CN105878414A - 一种具有抑制血管生成的夜交藤提取物 - Google Patents
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Abstract
一种用于抑制血管生成的夜交藤提取物，属于中药应用技术领域。本发明提供一种夜交藤提取物的制备方法，用水、或有机溶剂、或含水有机溶剂来提取夜交藤，并将提取液过滤、浓缩、干燥而成。本发明首次发现夜交藤提取物具有抑制血管生成的活性，可用于治疗或预防与血管生成相关的疾病。
Description
技术领域
一种用于抑制血管生成的夜交藤提取物，属于中药应用技术领域。
背景技术
血管形成是一个相当复杂的过程，血管系统的发育是器官形成的一个早期事件。在血管生成过程中，内皮细胞具有很重要的作用。在成年人内皮的发育和生长过程中，它们作为围绕在细胞外的旁分泌信号，能促进干细胞的发育和器官形成。最初该信号被用来促进内皮发育同时也直接影响其它类型的细胞，加强脉管系统和周围组织间的人凝血因子的相互作用。因此以内皮细胞为靶向的研究和治疗策略正在引起人们的重视。20世纪初，Goldman就观察到血管围绕肿瘤生成(angiogenesis)的现象。1968年，Greenblatt和Shubik提出了可产生弥散性血管生成物质的假设。1971年，Folkman依据前人的研究及他本人的工作，提出了肿瘤生长和转移是内皮血管依赖性的，阻断血管生成是遏止肿瘤生长的有效策略这一学说。主要内容包括(1)大部分实体瘤可长期处于无血管形成的休眠状态，在无血管状态下，肿瘤依靠简单被动扩散获得营养，最大生长直径小于1～2mm；(2)在一定状态下，周围血管通过芽生方式生成新的血管并进入肿瘤组织；(3)肿瘤细胞产生的肿瘤血管生长因子(TAF)能触发肿瘤的血管形成；(4)通过抑制TAF的产生或直接针对新生血管的内皮细胞等策略阻断血管形成，有可能抑制肿瘤生长；(5)抗血管生成只能使肿瘤停止生长或缩小至直径为1～2mm的无血管状态，而并非能彻底根除全部的肿瘤细胞。在机体内环境中促血管生成因子与抗血管生成因子处于动态平衡，当这一平衡被破坏，也即促血管生成因子的活力强于抗血管生成因子，导致新的血管生成。1976年，Gullion发现，癌前组织细胞在变成癌的过程中获得了血管生成的能力，但有关该领域的研究直到Folkman在1987年从肿瘤细胞分离获得第一个TAF即碱性成纤维细胞生长因子后才引起了学术界的广泛兴趣，尤其是近10年来，人们对肿瘤血管的形成机制进行了广泛深入的研究，数十种内源性的促血管生成分子和抗血管生成分子已被分离鉴定，由二者间平衡状态所决定的“血管生成开关”系统已被广泛接受；依据肿瘤生长和转移有赖于血管生成这一基本现象，针对肿瘤血管形成的机制所设计的抗血管生成治疗策略，已成为目前肿瘤治疗的热点研究领域，许多血管生成抑制剂已进入临床试验。而我国的传统中药在血管生成抑制方面的研究刚刚起步，还属于一个新的十分活跃的领域，从中我们已经看到了希望。
中药夜交藤是蓼科多年生蔓生草本植物何首乌的藤茎或带叶藤茎。中医认为夜交藤有养心安神，祛风通络的功效与作用。临床主治失眠多梦、皮肤瘙痒、风湿痹痛等症。现代研究表明中药夜交藤主要含蒽醌类(主要为大黄素、大黄酚或大黄素甲醚，均以结合型存在)、多种黄酮类、多糖和鞣质等化合物。经过调研，未见我国学者对夜交藤抑制血管生成作用的相关文献报道(CNKI、维普中国期刊网)，因此夜交藤在抑制血管生成的药理、药效等研究领域尚处于空白阶段。
发明内容
本发明提供一种以夜交藤为原料制备的中药提取物，其中含有多种具有抑制血管生成作用的活性成分。
本发明所述夜交藤提取物的制备方法，是用水、或有机溶剂、或含水有机溶剂来提取夜交藤，并将提取液过滤、浓缩、干燥而成。
本发明所述的应用，是该提取物有抗肿瘤血管生成及其他与血管生成有关疾病治疗、预防的用途。
附图说明
图1夜交藤提取物对HMEC细胞体外增殖的抑制作用
图2夜交藤提取物对EA·hy926细胞体外增殖的抑制作用
具体实施方式
实施例1：夜交藤提取物的制备方法
本发明提供的夜交藤提取物的制备工艺如下：首先用水、或有机溶剂、或含水有机溶剂来提取夜交藤提取物，煎煮提取两次，将提取液离心、合并后减压回收成浸膏，经冷冻干燥后得到夜交藤提取物干粉。
实施例2：夜交藤提取物对人血管内皮细胞增殖的抑制作用。
将人微血管内皮细胞(HMEC-1)、人脐静脉内皮细胞(EA·hy926)分别置于含1mmol谷氨酰胺，1μg/mL氢化可的松，10ng/mL表皮生长因子(EGF)和15％小牛血清的MCDB-131或DMEM培养液中培养(37℃、5％CO2、95％湿度)。取对数生长期细胞，以6000-8000个/孔细胞接种于96孔板，150μL/孔，每组设4个平行孔，放置于37℃、5％湿化CO2的培养箱过夜。加不同浓度(10-100μg/mL)夜交藤提取物，以水为阴性对照，培养48小时后，去掉上清液，每孔轻轻地加入10％三氯醋酸100μL固定，静置5min后移到4℃放置1h后倒掉固定液，用去离子水洗5次，空气干燥。每孔加入0.4％磺酰罗丹明B(SRB)100μL 37℃培养箱放置30min，用1％醋酸液洗5次，空气干燥。加100μL 10Mm Tris碱液(pH 10.5)溶解，自动分光光度仪在531nm波长处测定每个小孔的吸光度值(A)。上述实验重复3次。抑制率(％)计算如下：
结果如图1、图2所示，夜交藤提取物对HMEC-1细胞、EA·hy926细胞增殖均有抑制作用，其IC50分别为60和80μg/mL。
Claims (3)
1.一种具有抑制血管生成的夜交藤提取物。
2.权利要求1所述夜交藤提取物的制备方法，其特征是用水、或有机溶剂、或含水有机溶剂来提取夜交藤，并将提取液过滤、浓缩、干燥而成。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征是该提取物有抗肿瘤血管生成及其他与血管生成有关疾病治疗、预防的用途。
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| CN201410745857.6A CN105878414A (zh) | 2014-12-10 | 2014-12-10 | 一种具有抑制血管生成的夜交藤提取物 |
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Country Status (1)
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| CN (1) | CN105878414A (zh) |
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2014
- 2014-12-10 CN CN201410745857.6A patent/CN105878414A/zh active Pending
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 刘钧松: "NG2蛋白聚糖糖链生物活性研究夜交藤抑制MMPs改变细胞行为", 《中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20160824 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |