CN106074673B - 傣药肾叶山蚂蝗在制备治疗男性勃起功能障碍的药物或保健食品中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了傣药肾叶山蚂蝗在制备治疗男性勃起功能障碍的药物或保健食品中的用途。本发明还提供了新的肾叶山蚂蝗的提取物。本发明肾叶山蚂蝗及其提取物可以有效治疗勃起功能障碍，为临床治疗勃起功能障碍提供了一种新的选择。
Description
技术领域
本发明涉及傣药肾叶山蚂蝗在制备男性勃起功能障碍药物或保健品种的用途。
背景技术
勃起功能障碍(Erectile Dysfunction，ED)是指阴茎不能持续获得或维持充分的勃起以完成满意的性交，持续至少6个月以上。ED是男性常见的性功能障碍，主要影响40岁以上的男性，其患病率随年龄的增长而增高。据研究，40～70岁男子中有52％患有不同程度的勃起功能障碍。近年来，随着生活、工作、心理等各方面的压力逐步加大，ED的患病率呈现不断增高并出现年轻化的趋势。1998年正式上市的西地那非(Sildenafil)为选择性5型磷酸二酯酶抑制剂(PDE5-Is)，被认为是第一个可有效治疗ED的口服药物，目前，PDE5-Is已经成为治疗ED的最主要的药物。目前用于临床治疗ED的其它方式还包括：性心理治疗，改善生活方式，阴茎海绵体注射治疗，睾酮替代治疗，负压缩窄装置和手术治疗等。但上述治疗方式均具有其局限性。需要寻找其他治疗ED的药物。
傣药肾叶山蚂蝗是豆科植物肾叶山蚂蝗[Desmodiumrenifolium(Linn.)Schindler]的干燥根。肾叶山蚂蝗为多年生匍匐性草本，广泛分布于亚洲热带地区，包括我国的安徽、浙江、江西、福建、广东、广西、四川、贵州、云南、台湾等地，澳洲热带亦有分布。它具有清热解热、止咳化痰、通气止痛、利水退黄、补气增性的功效，可用于治疗热季感冒、咽喉肿痛、咳嗽喘息、胆汁病出现的黄疸、体弱多病等。未见傣药肾叶山蚂蝗治疗ED的报道。
发明内容
本发明的技术方案是提供了肾叶山蚂蝗及其提取物在制备治疗勃起功能障碍的药物或保健食品中的用途。
其中，所述的肾叶山蚂蝗是豆科植物肾叶山蚂蝗Desmodiumrenifolium(Linn.)Schindler的干燥根。
其中，所述的肾叶山蚂蝗的提取物为水提取物或者醇提取物。
其中，所述的肾叶山蚂蝗的水提取物按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，加5～9倍量的水浸泡1～2h，煮沸30～60min，过滤，药渣加3～7倍量水继续煎煮，煮沸25～50min，过滤，再重复1～2次，合并滤液，浓缩，得水提物；优选地，按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，加7倍量的水浸泡1～2h，煮沸45min，过滤，药渣加5倍量水继续煎煮，煮沸35min，过滤，再重复1次，合并3次滤液，浓缩，得水提物。
其中，所述肾叶山蚂蝗的醇提取物按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，用90-95％乙醇回流提取，得乙醇提取物。优选地，所述肾叶山蚂蝗的醇提取物按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，加6～10倍量的95％乙醇进行连续回流提取，重复2～4次，每次30～60min，合并提取液，抽滤，挥去乙醇，得乙醇提取物；进一步优选地，按照如下方法制备：加8倍量的95％乙醇进行连续回流提取，重复3次，每次45min，合并提取液，抽滤，挥去乙醇，得乙醇提取物。
其中，所述药物或保健食品是提高血清睾丸酮含量和/或降低血清雌二醇含量的药物或保健食品。
本发明还提供了一种肾叶山蚂蝗水提物，它是按照如下方法制备的：取肾叶山蚂蝗，加7倍量的水浸泡1-2h，煮沸45min，过滤，药渣加5倍量水继续煎煮，煮沸35min，过滤，再重复1次，合并3次滤液，浓缩，得水提物；优选地，按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，加5～9倍量的水浸泡1-2h，煮沸30～60min，过滤，药渣加3～7倍量水继续煎煮，煮沸25～50min，过滤，再重复1～2次，合并滤液，浓缩，得水提物；优选地，按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，加5-9倍量的水浸泡1-2h，煮沸45min，过滤，药渣加5倍量水继续煎煮，煮沸35min，过滤，再重复1次，合并3次滤液，浓缩，得水提物。
本发明还提供了一种肾叶山蚂蝗醇提物，它是按照如下方法制备的：取肾叶山蚂蝗，用90-95％乙醇回流提取，得乙醇提取物。优选地，它是按照如下方法制备的：取肾叶山蚂蝗，加6～10倍量的95％乙醇进行连续回流提取，重复2～4次，每次30～60min，合并提取液，抽滤，挥去乙醇，得乙醇提取物；进一步优选地，按照如下方法制备：加8倍量的95％乙醇进行连续回流提取，重复3次，每次45min，合并提取液，抽滤，挥去乙醇，得乙醇提取物。
本发明肾叶山蚂蝗及其提取物可以有效治疗勃起功能障碍，且其本身无毒性，可以制成药物或保健食品中，为临床治疗勃起功能障碍提供了一种新的选择。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
实施例1本发明水提物的制备方法
取肾叶山蚂蝗，加5倍量的水浸泡1～2h，煮沸30，过滤，药渣加3倍量水继续煎煮，煮沸25min，过滤，再重复2次，合并滤液，浓缩，得水提物。
实施例2本发明水提物的制备方法
取肾叶山蚂蝗，加9倍量的水浸泡1～2h，煮沸60min，过滤，药渣加7倍量水继续煎煮，煮沸50min，过滤，再重复1次，合并滤液，浓缩，得水提物。
实施例3本发明水提物的制备方法
肾叶山蚂蝗，加6倍量的95％乙醇进行连续回流提取，重复2次，每次30min，合并提取液，抽滤，挥去乙醇，得乙醇提取物。
实施例4本发明水提物的制备方法
肾叶山蚂蝗，加10倍量的95％乙醇进行连续回流提取，重复4次，每次60min，合并提取液，抽滤，挥去乙醇，得乙醇提取物。
实施例5本发明水提物的制备方法
肾叶山蚂蝗，加8倍量90％乙醇进行连续回流提取，重复3次，每次45min，合并提取液趁热抽滤，滤液置旋转蒸发仪上浓缩挥去大部分的乙醇，至闻不到乙醇味，得乙醇提取物。
以下通过实验例的方式来说明本发明的有益效果：
实验例1傣药肾叶山蚂蝗对急勃起功能障碍的治疗作用
1.材料
1.1动物
SPF级SD大鼠，体重200g±20g，120只，雌雄各半，购自成都达硕实验动物有限公司，合格证号：SCXK(川)2013-24。
1.2药物和试剂
傣药肾叶山蚂蝗(由云南省高校民族医药现代研究重点实验室提供)分为a.醇提：加8倍量95％乙醇进行连续回流提取，重复3次，每次45min，合并提取液趁热抽滤，滤液置旋转蒸发仪上浓缩挥去大部分的乙醇，至闻不到乙醇味，即得乙醇提取液，备用；b.水提：加相当于药材量7倍的冷水浸泡1-2h,煮沸45min，过滤。药渣加5倍量水继续煎煮，煮沸35min,过滤，再重复1次。合并3次滤液浓缩，备用；
龟鹿补肾片(国药准字z20080217广东新宝制药有限公司)；万艾可(枸橼酸西地那非片，简称西地那非)；
睾酮(T)酶联免疫吸附测定试剂盒，伊莱瑞特生物科技有限公司，产品货号：E-EL-0072c；雌二醇(E2)酶联免疫吸附测定试剂盒，伊莱瑞特生物科技有限公司，产品货号：E-EL-0065c。
1.3仪器
旋转蒸发仪(BUCHI瑞士公司)；
台式高速冷冻离心机(美国赛默飞世尔Primo R)；
双门立式超低温冰箱(美国赛默飞世尔REVCO Ux300)；
全波长扫描式多功能酶标仪(VaricsKar)
2.方法
2.1雌性大鼠的准备
为消除雌性大鼠在进行交配实验时动情期的不同，进行双侧卵巢切除术，并同时注射雌激素。方法为：雌性大鼠在10％水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉下，背部朝上固定于鼠板上，在大鼠最末肋骨下，腋中线和距脊柱外侧约2cm交叉处剪除长毛，切开皮肤和背肌，有乳白色发亮的脂肪团，其中便包埋着卵巢。用小镊子轻夹脂肪团，拉出切口外，分离脂肪，即见粉红色卵巢。取一丝线将卵巢下输卵管及脂肪一并结扎，剪下卵巢，将子宫角送回腹腔，然后摘取对侧卵巢，术后肌注青霉素20万U/kg抗感染治疗3天，常规饲养，1个月后进行交配试验，实验前48小时皮下注射苯甲酸雌二醇0.2mg/只，4小时前再次经皮下注射黄体酮0.4mg/只。
2.2大鼠给药及交配实验
选择雄性性成熟大鼠正常饲养，随机分为空白组、龟鹿补肾片组(0.93g生药/kg)、水提取物组高剂量组(13g生药/kg)、水提取物低剂量组(4.05g生药/kg)、乙醇提取物组(13g生药/kg)、万艾可组(0.13g/kg)，共六组。龟鹿补肾片组、水提高剂量及醇提组给药量按大鼠体表面积折算等效量的3倍；水提低剂量组按大鼠体表面积折算的等效量计算，每组大鼠除万艾可组于试验前1h灌胃给药外，其余每天灌胃两次，早晚各一次，灌胃容积均为1ml/100g，各组均灌胃培养28天，每日饲料与水正常供给，每周按时称量大鼠体重保证其发育正常。灌胃结束后，使雌性大鼠动情期相同，实验于晚上7-11时进行，将雄性大鼠单独放入笼中5min，使其适应环境，然后每笼加入1只雌鼠，观察记录捕捉潜伏期(自雌鼠投入至雄鼠第一次捕捉雌鼠的时间)、20min内雄鼠捕捉雌鼠的次数、交配潜伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次与雌鼠交配的时间)、20min内交配次数，
2.3性激素检测
待测定行为学指标结束后，雄性大鼠用10％水合氯醛腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，3000r/min,离心15分钟，取上清液，-20℃分装冷藏,待测定血清睾丸酮,雌二醇含量，睾酮(T)酶联免疫吸附测定试剂盒测定睾酮含量，雌二醇(E2)酶联免疫吸附测定试剂盒测定雌二醇。
3.结果
实验结果用SPSS软件进行统计，计量资料用均数±标准差(x±s)表示，样本比较用t检验，P＜0.05为有统计学意义，则说明傣药肾叶山蚂蝗对大鼠性行为及性激素影响具有统计学意义。
3.1傣药肾叶山蚂蝗对大鼠性行为的影响
结果见表1：
表1傣药肾叶山蚂蝗对大鼠性行为的影响(n＝10x±s)
注：与空白组比较*P<0.05，ΔP<0.01.
