CN106018387A - 一种atp荧光检测方法 - Google Patents
一种atp荧光检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106018387A CN106018387A CN201610319763.1A CN201610319763A CN106018387A CN 106018387 A CN106018387 A CN 106018387A CN 201610319763 A CN201610319763 A CN 201610319763A CN 106018387 A CN106018387 A CN 106018387A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reaction
- firefly luciferin
- atp
- detection method
- fluorescence detection
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 title claims abstract description 17
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 25
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 title abstract description 21
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 48
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 claims abstract description 44
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 25
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 24
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims abstract description 12
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims abstract description 12
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims abstract description 12
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 5
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 3
- 241000254064 Photinus pyralis Species 0.000 claims description 22
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims description 18
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims description 18
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- 238000010276 construction Methods 0.000 claims description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- DWNBOPVKNPVNQG-LURJTMIESA-N (2s)-4-hydroxy-2-(propylamino)butanoic acid Chemical compound CCCN[C@H](C(O)=O)CCO DWNBOPVKNPVNQG-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 2
- 229920000324 Cellulosome Polymers 0.000 claims description 2
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 claims description 2
- 210000000166 cellulosome Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 2
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 3
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 abstract 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract 1
- MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N fluorescin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1C2=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C21 MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000036632 reaction speed Effects 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000005267 amalgamation Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005558 fluorometry Methods 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000003239 susceptibility assay Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/76—Chemiluminescence; Bioluminescence
