14C(EM-800)水平-脑本身相关的放射性。这些数据建议抗雌激素在脑中的水平过低，而无法抵消外源性雌性激素的影响。重要的是，脑组织中所侦测的部分放射性可归因于残留血液(表14)。另外，本研究所使用的14C-EM-800的放射性化学纯度最小为96.25％。
表13
表14
示例9
动物
从Charles-River，Inc.(St-Constant，Quebec，Canada)取得的约50日并且重18-20克雌性BALB/c老鼠(BALB/cAnNCrlBR)以4-5/笼收容在控制的环境下，其温度(23±1℃)以及光照(每日12小时光照，7：15开灯)。老鼠以自由采食啮齿动物饲料和自来水饲养。动物在全身麻醉(Avertin)下以双边侧面切口切除卵巢，并且随机分配至9-10动物的组。
治疗
每日一次以不同剂量，亦即0.75、2.5、7.5、25或75hmol化合物/灌胃或应用/动物，将CS-115-1(消旋EM-652)及EM-762(消旋EM-800)透过口服灌胃给药或局部应用于背部皮肤。在卵巢切除术后2天，开始以抗雌激素(0.2mL/鼠/灌胃或应用)治疗，而以雌酮治疗(0.06μg，皮下注射(s.c.)，每日两次)则于三天后开始(卵巢切除术后5天)。此后，雌酮及抗雌激素联合施用6天。对口服施用而言，化合物是溶解于50∶50(vol/vol)聚乙二醇600(PEG-600)及乙醇，并且于1％(w/v)明胶-0.9％NaCl溶液施用(聚乙二醇600：乙醇的最终浓度为8％)，而对于经皮施用而言，化合物是溶解于50％乙醇-50％聚乙二醇。OVX对照组的老鼠在9天内接受口服的媒介物。在卵巢切除术后的第11天上午以颈椎脱位法(cervicaldislocation)处死动物。迅速解剖并称重子宫。
如图16所示，在口服或经皮途径施用阿考比芬衍生物后，可以观察到类似的效果。
药学组合物示例
如下所述，其是非限制的示例，是数个利用较佳的活性SERM阿考比芬(EM-652HCl；EM-1538)及较佳的活性性类固醇前体脱氢表雄酮(DHEA，普拉睾酮(Prasterone))的药学组合物。本发明其他化合物或其组合可以用来取代(或添加)阿考比芬或脱氢表雄酮。活性成分的浓度可以在本处所述的宽广范围内变化。其他本领域所熟知的成分的数量及种类可包含于此。
示例A
口服的药学组合物(胶囊)
成分 重量％(基于总组成的重量)
阿考比芬 5.0
DHEA 10.0
含水乳糖 70.0
淀粉 4.8
微晶纤维素 9.8
硬脂酸镁 0.4
示例B
口服的药学组合物(片剂)
成分 重量％(基于总组成的重量)
阿考比芬 5.0
DHEA 15.0
明胶 5.0
乳糖 58.5
淀粉 16.5
示例C
局部给药(乳膏剂)
成分 重量％(基于总组成的重量)
DHEA 1.0
阿考比芬 0.2
乳化蜡，NF 18.0
轻质矿物油，NF 12.0
苯甲醇 1.0
乙醇95％USP 33.8
纯水，USP 34.0
示例D
直肠给药
直肠栓剂或胚珠
DHEA栓剂是以Witepsol H-15 base(Medisca，Montreal，Canada)制备。可以使用任何其他亲脂性基底，例如硬脂肪、Fattibase、Wecobee、可可脂、可可油或其他Witepsol基底的组合。较佳的SERM是EM-800及阿考比芬。
试剂盒示例
如下所述，其是非限制的示例，是数个利用较佳的活性SERM阿考比芬的试剂盒，较佳的抗雌激素是福美斯坦(Faslodex)及较佳的性类固醇前体是DHEA。活性成分的浓度可以在本处所述的宽广范围内变化。其他本领域所熟知的成分的数量及种类可包含于此。
示例D
试剂盒
SERM及性类固醇前体是口服给药
口服给药的SERM组合物(胶囊)
成分 重量％(基于总组成的重量)
阿考比芬 5.0
含水乳糖 80.0
淀粉 4.8
微晶纤维素 9.8
硬脂酸镁 0.4
+
口服给药的DHEA组合物(明胶胶囊)
在上述配方中，其他SERM可用来取代阿考比芬，并且其他性类固醇前体可用来取代DHEA。多于一种SERM或多于一种前体可被包括在这种情况下，其总重量百分比较佳的是上述示例中的单一的前体或单一的SERM的重量百分比。
示例E
试剂盒
SERM是口服给药并且性类固醇前体是直肠给药
口服给药的SERM组合物(胶囊)
成分 重量％(基于总组成的重量)
阿考比芬 5.0
含水乳糖 80.0
淀粉 4.8
微晶纤维素 9.8
硬脂酸镁 0.4
+
直肠栓剂
成分 重量％(基于总组成的重量)
DHEA 0.25至2.0
Witepsol H-15 base 98至99.75
DHEA栓剂是以Witepsol H-15 base(Medisca，Montreal，Canada)制备。可以使用任何其他亲脂性基底，例如硬脂肪、Fattibase、Wecobee、可可脂、可可油或其他Witepsol基底的组合。
示例F
试剂盒
SERM及性类固醇前体是直肠给药
直肠栓剂
成分 重量％(基于总组成的重量)
DHEA 0.25至2.0
Witepsol H-15 base 98至99.75
+
直肠栓剂
成分 重量％(基于总组成的重量)
阿考比芬 0.3至3.0
硬脂肪 97.0至99.7
阿考比芬栓剂是以硬脂肪(Witepsol)制备。可以使用任何其他基底，例如Fattibase、Wecobee、可可脂、可可油或其他硬脂肪的组合。
示例G
SERM是口服给药并且性类固醇前体是经皮给药
口服给药的SERM组合物(胶囊)
+
透皮给药的性类固醇前体组合物(凝胶)
或
透皮给药的性类固醇前体组合物(乳膏剂)
示例H
试剂盒
抗雌激素是肌肉注射并且性类固醇前体是口服给药
市售的类固醇抗雌激素福美斯坦(Faslodex)
+
口服给药的DHEA组合物(明胶胶囊)
在上述配方中，其他SERM(他莫西芬(tamoxifen)、奥培米芬(ospemifene)、雷洛昔芬(raloxifene)、阿佐昔芬(arzoxifene)、拉索昔芬(lasofoxifene)、TSE-424、ERA-923、EM-800、SERM 3339、GW-5638)可用来取代阿考比芬，并且其他性类固醇前体可用来取代DHEA。多于一种SERM或多于一种前体可被包括在这种情况下，其总重量百分比较佳的是上述示例中的单一的前体或单一的SERM的重量百分比。
本发明是以较佳实施例及示例描述，但并不限于此。本领域的技术人员很容易地认识到本发明的更广泛的适用和范围，其仅限于本发明的权利要求。
建议
如Endocrine Society的指导(Bhasin，Cunningham et al.2006)所建议者，我们建议在治疗前，有可触及前列腺结节(palpable prostatic nodule)或硬结(nduration)或具有高于3ng/mL的血清PSA的男性进行进一步的泌尿系统评价。
相似的，治疗不建议用于患有红细胞增多症(erythrocytosis)的男性(红细胞压积(hematocrit)＞50％)、未经治疗的阻塞性睡眠呼吸暂停、IPSS分数＞19的重度未经治疗的良性前列腺增生症或不受控制的心脏衰竭。
参考文献
Akaza，H.(2006).＂Trends in primary androgen depletion therapy for patientswith localized and locally advanced prostate cancer：Japanese perspective.＂Cancer Sci 97(4)：243-247.
Alexandersen，P.，J.Haarbo，et al.(1996).＂The relationship of naturalandrogens to coronary heart disease in males：a review.＂Atherosc lerosis 125(1)：1-13.
Almeida，O.P.，B.B.Yeap，et al.(2008).＂Low free testosterone concentrationas a potentially treatable cause of depressive symptoms in older men.＂Arch Gen Psychiatry 65(3)：283-289.
Amano，T.，T.Imao，et al.(2010).＂Testosterone replacement therapy bytestosterone ointment relieves lower urinary tract symptoms in late onsethypogonadism patients.Aging Male 13(4)：242-246.
American Society of Andrology(2006).＂Testosterone replacement therapy formale aging：ASA position statement.＂J Androl 27(2)：133-134.
Anker，S.D.，T.P.Chua，et al.(1997).＂Hoimonal changes and catabolic/ahabolicimbalance in chronic heart failure and their importance for cardiaccachexia.＂Circulation 96(2)：526-534.
Anker，S.D.，A.L.Clark，et al.(1997).＂Tumor necrosis factor and steroidmetabolism in chronic heart failure：possible relation to muscle wasting.＂
I Am Coll Cardiol 30(4)：997-1001.
Araujo，A.B.and G.A.Wittert(2011).＂Endocrinology of the aging male.＂Best Pract Res Clin Endocrinol Metab 25(2)：303-319.
Arlt，W_，F.Callies，et al.(1999).＂Dehydroepiandrosterone replacement inwomen with adrenal insufficiency.＂N.Engl.J.Med，341(14)：1013-1020.
Arlt，W.，H.G_Justl，et al.(1998).＂Oral dehydroepiandrosterone for adrenalandrogen replacement：pharmacokinetics and peripheral conversion to androgensand estrogens in young healthy females after dexamethasone suppression.＂T.Clin.Endocrinol.Metab.83(6)：1928-1934.
Azad，N.，S.Pitale，et al.(2003).＂Testosterone treatment enhances regionalbrain perfusion in hypogonadal men.＂J Clin Endocrinol Metab 88(7)：
Bachmann，G.，J.Bancroft，et al.(2002).＂Female androgen insufficiency：thePrinceton consensus statement on definition，classification，and assessment.＂Fertil Steril 77(4)：660-665.
Baillargeon，J.，R.J.Urban，et al.(2013).＂Trends in androgen prescribing inthe United States，2001 to 2011.n TAMA Intern Med 173(15)：1465-1466.
Barnhart，K.T.，E.Freeman，et al.(1999).＂The effect ofdehydroepiandrosterone supplementation to symptomatic Perimenopausal women onserum endocrine profiles，lipid parameters，and health-related quality oflife.＂J Clin Endocrinol Metab 84(11)：3896-3902，
Barrett-Connor，E.and S.L.Edelstein(1994).＂A prospective study ofdehydroepiandrosterone sulfate and cognitive function in an older population：the Rancho Bernardo Study.＂J Am Geriatr Soc 42(4)：420-423.
Barrett-Connor，E.，K.T.Khaw，et al.(1986).＂A prospective study ofdehydroepiandrosterone sulfate，mortality and cardiovascular disease.＂
N.Engl.J.Med.315(24)：1519-1524.
Basaria，S.，A.D.Coviello，et al.(2010).＂Adverse events associated withtestosterone administration.＂N Engl J Med 363(2)：109-122.
