CN105949478A - 除去交联透明质酸中交联剂的方法 - Google Patents

除去交联透明质酸中交联剂的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105949478A
CN105949478A CN201610292499.7A CN201610292499A CN105949478A CN 105949478 A CN105949478 A CN 105949478A CN 201610292499 A CN201610292499 A CN 201610292499A CN 105949478 A CN105949478 A CN 105949478A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cross
ultrafiltration
hyaluronic acid
linking agent
sodium hyaluronate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610292499.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105949478B (zh
Inventor
郭振权
石江水
凌世兰
赵裕栋
林小鹊
张鸿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yichang dongyangguang Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd
Original Assignee
Guangdong HEC Pharmaceutical
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong HEC Pharmaceutical filed Critical Guangdong HEC Pharmaceutical
Priority to CN201610292499.7A priority Critical patent/CN105949478B/zh
Publication of CN105949478A publication Critical patent/CN105949478A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105949478B publication Critical patent/CN105949478B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C08J3/24—Crosslinking, e.g. vulcanising, of macromolecules
    • C08J3/247—Heating methods
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08K—Use of inorganic or non-macromolecular organic substances as compounding ingredients
    • C08K5/00—Use of organic ingredients
    • C08K5/04—Oxygen-containing compounds
    • C08K5/15—Heterocyclic compounds having oxygen in the ring
    • C08K5/151—Heterocyclic compounds having oxygen in the ring having one oxygen atom in the ring
    • C08K5/1515—Three-membered rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)

Abstract

本发明涉及一种除去交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4‑丁二醇二缩水甘油醚的方法，方法是用30KD中空纤维膜超滤，纯化水循环体积为进料体积的2～4倍，超滤进料流速为4～10L/h，跨膜压力为0.02～0.15Mpa。本发明可以使交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4‑丁二醇二缩水甘油醚的残留量小于1ppm，达到安全的范围内，确保交联透明质酸钠凝胶产品的安全性。