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及产品检测技术领域，提供一种荧光强度强、检测灵敏、单位时间内荧光反应速率高、底物循环利用、荧光信号输出周期增加的ATP荧光检测方法，包括以下处理步骤：（1）样品采集；（2）在反应容器中加入萤火虫荧光素酶及萤火虫荧光素再生酶荧光素再生酶复合结构、反应底物萤火虫荧光素、镁离子、半胱氨酸，通入适量的溶剂，充分混匀溶解，得到反应体系混合物溶液；（3）底物混合物溶液充分溶解待测样品中的ATP，在大气氧气条件下，促发反应，产生氧化态荧光素及光；（4）氧化态荧光素在萤火虫荧光素再生酶荧光素再生酶及底物半胱氨酸作用下，被还原为萤火虫荧光素，促使反应继续进行；（5）采集光信号：将步骤（3）反应产生的光进行采集。
Description
技术领域
本发明涉及产品检测技术领域，尤其涉及一种ATP荧光检测方法。
背景技术
三磷酸腺苷 (ATP) 存在于从微生物到高等动植物等生物体的细胞中，主要作用是提供能量，参与体内脂肪、蛋白质、糖和核酸的代谢，是机体能量的重要来源，在维持生物体的正常机能上有着无可替代的作用。ATP的快速高效测定，对于研究细胞乃至机体的生理活性和代谢过程、进行药物敏感实验以及食品卫生监控都有非常重要的意义。
食品安全快速检测，是对食品/饮料进行实时采样，通过检测样品ATP含量反映样品中微生物总数，进而指示食品/饮料的新鲜程度。目前市面上的ATP检测产品，都是基于萤火虫荧光蛋白发光反应机理（萤火虫荧光蛋白酶，催化荧光素与ATP定量反应），利用荧光强度反映ATP含量。反应式如图1所示，这种ATP检测产品存在局限性，主要受萤火虫荧光蛋白的稳定性、荧光素半衰期及荧光强度太弱等因素影响，导致灵敏度不足，且检测试剂有效工作期太短。
发明内容
因此，针对以上内容，本发明提供一种荧光强度强、检测灵敏、单位时间内荧光反应速率高、底物循环利用、荧光信号输出周期增加的ATP荧光检测方法。
为达到上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：一种ATP荧光检测方法，包括以下处理步骤：
（1）样品采集：采集需要检测的样品；
（2）在反应容器中加入萤火虫荧光素酶及萤火虫荧光素再生酶复合结构、反应底物萤火虫荧光素、镁离子、半胱氨酸，通入适量的溶剂，充分混匀溶解，得到反应体系混合物溶液；
（3）底物混合物溶液充分溶解步骤（1）采集的需要检测的样品中的ATP，在大气氧气条件下，促发反应，产生氧化态荧光素及光；
（4）氧化态荧光素在萤火虫荧光素再生酶及底物半胱氨酸作用下，被还原为萤火虫荧光素，促使反应继续进行；
（5）采集光信号：将步骤（3）反应产生的光进行采集。
优选的，还包括对步骤（5）采集的光信号进行放大处理，接着通过受光二极管的光电信号转化，将荧光信号转化为电信号，再通过检测仪器自身的电路系统报告信号终端。
优选的，所述萤火虫荧光素酶及萤火虫荧光素再生酶复合结构包括游离态双酶以及通过短肽、纤维小体偶联的双酶。
优选的，所述反应第五萤火虫荧光素包括D型萤火虫荧光素及其衍生物。
优选的，所述半胱氨酸包括D型半胱氨酸及L型半胱胺氨酸。
优选的，所述溶剂包括纯净水、磷酸缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液。
优选的，所述萤火虫荧光素、萤火虫荧光素酶与萤火虫荧光素再生酶复合结构、镁离子、半胱氨酸的反应浓度为0.01-10m mol/L、0.01-10mg/mL、0.01-100m mol/L、0.01-10m mol/L。
通过采用前述技术方案，本发明的有益效果是：本发明的ATP荧光检测方法，包括以下处理步骤：采集需要检测的物品，在反应容器中加入萤火虫荧光素酶及萤火虫荧光素再生酶复合结构、反应底物萤火虫荧光素、镁离子、半胱氨酸，通入适量的纯净水，充分混匀溶解，得到反应体系混合物溶液，反应体系混合物溶液充分溶解待测样品中的ATP，在有氧的大气环境中促发反应，产生氧化态荧光素及光，氧化态荧光素在萤火虫荧光素再生酶及底物半胱氨酸作用下，被还原为萤火虫荧光素，促使反应继续进行；利用萤火虫荧光素再生酶对底物萤火虫荧光素再利用，在单位时间内提高荧光反应速率，增强荧光强度，进而增强荧光输出信号，同时使原本不可再生的底物萤火虫荧光素循环利用，增加荧光信号输出周期；接着对反应产生的光进行采集；进一步的，通过光信号放大处理以及通过受光二极管的光电信号转化，将荧光信号转化为电信号，再通过检测仪器自身的电路系统报告信号终端，利用物理的光电信号转换对荧光信号进行放大处理，提高信号指示精度。采用本发明的检测方法，荧光信号延长24～72小时并保持稳定的信号强度，荧光信号强度提高了1～100倍。
附图说明
图1为本发明背景技术的反应示意图；
图2为本发明实施例中的反应式；
图3为本发明实施例中的反应模式图。
具体实施方式
以下将结合具体实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
若未特别指明，实施例中所采用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所采用的试剂和产品也均为可商业获得的。所用试剂的来源、商品名以及有必要列出其组成成分者，均在首次出现时标明。
本发明的实施例为：
参考图2及图3，一种ATP荧光检测方法，包括以下处理步骤：
（1）样品采集：采集需要检测的牛肉样品5g；
（2）在反应容器中加入萤火虫荧光素0.25mMol/L、萤火虫荧光素酶及萤火虫荧光素再生酶复合结构0.2 mg/L、反应底物萤火虫荧光素0.2 mMol/L、镁离子10 mMol/L、半胱氨酸5 mMol/L，通入适量的纯净水、磷酸缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液，充分混匀溶解，得到底物混合物溶液；
（3）底物混合物溶液充分溶解步骤（1）采集的需要检测的样品中的ATP，促发反应，产生氧化态荧光素及光；
（4）氧化态荧光素在荧光素再生酶及底物半胱氨酸作用下，被还原为萤火虫荧光素，促使反应继续进行；
（5）采集光信号：将步骤（3）反应产生的光进行采集；
（6）放大处理，接着通过受光二极管的光电信号转化，将荧光信号转化为电信号，再通过检测仪器自身的电路系统报告信号终端。
本发明的ATP荧光检测方法，包括以下处理步骤：采集需要检测的物品，在反应容器中加入萤火虫荧光素酶及萤火虫荧光素再生酶复合结构、反应底物萤火虫荧光素、镁离子、半胱氨酸，通入适量的纯净水，充分混匀溶解，得到反应体系混合物溶液，反应体系混合物溶液充分溶解待测样品中的ATP，在有氧的大气环境中促发反应，产生氧化态荧光素及光，氧化态荧光素在萤火虫荧光素再生酶及底物半胱氨酸作用下，被还原为萤火虫荧光素，促使反应继续进行；利用萤火虫荧光素再生酶对底物萤火虫荧光素再利用，在单位时间内提高荧光反应速率，增强荧光强度，进而增强荧光输出信号，同时使原本不可再生的底物萤火虫荧光素循环利用，增加荧光信号输出周期；接着对反应产生的光进行采集；进一步的，通过光信号放大处理以及通过受光二极管的光电信号转化，将荧光信号转化为电信号，再通过检测仪器自身的电路系统报告信号终端，利用物理的光电信号转换对荧光信号进行放大处理，提高信号指示精度。采用本发明的检测方法，荧光信号延长24～72小时并保持稳定的信号强度，荧光信号强度提高了1～100倍。