Basaria，S.，M.N.Davda，et al.(2013).＂Risk factors associated withcardiovascular events during testosterone administration in older men withmobility limitation.＂J Gerontol A Biol Sci Med Sci 68(2)：153-160.Bassil，N.，S.Alkaade，et al.(2009).＂The benefits and risks of testosterone replacementtherapy：a review.”Ther Clin Risk Manag 5(3)：427-448.
Basson，R.(2004).＂A New Model of Female Sexual Desire.＂Endocrine News 29：22.
Beck，S.G.and R.J.Handa(2004).＂Dehydroepiandrosterone(DHEA)：amisunderstood adrenal hormone and spine-tingling neurosteroid？＂Endocrinology145(3)：1039-1041.
Beer，N.A.，D.J.Jakubowicz，et al.(1996).＂Dehydroepiandrosterone reducesplasma plasminogen activator inhibitor type 1 and tissue plasminogenactivator antigen in men.＂Am J Med Sci 311(5)：205-210.Behre，H.M.，J.Bohmeyer，et al.(1994).＂Prostate volume in testosterone-treated and untreatedhypogonadal men in comparison to age-matched normal controls.＂Clin Endocrinol (Oxf)40(3)：341-349.Belanger，A.，M.Brochu，et al.(1986).＂Levels of plasmasteroid glucuronides in intact and castrated men with prostatic cancer.＂L Clin.Endocrinol.Metab.62：812-815.
Belanger，B.，A.Belanger，et al.(1989).＂Comparison of residual C-19 steroidsin plasma and prostatic tissue of human，rat and guinea pig after castration：unique importance of extratesticular androgens in men.＂I.Steroid Biochem.32：695-698.
Benz，D.J.，M.R.Haussler，et al.(1991).＂High-affinity androgen binding andandrogenic regulation of al(I)-procollagen and transforming growth factor-bsteady state messenger ribonucleic acid levels in human osteoblast-likeosteosarcoma cells.＂Endocrinology 128：2723-2730.
Bhasin，S.，G.R.Cunningham，et al.(2006).＂Testosterone therapy in adult menwith androgen deficiency syndromes：an endocrine society clinical practiceguideline.＂J Clin Endocrinol Metab 91(6)：1995-2010.
Bhasin，S.，G.R.Cunningham，et al.(2010).＂Testosterone therapy in men withandrogen deficiency syndromes：an Endocrine Society clinical practiceguideline.＂J Clin Endocrinol Metab 95(6)：2536-2559.
Bhasin，S.，T.W.Storer，et al_(1996).＂The effects of supraphysiologic dosesof testosterone on muscle size and strength in normal men.＂N Engl J Med 335(1)：1-7.
Bhasin，S.，T.W.Storer，et al.(1997).＂Testosterone replacement increasesfat-free mass and muscle size in hypogonadal men.＂J Clin Endocrinol Metab 82(2)：407-413.
Bhasin，S.，L.Woodhouse，et al.(2001).＂Testosterone dose-responserelationships in healthy young men.＂Am J Physiol Endocrinol Metab 281(6)：E1172-1181.
Bhasin，S.，L.Woodhouse，et al.(2005).＂Older men are as responsive as youngmen to the anabolic effects of graded doses of testosterone on the skeletalmuscle.＂J Clin Endocrinol Metab 90(2)：678-688.
Bolona，E.Rv M.V.Uraga，et al.(2007).＂Testosterone use in men with sexualdysfunction：a systematic review and meta-analysis of randomized placebo-controlled trials.＂Mayo Clin Proc 82(1)：20-28.Bonnefoy，M.，M.C.Patricot，et al.(2002).＂[Relation between physical activity，muscle function and IGF-1，testosterone and DHEAS concentrations in the elderly].＂Rev Med Interne 23(10)：819-827.
Bross，R.，R.Casaburi，et al.(1998).＂Androgen effects on body compositionand muscle function：implications for the use of androgens as anabolic agentsin sarcopenic states.＂Baillieres Clin Endocrinol Metab 12(3)：365-378.
Burger，H.G.，J_Hailes，et al.(1984).＂The management of persistentmenopausal symptoms with oestradiol-testosterone implants：clinical，lipid andhormonal results.＂Maturitas 6：351-358.
Callies，F_，M.Fassnacht，etal.(2001).＂Dehydroepiandrosterone replacement inwomen with adrenal insufficiency：effects on body composition，serum leptin，bone turnover，and exercise capacity.＂J Clin Endocrinol Metab 86(5)：1968-1972.
Calof，O.M.，A.B.Singh，et al.(2005).＂Adverse events associated withtestosterone replacement in middle-aged and older men：a meta-analysis ofrandomized，placebo-controlled trials.＂J Gerontol A Biol Sci Med Sci 60(11)：1451-1457.
Cappola，A.R.(2013).＂Testosterone therapy andrisk of cardiovasculardisease inmen.＂Tama 310(17)：1805-1806.
Casson，P.R_，R.N.Andersen，et al.(1993).＂Oral dehydroepiandrosterone inphysiologic doses modulates immune function in postmenopausal women.＂Am.J.Obstet.Gynecol.169：1536-1539.
Casson，P.R.，N.Santoro，et al.(1998).＂Postmenopausal dehydroepiandrosteroneadministration increases free insulin-like growth factor-l and decreaseshigh-density lipoprotein：a six-month trial.＂Fertil Steril 70(1)：107-110.
Caubet，J.F.，T.D.Tosteson，et al.(1997).＂Maximum androgen blockade inadvanced prostate cancer：a meta-analysis of published randomized controlledtrials using nonsteroidal antiandrogens.＂Urology 49：71-78.
Cefalu，W.T.，Z.Q.Wang，et al.(1995).＂Contribution of visceral fat mass tothe insulin resistance of aging.＂Metabolism 44(7)：954-959.
Chang，D.M.，J.L.Lan，et al.(2002).＂Dehydroepiandrosterone treatment ofwomen with mild-to-moderate systemic lupus erythematosus：a multicenterrandomized，double-blind，placebo-controlled trial.＂Arthritis Rheum 46(11)：2924-2927.
Chang，d.T.，S.C.Morton，et al.(2004).＂Interventions for the prevention offalls in older adults：systematic review and meta-analysis of randomisedclinical trials.＂Bmj 328(7441)：680.Chen，S.，J.Nilsen，et al.(2006).＂Dose andtemporal pattern of estrogen exposure determines neuroprotective outcome inhippocampal neurons：therapeutic implications.＂Endocrinology 147(11)：5303-5313.
Christopher-Hennings，J.，I.D.Kurzman，et al.(1995).＂The effect ofhigh fatdiet and dehydroepiandrosterone(DHEA)administration in the rhesus monkey.＂In Vivo 9(5)：415-420.
Cleary，M.P.and J.Zisk(1986).＂Antiobesity effect of two different levelsof dehydroepiandrosterone in lean and obese middle-aged female Zucker rats.＂Int.J.Obes.10：193-204.
Coleman，D.L.，E.H.Leiter，et al.(1982).＂Therapeutic effects ofdehydroepiandrosterone(DHEA)in diabetic mice.＂Diabetes 31：830-833.
Comhaire，F.H.(2000).＂Andropause：hormone replacement therapy in the ageingmale.＂Eur Urol 38(6)：655-662.
Corona，G.，E.A.Jannini，et al.(2006).＂Inventories for male and femalesexual dysfunctions.＂Int J Impot Res 18(3)：236-250.
Corona，G.，E.Mannucci，etal.(2006).＂ANDROTEST：a structured interview forthe screening of hypogonadism in patients with sexual dysfunction.＂J Sex Med3(4)：706-715.
Corona，G.，G.Rastrelli，et al.(2013).＂Dehydroepiandrosteronesupplementation in elderly men：a meta-analysis study of placebo-controlledtrials.＂J Clin Endocrinol Metab 98(9)：3615-3626.Corona，G.，G.Rastrelli，et al.(2012).＂Emerging medication for the treatment of male hypogonadism.＂Expert Opin Emerg Drugs 17(2)：239-259.
Couillard，S.，C.Labrie，et al.(1998).＂Effect of dehydroepiandrosterone andthe antiestrogen EM-800 on the growth of human ZR-75-1 breast cancerxenografts.＂J.Natl.Cancer Inst.90：772-778.
Crawford，B.A.，P.Y.Liu，et al.(2003).＂Randomized placebo-controlled trialof androgen effects on muscle and bone in men requiring long-term systemicglucocorticoid treatment.＂J Clin Endocrinol Metab 88(7)：
Cummings，S.R.and M.C.Nevitt(1989).＂A hypothesis：the causes of hipfractures.＂J Gerontol 44(4)：M107-111.
Cusan，L.，A.Dupont，et al.(1994).＂Comparison of flutamide andspironolactone in the treatment of hirsutism：a randomized controlled trial.＂Fertil.Steril.61：281-287.
Davis，S.R.，P.McCloud，et al.(1995).＂Testosterone enhances estradiol＇seffects on postmenopausal density and sexuality.＂Maturitas 21：227-236.
Dennerstein，L.，E.C.Dudley，et al.(1997).I，Sexuality，hormones and themenopausal transition.＂Maturitas 26(2)：83-93.
Dhatariya，K.，M.L.Bigelow，et al.(2005).＂Effect of dehydroepiandrosteronereplacement on insulin sensitivity and lipids in hypoadrenal women.＂Diabetes54(3)：765-769.
Diamond，P.，L.Cusan，et al.(1996).″Metabolic effects of 12-monthpercutaneous DHEA replacement therapy in postmenopausal women.″T.Endocrinol.150：S43-S50.
Ding，E.L.，Y.Song，et al.(2006).″Sex differences of endogenous sex hormonesand risk of type 2diabetes：a systematic review and meta-analysis.″jama 295(11)：1288-1299.
Ebert，T.，F.Jockenhovel，et al.(2005).″The current status of therapy forsymptomatic late-onset hypogonadism with transdermal testosterone gel.″EurUrd47(2)：137-146.
Eich，D.M.，J.E.Nestler，et al.(1993).″Inhibition of accelerated coronaryatherosclerosis with dehydroepiandrosterone in the heterotopic rabbit modelof cardiac transplantation.″Circulation 87(1)：261-269.
Elashoff，J.D.，A.D.Jacknow，et al.(1991).″Effects of anabolic-androgenicsteroids on muscular strength.″Ann Intern Med 115(5)：387-393.
English，K.M.，R.P.Steeds，et al.(2000).″Low-dose transdermal testosteronetherapy improves angina threshold in men with chronic stableangina：Arandomized，double-blind，placebo-controlled study.″Circulation 102(16)：1906-1911.
Evans，W.(1997).″Functional and metabolic consequences of sarcopenia.″J Nutr 127(5Suppl)：998S-1003S.
Farhat，R.，F.Al-zidjali，et al.(2010).″Outcome of gonadotropin therapy formale infertility due to hypogonadotrophic hypogonadism.″Pituitary 13(2)：105-110.
Fernandez-Balsells，M.M.，M.H.Murad，et al.(2010).″Clinical review 1：Adverseeffects of testosterone therapy in adult men：a systematic review and meta-analysis.″]Clin Endocrinol Metab 95(6)：2560-2575.
Ferrannini，E.，A.Natali，et al.(1997).″Insulin resistance，hyperinsulinemia，and blood pressure：role of age and obesity.European Group for the Study ofInsulin Resistance(EGlR).″Hypertension 30(5)：1144-1149.
Flood，J.F.and E.Roberts(1988).″Dehydroepiandrosterone sulfate improvesmemory in aging mice.″Brain Res 448(1)：178-181.
Foy，M.R.(2001).″17beta-estradiol：effect on CA1 hippocampal synapticplasticity.″Neurobiol Learn Mem 76(3)：239-252.
Franchi F，Luisi M，et al.(1978).″Long-term study of oral testosteroneundecanoate in hypogonadal males.″Int}Androl.1：270-278.
Frontera，W.R.，V.A.Hughes，et al.(2000).″Aging of skeletal muscle：a 12-yrlongitudinal study.″J Appl Physiol 88(4)：1321-1326.
Gallagher，A.，T.J.Chambers，et al.(1993).″The estrogen antagonist lCl182780 reduces cancellous bone volume in female rats.″Endocrinology 133：2787-2791
Gauthier，S.，B.Caron，et al.(1997).″(S)-(+)-4-[7-(2，2-dimethyl-l-oxopropoxy)-4-methyl-2-[4-[2-(l-piperidinyl)-ethoxy]phenyl]-2H-l-benzopyran-3-yl]-phenyl 2，2-dimethylpropanoate(EM-800)：a highly potent，specific，andorally active nonsteroidal antiestrogen.″T.Med.Chem.40：2117-2122.
Gebre-Medhin，G.，E.S.Husebye，et al.(2000).″Oral dehydroepiandrosterone(DHEA)replacement therapy in women with Addison′s disease.″Clin Endocrinol (Oxf)52(6)：775-780.
Genazzani，A.R.，S.Inglese，et al.(2004).″Long-term low-dosedehydroepiandrosterone replacement therapy in aging males with partialandrogen deficiency.″Aging Male 7(2)：133-143.
Gibbs，R.B.and P.Aggarwal(1998).″Estrogen and basal forebrain cholinergicneurons：implications for brain aging and Alzheimer′s disease-relatedcognitive decline.″Horm Behav 34(2)：98-111.
Goldstat，R.，E.Briganti，et al.(2003).″Transdermal testosterone therapyimproves well-being，mood，and sexual function in premenopausal women.″Menopause 10(5)：390-398.
Gooren，L.J.(1987).″Androgen levels and sex functions in testosterone-treated hypogonadal men.″Arch Sex Behav 16(6)：463-473.
Gooren，L.J.(1994).″A ten-year safety study of the oral androgentestosterone undecanoate.″J Androl 15(3)：212-215.
Gordon，C.M.，E.Grace，et al.(2002).″Effects of oral dehydroepiandrosteroneon bone density in young women with anorexia nervosa：a randomized trial.″J Clin Endocrinol Metab 87(11)：4935-4941.
Gordon，G.B.，D.E.Bush，et al.(1988).″Reduction of atherosclerosis byadministration of dehydroepiandrosterone.A study in the hypercholesterolemicNew Zealand white rabbit with aortic intimal injury.″I.Clin.Invest.82：712-720.
Gordon，G.Bv L_M.Shantz，et al.(1987).″Modulation of growth，differentiationand carcinogenesis by dehydroepiandrosterone.”Adv.Enzyme Regul.26：355-382.
Gray，P.B.，A.B.Singh，et al.(2005).″Dose-dependent effects of testosteroneon sexual function，mood，and visuospatial cognition in older men.″J Clin Endocrinol Metab 90(7)：3838-3846.
Grimley Evans，J.，R.Maiouf，et al.(2006).″Dehydroepiandrosterone(DHEA)supplementation for cognitive function in healthy elderly people.″Cochrane Database Syst Rev(4)：CD006221.
Guay，A.T.，J.Jacobson，et al.(2003).″Clomiphene increases free testosteronelevels in men with both secondary hypogonadism and erectile dysfunction：whodoes and does not benefit？″Int J lmpot Res 15(3)：156-165.
Gurnell，E.M.，P.J.Hunt，et al.(2008).″Long-term DHEA replacement in primaryadrenal insufficiency：a randomized，controlled trial.″J Clin Endocrinol Metab93(2)：400-409.
Hackbert，L.and J.R.Heiman(2002).″Acute dehydroepiandrosterone (DHEA)effects on sexual arousal in postmenopausal women.″J Womens Health Gend Based Med 11(2)：155-162.
Haddad，R.M.，C.C Kennedy，et al.(2007).″Testosterone and cardiovascularrisk in men：a systematic review and meta-analysis of randomized placebo-controlled trials.″Mayo Clin Proc 82(1)：29-39.
Haffner，S.M_，R.S.Kushwaha，et al_(1983).″Studies on the metabolicmechanism of reduced high density lipoproteins during anabolic steroidtherapy.″Metabolism 32(4)：413-420.
Hajszan，T.，N.J.MacLusky，et al.(2007).″Effects of androgens and estradiolon spine synapse formation in the prefrontal cortex of normal and testicularfeminization mutant male rats：Endocrinology 148(5)：1963-1967.
Hak，A.E.，J.C.Witteman，et al.(2002).″Low levels of endogenous androgensincrease the risk of atherosclerosis in elderly men：the Rotterdam study.″J Clin Endocrinol Metab 87(8)：3632-3639.
Hall，S.A.，G.R.Esche，et al.(2008).″Correlates of low testosterone andsymptomatic androgen deficiency in a population-based sample.″J Clin Endocrinol Metab 93(10)：3870-3877.
Han，D.H.，P.A.Hansen，et al.(1998).″DHEA treatment reduces fat accumulationand protects against insulin resistance in male rats.″J Gerontol A Biol Sci Med Sci 53(1)：B19-24.
Handelsman，D.J.(2006).″Clinical review：The rationale for banning humanchorionic gonadotropin and estrogen blockers in sport.″J Clin Endocrinol Metab 91(5)：1646-1653.
Hansen，P.A_，D.H.Han，et al.(1997).″DHEA protects against visceral obesityand muscle insulin resistance in rats fed a high-fat diet.″Am J Physiol 273(5Pt 2)：R1704-1708.
Harman，S.M.，E.J.Metter，et al.(2001).″Longitudinal effects of aging onserum total and free testosterone levels in healthy men.BaltimoreLongitudinal Study of Aging.″J Clin Endocrinol Metab 86(2)：724-731.
Hayashi，Tv T.Esaki，et al.(2000).″Dehydroepiandrosterone retardsatherosclerosis formation through its conversion to estrogen：the possiblerole of nitric oxide.″Arterioscler Thromb Vase Biol 20(3)：782-792.
Hazzard，W.R.，S.M.Haffner，et al.(1984).″Preliminary report：kinetic studieson the modulation of high-density lipoprotein，apolipoprotein，and subfractionmetabolism by sex steroids in a postmenopausal woman.″Metabolism 33(9)：779-784.
Henderson，E.，J.Y.Yang，et al.(1992).″Dehydroepiandrosterone(DHEA)andsysnthetic DHEA analogs are modest inhibitors of HlV-1lllB replication.″Aids Res.Hum.Retroviruses 8：625-631.
Hennernan，P.M.and S.Wallach(1957).″The role of androgens and estrogensand their metabolic effects.A review of the prolonged use of estrogens andandrogens in postmenopausal and senile osteoporosis.″AMA：Arch.Int.Med.100：715-723.
Herrington，D.M.，G.B.Gordon，et al.(1990).″Plasma dehydroepiandrosteroneand dehydroepiandrosterone sulfate in patients undergoing diagnostic coronaryangiography.″L Am.Coll.Cardiol.16：862-870.
Herrington，D.Mv N.Nanjee，et al.(1996).″Dehydroepiandrosterone and cardiacallograft vasculopathy.″J Heart Lung Transplant 15(1Pt 1)：88-93.
Hogervorst，E.，S.Bandelow，et al.(2004).″Low free testosterone is anindependent risk factor for Alzheimer′s disease.″Exp Gerontol 39(11-12)：1633-1639.
Hogervorst，E.，J.Williams，et al.(2000).″The nature of the effect of femalegonadal hormone replacement therapy on cognitive function in post-menopausalwomen：a meta-analysis.’1Neuroscience 101(3)：485-512.
Holland，J.，S.Bandelow，et al.(2011).″Testosterone levels and cognition inelderly men：a review.″Maturitas 69(4)：322-337.
Holmang，S.，P.Marin，et al.(1993).″Effect of long-term oral testosteroneundecanoate treatment on prostate volume and serum prostate-specific antigenconcentration in eugonadal middle-aged men.″Prostate 23(2)：99-106.
Huang，J.，H.Guan，et al.(2004).″Estrogen regulates neprilysin activity inrat brain.″Neurosci Lett 367(1)：85-87.
Huggins，C.and C.V.Hodges(1941).″Studies of prostatic cancer.l.Effect ofcastration，estrogen and androgen injections on serum phosphatases inmetastatic carcinoma of the prostate.″Cancer Res.1：293-307.
Hughes，V.A.，W.R.Frontera，et al.(2002).″Longitudinal changes in bodycomposition in older men and women：role of body weight change and physicalactivity.″Am J Clin Nutr 76(2)：473-481.
Hunt，P.J.，E.M.Gurnell，et al.(2000).″lmprovement in mood and fatigue afterdehydroepiandrosterone replacement in Addison′s disease in a randomized，double blind trial.″J Clin Endocrinol Metab 85(12)：4650-4656.
Huppert，F.A.and J.K.Van Niekerk(2001).″Dehydroepiandrosterone(DHEA)supplementation for cognitive function.″Cochrane Database Syst Rev 2(2)：CD000304.
lannuzzi-Sucich，M.，K.M.Prestwood，et al.(2002).″Prevalence of sarcopeniaand predictors of skeletal muscle mass in healthy，older men and women.″J Gerontol A Biol Sci Med Sci 57(12)：M772-777.
lsidori，A.M.，M.Caprio，et al.(1999).″Leptin and androgens in male obesity：evidence for leptin contribution to reduced androgen levels.″J Clin Endocrinol Metab 84(10)：3673-3680.
lsidori，A.M.，E.Giannetta，et al.(2005).’Effects of testosterone on bodycomposition，bone metabolism and serum lipid profile in middle-aged men：ameta-analysis.″Clin Endocrinol(Oxf)63(3)：280-293.
Johannsson，G.，P.Burman，et al.(2002).″Low dose dehydroepiandrosteroneaffects behavior in hypopituitary androgen-deficient women：a placebo-controlled trial.″J Clin Endocrinol Metab 87(5)：2046-2052.
Jones，T—H.，S.Arver，et al.(2011).″Testosterone replacement in hypogonadalmen with type 2diabetes and/or metabolic syndrome(the TlMES2study).″Diabetes Care 34(4)：828-837.
Jones，T.H.and F.Saad(2009).″The effects of testosterone on risk factorsfor，and the mediators of，the atherosclerotic process.″Atherosclerosis 207(2)：318-327.
