CN106086142A - 一种全血肽粉提取方法及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及膜分离技术提取全血肽粉的方法,新鲜牲畜血经过酶解、离心等步骤后,用膜分离技术对离心液进行分离、纯化和浓缩以及喷雾干燥等步骤,在离心液中,先经过粗过滤器去除大颗粒物质,然后采用陶瓷超滤膜去其中的大分子胶体并将分解后的蛋白质与多肽、氨基酸分离,浓缩液返回酶解罐继续酶解,清液采用电渗析脱盐、反渗透浓缩、喷雾干燥后获得多肽、氨基酸的混合物肽粉。该方法可以有效地获得牲畜血中蛋白质,并提高提取产品的酸溶蛋白含量,提取效率高,同时可以分离出多肽和氨基酸,实现了清洁生产,减少了占地面积。
Description
技术领域
本发明涉及一种膜分离技术提取全血肽粉的方法,特别是一种将酶水解、陶瓷膜、反渗透法耦合提取全血肽粉的方法,属于生物技术酶解全血蛋白及膜分离技术领域。
背景技术
目前,我国饲料中最为重要的蛋白来源是鱼粉。肽粉作为一种很好的饲料添加剂,每公斤可产生消化能41大卡,富含蛋白质,脂肪和多种微量元素,营养成分全面。在鸡、猪、牛等畜禽饲料中添加肽粉,可促进畜禽生长,缩短饲养周期。肽粉动物消化率达90%,赖氨酸为7%~8%,乃所有天然饲料之首,比鱼粉、肉粉含量高,亮氨酸含量8%左右。另外,牲畜血液约占牲畜活重8%,血液的采出率占牲畜活重的3%~5%,就全国而言,可用来加工利用的牲畜血液是一个庞大的数字。现在部分地区采用肽粉和羽毛粉相互配伍,可全部替代优质鱼粉。
中国专利CN101843289B公布了一种用酶解法从牲畜血中提取全血多肽蛋白粉的方法,通过选择合适底物浓度、蛋白水解复合酶和反应温度,使牲畜血通过酶解、还原、干燥和粉碎得到全血多肽蛋白粉。专利CN101263861B公布了一种提取动物水解蛋白粉的方法,通过酶水解、过滤、蒸发浓缩、干燥后得动物水解蛋白粉。上述的方法提取的蛋白质虽然一定程度保留了其生物活性,但过滤精度不高,因此产品纯度不高,此外,所采用浓缩方式均为蒸发浓缩,能耗高且产品中的盐类物质的去除未进行研究。因此要开发一种经济可行,产品纯度高易被吸收的蛋白质的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种膜分离技术提取全血肽粉的方法,需要提高提取蛋白纯度、增加成品中酸溶蛋白的含量,且操作简单、污染小、能实现清洁生产、适用于大规模生产。主要是通过陶瓷膜超滤+反渗透膜集成技术进行纯化浓缩操作,采用的具体技术方案如下:
一种全血肽粉提取方法,包括如下步骤:
第1步、在牲畜血中加入酶进行酶解;
第2步、酶解液进行固液分离处理;
第3步、固液分离得到的料液通过超滤膜进行过滤除杂;
第4步、超滤膜的透过液再经过反渗透膜浓缩处理。
所述的牲畜血是选自猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅等的屠宰后得到的血液。
所述的第1步中,酶解使用的酵素是胰蛋白酶、胰酶制剂、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、激肽释放酶、组织蛋白酶、嗜热菌蛋白酶或者V8蛋白酶等蛋白质分解酶中的一种或者几种的组合;酶解温度55~70℃,酶解pH7~9,酶解时间2~2.5小时。
所述的第2步中,固液分离的方式选自离心分离方式、压榨分离方式、过滤方式、上浮分离方式、沉降分离方式中的一种或者几种的组合;优选先采用离心分离再用粗过滤器进行分离。
所述的第3步中,所述的超滤膜的截留分子量1000~200000Da,超滤膜的材质选自纤维素、纤维素酯、聚砜、聚醚砜、聚氯乙烯、氯丙烯、聚烯烃、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸甲酯、聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯、陶瓷中的一种或者几种的组合。
所述的第3步中,所述的超滤膜是陶瓷超滤膜,平均孔径的范围是50~200nm,跨膜压差范围是0.1~0.3MPa,膜面流速2~5m/s,超滤过滤温度优选是40~60℃,超滤浓缩倍数是3~4倍。
所述的第4步中,反渗透膜的材质选自醋酸纤维素类聚合物、聚酰胺、聚酯、聚酰亚胺或者乙烯基聚合物等中的一种或者几种的组合;反渗透工艺优选参数是:操作压力为2.5~3.0 MPa,循环流量为2.0~3.0m³/h,浓缩倍数是2~3倍。
在一个实施例中,反渗透膜得到的浓缩液再经过干燥处理;干燥处理优选采用喷雾干燥。
在一个实施例中,超滤膜的透过液经过电渗析脱盐之后,再送入反渗透膜进行浓缩。电渗析脱盐优选的运行参数是:电渗析操作电压为100~200V,电流1~3A,进料压力为0.05~0.2MPa。
一种全血肽粉提取装置,包括有:
酶解罐,用于对牲畜血进行酶解处理;
固液分离装置,用于对酶解罐中得到的酶解液进行固液分离处理;
超滤膜,用于对固液分离后的料液进行过滤除杂;
反渗透膜,用于对超滤膜4的渗透液进行浓缩处理。
所述的固液分离装置选自离心分离装置、压榨分离装置、过滤装置、上浮分离装置、沉降分离装置中的一种或者几种的组分;优选先采用离心分离装置和粗过滤器的组合,离心分离装置用于对酶解液进行离心处理,粗过滤器用于对离心分离装置得到的母液进行过滤除杂处理。
所述的超滤膜的截留分子量1000~200000Da,超滤膜的材质选自纤维素、纤维素酯、聚砜、聚醚砜、聚氯乙烯、氯丙烯、聚烯烃、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸甲酯、聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯、陶瓷中的一种或者几种的组合。
所述的超滤膜是陶瓷超滤膜,平均孔径的范围是50~200nm。
反渗透膜的材质选自醋酸纤维素类聚合物、聚酰胺、聚酯、聚酰亚胺或者乙烯基聚合物等中的一种或者几种的组合。
在一个实施例中,还包括有干燥装置,用于对反渗透膜的浓缩液进行干燥处理。
干燥装置是喷雾干燥装置。
在一个实施例中,装置中还包括有电渗析装置,用于对进入反渗透膜进行浓缩的超滤膜4的渗透液进行脱盐处理。
所述的装置中还包括有酶投加部件,用于向牲畜血中加入酶。
有益效果
本发明提供了一种膜分离技术提取全血肽粉的方法,采用酶水解和陶瓷膜+反渗透法耦合,操作简单、提取率高,能耗低,实现了清洁生产,减少了占地面积。陶瓷超滤过程极大减轻电渗析脱盐系统和反渗透系统的污染,反渗透系统替代传统双效蒸发浓缩能大大降低能耗,提升产品品质,适用于工业生产。
附图说明
图1是本发明提供的装置图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细说明。但本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
以范围形式表达的值应当以灵活的方式理解为不仅包括明确列举出的作为范围限值的数值,而且还包括涵盖在该范围内的所有单个数值或子区间,犹如每个数值和子区间被明确列举出。例如,“大约0.1%至约5%”的浓度范围应当理解为不仅包括明确列举出的约0.1%至约5%的浓度,还包括有所指范围内的单个浓度(如,1%、2%、3%和4%)和子区间(例如,0.1%至0.5%、1%至2.2%、3.3%至4.4%)。本发明中所述的百分比在无特别说明的情况下,是指重量百分比。
