本文给出的百分率和比值以重量为单位,温度为摄氏度,除非另有注释。本申请所引证的参考文献参照适用的程度来引入。如果需要更好地解释本发明,则百分率和比率可以交叉-混合使用。
一般来说,本发明涉及一种玉米原料,它所具有的油酸含量超过以前报道过的最高值。还涉及一种玉米油,它所具有的油酸百分率堪与高油酸的菜籽(canola)油的和高油酸的向日葵油的相比美。
更特别的是,本发明涉及到个体的玉米种子,其所具有油酸含量至少为种子的全部脂肪酸含量的65%(重量)(自此以后,可表示为百分比或简单的百分比)。本发明的最佳实施例中种子所具有的油酸含量高于80%。本发明还涉及玉米作物,这种作物可生产出平均油酸含量至少为55%(重量)的种子来。同样,本发明涉及一种商业上可接受的玉米品种,这个品种的整批籽粒具有至少45%(重量)的平均油酸含量。
通过下面的详细说明,本发明的其它特点和优点将变得更明显。然而,应当知道这些同时表明本发明的最佳实施例的详细说明和特别举例仅是以例证的方式给出,对于那些本领域熟练技术人员来说,在阅读这一详细说明书之后所做出的在本发明精神与范围内的各种改变和改进都将是显而易见的。除非另行指出之外,引证的文献的有关含量在本文中被参照引入。
保藏情报:
LH85X85-205-6的F4代品系玉米的近交种子已经于1990年7月19日保藏在马里兰州林希肯的国际保藏中心的玻璃皿中(In Vitro International,Inc.,Linthicum,Mary land 21090),并且已经被注册编号为IVI No.10254。
为了便于理解本发明说明书和权利要求书中所用的几个术语,特给出下述定义:
“选择”-在具有所需的表现型或基因型的作物被选作育种步骤和育种计划的另外的作物时出现。
“族内交配”-和“同胞交配”意义相同,是表示一种实验操作,即:将所选择出的表现型的作物种子种植到各个行内,使其正常的发芽、出苗和生长成熟,把这些行中每一行中的作物与尽可能多的其它行上的作物有规律地杂交(在发生花粉脱落和玉米穗穗丝伸长时),以便使群体中分开的个体之间的杂交数最大。
“品种”一是指在一个物种之内的一组植物,例如玉米,这组植物共同拥有某些固定特征,这些特征使得它们能够与同在一个物种之内的其它可能存在的品种区别开来。在拥有至少一个区别特征的同时,一个品种还可能具有的特点是:品种之内的个体之间具有大量的变异,这主要取决于后续世代的后代中特性的孟德尔分离。
“品系”-品系不同于“品种”和“栽培品种”,它是指基本上具有一致特性的一组植物,只是这个组内的植物之间有比较小的变异,而这种变异能够被描写出来。这个组内植物之间减小了的变异通常(尽管不是唯一地)是由自花传粉(自交)的一些后代引起的。
“真育种(True Breeding)”-如果一个品系为了一个特殊的特性而遗传学地纯合到这样一个程度一即当品种进行自花传粉时,在后代当中没有观察到这个特性的明显数量的独立的分离,则认为该品系是对于该特殊特性的“真育种”。
“明显变异(Significant Variation)”-在这方面,明显变异可以例如以油酸值的差异为基础进行判定,其中油酸值的变异是由于籽粒在玉米穗上的位置造成的,即约为4%至5%的变异。参见“作物科学”[Jellum,Crop Sci.7:593-95(1967)]。因而本发明的以单个籽粒的油酸变异值约为5%或者更低为特征的高油酸玉米原料被要求用于为高的油酸特性作真育种。作为油酸含量而进行真育种的另一个解释是:当品种自花传粉时,品种将产生一个后代,其中95%或者更多的后代种子具有超过规定的最低限度的油酸含量。因此,“至少65%”的油酸含量将意味着真育种的自花传粉的品种的后代种子中95%以上的种子的油酸含量至少为65%。作为另一个例子,根据本发明的玉米品种是为了65%(与“至少65%”不同)的油酸含量而真育种的。当品种被自花传粉时,约95%或95%以上的后代玉米种子具有约65%的油酸含量,亦即约95%或95%以上的后代种子没有明显偏离65%的油酸含量的变异,某些比较重要的环境因素(例如种植日期、玉米穗的位置、地点和年代)以及决定玉米油中脂肪酸成分的遗传学因素已经由杰伦在上述“作物科学”(1967)上报道过。综合分析的结果(表2)表明,玉米穗尖处的籽粒的油与玉米穗上其它位置处的籽粒的油相比,前者含有较少的油酸和较高的亚油酸。对于表2中所试验的近交种来说,由于籽粒位置的原因,油酸含量的变动范围是0.6~4.8%。最高的油酸值通常得自位于玉米穗中部或根部的籽粒,而最低的油酸值则得自位于玉米穗尖的籽粒。
“油酸含量”和“油酸值”-这两个术语是同意义的,而且就玉米油中存在的油酸与全部脂肪酸的比例的测量来说,两者是可以互换使用的。所说玉米油是从单个种子(用下面将叙述的全或半种子技术)或整批的种子提取出的。因为在本说明书所列出的油酸值通常是用GLC分析得到的,因此所报道的油酸比例基本上是以重量为单位的。当油酸含量或油酸值被表示为百分率与重量百分率时,应当明白这种百分率是相对于种子的全部脂肪酸含量而言的。
“整批种子(Bulked Seed)”-可以是由来自遗传学上有关系的植物家系的全部或特殊部分的混合种子组成;或者由植物引种(在下面解释)的种子组成。例如由一个玉米穗轴上的多个种子组成(一个“籽粒集合”)。
“玉米油”-在本文中是指通过包括从玉米种子中,特别是从由含有平均油酸含量在相同的一般范围内的、亦即高于50%的种子组成的整批种子中提取油质的工艺所生产的植物油。在一个最佳实施例中,本发明的玉米油是通过包括从油酸含量差异不超过约5%(重量)的一批种子中提取油的方法获得的;这样的“集合物”是指种子的“基本上纯合的集合体”(在下面解释)。
“商业上可接受的基因型(Commercially Acceptable Genotype)”-用来指包括近交种和杂种的基因型在内的任何基因型,所述基因能够生产出具有农学上合格的特性(例如:产量、水分、干下落(dry-down)率、茎杆倒伏、活力、根倒伏、抗病力、抗虫力等)的作物来,且(A)就近交种来说,这些特性应能使这种基因型在杂交种的生产中经济地应用;或者(B),对于杂种来说,当杂交植物生长在种植者的田地里时,这些可接受的特性被表现在杂交植物上。
“植物引种(P.I)”-是相同物种种子的样品(例如玉米),所述种子能够长成具有通常可辨认的肉眼可见的形态学的作物。由于通常由起源地区选定,植物引种常常体现当地的和/或适宜于那个地区的种质。因而体现可观的基因易变性。植物引种也能够体现近交系的种质。
“纯合的集合体(Hornogeneous Assemblage)。-这个术语是指一组为了一个给定的特点而纯合的种子(不具有明显的变异)种子组的一个例子可以是从一英亩玉米上随意挑出的2000粒种子。
“平均油酸含量”-是从一个选定的基因型或基因型的家系所获得的油酸值的平均数。所说油酸值是由该基因型的整批种子(上面已解释)测定的,或者由平均代表玉米穗的顶、中、根部的9粒或9粒以上种子测得。
已经在玉米品种和品系的一个特殊亚群的类型中认定了一个一般的种质源。所说玉米品种和品系各自由能生产出油酸值在45-59%范围内的个体种子的作物组成。根据此处的描述,可以预言能够从该种质源培育出高油酸原料。特别是业已发现用下述步骤能够生产玉米品种和品系-即用从上述的亚群中选择的初始材料,经族内交配和选择顶部能生产出1-20%的油酸的作物。接着进行循环的自花传粉和选择那些平均油酸含量至少为55%(重量),例如58%或60%(重量),或者更高的基因型(品系)。此外,这样培育出来的高油酸特性能够例如通过把本发明的高油酸近交系与一个具有一个或多个理想的除了高油酸值之外的其它农学特性的轮回亲本回交的办法很容易地渗入(转移)到其它基因的本底。对一个原种轮回亲本进行回交,跟着进行4-8个世代的自交产物是一种不光具有至少45%的平均油酸百分率且农业上也理想的近交玉米品系。
以这种方式生产的高油酸油中可预期保持一个代表玉米油本身(perse)特征的甾醇组分(constituency)。参见“美国油化学协会杂志”[Itoh et al.J.Am.Oil Chem.Soc.50:122-25(1973)]。特别是关于依托(Itoh)等人所描述的24-甲基-△23甾醇:它们中的至少一种(24-甲基-23-二聚水苯酚(dihydrolophenol)被认为对玉米油来说是独特的,参见“植物化学”[Phytochem.20:1353-56(1981)]。本发明的高油酸油可以作为生产其它油制品时的粗原料。所说油制品中虽然发生了足够大的变化,以致于不能再辨认出“玉米油”的原貌,但是其仍然保持了高的油酸含量。混合物中各油分的鉴别已由阿布·哈迪德在一篇文章中实现[参见“美国油化学协会”杂志65:1922(1988)]。这篇参考文献的表1示出了几种经济上主要的植物油之间的特殊成分的差异。表2表明玉米油特有的成分β-谷甾醇的最低极限值为2.20毫克/克。
初始材料是已知的,而且很容易从伊阿华州立大学(Ames,Iowa)的USDA植物引种站购得。得自阿梅斯(Ames)收集站的植物引种初始材料,包括在本发明中用作样板种质源的品种和品系,列在本文的表1中。由这些表中编号所代表的品种和品系在自交之后,生产出了得自各个玉米穗的成批种子,所说个体玉米穗能够在显示可变的全部油酸含量的同时,还包括了重要个体种子的油酸值的百分率:约为45%或者更高,但通常约低于55%。但是,使指示的品系自交而得的各个玉米穗之间的油酸含量有广泛的变异。例如PI303851(智利)所生产的种子的油酸含量是32.9~48.49%。表1示出了挑选出的玉米穗上的籽粒的油酸含量。
表1 样板种质源植物引种(SO穗)单个种子油样[阿梅斯(Ames)收集品]
植物引种编号 来源 油酸含量(%)
162573 阿根廷 42.04,44.58,40.86,
52.75,39.18
186218 ″ 45.16,44.03,46.29,
47.27,45.88
180163 奥地利 40.54,40.18,49.04,
42.74,43.09
303851 智利 48.49,45.52,44.77,
32.93,40.53
291391 中国 49.50,43.53,47.32,
43.18,44.78
303878 日本 43.62,47.09,42.49,
41.66,48.32
303889 日本 39.78,44.23,49.26,
40.36,42.72
181839 黎巴嫩 48.25,53.63,49.49,
61.15,57,15
209135 波多黎各 51.55,32.79,40.08,
42.88.37.38
228182 俄罗斯 50.40,46.95,48.89,
45.47.47.02
236995 西伯利亚 4.58,32.53,42.25,
30.44,43.86
180230 英国 46.60,40.17,33.46,
44.00,46.41
218162 美国(亚利桑那) 36.82,35.02,44.33,
43.19,42.53
213701 美国(伊阿华) 46.15,38.97,45.35,
40.46,38.62
217406 美国(伊阿华) 48.72,37.14,35.61,
42.48,41.88
217409 美国(伊阿华) 50.78,37.01,35.94,
40.16,40.15
218141 美国(新墨西哥) 46.58,44.02,39.97,
35.05,37.92
218142 ″(″) 42.65,46.45,40.33,
49.84,34.53
213796 ″(北达科他) 40.27,48.19,41.41,
41.86,39.86
245130 美国(罗得岛) 41.68,44.89,43.53,
40.54,40.28
317680 美国(南达科他) 43.20,44.27,40.50,
44.01,44.89
公众可得到的玉米种质的其它种质源包括:美国农业部的国家种子储藏实验室(科罗拉多州立大学),科罗拉多、柯林斯堡)和玉米和小麦发展国际中心(Centro Internacional de Majoramiento de Maizy Trigo,Londres 40,Apertado Postal 6-641,06600 Mexico,D.F.,Mexico)。
根据本发明,对一个合适的起始品种或品系的成批种子进行筛选,以鉴别出那些油酸含量至少为45%的种子。筛选工作可以采用例如半种子技术来实现。此时,要将种子的子叶盘(scutulum)切开,并把提取出的油用GLC进行分析。参见“作物科学”[Jellum and Worthington,Crop Sci.6:251-55(1966)]。或者,采用类似的分析法分析从一个完整的种子中提取的油。后一方法几乎不能保全用于发芽的胚胎。筛选工作可以在最初的自交步骤之前进行,或者如果需要有一个大的分离度的活则也可在由整批种子长成的植物的自花传粉之后进行。
然后,把得自这样鉴别出的具有约45%或者更高的油酸含量的种子的胚胎以常规的方法使其生长成熟,使其自花传粉,以便扩大所选择的种质的供应。本文所述方法的这一阶段和其它阶段,生长条件最好是避免热量和温度的压力。然后让得自自交的作物种子生长成熟,并与同一个自交群体内的个体以使群体内的传粉以最大的混合方式进行杂交(同胞交配)。
为了高的油酸值,把同胞传粉的后代再次进行筛选,挑选出具有较高的油酸含量百分率的特别是超过10%的后代。之所以选择这样一个用以挑选后代的较高的范围,是为了适应油酸含量在种群中相对于该种群最终要达到的油酸值的量值而升高的速度。较低的选择压力将会在群体内保持一个较高程度的基因易变性。然后用具有选定的较高范围的种子生长成的作物进行另一轮的同胞传粉和选择。通常在2-4轮这样的轮回选择之内,人们就能够由选自上述亚群的初始材料着手获得特征是籽粒集合的平均油酸值是55%或者更高,例如在为60%-75%的范围内,的玉米品种来。
在2-4轮的辅助的自花传粉和选择之间,一般需要达到一个比较同质性的状态。至少就高油酸值而言是这样的。这是真育种品种或品系所指示的。在任何场合下,结合本发明的高油酸品种材料的这种近亲繁殖,都能够达到使单个籽粒油酸值超过65%,更好地是约70-85%。
在育种过程中培育的玉米种子的脂肪酸成分可以用GLC法按照上述杰伦和华盛顿(Jellum and Worthington)所公开的步骤测定。GLC分析可以在5个(或更多个)籽粒组成的籽粒集合试样上和一个一半籽粒的试样上进行,后者可以使剩下的半粒种子继续种植,以便进一步育种。
良种高油酸玉米品系(在原文中Oleic acid lines和Oleic Iines可以互换使用)可以通过把高油酸品系(来自高油酸作物引种种群)与一个农学良种在给定的成熟地区进行杂交的办法培育出来。例如,LH85是一个油酸含量范围为26.1-35.9%的良种玉米近交系,85-205-6是一个用本发明的步骤培育出来的高油酸品系。把LH85与85-205-6杂交,接着进行2-4代的自交和选择具有所希望的农学特性的高油酸品系,则由这一育种努力所得到的最终品系除了具有高的油酸含量外,还显示出合格的农学特性。如:植物活力大、具良好的茎杆和根系、抗病力强等等。通过把高油酸品系与若干个良种品系杂交、自交和从杂种中选择的办法,能够生产出很多种新的高油酸玉米品系。这些品系能够由于在良种玉米亲本中选择适当的成熟度和在后续的自交世代中选择理想的成熟度而适合所希望的任何成熟地区。由本发明方法培育的高油酸品系在玉米杂交时可以用作一个或多个亲本。
再之,如对良种轮回亲本进行一次或多次回交,则能够在保持高的油酸特性的同时结合更高比率的良种种质特性。例如把杂种PA91X85-205-21与PA91回交(标示为PA91285-205-21)。然后让其后代自交并进行高油酸品系的选择。PA91是一个128天成熟期的在宾夕法尼亚州立大学培育的良种玉米近交系。85-205-21是一个用本文所述步骤培育的高油酸品系。这样回交的19号穗上的5个籽粒集合的GLC分析表明其所具有的油酸含量为56.4%。19号穗上的31号籽粒的半籽粒GLC分析结果是其具有72.4%的油酸含量。19号穗上的31号籽粒剩下的一半被继续种植,用于进一步的育种步骤,比如:(1)进一步地自交和选择;(2)与PA91轮回亲本进行追加的回交,以便结合更多的PA91良种本底;(3)与其他的良种品系杂交,以便在保持高油酸特性的同时结合所希望的特性;(4)进行其它常规的育种,以便大批量地培育具有商业可行性的玉米近交种和杂种。
如上所述,为本发明的高油酸表现型而真育种的近交系有利于用在回交程序中用来把高油酸特性渗入到其它的、农学上更理想的品系中。例如,本发明一个真育种近交系可以是用于同一个蜡质玉米品系回交的授体亲本。这样,可产生一个高油酸蜡质杂种或品系。在这一点上,“杂种”可以是一个通过使不同血缘的亲本作物杂交所得到的后代。
正如“玉米和玉米改进”(第三版)[Coe et al.Corn and Corn Improvement(3d ed.).,Sprague,G.F.and Dudley,J.W.,Eds.,P.142-143(美国农学协会,威斯康星州麦迪孙,1988]中由寇(Coe)等人[此后简称为“寇等人(1988)”]所描述的那样,籽粒的蜡质型是如此的独特且它的表现是如此地不会被混淆,以致于该蜡质特性常被用作一个通用标记。当蜡质胚乳用刀切时,切开得非常整齐,留下一个光滑的不透明表面。而正常的胚乳用刀切时则不整齐地裂开,并留下一个不规则的半透明的表面。此外,非蜡质胚乳的外表面上的淀粉染有蓝色,遇碘-碘化钾溶液时很快变为黑色。而为蜡质等位基因(W×1)所纯合的材料的胚乳的外表面上的淀粉则染有红棕色,遇碘-碘化钾溶液时很快变成黑棕色。
根据本发明,蜡质特性的这一独特性质为与后代的轮回蜡质亲本-对照于授体蜡质(W×1/W×1)亲本-的方便地回交创造了条件。所指后代是(高油酸×蜡质)杂种。也就是说,回交世代的进展易于监视。这样,除了表现45%的或者更高一些的平均油酸值之外,高油酸授体的种质影响实际上被消除。
正象上面所述的那样,高油酸表现型的种质渗入也可以借助以除蜡质特性之外的特性为特征的基因本底方面来达到。根据本发明,对那些能够与高油酸表现型相结合的特性的说明在表2中列出。
表2 与高油酸表现型相结合的样板玉米特性
因子*说明
胚乳突变体
aelS“直链淀粉增长体(extender)”:可将淀
粉中的直链淀粉的百分率提高到50%
(玻璃状的、无光泽的胚乳);ael基因
十修饰因子为直链淀粉含量提供了一个
约50-80%的范围。但是直链淀粉的含
量能够被稳定在中间值;参见“玉米遗
传协作通讯”[Vineyard and Bear,
Corn Genet Coop.Newsltr.26:5
(1952)]。
o2S"无光泽"-2胚乳":降低胚乳中的玉米
朊和增加胚乳中的溶胞素(软的、白垩
质的,不透明的籽粒;小的、硬的、透
明的或者角质的胚乳);参见“科学”
[Nelson et al.,150:11469-70(1965)]。
抵抗常见叶锈病(Puccinia sorghi):
Rp1 “遗传”杂志[Mains,17:313-25(1926)];
“农业研究”杂志[J.Agric.Res.43:419-
30(1930)]
Rp3S“植物病理学”[Wilkinson and Hooker
Phytopathol.58:605-08(1968)]
Rp4SWilkinson and Hooker,loc.cit.
(1968)
Rp5S“美国科学院自然科学学报”[Saxena
and Hooker,Proc.Nat′l Acad.Sci.
USA 61:1300-05(1968)]
Rpp9S抵抗南方的叶锈病(Puccinia polysora
Underw.);“植物病理学”[Ullstrup,55:
425-28(1965)]
抵抗北方的叶斑病(Cochliobolus carbonum Nelson)
Hml 使具有完全的抗力,尽管有些等位基因
是中势的;“遗传”杂志[Nelson and
Ullstrup 55:194-99(1964)],“植物
病理学”[Hamid et al.,72:1169-73
(1982)]
Hm2 使具有抗力,在纯合的隐性的hml存在
的情况下,该抗力最初较低,但是随着
植物的培育逐渐加强。“遗传”杂志
[Nelson and Ullstrup 55:194-99
(1964)],“植物病理学”[Hamid et al.
752:1169-73(1982)]。
抵抗南方的玉米叶凋萎病[(Bipolaris maydis)(Nisik)
Shoemaker(race 0)]:
rhmlS“作物科学”[Smith and Hooker,13:
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Ht2SHooker,loc.cit.17:132-35(1977)
Ht3S“玉米遗传协作通讯”[Hooker,55:87-
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因型htl/htl.Bxl/Bxl和Htl/Htl/Bxl/
Bxl上的传染程度,与bxl/bxl配对物相
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蚜虫、玉米、花叶病、病毒I、EradicaneTM、灭草剂、干旱、
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[Change and Brewbaker,50:31-32
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Mvl 抵抗玉米花叶病病毒I[Brewbaker,in
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thcl 抵抗EradicaneTM(S-乙基-二丙基硫
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学文摘”[Pfund and Crum,P.66(1977)]
1tel “玉米遗传协作通讯”[Miranda,55:18-
19(1981)](也支配抗霜力)
Lte2 Miranda,loc.cit.56:28-30(1982)。
支配花粉竞争的,不利于玉米果穗穗丝与相同基因型的别的花粉的受精作用(Gal-s花粉为Gal-s穗丝向外排斥gal花粉);保持品系与异型杂种的分离:
Gal-Ss“美国科学院自然科学学报”[D.
Schwartz,36:719-724(1950)]。
GA8 “玉米遗传协作通讯”[Schwartz,
25:30(1951)]。
↓因子的名称与寇等人(1988)的连锁图中使用的一致。上标“S”表明可从农业部、玉米基因原种中心,伊利诺斯大学(Urbana)得到。
此外,很多种能够给予玉米雄性不育性的方法都能够用来生产雄性不育的本发明的高油酸原料。按照本发明,这种原料反过来也能够用以生产还显示出高油酸表现型的杂种。具有这样的高油酸表现型的近交系可以有益地用于回交程序中作为含有能给予雄性不育性的核因子和胞质因子的胞质遗传雄性不育授体(A品系)的一个轮回亲本;作为含有能给予雄性不育性的核因子而不含能给予雄性不育性的胞质因子的授体(B因子)的一个轮回亲本;以及作为含有能把能育性交还给雄性不育材料的核因子和胞质因子的授体(R品系)的一个轮回亲本,例如寇等人(1988)在195-98页和第206-09页,以及“大田作物育种”(第二版)[Poehlman,AVI Publishing Co.(1979)]第292-95页所述及的。胞质雄性不育性(cms)因子的种源包括:侯登基础种子公司[Holden′s Foundation Seeds,Inc.,P.O.Box839,威廉斯堡,依阿华州52361(cms-S and cms-C)]、伊利诺斯基础种子公司[P.O.Box722,香巴涅,伊利诺斯州61820(cm-S and cms-C);以及农业部、伊利诺斯大学[urbana,伊利诺斯州,cms-T,cms-S,cms-C和各种Rf因子]。
例子:
下面的例子只是为了进一步解释本发明,并没有在超过在所附加的权利要求中规定的界限以外限制本发明的意图。
例1:
脂肪酸含量的测定:
在育种过程中培育的玉米种子中脂肪酸成分按照下述步骤用GLC测定。
用具有下列步骤的玉米油提取方案提取油质:
1、从玉米穗上取下玉米试样,然后根据行号和系谱列出目录。
2、将试样用一个捣锤在研钵中捣碎,添入乙醚,并将试样继续研磨10秒钟。
3、将该溶液通过非吸收性棉布吸进一个吸管中,然后将净化液放进一个试管中。
4、向试管内的溶液中添加三滴四甲胺或甲氧基钠,并让它们反应五分钟。
5、五分钟之后,将蒸馏水添加到溶液中,以升起试管内的液面。由于油比水轻,因此油可用虹吸管从顶层吸出来。
6、将吸出的油放进一个2毫升的小玻璃瓶中,加入乙醚,以使瓶内液面升至瓶高四分之三处。
7、然后,将小玻璃瓶盖上盖,这样就为用气-液色层法进行处理做好了准备。
对于半个种子试样的分析来说,要将个体种子用一个剃刀片切成两半。然后将含有子叶盘(scutella)的那一半放到一个装有少量乙醚约1-1.5毫升-的研钵内,用捣锤将这半片碾碎,并搅动约10秒钟,再将溶液通过非吸收性棉布吸出并放到试管内。然后把0.5毫升乙醚提取物试样用上述方法进行处理。一半种子的脂肪酸分析形式能够使剩下的半粒种子在育种圃中继续种植,并用这种基因型进行更多的研究和扩大繁殖。
GLC分析用一台装有火焰电离探测器的5890A Hewlett-Packard气液色谱仪和一台Hewlett-Packard 3396A积分仪来完成。所用的柱体是Supelco 2330型熔融二氧化硅毛细柱(其具有一个厚度为0.2微米的薄膜,柱管尺寸为15米×0.25毫米)。进行GLC分析的操作条件包括:250℃的注射器温度和300℃的探测器温度;柱管流量是2.0毫升/分的氦。每一台色谱仪的运行都是把温度程序化的,即以170℃开始并在该温度上保持1.0分钟,然后以每分钟1或2℃的升温速度将温度升至180℃。经过该段时间之后,色谱仪工作结束,而柱体准备进行下一轮工作。
例2:
来自作物引种种质的高油酸玉米品系85-205-6和85-205-21的培育:
在本发明的样板实施例中,由上文中限定的合适的初始材料亚群内的代表性的玉米原料经作物引种而得的种子得自依阿华州立大学的USDA植物引种站。在生长成熟和自交阶段之后,将来自自交后的引种作物的穗上的种子以低亚油酸含量为目的用GLC法进行筛选。在1982年以前,为了低亚油酸含量的目的至少进行了两轮的轮回选择。作物引种的种子是轮回选择种群的原本。
1982年通过混合来自头七行的5-8株作物的花粉并授粉到次八行作物上的办法进行了同胞交配,几天后反过来进行。这块地上收获了80个同胞交配的穗并进行了油分分析,结果如表3所示:
表3:1982年收获的80个SO同胞交配穗的油酸值
穗 油酸 穗 油酸 穗 油酸
-1 49.77 -27 47.25 -53 49.32
-2 47.20 -28 48.23 -54 50.58
-3 44.29 -29 46.11 -55 36.93
-4 45.13 -30 47.56 -56 40.81
-5 48.58 -31 50.06 -57 44.13
-6 46.41 -32 50.03 -58 47.75
-7 49.16 -33 48.64 -59 47.21
-8 48.93 -34 53.18 -60 31.86
-9 43.06 -35 50.02 -61 50.99
-10 53.15 -36 49.41 -62 48.67
-11 52.67 -37 55.21 -63 52.19
-12 52.34 -38 51.66 -64 46.57
-13 47.05 -39 48.16 -65 52.37
-14 48.37 -40↓↓ 53.07 -66 47.75
-15 41.06 -41 47.29 -67 50.91
-16 48.97 -42 47.13 -68 49.03
-17 51.53 -43 44.42 -69 49.03
-18 48.91 -44 45.39 -70 43.08
-19 53.16 -45 49.42 -71 55.38
-20 50.80 -46 42.73 -72 46.76
-21 54.01 -47 45.70 -73 49.86
-22 43.87 -48 50.44 -74 50.24
-23 45.54 -49 43.85 -75 47.68
-24 50.18 -50 43.36 -76 45.38
-25 43.94 -51 58.98 -77 46.51
-26 24.02 -52 52.01 -78 42.88
-79 52.36
-80 40.73
↓↓从这个穗上收获的种子1983年用来种了第9行。
把1982年同胞交配的80个玉米穗中的10个SO玉米穗于1983年复种,在一块地上进行自交而在另一块地上进行第二轮的同胞交配。把一个15行的同胞交配地块标记为82-805。对一组24个自交的玉米穗进行了脂肪酸成分分析,结果如表4所示:
表4:1983年收获的24个自交(S1)穗的油酸值
行号 油酸 行号 油酸
83-221-1 53.45 -13 61.19
-2 65.08 -14 54.25
-3 58.65 -15 56.62
-4 56.79 -16 48.28
-5 56.27 83-221-17 55.11
-6 52.01 -18 57.88
-7 47.81 -19 54.67
-8 51.00 -20 58.45
83-221-9↓↓ 71.13 -21 56.72
-10 60.07 -22 51.05
-11 58.42 -23 55.06
-12 55.85 -24 57.66
↓↓从这一行上收获的种子1985年用来种了行205。
1985年把83-221-9穗种到了一个具有4行的苗圃地块(85-205)里,并让其自交。苗圃的记录把这一小区记成具有“良好的作物”,它们有5-6英尺高。收获时,穗被描述成“中等的小”和“分离”(就颜色而论,等等)。在种子间里,5个穗被弃去,32个穗被剥了皮并分别进行了包裹。有一个玉米穗被标为85-205-6,另一个穗被标为85-205-21。对8-10个籽粒集合进行的GLC分析表明,85-205-21所具有的油酸百分率为73.2~75.8%,而85-205-6的平均油酸含量为69.7%。
例3:
来自85-205-21的高油酸玉米基因型的培育:
让来自基因型85-205-21的种子发芽生长,并使长成的植物自花传粉,把取自一个S2穗(1076010-1)的单个籽粒通过GLC进行分析,结果是油酸含量范围为67.7%-73.1%。选择10760109-1进行自交,对取自S3穗上的半个籽粒的GLC分析结果是油酸含量为66.1~76.1%。
1988年,S3穗10833030-11的籽粒4被选出种于明尼苏达州布莱肯里奇的夏季苗圃里。这株植物是自花传粉的。取自具有最高油酸值的自交玉米穗的半个种子分析表明,在这个穗上的油酸值的高低是均匀的(对五个籽粒的分析结果是:77.3%,76.8%,78.1%,80.9%,80.3%)。由另一个挑选的S3基因型自交获得的S4玉米穗种子的半个种子分析产生了一个最高的油酸值(82.1%),而在同一个穗上最低的值为70.8%。在用整批种子提取出油的玉米穗中,还没有油酸值低于64.1%的穗。进一步的自交产生了平均油酸含量在65%以上的真育种品系。借助于本发明的高油酸玉米原料,能够生产出比至今为止任何所得到的玉米油的油酸比率都要高的玉米油来,它可以与大批量供应的菜籽(canola)油相比美而高于大多数向日葵油。不管是从提高油的氧化稳定性的观点考虑还是从与以单不饱和脂肪酸代替聚不饱和脂肪酸的饮食替换有关系的健康利益来看,这个提高了的油酸值是有好处的。
例4:
商业上可接受的高油酸玉米基因型的培育:
1987年,在布莱肯里奇的夏季苗圃种植了脂肪酸玉米材料85-205-6。把种植在行8701013923中的近交系LH85作为雌性亲本与种在行8701013832中的85-205-6的4号作物进行杂交。LH85的单个籽粒的油酸含量是26.1~35.9%。LH85是一个有所有权的品系,在许可的情况下可以从霍顿的基础种子公司获得。而且该品系是用Pioneer Hi-Bred International′s 3978杂种为原料直接自交培育出的。花粉亲本(85-205-6)是一株从种子生长的植物。种植前对由10个籽粒组成的籽粒集合预先进行了分析,表明生长出上述植物的种子具有69.7%的平均油酸含量(见例2)。
1982年,在布莱肯里奇的秋季温室里,把由上述杂交而得的F1代作物种在行10710121中并使其自交。对取自第三株植物的大约五个籽粒的分析表明的平均油酸含量为46.7%。
1988年,在夏季苗圃里种植了得自1987年的秋季温室的种子,让长成的作物自交。收获时所有的玉米穗都放进一个袋子中。取自7号穗的第14号籽粒的半个籽粒GLC分析显示了75.3%的油酸含量。在1989年的春季温室里,将剩下的一半籽粒进行了发芽、移栽处理,并标示为行10821193中的第1株作物。该作物进行了自交。来自这株作物的种子没有进行分析。
1989年,在布莱肯里奇的夏季苗圃里将自交的作物(10821193)的种子种到了10901914行和10901915行中。所有的植物都是自交。穗收获后放到一个标号为10911914的袋子里。对取自1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14和15号穗的种子进行了五籽粒集合分析。然后对取自除8、11和12号穗之外的其它所有穗上的单个籽粒进行了半籽粒分析。除了14号穗上的一粒种子外,其它所有种子的油酸含量至少是70.9%。取自13号穗的种子的油酸含量较低,最有可能是该穗意外地与具有较低油酸基因型的植物杂交。GLC分析的结果如表5和表6所示。
表5 玉米穗的油酸值
单个种子的
穗 五籽粒集合 高 低 中(mean)
1 76.8 81.3 72.8 76.8
2 76.7 76.6 75.6 76.2
3 75.2 79.5 74.5 77.4
4 75.7 77.3 74.6 75.6
5 77.0 79.0 70.9 76.6
6 75.0 79.1 76.2 77.2
7 76.8 80.8 74.8 78.2
8 74.5 - - -
9 75.1 77.0 72.3 75.8
10 76.1 78.0 75.6 76.8
11 73.9 - - -
12 73.5 - - -
13 69.7 74.4 60.0 71.3
14 77.5 81.1 78.6 79.6
15 77.2 77.6 73.3 76.4
表6 玉米穗的油酸值
穗·籽粒 油酸 穗·籽粒 油酸 穗·籽粒 油酸
1.1 77.1 6.1 77.7 11.1 75.6
1.2 77.1 6.2 78.1 11.2 78.0
1.3 77.2 6.3 78.3 11.3 76.2
1.4 76.9 6.4 79.0 11.4 76.7
1.5 76.5 6.5 78.3 11.5 77.3
1.6 72.8 6.6 71.7
1.7 76.0 6.7 76.1 14.1 60.0
1.8 76.7 6.8 77.0 14.2 71.4
1.9 77.4 6.9 76.7 14.3 72.2