Jordan，V.C.，E.Phelps，et al.(1987).″Effects of antiestrogens on bone incastrated and intact female rats.″Breast Cancer Res. Treat.10：31-35.
Kallman，D.A_，C.C.Plato，et al.(1990).″The role of muscle loss in the age-related decline of grip strength：cross-sectional and longitudinalperspectives.″J Gerontol 45(3)：M82-88.
Kantor，M.A.，A.Bianchini，et al.(1985).″Androgens reduce HDL2-cholesteroland increase hepatic trielyceride lipase activity.″Med Sci Sports Exerc 17(4)：462-465.
Kapoor，D.，E.Goodwin，et al.(2006).″Testosterone replacement therapyimproves insulin resistance，glycaemic control，visceral adiposity andhypercholesterolaemia in hypogonadal men with type 2diabetes.″Eur J Endocrinol 154(6)：899-906.
Kapoor，D.r C.J.Malkin，et al.(2005).″Androgens，insulin resistance andvascular disease in men.″Clin Endocrinol(Oxf)63(3)：239-250.
Kapur，S.P.and A.H.Reddi(1989).″Influence of testosterone anddihydrotestosterone on bone-matrix induced endochondral bone formation.″Calcif.Tissue Int.44：108-113.
Katz，D.J.，O.Nabulsi，et al.(2012).″Outcomes of clomiphene citratetreatment in young hypogonadal men.″BJU Int 110(4)：573-578.
Kawano，H.，H.Yasue，et al.(2003).″Dehydroepiandrosterone supplementationimproves endothelial function and insulin sensitivity in men.”J Clin Endocrinol Metab 88(7)：3190-3195.
Kelleher，S.，A.J.Conway，et al.(2004).″Blood testosterone threshold forandrogen deficiency symptoms.″J Clin Endocrinol Metab 89(8)：3813-3817.
Kenny，A.M.，K.M.Prestwood，et al.(2001).″Effects of transdermaltestosterone on bone and muscle in older men with low bioavailabletestosterone levels.″J Gerontol A Biol Sci Med Sci 56(5)：M266-272.
Khaw，K.T.，M.Dowsett，et al.(2007).″Endogenous testosterone and mortalitydue to all causes，cardiovascular disease，and cancer in men：Europeanprospective investigation into cancer in Norfolk(EPlC-Norfolk)ProspectivePopulation Study.″Circulation 116(23)：2694-2701.
Kim，E.D.，L.Crosnoe，et al.(2013).″The treatment of hypogonadism in men ofreproductive age.″Fertil Steril 99(3)：718-724.
Kleerekoper，M.，A.R.Villanueva，et al.(1985).″The role of three-dimensionaltrabecular microstructure in the pathogenesis of vertebral compressionfractures.″Calcif.Tissue Int.37：594-597.
Komesaroff，P.A.(2008).″Unravelling the enigma of dehydroepiandrosterone：moving forward step by step.″Endocrinology 149(3)：886-888.
Kopelman，P.G_(2000).″Obesity as a medical problem.″Nature 404(6778)：635-643.
Kostka，T.，L.M.Arsac，et al.(2000).″Leg extensor power anddehydroepiandrosterone sulfate，insulin-like growth factor-l and testosteronein healthy active elderly people.″Eur J Appl Physiol 82(1-2)：83-90.
Kramer，C.Y.(1956).″Extension of multiple range tests to group means withunique numbers of replications.″Biometrics 12：307-310.
Kroller and Buri(1987).″S.J.P.PHARMA：73：115-124.
Kurzman，I.D.，D.L.Panciera，et al.(1998).″The effect ofdehydroepiandrosterone combined with a low-fat diet in spontaneously obesedogs：a clinical trial.″Obes Res 6(1)：20-28.
Kushnir，M.M.，T.Blamires，et al.(2010).″Liquid chromatography-tandem massspectrometry assay for androstenedione，dehydroepiandrosterone，andtestosterone with pediatric and adult reference intervals.″Clin Chem 56(7)：1138-1147.
Labrie，C.，A.Belanger，et al.(1988).″Androgenic activity ofdehydroepiandrosterone and androstenedione in the rat ventral prostate.″Endocrinology 123：1412-1417.
Labrie，F.(1991).″Intracrinology.″Mol.Cell.Endocrinol.78：C113-C118.
Labrie，F.(2010a).″DHEA after Menopause-Sole source of sex steroids andpotential sex steroid deficiency treatment.″Menopause Management 19：14-24.
Labrie，F.(2010b).DHEA，important source of sex steroids in men and evenmore in women.Neuroendocrinology，The Normal Neuroendocrine System，Progress in Brain Research.L.Martini，Chrousos G.P，Labrie F，Pacak K and D.Pfaff，eds.，Elsevier.182(Chapter 4)：97-148.
Labrie，F.(2011).″Blockade of testicular and adrenal androgens in prostatecancer treatment.″Nat Rev Urol 8(2)：73-85.
Labrie，F.，D.Archer，et al.(2009a).″Effect on intravaginaldehydroepiandrosterone(Prasterone)on libido and sexual dysfunction inpostmenopausal women.″Menopause 16：923-931.
Labrie，F.，D.Archer，et al.(2009b).″Intravaginal dehydroepiandrosterone(Prasterone)，a physiological and highly efficient treatment of vaginalatrophy.”Menopause 16：907-922.
Labrie，F.，D.Archer，et al.(2009c).″Serum steroid levels during 12-weekintravaginal dehydroepiandrosterone administration.″Menopause 16：897-906.
Labrie，F.，A.Belanger，et al.(2006).″Androgen glucuronides，instead oftestosterone，as the new markers of androgenic activity in women.″J Steroid Biochem Mol Biol99：182-188.
Labrie，F.，A.Belanger，et al.(1997a).″Physiological changes indehydroepiandrosterone are not reflected by serum levels of active androgensand estrogens but of their metabolites：intracrinology.″JClin Endocrinol Metab82(8)：2403-2409.
Labrie，F.，A.Belanger，et al.(1997b).″Marked decline in serumconcentrations of adrenal Cl 9sex steroid precursors and conjugated androgenmetabolites during aging.″J Clin Endocrinol Metab 82：2396-2402.
Labrie，F.，A.Belanger，et al.(1993).″Science behind total androgenblockade：from gene to combination therapy.″Clin.Invest.Med，16：475-492.
Labrie，F.，A.Belanger，et al.(1998).″DHEA and the intracrine formation ofandrogens and estrogens in peripheral target tissues：its role duringaging.Steroids 63(5-6)：322-328.
Labrie，F.，A.Belanger，et al.(2005).″Gonadotropin-releasing hormoneagonists in the treatment of prostate cancer.″Endocrine Reviews 26(3)：361-379.
Labrie，F.，B.Candas，et al.(2002).″Can combined androgen blockade providelong-term control or possible cure of localized prostate cancer？″Urology 60(1)：115-119.
Labrie，F.，L.Cusan，et al.(2009).″Comparable amounts of sex steroids aremade outside the gonads in men and women：strong lesson for hormone therapy ofprostate and breast cancer.″J Steroid Biochem Mol Biol 113：52-56.
Labrie，F.，P.Diamond，et al.(1997a).″Effect of 12-month DHEA replacementtherapy on bone，vagina，and endometrium in postmenopausal women.″J.Clin.Endocrinol.Metab.82：3498-3505.
Labrie，F.，P.Diamond，et al.(1997b).″Effect of 12-monthdehydroepiandrosterone replacement therapy on bone，vagina，and endometrium inpostmenopausal women.″J Clin Endocrinol Metab 82(10)：3498-3505.
Labrie，F.，A.Dupont，et al.(1985).Complete androgen blockade for thetreatment of prostate cancer.Important Advances in Oncology.V.T.de Vita，S.Heilman and S.A.Rosenberg.Philadelphia，J.B.Lippincott：193-217.
Labrie，F.，A.Dupont，et al.(1982).″New hormonal therapy in prostaticcarcinoma：combined treatment with an LHRH agonist and an antiandrogen.″Clin.Invest.Med.5：267-275.
Labrie，Fv V.Luu-The，et al.(1997).″The key role of 17b-HSDs in sex steroidbiology.″Steroids 62：148-158.
Labrie，F.，C.Martel，et al.(2011).″Wide distribution of the serumdehydroepiandrosterone and sex steroid level sin postmenopausal women：role ofthe ovary？″Menopause 18(1)：30-43.
Labrie，F.，J.Simard，et al.(1992a).″Structure，function and tissue-specificgene expression of 3b-hydroxysteroid dehydrogenase/5-ene-4-ene isomeraseenzymes in classical and peripheral intracrine steroidogenic tissues.″J.Steroid Biochem.Mol.Biol，43：805-826.
Labrie，F.，J.Simard，et al.(1996a).The 3p-hydroxysteroid dehydrogenase/isomerase gene family：lessons from type ll 3p-HSD congenitaldeficiency.Signal Transduction in Testicular Cells.Ernst Schering Research Foundation Workshop.V.Hansson，F.O.Levy and K.Tasken.Berlin，Heidelberg，NewYork，Springer-Verlag.Suppl.2：185-218.
Labrie，F.，J.Simard，et al.(1996b).″The 3β-hydroxysteroid dehydrogenase/isomerase gene family：lessons from type ll 3β-HSD congenital deficiency.″Signal Transduction in Testicular Cells，Ernst Schering Research Foundation Workshop Suppl.2：185-218.
Labrie，F.，J.Simard，et al.(1992b).″Structure and tissue-specificexpression of 3b-hydroxy steroid dehydrogenase/5-ene-4-ene isomerase genes inhuman and rat classical and peripheral steroidogenic tissues，″J.Steroid Biochem.Mol.Biol.41：421-435.
Labrie，F.，J.Simard，et al.(1994).″Structure，regulation and role of 3b-hydroxysteroid dehydrogenase，17b-hydroxysteroid dehydrogenase and aromataseenzymes in formation of sex steroids in classical and peripheral intracrinetissues.″Hormone，Enzymes and Receptors：451-474.
Labrie，F.，Y.Sugimoto，et al.(1992).″Structure of human type ll 5α-reductase.″Endocrinology 131：1571-1573.
Labrie，Y.，F.Durocher，et al.(1995).″The human type ll 17β-hydroxysteroiddehydrogenase gene encodes two alternatively-spliced messenger RNA species.″DNA Cell Biol.14：849-861.
Lamberts，S.W，(2003).”The endocrinology of gonadal involution：menopauseand andropause.″Ann Endocrinol(Paris)64(2)：77-81.
Larsson，L.，G.Grimby，et al.(1979).″Muscle strength and speed of movementin relation to age and muscle morphology.″J Appl Physiol 46(3)：451-456.
Lasco，A.，N.Frisina，et al.(2001).″Metabolic effects ofdehydroepiandrosterone replacement therapy in postmenopausal women.″Eur J Endocrinol 145：457-461.
Lauffenburger，T.，A.J.Olah，et al.(1977).″Bone remodeling and calciummetabolism：a correlated histomorphometric，calcium kinetic，and biochemicalstudy in patients with osteoporosis and Paget′s disease.″Metabolism 26：589-606.
Laumann，E.O.，A.Paik，et al.(1999).″Sexual dysfunction in the UnitedStates：prevalence and predictors.″Tama 281(6)：537-544.
LeBlanc，E.S.，J.Janowsky，et al.(2001).″Hormone replacement therapy andcognition：systematic review and meta-analysis.″Tama 285(11)：1489-1499.
Li，S.，X.Yan，et al.(1993).″Prevention by dehydroepiandrosterone of thedevelopment of mammary carcinoma induced by 7，12-dimethylbenz(a)anthracene(DMBA)in the rat.″Breast Cancer Res.Treat.29：203-217.
Libe，R.，L.Barbetta，et al.(2004).″Effects of dehydroepiandrosterone(DHEA)supplementation on hormonal，metabolic and behavioral status in patients withhypoadrenalism.″J Endocrinol Invest 27(8)：736-741.
Liu，P.Y_，H.W.Baker，et al.(2009).″Induction of spermatogenesis andfertility during gonadotropin treatment of gonadotropin-deficient infertilemen：predictors of fertility outcome.″J Clin Endocrinol Metab 94(3)：801-808.
Liu，P.Y.r R.S.Swerdloff，et al.(2006).″Rate，extent，and modifiers ofspermatogenic recovery after hormonal male contraception：an integratedanalysis.″Lancet 367(9520)：1412-1420.
Lobo，R.A.(1991).″Clinical review 27：Effects of hormonal replacement onlipids and lipoproteins in postmenopausal women.″J.Clin.Endocrinol.Metab.73(5)：925-930.
Lobo，R.A.，R.C.Rosen，et al.(2003).″Comparative effects of oral esterifiedestrogens with and without methy ltestosterone on endocrine profiles anddimensions of sexual function in postmenopausal women with hypoactive sexualdesire.″Fertil Steril 79(6)：1341-1352.
Lovas，K.，G.Gebre-Medhin，et al.(2003).″Replacement ofdehydroepiandrosterone in adrenal failure：no benefit for subjective healthstatus and sexuality in a 9-month，randomized，parallel group clinical trial.″J Clin Endocrinol Metab 88(3)：1112-1118.
Lovas，K.and E.S.Husebye(2008).″Replacement therapy for Addison′s disease：recent developments.″Expert Opin Investig Drugs 17(4)：497-509.
Lunenfeld，B.and E.Nieschlag(2007).″Testosterone therapy in the agingmale.”Aging Male 10(3)：139-153.
Luo，S.，A.Sourla，et al.(1997).″Combined effects of dehydroepiandrosteroneand EM-800 on bone mass，serum lipids，and the development of dimethylbenz(a)anthracene(DMBA)-induced mammary carcinoma in the rat″Endocrinology 138：4435-4444.
Luu-The，V.，I.Dufort，et al.(1995).″Structural characterization andexpression of the human dehydroepiandrosterone sulfotransferase gene.″DNA Cell Biol.14：511-518.
Luu-The，V.，Y.Zhang，et al.(1995).″Characteristics of human types 1，2 and317b-hydroxysteroid dehydrogenase activities：oxidation-reduction andinhibition.″T-Steroid Biochem，Mol.Biol.55：581-587.
MacEwen，E.G.and I.D.Kurzman(1991).″Obesity in the dog：role of the adrenalsteroid dehydroepiandrosterone(DHEA).″J.Nutr.121：S51-S55.
Maggi，M.，J.Buvat，et al.(2013).″Hormonal causes of male sexualdysfunctions and their management(hyperprolactinemia，thyroid disorders，GHdisorders，and DHEA).″J Sex Med 10(3)：661-677.
Malkin，C.J.，P.J.Pugh，et al.(2004).″Testosterone replacement inhypogonadal men with angina improves ischaemic threshold and quality oflife.″Heart 90(8)：871-876.
Malkin，C.J.，P.J.Pugh，et al.(2006).″Testosterone therapy in men withmoderate severity heart failure：a double-blind randomized placebo controlledtrial.”Eur Heart J 27(1)：57-64.
Manson，J.E.，S.S.Bassuk，et al.(2006).″Postmenopausal hormone therapy：newquestions and the case for new clinical trials.″Menopause 13(1)：139-147.
Marin，P.，S.Holmang，et al_(1993).”Androgen treatment of abdominally obesewomen.″Obes.Res.1：245-251.
Marks，L.S.，N.A.Mazer，et al.(2006).″Effect of testosterone replacementtherapy on prostate tissue in men with late-onset hypogonadism：a randomizedcontrolled trial.″Tama 296(19)：2351-2361.
Martel，C.，A.Sourla，et al.(1998).″Predominant androgenic component in thestimulatory effect of dehydroepiandrosterone on bone mineral density in therat.″J.Endocrinol.157：433-442.
Matsumoto，A.M.(2002).″Andropause：clinical implications of the decline inserum testosterone levels with aging in men.″J Gerontol A Biol Sci Med Sci 57(2)：M76-99.
McEwen，B.S.and S.E.Alves(1999).″Estrogen actions in the central nervoussystem.″Endocr Rev 20(3)：279-307.
McEwen，B.S.，E.Gould，et al.(1995).″Oestrogens and the structural andfunctional plasticity of neurons：implications for memory，ageing andneurodegenerative processes.″Ciba Found Symp 191：52-66；discussion 66-73.
Melsen，F.，B.Melsen，et al.(1978).″Histomorphometric analysis of normalbone from the iliac crest.″Acta Pathol.Microbiol.Scand.86：70-81.
Melton，L.J.，3rd，S.Khosla，et al.(2000).″Epidemiology of sarcopenia.″Mayo Clin Proc 75Suppl：SlO-12；discussion S12-13.
Meunier，P.J.，C.Salson，et al.(1987).″Skeletal distribution and biochemicalparameters of Paget′s disease.″Clin.Orthop.217：37-44.
Miller，K.K.，W.Rosner，et al.(2004).″Measurement of free testosterone innormal women and women with androgen deficiency：comparison of methods.″J Clin Endocrinol Metab 89(2)：525-533.
Mitchell，L.E.，D.L.Sprecher，et al.(1994).″Evidence for an associationbetween dehydroepiandrosterone sulfate and nonfatal，premature myocardialinfarction in males.″Circulation 89(1)：89-93.
Mohan，P.F.，J.S.lhnen，et al.(1990).″Effects of dehydroepiandrosteronetreatment in rats with diet-induced obesity.″J.Nutr.120：1103-1114.
Monk，D.and H.Brodaty(2000).″Use of estrogens for the prevention andtreatment of Alzheimer′s disease.’1Dement Geriatr Cogn Disord 11(1)：1-10.
Moore，C.，D.Huebier，et al.(2004).″The Aging Males′Symptoms scale (AMS)asoutcome measure for treatment of androgen deficiency.″Eur Urol 46(1)：80-87.
Morales，A.J.R.H.Haubrich，et al.(1998).″The effect of six months treatmentwith a 100mg daily dose of dehydroepiandrosterone(DHEA)on circulating sexsteroids，body composition and muscle strength in age-advanced men and women.″Clin Endocrinol(Oxf)49(4)：421-432.
Morales，A.J.，J.J.Nolan，et al.(1994).″Effects of replacement dose ofdehydroepiandrosterone in men and women of advancing age.″J.Clin， Endocrinol.Metab.78：1360-1367.
Morley，J.E.(2003).″Testosterone and behavior.″Clin Geriatr Med 19(3)：605-616.
Morley，J.E.，E.Charlton，et al.(2000).″Validation of a screeningquestionnaire for androgen deficiency in aging males.″Metabolism 49(9)：1239-1242.
Morley，J.E.and H.M.Perry，3rd(2003).″Andropause：an old concept in newclothing.″Clin Geriatr Med 19(3)：507-528.
Morrison，J.H.，R.D.Brinton，et al.(2006).″Estrogen，menopause，and the agingbrain：how basic neuroscience can inform hormone therapy in women.″J Neurosci26(41)：10332-10348.
Mortola，J.F_and S.S.Yen(1990).″The effects of oral dehydroepiandrosteroneon endocrine-metabolic parameters in postmenopausal women.″J Clin Endocrinol Metab 71(3)：696-704.
Mostaghel，E.A.，S.T.Page，et al.(2007).″Intraprostatic androgens andandrogen-regulated gene expression persist after testosterone suppression：therapeutic implications for castration-resistant prostate cancer.″Cancer Res67(10)：5033-5041.
Murray，R.and P.Pitt(1985).″Treatment of advanced prostatic cancer，resistant to conventional therapy，with aminoglutethimide.″Eur J Cancer Clin Oncol 21(4)：453-458.
Nair，K.S.，R.A.Rizza，et al.(2006).″DHEA in elderly women and DHEA ortestosterone in elderly men.″N Engl J Med 355(16)：1647-1659.
Nathorst-Boos，J.and B.von Schoultz(1992).″Psychological reactions andsexual life after hysterectomy with and without oophorectomy.″Gynecol Obstet Invest 34(2)：97-101.
Need，A.G.，M.Horowitz，et al.(1989).″Effects of nandrolone decanoate andantiresorptive therapy on vertebral density in osteoporotic postmenopausalwomen.″Arch.Intern.Med.149：57-60.
Nestler，J.E.，C.O.Barlascini，et al.(1988).″Dehydroepiandrosterone reducesserum low density lipoprotein levels and body fat but does not alter insulinsensitivity in normal men.″J.Clin.Endocrinol.Metab，66：57-61.
Nishiyama，T.，Y.Hashimoto，et al.(2004)_″The influence of androgendeprivation therapy on dihydrotestosterone levels in the prostatic tissue ofpatients with prostate cancer.″Clin Cancer Res 10(21)：7121-7126.
Notelovitz，M.，N.Watts，et al.(1991).Effects of estrogen plus low dose androgen vs estrogen alone on menopausal symptoms in oophorectomized/ hysterectomized women.North Am.Menopause Soc.，Montreal.
O′Connor，D.B.，D.M.Lee，et al.(2011).″The Relationships between SexHormones and Sexual Function in Middle-Aged and Older European Men.″J Clin Endocrinol Metab 96(10)：E1577-E1587.
O′Leary，M.P.，F.J.Fowler，et al.(1995).″A brief male sexual functioninventory for urology.″Urology 46(5)：697-706.
Ohlsson，C.，F.Labrie，et al.(2010).″Low serum levels ofdehydroepiandrosterone sulfate predict all-cause and cardiovascular mortalityin elderly men，J Clin Endocrinol Metab 95：4406-4414.
Ota，H.，M.Akishita，et al.(2012).″Testosterone deficiency acceleratesneuronal and vascular aging of SAMP8 mice：protective role of eNOS and SIRT1.″PLoS One 7(1)：e29598.
Page，S.T.，J.K.Amory，et al.(2005).″Exogenous testosterone(T)alone or withfinasteride increases physical performance，grip strength，and lean body massin older men with low serum T.″J Clin Endocrinol Metab 90(3)：1502-1510.
Pechersky，A.V.，V.I.Mazurov，et al.(2002).″Androgen administration inmiddle-aged and ageing men：effects of oral testosterone undecanoate ondihydrotestosterone，oestradiol and prostate volume.″Int J Androl 25(2)：119-125.
Percheron，G.，J.Y.Hogrel，et al_(2003).″Effect of 1-year oraladministration of dehydroepiandrosterone to 60- to 80-year-old individuals onmuscle function and cross-sectional area：a double-blind placebo-controlledtrial.″Arch Intern Med 163(6)：720-727.
Petri，M.A.，R.G.Lahita，et al.(2002).″Effects of prasterone oncorticosteroid requirements of women with systemic lupus erythematosus：adouble-blind，randomized，placebo-controlled trial.″Arthritis Rheum 46(7)：1820-1829.
Petri，M.A.，P.J.Mease，et al.(2004).″Effects of prasterone on diseaseactivity and symptoms in women with active systemic lupus erythematosus.″Arthritis Rheum 50(9)：2858-2868.
Pike，C.J.，J.C.Carroll，et al.(2009).″Protective actions of sex steroidhormones in Alzheimer′s disease.″Front Neuroendocrinol 30(2)：239-258.
Poretsky，L.，D.J.Brillon，et al.(2006).″Endocrine effects of oraldehydroepiandrosterone in men with HIV infection：a prospective，randomized，double-blind，placebo-controlled trial.″Metabolism 55(7)：858-870.
Prostate Cancer Triallists1 Collaborative Group(2000).″Maximum androgenblockade in advanced prostate cancer：an overview of the randomised trials.″Lancet 355：1491-1498.
Pugh，P.J.，R.D.Jones，et al.(2004).″Testosterone treatment for men withchronic heart failure.″Heart 90(4)：446-447.
Raisz，L.G.，B.Wiita，et al.(1996).″Comparison of the effects of estrogenalone and estrogen plus androgen on biochemical markers of bone formation andresorption in postmenopausal women.″J Clin Endocrinol Metab 81(1)：37-43.
Rasmussen，K.R.，M.J.Arrowood，et al.(1992).″Effectiveness ofdehydroepiandrosterone in reduction of cryptosporidial activity inimmunosuppressed rats.″Antimicrob.Agents Chemother.36：220-222.Raven，P.W.andJ.P.Hinson(2007).″Dehydroepiandrosterone(DHEA)and the menopause：an update.″Menopause Int 13(2)：75-78.
Rocca，W.A.，J.H.Bower，et al.(2007).″Increased risk of cognitive impairmentor dementia in women who underwent oophorectomy before menopause.″Neurology69(11)：1074-1083.
Rocca，W.A.，B.R.Grossardt，et al.(2006).″Survival patterns afteroophorectomy in premenopausal women：a population-based cohort study.″Lancet Oncol 7(10)：821-828.
Roy，T.A.，M.R.Blackman，et al.(2002).″Interrelationships of serumtestosterone and free testosterone index with FFM and strength in aging men.″Am J Physiol Endocrinol Metab 283(2)：E284-294.
Saad，F.，L.J.Gooren，et al.(2008).″A dose-response study of testosterone onsexual dysfunction and features of the metabolic syndrome using testosteronegel and parenteral testosterone undecanoate.″J Androl 29(1)：102-105.
Salmimies，P.，G.Kockott，et al.(1982).″Effects of testosterone replacementon sexual behavior in hypogonadal men.″Arch Sex Behav 11(4)：345-353.
Savvas，M.，J.W.W.Studd，et al.(1988).″Skeletal effects of oral oestrogencompared with subcutaneous oestrogen and testosterone in postmenopausalwomen.″Br.Med.J.297：331-333.
Schaap，L.A.，S.M.Pluijm，et al.(2005).″The association of sex hormonelevels with poor mobility，low muscle strength and incidence of falls amongolder men and women.″Clin Endocrinol(Oxf)63(2)：152-160.
Schriock，E.D.，C.K.Buffington，et al.(1988).″Divergent correlations ofcirculating dehydroepiandrosterone sulfate and testosterone with insulinlevels and insulin receptor binding.″J.Clin.Endocrinol.Metab.66：1329-1331.
Schwartz，A.G.，L.Pashko，et al.(1986).″Inhibition of tumor development bydehydroepiandrosterone and related steroids.″Toxicol，Pathol.14：357-362.
Seftel，A.D.，R.J.Mack，et al.(2004).″Restorative increases in serumtestosterone levels are significantly correlated to improvements in sexualfunctioning.″J Androl 25(6)：963-972.
Shabsigh，A.，Y.Kang，et al.(2005).″Clomiphene citrate effects ontestosterone/estrogen ratio in male hypogonadism.″J Sex Med 2(5)：716-721.
Sherwin，B.B.(1988).″Affective changes with estrogen and androgenreplacement therapy in surgically menopausal women.″T.Affect.Disord.14：177-187.
Sherwin，B.B.and M.M.Gelfand(1985).″Differential symptom response toparenteral estrogen and/or androgen administration in the surgicalmenopause.″Am.J.Obstet.Gynecol.151：153-160.
Sherwin，B.B.and M.M.Gelfand(1987).″The role of androgen in themaintenance of sexual functioning in oophorectomized women.″Psychosom Med.49：397-409.
Shifren，J.L.，G.D.Braunstein，et al.(2000).″Transdermal testosteronetreatment in women with impaired sexual function after oophorectomy.″N Engl J Med 343(10)：682-688.
Shigehara，K.and M.Namiki(2011).″Late-onset hypogonadism syndrome andlower urinary tract symptoms.″Korean J Urol 52(10)：657-663.
Shimokata，H.，J.D.Tobin，et al.(1989).″Studies in the distribution of bodyfat：I.Effects of age，sex，and obesity.″J Gerontol 44(2)：M66-73.
Shores，M.M.，N.L.Smith，et al.(2012).″Testosterone treatment and mortalityin men with low testosterone levels.″J Clin Endocrinol Metab 97(6)：2050-2058.
Sibonga，J.D.，G.L.Evans，et al.(1996).″Ovarian status influences theskeletal effects of tamoxifen in adult rats.″Breast Cancer Res.Treat.41：71-79.
Sih，R.，J.E.Morley，et al.(1997).″Testosterone replacement in olderhypogonadal men：a 12-month randomized controlled trial.″J Clin Endocrinol Metab 82(6)：1661-1667.
Simard，J.，R.Sanchez，et al.(1997).″Blockade of the stimulatory effect ofestrogens，OH-Tamoxifen，OH-Toremifene，Droloxifene and Raloxifene on alkalinephosphatase activity by the antiestrogen EM-800 in human endometrialadenocarcinoma lshikawa cells.Cancer Res.57：3494-3497.
Simpkins，J.W.，P.S.Green，et al.(1997).″Role of estrogen replacementtherapy in memory enhancement and the prevention of neuronal loss associatedwith Alzheimer′s disease.″Am J Med 103(3A)：19S-25S.
Siris，E.S.，Y.T.Chen，et al.(2004).″Bone mineral density thresholds forpharmacological intervention to prevent fractures.″Arch Intern Med 164(10)：1108-1112.
Smith，K.W.，H.A.Feldman，et al.(2000).″Construction and field validation ofa self-administered screener for testosterone deficiency (hypogonadism)inageing men.″Clin Endocrinol(Oxf)53(6)：703-711.Smith，M.R.(2006).″Treatment-related osteoporosis in men with prostate cancer.″Clin Cancer Res 12(20 Pt2)：6315s-6319s.
Snyder，P.J.，H.Peachey，et al.(2000).″Effects of testosterone replacementin hypogonadal men.″J Clin Endocrinol Metab 85(8)：2670-2677.
Snyder，P.J.，H.Peachey，et al.(1999).″Effect of testosterone treatment onbody composition and muscle strength in men over 65 years of age.″J Clin Endocrinol Metab 84(8)：2647-2653.
Storer，T.W.，L.Magliano，et al.(2003).″Testosterone dose-dependentlyincreases maximal voluntary strength and leg power，but does not affectfatigability or specific tension.″J Clin Endocrinol Metab 88(4)：1478-1485.
Studd，J.W.，W_P.Collins，et al.(1987).″Estradiol and testosterone implantsin treatment of psychosexual problems in postmenopausal woman.″Br.J.Obstet.Gynecol.84：314-315.
Suzuki，T.，N.Suzuki，et al.(1991).″Dehydroepiandrosterone enhances IL2production and cytotoxic effector function of human T cells.″Clin.Immunol.Immunopathol.61：202-211.
Tagliaferro，A.R.，J.R.Davis，et al.(1986).″Effects ofdehydroepiandrosterone acetate on metabolism，body weight and composition ofmale and female rats.″J.Nutr.116：1977-1983.
Takao，T.，A.Tsujimura，et al.(2009).″Lower urinary tract symptoms afterhormone replacement therapy in Japanese patients with late-onsethypogonadism：a preliminary report.″Int J Urol 16(2)：212-214.
Tan，K.C.，S.W.Shiu，et al.(1998).″Effects of testosterone replacement onHDL subfractions and apolipoprotein A-I containing lipoproteins.″Clin Endocrinol(Oxf)48(2)：187-194.
Tan，R.S.and S.J.Pu(2003).″A pilot study on the effects of testosterone inhypogonadal aging male patients with Alzheimer′s disease.″AgingMale 6(1)：13-17.
Taylor，F.and L.Levine(2010).″Clomiphene citrate and testosterone gelreplacement therapy for male hypogonadism：efficacy and treatment cost.”，J Sex Med 7(1 Pt 1)：269-276.
Tchernof，A.，J.P.Despres，et al.(1995).″Reduced testosterone and adrenalCI9 steroid levels in obese men.″Metabolism 44：513-519.Tchernof，A.，F.Labrie，et al.(1996).″Obesity and metaboliccomplications：contribution of DHEA andother steroid hormones.″J.Endocrinol.150：S155-S164.
Tenover，J.S.(1992).″Effects of testosterone supplementation in the agingmale.”J Clin Endocrinol Metab 75(4)：1092-1098.
Tivesten，A.，L.Vandenput，et al.(2009).″Low serum testosterone andestradiol predict mortality in elderly men.″J Clin Endocrinol Metab 94(7)：2482-2488.
Traish，A.M.，A.Guay，et al.(2009).″The dark side of testosteronedeficiency：I.Metabolic syndrome and erectile dysfunction.″JAndrol 30(1)：10-22.
Traish，A.M.，A.Haider，et al.(2013).″Long-term testosterone therapy inhypogonadal men ameliorates elements of the metabolic syndrome：anobservational，long-term registry study.″Int J Clin Pract.
Traish，A.M.，H.P.Kang，et al.(2011).″Dehydroepiandrosterone (DHEA)-aprecursor steroid or an active hormone in human physiology.″J Sex Med 8(11)：2960-2982；quiz 2983.
Travison，T.G.，J.E.Morley，et al.(2006).″The relationship between libidoand testosterone levels in aging men.″J Clin Endocrinol Metab 91(7)：2509-2513.
Trenell，M_L，N.S.Marshall，et al.(2007).″Sleep and metabolic control：wakingto a problem？″Clin Exp Pharmacol Physiol 34(1-2)：1-9.Turhan，S.，C.Tulunay，etal.(2007).″The association between androgen levels and premature coronaryartery disease in men.″Coron Artery Pis 18(3)：159-162.
