CN105878361A - 秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性有效提取物及其组合物的医药用途和制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属医药技术领域，具体涉及一种秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的制备方法和其在制备预防及治疗阿尔茨海默病(AD)等丁酰胆碱酯酶抑制活性药物中的应用。维吾尔药秦艽花经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用100:20的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱液干燥，即得丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。

Description

秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性有效提取物及其组合物的医药用途和制备方法

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物及其组合物的制备方法和其制备预防及治疗阿尔茨海默病(AD)等丁酰胆碱酯酶抑制活性药物中的应用。

背景技术

大叶秦艽(Gentiana macrophylla Pall.)是龙胆科Gentianaceae龙胆属Gentiana L. 秦艽组Seet. Aptera Kusnez.植物，是重要的传统中药之一始载于《神农本草经》列为中品，性味苦、平，微寒，归肝、胆、胃经。可祛风湿，舒经络，清虚热，利湿退黄，在我国己有近两千多年的用药历史其中秦艽及麻花艽在国家重点保护的药用植物物种中列为国家三级重点保护植物。秦艽在我国的分布，北自大兴安岭，经内蒙古草原，沿祁连山北麓至天山一线，东界太行山脉，向南到云贵高原西北缘，西达青藏高原东部。从资源分布的常见度来看，黄土高原及青藏高原东缘是我国秦艽资源分布中心。位于该区的甘肃、陕西、四川、山西等省是秦艽的主要产区，其中甘肃产秦艽以量大质优在国内外享有盛誉。国内外学者的研究还是集中于大叶秦艽，而历代本草的记载也是以大叶秦艽Gentiana macrophylla Pall.为秦艽正品。此外，达乌里秦艽、粗茎秦艽和西藏秦艽也有研究。

秦艽是我国的传统中药，其药用部位主要是根，中医学上主要用来治疗风湿，抗炎镇痛等。在高通量筛选的过程中，本发明意外地发现大叶秦艽花具有很好的抑制丁酰胆碱酯酶的活性，该活性提取物及其组合物有望应用于治疗阿尔茨海默病(AD)等方面的医药用途。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种秦艽花提取物。

本发明还提供了以秦艽花提取物为主要活性成分的组合物。

本发明同时提供了秦艽花提取物及其组合物的制备和在制备丁酰胆碱酯酶抑制活性药物中的应用。

本发明是通过如下技术方案实现的：

维吾尔药秦艽花经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO₂）柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱（石油醚-丙酮，比例见表1），各石油醚-丙酮比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其丁酰胆碱酯酶抑制活性，意外地发现先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱得到的石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。而其他比例的洗脱部位，没有丁酰胆碱酯酶抑制活性的作用。优先的，先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱得到的石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱液经回收干燥，即得丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。即丁酰胆碱酯酶抑制活性的提取物，可以通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物从未见文献报道，其薄层色谱（TLC）分析结果见图1， TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。

维吾尔药秦艽花经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱（石油醚-丙酮，比例见表1），各石油醚-丙酮比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外筛选体系测试其丁酰胆碱酯酶抑制活性，意外地发现先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:50，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:100，体积比）洗脱得到的石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:100，体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。而其他比例的洗脱部位，没有丁酰胆碱酯酶抑制活性的作用。即，丁酰胆碱酯酶抑制活性的提取物，可以通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物从未见文献报道，其薄层色谱（TLC）分析结果见图2， TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。

具体，发现过程如下：

1、秦艽花经甲醇超声提取物的制备

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物SN0255A，样品上柱：0.2158 g，拌样硅胶0.5 g，空白硅胶5g，石油醚-丙酮系统。

2、石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱方法和结果

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物SN0255A，0.2158 g上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 mL。上硅胶柱色谱，拌样硅胶0.5 g，空白硅胶5 g，玻璃柱内径1.6cm，石油醚-丙酮系统梯度洗脱（条件见表1），柱体积12 mL，每个梯度洗脱100mL，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：丙酮梯度洗脱提取物，TLC分析结果见图3，图4，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1），石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。

表1

3、抑制丁酰胆碱酯酶活性筛选方法和结果

1) 实验条件

a、材料：DMSO(二甲基亚砜) (科密欧公司)；KH₂PO₄、K₂HPO₄·3H₂O(广东汕头市西陇化工厂)；BuChE酶(美国Sigma公司)；PNPG(美国Sigma公司)

b、实验仪器：多功能酶标仪Bio-Rad Model 680型(Bio-Rad Laboratories Inc.)

