CN105994421B - 一种植物源杀菌制剂及在防治蔬菜枯萎病中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种植物源杀菌制剂，它包含如下重量/体积份的组分：两面针提取物10重量份,有机溶剂1‑2体积份，无菌水20‑30体积份。同时公开了该植物源杀菌制剂的制备方法。该植物源杀菌制剂的制备方法是：将两面针提取物10份,有机溶剂1‑2份，无菌水20‑30份搅拌均匀装瓶包装即可。所述的有机溶剂为乙醇、甲醇的一种或两种的混合物。该植物源杀菌制剂在防治蔬菜枯萎病中的施用方法是：取两面针提取物的植物源杀菌制剂，加入200‑250倍体积的净水，搅拌均匀灌根即可。
Description
技术领域
本发明属于植物保护技术领域，具体涉及一种以两面针提取物为有效成分植物源杀菌制剂，以及该植物源杀菌制剂在防治蔬菜枯萎病中的应用。
背景技术
蔬菜枯萎病，如番茄枯萎病、黄瓜枯萎病、辣椒枯萎病、茄子枯萎病等均是由尖孢镰刀菌属(Fusarium oxysporum)引起的世界性土传病害，是蔬菜生产的主要病害之一，在我国蔬菜产地均有发生，随着蔬菜保护地面积的扩大，加之种植模式单一，不合理轮作，连作障碍加重，致使蔬菜枯萎病的为害呈逐年加重趋势，一般年份发病率为20％ ～ 40％，严重年份达80％以上甚至绝收，蔬菜枯萎病已经成为蔬菜生产中的主要病害。由尖孢镰刀菌引起的蔬菜枯萎病从出幼苗至蔬菜成熟均可发生。尖孢镰刀菌的孢子在土壤中存活10 年以上，离开寄主也能存活5 ～ 6 年，在长期种植的情况下，病原菌大量累积，致使防治困难。因此，采取有效的防治方法，减轻其危害，是蔬菜增产、增收的关键。目前在防治蔬菜枯萎病的手段上，主要还是化学防治，化学防治具有见效快、效果好的特点，但化学防治带来众所周知的农药残留、污染环境问题已经越来越引起重视。生物农药防治由于其选择性强、对生态环境影响小的特点，因此开发研制出高效、环境友好型植物源生物农药防治蔬菜枯萎病是目前研究的热点。通过植物源天然化合物改良后制成的生物农药，一方面对植株的果、花、叶都无危害，对人畜安全，具有高效无残留，无药害，无抗药性等优点；另一方面在控制病害的同时可以有效提高农产品品质。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供一种以两面针提取物为有效成分植物源杀菌制剂，该制剂是一种新型环境友好制剂。本发明的另一目的是提供基于两面针提取物为有效成分植物源杀菌制剂在防治蔬菜枯萎病中的应用。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种植物源杀菌制剂，它包含如下重量/体积份的组分：两面针提取物10重量份,有机溶剂1-2体积份，无菌水20-30体积份。
所述的两面针提取物的制备方法包括如下步骤：
（1）取两面针地下部分清洗干净，沥干、充分阴干，然后粉碎通过60目筛；
（2）称取一定重量（1）制备的两面针粉倒入多功能提取罐中，取两面针粉重量/体积比1︰4-6倍的95%的乙醇加入多功能提取罐，反复渗漉8-10小时，然后固液分离，重复2-3次，合并液体；
（3）将（2）得到的液体减压回收乙醇，当浓缩物比重至1.1-1.2时停止蒸馏，得两面针浸膏；
（4）将（3）得到的两面针浸膏，用浸膏重量体积比3-4倍的水稀释，再加入浸膏重量体积比5-6倍的石油醚，在室温下搅拌萃取2-3小时，静置后得上层有机溶液、中层水溶液及下层沉淀物；
（5）取（4）得到的水溶液即为两面针提取物。
本发明的植物源杀菌制剂的制备方法是：将两面针提取物10份,有机溶剂1-2份，无菌水20-30份搅拌均匀装瓶包装即可。
所述的有机溶剂为乙醇、甲醇的一种或两种的混合物。
本发明的植物源杀菌制剂在防治蔬菜枯萎病中的施用方法是：取上述两面针提取物的植物源杀菌制剂，加入200-250倍体积的净水，搅拌均匀灌根即可。