Description

除去交联透明质酸中交联剂的方法
技术领域
本发明涉及一种除去交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚的方法，特别指的是用中空纤维膜超滤法去除交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚。
技术背景
透明质酸(hyaluronic acid)又名玻尿酸，是由葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡萄糖双糖相互结合的线性大分子酸性粘多糖，广泛存在于人和脊椎动物组织的细胞外基质和链球菌的荚膜中，具有良好的理化性能和生物相容性，在生物体内发挥着重要的作用。
高纯度的药物级透明质酸钠已被制成注射剂，用于眼科手术、骨科手术、预防术后粘连、治疗骨性关节炎和类风湿性关节炎，此外，也被用于面部注射美容，改进皮肤外观和结构、减轻皱纹、阻止皮肤衰老或改进唇部性状。但在临床医学中发现，天然的透明质酸易被生物降解，在体内存留时间较短，限制了透明质酸的应用。
采用1，4-丁二醇二缩水甘油醚作为透明质酸的交联剂，将透明质酸进行交联，交联后的透明质酸除了可以保留透明质酸原有的力学性能、生物降解性、生物相容性、安全性、无免疫源性、无刺激性等特性外，还对自由基、热和透明质酸酶的降解作用具有更强的抵抗性，这极大的提高了透明质酸在体内的保留时间，使其在体内的保留时间可以延长至6个月甚至更久，这使得交联透明质酸的应用获得极大地推广，尤其是在获得新型医用生物材料方面，如防术后粘连材料、软组织填充材料、新型药物释放基质、美容和整形填充物等。
然而交联透明质酸中残留的交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚不能被人体降解，交联剂量过高，有致突变和引起不良反应甚至癌症的风险，故《整形手术用交联透明质酸钠凝胶》对1，4-丁二醇二缩水甘油醚的残留有严格的规定，限制其残留量小于2ppm。去除交联剂残留的常规方法是用乙醇侵泡洗涤，缓冲盐溶液溶胀透析，过滤等，这些方法效率不高，不能有效去除交联剂的残留。因此，开发一种有效降低1，4-丁二醇二缩水甘油醚残留量的方法，且能够实现大规模的放大生产，这对交联透明质酸钠凝胶的应用具有重大的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种除去交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚的方法，采用中空纤维膜超滤法去除交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚，使交联剂的含量达到安全的范围，确保交联透明质酸凝胶产品的安全性。
本发明提供一种除去交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚的方法，包括如下步骤：
将交联透明质酸钠凝胶进行透析溶胀处理后，超滤浓缩，真空干燥，得到去除交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚的交联透明质酸钠凝胶。
本发明中的交联透明质酸钠凝胶，其所使用的交联剂为1，4-丁二醇二缩水甘油醚，其中交联剂加入量与透明质酸钠凝胶的质量比为0.01-0.1。
本发明中透析溶胀是将透明质酸钠凝胶加入用磷酸氢二钠和磷酸二氢钠与0.9％生理盐水配制，用0.1mol/L的盐酸调节pH值至7.0所得到的透析液中，在20℃～30℃范围内，透析12～15小时，直至达到透明质酸吸水平衡，其中透明质酸与透析液的质量体积比为1g/L。
本发明中交联透明质酸凝胶进行透析溶胀处理后的浓度≤1g/L，使其具有较好的流动性。
本发明中超滤以纯化水为循环体系，在一定的流速与跨膜压力下，用中空纤维膜进行超滤。
本发明中纯化水循环体积为进料体积的0～4倍，超滤进料流速为1～10L/h，跨膜压力为0.02～0.2Mpa，中空纤维膜<980KD。
本发明中纯化水循环体积优选为进料体积的2～4倍，超滤进料流速为4～10L/h，跨膜压力为0.02～0.15Mpa，中空纤维膜为30KD进行超滤，在60℃真空干燥，得到浓度为50mg/mL的透明质酸，可通过气相色谱法测得交联透明质酸中1，4-丁二醇二缩水甘油醚的残留量。气相色谱使用的是Agilent DB-170(0.32mm×30m,0.25μm)色谱柱，气相色谱测试条件：柱温：初温120℃，以30℃/min升至260℃，保持10min；检测器：FID；检测器温度：300℃；进样口温度：260℃；载气：N2；载气流速：4mL/min；分流比：1:1。
本发明提供了一种用中空纤维膜超滤除去交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚的方法，该方法不仅可以确保透明质酸产品的安全性，且操作简单，成本低廉，绿色无污染，可以实现工业化生产。
具体实施方式
实施例：
1)交联透明质酸凝胶的制备
在25℃下将1.60mg的氢氧化钠溶解于400mL的水中，加入0.5g的1，4-丁二醇二缩水甘油醚，溶解后，加入10g透明质酸(购自山东福瑞达生物化工有限公司，平均分子量为98万道尔顿)，搅拌30分钟后，升高温度至50℃，搅拌4小时，得到交联透明质酸钠凝胶。
2)透析溶胀处理
在25℃下，将8.55g磷酸氢二钠和1.20g磷酸二氢钠溶于10L含量为0.9％生理盐水中，过滤，滤液用0.1mol/L盐酸调节pH值至7.0，加入步骤1)得到的透明质酸钠凝胶，透析溶胀12小时，直至透明质酸达到吸水平衡。
3)超滤
将步骤2)得到的透明质酸钠凝胶用30KD中空纤维膜进行超滤，控制跨膜压力，纯化水循环体积，进料流速等参数，同时使各组透明质酸钠凝胶超滤浓缩后的体积为2L。超滤条件与结果如表1所示：
表1：超滤条件与实验结果
4)真空干燥
在60℃下，对步骤3)得到的凝胶进行真空浓缩，得到50mg/mL除去交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚的交联透明质酸钠凝胶。
其中，透明质酸凝胶浓度由硫酸咔唑法进行检测；1，4-丁二醇二缩水甘油醚含量由气相色谱法进行检测；
实验结果表明，该方法在保证收率不小于80％的情况下，可以有效将交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚残留降至0.1ppm以下，保证了该交联透明质酸凝胶样品的安全性，证明了超滤法去除交联透明质酸凝胶中1，4-丁二醇二缩水甘油醚的有效性。