在本说明书中所述及到的“一个实施例”、“另一个实施例”、“实施方式”等,指的是结合该实施例描述的具体特征、结构或者包括在本申请概括性描述的至少一个实施例中。在说明书中多个地方出现同种表述不是一定指的是同一个实施例。进一步来说,结合任一实施例描述一个具体特征、结构或者特点时,所要主张的是结合其他实施例来实现这种特征、结构或者特点也落在本申请所要保护的范围内。
本发明的提取方法第一步是通过酶解的作用将牲畜血中蛋白质大分子酶解,使其更易被分离、纯化、而且更易动物吸收,另外,由于在酶解过程中会产生一部分多肽和氨基酸,同时含有大量杂质,这一部分的水解物中的多肽和氨基酸是成品肽粉中酸溶蛋白主要组成成分,需要将其从蛋白质中分离,提高产物的品质,本发明通过对酶解液进行固液初步分离、超滤精密分离的过程将杂质去除,再通过反渗透浓缩、干燥将其提取。水解工艺的参数包括有酶的类型、酶解pH、酶解温度和酶解时间等,酶解工艺的不同会影响到蛋白质的酶解程度、超滤的工艺参数、产物的收率等。如果酶解程度较高,会导致蛋白质过多的被水解而收率低;相反,如果酶解程度不够,则会导致蛋白质不能完全水解、较多的蛋白质会对超滤膜产生污染。较为优选的酶解参数是:酶解使用的酵素是胰蛋白酶、胰酶制剂、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、激肽释放酶、组织蛋白酶、嗜热菌蛋白酶和V8蛋白酶等蛋白质分解酶;酶解温度55~70℃,酶解pH7~9,酶解时间2~2.5小时。
本发明中所述的牲畜血,没有特别限定,只要是通常养殖的家畜类的血液都可以实现,例如:猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅等的屠宰后得到的血液。
在得到了酶解液之后,可以通过固液分离的方式将其中的较大的固体物进行去除,这里的固液分离的方式,没有特别限定。作为具体的固液分离处理的方法,可举出离心分离方式、压榨分离方式、过滤方式、上浮分离方式、沉降分离方式。作为离心分离方式,可以例示卧式连续离心分离机(螺旋倾析器处理)、分离板式离心分离机、离心过滤机、厦普勒斯型超离心分离机,作为过滤方式,可以例示带式过滤机、压带机、螺杆压机、预涂过滤器、压滤机,作为上浮分离方式,可以例示连续上浮分离装置,作为沉降分离方式,可以例示凝集沉降分离机、迅速沉降分离机等,但不特别限定于上述的任一项。然而能够通过上述的任一项或其组合来减少精密过滤膜和/或超滤膜处理时对膜的负荷。较优选的方式是先通过离心分离出固体物,再用粗过滤器经过过滤后,再送入至后续的超滤膜进行过滤除杂。离心参数优选是:主电机2500~3000转/分钟,辅电机1000转/分钟。第三步中,水解物首先需要通过粗过滤器去除其中的大颗粒杂质,这主要是牲畜毛、皮等,可以减轻超滤膜的污染、提高产品纯度,粗过滤器可以是常规的板框、碟片等。
本发明中所使用的超滤膜,为截留分子量是1000~200000的膜,简称为超滤膜、UF膜等。在此,由于超滤膜的孔径过小而难以用电子显微镜等来测定膜表面的孔径,所以用称为截留分子量的值代替平均孔径来作为孔径大小的指标。关于截留分子量,如在本领域手册中所述的:“将以溶质分子量为横轴、阻止率为纵轴,对数据进行绘制而成的曲线称为截留分子量曲线。而且将阻止率为90%的分子量称为膜的截留分子量”,截留分子量作为表示超滤膜的膜性能的指标,为本领域技术人员所熟知。
