CN105785018A - 一种手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,可有效解决现有技术检测敏感度低,准确率低,容易出现漏检,标本采集困难的问题,方法是,首先将反应膜粘贴到背衬中心上,反应膜上喷涂检测线和对照线,再将吸水垫压到反应膜靠近背衬末端的一侧,胶体金垫压到反应膜的另一侧,样品垫压到胶体金垫的另一侧,样品垫、胶体金垫、反应膜和吸水垫皆用强力胶固定于背衬上,用切条机沿背衬横截面方向切成4mm宽的条,将试纸条装在试纸壳内,试纸壳上开有样本孔和检测结果区;本发明是利用抗肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型特异性单克隆抗体制备的高敏感性手足口病病原快速检测试纸,检测敏感度好,准确率高,不容易出现漏检。
Description
技术领域
本发明涉及检测试纸,特别是一种手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法。
背景技术
手足口病(Handfootandmouthdisease,HFMD)是一种人肠道病毒引起的常见传染病,该病以手、足和口腔粘膜疱疹或破溃后形成溃疡为主要临床症状。多发生于5岁以下儿童,可引起手、足、口腔等部位的疱疹,少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。个别重症患儿如果病情发展快,导致死亡,给婴幼儿的生命健康带来了巨大威胁,造成了较严重的社会影响。引发手足口病的肠道病毒有20多种(型),其中以柯萨奇病毒A16型(CA16)和肠道病毒71型(EV71)最为常见。据卫生部根据各地上报数统计,EV71和CA16肠道病毒引起的手足口病2011年感染者为162万人,死亡509人;2012年感染者216.9万人,死亡567人,呈逐年上升的趋势。手足口病近年在全国多个省、市的流行越发强势,疾病预防控制形势不容乐观。
由于EV71和CA16病毒在人群中隐性感染者广泛存在,具有传播途径不易切断、重症病例病死率高的特性,近年来,EV71和CA16疫情在全国流行范围逐渐扩大,并且有向成人发展的趋势。积极采取手足口病的早诊断、早治疗等防治措施可明显降低病死率。因此手足口病病原快速检测试剂市场巨大。在探寻和建立手足口病病原(EV71和CA16)诊断试剂盒方面,国内外研究人员都进行了大量工作。2010年,昆明理工大学生命科学与技术学院与北京科兴生物制品有限公司研发中心建立EV71抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,探索检测样本中EV71抗原含量的可能。同年,谢靖婧报告研制出了早期快速检测肠道病毒71型抗体的ELISA血清学诊断试剂盒。2011年,深圳国际旅行卫生保健中心发明公开了一种咽拭子标本手足口病EV71病毒RT-PCR检测试剂盒及其检测方法。2012年,北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司提供一种结合单克隆抗体,应用双抗体夹心法,检测标本中EV71的快速检测试纸条。2012年,北京万泰生物药业股份有限公司建立柯萨奇病毒A组16型(CA16)抗原的双抗体夹心ELISA定量检测方法。但至今,以上研究的检测方法都因为本身的敏感性和特异性等的原因没能推向市场。
目前,实时荧光定量PCR方法是检测手足口病灵敏度和准确率都比较高的方法,该方法在许多国家和地区已经是鉴定手足口病阳性病例的确诊性方法。然而,由于核酸检测第二天才能出结果,且需要一定的检测条件,不适合中小医院临床诊断使用,很多患儿在这些医院仅靠临床表现判定患者是否患有手足口病就进行治疗,并不上报卫生部。只有在规模较大的疾病预防控制中心,才能使用PCR技术对患儿进行确诊。实时荧光定量PCR方法的实验检测条件限制了该方法只能用于手足口病的最终实验室确定性检测。但是而敏感度、准确率低于实时荧光定量PCR技术的免疫胶体金技术、酶联免疫检测(ELISA)技术等方法由于操作简便、成本低廉、对实验条件要求低等特点被广泛应用在手足口病检测的第一线。
由于市场上查抗体的ELISA诊断试剂盒结果波动较大,敏感性较低,而且检测需要6~8小时以上出结果,基层的乡镇卫生院和社区医院多数也不具备进行该项检测的条件。此外,目前国内市场上生产手足口病检测试剂盒主要检测的是患儿血清中的抗体或粪便和咽试子中的病毒核酸。对于患儿来讲,抽血采集血清标本是一件非常困难的事;病毒核酸检测方法特异性强、敏感性高,但是该方法对仪器、技术和环境要求较高,易形成污染和出现假阳性,更重要的是该方法的取材和处理需要在P2实验室中进行一般医院检验科都不具备该条件,大大限制了其应用,如果标本处理不够严格,反而增大了疫情扩散的可能性。
因此,研制满足国家传染病防控重大需求,提升突发传染病应急处置能力,同时带动传染病诊断试剂产业的发展和快速检测试剂盒研发技术链的成熟和发展,亟需一种方便、快捷、操作简单的手足口病抗原(EV71和CA16)检测试剂盒,但至今未见有公开报导。
发明内容
针对上述情况,为解决现有技术之缺陷,本发明之目的就是提供一种手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,可有效解决现有技术检测敏感度低,准确率低,容易出现漏检,标本采集困难的问题。
本发明解决的技术方案是,首先将反应膜粘贴到背衬中心上,反应膜上喷涂检测线和对照线,再将吸水垫压到反应膜靠近背衬末端的一侧,胶体金垫压到反应膜的另一侧,样品垫压到胶体金垫的另一侧,样品垫、胶体金垫、反应膜和吸水垫皆用强力胶固定于背衬上,用切条机沿背衬横截面方向切成4mm宽的条,将试纸条装在试纸壳内,试纸壳上开有样本孔和检测结果区;所述的样品垫是由样品处理液和玻纤膜制成;所述的胶体金垫是由玻纤膜上喷涂金标抗体液制成;所述的检测线和对照线分别是由检测抗体点膜液、对照抗体点膜液喷涂在反应膜上制成。
本发明是利用抗肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型特异性单克隆抗体制备的高敏感性手足口病病原快速检测试纸,检测敏感度好,准确率高,不容易出现漏检,是手足口病病原检测试纸上的创新。
附图说明
图1为本发明的试纸条结构主视图。
图2为本发明的试纸壳结构主视图。
图3为本发明的使用状态图。
具体实施方式
以下结合附图和具体情况对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
由图1-3给出,本发明在具体实施时,是由以下方法实现的:
首先将反应膜4粘贴到背衬7中心上,反应膜4上喷涂检测线3和对照线5,再将吸水垫6压到反应膜4靠近背衬末端的一侧,胶体金垫2压到反应膜4的另一侧,样品垫1压到胶体金垫2的另一侧,样品垫、胶体金垫、反应膜和吸水垫皆用强力胶固定于背衬上,用切条机沿背衬横截面方向切成4mm宽的条,将试纸条装在试纸壳8内,试纸壳8上开有样本孔9和检测结果区10;
所述的样品垫1是由样品处理液和玻纤膜制成,方法是,由20g牛血清白蛋白、5g曲拉通-100和0.01mol、pH为7.4的磷酸缓冲液加水至1000ml制成样品处理液,把玻纤膜裁切成22mm宽的条,然后在每0.8cm长的玻纤膜上喷涂100μL样品处理液,37℃干燥过夜,成样品垫1;
所述的胶体金垫2是由玻纤膜上喷涂金标抗体液制成,方法是,将玻纤膜裁切成7mm宽的条,每1.7cm长的玻纤膜上喷涂100μL金标抗体液,冷冻真空干燥或加入干燥剂晾干,再密闭在密闭容器中静置12小时,即成胶体金垫2;
金标抗体液的制备,方法是:
1)胶体金稀释液的配制,胶体金稀释液是由10g牛血清白蛋白、25g蔗糖、0.5g吐温-20、1g叠氮钠和0.01mol、pH为7.4的磷酸缓冲液加水至1000mL制成;
2)胶体金颗粒溶液的配制:取质量浓度为0.01%氯金酸水溶液50ml,微波加热至煮沸,加入质量浓度为1%柠檬酸三钠水溶液600μL,加热至出现酒红色,再加入50ml、4℃预冷的电导率为18.25的纯净水,即成40nm胶体金颗粒溶液,胶体金颗粒溶液吸收峰波长为532-534nm;Abs大于0.400;
3)胶体金标记抗体的配制:取胶体金颗粒溶液10ml,磁力搅拌下,加入体积浓度为30%的双氧水水溶液32μL;室温磁力搅拌混合10min,再加入0.2M的碳酸钾水溶液300μL,室温磁力搅拌10min,加入0.2mg纯化冻干的抗手足口病病原单克隆抗体CE-6,抗手足口病病原单克隆抗体CE-6冻干前缓冲液为0.01M,pH7.4的磷酸缓冲液;室温磁力搅拌60min,加入0.1g牛血清白蛋白,室温磁力搅拌混匀10min后,再加入0.01g聚乙二醇6000,室温磁力搅拌30min,得金标抗体,将金标抗体移入离心管,在4℃,用HimacCR21G离心机浓缩,8000rpm离心10min,弃去上清,得酒红色沉淀,即为胶体金标记抗体;
4)金标抗体液的配制:胶体金标记抗体用胶体金稀释液溶解以置换溶液体系,然后用胶体金稀释液稀释金标抗体,稀释后的金标抗体最高吸收峰波长532-534nm,吸光度(OD)大于0.400Abs;
所述的检测线3和对照线5分别是由检测抗体点膜液、对照抗体点膜液喷涂在反应膜4上制成,方法是:
1)配制点膜稀释液:由0.01mol、pH为7.4的磷酸缓冲液,0.15mol氯化钠,10mol乙二胺四乙酸,1g叠氮钠,30g的甲醇加水至1000mL制成;
2)配制检测抗体点膜液:将纯化冻干的抗手足口病病原单克隆抗体CE-24用点膜稀释液稀释至2mg/mL,抗手足口病病原单克隆抗体CE-24纯度大于90%,比活性大于10-5效价/mg蛋白;
3)配制对照抗体点膜液:将比活性大于10-7/mg的山羊抗小鼠多抗用点膜稀释液稀释至0.8mg/mL;
4)制备检测线和对照线:先将反应膜贴到背衬的相应位置,再用点膜机将检测抗体点膜液及对照抗体点膜液划到反应膜上的相应位置,检测线和对照线的喷制均按每厘米检测线用2μL点膜液喷制,室温晾干,即成。
所述的反应膜4的材质是硝酸纤维素膜,型号为:MILLIPORE,M135,制备时将反应膜裁切成宽度为25mm的条;
所述的吸水垫6的材质是加厚吸水纸,在一般的胶体金耗材公司即可买到,将加厚吸水纸裁切成宽度为26mm的条,然后将其粘贴到背衬相应位置上即可。
所述的背衬7尺寸为77mm×4mm。
所述的胶体金垫2尺寸为7mm×4mm。
所述的反应膜4尺寸为25mm×4mm。
所述的检测线3和对照线5尺寸为2-3mm×4mm。
所述的吸水垫6尺寸为26mm×4mm。
所述的样品垫1尺寸为22mm×4mm。
所述的试纸壳8上有样本孔9和检测结果区10。
所述的样品垫1一端扣压住胶体金垫21mm,胶体金垫2一端扣压住反应膜41mm,吸水垫6一端扣压住反应膜41mm。
本发明使用时,由于样品垫上含有处理样品成分的化学试剂,当含有手足口病病原的样品液滴到其上时,它会溶解样品垫中的化学试剂,对样品中的手足口病病原进行裂解、调整反应体系的离子强度和pH值等,并对非特异杂质进行封闭,使其更符合抗原抗体反应条件,有利于样品中的病毒抗原与金垫上的抗体结合。金垫上含有胶体金标记的抗手足口病病原特异性单克隆抗体及其相关化学试剂,显示酒红色。当这些胶体金标记的抗手足口病病原特异性单克隆抗体在俘获到手足口病病原抗原后,随着液体侧向流,手足口病病原抗原又与相应的检测线处的另一特异性抗手足口病病原单克隆抗体结合而大量聚集,肉眼就可见红色或粉红色条带。反应膜上划有检测线和对照线,是免疫显色反应线的形成处。检测线处固定有特异的抗手足口病病原单克隆抗体,可以和随液体侧向流扩散过来的手足口病病原抗原与胶体金标记的手足口病病原单克隆抗体复合物结合,对手足口病病原抗原形成双抗体夹心,通过胶体金显色,指示出检测阳性带。对照线处固定有羊抗鼠抗体,可以和未与检测带结合的胶体金标记的单克隆抗体结合(鼠源性单克隆抗体),以确定反应体系是正常的。吸收垫的作用是在反应完全后对反应体系多余液体进行吸收、存储。
背衬的作用是支撑整个试纸条,是一种常见的普通胶体金耗材,在金标耗材试剂公司都可以买到,背衬尺寸为77mm×300mm。首先将反应膜贴于背衬相应位置,按反应膜的制备方法完成反应膜的制备后,将吸水垫参压到反应膜靠近背衬末端的一侧,注意要参压反应膜1mm;胶体金垫参压到反应膜的另一侧,同样要参压反应膜1mm;样品垫参压到胶体金垫的另一侧,同样要参压金垫1mm;样品垫区、胶体金垫区、反应膜区和吸水垫区皆用强力胶固定于背衬上。当整个背衬按要求都贴好后,用切条机沿背衬横截面方向将试纸切成4mm的窄条,这样一个有检测功能的试纸条就制备出来了。
本发明手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒检测方法:
1.样本收集收集患儿新鲜粪便或者咽拭子样本,用咽拭子/棉签挑取少许,置于预加有0.3ml标本提取液的离心管中,漩涡振荡混匀,置于4℃冰箱备用(样品最多保存8h)。
2.检验方法
测试前请将所有试剂恢复至室温,测试应在室温下进行。
1)样本处理
a在离心管内垂直加入300ul样本提取液。
b将采样后的咽拭子插入样本提取管的溶液内,紧靠离心管内壁旋转约10次,使标本尽可能溶解在提取溶液中。
c沿离心管内壁挤压咽拭子的棉签头,使液体尽可能留在管内,取出并弃去咽拭子。
d用漩涡混合器混匀30秒,待用。
2)检测程序
a沿铝箔袋撕口处打开,将测试卡(即本发明试纸)取出平放。
b向测试卡的样本孔中加入100ul处理后的标本提取物。
c15~20分钟内观察显示的结果,在20分钟后显示的结果无效。
3.检验结果的判读(如图3所示)
阳性:两条红色/粉色反应线,即在检测区(T)及质控区(C)各出现一条红色/粉色/棕色反应线。
阴性:一条红色/粉色反应线,即仅在质控区(C)出现一条红色/粉色反应线。
无效:质控区(C)无红色反应线出现或检测区(T)出现其他颜色的条带,检测无效,建议此时用新试卡重新检测。
注:条带显色深浅与提取样本中所含的被测物质含量有关,不论颜色强度多少,都应按照条带是否显色判断结果。本发明内含质控过程,当C区出现红色条带,表明操作正确有效,否则测试无效。
表1PCR/ELISA/本发明胶体金检测结果对照
检测方法 | 手足口病病原 | 与PCR检测符合率 | 对照标本 | 与PCR检测符合率 |
PCR检测结果 | 98 | 100 | 95 | 100 |
ELISA检测结果 | 97 | 99 | 91 | 96 |
胶体金检测结果 | 98 | 100 | 95 | 100 |
综上,本发明试剂盒特异性好、灵敏度高,能够快速、准确检测出引起手足口病的肠道病毒,操作简单,对病人标本无创取材、操作简便,快速,可在十分钟内观察结果,检测结果与PCR和ELISA试剂水平基本一致,无需仪器设备,检测成本低,检测过程无污染产生、对手足口病病原检测准确性高,作为手足口病感染的初筛快检试剂,适用于门诊/急诊病人的检测,和对流行病现场进行快速、大规模批量检测,能较好的满足基层防控一线需求,可对手足口病快速诊断和防控起到非常重要的作用,具有良好的经济和社会效益。
Claims (9)
1.一种手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,首先将反应膜(4)粘贴到背衬(7)中心上,反应膜(4)上喷涂检测线(3)和对照线(5),再将吸水垫(6)压到反应膜(4)靠近背衬末端的一侧,胶体金垫(2)压到反应膜(4)的另一侧,样品垫(1)压到胶体金垫(2)的另一侧,样品垫、胶体金垫、反应膜和吸水垫皆用强力胶固定于背衬上,用切条机沿背衬横截面方向切成4mm宽的条,将试纸条装在试纸壳(8)内,试纸壳(8)上开有样本孔(9)和检测结果区(10);
所述的样品垫(1)是由样品处理液和玻纤膜制成,方法是,由20g牛血清白蛋白、5g曲拉通-100和0.01mol、pH为7.4的磷酸缓冲液加水至1000ml制成样品处理液,把玻纤膜裁切成22mm宽的条,然后在每0.8cm长的玻纤膜上喷涂100μL样品处理液,37℃干燥过夜,成样品垫(1);
所述的胶体金垫(2)是由玻纤膜上喷涂金标抗体液制成,方法是,将玻纤膜裁切成7mm宽的条,每1.7cm长的玻纤膜上喷涂100μL金标抗体液,冷冻真空干燥或加入干燥剂晾干,再密闭在密闭容器中静置12小时,即成胶体金垫(2);
金标抗体液的制备,方法是:
1)胶体金稀释液的配制,胶体金稀释液是由10g牛血清白蛋白、25g蔗糖、0.5g吐温-20、1g叠氮钠和0.01mol、pH为7.4的磷酸缓冲液加水至1000mL制成;
2)胶体金颗粒溶液的配制:取质量浓度为0.01%氯金酸水溶液50ml,微波加热至煮沸,加入质量浓度为1%柠檬酸三钠水溶液600μL,加热至出现酒红色,再加入50ml、4℃预冷的电导率为18.25的纯净水,即成40nm胶体金颗粒溶液,胶体金颗粒溶液吸收峰波长为532-534nm;Abs大于0.400;
3)胶体金标记抗体的配制:取胶体金颗粒溶液10ml,磁力搅拌下,加入体积浓度为30%的双氧水水溶液32μL;室温磁力搅拌混合10min,再加入0.2M的碳酸钾水溶液300μL,室温磁力搅拌10min,加入0.2mg纯化冻干的抗手足口病病原单克隆抗体CE-6,抗手足口病病原单克隆抗体CE-6冻干前缓冲液为0.01M,pH7.4的磷酸缓冲液;室温磁力搅拌60min,加入0.1g牛血清白蛋白,室温磁力搅拌混匀10min后,再加入0.01g聚乙二醇6000,室温磁力搅拌30min,得金标抗体,将金标抗体移入离心管,在4℃,用HimacCR21G离心机浓缩,8000rpm离心10min,弃去上清,得酒红色沉淀,即为胶体金标记抗体;
4)金标抗体液的配制:胶体金标记抗体用胶体金稀释液溶解以置换溶液体系,然后用胶体金稀释液稀释金标抗体,稀释后的金标抗体最高吸收峰波长532-534nm,吸光度大于0.400Abs;
所述的检测线(3)和对照线(5)分别是由检测抗体点膜液、对照抗体点膜液喷涂在反应膜(4)上制成,方法是:
1)配制点膜稀释液:由0.01mol、pH为7.4的磷酸缓冲液,0.15mol氯化钠,10mol乙二胺四乙酸,1g叠氮钠,30g的甲醇加水至1000mL制成;
2)配制检测抗体点膜液:将纯化冻干的抗手足口病病原单克隆抗体CE-24用点膜稀释液稀释至2mg/mL,抗手足口病病原单克隆抗体CE-24纯度大于90%,比活性大于10-5效价/mg蛋白;
3)配制对照抗体点膜液:将比活性大于10-7/mg的山羊抗小鼠多抗用点膜稀释液稀释至0.8mg/mL;
4)制备检测线和对照线:先将反应膜贴到背衬的相应位置,再用点膜机将检测抗体点膜液及对照抗体点膜液划到反应膜上的相应位置,检测线和对照线的喷制均按每厘米检测线用2μL点膜液喷制,室温晾干,即成。
2.根据权利要求1所述的手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,所述的反应膜(4)的材质是硝酸纤维素膜,型号为:MILLIPORE,M135,制备时将反应膜裁切成宽度为25mm的条;所述的吸水垫(6)的材质是加厚吸水纸,将加厚吸水纸裁切成宽度为26mm的条,然后将其粘贴到背衬相应位置上即可。
3.根据权利要求1所述的手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,所述的背衬(7)尺寸为77mm×4mm。
4.根据权利要求1所述的手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,所述的胶体金垫(2)尺寸为7mm×4mm。
5.根据权利要求1所述的手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,所述的反应膜(4)尺寸为25mm×4mm。
6.根据权利要求1所述的手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,所述的检测线(3)和对照线(5)尺寸为2-3mm×4mm。
7.根据权利要求1所述的手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,所述的吸水垫(6)尺寸为26mm×4mm。
8.根据权利要求1所述的手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,所述的样品垫(1)尺寸为22mm×4mm。
9.根据权利要求1所述的手足口病病原胶体金诊断检测试纸盒的制备方法,其特征在于,所述的样品垫(1)一端扣压住胶体金垫(2)1mm,胶体金垫(2)一端扣压住反应膜(4)1mm,吸水垫(6)一端扣压住反应膜(4)1mm。
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Cited By (3)
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---|---|---|---|---|
CN106645714A (zh) * | 2016-11-07 | 2017-05-10 | 广州瑞辉生物科技股份有限公司 | EV71病毒IgA抗体检测试纸条及其应用 |
CN107389940A (zh) * | 2017-08-23 | 2017-11-24 | 潍坊市康华生物技术有限公司 | 一种阴道炎多联检测试剂盒及其制备方法 |
CN109142725A (zh) * | 2018-08-29 | 2019-01-04 | 陕西省人民医院 | 一种甲型通用及h7n9亚型流感病毒胶体金联合检测试纸的制备方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101650366A (zh) * | 2008-08-11 | 2010-02-17 | 万志静 | 一种检测肠病毒的快速检测试纸及其制造方法 |
CN102243237A (zh) * | 2010-05-14 | 2011-11-16 | 北京贝尔生物工程有限公司 | 肠道病毒71型抗原检测试纸条(胶体金法) |
CN102262156A (zh) * | 2010-06-04 | 2011-11-30 | 北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司 | 一种柯萨奇病毒A16型(CA16)IgM抗体检测试纸条 |
CN102944677A (zh) * | 2012-11-26 | 2013-02-27 | 深圳市伯劳特生物制品有限公司 | 一种手足口病分型检测试剂盒及其制备方法 |
CN103869067A (zh) * | 2014-04-01 | 2014-06-18 | 开封市疾病预防控制中心 | 一种甲型流感病毒胶体金诊断检测试纸及其制备方法 |
-
2016
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Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101650366A (zh) * | 2008-08-11 | 2010-02-17 | 万志静 | 一种检测肠病毒的快速检测试纸及其制造方法 |
CN102243237A (zh) * | 2010-05-14 | 2011-11-16 | 北京贝尔生物工程有限公司 | 肠道病毒71型抗原检测试纸条(胶体金法) |
CN102262156A (zh) * | 2010-06-04 | 2011-11-30 | 北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司 | 一种柯萨奇病毒A16型(CA16)IgM抗体检测试纸条 |
CN102944677A (zh) * | 2012-11-26 | 2013-02-27 | 深圳市伯劳特生物制品有限公司 | 一种手足口病分型检测试剂盒及其制备方法 |
CN103869067A (zh) * | 2014-04-01 | 2014-06-18 | 开封市疾病预防控制中心 | 一种甲型流感病毒胶体金诊断检测试纸及其制备方法 |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106645714A (zh) * | 2016-11-07 | 2017-05-10 | 广州瑞辉生物科技股份有限公司 | EV71病毒IgA抗体检测试纸条及其应用 |
CN106645714B (zh) * | 2016-11-07 | 2018-11-02 | 广州瑞辉生物科技股份有限公司 | EV71病毒IgA抗体检测试纸条及其应用 |
CN107389940A (zh) * | 2017-08-23 | 2017-11-24 | 潍坊市康华生物技术有限公司 | 一种阴道炎多联检测试剂盒及其制备方法 |
CN109142725A (zh) * | 2018-08-29 | 2019-01-04 | 陕西省人民医院 | 一种甲型通用及h7n9亚型流感病毒胶体金联合检测试纸的制备方法 |
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