CN105853466B - 双歧杆菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成体重减轻的产品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物医药领域,具体涉及双歧杆菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成体重减轻的产品中的应用。根据本发明,在服用酒精之前或之后或期间,连续服用双歧杆菌,尤其是动物双歧杆菌,能够改善由于酒精所造成的体重减轻的状况。并且,当双歧杆菌与培养上清或与所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物进行联合用药,能够更有效的改善体重减轻的状况。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域,具体地,涉及双歧杆菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成体重减轻的产品中的应用。
背景技术
在人类科技进步、经济发展的同时,嗜酒和滥用酒精的人群也在不断扩大,且已经发展为国内外不可忽视的重要问题,给社会、家庭带来了极大的危害。世界卫生大会在十年前发表的结果显示酒精有4.01%的患病率和3.19%的致死率,用数据说明了酒精对人体的损害作用。过量饮酒是导致发展中国家人民健康受到威胁的第一位原因,在发达国家也排在前列。截至2009年的统计,酒精引发的疾病在世界居于领先地位。中国在改革开放以后对过量饮酒者的统计结果表明,每年过量饮酒者在正常饮酒者的比例均不断升高;据九十年代的调查统计,西安市的过量饮酒者约有百分之三十五,北京市的过量饮酒者约占百分之十五。
长期大量接触酒精可引起身体各项机能的慢性损伤,如果不加以控制和治疗便会成为健康杀手,甚至危及到生命。随着对酒精流行病学的研究深入,人们也渐渐清晰的认识到过量摄入酒精对人体的损伤作用。酒精能够严重影响肝脏、胃肠道、神经系统、免疫系统、骨髓及造血系统等方面健康。慢性酒精损伤的危害远远不止以上列举的这些,国内外开始积极采取措施来控制和治疗这类疾病。通过对其发病机制的探索,现阶段利用戒酒、药物治疗,以及利用中药材的提取物治疗等治疗手段来抑制慢性酒精损伤。但是药物治疗的缺陷也显而易见:药物终究是药物,是药三分毒,耐药性、副作用等都是问题,都会让治疗更加棘手。在美国,尚没有FDA认可的能有效治疗慢性酒精损伤特别是由于酒精造成的体重减轻症状的药物。
因此,亟需开发出一种有效且无毒素作用的治疗慢性酒精损伤特别是由于酒精造成的体重减轻症状的药物。
发明内容
本发明的目的是为了克服以上缺陷,提供一种能够有效预防和/或治疗因摄入酒精造成体重减轻的且无任何毒副作用的产品。
为了实现上述目的,本发明提供了双歧杆菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成体重减轻的产品中的应用。
优选的,所述双歧杆菌为双歧杆菌的菌体物质和/或其胞外代谢产物。
优选的,所述双歧杆菌为动物双歧杆菌,更优选为动物双歧杆菌乳酸亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis);最优选为保藏编号为CGMCC No.9273的动物双歧杆菌乳酸亚种。
优选的,所述应用还包括所述双歧杆菌与其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物的联合用药;所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物包括人参、葛花、葛根、三七、刺五加、绿豆、五味子、菊花、决明子、山楂、麦芽、桑葚、葛花、蜂蜜、玉米肽、花生蛋白肽、乳制品、乙醛脱氢酶和维生素。
在服用酒精之前或之后或期间,连续服用双歧杆菌,尤其是动物双歧杆菌,能够改善由于酒精所造成的体重减轻的状况。并且,并且,当双歧杆菌与培养上清或与所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物进行联合用药,能够更有效的改善体重减轻的状况。
本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
附图是用来提供对本发明的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与下面的具体实施方式一起用于解释本发明,但并不构成对本发明的限制。在附图中:
图1为各组小鼠在试验期间体重的变化情况;
图2为试验进行12周后,各组小鼠摄入鼠粮质量与体重增加质量的比值;
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明,并不用于限制本发明。
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值,这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说,各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间,以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围,这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
公知,双歧杆菌常用于维持或调节肠道菌群,从而维持肠道健康;另外,双歧杆菌还常用于提高机体的免疫力。甚至还有学者提出长期食用双歧杆菌可起到减肥的作用。然而本发明的发明人在研究的过程中发现,相反的,服用双歧杆菌可以改善由于饮酒而造成的体重减轻的状况。
基于以上发现,本发明提供了双歧杆菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻的产品中的应用。
根据本发明,所述应用包括制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻的产品,优选的,所述产品为药品和/或食品。
本发明中,所述食品可以是任意类型的食品,例如果汁制品、乳制品、豆制品等。食品也可以根据食用对象的不同而有所不同。所述食品中还可以含有常规的食品学上可接受的添加剂,例如香料、矿物质、维生素、稳定剂、增稠剂、防腐剂等。另外,所述药品可以根据给药途径的不同而制备成不同的剂型,例如,可以制备成散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂等形式,所述药物中还可以包括药学上可接受的辅料,本领域技术人员能够根据不同的剂型选择不同的佐剂,本发明在此不再详细赘述。
本文中的术语“双歧杆菌”可以指双歧杆菌菌体物质,还可以指双歧杆菌的胞外代谢产物,或者其两者的组合。其中,所述双歧杆菌的菌体物质可以为活菌体和/或死菌体,本发明优选选用双歧杆菌的活菌体。所述双歧杆菌的胞外代谢产物可以以将培养后的菌悬液进行固液分离后得到的上清液的形式而存在。其中,所述固液分离可以通过离心的方法实现,例如,在4000-12000rpm的条件下于2-6℃离心5-20min。
其中,本发明的“双歧杆菌”优选为同时含有双歧杆菌菌体物质和双歧杆菌胞外代谢产物菌悬液,例如,将双歧杆菌种子接种到培养基进行特定时间的培养后所获的菌悬液。
根据本发明,优选的,所述双歧杆菌为动物双歧杆菌,进一步优选为动物双歧杆菌乳酸亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis),最优选为保藏编号为CGMCCNo.9273的动物双歧杆菌乳酸亚种。本发明的发明人发现,当所述双歧杆菌最优选为保藏编号为CGMCC No.9273的动物双歧杆菌乳酸亚种时,对于因摄入酒精造成的体重减轻状况的改善最为显著。
其中,保藏编号为CGMCC No.9273的动物双歧杆菌乳酸亚种的培养方法可以按照201410816266.3专利申请中对CGMCC No.6936的培养条件进行。该申请的全部内容通过引用合并于此。
根据本发明,所述产品还含有一种或多种其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物以和所述双歧杆菌进行联合用药。在该联合用药的情况下,对双歧杆菌对因摄入酒精造成的体重减轻的效果更加明显。
优选的,所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物选自人参、葛花、葛根、三七、刺五加、绿豆、五味子、菊花、决明子、山楂、麦芽、桑葚、葛花、蜂蜜、玉米肽、花生蛋白肽、乳制品、乙醛脱氢酶和维生素中的至少一种。
根据本发明,当所述产品中含有的是双歧杆菌的菌体物质时,以每克所述产品为基准,所述双歧杆菌的含量可以为106-1011CFU。
CFU(Colony-Forming Units,菌落形成单位)指活菌个数。在活菌培养计数时,由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,称为菌落形成单位,以其表达活菌的数量,可以通过平板菌落计数法获得。本发明中,当双歧杆菌的死菌体的浓度以CFU/ml表示时,是指双歧杆菌的活菌体死亡后得到相应数量的死菌体,并将其溶于缓冲液中配制成所需浓度。
以下的实施例将对本发明作进一步的说明,但并不因此限制本发明。
在下述制备例、实施例和对比例中:
受试菌株及培养条件:
保藏编号为CGMCC No.9273的动物双歧杆菌乳酸亚种(以下简称A6),保藏编号为CGMCC No.6270的青春双歧杆菌(专利申请号201310149278.0);受试菌经三代活化后在MRS厌氧液体培养基中于37℃厌氧培养18h,使菌浓度达到109cfu/ml,菌液在室温下以6000g离心10min收集菌体和上清液,菌体用无菌生理盐水重悬洗涤两次后,用无菌生理盐水调整至不同浓度。
其中,MRS厌氧液体培养基的配方为:胰蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母浸粉5.0g,柠檬酸三铵2.0g,葡萄糖20.0g,吐温801.0mL,乙酸钠5.0g,磷酸氢二钾2.0g,硫酸镁0.5g,硫酸锰0.25g,水1L,pH 6.5,121℃灭菌15min。
实验动物:
SPF级ICR小鼠,购于北京维通利华公司实验动物技术有限公司,饲养于农业部转基因生物食用安全监督检验测试中心(北京)动物房,每笼5只,,定时更换垫料,保持鼠笼内清洁干燥,室温20±2℃,湿度50±5%,12小时灯照/黑暗循环。
本发明所用的试剂、培养基组成以及实验学方法等在没有特别说明的情况下,均为本领域常规使用的试剂、培养基组成以及实验学方法。
实施例1-4
用于说明本发明提供的双歧杆菌在预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻中的应用
按照表1中的设置,将小鼠随机分为6组,每组15只。适应性饲养7天,然后按照如下表2的处理方式对每组小鼠进行处理。每2周称量小鼠体重一次,计算处理12周时每只小鼠摄入鼠粮质量与体重增加质量的平均比值(料重比),结果见表3。其中,空白对照组、酒精模型组、A6低剂量组和A6高剂量组每周体重的变化趋势见图1,12周时小鼠料重比见图2。
表1
表2
注:酒精指的是50%乙醇;从第3周开始,每天灌胃2次,“+”前为第一次,“+”后为第二次,两次间隔30min。
实施例5
用于说明本发明提供的双歧杆菌在预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻中的应用
按照如上试验组的处理方式对一组15只的小鼠进行处理,不同的是,受试物为同等体积的生理盐水悬浮的动物双歧杆菌菌体物质和蜂蜜液(含水量20%)的混合物,其中,动物双歧杆菌菌体物质的含量为107cfu/ml,蜂蜜的用量使得在每毫升灌服液中,蜂蜜以除去水的重量计,其和菌体物质的重量之和与菌体物质含量为108cfu/ml菌液中的菌体物的质重量相等。每2周称量小鼠体重一次,计算处理12周时小鼠摄入鼠粮质量与体重增加质量的比值(料重比),结果见表3。
对比例1
用于说明参比物质在预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻中的应用
按照如上试验组的处理方式对一组15只的小鼠进行处理,不同的是,受试物为同等体积的蜂蜜液(含水量20%)生理盐水稀释液,其中,蜂蜜的用量使得在每毫升灌服液中,蜂蜜以除去水的重量计,其重量与菌体物质含量为108cfu/ml菌液中的菌体物的质重量相等。每2周称量小鼠体重一次,计算处理12周时小鼠摄入鼠粮质量与体重增加质量的比值(料重比),结果见表3。
表3
由表3可以看出,双歧杆菌,尤其是动物双歧杆菌能够显著地预防和治疗由于酒精摄入而导致的体重减轻。并且在优选的情况下,当双歧杆菌与其他可降低酒精对机体造成伤害的药物共同作用时,改善酒精导致的体重减轻状况的效果更加明显。
如图2所示的,在长期持续灌胃酒精后,模型组与对照组相比,料重比呈现负值,小鼠体重显著下降,在低、高剂量的动物双歧杆菌A6活菌体干预下,料重比恢复至正常组水平,小鼠体重显著增加,显著高于模型组,与对照组没有显著性差异。说明动物双歧杆菌菌体可以减轻因摄入酒精造成的体重减轻的不良影响。
以上详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复,本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外,本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合,只要其不违背本发明的思想,其同样应当视为本发明所公开的内容。
Claims (8)
1.双歧杆菌在制备用于预防和/或治疗因摄入酒精造成的体重减轻的产品中的应用,其中,所述双歧杆菌为动物双歧杆菌。
2.根据权利要求1所述的应用,其中,所述双歧杆菌为双歧杆菌的菌体物质和/或其胞外代谢产物。
3.根据权利要求2所述的应用,其中,所述双歧杆菌的菌体物质为双歧杆菌活菌体。
4.根据权利要求1所述的应用,其中,所述动物双歧杆菌为动物双歧杆菌乳酸亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)。
5.根据权利要求4所述的应用,其中,所述动物双歧杆菌乳酸亚种的保藏编号为CGMCCNo.9273。
6.根据权利要求1所述的应用,其中,所述产品还含有药学上和/或食品学上可接受的辅料。
7.根据权利要求1-6中任意一项所述的应用,其中,所述应用还包括所述双歧杆菌与其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物的联合用药。
8.根据权利要求7所述的应用,其中,所述其他能够预防和/或治疗酒精造成的机体损害的药物选自人参、葛花、葛根、三七、刺五加、绿豆、五味子、菊花、决明子、山楂、麦芽、桑葚、葛花、蜂蜜、玉米肽、花生蛋白肽、乳制品、乙醛脱氢酶和维生素中的至少一种。
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