2) 实验方法和过程

样品处理：将1 mg待测样品溶于20μL二甲基亚砜(DMSO)作为母液，取1μL母液加入249μL蒸馏水配成200μg·mL^-1的溶液。

丁酰胆碱酯酶抑制活性测定方法：

在96孔板上测定样品的BuchE抑制活性。具体操作如下：在96孔板中依次加入25μL PBS (100 mM, pH 8.0)，25μL BuChE (≥0.04 U/mL, pH 8.0 PBS溶解稀释)，25μL样品溶液(200μg·mL^-1)。加25μL BuSCH(1.6 mM, pH 8.0 PBS溶解稀释)及25μL DTNB(4.0 mM, pH 8.0 PBS溶解稀释)，37℃孵育60 min后，用酶标仪在412 nm下测定其吸光度值。样品抑制百分率按以下公式计算:

酶活性抑制率% = [A_空白- (A_样品- A_背景)] / A_空白× 100

式中A_空白：不加样品反应后的吸收值；

A_样品：加入样品反应后的吸收值；

A_背景：只加样品的吸收值。

3) 实验结果

表2

结果发现：

本发明的优选方案如下：维吾尔药秦艽花经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。该丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图1。

维吾尔药秦艽花经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:50，体积比）洗脱，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100：100，体积比）洗脱，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100：100，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物。该丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物从未见文献报道，其TLC分析表征如图2。

4、丁酰胆碱酯酶抑制活性有效提取物的提取方法研究

1）提取溶剂的种类研究

分别用甲醇、丙酮、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂等有机溶剂提取，并测试提取物的丁酰胆碱酯酶抑制活性，实验结果如下：

表3

研究结果表明：提取用有机溶剂可以为甲醇、石油醚、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂。

2）提取溶剂的用量研究

分别用1、2、5、10、20、30、40、50倍（重量/体积比）有机溶剂提取，并测试提取物的丁酰胆碱酯酶抑制活性，结果如下：

表4

活性提取物的提取所用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍（重量/体积比）。

3）干燥方法的研究

分别用真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等方法，对得到的抑制丁酰胆碱酯酶活性提取物进行干燥，以含水量、TLC、活性测试为指标，发现真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法适用于对丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物进行干燥，其中，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。

表5

因此，秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物的制备方法为：

维吾尔药秦艽花经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该活性提取物。以上条件最优为先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:25，体积比）洗脱20倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:50，体积比）洗脱15倍柱体积。

维吾尔药秦艽花经有机溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:50，体积比）洗脱，洗脱2-50倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:100，体积比）洗脱，洗脱2-50倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:100，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为该活性提取物。以上条件最优为先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:25，体积比）洗脱15倍柱体积，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:50，体积比）洗脱25倍柱体积。其中，

1) 提取物提取用有机溶剂可以为甲醇、石油醚、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、乙醇水混合溶剂，最优条件为甲醇和95%乙醇。活性提取物提取用有机溶剂用量为药材重量的2-50倍（重量/体积比）。

2) 提取物干燥方法可以为真空干燥法、冷冻干燥法、鼓风干燥、离心干燥、旋蒸干燥法等，最优为真空干燥法、冷冻干燥法。

5. 秦艽花抑制丁酰胆碱酯酶活性提取物（先用100:25的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱，继用100:50的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱后得到的提取物）的医药用途研究

按优化的秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物制备方法制备的活性提取物，经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=20.8 μg/mL。

由于丁酰胆碱酯酶抑制剂具有治疗阿尔茨海默病等方面的医药用途。因此，我们发现的秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物具有广泛的医药用途。

6、秦艽花抑制丁酰胆碱酯酶活性提取物的组合物及其制备方法研究

1）固体分散体

处方

秦艽花提取物 20 g

Vc 1 g

聚乙烯吡咯烷酮 79 g

固体分散100g

制备方法：

称取秦艽花提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮（PVP）按比例1:2、1:4、1:6的质量比分别放入烧杯中，加入适量的无水乙醇和Vc，用磁力搅拌器搅拌至秦艽花提取物和载体完全溶解，充分混合均匀后转入旋蒸仪中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得秦艽花有效提取物PVP包合物。

2）环糊精包合物

处方：

秦艽花提取物 20 g

Vc 1 g

β-环糊精 79 g

包合物100g

制备方法：

将β-环糊精与 1～5 倍水研匀,加秦艽花有效提取物( 水难溶性的应先溶于少量有机溶剂中) 继续充分研磨至成糊状物, 低温干燥即得环糊精包合物。

3）分散片处方:

秦艽花提取物 100

十二烷基硫酸钠 1

Vc 1

预胶化淀粉 10

可溶性淀粉 100

交联聚维酮 10

微晶纤维素 9

微分硅胶 0.3

滑石粉 1

100片

制备方法：

1. 秦艽花有效提取物分散体的制备，精密称取秦艽花提取物、Vc，加入处方量的十二烷基硫酸钠，用适量的浓度为70%乙醇溶解并加入等比例的可溶性淀粉混合均匀后，在70℃的温度下蒸干，粉碎，过100目筛；

2. 将第一步中的秦艽花有效提取物淀粉分散体与处方量的交联聚维酮，预胶化淀粉，用适量的浓度为70%乙醇做湿润剂，边加入边搅拌，制成湿颗粒过14目筛，室温下放置15min 后， 60℃烘箱烘干45min，16目筛整粒，加入处方量的滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片即得。

7、秦艽花抑制丁酰胆碱酯酶活性提取物的检测方法研究

我们发现，可以用薄层色谱的方法，很好地检测和标示秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物的特征。见图1，图2

具体条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。

附图说明：

图1 秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物的TLC色谱图；

图2 秦艽花丁酰胆碱酯酶抑制活性提取物的TLC色谱图；

图3 秦艽花溶剂提取物的TLC色谱图；

图4 秦艽花溶剂提取物的TLC色谱图。

具体实施方式

以下实施例表示本发明的实用性，本发明不受此限制。

实施例 1：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，真空干燥，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=82.0 μg/mL。

实施例2：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL乙醇超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=88.0 μg/mL。

实施例3：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL石油醚超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，旋蒸干燥法，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=76.0 μg/mL。

实施例4：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL丙酮超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，鼓风干燥，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=84.0 μg/mL。

实施例5：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL氯仿超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，离心干燥，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=81.0 μg/mL。

实施例6：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL乙酸乙酯超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=74.0 μg/mL。

实施例7：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL甲醇水混合溶剂（甲醇：水=1：1）超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=86.0 μg/mL。

实施例8：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL乙醇水混合溶剂（乙醇：水=1：1）超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=67.0 μg/mL。

实施例9：

取维吾尔药秦艽花20 g，经100 mL乙醇-水混合溶剂（乙醇：水=90：10）超声提取15 min，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱（1.6cm 内径小柱），先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:20，体积比）洗脱，洗脱15倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱，洗脱25倍柱体积，用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:25，体积比）洗脱的洗脱液经回收有机溶剂，冷冻干燥，即为该活性提取物。经测试，其丁酰胆碱酯酶抑制活性为IC₅₀=75.0 μg/mL。

实施例 10：固体分散体

称取秦艽花提取物和载体聚乙烯吡咯烷酮（PVP）按比例1:2、1:4、1:6的质量比分别放入烧杯中，加入适量的无水乙醇和Vc，用磁力搅拌器搅拌至秦艽花提取物和载体完全溶解，充分混合均匀后转入旋蒸仪中除去有机溶剂，干燥，粉碎过80目筛，即得秦艽花有效提取物PVP包合物。

实施例 11：环糊精包合物

将β-环糊精与 1～5 倍水研匀,加秦艽花有效提取物( 水难溶性的应先溶于少量有机溶剂中) 继续充分研磨至成糊状物, 低温干燥即得环糊精包合物。

实施例 12：分散片

1. 秦艽花有效提取物分散体的制备，精密称取秦艽花提取物、Vc，加入处方量的十二烷基硫酸钠，用适量的浓度为70%乙醇溶解并加入等比例的可溶性淀粉混合均匀后，在70℃的温度下蒸干，粉碎，过100目筛；

2. 将第一步中的秦艽花有效提取物淀粉分散体与处方量的交联聚维酮，预胶化淀粉，用适量的浓度为70%乙醇做湿润剂，边加入边搅拌，制成湿颗粒过14目筛，室温下放置15min 后， 60℃烘箱烘干45min，16目筛整粒，加入处方量的滑石粉和微分硅胶，混合均匀后，压片即得。

Claims (11)

1.一种秦艽花提取物，其特征为，秦艽花经溶剂超声提取，提取液浓缩后，用硅胶柱分离，上样后的硅胶柱，先用100:20的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱液干燥即得。

2. 如权利要求1所述秦艽花提取物，其特征为，先用100:20的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱液干燥即得。

3. 如权利要求1或2所述的一种维吾尔药秦艽提取物，先用100:20的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，继用100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱，100:25的石油醚-丙酮混合溶剂洗脱液干燥即得。

4. 如权利要求1-3任何一项所述的一种维吾尔药秦艽提取物，其特征为，提取用有机溶剂为甲醇、乙醇、水、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶剂、或乙醇水混合溶剂。

5. 如权利要求1-3任何一项所述的一种维吾尔药秦艽提取物，其特征为，用于洗脱的石油醚-丙酮的洗脱体积为2-50倍柱体积。

6. 如权利要求1-4任何一项所述的一种维吾尔药秦艽提取物，其特征为先用100:25的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱15倍柱体积，继用100:50的石油醚：丙酮混合溶剂洗脱25倍柱体积。

7. 一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-6任何一项所述的秦艽提取物和药学上可接受的载体。

8. 一种药物制剂，其特征在于，包含权利要求1-6任何一项所述的秦艽提取物或权利要求7所述的药物组合物。

9. 权利要求1-6任何一项所述的秦艽提取物或权利要求7所述的组合物或权利要求8所述的药物制剂在制备抑制丁酰胆碱酯酶活性药物中的应用。

10.权利要求9所述的应用，其特征为，用于治疗阿尔茨海默病(AD)等。

11.如权利要求1-6任何一项所述的维吾尔药秦艽提取物，其特征为，用TLC法检，其色谱条件为：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（1:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。