1.10 81.3 6.10 70.9 14.4 70.2
1.11 75.0 6.11 75.4 14.5 73.9
1.12 78.1 6.12 77.2 14.6 71.5
1.13 75.5 6.13 77.5 14.7 71.1
1.14 77.3 6.14 77.0 14.8 70.5
1.15 77.1 6.15 77.5 14.9 71.4
14.10 73.3
2.1 75.7 7.1 77.0 14.11 71.6
2.2 76.6 7.2 79.1 14.12 73.6
2.3 75.6 7.3 77.0 14.13 74.4
2.4 76.4 7.4 76.5 14.14 73.4
2.5 76.6 7.5 76.2 14.15 70.1
14.16 71.6
3.1 76.8 8.1 80.8
3.2 78.3 8.2 80.1 15.1 78.6
3.3 78.3 8.3 79.4 15.2 81.1
3.4 76.7 8.4 77.6 15.3 79.8
3.5 76.7 8.5 79.3 15.4 78.7
3.6 77.9 8.6 78.5 15.5 80.0
3.7 74.5 8.7 76.5
3.8 79.5 8.8 79.5 16.1 77.3
3.9 76.1 8.9 77.7 16.2 76.9
3.10 77.5 8.10 78.5 16.3 77.0
3.11 78.2 8.11 76.5 16.4 77.6
3.12 76.9 8.12 76.5 16.5 73.3
3.13 79.1 8.13 74.8
3.14 78.1 8.14 78.1
3.15 76.0 8.15 79.9
4.1 76.6 10.1 76.4
4.2 74.9 10.2 77.0
4.3 77.3 10.3 72.3
4.4 74.6 10.4 76.4
4.5 74.8 10.5 76.7
↓1.1=穗1,籽粒1;1.2=穗2,籽粒2;等等。
按照上述步骤,用下面的良种玉米品种代替LH85,获得了平均油酸含量高于45%的高油酸玉米品系。
油酸百分率(%)
McCurdy′s74-41(MC74-41) 31.8-34.2
B73 22.0-39.8
Mo17 19.2-22.9
M50-1 18.1-25.6
PA91 29.7-32.5
Jacques17(J17) 20.7-32.0
McCurdy′s731(MC731) 23.9-26.2
McCurdy′s75-103(MC75-103) 25.3-27.5
McCurdy′s851(MC851) 32.6-34.7
按照上述步骤,用任何商业上可接受的良种玉米品系均可获得平均油酸含量高于45%的高油酸玉米品系。
例5-11:
高油酸玉米品系以回交方法进行培育:
在本发明的另一个实施例中,对良种轮回亲本进行了一次或多次回交,在保持高油酸特性的同时,还结合了较高百分率的该良种种质特征。
已经在高油酸选择物和良种轮回亲本-包括B73、Mol7、PA91、J17、M50-1、MC74-41、MC75-103、MC851与MC731-之间进行了回交。大约2936颗自交的回交半籽粒的GLC分析结果产生了约40颗与轮回亲本回交的籽粒。合适的高油酸选择物的样品在下面的表中被标以上标“1”。
例5:
用PA91作为轮回亲本进行高油酸玉米品系的培育:
1989年,在布莱肯里奇的冬季温室里,PA91与预先指定的高油酸品系85-205-21进行了杂交。PA91是一个128天成熟的在宾夕法尼亚州立大学培育的玉米近交良种。PA91是从[(Wf9×Oh40B)4]×[(Ind38-1)×L317)Ind 38-1)4]的基因本底选择出的。85-205-21是一个在上面的例2中培育的高油酸品系。这一杂交的种子种植在伊利诺斯州的林肯,然后同轮回亲本PA91进行第一次回交。第一次回交的种子种植于波多黎各,在那里让植物自交。BC1自交穗19的五籽粒集合的GLC分析的结果为具有56.4%的油酸(见表7)。取自19号穗的31号籽粒的半籽粒GLC分析结果为具有72.4%的油酸含量(见表8)。在表8的第一栏(行号)中标有上标“1”的各个籽粒是与良种PA91亲本回交的。
表7 得自系谱PA912HO的BC1的五籽粒集合的油中的脂肪酸含量
油组分(%)
软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
3908698-1 8.9 2.1 47.2 41.0
-2 9.7 1.5 44.5 44.3
-3 12.4 2.0 47.7 37.0
-4 12.0 1.8 40.7 45.5
-5 10.3 2.1 35.8 51.9
-6 10.9 1.9 39.4 47.1
-7 11.2 1.8 53.5 32.8
-8 11.8 2.2 34.2 51.7
-9 11.0 1.8 46.9 39.6
-10 13.4 2.0 34.2 49.7
-11 8.5 1.8 36.3 52.6
3908698-12 13.1 2.0 36.4 48.5
-13 12.9 1.7 30.3 55.1
-14 11.1 2.5 36.5 49.0
-15 11.2 1.5 55.4 30.8
-16 13.1 1.7 46.5 38.7
-17 12.1 1.9 43.4 41.8
-18 10.7 2.1 41.4 44.8
-19 9.1 2.1 56.4 31.1
-20 8.3 1.9 35.6 53.3
表8 得自系谱PA912HO的BC1半籽粒的油的脂肪酸含量
油组分(%)
软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗·籽粒 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
3908698-19.1 6.9 2.4 63.0 27.8
-19.2 8.4 2.6 67.4 19.3
-19.3 10.3 3.0 47.1 39.6
-19.418.6 3.0 70.3 18.1
-19.5 10.9 2.9 39.2 46.9
-19.6 11.2 3.1 41.9 43.8
-19.7 8.3 3.4 45.1 43.1
-19.8 11.9 2.9 45.1 39.3
-19.9 10.3 2.3 45.9 41.5
-19.10 12.8 2.1 40.1 44.0
-19.11 7.0 2.3 47.7 41.8
-19.12 13.6 3.5 42.9 39.9
-19.13 7.1 2.8 43.0 45.6
-19.14 11.1 2.5 53.5 30.5
-19.15 10.0 2.2 36.7 50.1
-19.16 9.1 4.2 68.3 18.3
-19.17 9.2 2.8 56.2 31.9
-19.18 7.0 2.8 46.2 44.0
-19.19 6.7 2.5 54.0 32.4
-19.20 12.9 3.8 40.5 42.8
-19.21 12.3 3.0 60.8 21.4
3908698-19.22 11.2 2.4 43.9 41.2
-19.23 12.2 2.5 50.4 33.7
-19.24 8.3 2.5 42.4 44.3
-19.25 10.5 2.9 43.9 41.3
-19.2615.8 2.0 71.4 19.6
-19.27 9.8 2.6 45.4 40.2
-19.28 9.0 1.9 69.2 18.1
-19.29 9.0 2.4 61.0 25.5
-19.30 10.4 2.6 53.4 31.0
-19.3115.7 1.9 72.4 18.5
-19.32 10.2 2.1 44.3 40.8
-19.33 8.9 2.8 69.4 17.1
-19.34 9.8 2.9 36.1 49.4
-19.35 10.5 3.1 47.4 37.1
-19.36 10.5 3.2 51.4 33.6
-19.37 11.1 2.8 48.2 34.3
-19.38 7.6 3.0 65.4 22.2
-19.39 10.8 2.3 56.1 28.4
-19.40 9.9 2.9 41.9 43.1
-19.41 9.6 2.1 57.1 29.2
-19.42 10.0 3.6 45.4 39.2
-19.43 10.1 3.6 41.7 43.2
-19.44 9.5 3.2 45.9 41.4
-19.45 10.0 2.2 36.9 49.5
-19.46 13.1 3.0 37.9 43.0
-19.47 9.6 3.0 40.2 45.6
-19.48 10.9 2.7 37.2 47.5
-19.49 10.8 2.4 43.3 42.1
-19.50 9.7 2.3 46.7 39.7
-19.51 7.8 2.8 38.6 48.5
-19.52 9.2 3.3 49.4 36.6
-19.53 10.4 2.6 33.8 51.1
-19.54 12.6 2.2 41.9 41.9
-19.55 7.0 2.6 46.3 42.5
-19.56 6.1 2.4 69.9 20.1
-19.57 12.0 -- 50.1 34.6
-19.58 9.3 2.3 47.0 40.1
-19.59 7.2 3.4 41.9 46.0
-19.60110.0 2.7 71.5 14.7
-19.61 9.6 2.0 49.5 37.5
-19.62 10.1 3.6 36.2 48.4
-19.63 9.4 2.5 35.1 52.4
-19.64 7.3 2.8 39.6 48.1
-19.65 9.9 3.0 47.1 38.1
-19.66 7.2 2.0 66.0 23.0
-19.67 8.6 3.6 43.5 42.8
-19.68 9.4 3.2 41.7 44.3
3908698-19.69 9.1 2.4 64.6 22.6
-19.70 8.3 2.4 36.8 50.1
-19.9716.7 3.4 70.6 17.7
-19.10416.2 2.5 70.2 19.9
-19.13015.8 1.7 71.1 19.3
-55.1619.8 2.2 70.0 18.0
通过2-6轮的与良种亲本回交及然后自交和选择高油酸分离种,生产出了具有与PA91基本相同特性的并还具有来自85-205-21的高油酸特性的良种玉米近交种。
例6:
用MC731作为轮回亲本进行高油酸玉米品系的培育:
在本发明的另一个实施例中,与良种亲本MC731进行了一次回交,目的是在保持高油酸特性的同时,结合更高比率的MC731的良种种质特征。
将高油酸玉米品系85-205-21与MC731进行了杂交。MC731是一个由麦克寇迪种子公司(MC Curdy′s Seed Company,Fremont,Iowa)培育的具所有权的品系。MC731的本底是B732N7A。BF32N7A是杂种(B73×N7A)B73的缩写。85-205-21的本底描述于例2之中。
把MCT31×(85-205-21)杂交种与MC731回交。如例1中已描述过的,把来自这一杂交种的各个S1穗的5籽粒集合用GLC法进行分析。如表9所示,行151的1号穗的油酸值是67.5%。根据对行151的1号穗的各个籽粒的进一步的GLC分析(示于表10),1号穗的4号籽粒的油酸百分率为73.9%,27号籽粒的油酸百分率为72.3%,38号籽粒的油酸百分率是75.3%。这三个值均高于以前曾报道过的玉米中的最高油酸百分率。在表10的第一栏(行号)中标有上标“1”的籽粒是与MC731亲本回交的。根据例5,生产出了基本上具有与MC731相同特征的高油酸近交种。另一方面还可使籽粒进一步自交以培育良种品系。
表9 来自系谱MC7312HO BC1的5籽粒集合的油的脂肪酸含量
油组分(%)
软脂肪 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
143-1 7.8 1.6 41.5 48.1
143-2 8.8 1.7 54.9 36.6
143-3 8.8 1.7 44.1 44.5
144-1 7.3 2.5 29.6 59.6
144-2 9.3 1.9 46.9 40.1
144-3 8.1 2.0 31.2 57.8
144-4 7.2 2.5 42.8 46.5
144-5 9.8 1.5 36.0 51.8
145-1 9.9 2.6 51.8 34.7
146-1 7.4 1.9 44.2 45.6
147-1 6.8 2.0 46.0 45.2
148-1 9.1 2.5 67.2 20.4
149-1 8.2 1.7 51.1 38.0
150-1 9.0 2.4 35.4 52.3
150-2 7.2 1.7 45.3 45.7
151-1 6.8 2.0 67.5 23.7
152-1 6.9 2.4 61.8 28.4
153-1 9.3 2.3 38.6 48.8
表10 来自系谱MC7312HO BC1的半籽粒的油的脂肪酸含量
油组分(%)
软脂肪 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗·籽粒 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
151-1.1 8.5 1.9 35.0 53.0
1.2 7.8 2.6 37.8 50.2
1.3 8.2 2.1 51.9 36.3
1.417.5 2.5 73.9 14.8
1.5 7.7 2.0 49.5 39.3
1.6 9.4 2.2 49.8 37.4
1.7 9.0 2.3 42.6 43.9
1.8 8.2 2.5 45.9 41.9
1.9 6.5 2.1 54.7 35.5
1.10 8.8 2.1 49.8 39.3
1.11 7.3 2.2 69.5 19.4
1.12 9.9 1.6 36.4 50.6
1.13 8.7 2.1 46.9 40.7
1.14 10.2 2.8 48.9 38.2
1.15 8.1 1.8 66.4 22.2
1.16 9.4 2.3 47.0 39.3
1.17 7.0 2.5 55.4 32.2
1.18 7.9 2.5 43.5 44.1
1.19 7.4 1.9 50.9 38.4
1.20 6.3 2.0 54.7 36.1
1.21 5.4 2.1 41.2 50.1
1.22 10.0 2.4 44.5 41.7
1.23 8.1 2.0 63.4 24.9
1.24 5.7 1.6 47.6 43.4
1.25 6.5 2.2 50.4 39.6
1.26 9.9 2.7 50.9 35.1
1.2716.8 2.3 72.3 17.0
1.28 5.9 2.1 47.9 42.5
1.29 9.6 2.3 40.5 46.1
1.30 7.1 2.2 36.7 52.4
1.31 7.7 2.1 50.9 37.5
1.32 10.1 1.8 27.4 59.1
1.33 8.0 2.8 45.7 41.3
1.34 8.5 2.1 37.1 50.7
1.3516.7 2.3 70.5 19.3
1.36 6.5 2.6 42.0 47.4
1.3717.5 2.2 72.3 16.6
1.3816.2 2.5 75.3 14.2
1.39 7.5 2.9 34.9 53.1
148-1.718.9 2.4 70.9 16.5
例7:
用MC851作为轮回亲本进行高油酸玉米品系的培育:
本发明的另一个实施例中,对良种亲本MC851进行了一次回交,以便在保持高油酸特性的同时结合较高比率的MC851的良种种质特征。
把高油酸品系85-205-21与MC851进行杂交。MC851是麦克寇迪的种子公司(Fremont,Iowa)培育的一个有所有权的品系。MC851是来自杂交种MC825×MC850,MC825的本底是7204×SC276,而MC850是育自SC276×AB18E。85-205-21的本底已在例2中描述过。
将MC851×(85-205-21)杂种与MC851进行回交,把从该杂种MC851285-205-21获得的各个S1穗的五籽粒集合用前面例1所述的GLC法进行了分析。如表11所示,094号行的2号穗的油酸值是68.3%。根据2号穗的各个籽粒的进一步的GLC分析(见表12),21号籽的油酸值是73.3%,64号籽的油酸值是73.2%。所有这些值均高于以前报道过的任何玉米的。在表12的第1栏中标有上标“1”的籽粒是与MC851回交的。
根据上述例5生产出了具有与MC851基本相同的特性的高油酸近交种。另一方面还可以让籽粒进一步自交,以培育良种品系。
表11 来自谱系MC8512HO BC1的五籽粒集合的油的脂肪酸含量
油组分(%)
软脂肪 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
092-1 13.8 1.8 40.7 43.8
-2 11.6 2.1 47.6 38.0
-3 13.7 1.9 39.3 45.0
-4 13.2 1.2 51.6 33.9
-5 14.2 2.0 38.1 45.7
-6 11.4 1.8 41.3 44.8
-7 14.8 2.0 36.7 45.9
093-1 12.9 1.6 38.7 46.8
-2 13.6 1.8 41.2 43.5
094-1 15.2 2.3 41.7 40.9
-2 7.3 1.9 68.3 22.5
-3 14.6 1.7 37.8 45.9
-4 14.7 1.6 48.1 35.6
095-1 11.4 2.2 40.1 45.7
-2 14.0 1.5 38.9 45.0
-3 11.6 1.6 49.5 37.2
-4 11.9 1.9 44.7 41.5
096-1 11.6 1.8 51.6 35.0
-2 14.0 1.7 47.6 36.8
-3 13.8 1.7 44.2 40.3
-4 12.0 1.8 57.4 28.8
-5 15.0 2.1 39.4 41.7
表12 来自系谱MC8512HO BC1的半籽粒的油的脂肪酸含量
油组分(%)
软脂肪 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗·籽粒 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
094-2.1 9.1 3.3 54.3 31.8
-2.2 8.6 2.9 64.1 24.3
-2.3 7.0 3.2 52.4 36.2
-2.4 8.7 2.7 67.4 20.1
-2.5 15.6 4.2 49.5 32.8
-2.6 11.2 2.9 64.9 20.4
-2.7 9.8 3.1 45.8 39.7
-2.8 10.0 2.9 48.2 38.9
-2.9 9.8 2.5 50.0 36.7
-2.10 8.4 2.7 65.1 22.9
-2.11 9.4 3.1 44.8 42.0
-2.12 8.3 2.4 65.8 21.9
-2.13 7.2 3.1 48.6 40.1
-2.14 6.9 3.2 50.9 39.0
-2.15 7.4 2.8 39.1 50.2
-2.16 6.8 2.6 52.5 37.3
-2.17 12.8 2.5 45.8 37.4
-2.18 6.5 3.0 55.6 33.9
-2.19 11.3 2.5 39.3 46.1
-2.20 11.0 2.4 40.4 46.1
-2.2115.4 3.5 73.3 16.9
-2.22 6.4 2.5 67.0 22.9
-2.23 11.0 2.5 40.1 46.4
-2.24 9.5 2.9 42.7 43.8
-2.25 7.1 3.1 66.6 22.1
-2.26 7.1 2.9 41.2 47.8
-2.27 8.7 2.9 61.6 25.8
-2.28 9.0 2.8 51.5 36.6
-2.2918.0 2.7 71.9 16.5
-2.30 7.3 2.8 38.8 49.8
-2.3115.8 2.4 70.8 20.0
-2.32 6.5 2.7 65.1 25.7
-2.33 6.7 2.8 47.2 42.0
-2.34 11.0 2.8 42.1 43.1
-2.35 9.8 2.5 58.1 28.6
-2.36 10.8 2.9 39.0 46.3
-2.37 9.0 2.5 61.1 26.1
-2.38 7.1 2.7 48.9 41.3
-2.39 12.0 2.6 42.6 41.5
-2.40 7.4 2.6 60.2 29.8
-2.4115.6 3.5 71.2 18.8
-2.42 11.7 2.3 52.9 32.0
-2.43 9.5 2.7 60.2 26.8
-2.44 10.3 3.5 56.7 28.6
-2.45 6.8 3.1 68.2 21.9
-2.46 9.9 2.6 48.2 38.3
-2.47 9.5 2.8 54.7 31.9
-2.48 9.6 2.8 51.7 34.5
-2.49 10.3 3.0 50.0 35.7
-2.50 14.3 2.3 41.5 40.9
-2.51 5.1 2.6 69.5 21.8
-2.52 9.5 2.7 50.7 36.1
-2.53 11.4 2.4 45.2 40.0
-2.54 10.1 2.4 53.9 32.6
-2.55 9.3 2.9 61.1 26.7
-2.56 5.3 2.8 67.6 23.1
-2.5717.7 2.9 71.2 17.3
-2.58 8.8 2.8 61.1 26.3
-2.59 10.3 2.9 46.5 38.8
-2.60 7.2 2.7 49.3 40.3
-2.61 8.9 2.6 60.2 27.0
-2.62 9.3 2.9 54.4 32.1
-2.63 6.8 3.2 44.2 44.8
-2.6415.7 3.1 73.2 17.0
-2.65 10.3 2.9 64.4 21.4
-2.66 8.2 2.6 67.2 20.8
-2.67 13.3 2.8 49.9 33.1
-2.68 11.4 2.7 63.4 21.4
-2.69 6.8 3.2 50.1 38.8
-2.70 12.1 2.6 50.8 33.1
-2.71 8.8 2.3 57.1 30.6
-2.72 11.8 2.5 48.3 36.6
-2.73 8.9 2.9 59.6 27.3
-2.74 12.5 3.1 43.3 39.8
-2.75 6.2 2.7 50.3 39.4
-2.76 9.9 2.5 43.8 42.7
-2.77 6.9 2.7 41.0 48.1
-2.78 12.7 2.9 48.2 35.1
-2.79 9.8 3.0 44.7 42.5
-2.80 13.9 2.5 47.4 36.1
-2.81 14.6 2.5 41.6 40.3
-2.82 10.2 2.8 51.3 34.5
-2.83 6.0 2.8 67.6 22.4
-2.84 6.5 2.7 67.1 22.7
-2.85 8.4 2.8 67.8 20.1
-2.86 8.7 2.7 64.9 22.5
-2.87 13.7 2.5 48.4 34.5
-2.88 7.2 3.1 51.8 37.8
-2.89 11.7 2.3 61.7 23.4
-2.90 10.9 2.5 44.3 41.0
-2.91 11.5 2.1 35.3 49.9
-2.92 12.6 2.6 45.7 37.8
-2.93 6.5 3.1 50.4 39.1
-2.94 9.0 2.8 52.4 34.7
-2.95 8.9 2.9 63.7 23.1
-2.96 14.0 2.5 38.8 43.5
-2.97 8.2 3.1 66.0 21.6
-2.98 10.2 2.4 47.3 39.0
-2.99 11.1 2.5 40.1 45.2
-2.100 8.5 2.9 68.7 18.8
103-3.418.6 2.6 71.7 15.5
-3.916.8 3.9 71.8 17.5
-3.62110.6 2.9 70.1 15.3
-3.6717.8 3.2 70.0 17.7
例8:
用MC75-103作为轮回亲本进行高油酸玉米品系的培育:
在本发明的另一实施例中,与MC75-103良种亲本进行了一次回交,目的是在保持高油酸特性的同时,结合较高比率的MC75-103的良种种质特征。
把高油酸玉米品系85-205-21与MC75-103进行杂交。MC75-103是麦克寇迪的种子公司(Fremont,Iowa)的一个有所有权的品系,而且是从N732B37培育出来的。85-205-21的本底已在例2中描述。将MC75-103×(85-205-21)杂交种与良种MC75-103品系进行回交。将得自这一杂种的各个S1穗上的五籽粒集合进行GLC分析。如表13所示,行197的2号穗的油酸百分率是65.2%。表14示出了2号穗上的各个籽粒的数据。2号穗的10号籽的油酸含量是70.5%,而11号和15号籽的油酸含量分别是72.5%和71.5%。所有这些值均高于以前对玉米的报道中所述的。在表14的第一栏(行号)中标有上标“1”的籽粒是与MC75-103回交的。
按例5中生产出了具有与MC75-103基本相同特征高油酸近交种。另一方面还可以让籽粒进一步自交以培育良种品系。
表13 来自系谱MC75-1032OH BC1的五籽粒集合的油的脂肪酸含量:
油组分(%)
软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号·穗 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
197-1 6.8 1.9 52.6 37.1
-2 6.9 1.6 65.2 24.3
-3 10.4 1.7 26.3 60.0
-4 9.3 1.5 49.6 38.0
-5 10.3 1.7 23.7 63.3
198-1 8.6 1.8 23.4 64.6
-2 9.8 1.4 35.4 51.7
-3 8.0 2.1 46.7 41.2
-4 10.6 2.4 34.4 50.9
199-1 10.8 2.0 27.8 57.7
-2 8.5 1.8 33.1 54.8
-3 10.6 2.6 36.6 48.6
-4 10.1 1.6 24.0 62.7
-5 10.2 2.2 31.9 53.9
200-1 10.3 2.0 28.4 57.8
-2 8.6 1.8 47.2 40.6
-3 8.8 2.3 28.7 59.3
-4 9.9 2.5 37.2 49.6
-5 10.1 2.0 31.0 55.9
-6 10.1 2.9 49.0 37.2
表14 来自系谱MC75-1032OH BC1的半个籽粒的油的脂肪酸含量:
油组分(%)
软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗·籽 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
197-2.1 10.4 2.4 44.4 41.4
-2.2 9.4 2.0 36.2 50.9
-2.3 7.8 2.3 45.6 42.7
-2.4 9.7 2.1 51.6 34.9
-2.5 8.5 2.1 51.3 36.2
-2.6 8.9 2.1 34.4 52.6
-2.7 7.4 2.4 50.6 37.5
-2.8 8.9 1.8 53.9 33.1
-2.9 7.1 2.8 54.2 34.2
-2.1018.3 1.7 70.5 17.9
-2.1116.7 2.2 72.5 16.8
-2.12 7.6 2.6 54.9 33.3
-2.13 6.8 2.5 47.2 40.6
-2.14 6.5 2.3 68.4 20.5
-2.1518.3 2.3 71.5 16.2
-2.16 7.5 2.3 37.3 51.4
-2.17 8.9 2.3 48.1 38.9
-2.18 10.3 2.0 46.2 40.0
-2.19 8.3 1.6 40.2 48.4
-2.20 7.2 2.3 47.7 40.9
-2.21 8.0 2.7 44.0 43.7
-2.2216.1 2.2 72.1 18.4
-2.23 8.6 2.1 29.3 57.9
-2.24 8.2 1.6 34.6 53.8
-2.2515.5 2.2 74.5 16.4
-2.26 8.0 2.2 47.2 41.0
-2.27 7.4 2.7 54.0 34.3
-2.28 10.2 1.7 36.9 49.5
-2.29 7.8 1.8 36.2 52.8
-2.30 8.4 1.9 41.4 47.0
-2.31 8.1 2.0 37.0 51.2
-2.32 7.3 1.6 64.3 25.1
-2.33 6.4 2.3 35.4 54.2
-2.34 8.9 2.7 48.4 38.4
-2.35 9.5 2.3 36.6 50.0
-2.36 7.2 2.6 37.1 51.1
-2.37 6.1 1.6 65.8 24.6
-2.38 7.1 2.0 62.8 25.5
-2.39 7.4 2.2 37.3 51.5
-2.40 11.0 2.4 36.7 48.0
-2.41 8.0 2.0 65.4 22.7
-2.42 10.2 2.3 46.8 39.1
-2.43 8.6 2.0 50.5 37.3
-2.44 9.6 2.7 43.7 42.0
-2.4516.7 1.9 73.6 16.5
-2.46 10.7 2.0 44.4 41.0
-2.47 8.6 1.8 34.9 52.7
-2.48 6.9 2.4 40.5 48.4
-2.49 9.3 1.9 40.2 46.6
-2.50 8.7 2.0 66.4 21.5
-2.5117.0 2.3 71.9 16.5
-2.52 9.6 2.4 47.6 38.9
-2.53 9.3 2.6 43.5 43.0
-2.54 8.3 2.5 49.7 37.9
-2.55 7.0 1.7 68.4 21.5
-2.56 8.7 2.1 35.4 52.0
-2.57 9.6 2.6 38.3 47.6
-2.58 7.3 1.5 61.1 28.4
-2.59 8.5 2.7 35.8 51.4
-2.60 7.1 1.5 64.8 25.0
-2.61 7.4 1.9 65.5 23.4
-2.62 8.3 1.8 48.4 39.8
-2.63 9.4 2.2 43.8 43.0
-2.64 9.4 2.2 44.5 42.1
-2.65 6.9 2.3 33.5 55.8
-2.66 7.2 2.3 50.3 38.4
-2.67 8.6 2.5 40.4 46.9
-2.68 8.5 2.6 41.6 44.8
-2.69 8.0 1.5 60.7 27.8
-2.70 6.4 2.3 32.1 57.7
-2.71 7.3 1.7 60.9 28.0
-2.72 8.7 2.2 45.8 41.6
-2.73 8.9 2.5 68.7 18.2
-2.74 6.2 2.0 69.7 20.0
-2.75 7.4 2.1 34.8 55.7
-2.76 8.5 2.5 64.3 22.8
-2.77 7.7 2.0 32.1 56.5
-2.7817.2 2.4 71.0 17.5
-2.79 6.2 1.8 66.0 24.0
-2.80 9.3 2.2 34.6 52.1
-2.81 8.3 2.6 44.7 42.1
-2.82 7.7 2.4 61.5 28.4
-2.83 8.6 2.4 48.2 39.1
-2.84 8.4 2.1 41.8 45.8
-2.85 10.0 2.2 41.5 44.1
-2.86 8.2 2.1 39.9 47.9
-2.87 8.3 2.7 61.4 25.5
-2.88 6.9 2.1 36.4 52.6
-2.89 10.0 2.4 36.3 49.7
-2.90 7.0 2.1 65.6 23.7
-2.91 10.2 2.3 46.7 39.1
-2.92 8.3 2.6 34.8 52.4
-2.9315.8 1.7 70.2 20.5
-2.94 8.7 2.6 36.0 50.0
-2.95 7.2 2.2 67.4 21.5
-2.96 10.1 2.8 39.1 45.9
-2.97 8.6 2.0 67.0 20.4
-2.98 9.4 1.9 47.8 38.6
-2.9918.7 2.5 70.8 16.5
-2.100 6.2 2.7 53.7 35.5
例9:
用MC74-41作为轮回亲本进行高油酸玉米品系的培育:
在本发明的另一实施例中,与良种亲本MC74-41进行了一次回交,目的是在保持高油酸特性的同时,结合较高比率的MC741-41的良种种质特征。
高油酸玉米品系85-205-21与MC74-41进行了杂交。MC74-41是麦克寇迪的种子公司(Fremont,Iowa)从Pioneer Hi-Bred International,Inc.′s 3417杂交种自交培育出来的有所有权的品系。85-205-21的本底是为例2所述的。
MC74-41×(85-205-21)杂交种与良种品系MC74-41进行了回交。对得自这一回交的各个S1穗进行了选择,对来自每个穗的五籽粒集合按上述方法进行了GLC分析。如表15所示,行017的5号穗的油酸值是61.2%。表16示出了行017的5号穗上的各个籽粒的数据。5号穗的131号籽的油酸值是71.1%。表16的第一栏(行号)中标有上标“1”的籽粒是如上所述与MC75-103回交的或者是进一步自交以便生产良种品系的。
表15 来自谱系MC74-412OH BC1的五籽粒集合的油的脂肪酸含量:
油组分(%)
软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
016-1 11.2 1.8 40.5 46.5
-2 9.0 1.7 41.0 47.5
-3 10.8 1.9 43.8 43.2
-4 12.1 2.0 32.6 52.9
017-1 12.1 2.1 44.4 40.8
-2 11.0 2.3 42.4 44.0
-3 11.3 1.6 47.2 39.6
-4 10.9 1.9 49.6 37.1
-5 10.4 1.3 61.2 27.1
-6 10.1 1.4 54.9 33.1
-7 8.9 1.9 55.0 33.8
-8 12.0 1.8 53.6 32.6
-9 11.0 1.8 51.7 35.6
018-1 13.1 1.9 35.5 49.6
-2 9.9 1.6 51.9 36.1
-3 8.5 1.6 63.2 26.1
-4 9.6 1.9 40.9 46.9
-5 11.7 2.6 39.7 45.4
-6 9.2 3.0 41.5 45.6
019-1 11.2 2.4 39.2 46.6
-2 9.8 2.0 38.1 49.6
表16 来自系谱MC74-412OH BC1的半个籽粒的油的脂肪酸含量:
油组分(%)
软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗·籽 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
017-5-.101 8.1 2.0 42.2 46.8
-.102 10.5 1.3 58.1 28.7
-.103 10.3 1.6 38.8 48.1
-.104 9.6 1.9 60.0 27.0
-.105 10.1 1.9 56.1 29.5
-.106 8.5 2.1 44.2 45.1
-.107 11.6 2.0 45.7 37.7
-.108 11.0 1.7 34.6 51.0
-.109 10.6 1.5 54.6 31.0
-.110 10.1 2.0 46.0 40.7
-.111 12.1 1.7 33.4 51.3
-.112 8.3 1.5 62.9 25.4
-.113 10.3 1.6 45.5 40.8
-.114 11.9 1.6 38.2 46.0
-.115 9.2 1.9 63.1 23.8
-.116 11.4 1.7 37.2 47.9
-.117 9.5 1.9 49.6 37.3
-.118 10.3 1.9 34.4 51.6
-.119 10.5 1.5 45.5 40.9
-.120 11.2 2.0 43.2 42.0
-.121 11.1 1.7 35.4 49.5
-.122 11.6 1.7 49.6 35.2
-.123 13.2 2.4 39.2 45.2
-.124 11.6 1.8 44.7 40.7
-.125 11.4 1.9 38.7 45.6
-.126 10.1 1.6 34.4 52.7
-.127 10.0 1.6 45.6 41.6
-.128 12.1 1.4 41.3 43.8
-.129 9.1 1.3 68.6 19.3
-.130 7.7 2.1 67.7 20.7
-.13117.2 1.9 71.1 18.6
-.132 12.9 1.6 43.1 40.7
-.133 11.9 1.7 36.3 50.2
-.134 12.0 1.8 33.6 51.3
-.135 8.2 1.7 54.7 33.4
-.136 11.0 1.7 34.9 51.3
-.137 12.2 1.9 34.2 49.2
-.138 10.5 1.6 41.5 45.1
-.139 10.3 1.4 62.4 24.3
-.140 9.3 2.0 39.0 49.7
-.141 13.0 1.4 43.4 42.1
-.142 8.1 1.4 65.3 23.8
-.143 8.9 1.5 57.5 30.4
-.144 8.9 1.8 65.2 22.8
017-5-.145 9.8 1.9 41.6 44.6
-.146 12.6 1.8 38.3 43.9
-.147 8.4 1.5 64.6 24.2
-.148 11.1 1.7 58.1 27.4
-.149 10.6 1.8 44.0 42.2
-.150 11.1 1.6 43.7 42.2
-.151 8.8 1.6 40.2 47.5
-.152 9.7 2.0 41.4 45.2
-.153 9.9 1.9 44.3 41.5
-.154 11.0 1.8 30.8 53.7
-.155 8.8 2.2 34.4 53.1
-.156 10.8 1.9 45.3 40.7
-.157 10.4 2.1 38.3 47.6
-.158 11.4 2.1 43.8 40.7
-.159 9.5 2.0 47.9 38.5
-.160 10.8 1.8 44.9 40.7
-.161 8.4 1.5 63.0 25.2
-.162 10.5 1.8 60.0 26.0
-.163 11.2 2.2 44.4 40.0
-.164 9.3 2.0 43.8 43.4
-.165 10.3 2.0 35.9 50.2
-.166 11.6 2.1 43.2 41.1
-.167 12.5 1.6 44.1 39.6
-.168 11.0 1.9 45.4 40.3
-.169 11.5 1.7 45.6 40.1
-.170 10.6 1.8 45.1 40.7
-.171 10.8 2.2 58.1 27.1
-.172 8.2 1.6 59.5 29.2
-.173 9.5 1.8 47.5 39.3
-.174 9.2 1.8 46.1 41.1
-.175 9.8 1.8 62.0 25.2
-.176 10.5 1.7 57.4 28.7
-.177 10.1 1.8 44.1 42.5
-.178 9.4 1.4 62.8 25.3
-.179 8.7 1.8 45.2 42.4
-.180 9.6 1.8 63.6 23.0
-.181 10.2 1.9 42.8 43.1
017-5-.182 8.4 1.5 42.7 45.7
-.183 8.7 1.7 46.8 41.7
-.184 9.1 1.9 45.8 41.2
-.185 11.7 2.0 37.2 46.2
-.186 11.1 1.7 50.9 34.1
-.187 7.6 1.5 61.2 28.2
-.188 11.2 1.7 44.6 39.8
-.189 7.1 1.8 64.6 25.4
-.190 11.5 1.9 43.5 41.1
-.191 9.5 1.9 65.0 21.6
018-3.217.5 2.1 70.1 18.7
-3.8516.3 1.8 70.5 20.0
-3.19017.1 1.7 70.5 18.7
-3.32817.2 2.1 70.6 18.4
-3.38217.4 1.9 70.7 18.1
例10:
用J17作为轮回亲本进行高油酸玉米品系的培育:
本发明的另一个实施例中与良种亲本J17进行了一次回交,以便结合J17的较高比率的良种种质特征。
高油酸玉米品系85-205-21与J17进行了杂交。J17是麦克寇迪的种子公司(Fremont,Iowa)从C123×R117培育出的一个有所有权的品系。85-205-21的本底已在例2中描述过。
J17×(85-205-11)杂交种与良种品系J17进行了回交。对来自这一回交的各个S1玉米穗进行了选择并且对来自每一个穗的五籽粒集合用上述GLC法进行了分析。如表17所示,03908752号行的183号穗的油酸值为58.8%。表18示出了03908752号行的183号穗上的每一个籽粒的数据。183号穗的30号籽具有67.4%的油酸值。表18的第一栏(行号)中标有上标“1”的籽粒是与上述J17亲本回交的。或者进一步自交以生产良种品系。
表17 来自谱系J172HO BC1的五籽粒集合的油的脂肪酸含量:
油组分(%)
软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
行号-穗 16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
03908752-1 10.2 1.7 27.1 59.6
-2 10.4 1.4 44.1 44.1
-3 10.4 1.8 46.0 41.8
-4 11.7 1.7 35.4 51.2
-5 11.8 1.6 46.9 39.7
-6 10.1 1.6 40.9 47.4
-7 12.0 2.2 32.5 53.3
-8 9.4 2.0 41.4 47.2
-9 9.0 1.9 33.4 55.7
-10 10.7 1.8 42.2 45.2
-11 9.4 1.1 43.2 45.3
-12 11.8 2.1 46.3 39.8
-13 12.1 1.9 31.0 54.9
-14 12.0 2.5 41.7 43.8
-15 8.8 2.7 35.8 52.7
-16 7.9 1.8 57.3 33.0
-17 11.5 2.3 35.3 50.9
-18 8.6 1.3 27.5 62.5
-19 8.0 2.0 29.8 60.1
-20 12.0 1.7 32.6 53.7
-21 11.2 1.3 26.4 61.1
-22 8.8 2.0 36.8 52.4
-23 10.4 1.7 33.6 54.2
-24 9.6 1.8 49.5 39.2
-25 10.9 1.5 45.1 42.5
-26 7.8 1.6 31.2 59.4
-27 9.1 1.9 25.4 63.6
-28 9.6 1.5 36.5 52.4
-29 12.1 2.0 35.4 49.2
-30 11.0 2.2 41.0 45.8
-31 8.9 1.6 55.0 34.5
-32 12.5 1.9 36.1 49.5
-33 12.6 1.6 39.7 46.1
-34 9.6 1.7 29.3 59.3
-35 11.9 1.4 29.1 56.3
-36 11.1 1.7 53.2 34.0
-37 8.7 1.7 41.1 46.9
-38 10.6 1.7 32.2 54.6
-39 10.5 1.6 29.0 58.8
-40 8.3 1.7 41.8 48.2
-41 11.7 1.7 34.5 51.9
-42 10.9 2.7 48.3 38.2
-43 12.1 2.0 27.4 58.5
-44 11.6 1.6 28.2 58.6
03908752-45 12.1 1.3 40.0 46.6
-46 10.8 2.0 48.8 38.4
-47 9.2 2.2 54.0 33.6
-48 9.0 1.8 33.4 54.8
-49 9.9 1.8 39.9 46.9
-50 9.5 1.6 31.4 56.3
-51 9.2 1.5 25.9 62.1
-52 11.9 1.8 31.1 53.8
-53 9.2 1.9 35.5 52.3
-54 12.0 1.4 22.0 53.4
-55 11.3 1.4 43.3 42.8
-56 10.0 2.1 42.4 43.7
-57 13.0 1.7 29.5 54.5
-58 9.1 1.2 39.3 49.3
-59 11.4 2.4 37.4 47.7
-60 10.4 1.7 25.8 60.8
-61 11.8 1.2 43.9 42.4
-62 12.3 2.1 41.6 42.9
-63 9.8 1.7 39.7 47.5
-64 8.4 1.4 23.7 65.1
-65 8.6 1.6 28.0 60.2
-66 11.2 1.6 41.4 44.6
-67 8.3 1.5 43.0 46.1
-68 12.8 1.6 28.2 56.1
-69 8.9 2.3 28.7 58.9
-70 11.9 1.6 23.7 60.9
-71 12.8 1.8 34.5 49.5
-72 11.9 1.8 32.0 53.0
-73 13.0 1.6 32.8 51.3
-74 9.8 1.4 47.3 39.9
-75 11.2 1.8 52.3 33.5
-76 12.0 1.6 33.7 51.3
-77 8.9 1.6 62.1 26.0
-78 10.1 1.4 40.7 46.3
-79 12.5 1.3 26.0 58.8
-80 12.1 1.6 46.8 38.2
-81 10.0 1.2 26.4 61.2
-82 10.0 1.6 27.5 59.6
-83 11.6 1.8 29.4 56.2
-84 12.2 1.6 48.2 36.6
-85 10.1 1.3 37.1 49.7
-86 12.8 1.3 32.8 52.3
-87 12.2 1.6 28.3 56.5
-88 11.4 1.8 47.1 38.3
-89 10.6 2.2 48.8 37.3
03908752-90 11.3 1.2 51.7 34.2
-91 9.6 1.9 38.0 49.2
-92 12.5 1.7 23.8 60.7
-93 11.2 2.0 35.8 51.0
-94 10.0 1.5 38.9 49.5
-95 8.7 1.7 25.3 64.3
-96 11.0 2.1 53.4 33.6
-97 8.6 1.8 52.4 37.3
-98 11.6 2.0 46.1 40.3
-99 11.6 2.8 38.6 47.0
-100 11.4 2.1 39.3 47.2
-101 13.4 2.1 32.5 51.9
-102 9.8 2.2 36.0 52.0
-103 10.6 2.0 34.1 53.3
-104 6.6 2.3 40.2 51.9
-105 8.8 2.2 31.2 58.8
-106 8.8 1.9 33.6 56.6
-107 10.2 2.3 37.4 50.2
-108 7.7 2.2 45.7 44.4
-109 7.5 1.9 26.8 63.9
-110 9.4 2.1 37.8 50.6
-111 11.3 1.5 25.3 61.8
-112 10.5 2.6 43.7 43.3
-113 8.9 1.5 40.0 49.7
-114 11.1 1.8 47.8 39.3
-115 12.0 1.9 39.3 46.8
-116 11.4 1.7 39.2 47.6
-117 10.0 2.2 33.5 54.3
-118 11.2 2.0 51.3 35.5
-119 11.4 1.9 37.7 49.0
-120 11.3 1.8 34.3 52.6
-121 12.2 2.1 44.3 41.4
-122 10.2 1.8 35.5 52.5
-123 11.2 1.8 24.5 62.5
-124 11.5 1.7 45.0 41.8
-125 10.0 1.6 30.3 58.1
-126 12.0 1.8 37.3 48.9
-127 13.0 1.9 39.9 45.2
-128 12.8 1.9 34.8 50.5
-129 11.9 2.0 43.7 42.4
-130 12.6 1.5 23.8 62.1
-131 8.0 2.2 41.5 48.2
-132 8.0 2.1 36.2 53.6
03908752-133 11.7 1.7 28.8 57.8
-134 10.9 1.7 37.9 49.5
-135 10.4 1.7 52.5 35.4
-136 11.4 1.9 28.3 58.4
-137 9.2 1.7 27.0 62.1
-138 9.5 1.8 40.9 47.8
-139 13.0 2.1 38.9 46.0
-140 12.4 2.3 35.3 48.8
-141 9.2 1.6 38.9 48.8
-142 10.0 2.3 37.1 49.4
-143 13.3 2.0 28.2 55.1
-144 11.5 2.3 47.2 37.8
-145 11.3 1.7 30.9 54.7
-146 12.6 1.9 47.2 37.2
-147 11.9 2.1 32.8 52.0
-148 14.5 1.8 30.8 52.0
-149 12.3 1.7 47.7 37.3
-150 11.2 1.9 41.1 44.5
-151 10.8 1.9 34.8 51.1
-152 10.7 2.4 41.8 43.8
-153 10.6 1.3 37.9 48.7
-154 8.6 2.0 32.3 55.8
-155 11.8 1.7 34.4 50.6
-156 9.3 1.6 44.8 43.0
-157 11.9 1.7 47.0 38.0
-158 9.7 1.1 39.3 48.1
-159 10.8 1.7 29.5 56.8
-160 10.1 1.6 38.9 48.0
-161 12.8 1.8 30.0 54.0
-162 12.6 1.6 32.2 52.6
