CN105770877A

CN105770877A - 乌司他丁在制备治疗膀胱癌药物中的用途

Info

Publication number: CN105770877A
Application number: CN201610374776.9A
Authority: CN
Inventors: 宋建东; 叶晓春; 孙明晖; 侯维静; 赵菁
Original assignee: GUANGDONG TIANPU BIOCHEMICAL MEDICINE CO Ltd
Current assignee: GUANGDONG TIANPU BIOCHEMICAL MEDICINE CO Ltd; Guangdong Techpool Bio Pharma Co Ltd
Priority date: 2016-05-30
Filing date: 2016-05-30
Publication date: 2016-07-20

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体公开了乌司他丁在制备治疗膀胱癌药物中的用途。经动物试验证实，乌司他丁对人膀胱癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用，且其毒副作用低，可以作为治疗膀胱癌的药物使用。

Description

乌司他丁在制备治疗膀胱癌药物中的用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体公开了乌司他丁在制备治疗膀胱癌药物中的用途。

背景技术

膀胱癌是指发生在膀胱黏膜上的恶性肿瘤。是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，也是世界十大常见肿瘤之一。占我国泌尿生殖系肿瘤发病率的第一位，而在西方其发病率仅次于前列腺癌，居第2位。膀胱癌可发生于任何年龄，甚至于儿童，其发病率随年龄增长而增加，高发年龄50～70岁。男性膀胱癌发病率为女性的3～4倍。膀胱癌中70～80％为浅表性膀胱癌，严重威胁着人们的健康和生活质量。

膀胱癌的病因复杂，既有内在的遗传因素，又有外在的环境因素。较为明确的两大致病危险因素是吸烟和职业接触芳香胺类化学物质。膀胱尿路上皮癌分为非肌层浸润性尿路上皮癌和肌层浸润性尿路上皮癌。非肌层浸润性尿路上皮癌患者多采用经尿道膀胱肿瘤电切术，但是约70％的患者经尿道电切术后复发，术后膀胱内灌注卡介苗或化疗药治疗可使复发率降为25％～40％，常用的灌注化疗药物有丝裂霉素、阿霉素、噻替派、羟基喜树碱等。肌层浸润性尿路上皮癌和膀胱鳞癌、腺癌患者多采用全膀胱切除术治疗，有些患者可以采用膀胱部分切除术治疗。肌层浸润性尿路上皮癌患者也可先进行新辅助化疗+手术治疗的方法。转移性膀胱癌以化疗为主，常用的化疗方案有M-VAP(甲氨蝶呤+长春花碱+阿霉素+顺铂)和GC(吉西他滨+顺铂)及MVP(甲氨蝶呤+长春花碱+顺铂)方案，化疗的有效率为40％～65％。因此，寻找新的药物治疗和治疗方法是临床急需解决的问题。

乌司他丁是从健康男性尿中分离纯化而得，分子量约为67000Da的酸性糖蛋白，是一种广谱的蛋白酶抑制制剂，能够抑制多种蛋白、糖和脂类水解酶的活性。其主要在肝脏中合成，由肾脏代谢随尿液排出，且其分解形成的低分子量成分也具有很强的抑制水解酶的作用。1985年由日本首先开发上市，目前常用于治疗急性胰腺炎，慢性复发性胰腺炎，亦可用于急性循环衰竭的抢救辅助用药。也有研究表明乌司他丁对肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、宫颈癌等癌症细胞有较好的抑制作用，但经检索，尚无发现有乌司他丁在治疗膀胱癌的相关研究。

发明内容

本发明的目的在于提供乌司他丁在制备治疗膀胱癌药物中的用途。

进一步的，所述药物为冻干粉针剂或注射液。

再进一步的，所述冻干粉针剂或注射液配以一种或多种药可接受的载体或添加剂。

所述冻干粉针剂制药可接受载体或添加剂选自甘露醇、乳糖、水解明胶、氯化钠或葡萄糖中的一种或其任意混合物；所述注射液可接受载体或添加剂选自注射用水、甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的一种或其任意混合物。

经动物试验证实，乌司他丁对人膀胱癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用，且乌司他丁对人膀胱癌裸鼠移植瘤的治疗呈剂量依赖性，同时，实验期间小鼠未出现活动减少和精神萎靡等表现，小鼠进食无明显减少，无明显消瘦，无裸鼠死亡，移植瘤处皮肤无破溃或糜烂，且体重均有所增加。这些结果表明乌司他丁对膀胱癌有较好的治疗作用。

因此，本发明的优势在于：本发明提供了乌司他丁在医药领域的一种新应用，即乌司他丁可以作为治疗膀胱癌的药物使用，开拓了乌司他丁的应用方向，同时也给广大膀胱癌患者提供一种新药，其疗效显著，毒副作用低。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。

实施例1、制备乌司他丁冻干粉针

取过滤灭菌乌司他丁水溶液20000万单位，加20克甘露醇溶解，调节PH到中性，加注射用水至2000毫升，加氯化钠调节等渗，无菌过滤，分装于1000个西林瓶中，无菌条件下冷冻干燥，即得。