其中，本发明的萤火虫荧光素酶和萤火虫荧光素再生酶的单体及复合物结构都是通过微生物发酵生长合成的，通过基因表达调控随着细菌生成代谢产生，通过对基因的表达调控提高了这两种酶的单体及其融合表达复合结构的蛋白稳定性和生物活性，本发明的萤火虫荧光素酶和萤火虫荧光素再生酶已为市场公知的物质。
以上所记载，仅为利用本创作技术内容的实施例，任何熟悉本项技艺者运用本创作所做的修饰、变化，皆属本创作主张的专利范围，而不限于实施例所揭示者。
Claims (7)
1.一种ATP荧光检测方法，其特征在于，包括以下处理步骤：
（1）样品采集：采集需要检测的样品；
（2）在反应容器中加入萤火虫荧光素酶及萤火虫荧光素再生酶复合结构、反应底物萤火虫荧光素、镁离子、半胱氨酸，通入适量的溶剂，充分混匀溶解，得到反应体系混合物溶液；
（3）底物混合物溶液充分溶解步骤（1）采集的需要检测的样品中的ATP，在大气氧气条件下，促发反应，产生氧化态荧光素及光；
（4）氧化态荧光素在萤火虫荧光素再生酶及底物半胱氨酸作用下，被还原为萤火虫荧光素，促使反应继续进行；
（5）采集光信号：将步骤（3）反应产生的光进行采集。
2.根据权利要求1所述的ATP荧光检测方法，其特征在于：还包括对步骤（5）采集的光信号进行放大处理，接着通过受光二极管的光电信号转化，将荧光信号转化为电信号，再通过检测仪器自身的电路系统报告信号终端。
3.根据权利要求1或2所述的ATP荧光检测方法，其特征在于：所述萤火虫荧光素酶及萤火虫荧光素再生酶复合结构包括游离态双酶以及通过短肽、纤维小体偶联的双酶。
4.根据权利要求1或2所述的ATP荧光检测方法，其特征在于：所述反应底物萤火虫荧光素包括D型萤火虫荧光素及其衍生物。
5.根据权利要求1或2所述的ATP荧光检测方法，其特征在于：所述半胱氨酸包括D型半胱氨酸及L型半胱胺氨酸。
6.根据权利要求1或2所述的ATP荧光检测方法，其特征在于：所述溶剂包括纯净水、磷酸缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液。
7.根据要求6所述的ATP荧光检测方法，其特征在于：所述萤火虫荧光素、萤火虫荧光素酶与萤火虫荧光素再生酶复合结构、镁离子、半胱氨酸的反应浓度为0.01～10m mol/L、0.01～10mg/mL、0.01～100m mol/L、0.01～10m mol/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610319763.1A CN106018387A (zh) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | 一种atp荧光检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610319763.1A CN106018387A (zh) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | 一种atp荧光检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106018387A true CN106018387A (zh) | 2016-10-12 |
Family
ID=57100815
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610319763.1A Pending CN106018387A (zh) | 2016-05-13 | 2016-05-13 | 一种atp荧光检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106018387A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114410598A (zh) * | 2022-01-28 | 2022-04-29 | 武汉霆科生物科技有限公司 | 萤火虫发光科普教育试剂盒、荧光素酶及其制备方法 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1395619A (zh) * | 2000-01-17 | 2003-02-05 | 株式会社佐竹 | Atp再生反应系统、利用该系统的腺苷酸的检验方法、rna检测方法和atp放大方法 |
| WO2003042693A2 (en) * | 2001-11-14 | 2003-05-22 | The Secretary Of State For Defence | Method for measuring intracellular atp and/or gene expression |
| CN1485617A (zh) * | 2002-09-26 | 2004-03-31 | 中国科学院武汉病毒研究所 | 一种光循环放大型生物芯片检测的方法 |
| CN1632134A (zh) * | 2004-08-13 | 2005-06-29 | 湖南大学 | 一种atp、nad及相关酶和底物的分析方法 |
| CN103483229A (zh) * | 2013-09-12 | 2014-01-01 | 杭州隆基生物技术有限公司 | 一种atp释放剂及包含该释放剂的细菌快速检测试剂 |
| CN104237193A (zh) * | 2014-10-16 | 2014-12-24 | 福州大学 | 一种检测焦磷酸酶的荧光传感器及其制备方法 |
| CN104655839A (zh) * | 2014-12-25 | 2015-05-27 | 江南大学 | 一种特异性检测金黄色葡萄球菌的方法 |
| CN104946728A (zh) * | 2015-07-20 | 2015-09-30 | 北京中科紫鑫科技有限责任公司 | 一种萤火虫荧光素酶活性的测定方法 |
-
2016
- 2016-05-13 CN CN201610319763.1A patent/CN106018387A/zh active Pending
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1395619A (zh) * | 2000-01-17 | 2003-02-05 | 株式会社佐竹 | Atp再生反应系统、利用该系统的腺苷酸的检验方法、rna检测方法和atp放大方法 |