-163 11.9 1.3 42.1 43.2
-164 12.0 1.4 40.1 45.2
-165 13.2 1.8 27.7 56.0
-166 10.6 1.4 31.6 55.0
-167 9.1 1.9 45.8 41.7
-168 12.4 1.2 25.1 59.5
-169 10.1 1.9 30.7 56.0
-170 7.9 2.2 42.4 45.9
-171 9.4 1.5 39.8 48.3
-172 12.7 1.5 27.0 57.2
-173 10.8 2.4 30.2 55.3
-174 12.1 2.2 37.4 47.1
-175 9.5 1.4 32.2 55.3
-176 11.9 1.9 46.3 38.3
03908752-177 10.5 1.2 40.0 47.0
-178 12.8 1.8 47.4 37.3
-179 12.1 1.5 25.6 58.4
-180 9.4 2.1 34.6 51.3
-181 8.5 1.6 38.3 50.0
-182 8.7 1.3 36.6 50.8
-183 8.3 1.8 58.8 29.7
-184 9.6 1.4 33.6 54.0
-185 11.6 2.1 30.5 54.4
-186 11.8 2.1 40.6 43.8
-187 11.8 2.2 46.4 38.2
-188 11.0 2.2 48.5 36.6
-189 11.0 2.1 32.7 52.7
-190 12.4 1.9 41.8 42.6
-191 11.9 2.0 42.1 42.6
-192 11.7 1.8 36.4 48.7
-193 8.2 1.9 27.7 60.6
-194 9.1 1.7 28.4 59.1
-195 12.6 2.4 31.3 52.2
-196 10.5 1.8 33.7 52.4
-197 11.9 1.8 33.2 51.7
-198 8.7 1.8 49.0 39.1
-199 11.7 1.8 30.6 54.4
-200 12.4 1.5 39.2 45.4
-201 12.2 1.6 30.9 53.7
-202 10.9 2.5 42.7 43.1
-203 12.2 1.7 35.0 49.6
-204 10.7 2.0 32.6 53.2
-205 12.0 2.2 34.1 50.1
-206 13.0 1.7 28.1 55.7
-207 11.5 1.6 28.8 56.5
-208 11.4 1.6 48.4 37.2
-209 11.1 2.0 57.2 28.4
-210 11.1 1.4 26.1 59.7
-211 11.5 1.3 21.5 63.8
-212 9.3 1.6 47.2 40.2
-213 12.2 1.6 34.0 50.6
-214 9.4 2.2 36.8 50.2
-215 8.9 1.5 27.7 60.7
-216 10.6 2.0 43.1 44.3
-217 10.1 1.6 41.8 45.0
-218 10.5 1.7 33.7 52.7
-219 7.6 1.6 29.7 59.4
03908752-220 11.5 1.5 47.7 37.9
-221 11.4 2.1 32.9 52.2
-222 11.9 2.4 33.9 50.3
-223 12.0 1.8 46.6 38.2
-224 11.8 1.8 39.3 45.7
-225 9.4 1.9 33.9 53.3
-226 11.7 1.8 44.7 40.3
-227 12.2 2.0 34.6 49.7
-228 12.2 1.8 26.1 58.4
-229 12.2 1.8 33.6 51.0
-230 11.6 1.5 33.8 51.7
-231 13.7 2.0 42.0 42.2
-232 13.4 1.6 34.5 49.9
-233 10.2 1.7 40.2 46.4
-234 12.8 1.8 28.7 55.6
-235 11.8 1.5 46.8 38.5
-236 8.9 1.4 43.1 45.4
表18 来自系谱J172HO BC1的半籽粒的油的脂肪酸含量:
油组分(%)
行-穗·籽 软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
03908752-183-.1 9.0 3.1 43.2 44.8
183-.2 9.9 2.4 50.4 37.2
183-.3 7.8 3.2 48.2 38.8
183-.4 7.8 3.3 44.8 42.6
183-.5 10.6 3.0 42.8 41.5
183-.6 8.4 1.9 46.1 43.6
183-.7 8.8 2.2 47.5 41.4
183-.8 6.0 2.6 38.6 52.9
183-.9 6.8 3.1 24.0 62.3
183-.10 6.3 2.5 36.4 54.7
183-.11 10.5 2.3 50.8 36.4
183-.12 10.1 2.1 64.2 22.9
183-.13 6.3 3.0 50.0 40.7
183-.14 8.1 2.8 58.0 31.1
183-.15 9.2 2.3 40.0 48.6
183-.16 6.7 2.4 43.8 47.2
183-.17 10.7 2.1 48.6 38.6
183-.18 7.8 2.1 51.8 38.3
183-.19 8.4 2.6 35.1 54.0
183-.20 6.0 1.9 38.5 52.5
183-.21 8.4 2.0 39.7 49.8
183-.22 8.8 2.6 34.9 52.3
183-.23 6.3 2.8 46.8 41.9
183-.24 7.9 2.5 60.1 24.5
183-.25 8.4 2.3 37.6 50.2
183-.26 8.0 2.1 45.4 43.1
183-.27 8.6 2.8 46.9 40.3
183-.28 8.0 2.5 48.4 39.8
183-.29 9.7 1.7 40.0 47.2
183-.3015.4 2.8 67.4 23.2
183-.31 5.9 1.9 42.3 48.1
183-.32 8.5 2.5 48.5 38.8
183-.33 6.3 1.7 26.4 64.0
183-.34 5.9 1.6 58.5 32.3
183-.35 5.8 1.6 60.7 30.4
03908752-183-.36 7.8 2.0 41.0 48.6
183-.37 6.2 2.5 38.1 50.8
183-.3817.9 2.4 65.7 22.3
183-.39 9.4 1.8 33.4 54.0
183-.40 11.1 2.7 41.2 43.7
183-.41 7.7 1.8 38.0 51.2
183-.42 8.6 1.7 41.4 46.5
183-.43 8.5 2.4 60.6 28.5
183-.44 8.4 1.9 36.8 52.8
183-.45 7.4 1.7 60.5 30.4
183-.46 9.0 2.3 40.1 48.6
183-.47 8.5 2.2 44.1 43.8
183-.48 9.0 2.2 62.2 24.5
183-.49 8.9 2.0 48.1 39.6
183-.50 6.8 3.0 51.6 37.3
183-.51 6.4 2.5 48.3 41.3
183-.52 6.1 1.9 60.7 29.1
183-.53 9.7 2.7 49.0 37.5
183-.54 8.0 2.9 48.2 39.5
183-.55 7.1 2.4 50.7 38.3
183-.56 5.9 2.6 35.0 55.1
183-.5717.1 1.9 65.3 24.0
183-.58 10.0 1.9 37.5 49.1
183-.59 10.5 2.7 42.6 42.9
183-.60 9.2 1.9 44.3 42.6
183-.61 8.5 2.3 47.7 40.3
183-.62 8.2 2.0 35.4 52.9
183-.63 8.2 1.9 46.1 42.4
183-.64 5.6 2.0 49.9 41.0
183-.65 8.8 2.2 34.5 54.6
183-.66 6.2 1.5 35.7 54.6
183-.67 5.8 2.8 30.2 59.8
183-.68 7.5 1.7 59.8 29.8
183-.69 10.1 1.8 48.4 37.2
183-.70 8.6 2.6 62.9 24.4
183-.71 7.6 1.6 39.0 50.3
183-.72 6.0 1.7 53.2 37.6
183-.73 8.6 2.1 32.5 54.3
183-.74 10.7 3.1 43.7 41.6
183-.7517.4 2.9 67.9 20.0
183-.76 9.5 3.6 39.2 47.7
183-.77 7.7 2.3 45.4 42.8
183-.78 8.2 2.3 36.7 51.1
183-.79 8.7 2.4 39.3 48.4
183-.8019.0 3.4 66.0 20.1
03908752-77.6319.5 2.2 67.2 19.9
-77.6619.3 2.1 66.0 21.2
-77.6717.4 2.3 66.0 23.1
-77.7818.0 2.3 65.3 23.9
例11:
用M50-1作轮回亲本进行高油酸玉米品系培育:
本发明的另一个实施例中,对良种亲本M50-1进行了一次回交,以便在保持高油酸特性的同时结合较高比率的M50-1良种种子特性。
高油酸玉米品系85-205-21与M50-1进行了杂交。M50-1是雅克(Jacques)种子公司(Prescott,Wisconsin)从[43-118(43-103-4×43-118)]培育而来的一个有所有权的品系。85-205-21的本底已描述于例2。
杂种M50-1×(85-205-21)对良种品系M50-1进行了回交。对来自这一回交的各个S1玉米穗进行了选择,并且对来自每一穗的五籽粒集合用上述的GLC方法进行了分析。如表19所示,8号穗的48号籽具有68.4%的油酸值,而2号穗的53号籽具有68.8%的油酸值。表19所示的所有籽粒或者如上所述与M50-1回交或者进一步自交以产生良种品系。
表19 来自家系M50-12HO BC1的半籽粒的油的脂肪酸含量:
油组分(%)
行-穗·籽 软脂酸 硬脂酸 油酸 亚油酸
16∶0 18∶0 18∶1 18∶2
01950625-2.8110.1 3.3 66.9 18.1
-2.11110.7 2.6 65.7 19.4
-2.5319.8 2.9 68.8 17.0
-2.6419.7 2.8 66.7 19.4
-2.77110.5 2.5 65.3 20.8
-2.109111.4 2.4 66.3 18.6
01950630-8.9 8.8 2.2 66.5 21.1
-8.1218.5 2.0 67.3 21.0
-8.17110.2 2.0 66.3 20.6
-8.4818.5 2.0 68.4 19.9
-8.9018.6 2.2 66.7 21.0
按照例5-11所述的步骤以及用任何商业上可接受的良种玉米品系。生产出了平均油酸含量超过45%的高油酸玉米品系。
例2:
高油酸腊质玉米品系的培育:
在例5-11的回交过程的同时,良种胚乳品系正被区转化成高油酸基因型,另外一个回交程序被用来把MC74-41、PA91、J17、MC731、MC75-103以及MC851转化成蜡质胚乳基因型。后一个回交程序包括下列步骤:(1)把良种(轮回)正常胚乳本与蜡质(授体)亲本杂交,产生F1代种子;(2)把F1种子与轮回亲本回交;(3)种植BCl后代并让其自花传粉;(4)当成熟种子收获之后,鉴别蜡质籽粒,这些蜡质籽粒将成为用于下一轮对正常的轮回亲本回交(上述二、三步)的种子。
得自例5-11的一些高油酸种子被用在回交后代中,此时通过上述步骤从正常胚乳转化为蜡质籽粒胚乳而得的蜡质亲本变成了轮回亲本。例如,在具有例5中所生产的高油酸品系的回交程序中,蜡质PA91就被用作轮回亲本。因为只有蜡质的高油酸种子是所希望的产品,所以必须有一个四倍的种群规模。这是因为蜡质等位基因是隐性的。换句话说,只有四分之一的高油酸分离体(recoveries)将具有蜡质胚乳。
通常,三到五轮回交足以在生产蜡质籽粒的作物中恢复轮回亲本的表现型。
至此为止,在本申请中参照发明实施例的详细说明已经公开了本发明。应当明白,这一公开的目的在于说明而没有限制的意思。如所预计的,对于那些本领域熟练的技术人员来说,在本发明的精神和所附的权利要求的范围以内,将很容易出现一些变换。