CN106053834B - 一种基于16o/18o标记的完整糖肽相对定量方法 - Google Patents
一种基于16o/18o标记的完整糖肽相对定量方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种16O/18O标记完整糖肽的有效定量方法，并提出了消除同位素峰重叠的修正方法。具体是将胰蛋白酶催化生成的同位素16O/18O标记的完整糖肽混合后进样，由生物质谱检测峰强度，再经计算消除同位素峰重叠后，进行相对定量。本发明成功解决了同位素16O/18O标记的完整糖肽在质谱中同位素峰重叠的问题，在两个数量级的动态范围内，取得了良好的线性和较低的变异系数，为完整糖肽的定量提供了有效的修正和计算方法。
Description
技术领域
本发明属分析化学技术领域，具体涉及完整糖肽相对定量方法，尤其涉及一种基于16O/18O标记的完整糖肽相对定量方法。
背景技术
蛋白质的糖基化修饰是细胞中最重要、最常见和最复杂的蛋白质翻译后的修饰之一，目前已知哺乳动物蛋白质中约有一半以上的蛋白质发生了糖基化。糖蛋白质是蛋白质与糖类以共价键相连形成的复合物，根据蛋白质被糖修饰形式的不同可以把蛋白质糖基化分成以下四类：1)N-糖蛋白，糖链通过N-乙酰葡糖胺与处于特征序列N-X-S/T(X是除了P之外的氨基酸)中的N相连；2) O-糖蛋白，糖链与丝氨酸或苏氨酸相连；3)GPI(糖基磷脂酰基醇)-锚定糖蛋白；4)C-糖蛋白，糖链以C-C键与肽链上的色氨酸残基相连。蛋白质糖基化以前两种最为常见且研究得最多。
蛋白质的糖基化修饰具有宏观和微观不均一性，即糖基化位点的多样性(位点占有率变化)和同一位点糖链结构的多样性(结构变化)，增加了糖蛋白研究的难度。目前，糖基化修饰的质谱分析方式主要分为三种：一是从糖蛋白或糖肽上切除全部的糖链，单独研究去糖基化的蛋白或肽段，发现潜在糖基化位点，确定位点占有率；二是从糖蛋白或糖肽上切除全部的糖链，单独研究糖链，分析糖链结构；三是直接分析完整糖肽，获得糖基化位点对应的糖链结构信息。单独针对肽链或糖链进行分析，具有一定局限性；针对完整糖肽的分析，可以保留位点特异性的糖链信息，但受到分离方式、富集特异性、糖肽在质谱中响应和解析软件等的限制。因此，针对完整糖肽定量的质谱技术仍需进一步完善。
基于质谱的定量技术主要分为非标定量和标记定量两种。非标定量将样品分别进行质谱检测，再根据峰强度或面积的比较计算，获得定量结果，操作简单，但准确度较低。标记定量通常是进行样品的同位素标记，混合进样，一张谱图即可显示所有样品，样品峰之间相差相应同位素的分子量差，再根据峰强度或面积的比较计算，获得定量结果，操作繁琐，但准确度高。
在前期工作中，本申请人采用iTRAQ和N-糖基化位点16O/18O同位素标记，使非糖肽获得iTRAQ标记，切除N-糖链的糖肽获得iTRAQ和16O/18O标记，同时完成四组样本糖基化位点占有率的比较。这种方法可以精确定量非糖肽和切除 N-糖链的糖肽，从而可以平行分析多组样本的糖蛋白N-糖基化位点占有率的变化，但由于糖基化位点标记需在PNGase F酶作用下进行，丢失了重要的糖链结构信息。
因此，本领域技术人员致力于开发一种完整糖肽相对定量的方法，以克服现有技术中存在的问题。
发明内容
本发明的目的在于建立一种基于16O/18O标记的完整糖肽的质谱定量新方法，并解决质谱中同位素重叠影响定量的难点。
本发明提出的基于16O/18O标记的完整糖肽相对定量方法具体是将酶催化生成的同位素16O/18O标记的完整糖肽混合后进样，由生物质谱检测峰强度，再经以下式(I)-式(V)计算，消除同位素峰重叠后，进行相对定量。
上述混合溶液中，同位素16O/18O标记的完整糖肽在生物质谱中表现为相差4 道尔顿的独立峰。
由生物质谱检测到的峰强度，按下列公式计算消除同位素峰重叠：
上述公式(I)-(V)中，表示消除同位素峰重叠后得到的定量结果，即是16O/18O标记完整糖肽的比例。
其中I0，I2，I4表示实验测得16O标记肽段，一个16O标记和一个18O标记的肽段，18O标记肽段的单同位素峰的强度值；
I1，I3，I5表示分别与I0，I2，I4相距1道尔顿的同位素峰的强度值；
M0，M2，M4是相对应的16O标记肽段，一个16O标记和一个18O标记的肽段，18O标记肽段的理论同位素含量的相对值；
M1，M3，M5表示分别与M0，M2，M4相距1道尔顿的理论同位素含量的相对值(M1，M3，M5与M0，M2，M4通过MS-Isotope:http://prospector.ucsf.edu计算得到)。
进一步，所述完整糖肽是N-糖基化糖肽。
进一步，所述酶为胰蛋白酶(Trypsin)，优选为固化胰蛋白酶(ImmobilizedTrypsin)。
优选地，相对定量的两个样品中目标完整糖肽的含量比例范围为1:10-10:1。
本发明采用C-末端16O/18O标记完整糖肽，根据16O与18O同位素标记在一级质谱中产生的对峰，进行两组样本间每个糖基化位点上糖链多样性的比较定量。通过公式计算，成功解决了同位素峰重叠的问题，在扣除同位素重叠之后，在两个数量级的动态范围内，取得良好的线性和较低的变异系数，建立了高稳定性和高准确性的完整糖肽的微观多样性的质谱定量新方法。
附图说明
图1是同位素16O/18O标记的完整糖肽的理论峰强度比，同实际检测并修正得到的峰强度比的对偶对数曲线图，其中所示完整糖肽均来自结合珠蛋白标准品。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本发明，但是下述实施例并不限制本发明范围。
将300微克结合珠蛋白标准品用胰蛋白酶(Trypsin)进行酶解，经糖肽富集后，加入固定化胰蛋白酶(Immobilized Trypsin)，然后将其分成两份，分别在H2 16O 和H2 18O体系下进行C-末端标记，用冷冻干燥剂冻至微干。
检测时，将两种不同标记的样品混合后取2微升采用生物质谱Q-Exactive进行检测，根据质谱谱图得到同位素16O/18O标记的完整糖肽的峰强度，包括16O标记肽段、一个16O标记和一个18O标记的肽段、18O标记肽段的单同位素峰的强度值(I0，I2，I4)及与I0，I2，I4相距1道尔顿的同位素峰的强度值I1，I3，I5。
将得到的强度数据I1，I3，I5与I0，I2，I4带入Ratio1，Ratio2，Ratio1′及Ratio2′计算，得到修正后的比例
实施例1-7
将分别用16O和18O标记的样品按一定比例(16O/18O：1:10、1:5、1:2、 1:1、2:1、5:1、10:1)混合，分别取2微升各组混合样品采用生物质谱Q-Exactive 进行检测，按以上实施方式得到的结果及线性关系，如图1所示。
生物质谱检测到的结合珠蛋白标准品的完整糖肽如下：
上述完整糖肽均来自结合珠蛋白标准品，圆圈表示己糖，方块表示乙酰己糖胺，菱形表示唾液酸。
表1是按以上实施方式得到的修正16O/18O比例结果，其中所有的数据重复测定了3次，并采用“修正比例±变异系数”的方式表示：
表1
上述实施例通过标准糖蛋白的标记定量计算，验证了本发明的有效性。如图1 和表1的数据所示，在两个数量级的动态范围内(1:10-10:1)，质谱检测到的完整糖肽标准曲线的R2均达到0.99，变异系数均小于20％。从而证明本发明建立了16O/18O标记完整糖肽的有效定量方法，并提出了消除同位素峰重叠的修正方法。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
Claims (6)
1.一种基于16O/18O标记的完整糖肽相对定量方法，其特征在于包括步骤：将酶催化生成的C-末端同位素16O/18O标记的完整糖肽混合后进样，由生物质谱检测峰强度，再经以下式(I)-式(V)计算，消除同位素峰重叠后，进行相对定量；
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上述公式(I)-(V)中，表示消除同位素峰重叠后得到的定量结果，即是16O/18O标记完整糖肽的比例；
其中I0，I2，I4表示实验测得16O标记肽段，一个16O标记和一个18O标记的肽段，18O标记肽段的单同位素峰的强度值；
I1，I3，I5表示分别与I0，I2，I4相距1道尔顿的同位素峰的强度值；
M0，M2，M4是相对应的16O标记肽段，一个16O标记和一个18O标记的肽段，18O标记肽段的理论同位素含量的相对值；
M1，M3，M5表示分别与M0，M2，M4相距1道尔顿的理论同位素含量的相对值。
2.如权利要求1所述的基于16O/18O标记的完整糖肽相对定量方法，其特征在于M1，M3，M5与M0，M2，M4通过MS-Isotope:http://prospector.ucsf.edu计算得到。
3.如权利要求1所述的基于16O/18O标记的完整糖肽相对定量方法，其特征在于同位素16O/18O标记的完整糖肽在生物质谱中表现为相差4道尔顿的独立峰。
4.如权利要求1所述的基于16O/18O标记的完整糖肽相对定量方法，其特征在于所述完整糖肽是N-糖基化糖肽。
5.如权利要求1所述的基于16O/18O标记的完整糖肽相对定量方法，其特征在于所述酶为胰蛋白酶。
6.如权利要求1所述的基于16O/18O标记的完整糖肽相对定量方法，其特征在于相对定量的两个样品中目标完整糖肽的含量比例范围为1:10-10:1。
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| US20050032149A1 (en) * | 2003-02-26 | 2005-02-10 | Xudong Yao | Enzyme catalyzed isotope labeling |
| GB0314209D0 (en) * | 2003-06-19 | 2003-07-23 | Amersham Biosciences Ab | Novel MS reagents |
| CA2838007A1 (en) * | 2004-11-15 | 2006-05-26 | University Of North Dakota | A method for single oxygen atom incorporation into digested peptides using peptidases |
| CN101173926A (zh) * | 2006-11-03 | 2008-05-07 | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 | 稳定同位素18o标记蛋白质组双重定量方法与试剂盒 |
| CN101907603B (zh) * | 2010-07-19 | 2012-09-05 | 复旦大学 | 一种基于18o标记的n-糖链相对定量方法 |
| CN102445544B (zh) * | 2010-10-15 | 2013-10-30 | 中国科学院计算技术研究所 | 一种提高单同位素峰判断准确率的方法和系统 |
| CN102590376B (zh) * | 2012-02-01 | 2014-07-09 | 复旦大学附属中山医院 | 凝集素富集和18o标记结合自定义算法的糖蛋白组定量方法 |
| CN104458989B (zh) * | 2014-09-12 | 2016-09-14 | 江西师范大学 | 基于质谱和同位素标记建立的定量检测猪皮明胶的方法 |
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