Ueno，S.，M.Namiki，et al.(2006).″Efficacy of primary hormonal therapy forpatients with localized and locally advanced prostate cancer：a retrospectivemulticenter study.″Int J Urol 13(12)：1494-1500.
Valenti，G.，L.Denti，et al.(2004).″Effect of DHEAS on skeletal muscle overthe life span：the InCHIANTI study.″J Gerontol A Biol Sci Med Sci 59(5)：466-472.
Vallee，M.，W.Mayo，et al.(2001).″Role of pregnenolone，dehydroepiandrosterone and their sulfate esters on learning and memory incognitive aging.″Brain Res Brain Res Rev 37(1-3)：301-312.
Vermeulen，A.(2003).″Diagnosis of partial androgen deficiency in the agingmale.″Ann Endocrinol(Paris)64(2)：109-114.
Vigen，R.，C.I.O′Donnell，et al.(2013).″Association of testosterone therapywith mortality，myocardial infarction，and stroke in men with low testosteronelevels.″Tama 310(17)：1829-1836.
Villareal，D.T.and J.O.Holloszy(2004).″Effect of DHEA on abdominal fat andinsulin action in elderly women and men：a randomized controlled trial.″TAMA292(18)：2243-2248.
Villareal，D.T.，J.O.Holloszy，et al.(2000).″Effects of DHEA replacement onbone mineral density and body composition in elderly women and men.″ClinEndocrinol(Oxf)53(5)：561-568.
Wakeling，A.E.(1993).″The future of new pure antiestrogens in clinicalbreast cancer.″Breast Cancer Res，Treat.25：1-9.
Wang，C.，G.Cunningham，et al.(2004).″Long-term testosterone gel(AndroGel)treatment maintains beneficial effects on sexual function and mood，lean andfat mass，and bone mineral density in hypogonadal men.″J Clin Endocrinol Metab89(5)：2085-2098.
Wang，C.，E.Nieschlag，et al.(2009a).″Investigation，treatment，and monitoringof late-onset hypogonadism in males：ISA，ISSAM，EAU，EAA，and ASArecommendations.″J Androl 30(1)：1-9.
Wang，C.，E.Nieschlag，et al.(2009b).″ISA，ISSAM，EAU，EAA and ASArecommendations：investigation，treatment and monitoring of late-onsethypogonadism in males.″Aging Male 12(1)：5-12.
Wang，C.，R.S.Swerdloff，et al.(2000).″Transdermal testosterone gel improvessexual function，mood，muscle strength，and body composition parameters inhypogonadal men.″J Clin Endocrinol Metab 85(8)：2839-2853.
Weill-Engerer，S.，J.P.David，et al.(2002).″Neurosteroid quantification inhuman brain regions：comparison between Alzheimer′s and nondemented patients.″J Clin Endocrinol Metab 87(11)：5138-5143.
Weinstein，R.S.and M.S.Hutson(1987).″Decreased trabecular width andincreased trabecular spacing contribute to bone loss with aging.″Bone 8：137-142.
Whitten，S.J.，A.K.Nangia，et al.(2006).″Select patients withhypogonadotropic hypogonadism may respond to treatment with clomiphenecitrate.″Fertil Steril 86(6)：1664-1668.
Williams，M.R.，T.Dawood，et al.(2004).″Dehydroepiandrosterone increasesendothelial cell proliferation in vitro and improves endothelial function invivo by mechanisms independent of androgen and estrogen receptors.″J Clin Endocrinol Metab 89(9)：4708-4715.
Wolkowitz，O.M.，V.I.Reus，et al.(1999).″Double-blind treatment of majordepression with dehydroepiandrosterone.″Am J Psychiatry 156(4)：646-649.
Wu，F.C.，A.Tajar，et al.(2010).″Identification of late-onset hypogonadismin middle-aged and elderly men.″N Engl J Med 363(2)：123-135.
Wu，F.C.and A.von Eckardstein(2003).″Androgens and coronary arterydisease.″Endocr Rev 24(2)：183-217.
Xu，H.，G.K.Gouras，et al.(1998).″Estrogen reduces neuronalgeneration ofAlzheimer beta-amyloid peptides.”Nat Med 4(4)：447-451.
Yaffe，K.(1998).″Estrogen therapy in postmenopausal women：effects oncognitive function and dementia.″TAMA 279：688-695.
Yau，J.L.，S.Rasmuson，et al.(2003).″Dehydroepiandrosterone 7-hydroxylaseCYP7B：predominant expression in primate hippocampus and reduced expression inAlzheimer′s disease.″Neuroscience 121(2)：307-314.
Yen，S.S.，A.J.Morales，et al.(1995).″Replacement of DHEA in aging men andwomen.Potential remedial effects.″Ann.N.Y.Acad.Sci.774：128-142.
Yen，T.T.，J.A.Allan，et al.(1977).″Prevention of obesity in Avy/a mice bydehydroepiandrosterone.″Lipids 12：409-413.
Zitzmann，M.(2009).″Testosterone deficiency，insulin resistance and themetabolic syndrome，Nat Rev Endocrinol 5(12)：673-681.
Zitzmann，M.，S.Faber，et al.(2006).″Association of specific symptoms andmetabolic risks with serum testosterone in older men.″J Clin Endocrinol Metab91(11)：4335-4343.

Claims (24)

1.一种预防、减轻或消除男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率的方法，所述方法包含施予有需要所述预防、减轻或消除的男性患者，(i)有效治疗量的性类固醇前体或其前药与(ii)有效治疗量的选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药，其中所述选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素刺激黄体生成素分泌以增加循环睾酮的水平。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述症状或疾病与低睾酮、低DHEA或两者相关。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述症状或疾病是选自于以下所包含的群组：性欲减退、勃起功能障碍、疲劳、失去能量、抑郁症、骨质流失、肌肉损失、肌肉无力、脂肪堆积、记忆丧失、认知减退、阿尔茨海默氏病、痴呆、体毛脱落、生育问题、失眠、男性乳房发育症、贫血、潮热、盗汗、幸福感下降、肥胖、骨质疏松症、高胆固醇血症、高脂血症、动脉粥样硬化、高血压、胰岛素抗性、心血管疾病及第二型糖尿病。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述性类固醇前体是选自于由以下所组成的群组：脱氢表雄酮、硫酸脱氢表雄酮、雄甾-5-烯-3β，17β-二醇及4-雄甾烯-3，17-二酮。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述性类固醇前体是脱氢表雄酮。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂是选自于以下所包含的群组：他莫西芬、托瑞米芬、CC 8490、SERM 3471、HMR 3339、HMR 3656、雷洛昔芬、LY335124、LY 326315、阿佐昔芬(LY 353381)、哌喷昔芬(ERA 923)、巴多昔芬(TSE 424，WAY140424)、欧波利亚(拉索昔芬)、EM-652、EM-800、EM-652-HCI(阿考比芬，EM-1538)、4-羟基-他莫西芬、4-羟基-托瑞米芬、屈洛昔芬、LY 335563、GW-5638、艾多昔芬、左美洛昔芬、磷酸二氢(E)-4-[1-[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基]-2-[4-(1-甲基乙基)苯基]-1-丁烯基]苯酚(TAT-59)、奥培米芬(FC 1271)、非培米芬、苯并二氢吡喃、CHF 4227、LY 2066948、LY2120310、司韦芬、SR 16234、克罗米芬、恩氯米芬、珠氯米芬、GW 7603、BL 3040、SRI 16158、SR 16157、SRI 16137、SR 16137、Rad 1901、(+)-3-(4-羟基苯基)-2-[4-]2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-4-(三氟甲基)-2H-1-苯并吡喃-7-醇、芬吗瑞乐、萘福昔定及4-羟基-n-去甲基他莫昔芬。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂具有以下化学式：
(a)其中R1及R2分别为氢、羟、卤素、C1-C6烷基或在体内转化成羟的基团；
(b)其中Z是缺少的或选自于由以下所组成的群组：-CH2-、-O-、-S-及-NR3-(R3是氢或C1-C6烷基)；
(c)其中R100是将L与B-环以4-10个居间原子隔开的二价基团；
(d)其中L是选自于-SO-、-CON＜、-N＜及-SON＜的群组的二价或三价基团；
(e)其中G1是选自于以下所组成的群组：氢、C1至C5烃、与G2结合的二价基团并且L是5至7元杂环及上述卤代或未饱和的衍生物；
(f)其中G2是缺少的或选自于以下所组成的群组：氢、C1至C5烃、与G1结合的二价基团并且L是5至7元杂环及上述卤代或未饱和的衍生物；
(g)其中G3是选自于以下所组成的群组：氢、甲基、乙基及三氟甲基。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂是下述结构的苯并吡喃化合物：
或其药学上可接受的盐，
(a)其中D是-OCH2CH2N(R3)R4(R3及R4分别选自于C1-C4烷基所组成的群组或R3、R4及其所结合的N共同形成以下所组成的群组的环结构：吡咯啶基、2，2-二甲基吡咯啶基、2-甲基吡咯啶基、哌啶子基、六亚甲基亚胺基及吗啉；
(b)其中R1及R2分别选自于以下所组成的群组：氢、羟、卤素、C1-C6烷基或在体内转化成羟的基团；
(c)其中G3是选自于以下所组成的群组：氢、甲基、乙基及三氟甲基。
9.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂是在2号碳上具有S绝对构型的光学活性的苯并吡喃化合物，所述化合物具有以下分子结构：
或其药学上可接受的盐；
(a)其中R1及R2分别选自于以下所组成的群组：羟、卤素、C1-C6烷基或在体内转化成羟的基团；
(b)其中R3是选自于以下所组成的群组：饱和、未饱和或取代的吡咯啶基，饱和、未饱和或取代的吡啶子基，饱和、未饱和或取代的哌啶基，饱和、未饱和或取代的吗啉，含氮环状基团以及NRaRb(Ra及Rb分别为氢、直链或支链C1-C6烷基、直链或支链C2-C6烯基或直链或支链C2-C6炔基)。
10.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂是阿考比芬：
并且是在2号碳上具有S绝对构型的光学活性化合物。
11.根据权利要求9所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂是选自于以下所组成的群组的酸的苯并吡喃盐：醋酸、己二酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、反丁烯二酸、氢碘酸、氢溴酸、盐酸、氢氯噻嗪酸、羟基萘甲酸、乳酸、马来酸、甲基磺酸、甲基硫酸、1，5-萘二磺酸、硝酸、棕榈酸(十六酸)、特戊酸、磷酸、丙酸、丁二酸、硫酸、酒石酸、对苯二甲酸、对甲苯磺酸及戊酸。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂是阿考比芬：
并且是在2号碳上具有S绝对构型的光学活性化合物，并且所述性类固醇前体是脱氢表雄酮。
13.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗雌激素是选自于以下所包含的群组：福美斯坦(ICI 182780、氟维司群、7α-[9-(4，4，5，5，5-五氟-苯基磺酰基)壬基]雌-1，3，5(10)-三烯-3，17-β-二醇)、ICI 164384、CH 4893237、ZK 246965及SH 646。
14.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂于乳房、子宫或子宫内膜组织内无雌激素活性。
15.根据权利要求1所述的方法，其可降低男性患者罹患乳癌的风险。
16.根据权利要求1所述的方法，还包含施用有效治疗量的人绒毛膜促性腺激素以作为联合治疗的一部份。
17.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂及/或性类固醇前体是直肠给药。
18.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂及/或性类固醇前体是口服给药。
19.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择性雌激素受体调节剂及/或性类固醇前体是经皮给药。
20.一种药学组合物，用以预防、减轻或消除如权利要求3所定义的男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率，包含：
a)药学上可接受的赋形剂，稀释剂或载体；
b)至少一个如权利要求4所定义的性类固醇前体或其前药；及
c)至少一个如权利要求6-11及13中任一所定义的选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药；其中所述药学组合物以封装提供，以指引所述组合物用于预防、减轻或消除至少一个男性雄激素缺乏症状或疾病。
21.根据权利要求20所述的药学组合物，其中性类固醇及选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素共同以下述群组所包含的药物输送形式配置：丸剂、片剂、胶囊、乳膏剂、凝胶、直肠栓剂及注射。
22.根据权利要求20所述的药学组合物，其中所述选择性雌激素受体调节剂是阿考比芬：
并且是在2号碳上具有S绝对构型的光学活性化合物，并且所述类固醇前体是脱氢表雄酮。
23.一种试剂盒，用以预防、减轻或消除如权利要求3所定义的男性雄激素缺乏症状或包含男性性腺功能低下有关的症状和疾病的疾病的发生率，包含(i)第一容器，其内含有至少一个如权利要求4所定义的性类固醇前体或其前药；(ii)第二容器，其内含有至少一个如权利要求6-11及13中任一所定义的选择性雌激素受体调节剂或抗雌激素或任一的前药；及(iii)使用试剂盒以预防、减轻或消除至少一个男性雄激素缺乏症状或疾病的指示。
24.根据权利要求23所述的试剂盒，其中所述选择性雌激素受体调节剂是阿考比芬：
并且是在2号碳上具有S绝对构型的光学活性化合物，并且所述性类固醇前体是脱氢表雄酮。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113348163A (zh) * 2019-02-12 2021-09-03 雷迪厄斯制药公司 方法和化合物

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100317635A1 (en) 2009-06-16 2010-12-16 Endorecherche, Inc. Treatment of hot flushes, vasomotor symptoms, and night sweats with sex steroid precursors in combination with selective estrogen receptor modulators
US9744177B2 (en) * 2014-03-10 2017-08-29 Endorecherche, Inc. Treatment of male androgen deficiency symptoms or diseases with sex steroid precursor combined with SERM
WO2018027175A1 (en) * 2016-08-04 2018-02-08 University Of Iowa Research Foundation Use of swell1 inhibitors and modulators to treat type 2 diabetes and obesity
TW201919608A (zh) * 2017-09-11 2019-06-01 美商艾陶莎基因有限公司 局部用組合物
CN116832020A (zh) 2017-09-11 2023-10-03 阿托萨治疗学公司 制备和使用内昔芬的方法
JP7121999B2 (ja) * 2019-09-26 2022-08-19 学校法人九州文化学園 男性性腺機能低下症治療剤
CN114864095B (zh) * 2022-04-29 2024-10-18 西安理工大学 一种结合多运动强度下的狭窄冠脉血运变化的分析方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6696432B1 (en) * 1996-03-06 2004-02-24 Schering Aktiengesellschaft Combination of dehydroepiandrosterone and aromatase inhibitors and use of this combination to produce a medicament for treating relative and absolute androgen deficiency in men
CN102458404A (zh) * 2009-06-16 2012-05-16 恩多研究公司 以性类固醇前驱物组合选择性雌激素受体调节物治疗热潮红、血管舒缩症状及夜汗的技术

Family Cites Families (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3797444A (en) 1971-04-19 1974-03-19 H Stubbs Towing guide
US3742951A (en) 1971-08-09 1973-07-03 Alza Corp Bandage for controlled release of vasodilators
DE3333240A1 (de) 1983-09-12 1985-03-28 Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen Mittel zur transdermalen applikation von arzneimittelwirkstoffen
US4725439A (en) 1984-06-29 1988-02-16 Alza Corporation Transdermal drug delivery device
US4624665A (en) 1984-10-01 1986-11-25 Biotek, Inc. Method of transdermal drug delivery
US4568343A (en) 1984-10-09 1986-02-04 Alza Corporation Skin permeation enhancer compositions
US4666441A (en) 1985-12-17 1987-05-19 Ciba-Geigy Corporation Multicompartmentalized transdermal patches
IE60941B1 (en) 1986-07-10 1994-09-07 Elan Transdermal Ltd Transdermal drug delivery device
US4816258A (en) 1987-02-26 1989-03-28 Alza Corporation Transdermal contraceptive formulations
US5064654A (en) 1989-01-11 1991-11-12 Ciba-Geigy Corporation Mixed solvent mutually enhanced transdermal therapeutic system
US5162037A (en) 1988-04-01 1992-11-10 Whitson Laboratories, Inc. Magnetically influenced homeopathic pharmaceutical formulations, methods of their preparation and methods of their administration
ZA899112B (en) 1988-12-01 1990-08-29 Schering Corp Compositions for transdermal delivery of estradiol
US5071644A (en) 1990-08-07 1991-12-10 Mediventures, Inc. Topical drug delivery with thermo-irreversible gels
US6060503A (en) 1991-12-02 2000-05-09 Endorecherche, Inc. Benzopyran-containing compounds and method for their use
CN1100541C (zh) * 1993-01-19 2003-02-05 恩多研究公司 脱氢表雄酮的治疗用途和传送系统
DE19681496T1 (de) 1995-07-11 1998-12-24 Henrik Carlsen Stirling-Maschine
JP2001500101A (ja) 1996-01-11 2001-01-09 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 乳癌の治療及び予防のための医薬組成物の製造のためのセントクロマンのｌ―鏡像異性体の使用
US5747059A (en) 1996-01-11 1998-05-05 Novo Nordisk A/S Atrophy of skin/mucous membrane
AU1367297A (en) 1996-01-11 1997-08-01 Novo Nordisk A/S Use of 3,4-diphenyl chromans for the manufacture of a pharmaceutical comp osition for the treatment or prophylaxis of menopausal symptoms
US5726202A (en) 1996-01-11 1998-03-10 Novo Nordisk A/S Benign prostatic hypertrophy
US5883118A (en) 1996-01-11 1999-03-16 Nova Nordisk A/S Prostatic carcinoma
IL120266A (en) * 1996-02-28 2005-05-17 Pfizer Use of estrogen antagonists and estrogen agonists in the preparation of medicaments for inhibiting pathological conditions
WO1997032837A1 (fr) 1996-03-06 1997-09-12 Sumitomo Pharmaceuticals Co., Ltd. Derives estrogenes non steroidiens
TW397821B (en) 1996-04-19 2000-07-11 American Home Produits Corp 3-[4-(2-phenyl-indole-1-ylmethyl)-phenyl]-acrylamides and 2-phenyl-1-[4-(amino-1-yl-alk-1-ynyl)-benzyl]-1H-indol-5-ol as well as pharmaceutical compositions of estrogenic agents thereof
EP0802183B1 (en) 1996-04-19 2001-10-10 American Home Products Corporation Estrogenic agents
US5861391A (en) * 1997-01-29 1999-01-19 Research Development Foundation Use of dehydroepiandrosterone to treat primary adrenal insufficiency and Addison's disease
DE19825591A1 (de) 1998-06-09 1999-12-23 Jenapharm Gmbh Pharmazeutische Kombinationen zum Ausgleich eines Testosteron-Defizits beim Mann mit gleichzeitigem Schutz der Prostata
US6465445B1 (en) 1998-06-11 2002-10-15 Endorecherche, Inc. Medical uses of a selective estrogen receptor modulator in combination with sex steroid precursors
US7176279B2 (en) * 2000-06-28 2007-02-13 Palatin Technologies, Inc. Cyclic peptide compositions and methods for treatment of sexual dysfunction
CN1390126B (zh) * 1999-07-06 2012-06-13 恩多研究公司 选择性雌激素受体调节剂在制备用于治疗或降低肥胖症发展危险性的药物中的用途
TW593256B (en) 1999-11-16 2004-06-21 Hormos Medical Oy Ltd Triphenylalkene derivatives and their use as selective estrogen receptor modulators
KR20020073566A (ko) 2000-01-28 2002-09-27 앙도르쉐르슈 인코포레이티드 에스트로겐과 배합된 선택적인 에스트로겐 수용체 조절자
US7067557B2 (en) 2000-05-26 2006-06-27 Harry Fisch Methods of treating androgen deficiency in men using selective antiestrogens
JP2003534375A (ja) 2000-05-26 2003-11-18 フィッチ，ハリー 選択性抗エストロゲン薬を用いた男性におけるアンドロゲン欠乏症の治療法
US7820702B2 (en) * 2004-02-04 2010-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Sulfonylpyrrolidine modulators of androgen receptor function and method
US20050233970A1 (en) * 2004-03-23 2005-10-20 Praecis Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating long QT syndrome
WO2006024689A1 (en) 2004-09-03 2006-03-09 Hormos Medical Ltd. Use of a selective estrogen receptor modulator for the manufacture of a pharmaceutical preparation for use in a method for the treatment or prevention of androgen deficiency
US20060293294A1 (en) 2004-09-03 2006-12-28 Hormos Medical Corporation Method for treatment or prevention of androgen deficiency
US8268806B2 (en) 2007-08-10 2012-09-18 Endorecherche, Inc. Pharmaceutical compositions
US20090215733A1 (en) 2008-02-26 2009-08-27 Michael Charles Scally Therapy for the prophylaxis or treatment of adverse body composition changes and/or decreased muscle strength after androgen or gnrh analogue intake
KR101731008B1 (ko) * 2010-06-16 2017-04-27 앙도르쉐르슈 인코포레이티드 에스트로겐-관련 질병의 치료 또는 예방 방법
EP2814471A1 (en) 2012-02-14 2014-12-24 Repros Therapeutics Inc. Selective estrogen receptor modulators with short half-lives and uses thereof
ES2681023T3 (es) 2012-02-29 2018-09-11 Repros Therapeutics Inc. Terapia de combinación para tratar el déficit de andrógenos
US9744177B2 (en) * 2014-03-10 2017-08-29 Endorecherche, Inc. Treatment of male androgen deficiency symptoms or diseases with sex steroid precursor combined with SERM

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6696432B1 (en) * 1996-03-06 2004-02-24 Schering Aktiengesellschaft Combination of dehydroepiandrosterone and aromatase inhibitors and use of this combination to produce a medicament for treating relative and absolute androgen deficiency in men
CN102458404A (zh) * 2009-06-16 2012-05-16 恩多研究公司 以性类固醇前驱物组合选择性雌激素受体调节物治疗热潮红、血管舒缩症状及夜汗的技术

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113348163A (zh) * 2019-02-12 2021-09-03 雷迪厄斯制药公司 方法和化合物

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