实施例2、制备乌司他丁注射液

取过滤灭菌的乌司他丁水溶液10000万单位，加20克甘露醇溶解，调节PH到中性，加注射用水至2000毫升，加氯化钠调节等渗，无菌过滤，分装1000个西林瓶中，即得。

实施例3、乌司他丁对人膀胱癌裸鼠移植瘤的作用研究

1、材料

动物：BALB/c裸鼠40只，鼠龄4～5周，体重16～20g，由广东医学院动物实验中心提供；细胞株：BIU-87膀胱癌细胞株，购自上海细胞生物研究所细胞库；顺铂，购自南京制药厂有限公司，国药准字H20104016。

2、方法

(1)细胞培养及动物模型建立：BIU-87细胞为人膀胱上皮肿瘤细胞株，用含有10％胎牛血清、2.0mmol/LL-glutamine、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素的RPMI-1640培养液，在37℃、5％CO₂的条件下进行培养，每隔3d用0.125％的胰蛋白酶和0.02％EDTA消化传代后继续培养。待传代足够数量后取对数生长期的细胞配制成细胞悬液。收集酶-细胞溶液，1000r/min离心6min，用培养液洗1遍，重悬细胞台盼蓝染色并用牛鲍计数板计数活细胞数达90％后，将单细胞悬液调整细胞浓度至1×10⁸·mL-¹准备接种至裸鼠身上。用6号针头注射器抽取0.2mL瘤细胞悬液(含活细胞数1×10⁷)均接种于40只裸鼠右侧前肢后部皮下。整个操作过程均要求无菌操作。

(2)小鼠模型的分组及用药：接种后4d成瘤达到实验标准后把40只荷瘤裸鼠随机分为5个实验组，每组8只。

对照组：10ml/(kg·d)生理盐水，尾静脉注射给药；

乌司他丁低剂量组：1000单位/(kg·d)乌司他丁注射液，尾静脉注射给药；

乌司他丁中剂量组：5000单位/(kg·d)乌司他丁注射液，尾静脉注射给药；

乌司他丁高剂量组：10000单位/(kg·d)乌司他丁注射液，尾静脉注射给药；

顺铂组：3mg/(kg·d)顺铂注射液，尾静脉注射给药。

各组每天定时给药1次，连用2周。治疗后15天颈椎脱臼法处死全部小鼠，剥离小鼠皮下的瘤体并称瘤重，按公式计算肿瘤的平均抑瘤率(inhibitoryrate，IR)，IR＝(1-治疗组平均瘤质量/对照组平均瘤质量)×100％。

统计学分析：各组数据均为计量资料，使用统计分析软件SPSS17.0，采用单因素方差分析和t检验进行统计分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

3、结果

见下表1。

(1)不良反应观察和各治疗组对荷瘤裸鼠体重的影响：各乌司他丁用药组小鼠未出现活动减少和精神萎靡等表现，实验期间小鼠进食无明显减少，无明显消瘦，无裸鼠死亡，移植瘤处皮肤无破溃或糜烂。各实验组裸鼠体重均缓慢增长，其中各用药组裸鼠体重增长比对照组略慢，但差异无统计学意义。

(2)各治疗组对荷瘤裸鼠肿瘤重量和抑瘤率的影响：用药结束后第15天处死裸鼠，剖开皮肤可见肿瘤呈现类圆形或结节状，解剖其他脏器未见肿瘤转移病灶。各用药组与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.01)，乌司他丁对人膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制效果接近于现有药物，且乌司他丁对人膀胱癌裸鼠移植瘤的治疗呈剂量依赖性。

表1各组裸鼠体重、移植瘤重量和抑瘤率的比较

组别	n	移植瘤重量(g)	抑瘤率(％)	裸鼠体重(g)
					对照组	8	1.14±0.14	-	26.10±4.22
乌司他丁高剂量组	8	0.45±0.08**	60.53％**	23.25±3.54
					乌司他丁中剂量组	8	0.54±0.10**	52.63％**	23.94±3.48
乌司他丁低剂量组	8	0.68±0.11**	40.35％**	24.86±4.16
					顺铂组	8	0.60±0.09**	47.37％**	22.98±3.96

**与对照组相比，P＜0.01。

虽然本发明己以较佳实施例公开如上，但它们并不是用来限定本发明，本发明的保护范围应当以本申请的权利要求保护范围所界定的内容为准。任何熟习本技术领域者，在不脱离本发明的精神和范围内，所作的各种变化或等同替换，都应当属于本发明的保护范围。

Claims

1.乌司他丁在制备治疗膀胱癌药物中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物为冻干粉针剂或注射液。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述冻干粉针剂或注射液配以一种或多种药可接受的载体或添加剂。

4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述冻干粉针剂制药可接受载体或添加剂选自甘露醇、乳糖、水解明胶、氯化钠或葡萄糖中的一种或其任意混合物；所述注射液可接受载体或添加剂选自注射用水、甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的一种或其任意混合物。