Claims (5)

1.一种除去交联透明质酸钠凝胶中交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚的方法，特征在于：
将交联透明质酸钠凝胶进行透析溶胀处理后，超滤浓缩，真空干燥，得到去除交联剂1，4-丁二醇二缩水甘油醚的交联透明质酸钠凝胶。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，交联透明质酸凝胶进行透析溶胀处理后的浓度≤1g/L。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述的超滤以纯化水为循环体系，在一定的流速与跨膜压力下，用中空纤维膜进行超滤。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，纯化水循环体积为进料体积的0～4倍，超滤进料流速为1～10L/h，跨膜压力为0.02～0.2Mpa，中空纤维膜＜980KD。
5.根据权利要求3所述的方法，其中，纯化水循环体积为进料体积的2～4倍，超滤进料流速为4～10L/h，跨膜压力为0.02～0.15Mpa，中空纤维膜为30KD。
CN201610292499.7A 2016-05-05 2016-05-05 除去交联透明质酸中交联剂的方法 Active CN105949478B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610292499.7A CN105949478B (zh) 2016-05-05 2016-05-05 除去交联透明质酸中交联剂的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610292499.7A CN105949478B (zh) 2016-05-05 2016-05-05 除去交联透明质酸中交联剂的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105949478A true CN105949478A (zh) 2016-09-21
CN105949478B CN105949478B (zh) 2021-10-01

Family

ID=56915090

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610292499.7A Active CN105949478B (zh) 2016-05-05 2016-05-05 除去交联透明质酸中交联剂的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105949478B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110396204A (zh) * 2019-08-02 2019-11-01 常州药物研究所有限公司 一种超低交联剂残留量、高粘性的交联透明质酸钠凝胶的制备方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN87106919A (zh) * 1986-10-13 1988-08-24 菲迪亚公司 透明质酸的交联酯类
CN1326352A (zh) * 1998-11-10 2001-12-12 电气化学工业株式会社 透明质酸凝胶、其制造方法及含透明质酸凝胶的医用材料
CN102812050A (zh) * 2010-03-17 2012-12-05 电气化学工业株式会社 透明质酸及/或其盐的提纯方法
CN103665400A (zh) * 2013-11-12 2014-03-26 唐忠海 白芨止血凝胶的制备方法及应用
CN103834053A (zh) * 2014-02-28 2014-06-04 陕西佰傲再生医学有限公司 一种可注射的交联透明质酸凝胶及其制备方法
CN104662158A (zh) * 2012-07-05 2015-05-27 阿尔特刚意大利有限公司 生产具有可控分子量的高纯度透明质酸钠(hana)的方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN87106919A (zh) * 1986-10-13 1988-08-24 菲迪亚公司 透明质酸的交联酯类
CN1326352A (zh) * 1998-11-10 2001-12-12 电气化学工业株式会社 透明质酸凝胶、其制造方法及含透明质酸凝胶的医用材料
CN102812050A (zh) * 2010-03-17 2012-12-05 电气化学工业株式会社 透明质酸及/或其盐的提纯方法
CN104662158A (zh) * 2012-07-05 2015-05-27 阿尔特刚意大利有限公司 生产具有可控分子量的高纯度透明质酸钠(hana)的方法
CN103665400A (zh) * 2013-11-12 2014-03-26 唐忠海 白芨止血凝胶的制备方法及应用
CN103834053A (zh) * 2014-02-28 2014-06-04 陕西佰傲再生医学有限公司 一种可注射的交联透明质酸凝胶及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RUI YANG,ET.AL: "An injectable scaffold based on crosslinked hyaluronic acid gel for tissue regeneration", 《RSC ADVANCES》 *
王振宇等: "《生物活性成分分离技术》", 31 May 2015, 哈尔滨工业大学出版社 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110396204A (zh) * 2019-08-02 2019-11-01 常州药物研究所有限公司 一种超低交联剂残留量、高粘性的交联透明质酸钠凝胶的制备方法
CN110396204B (zh) * 2019-08-02 2020-07-24 常州药物研究所有限公司 一种超低交联剂残留量、高粘性的交联透明质酸钠凝胶的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105949478B (zh) 2021-10-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2377260C2 (ru) Загущенный сшитым полимером биологически совместимый гель
RU2640911C2 (ru) Способ получения композиции на основе гиалуроновой кислоты
CN101538377A (zh) 一种交联透明质酸凝胶及其制备方法
KR101879065B1 (ko) 구형 입자를 갖는 연조직용 필러 및, 그 제조방법
CN107522881B (zh) 制备单相修饰透明质酸钠凝胶的方法
CN112480440A (zh) 一种单相交联透明质酸钠凝胶的制备方法
EP4038105B1 (en) A hyperbranched polyglycerol polyglycidyl ether and its use as crosslinker for polysaccharides
US6610666B1 (en) Hyaluronan product and process for manufacturing thereof
KR20130118307A (ko) 고순도 헤파린 및 그 제조방법
US20180177707A1 (en) Method of preparing a composition based on hyaluronic acid
CN109481339B (zh) 一种胶原基复合水凝胶面膜材料及其制备方法和应用
US9908948B2 (en) Enantiopure or enantioenriched BDDE and its use as crosslinking agent in the manufacture of cross-linked products
CN105949478A (zh) 除去交联透明质酸中交联剂的方法
CN110655662B (zh) 一种橄榄苦苷交联制备透明质酸钠凝胶的方法及透明质酸钠凝胶
JP6561133B2 (ja) 生体適合性組成物及びこの製造方法
CN115429935B (zh) 一种可注射性的交联硫酸软骨素水凝胶及其制备方法
KR20210137345A (ko) 고탄성, 고점도 및 고유효 가교율을 갖는 히알루론산 가교체, 및 이의 제조방법
KR102103180B1 (ko) 히알루론산유도체, 플루란 및 카르복시메틸 셀룰로오스를 포함하는 유착방지용 조성물 및 이의 제조방법
KR102611240B1 (ko) 저분자량 히알루론산의 제조 방법
CN105860151A (zh) 注射用高分子普鲁兰多糖-胶原蛋白复合水凝胶及其制备方法
CN103923229B (zh) 一种交联透明质酸钠及其制备方法
KR102226724B1 (ko) 물리적 반응에 의한 히알루론산 하이드로겔의 제조 방법
US20210052769A1 (en) Resorbable implantable device based on crosslinked glycosaminoglycans, and process for the preparation thereof
CN113683795A (zh) 一种微交联透明质酸及其制备方法
CN109513043A (zh) 一种注射用修饰透明质酸钠凝胶及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20200528

Address after: 523871 room 114, building 3, No. 368, middle Zhen'an Road, Chang'an Town, Dongguan City, Guangdong Province

Applicant after: Dongguan dongyangguang biosynthetics Co., Ltd

Address before: 523808 Guangdong city of Dongguan province Hubei Songshan Industrial Park Industrial Road No. 1

Applicant before: SUNSHINE LAKE PHARMA Co.,Ltd.

TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20200922

Address after: No.62, Lucheng Binjiang Road, Yidu City, Yichang City, Hubei Province

Applicant after: Yichang dongyangguang Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd

Address before: 523871 room 114, building 3, No. 368, middle Zhen'an Road, Chang'an Town, Dongguan City, Guangdong Province

Applicant before: Dongguan dongyangguang biosynthetics Co.,Ltd.

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant