CN105878094A - 含茶籽抗氧化肽的化妆品的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了含茶籽抗氧化肽的化妆品的制备方法，涉及护肤类化妆品的配方和制备工艺。茶籽中含有丰富的蛋白，本发明将茶籽蛋白水解生成茶籽抗氧化肽，以1-5％的质量百分数添加于护肤类化妆品中，使化妆品具有清除自由基，延缓皮肤老化的功能。同时茶籽多肽也为肌肤提供了营养成分，有助于皮肤的修复保养。

Description

含茶籽抗氧化肽的化妆品的制备方法

技术领域

本发明涉及具有抗氧化作用的护肤类化妆品，配方中主要抗氧化成分为茶籽抗氧化肽。

背景技术

油茶为茶科山茶属植物，起源于中国，是世界四大木本食用油源树种之一。油茶籽榨油后的残渣茶籽粕中含10-15％蛋白质，是一种植物蛋白资源，具有很高的营养价值。据文献报道，茶籽蛋白含有17种氨基酸，包括8种人体必需氨基酸。茶籽蛋白经过生物酶水解后，能制备具有多种生物活性的多肽。研究表明，茶籽多肽安全无毒，富有营养，并有抗氧化性，但目前尚无含茶籽多肽的产品面世。本发明通过制备茶籽抗氧化肽，并将其应用到护肤类化妆品中，对茶籽多肽的应用推广具有重要的现实意义。

皮肤衰老是皮肤组织内一系列复杂的生物学过程，是内源性生理因素和外源性环境因素共同作用的结果。其主要原因之一是机体内过多的自由基氧化损伤了正常细胞，加速细胞老化，若能清除自由基，抑制这种氧化作用，则对皮肤的衰老能起到减缓的作用。化学抗氧化剂如TBHQ(叔丁基对苯二酚)、BHA(丁基羟基茴香醚)、BHT(2，6-二叔羟基对甲酚)等，由于其具有潜在的不安全性因素，其使用受到一定的限制。天然抗氧化剂具有高安全性、较好的生物相容性、多种生物活性等优点，越来越受到人们的重视。在天然抗氧化剂的研究中，抗氧化肽是目前的热门方向之一，它不仅具有清除体内过量自由基的功能，而且兼具营养作用，能提供人体所需的氨基酸。来自植物蛋白的抗氧化肽，分子量小、易溶于水、易吸收、安全稳定，在生物医药、化妆品、保健食品等领域具有巨大的开发潜力。

本发明以油茶籽榨油后副产品茶籽粕为原料制备得到茶籽抗氧化肽，原料来源广价格低。本发明中制备的茶籽抗氧化肽具有清除DPPH自由基、羟基自由基的能力，抗氧化性能良好。此外，茶籽抗氧化肽含有8种人体必需氨基酸，相对平均分子量约为530Da，是一种易吸收的营养成分。因而它作为化妆品中的添加成分，不仅可起到延缓肌肤衰老的功效，而且有助于皮肤的修复保养。

发明内容

本发明以茶籽粕为原料，提取茶籽蛋白，然后水解生成茶籽抗氧化肽，以1-5％的质量百分数添加于护肤类化妆品中，使化妆品具有清除自由基，延缓皮肤老化的功能。同时茶籽抗氧化肽也为肌肤提供了营养成分，有助于皮肤的修复。

本发明研究了含茶籽抗氧化肽的多种护肤类化妆品，例如：抗氧化日霜、抗氧化眼霜、抗氧化精华液。上述化妆品中包含1-5％质量百分比的茶籽抗氧化肽。

抗氧化日霜的配方为(以质量百分数计)：2-5％茶籽抗氧化肽、2-5％甘油、2.5-3.5％单硬脂酸甘油酯、2-3.5％鲸蜡酸硬脂酸、2-3％聚二甲基硅氧烷、0.5-1％辛酸/癸酸甘油酯、0.5-1％角鲨烷、0.5-0.8％生育酚醋酸酯、0.1-0.5％透明质酸钠、0.5-0.8％茶籽油、0.3-0.8％丙二醇、0.3-0.8％肉豆蔻酸甘油酯、0.3-0.5％蜂蜡、0.1-0.3％尿囊素、0.8-1％苯氧乙醇、0.2-0.3％黄原胶、0.1-0.2％丙烯酸(酯)类共聚物、0.05-0.1％三乙醇胺、0.03-0.05％EDTA-2Na、香精少量、其余为水。

抗氧化眼霜的配方为(以质量百分数计)：3-5％茶籽抗氧化肽、1-3％鲸蜡醇、1-3％甘油、1-3％霍霍巴油、1-3％聚二甲基硅氧烷、1-3％硬脂醇聚醚-6、1-3％硬脂醇聚醚-21、1-2％聚甲基丙烯酸甘油酯、0.5-1.5％乳木果油、0.5-0.8％茶籽油、0.2-1％生育酚醋酸酯、0.1-0.4％泛醇、0.1-0.5％透明质酸钠、0.5-1％苯氧乙醇、0.1-0.2％丙烯酸(酯)类共聚物、0.03-0.06％氢氧化钠、0.03-0.05％EDTA-2Na、香精少量、其余为水。

抗氧化精华液的配方为(以质量百分数计)：1-3％茶籽抗氧化肽、3-5％聚甲基丙烯酸甘油酯、2-5％甘油、0.8-1％苯氧乙醇、0.5-2％丙二醇、0.3-0.8％PEG-40氢化蓖麻油、0.3-0.5％乙基己基甘油、0.1-0.5％透明质酸钠、0.02-0.08％红没药醇、0.02-0.06％羟乙基纤维素、0.03-0.05％EDTA-2Na、香精少量、其余为水。

本发明涉及的化妆品中，所用茶籽抗氧化肽的制法如下：

(1)盐法提取茶籽蛋白：脱脂脱茶皂素的茶籽粕以料液比1∶50(g/mL)溶解在0.005mol/L的硫酸铵溶液中，用NaOH溶液调节提取液pH为10.0，在20℃下浸提180min后离心分离得上清液；上清液中滴加稀盐酸溶液调节pH至4.0左右，不断搅拌并静置1h后离心，收集沉淀即为茶籽蛋白。

(2)酶法水解茶籽蛋白为多肽粗液：茶籽蛋白中按料液比1∶10(g/mL)加入溶剂水，加热，用NaOH溶液调节pH到10左右，加入酶底比1.0％的碱性蛋白酶，放入水浴恒温振荡器中，50℃下水解3h后，升温灭酶，冷却，离心后上清液即为茶籽多肽粗提液。

(3)树脂脱色：茶籽多肽粗提液中按1.0g/10mL加入经预处理的D392阴离子树脂，置于水浴恒温振荡器内振荡90min，过滤得茶籽多肽脱色液。

(4)凝胶柱层析纯化：茶籽多肽脱色液浓缩，过Sephadex G-25凝胶柱，超纯水洗脱，在波长280nm处检测吸光度，收集洗脱液，浓缩，得到多肽溶液。多肽溶液再通过Sephadex G-15凝胶柱，在波长280nm处检测吸光度，收集洗脱液，浓缩，冷冻干燥得茶籽抗氧化肽。

附图说明

图1为实施例1所得茶籽抗氧化肽对DPPH自由基、羟基自由基的清除率。

具体实施方式

实施例1茶籽抗氧化肽的制备

(1)提取茶籽蛋白：脱脂脱茶皂素的茶籽粕以料液比1∶50(g/mL)溶解在0.005mol/L的硫酸铵溶液中，用NaOH溶液调节提取液pH为10.0，在20℃下浸提180min后离心分离得上清液；上清液中滴加稀盐酸溶液调节pH至4.0左右，不断搅拌并静置1h后离心，收集沉淀即为茶籽蛋白。

(2)水解茶籽蛋白为多肽粗液：茶籽蛋白中按料液比1∶10(g/mL)加入溶剂水，加热，用NaOH溶液调节pH到10左右，加入酶底比1.0％的碱性蛋白酶，放入水浴恒温振荡器中，50℃下水解3h后，升温灭酶，冷却，离心后上清液即为茶籽多肽粗提液。

(3)树脂脱色：茶籽多肽粗提液中按1.0 g/10mL加入经预处理的D392阴离子树脂，置于水浴恒温振荡器内振荡90min，过滤得茶籽多肽脱色液。

(4)凝胶柱层析纯化：茶籽多肽脱色液浓缩，过Sephadex G-25凝胶柱，超纯水洗脱，在波长280nm处检测吸光度，收集洗脱液，浓缩，得到多肽溶液。多肽溶液再通过Sephadex G-15凝胶柱，在波长280nm处检测吸光度，收集洗脱液，浓缩，冷冻干燥得茶籽抗氧化肽。

(5)茶籽抗氧化肽抗氧化性测定：

取1.5mL多肽溶液与1.5mL 0.1mmol/L DPPH自由基溶液混匀，室温下避光放置30min后在517nm波长处测吸光度，计算DPPH自由基清除率：

式中：A₀：DPPH·+1.5mL乙醇吸光度；A₁：DPPH·+多肽溶液吸光度；A₂：1.5mL乙醇+多肽溶液吸光度。

试管中加入1mL邻二氮菲(0.75mmol/L)、2mL PBS缓冲液(0.15mmol/L，pH 7.4)、1mL FeSO₄(0.75mmol/L)、1mL多肽溶液、1mL 0.01％H₂O₂，在37℃水浴中反应30min，测定536nm波长处吸光度，计算羟基自由基清除率：

式中：A₁：邻二氮菲+PBS+FeSO₄+多肽溶液+1mL H₂O₂；A₂：邻二氮菲+PBS+FeSO₄+2mL H₂O；A₃：邻二氮菲+PBS+FeSO₄+1mL H₂O+H₂O₂。

茶籽抗氧化肽对DPPH自由基、羟基自由基的清除率见附图1。茶籽抗氧化肽浓度在0.030％时，对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别为86.4％和67.0％，并且随浓度的增加清除率有不断上升的趋势。因此推断，在化妆品中茶籽抗氧化肽用量达到1-5％时，具有显著的抗氧化能力。

此外，经氨基酸分析茶籽抗氧化肽中含苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、色氨酸8种人体必需氨基酸。

实施例2抗氧化日霜

配方：3％茶籽抗氧化肽、5％鲸蜡酸硬脂酸、3％甘油、2.5％单硬脂酸甘油酯、2.5％聚二甲基硅氧烷、1％辛酸/癸酸甘油酯、1％苯氧乙醇、0.8％角鲨烷、0.8％生育酚醋酸酯、0.8％丙二醇、0.5％茶籽油、0.5％肉豆蔻酸甘油酯、0.5％蜂蜡、0.3％香精、0.2％尿囊素、0.2％黄原胶、0.15％丙烯酸(酯)类共聚物、0.1％三乙醇胺、0.1％透明质酸钠、0.05％EDTA-2Na、其余为水。

制法：将去离子水、甘油、丙烯酸(酯)类共聚物、尿囊素、丙二醇、EDTA-2Na、黄原胶、透明质酸钠按配方比例依次加入水相锅中加热至80-90℃，高速搅拌至完全溶解，备用。将鲸蜡酸硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、聚二甲基硅氧烷、辛酸/癸酸甘油酯、角鲨烷、茶籽油、生育酚醋酸酯、肉豆蔻酸甘油酯、蜂蜡按配方比例加入油相锅中高速搅拌，并加热至80-90℃，备用。将水相混合物加入到油相混合物中，均质3-5min至乳化完全，抽真空10min，自然冷却。温度降至55℃时，加入茶籽抗氧化肽、三乙醇胺、苯氧乙醇、香精，继续搅拌至温度降至30℃时出料。

实施例3抗氧化眼霜

配方：4％茶籽抗氧化肽、3％甘油、2％鲸蜡醇、2％霍霍巴油、2％聚二甲基硅氧烷、2％硬脂醇聚醚-6、2％硬脂醇聚醚-21、1％聚甲基丙烯酸甘油酯、1％乳木果油、0.8％茶籽油、0.8％苯氧乙醇、0.5％生育酚醋酸酯、0.3％泛醇、0.3％香精、0.15％丙烯酸(酯)类共聚物、0.1％透明质酸钠、0.05％氢氧化钠、0.05％EDTA-2Na、其余为水。

制法：将去离子水、甘油、聚甲基丙烯酸甘油酯、丙烯酸(酯)类共聚物、EDTA-2Na、透明质酸钠按配方比例依次加入水相锅中加热至80-90℃，高速搅拌至完全溶解，备用。将鲸蜡醇、霍霍巴油、乳木果油、聚二甲基硅氧烷、硬脂醇聚醚-6、硬脂醇聚醚-21、茶籽油、生育酚醋酸酯按配方比例加入油相锅中高速搅拌，并加热至80-90℃，备用。将水相混合物加入到油相混合物中，均质3-5min至乳化完全，抽真空10min，自然冷却。温度降至55℃时，加入茶籽抗氧化肽、泛醇、苯氧乙醇、香精，继续搅拌数分钟后加入氢氧化钠水溶液，搅拌至温度降至30℃时出料。

实施例4抗氧化精华液

配力：2％茶籽抗氧化肽、5％聚甲基丙烯酸甘油酯、5％甘油、1.5％丙二醇、1％苯氧乙醇、0.5％PEG-40氢化蓖麻油、0.5％透明质酸钠、0.3％乙基己基甘油、0.3％香精、0.05％红没药醇、0.05％羟乙基纤维素、0.05％EDTA-2Na、其余为水。

制法：按配方比例将羟乙基纤维素分散在少量去离子水中，备用。按比例依次加入去离子水、聚甲基丙烯酸甘油酯、甘油、PEG-40氢化蓖麻油、乙基己基甘油、透明质酸钠、EDTA-2Na，高速搅拌至80-90℃至完全溶解，备用；温度降至45-55℃时，加入茶籽抗氧化肽、红没药醇、苯氧乙醇、羟乙基纤维素分散液、香精，继续搅拌约5min，温度降至30℃时出料。

上述仅为本发明的较佳可行实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均同理包含在本发明的范围内。

Claims (5)

1.含茶籽抗氧化肽的化妆品包括多种护肤类化妆品，例如：抗氧化日霜、抗氧化眼霜、抗氧化精华液。其特征在于，所述化妆品中包含1-5％质量百分比的茶籽抗氧化肽。

2.权利要求1所述的抗氧化日霜，配方为(以质量百分数计)：2-5％茶籽抗氧化肽、2-5％甘油、2.5-3.5％单硬脂酸甘油酯、2-3.5％鲸蜡酸硬脂酸、2-3％聚二甲基硅氧烷、0.5-1％辛酸/癸酸甘油酯、0.5-1％角鲨烷、0.5-0.8％生育酚醋酸酯、0.1-0.5％透明质酸钠、0.5-0.8％茶籽油、0.3-0.8％丙二醇、0.3-0.8％肉豆蔻酸甘油酯、0.3-0.5％蜂蜡、0.1-0.3％尿囊素、0.8-1％苯氧乙醇、0.2-0.3％黄原胶、0.1-0.2％丙烯酸(酯)类共聚物、0.05-0.1％三乙醇胺、0.03-0.05％EDTA-2Na、香精少量、其余为水。

3.权利要求1所述的抗氧化眼霜，配方为(以质量百分数计)：3-5％茶籽抗氧化肽、1-3％鲸蜡醇、1-3％甘油、1-3％霍霍巴油、1-3％聚二甲基硅氧烷、1-3％硬脂醇聚醚-6、1-3％硬脂醇聚醚-21、1-2％聚甲基丙烯酸甘油酯、0.5-1.5％乳木果油、0.5-0.8％茶籽油、0.2-1％生育酚醋酸酯、0.1-0.4％泛醇、0.1-0.5％透明质酸钠、0.5-1％苯氧乙醇、0.1-0.2％丙烯酸(酯)类共聚物、0.03-0.06％氢氧化钠、0.03-0.05％EDTA-2Na、香精少量、其余为水。

4.权利要求1所述的抗氧化精华液，配方为(以质量百分数计)：抗氧化精华液的配方为(以质量百分数计)：1-3％茶籽抗氧化肽、3-5％聚甲基丙烯酸甘油酯、2-5％甘油、0.8-1％苯氧乙醇、0.5-2％丙二醇、0.3-0.8％PEG-40氢化蓖麻油、0.3-0.5％乙基己基甘油、0.1-0.5％透明质酸钠、0.02-0.08％红没药醇、0.02-0.06％羟乙基纤维素、0.03-0.05％EDTA-2Na、香精少量、其余为水。

5.权利要求1-4所述的茶籽抗氧化肽具有抗氧化性，制法如下：

(1)盐法提取茶籽蛋白：脱脂脱茶皂素的茶籽粕以料液比1∶50(g/mL)溶解在0.005mol/L的硫酸铵溶液中，用NaOH溶液调节提取液pH为10.0，在20℃下浸提180min后离心分离得上清液；上清液中滴加稀盐酸溶液调节pH至4.0左右，不断搅拌并静置1h后离心，收集沉淀即为茶籽蛋白。

(2)酶法水解茶籽蛋白为多肽粗液：茶籽蛋白中按料液比1∶10(g/mL)加入溶剂水，加热，用NaOH溶液调节pH到10左右，加入酶底比1.0％的碱性蛋白酶，放入水浴恒温振荡器中，50℃下水解3h后，升温灭酶，冷却，离心后上清液即为茶籽多肽粗提液。

(3)树脂脱色：茶籽多肽粗提液中按1.0g/10mL加入经预处理的D392阴离子树脂，置于水浴恒温振荡器内振荡90min，过滤得茶籽多肽脱色液。

(4)凝胶柱层析纯化：茶籽多肽脱色液浓缩，过Sephadex G-25凝胶柱，超纯水洗脱，在波长280nm处检测吸光度，收集洗脱液，浓缩，得到多肽溶液。多肽溶液再通过Sephadex G-15凝胶柱，在波长280nm处检测吸光度，收集洗脱液，浓缩，冷冻干燥得茶籽抗氧化肽。