作为这些超滤膜的材质,只要能够实现除去上述水溶性高分子和胶体成分这样的本发明目的即可,没有特别限定,可以举出:纤维素、纤维素酯、聚砜、聚醚砜、聚氯乙烯、氯丙烯、聚烯烃、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸甲酯、聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯等有机材料,或者不锈钢等金属、或者陶瓷等无机材料。超滤膜的材质可以考虑酶解物的性状或者运行成本来适当选择,从膜的运行寿命考虑,优选陶瓷材料的超滤膜。作为构成陶瓷分离膜的多孔膜的材料,能够从现有公知的陶瓷材料中适当选择。例如,可以使用氧化铝、氧化锆、氧化镁、氧化硅、氧化钛、氧化铈、氧化钇,钛酸钡等氧化物类材料;堇青石、多铝红柱石、镁橄榄石、块滑石、硅铝氧氮陶瓷、锆石、铁酸盐等复合氧化物类材料;氮化硅,氮化铝等氮化物类材料;碳化硅等碳化物类材料;羟基磷灰石等氢氧化物类材料;碳、硅等元素类材料;或者含有它们的两种以上的无机复合材料等。还可以使用天然矿物(粘土、粘土矿物、啕渣、硅砂、陶石、长石、白砂)或高炉炉渣、飞灰等。其中,优选选自氧化铝、二氧化锆、氧化钛、氧化镁、氧化硅中的1种或2种以上,更优选以氧化铝、二氧化锆或者氧化钛作为主体构成的陶瓷粉末。其中,这里所说的“作为主体”表示陶瓷粉末总体的50质量%以上(优选75质量%以上、更优选80质量%~100质量%)为氧化铝或二氧化硅。例如,在多孔材料中,氧化铝较为廉价且操作性优异。并且,能够容易地形成具有适合于液体分离的孔径的多孔结构,因此能够容易地制造具有优异的液体透过性的陶瓷分离膜。并且,在上述氧化铝中,特别优选使用α-氧化铝。α-氧化铝具有在化学方面稳定、且熔点和机械强度高的特性。因此,通过使用α-氧化铝,能够制造可以在宽泛用途(例如工业领域)中利用的陶瓷分离膜。
陶瓷超滤膜的操作过程中,经过大量试验摸索,超滤膜的平均孔径的范围是50~200nm,因为孔径太大,会导致产物的纯度下降;孔径太小,在通量较低的同时一部分蛋白质也被截留,产品得率降低。陶瓷超滤膜的材质优选是氧化铝、氧化锆、氧化钛中的一种。在超滤过程中,跨膜压差的选择与超滤膜的平均孔径、过滤通量、产物纯度都有着相互影响的关系,如果跨膜压差过大,会导致一部分蛋白质胶体受压后穿过膜孔达到渗透侧,影响产品纯度,如果跨膜压差过小,则会导致过滤通量过小,成本增加。经过大量试验的摸索,优选的跨膜压差范围是0.1~0.3MPa。膜面流速会影响到过滤通量,如果膜面流速过大,跨膜压差会降低,过滤通量会过小,如果膜面流速过小,膜面污染会加剧,通量稳定性会降低,优选的范围是2~5m/s。过滤温度优选是40~60℃,浓缩比优选是物料浓缩3~4倍。
在得到超滤的透过液之后,可以通过浓缩的方式对料液进行处理,以使氨基酸和多肽得到浓缩,这里优选的浓缩的方式是采用反渗透进行浓缩,由于反渗透对于盐具有一定的透过性,可以使物料中的部分无机盐透过,以使氨基酸和多肽得到提纯。
作为反渗透膜的材料,一般使用醋酸纤维素类聚合物、聚酰胺、聚酯、聚酰亚胺、乙烯基聚合物等高分子材料。另外,作为其构造,有在膜的至少一侧具有致密层,从该致密层向膜内部或者另一侧的表面具有缓缓变大的孔径的微细孔的非对称膜以及在该非对称膜的致密层上具有由其他材料形成的非常薄的活性层的复合膜等。其中,作为反渗透膜的形式,有中空丝、平膜等。通常,优选中空丝和平膜的膜厚为10μm~1mm,中空丝的外径为5 0μm~4mm。另外,作为平膜,优选非对称膜,作为复合膜优选被织物、编织物、无纺布等基材支撑的膜。但是,本发明的方法可以不依赖于反渗透膜的材料、膜构造或形式地加以利用,对于任意一种情况都有效。作为代表性的反渗透膜,例如可以例举醋酸纤维素类或聚酰胺类非对称膜、具有聚酰胺类、聚脲类活性层的复合膜等。其中,本发明的方法对于醋酸纤维素类非对称膜、聚酰胺类复合膜特别有效。反渗透膜组件是为了实际使用上述反渗透膜而使之形状化的物质。反渗透膜的形式是平膜的情况下,可以编入螺旋状、管状或者板与框的组件中进行使用,另外,在中空丝的情况下,可以在成束的基础上编入组件进行使用。本发明可以不依赖于这些反渗透膜组件的构成形式地适用。反渗透工艺优选参数是:操作压力为2.5~3.0 MPa,循环流量为2.0~3.0m³/h,浓缩倍数是2~3倍。反渗透浓缩可以大大缩小料液体积,减轻后续喷雾干燥的负荷。经过大量实验摸索,反渗透膜截留分子量选择50Da~100Da,因为料液中含赖氨酸、色氨酸等小分子氨基酸,截留分子量过大会使收率降低;截留分子量过小会使能耗增高。
在得到了反渗透浓缩液之后,可以通过其它的干燥的方式获得固体粉末,例如可以采用喷雾干燥方式对反渗透浓缩液进行处理,操作时间短,可以保证蛋白质在干燥的过程中不会被破坏,得到含多肽和氨基酸的肽粉。
在一个实施方式中,可以采用电渗析对超滤透过液进行脱盐处理后,再送入反渗透膜进行浓缩,电渗析因操作条件温和、无相变和容易放大等特点具有良好的脱盐效果,显著提升了产品品质,并可以提高反渗透膜的截留率,优选的运行参数是:电渗析操作电压为100~200V,电流1~3A,进料压力为0.05~0.2MPa。
本发明提供的装置如图1所示,包括有:
酶解罐1,用于对牲畜血进行酶解处理;
固液分离装置8,用于对酶解罐中得到的酶解液进行固液分离处理;
超滤膜4,用于对固液分离后的料液进行过滤除杂;
反渗透膜6,用于对超滤膜4的渗透液进行浓缩处理;
干燥装置7,用于对反渗透膜6的浓缩液进行干燥处理。
在一个实施例中,固液分离装置8中包括有离心分离装置2和粗过滤器3,离心分离装置2用于对酶解液进行离心处理,粗过滤器3用于对离心分离装置2得到的母液进行过滤除杂处理。
在一个实施例中,装置中还包括有电渗析装置5,用于对进入反渗透膜6进行浓缩的超滤膜4的渗透液进行脱盐处理。
在一个实施例中,干燥装置7是喷雾干燥装置。
实施例1
取生猪屠宰厂得到的牲畜血200kg泵入酶解罐,通入蒸汽升温至55℃,加入胰蛋白酶
100g进行酶解,控制pH为7,酶解2h,酶解温度65℃。将酶解液送入离心机进行离心,主电机
2500转/分钟,辅电机1000转/分钟。离心机母液送入板框进行压滤后进入陶瓷超滤膜,陶瓷
超滤膜的平均孔径是分别是采用20 nm、50 nm、200 nm、500 nm,材质是氧化铝,超滤过程跨
膜压差0.1Mpa,膜面流速2 m/s,过滤温度40℃,将料液浓缩3倍后停止。将超滤浓液返回酶
解罐继续酶解,超滤的渗透液送入反渗透膜进行浓缩,操作压力为2MPa,循环流量为3.0m³/
h,浓缩倍数是3倍,得到多肽类与氨基酸的混合物。在不同条件下的试验结果如下:
陶瓷膜平均孔径 | 20nm | 50nm | 200nm | 500nm |
肽含量 g/100g | 12.4 | 14.1 | 13.8 | 11.4 |
肽粉中酸溶总氨基酸含量 g/100g | 15.4 | 16.3 | 16.4 | 14.2 |
反渗透膜氨基酸截留率 % | 95.4 | 96.3 | 96.5 | 94.2 |
肽粉数均分子量 | 513 | 564 | 789 | 2432 |
肽粉重均分子量 | 538 | 623 | 884 | 2682 |