| WO2003042693A2 (en) * | 2001-11-14 | 2003-05-22 | The Secretary Of State For Defence | Method for measuring intracellular atp and/or gene expression |
| CN1613011A (zh) * | 2001-11-14 | 2005-05-04 | 英国国防部 | 信号系统及其使用的元件 |
| CN1485617A (zh) * | 2002-09-26 | 2004-03-31 | 中国科学院武汉病毒研究所 | 一种光循环放大型生物芯片检测的方法 |
| CN1632134A (zh) * | 2004-08-13 | 2005-06-29 | 湖南大学 | 一种atp、nad及相关酶和底物的分析方法 |
| CN103483229A (zh) * | 2013-09-12 | 2014-01-01 | 杭州隆基生物技术有限公司 | 一种atp释放剂及包含该释放剂的细菌快速检测试剂 |
| CN104237193A (zh) * | 2014-10-16 | 2014-12-24 | 福州大学 | 一种检测焦磷酸酶的荧光传感器及其制备方法 |
| CN104655839A (zh) * | 2014-12-25 | 2015-05-27 | 江南大学 | 一种特异性检测金黄色葡萄球菌的方法 |
| CN104946728A (zh) * | 2015-07-20 | 2015-09-30 | 北京中科紫鑫科技有限责任公司 | 一种萤火虫荧光素酶活性的测定方法 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114410598A (zh) * | 2022-01-28 | 2022-04-29 | 武汉霆科生物科技有限公司 | 萤火虫发光科普教育试剂盒、荧光素酶及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11066692B2 (en) | Real-time monitoring | |
| Jeffrey et al. | Activity of an attached and free-living Vibrio sp. as measured by thymidine incorporation, p-iodonitrotetrazolium reduction, and ATP/DNA ratios | |
| Liu et al. | Application of ATP-based bioluminescence technology in bacterial detection: a review | |
| CN108107028A (zh) | 一种检测三磷酸腺苷（atp）的生物传感器 | |
| CN103805170A (zh) | 一种用于识别硫化氢的特异性荧光探针及其应用 | |
| CN103063657B (zh) | 基于化学发光法检测蛋白酶活性及其抑制剂活性的方法 | |
| Wu et al. | Chemiluminescence biosensor system for lactic acid using natural animal tissue as recognition element | |
| JP2002543851A (ja) | 細胞アッセイ、方法及び試薬 | |
| Varadi et al. | Studying the bienzyme reaction with amperometric detection for measuring maltose | |
| CN101126717A (zh) | 一种抗干扰的食品细菌总数快速检测方法及试剂 | |
| Singh et al. | Evaluation of biomass | |
| Gründig et al. | Electron mediator-modified electrode for the determination of glucose in fermentation media | |
| CN106018387A (zh) | 一种atp荧光检测方法 | |
| Coulet et al. | Bioluminescence/chemiluminescence based sensors | |
| US6238857B1 (en) | Method for analyzing intracellular components | |
| CN103336045A (zh) | 有毒物质在线检测及自动报警装置及有毒物质的检测方法 | |
| Worsfold | The bio-analytical potential of flow injection analysis | |
| Keay et al. | Applications of flow injection analysis to analytical biotechnology | |
| Nabi et al. | Bioluminescence assays with immobilised bacterial luciferase using flow injection analysis | |
| CN105462939A (zh) | 一种生物素化荧光素酶的表达方法 | |
| CN103207167B (zh) | 用于快速检测线粒体内atp的荧光共振体系的制备方法 | |
| CN102776260A (zh) | 一种高效表达重组人凝血八因子的方法 | |
| Wos et al. | Cellular nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) as an indicator of bacterial metabolic activity dynamics in activated sludge | |
| CN105137099A (zh) | 一种用次血红素六肽测定血清总胆固醇方法 | |
| Thore | Luminescence in clinical analysis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20161012 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |