CN105852114B - 一种降脂保肝的功能食品 - Google Patents
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Classifications
-
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Abstract
本发明公开了一种降脂保肝的功能食品。由海藻多酚40‑60重量份、岩藻黄素20‑40重量份、虾青素10‑20重量份、牛磺酸10‑20重量份经过调配、杀菌、制粒、压片、包装工艺制成。可制备成胶囊、片剂、冲剂、口服液。具有有效抑制小鼠体重的过快增长，使小鼠肝脏系数以及内脏白色脂肪保持在正常范围。显著降低小鼠血清TC、LDL、AST以及ALT浓度；显著降低小鼠肝脏中TC、TG、LDL水平和提高HDL水平；及良好的抗脂肪肝的功能。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品技术领域，尤其涉及一种降脂保肝的功能食品。
背景技术
血脂异常是导致心血管疾病的主要原因。近年来，由于高脂膳食结构与运动缺乏，血脂异常人群急剧上升。据《中国健康大数据》最新报告，我国血脂异常人群规模在2亿以上，血脂异常率超过20％。此外，高脂膳食结构还容易导致非酒精性脂肪肝的发生。调查发现，非酒精性脂肪肝的发病率在美国、日本及中国分别达到了33％、29％和10％，且发病年龄有年轻化的趋势(Farrell et al.，2006)。非酒精性脂肪肝属于代谢综合症范畴，与中心性肥胖、高血脂、高甘油三酯血症、Ⅱ型糖尿病、动脉粥样硬化等疾病都有密切关系(Matthew et al.，2007)。据调查，30％的肥胖人群、50％的Ⅱ型糖尿病患者、100％的中心性肥胖症患者均同时患有非酒精性脂肪肝(Shivakumar et al.，2011)。此外，非酒精性脂肪肝是非良性动态发展性病变，可在短期内发展为严重的肝损害，其肝纤维化的发生率可高达25％，肝硬化为1.5％-8％(Cheung et al.，2011)，对人类健康危害极大。以此，血脂异常及非酒精性脂肪肝已成为我国重要的公共卫生问题。
然而，目前对于血脂异常及非酒精性脂肪肝的药物治疗效果较差，且药物治疗的疗程长，毒副作用大，甚至有进一步加剧病情的风险。《黄帝内经》认为“上工治未病，中工治欲病，下工治已病”，通过食疗从养生角度介入疾病的早期干预是预防血脂异常及非酒精性脂肪肝的最有效方式。医学研究发现，非酒精性脂肪肝的发生与肝脏脂肪代谢功能的紊乱密切相关，其病理发展是从单纯性脂肪变性(simple steatosis)或单纯性脂肪肝到脂肪性肝炎，最后到肝硬化(Brunt，2010)。NAFL为NAFLD的早期阶段，是一种良性的可逆病变，如果能够及时去除病因和控制发病，肝的组织病变可以得到好转，甚至完全恢复正常。因此，通过膳食功能因子对非酒精性脂肪肝早期阶段进行干预已成为食品学、营养学以及医学界的研究热点。
研究表明，高血脂、非酒精性脂肪肝的病理发生涉及人体代谢的多个环节，与多个器官作用密切相关。尽管已经发现许多天然活性物质都具有降脂保肝的活性，但这些物质的降脂机理或者降脂途径存在明显不同。目前较为公认的降脂途径包括：(1)减少肠道对脂肪(胆固醇)的吸收；(2)减少肝脏内源性脂质的合成；(3)促进脂质(胆固醇)的转运和排泄；(4)提高机体对脂质(胆固醇)的代谢能力。因此，由于单一天然活性成分存在靶向单一的缺陷，使用一种或一类膳食营养素开发降脂保肝的功能食品必然导致功效较差。
发明内容
本发明的目的在于提供一种功效明显、绿色天然、适合广大消费群体降脂保肝的功能食品。
为实现上述目的，本发明提供一种降脂保肝的配方，其特征在于，由海藻多酚40-60重量份、岩藻黄素20-40重量份、虾青素10-20重量份和牛磺酸10-20重量份制备得到。
进一步，所述海藻多酚中总酚重量含量不少于20％，6,6’-二鹅掌菜酚占海藻多酚中总酚重量的80％。
进一步，所述岩藻黄素中岩藻黄素重量含量不少于10％
进一步，所述海藻多酚和岩藻黄素来源于可食用海藻。
进一步，所述可食用海藻为海带、紫菜、羊栖菜、裙带菜、鼠尾藻、红毛藻、泡叶藻、麒麟菜、江蓠、墨角藻或微球藻。
进一步，所述降脂保肝的配方制备成片剂、胶囊或冲剂。
所述降脂保肝的配方用于功能食品的用途。
进一步，所述功能食品是饮料或休闲食品。
海藻是海洋植物多酚的主要来源，其结构与陆源植物多酚存在很大不同。研究表明，细微的结构差异会导致生物活性的巨大不同。海藻多酚由于结构区别于传统多酚化合物，其降脂保肝功能尚未见报道。岩藻黄素的抗氧化活性是维生素E的13.5倍，可实现受损肝细胞的快速修复；牛磺酸可靶向促进呼吸链作用；虾青素能提高血清高密度脂蛋白HDL水平，促进胆固醇转运和排泄。因此，本发明以海藻多酚为主要原料，同时结合传统中医理论的“多途径、多靶点、协同作用”思想，实现与岩藻黄素、虾青素、牛磺酸的功效互补，从而得到降脂保肝效果突出的功能食品。
所述海藻多酚是按本发明人前期已申请受理发明专利“一种高纯度海藻多酚的制备方法”(专利受理公开号：CN105193863A)记载的方法进行制备的。
所述岩藻黄素是按本发明人前期已授权发明专利“一种酶法制备褐藻岩藻聚糖与岩藻黄素的方法”(专利号：ZL201310142757.X)记载的方法进行制备的。
所述功能食品配方中的主要活性成分是海藻多酚，并与岩藻黄素、牛磺酸、虾青素按一定比例构成，以上成分在降脂保肝中具有不同作用靶点和作用途径，从而实现功效成分的协同增效。发明人采用高血脂动物模型证实，海藻多酚降脂保肝效果明显，主要途径是通过提高肝细胞磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)活性，促进脂质的能量转化，具体实施方式部分的表4数据显示，当海藻多酚的剂量≥80mg/kg时降脂保肝效果显著，在剂量范围80mg/kg-120mg/kg呈现良好的量效关系，但进一步提高海藻多酚剂量已无法进一步降低血清及肝脏中的脂质水平。因此，海藻多酚的有效剂量确定为80mg/kg-120mg/kg。此外，海藻多酚在有效剂量范围内可明显提高AMPK活性，促进多余脂质进行能量转化。
附图说明
图1是空白对照组小鼠肝组织病理切片图(油红O染色×400)；
图2是模型对照组小鼠肝组织病理切片图(油红O染色×400)；
图3是阳性对照组小鼠肝组织病理切片图(油红O染色×400)；
图4是组方干预组小鼠肝组织病理切片图(油红O染色×400)。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1：降脂保肝的功能食品配方
以海藻多酚50重量份、岩藻黄素30重量份、虾青素10重量份、牛磺酸10重量份的比例称取上述各提取物，混合均匀，待用。
实施例2：降脂保肝的功能食品配方
以海藻多酚40重量份、岩藻黄素20重量份、虾青素15重量份、牛磺酸15重量份的比例称取上述各提取物，混合均匀，待用。
实施例3：降脂保肝的功能食品配方
以海藻多酚60重量份、岩藻黄40重量份、虾青素20重量份、牛磺酸20重量份的比例称取上述各提取物，混合均匀，待用。
实施例4：效果验证实验
将实施例2中得到的配方设置为组方干预组，并设置空白对照组，模型对照组和阳性对照组(北大维信牌血脂康胶囊)。
实验动物：SPF级雌性ICR小鼠，15-20g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。小鼠基础饲料成分：碳水化合物64％，蛋白质21％，脂肪4％，纤维5％，水分6％；小鼠高脂饲料成分：10％猪油，1％胆固醇，0.1％胆酸盐和88.9％基础饲料。上述饲料均购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。饲养室温度：23±2℃，相对湿度55±5％。
剂量的确定：血脂康灌胃量按使用说明书的预防剂量，为200mg/kg；配方灌胃的剂量为200mg/kg。
动物分组及处理方法：小鼠适应性喂养1周后，按照体重随机分为6组，每组10只，空白对照组给予基础饲料，模型对照组、阳性对照组及组方干预组给予高脂饲料，自由采食。每3天称一次体重，根据体重变化调整给药量。给药时，将实施例2所得产品(组方干预组)或血脂康药物(阳性对照组)用去离子水配置成液体状后，按剂量经口灌胃。连续8周给药后处死小鼠。实验结束时，将小鼠禁食12h，摘眼球取血，4000×g离心5min，分离血清，测定总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、谷草转氨酶(AST)及谷丙转氨酶(ALT)；摘取小鼠肝脏，于含冰的生理盐水中快速漂洗，拭干，称重。肝脏一部分用于制作肝冷冻切片，其余迅速投入液氮，冷冻后移入-80℃冰箱保存，用于测定肝脏TC、TG、LDL和HDL含量。
实验结果：
由表1可知，与空白对照组相比较，模型对照组小鼠的体重、肝脏系数以及内脏白色脂肪都明显升高(P<0.05)。在连续的8周给药后，组方干预组能有效抑制小鼠体重的过快增长，使小鼠肝脏系数以及内脏白色脂肪保持在正常范围。阳性对照组的血脂康虽然也能有效控(P<0.05)制小鼠体重、降低小鼠肝脏系数以及内脏白色脂肪堆积，但效果没有组方干预组的功效明显。
表1配方对高脂饮食小鼠体重、肝重、白色脂肪堆积的影响表(n＝10)
在血脂各项生化参数方面，由表2可知，高脂饮食诱导8周后，模型对照组小鼠血清TC、LDL、AST以及ALT浓度与空白对照组相比均显著升高(P<0.05)，形成了高血脂症，肝脏出现了轻微炎症。给药后，组方干预组小鼠血清TC、LDL、AST以及ALT浓度均显著降低(P<0.05)。阳性对照组也能明显降低高血脂小鼠血清TC、LDL、AST以及ALT浓度(P<0.05)。
表2配方对高脂饮食小鼠血清血脂指标的影响表(n＝10)
在预防脂肪肝效果方面，从表3可以看出，经过8周的高脂饲料喂养，模型对照组小鼠肝脏中TC、TG、LDL和HDL含量均显著高于空白对照组(P<0.05)，这说明模型对照组小鼠的肝脏已经出现了明显的脂质异常堆积，出现了非酒精性脂肪肝症状。组方干预组及阳性对照组均显著降低肝脏中TC、TG、LDL和HDL水平，且组方干扰组的效果明显好于阳性对照组的效果。
表3配方对高脂饮食小鼠肝脏脂质指标的影响(n＝10)
肝组织病理切片观察：经过8周的试验，各组小鼠肝脏进行油红O染色，观察肝细胞脂肪沉积情况。结果显示：空白对照组呈阴性，未见明显病理异常(见图1，图1是空白对照组小鼠肝组织病理切片图)；模型对照组肝细胞水肿，肝窦消失，胞浆内可见圆形空泡，肝细胞中脂肪变性显著，85％肝细胞内可见弥漫性体积较小的脂肪滴(见图2，图2是模型对照组小鼠肝组织病理切片图)；阳性对照组肝病理情况出现明显好转，只有少量肝细胞肿胀、胞浆疏松，15％肝细胞内可见弥漫性体积较小的脂肪滴(见图3，图3是阳性对照组小鼠肝组织病理切片图)；组方干预组呈阴性，肝细胞内未见明显脂肪滴，与空白对照组无明显差异(见图4，图4是组方干预组小鼠肝组织病理切片图)。以上说明组方具有良好的抗脂肪肝的功能。
采用实施例1和3所得进行效果验证，具有与实施例2同样良好的功能：有效抑制小鼠体重的过快增长，使小鼠肝脏系数以及内脏白色脂肪保持在正常范围。显著降低小鼠血清TC、LDL、AST以及ALT浓度；显著降低肝脏中TC、TG、LDL水平和提高HDL水平；及良好的抗脂肪肝。
实施例5：功能食品的制备
(1)颗粒剂的制备
向200g实施例1中制备的组方中加入适量可溶性淀粉、糊精、蔗糖、乳糖和甘露醇其中一种或几种，用适量70％(v/v)乙醇润湿，制软材，过20目筛制粒，70-80℃干燥，60目整粒，得颗粒剂。
(2)胶囊的制备
向200g实施例2中制备的组方中加入适量硬脂酸镁和淀粉，混匀，用全自动胶囊填充机填充入硬胶囊，每粒装量0.5g。
(3)片剂的制备
向200g实施例3中制备的配方中加入适量的糊精、淀粉、微晶纤维素和乳糖中的一种或几种辅料，混合均匀，用适量70％(v/v)乙醇润湿，制软材，过30目筛制粒，于70-80℃干燥，用60目筛整粒，压片，得片剂，每片0.2g。
(4)饮料的制备
将200g实施例1中制备的配方溶于适量的70％(v/v)乙醇，加入大豆卵磷脂、硬脂酰乳酸钠、三聚甘油酯、蔗糖酯、月桂酸单甘油酯中的一种或几种进行乳化，然后经复溶、加入适量的甜味剂和稳定剂，混匀，过滤，灌装，杀菌，即得饮料。
实施例6：海藻多酚降脂保肝效果实验
发明人采用高血脂动物模型证实，海藻多酚降脂保肝效果明显，主要途径是通过提高肝细胞磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)活性，促进脂质的能量转化，如表4所示。实验方法：
实验动物：SPF级雌性ICR小鼠，15-20g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。小鼠基础饲料成分：碳水化合物64％，蛋白质21％，脂肪4％，纤维5％，水分6％；小鼠高脂饲料成分：10％猪油，1％胆固醇，0.1％胆酸盐和88.9％基础饲料。上述饲料均购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。饲养室温度：23±2℃，相对湿度55±5％。
给药剂量及方法：海藻多酚的灌胃的剂量分别为60mg/kg、80mg/kg、100mg/kg、120mg/kg和140mg/kg。
动物分组及处理方法：小鼠适应性喂养1周后，按照体重随机分为6组，每组10只，正常组给予基础饲料，模型对照组、阳性对照组及组方干预组均给予高脂饲料，自由采食。每3天称一次体重，根据体重变化调整给药量。给药时，将海藻多酚用去离子水配置成液体状后，按剂量经口灌胃。连续8周给药后处死小鼠。实验结束时，将小鼠禁食12h，摘眼球取血，4000×g离心5min，分离血清，测定总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)；摘取小鼠肝脏，于含冰的生理盐水中快速漂洗，拭干，用于测定肝脏TC、TG和AMPK含量。
表4海藻多酚降脂保肝功能与作用途径表
结果显示，当海藻多酚的剂量≥80mg/kg时降脂保肝效果显著，在剂量范围80mg/kg-120mg/kg呈现良好的量效关系，但进一步提高海藻多酚剂量已无法进一步降低血清及肝脏中的脂质水平。因此，海藻多酚的有效剂量确定为80mg/kg-120mg/kg。此外，海藻多酚在有效剂量范围内可明显提高AMPK活性，促进多余脂质进行能量转化。
为了进一步有效提高降脂保肝功能食品的功效性，根据中医理论的“多靶点、多途径、协同作用”思想，在海藻多酚促进肝细胞AMPK表达、实现脂质能量转化基础上，充分结合岩藻黄素的抗氧化及细胞修缮功能、牛磺酸促进呼吸链功能、虾青素促进胆固醇转运和排泄功能，实现海藻多酚与岩藻黄素、牛磺酸、虾青素的科学组方设计，有益效果如表5所示。
实验方法：
实验动物：SPF级雌性ICR小鼠，15-20g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。小鼠基础饲料成分：碳水化合物64％，蛋白质21％，脂肪4％，纤维5％，水分6％；小鼠高脂饲料成分：10％猪油，1％胆固醇，0.1％胆酸盐和88.9％基础饲料。上述饲料均购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。饲养室温度：23±2℃，相对湿度55±5％。
给药剂量及方法：组方灌胃剂量为200mg/kg。
动物分组及处理方法：小鼠适应性喂养1周后，按照体重随机分为6组，每组10只，正常组给予基础饲料，模型对照组、阳性对照组及组方干预组给予高脂饲料，自由采食。每3天称一次体重，根据体重变化调整给药量。给药时，将各组方用去离子水配置成液体状后，按剂量经口灌胃。连续8周给药后处死小鼠。实验结束时，将小鼠禁食12h，摘眼球取血，4000×g离心5min，分离血清，测定总胆固醇(TC)；摘取小鼠肝脏，于含冰的生理盐水中快速漂洗，拭干，用于测定肝脏TC含量。
表5海藻多酚与岩藻黄素、牛磺酸、虾青素进行配伍的降脂保肝效果表(剂量：200mg/kg)
从表5可以看出，以高血脂小鼠动物为模型，给药剂量为200mg/kg，其中，海藻多酚的重量含量为40wt％(根据海藻多酚有效剂量的下限为80mg/kg)，发现仅与岩藻黄素、牛磺酸、虾青素中的一种或2种进行配伍，效果均没有4种有效成分的配伍效果好。同时，研究发现，在固定海藻多酚比例的前提下，岩藻黄素、牛磺酸、虾青素在产品中比例分别为20wt％-40wt％、10wt％-20wt％、10wt％-20wt％时可实现血清及肝脏胆固醇接近正常值，提高或降低以上成分的比例，其效果都会变差。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (8)
1.一种降脂保肝的食品，其特征在于，由海藻多酚40-60重量份、岩藻黄素20-40重量份、虾青素10-20重量份和牛磺酸10-20重量份制备得到。
2.权利要求1所述降脂保肝的食品，其特征在于，所述海藻多酚中总酚重量含量不少于20％，6,6’-二鹅掌菜酚占海藻多酚中总酚重量的80％。
3.权利要求1所述降脂保肝的食品，其特征在于，所述岩藻黄素中岩藻黄素重量含量不少于10％
4.权利要求1所述降脂保肝的食品，其特征在于，所述海藻多酚和岩藻黄素来源于可食用海藻。
5.权利要求4所述降脂保肝的食品，其特征在于，所述可食用海藻为海带、紫菜、羊栖菜、裙带菜、鼠尾藻、红毛藻、泡叶藻、麒麟菜、江蓠、墨角藻或微球藻。
6.权利要求1所述降脂保肝的食品，其特征在于，所述降脂保肝的配方制备成片剂、胶囊或冲剂。
7.权利要求1所述降脂保肝的食品在制备功能食品中的用途。
8.权利要求7所述的用途，其特征在于，所述功能食品是饮料或休闲食品。
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- 2016-05-14 CN CN201610322166.4A patent/CN105852114B/zh active Active
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