挥发性盐基氮 mg/100g | 72 | 70 | 84 | 96 |
脂肪 % | 0.9 | 0.8 | 1.3 | 1.5 |
实施例2
取生猪屠宰厂得到的牲畜血200kg泵入酶解罐,通入蒸汽升温至55℃,加入胰蛋白酶
100g进行酶解,控制pH为7,酶解2h,酶解温度65℃。将酶解液送入离心机进行离心,主电机
2500转/分钟,辅电机1000转/分钟。离心机母液送入板框进行压滤后进入陶瓷超滤膜,陶瓷
超滤膜的平均孔径是50 nm,材质是氧化铝,超滤过程跨膜压差分别是0.1、0.2、0.3、0.4、
0.5Mpa,膜面流速2 m/s,过滤温度40℃,将料液浓缩3倍后停止。将超滤浓液返回酶解罐继
续酶解,超滤的渗透液送入反渗透膜进行浓缩,操作压力为2MPa,循环流量为3.0m³/h,浓缩
倍数是3倍,得到多肽类与氨基酸的混合物。在不同条件下的试验结果如下:
陶瓷膜跨膜压差 MPa | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
肽含量 g/100g | 14.1 | 14.3 | 14.5 | 13.2 | 13.6 |
肽粉中酸溶总氨基酸含量 g/100g | 16.3 | 16.4 | 15.6 | 15.3 | 15.1 |
反渗透膜氨基酸截留率 % | 96.3 | 96.5 | 95.6 | 95.7 | 95.1 |
肽粉数均分子量 | 564 | 532 | 635 | 754 | 891 |
肽粉重均分子量 | 623 | 565 | 681 | 795 | 962 |
挥发性盐基氮 mg/100g | 70 | 72 | 86 | 84 | 88 |
脂肪 % | 0.8 | 0.7 | 0.9 | 1.1 | 1.1 |
实施例3
取生猪屠宰厂得到的牲畜血200kg泵入酶解罐,通入蒸汽升温至55℃,加入胰蛋白酶
80g进行酶解,控制pH为7,酶解3h,酶解温度60℃。将酶解液送入离心机进行离心,主电机
2000转/分钟,辅电机1500转/分钟。离心机母液送入板框进行压滤后进入陶瓷超滤膜,陶瓷
超滤膜的平均孔径是200 nm,材质是氧化铝,超滤过程跨膜压差分别是0.3Mpa,膜面流速2
m/s,过滤温度35℃,将料液浓缩4倍后停止。将超滤浓液返回酶解罐继续酶解,超滤的渗透
液送入反渗透膜进行浓缩,操作压力分别为1.5、2.0、2.5、3.0MPa,循环流量为2.5m³/h,浓
缩倍数是3.5倍,得到多肽类与氨基酸的混合物。在不同条件下的试验结果如下:
反渗透操作 MPa | 1.5 | 2.0 | 2.5 | 3.0 |
肽含量 g/100g | 13.6 | 12.4 | 14.1 | 13.8 |
肽粉中酸溶总氨基酸含量 g/100g | 16.5 | 15.4 | 16.3 | 16.4 |
反渗透膜氨基酸截留率 % | 95.4 | 96.9 | 96.8 | 97.1 |
肽粉数均分子量 | 768 | 786 | 795 | 826 |
肽粉重均分子量 | 779 | 854 | 815 | 849 |
挥发性盐基氮 mg/100g | 75 | 83 | 79 | 80 |
脂肪 % | 1.1 | 1.2 | 1.1 | 1.2 |
实施例4
取生猪屠宰厂得到的牲畜血200kg泵入酶解罐,通入蒸汽升温至55℃,加入胰蛋白酶
100g进行酶解,控制pH为7,酶解2h,酶解温度65℃。将酶解液送入离心机进行离心,主电机
2500转/分钟,辅电机1000转/分钟。离心机母液送入板框进行压滤后进入陶瓷超滤膜,陶瓷