本发明植物源杀菌制剂对尖孢镰刀菌的抑菌效果试验
1试验方法
1.1本发明植物源杀菌制剂与防治蔬菜枯萎病常用药50%多菌灵可湿性粉剂对尖孢镰刀菌的抑菌效果试验
采用实施例1制备本发明植物源杀菌制剂稀释200倍液为处理，以防治蔬菜枯萎病常用药50%多菌灵可湿性粉剂600倍液为对照1，以无菌水为对照2。进行尖孢镰刀菌抑菌效果比较试验。采用菌丝生长速率法测定杀菌制剂与对照农药对病原真菌菌丝生长的抑制方法：吸取6 mL药剂于灭菌的三角瓶中，然后加54 mL的PDA培养基混匀，倒入培养皿（90 mm× 20 mm）中，每皿20 mL，在无菌条件下每皿中央放置1块菌饼（直径为6 mm），重复3次，以无菌水为对照2。置于26℃恒温光照培养箱中培养，5 天后用十字交叉法测量菌落直径。按下列公式评判抑菌效果。
菌丝生长抑制率/% ＝（对照2菌落直径－处理或对照1菌落直径）/（对照2菌落直径－菌饼直径）×100
1.2本发明植物源杀菌制剂在田间防治蔬菜枯萎病试验
用本发明的植物源杀菌制剂200倍液为处理，以50%多菌灵可湿性粉剂600倍液为对照1，以清水为对照2，以栽培番茄、黄瓜、辣椒和茄子的4 个大棚温室为试验田，每个大棚600平方米，每个棚分为6个小区，每个小区100平方米，重复三次。苗期用等量的上述药液或清水每隔10天灌根一次，灌根2次10天后进行统计分析番茄枯萎病、黄瓜枯萎病、辣椒枯萎病、茄子枯萎病的病情指数和防治效果。测定方法：病情指数和防治效果的测定：参照窦瑞木方法。( 窦瑞木. 3 株植物内生细菌对番茄灰霉病的防治效果. 河南农业科学，2010，4：77-79.) 。
2 试验结果
2.1本发明植物源杀菌制剂与50%多菌灵可湿性粉剂对尖孢镰刀菌的抑菌效果如表1：
表1本发明植物源杀菌制剂与50%多菌灵可湿性粉剂对尖孢镰刀菌的抑菌活性
注：表中数据为平均数±标准误。同行数据后的小写字母表示本发明植物源杀菌制剂与50%多菌灵可湿性粉剂对不同病原菌的抑菌活性差异显著性分析（P < 0.05）。
由表1可见，采用菌丝生长速率法测定了本发明植物源杀菌制剂与50%多菌灵可湿性粉剂对尖孢镰刀菌的抑菌活性，结果表明，本发明植物源杀菌制剂与50%多菌灵可湿性粉剂对4种蔬菜尖孢镰刀菌的生长均有不同的抑制作用。其中，本发明植物源杀菌制剂对4种蔬菜枯萎病专化型尖孢镰刀菌的抑菌效果在69%-79%之间，50%多菌灵可湿性粉剂对4种蔬菜枯萎病专化型尖孢镰刀菌的抑菌效果在74%-78%之间；说明本发明的植物源杀菌制剂对4种蔬菜枯萎病专化型尖孢镰刀菌的抑菌效果差异性较大，而多菌灵的抑菌效果较为平均，但是，就本发明植物源杀菌制剂与50%多菌灵可湿性粉剂对各种蔬菜枯萎病菌的抑菌效果差异不显著（P＞0.05），说明本发明植物源杀菌制剂的抑菌效果与50%多菌灵可湿性粉剂相当。
2.2本发明植物源杀菌制剂在田间防治蔬菜枯萎病试验结果见表2：
表2 本发明植物源杀菌制剂在田间防治蔬菜枯萎病试验结果
注：表中平均防治效果数据后的不同小写字母表示防治效果在P < 0.05水平差异显著。
由表2可知，本发明植物源杀菌制剂在田间防治蔬菜枯萎病效果为61.6％，对照50%多菌灵可湿性粉剂的防效为63.4％，两者之间没有显著差异（P＞0.05）。
本发明与现有技术相比，具有以下优势：（1）本发明以两面针提取物为有效成分的植物源杀菌制剂能够有效防治茄子、黄瓜、番茄和辣椒4种蔬菜枯萎病，其200倍稀释液的防治效果在60%以上，与50%多菌灵可湿性粉剂的防效无显著差异。（2）本发明原材料易得，生产工艺简单，对环境没有污染，生产的蔬菜品质好，具有较好的经济效益和社会效益明显，具有十分广阔的应用前景。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1
制备两面针提取物，包括如下步骤：
（1）取两面针地下部分清洗干净，沥干、充分阴干，然后粉碎通过60目筛；
（2）称取一定重量（1）制备的两面针粉倒入多功能提取罐中，取两面针粉重量/体积比1︰4倍的95%的乙醇加入多功能提取罐，反复渗漉8小时，然后固液分离，重复3次，合并液体；
（3）将（2）得到的液体减压回收乙醇，当浓缩物比重至1.1-1.2时停止蒸馏，得两面针浸膏；
（4）将（3）得到的两面针浸膏，用浸膏重量体积比3倍的水稀释，再加入浸膏重量体积比5倍的石油醚，在室温下搅拌萃取2小时，静置后得上层有机溶液、中层水溶液及下层沉淀物；
（5）取（4）得到的水溶液即为两面针提取物。
实施例2
制备两面针提取物，包括如下步骤：
（1）取两面针地下部分清洗干净，沥干、充分阴干，然后粉碎通过60目筛；
（2）称取一定重量（1）制备的两面针粉倒入多功能提取罐中，取两面针粉重量/体积比1︰6倍的95%的乙醇加入多功能提取罐，反复渗漉10小时，然后固液分离，重复2次，合并液体；
（3）将（2）得到的液体减压回收乙醇，当浓缩物比重至1.1-1.2时停止蒸馏，得两面针浸膏；
（4）将（3）得到的两面针浸膏，用浸膏重量体积比4倍的水稀释，再加入浸膏重量体积比6倍的石油醚，在室温下搅拌萃取3小时，静置后得上层有机溶液、中层水溶液及下层沉淀物；
（5）取（4）得到的水溶液即为两面针提取物。
实施例3
制备植物源杀菌制剂的方法是：取实施例1或2制备的两面针提取物10重量份与95%乙醇1体积份和无菌水20体积份搅拌均匀装瓶包装即可。
采用上述制备的植物源杀菌制剂防治蔬菜枯萎病的施用方法是：取上述两面针提取物的植物源杀菌制剂，加入250倍体积的净水，搅拌均匀灌根即可。
实施例4
制备植物源杀菌制剂的方法是：取实施例1或2制备的两面针提取物10重量份、甲醇2体积份和无菌水30体积份搅拌均匀装瓶包装即可。
采用上述制备的植物源杀菌制剂防治蔬菜枯萎病的施用方法是：取上述两面针提取物的植物源杀菌制剂，加入200倍体积的净水，搅拌均匀灌根即可。
实施例5
制备植物源杀菌制剂的方法是：取实施例1或2制备的两面针提取物10重量份、95%乙醇1体积份、甲醇1体积份和无菌水25体积份搅拌均匀装瓶包装即可。
采用上述制备的植物源杀菌制剂防治蔬菜枯萎病的施用方法是：取上述两面针提取物的植物源杀菌制剂，加入220倍体积的净水，搅拌均匀灌根即可。
Claims (4)
1.一种植物源杀菌制剂，其特征在于，植物源杀菌制剂包含如下重量/体积份的组分：两面针提取物10重量份,有机溶剂1-2体积份，无菌水20-30体积份；所述的两面针提取物的制备方法包括如下步骤：
（1）取两面针地下部分清洗干净，沥干、充分阴干，然后粉碎通过60目筛；
（2）称取一定重量（1）制备的两面针粉倒入多功能提取罐中，取两面针粉重量/体积比1︰4-6倍的95%的乙醇加入多功能提取罐，反复渗漉8-10小时，然后固液分离，重复2-3次，合并液体；
（3）将（2）得到的液体减压回收乙醇，当浓缩物比重至1.1-1.2时停止蒸馏，得两面针浸膏；
（4）将（3）得到的两面针浸膏，用浸膏重量体积比3-4倍的水稀释，再加入浸膏重量体积比5-6倍的石油醚，在室温下搅拌萃取2-3小时，静置后得上层有机溶液、中层水溶液及下层沉淀物；
（5）取（4）得到的水溶液即为两面针提取物。
2.根据权利要求1所述的植物源杀菌制剂，其特征在于，所述的植物源杀菌制剂的制备方法是：将两面针提取物10重量份,有机溶剂1-2体积份，无菌水20-30体积份搅拌均匀装瓶包装即可。
3.根据权利要求1所述的植物源杀菌制剂，其特征在于，所述的有机溶剂为乙醇、甲醇的一种或两种的混合物。
4.根据权利要求1所述的植物源杀菌制剂，其特征在于，所述的植物源杀菌制剂在防治蔬菜枯萎病中的施用方法是：取两面针提取物的植物源杀菌制剂，加入200-250倍体积的净水，搅拌均匀灌根即可。
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