由表1可以看出：与空白组比较，阳性对照药万艾可明显缩短雄性大鼠捕捉潜伏期、明显增加捕捉次数、显著缩短交配潜伏期、明显增加20min内交配次数；龟鹿补肾片也能缩短雄性大鼠捕捉潜伏期，增加捕捉次数，缩短交配潜伏期，明显增加20min内交配次数；本发明傣药肾叶山蚂蝗水提高剂量组和醇提组能缩短雄性大鼠捕捉潜伏期，增加捕捉次数，能明显缩短交配潜伏期，增加20min内交配次数。
实验结果说明，本发明药物肾叶山蚂蝗及其醇提物、水提物均可以有效延长交配时间，增加交配次数，延长潜伏期，可以治疗勃起功能障碍。
3.2傣药肾叶山蚂蝗对大鼠血清睾酮、雌二醇含量的影响
结果见表2：
表2傣药肾叶山蚂蝗对雄性大鼠血清睾酮、雌二醇含量的影响(n＝10,x±s)
注：与空白组比较*P<0.05,ΔP<0.01.
由表2可以看出，龟鹿补肾片组，可升高雄性大鼠血清睾丸酮含量。傣药肾叶山蚂蝗水提高剂量组和低剂量组对雄性大鼠血清睾丸酮升高影响不显著，而醇提剂量组有明显升高；对雌二醇含量，龟鹿补肾片组和傣药肾叶山蚂蝗水提低剂量组雌二醇含量影响不明显，而醇提组则雌二醇含量降低效果较为明显。
实验结果说明，本发明药物肾叶山蚂蝗及其醇提物可以有效提高血清睾丸酮含量，降低血清雌二醇的含量。
综上，本发明肾叶山蚂蝗及提取物可以有效延长交配时间，增加交配次数，延长潜伏期，可以治疗勃起功能障碍，其中，其醇提物还可以有效提高血清睾丸酮含量，降低血清雌二醇的含量，应用前景良好。
Claims (7)
1.肾叶山蚂蝗及其提取物在制备治疗勃起功能障碍的药物或保健食品中的用途；
所述的肾叶山蚂蝗是豆科植物肾叶山蚂蝗Desmodiumrenifolium(Linn.)Schindler的干燥根；
所述的肾叶山蚂蝗的提取物为水提取物或者醇提取物。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的肾叶山蚂蝗的水提取物按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，加5～9倍量的水浸泡1～2h，煮沸30～60min，过滤，药渣加3～7倍量水继续煎煮，煮沸25～50min，过滤，再重复1～2次，合并滤液，浓缩，得水提物。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述的肾叶山蚂蝗的水提取物按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，加7倍量的水浸泡1～2h，煮沸45min，过滤，药渣加5倍量水继续煎煮，煮沸35min，过滤，再重复1次，合并3次滤液，浓缩，得水提物。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述肾叶山蚂蝗的醇提取物按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，用90-95％乙醇回流提取，得乙醇提取物。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：所述肾叶山蚂蝗的醇提取物按照如下方法制备：取肾叶山蚂蝗，加6～10倍量的95％乙醇进行连续回流提取，重复2～4次，每次30～60min，合并提取液，抽滤，挥去乙醇，得乙醇提取物。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：所述肾叶山蚂蝗的醇提取物按照如下方法制备：加8倍量的95％乙醇进行连续回流提取，重复3次，每次45min，合并提取液，抽滤，挥去乙醇，得乙醇提取物。
7.根据权利要求1～6任意一项所述的用途，其特征在于：所述药物或保健食品是提高血清睾丸酮含量和/或降低血清雌二醇含量的药物或保健食品。
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| Decrease in the number of sperm associated with decreased blood testosterone levels in male rats treated with extracts from seven plants consumed by natives of northern Thailand;S Wanichacheewa等;《Environmental Toxicology and Pharmacology》;20010630;1-4 * |
| Effect of Gangetin on Fertility of Male Rats;P. Latha;《PHYTOTHERAPY RESEARCH》;19971231;372-375 * |
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