超滤膜的平均孔径是分别是采用20 nm、50 nm、200 nm、500 nm,材质是氧化铝,超滤过程跨
膜压差0.1Mpa,膜面流速2 m/s,过滤温度40℃,将料液浓缩3倍后停止。将超滤浓液返回酶
解罐继续酶解,超滤的渗透液送入电渗析装置脱盐,电渗析操作电压为150V,电流2A,进料
压力为0.1MPa,电渗析的脱盐液送入反渗透膜进行浓缩,操作压力为2MPa,循环流量为3.0m
³/h,浓缩倍数是3倍,得到多肽类与氨基酸的混合物。在不同条件下的试验结果如下:
陶瓷膜平均孔径 | 20nm | 50nm | 200nm | 500nm |
肽含量 g/100g | 13.7 | 14.5 | 14.6 | 12.3 |
肽粉中酸溶总氨基酸含量 g/100g | 16.2 | 16.5 | 16.7 | 14.8 |
反渗透膜氨基酸截留率 % | 97.2 | 98.7 | 97.7 | 96.6 |
肽粉数均分子量 | 502 | 534 | 782 | 2653 |
肽粉重均分子量 | 528 | 603 | 852 | 2745 |
挥发性盐基氮 mg/100g | 38 | 37 | 40 | 42 |
脂肪 % | 0.7 | 0.7 | 1.1 | 1.3 |
实施例5
取生猪屠宰厂得到的牲畜血200kg泵入酶解罐,通入蒸汽升温至55℃,加入胰蛋白酶80g进行酶解,控制pH为9,酶解3h,酶解温度60℃。将酶解液送入离心机进行离心,主电机2000转/分钟,辅电机1500转/分钟。离心机母液送入板框进行压滤后进入陶瓷超滤膜,陶瓷超滤膜的平均孔径是200 nm,材质是氧化铝,超滤过程跨膜压差分别是0.3Mpa,膜面流速2m/s,过滤温度35℃,将料液浓缩4倍后停止。将超滤浓液返回酶解罐继续酶解,超滤的渗透液送入反渗透膜进行浓缩,操作压力分别为1.5、2.0、2.5、3.0MPa,循环流量为2.5m³/h,浓缩倍数是3.5倍,得到多肽类与氨基酸的混合物。在不同条件下的试验结果如下。
反渗透操作 MPa | 1.5 | 2.0 | 2.5 | 3.0 |
肽含量 g/100g | 13.5 | 12.4 | 14.2 | 13.9 |
肽粉中酸溶总氨基酸含量 g/100g | 16.6 | 15.3 | 16.2 | 16.5 |
反渗透膜氨基酸截留率 % | 96.7 | 97.6 | 97.5 | 97.9 |
肽粉数均分子量 | 757 | 756 | 783 | 811 |
肽粉重均分子量 | 783 | 838 | 821 | 835 |
挥发性盐基氮 mg/100g | 76 | 81 | 79 | 81 |
脂肪 % | 1.0 | 1.1 | 1.1 | 1.1 |
Claims (10)
1.一种全血肽粉提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
第1步、在牲畜血中加入酶进行酶解;
第2步、酶解液进行固液分离处理;
第3步、固液分离得到的料液通过超滤膜进行过滤除杂;
第4步、超滤膜的透过液再经过反渗透膜浓缩处理。
2.根据权利要求1所述的全血肽粉提取方法,其特征在于,所述的牲畜血是选自猪、牛、羊、马、驴、鸡、鸭、鹅等的屠宰后得到的血液;所述的第1步中,酶解使用的酵素是胰蛋白酶、胰酶制剂、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、激肽释放酶、组织蛋白酶、嗜热菌蛋白酶或者V8蛋白酶等蛋白质分解酶中的一种或者几种的组合;酶解温度55~70℃,酶解pH7~9,酶解时间2~2.5小时。
3.根据权利要求1所述的全血肽粉提取方法,其特征在于,所述的第2步中,固液分离的方式选自离心分离方式、压榨分离方式、过滤方式、上浮分离方式、沉降分离方式中的一种或者几种的组合;优选先采用离心分离再用粗过滤器进行分离。
4.根据权利要求1所述的全血肽粉提取方法,其特征在于,所述的第3步中,所述的超滤膜的截留分子量1000~200000Da,超滤膜的材质选自纤维素、纤维素酯、聚砜、聚醚砜、聚氯乙烯、氯丙烯、聚烯烃、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸甲酯、聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯、陶瓷中的一种或者几种的组合;所述的第3步中,所述的超滤膜是陶瓷超滤膜,平均孔径的范围是50~200nm,跨膜压差范围是0.1~0.3MPa,膜面流速2~5m/s,超滤过滤温度优选是40~60℃,超滤浓缩倍数是3~4倍。
5.根据权利要求1所述的全血肽粉提取方法,其特征在于,所述的第4步中,反渗透膜的材质选自醋酸纤维素类聚合物、聚酰胺、聚酯、聚酰亚胺或者乙烯基聚合物等中的一种或者几种的组合;反渗透工艺优选参数是:操作压力为2.5~3.0 MPa,循环流量为2.0~3.0m³/h,浓缩倍数是2~3倍;反渗透膜得到的浓缩液再经过干燥处理;干燥处理优选采用喷雾干燥;超滤膜的透过液经过电渗析脱盐之后,再送入反渗透膜进行浓缩;6. 电渗析脱盐优选的运行参数是:电渗析操作电压为100~200V,电流1~3A,进料压力为0.05~0.2MPa。
6.一种全血肽粉提取装置,其特征在于,包括有:
酶解罐(1),用于对牲畜血进行酶解处理;
固液分离装置(8),用于对酶解罐中得到的酶解液进行固液分离处理;
超滤膜(4),用于对固液分离后的料液进行过滤除杂;
反渗透膜(6),用于对超滤膜(4)的渗透液进行浓缩处理。
7.根据权利要求6所述的全血肽粉提取装置,其特征在于,所述的固液分离装置(8)选自离心分离装置、压榨分离装置、过滤装置、上浮分离装置、沉降分离装置中的一种或者几种的组分;优选先采用离心分离装置(2)和粗过滤器(3)的组合,离心分离装置(2)用于对酶解液进行离心处理,粗过滤器(3)用于对离心分离装置(2)得到的母液进行过滤除杂处理;所述的超滤膜(4)的截留分子量1000~200000Da,超滤膜(4)的材质选自纤维素、纤维素酯、聚砜、聚醚砜、聚氯乙烯、氯丙烯、聚烯烃、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸甲酯、聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯、陶瓷中的一种或者几种的组合;所述的超滤膜(4)是陶瓷超滤膜,平均孔径的范围是50~200nm。
8.根据权利要求6所述的全血肽粉提取装置,其特征在于,反渗透膜(6)的材质选自醋酸纤维素类聚合物、聚酰胺、聚酯、聚酰亚胺或者乙烯基聚合物等中的一种或者几种的组合。
9.根据权利要求6所述的全血肽粉提取装置,其特征在于,还包括有干燥装置(7),用于对反渗透膜(6)的浓缩液进行干燥处理。
10.根据权利要求9所述的全血肽粉提取装置,其特征在于,干燥装置(7)是喷雾干燥装置;装置中还包括有电渗析装置(5),用于对进入反渗透膜(6)进行浓缩的超滤膜(4)的渗透液进行脱盐处理;所述的装置中还包括有酶投加部件,用于向牲畜血中加入酶。
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