CN105748953A - 一种具有治疗失眠、改善老年痴呆、提高学习记忆、抗抑郁、抗焦虑作用的中药组合物 - Google Patents

一种具有治疗失眠、改善老年痴呆、提高学习记忆、抗抑郁、抗焦虑作用的中药组合物 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种治疗失眠、改善老年痴呆、提高学习记忆能力、抗抑郁、抗焦虑、安神益智作用的中药组合物，其原料药组成为：天麻、白芍、刺五加和酸枣仁，该中药组合物可制成临床或药学上可接受的剂型。动物实验显示，本发明中药组合物可以改善睡眠功能、改善老年痴呆、提高学习记忆能力，具有抗抑郁作用和抗焦虑作用。

Description

一种具有治疗失眠、改善老年痴呆、提高学习记忆、抗抑郁、抗焦虑作用的中药组合物
技术领域
本发明属于中药组合物制剂领域，具体涉及一种用于治疗失眠、改善老年痴呆、提高学习记忆能力、抗抑郁、抗焦虑、安神益智作用的中药组合物。
背景技术
中医认为饮食不节、起居无常、情志不遂、劳逸无度、外感六淫邪毒(如环境污染)等均可引起脏腑气血阴阳失调，最终导致睡眠状况不佳的发生。因此，针对心气不足、肝阳偏亢、心神不宁的人群，采用平抑肝阳、益气宁神的保健方法，可从根本上改善睡眠。
老年痴呆包括血管性痴呆和阿尔茨海默病、混合型痴呆和其他(外伤、帕金森)痴呆。老年痴呆是一种严重危害老年人群身心健康的慢性神经退行性疾病，其首要症状是智力、记忆力、感官定向能力、语言思维能力不可逆的进行性退化，通常伴有性格改变。有资料表明，5-15％的老年人有不同程度的阿尔茨海默病症状。老年痴呆特征性病理变化为大脑皮层萎缩，并伴有β-淀粉样蛋白沉积，神经原纤维缠结，大量记忆性神经元数目减少，以及老年斑的形成。老年痴呆属于中医学“痴呆”、“呆病”、“善忘”等范畴。老年性痴呆病位在脑，与肾、心、肝、脾等的功能密切相关，且其关键在于肾与肝的作用。肾为先天之本，藏精而生髓脑为髓之海，肾精充足，气血上荣则耳聪目明，思维敏捷；肾精匮乏，髓海失充，神失所养，则可能发展为痴呆。肝主疏泄、藏血、魂之舍也，肝失疏泄，情志不遂，肝气郁结，则易化火伤阴、气滞血凝，脑络梗阻，清窍失灵而引发痴呆。脾气不足，失于健运，水谷精微不能上行，神明失养，亦可导致老年痴呆。因此，补益脾肾心之气，滋养肝脏，能振奋脏腑机能，有效缓解老年痴呆。
记忆是人脑对经验过事物的识记、保持、再现或再认，它是进行思维、想象等高级心理活动的基础，联结着人的心理活动，是人们学习、工作和生活的基本机能。如发现自己近期记忆力大不如从前，常记不住事，丢三落四、忘记刚刚做过的事情等，这就是我们常说的记忆力减退，在医学上，称为“健忘”。中医认为，“心藏神、肝藏魂、肺藏魄、脾藏意、肾藏智”，人的思维活动和五脏均有非常密切的关系。此外，“脑为元神之府”，脑髓盈满，则耳目聪明，精力充沛；脑髓空虚，可出现记忆减退。健忘的一大因素是为心肾亏虚，心血肾精不足难以濡养，心血涸、肾水竭从而心肾不交，久而久之就会导致健忘。《诸病源候论》中论述：“心劳者，忽忽喜忘”。孙思邈认为人老体衰可导致肾阳虚衰，阴精不足，随着年龄的增长老年人的肾中阳气日渐亏少，肾阳不能上达于心，可导致健忘的产生。《圣济总录》言“健忘之病，本于心虚”。《普济方》云：“夫健忘之病，本于心虚，血气衰少，精神昏馈，故志动乱而多忘也。盖心者，君主之官，神明出焉，苟为休惕思虑所伤，或愁忧过损，惊惧失志，皆致是疾。故曰：愁忧思虑则伤心，心伤则善忘。”表明了各种情志因素伤及心脾气血，从而导致健忘。袭廷贤在《寿世保元》一书中，专列有关“健忘”一门，认为心虚是健忘产生的根本原因，同时可兼它脏的虚损，其所列方剂包括养心安神、心肾同治等方式。中医认为健忘可由实证或虚证引起，虚证与心脾肾三脏虚损密切相关，实证则与瘀阻痰凝、脉络不通关系密切。故中医可以采用活血化瘀通络、益气补肾宁心等方法治疗健忘，达到改善记忆的效果。
抑郁是全球死亡率最高的疾病之一。发病原因复杂，目前尚无有效的根治方法。抑郁症又称抑郁障碍，以显著而持久的心境低落为主要临床特征，是心境障碍的主要类型。抑郁症相当于中医学的郁证、癫疾、百合病、梅核气、奔豚、失志等范畴。中医学对抑郁症的病因病机认识角度较多，大部分医家认为情志刺激和体制禀赋是抑郁症的两大主要病因。抑郁症病因病机复杂，但总以情志不舒、气机郁滞为其主因，病变波及五脏六腑，但与肝、脾、肾、心等器官的功能密切相关。郁之所以起，首先“气郁”，继则“血郁”，然后出现神疲气弱，而“神郁”贯穿抑郁症全过程。抑郁证发病时情志不遂，肝郁抑脾，耗伤心气，营血渐耗，心失所养，神失所藏，即所谓忧郁伤神；久郁伤脾，饮食减少，生化无源则气血不足，心脾两虚；郁久化火易伤阴血，累及于肾，忧思伤志，肾藏志故忧思也伤肾。心主血脉，又主神明，肾主藏精，髓充于脑，心气亦通于脑。心、脾、肾既虚，则精血不足，精不化气，元神亏虚，而形见动作迟缓、心烦不安、兴趣索然或多疑多敏等。由此可见，舒解肝郁，补脾益肾可以有效的治疗抑郁症。
焦虑症是一种持续紧张、担心、恐惧或发作性惊恐为特征的情绪障碍，伴有植物性系统症状和运动不安等行为特征，包括广泛性焦虑和惊恐障碍。焦虑症是是临床常见病、多发病，随着社会和经济的发展，焦虑症的发病率有逐年上升的趋势。焦虑症属于中药情志病范畴，涵盖“郁证”、“惊恐”、“不寐”、“惊悸”、“怔忡”、“奔豚病”等范畴。《内经》有云“惊则心无所倚，神无所归，虑无所定，故气乱矣。”《诸病源候论》：“夫奔豚气者，肾之积气。起于惊恐、忧思所生。若惊恐……神志伤动，气积于肾，而气下上游，如豚之奔，故曰奔豚。”焦虑症的发病与肝、心、肾等器官关系密切。焦虑症基本病机多由肝失疏泄条达，气郁不散，化火生痰，痰火扰及心胆，气、痰、火蕴结日久，耗气伤阴，心胆两虚所致，虚实夹杂，病程缠绵不愈。由此可见，舒解肝郁，补脾益肾、滋阴降火可以有效的治疗焦虑症。
现有技术中，治疗失眠、老年痴呆、抑郁和焦虑症的药物很多，但其治疗效果不理想，副作用大。比如治疗失眠的西药，容易造成肝脏损害；治疗老年痴呆的西药，只能缓解早期病人的认知障碍，提供适度的症状改善作用，无法阻止病情的进展，某些药物甚至产生促进女性化的副作用；常用的抗抑郁药对血压的影响和对心脏的毒性较大；抗焦虑药剂量过高、疗程过长，都会引起药物依赖。而且，市场上也不存在同时能治疗以上几种疾病的药物，多种药物同时服用存在较多的配伍禁忌。从中医理论来讲，以上疾病存在共同的发病机制，所以使用中医疗法可以针对病因直接作用，同时治疗以上几种疾病。
在现有技术中，中国专利CN102657819B公开了一种用于治疗抑郁症的中药组合物，该组合物以15味中药作为原料药。诸如此类的中药组合物组分较多，质量不易控制，工艺过程不易产业化，适用范围单一。
发明内容
本发明的目的在于从平抑肝阳，益气宁神的中医学角度提供了一种新的同时改善睡眠，改善老年痴呆、提高学习记忆能力、抗抑郁、抗焦虑的中药组合物。
该中药组合物是由如下重量份的原料药组成的：
天麻1-10重量份、白芍2-12重量份、刺五加1-8重量份、酸枣仁1-10重量份。
优选的，所述组合物的原料药组成为：
天麻1.2-5重量份、白芍6-11重量份、刺五加1.1-4重量份、酸枣仁4.1-8重量份；
或者
天麻5.2-9.5重量份、白芍2.1-5重量份、刺五加4.1-8重量份、酸枣仁1.1-6重量份；
或者
天麻5.2-9.5重量份、白芍2.1-5重量份、刺五加4.1-8重量份、酸枣仁4.1-8重量份。
更优选的，所述组合物的原料药组成为：
天麻1重量份、白芍2重量份、刺五加3重量份、酸枣仁1重量份；
或者
天麻3重量份、白芍7重量份、刺五加9重量份、酸枣仁3重量份；
或者
天麻6重量份、白芍4重量份、刺五加4重量份、酸枣仁5重量份；
或者
天麻7.5重量份、白芍5重量份、刺五加6重量份、酸枣仁5重量份。
所述组合物按照常规工艺，可以制成临床或药学上可接受的片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、蜜炼膏剂、口服液体制剂、缓释制剂、速释制剂等。
本发明提供的中药组合物由天麻、白芍、刺五加、酸枣仁组成，配方中天麻平肝息风、平抑肝阳；白芍养血敛阴、柔肝解郁、补肝血、疏肝气；刺五加益气健脾，补肾安神，能补脾气、补肾气、益肺气、补心气，可以治失眠、治健忘、防衰老；酸枣仁养心益肝、安神生津，能养心阴、补肝气、治失眠。诸药共用，柔肝体、疏肝气、抑肝阳、养心阴、补肾气、健脾气，通过平抑肝阳、益气宁神、柔肝解郁，可以治失眠、防衰老、治健忘、解肝郁、抗抑郁、抗焦虑。
本发明具有下述优点：
1.本发明选用天然植物药为原料，采用各味中药的综合作用来改善睡眠，改善老年痴呆、提高学习记忆能力、抗抑郁、抗焦虑，无任何毒副作用，且不会产生依赖性。
2.本发明的中药组合物从平抑肝阳，益气宁神的中医学角度出发，同时具有改善睡眠，改善老年痴呆、提高学习记忆能力、抗抑郁、抗焦虑的作用，适用范围广泛。
3.通过药理实验和临床观察，对失眠、老年痴呆、抑郁和焦虑症都有较好的效果，且愈后不易复发，疗程短。
具体实施方式
实施例1
天麻1kg、白芍2kg、刺五加3kg、酸枣仁1kg。
取上述原料药加入常规辅料按常规工艺制成片剂。
实施例2
天麻3kg、白芍7kg、刺五加9kg、酸枣仁3kg。
取上述原料药加入常规辅料按常规工艺制成胶囊剂。
实施例3
天麻6kg、白芍4kg、刺五加4kg、酸枣仁5kg。
取上述原料药加入常规辅料按常规工艺制成颗粒剂。
实施例4
天麻7.5kg、白芍3kg、刺五加6kg、酸枣仁6kg。
取上述原料药加入常规辅料按常规工艺制成散剂。
实施例5
天麻1.2kg、白芍2.4kg、刺五加3.5kg、酸枣仁1.4kg。
取上述原料药加入常规辅料按常规工艺制成片剂。
实施例6
天麻3kg、白芍8kg、刺五加10kg、酸枣仁4kg。
取上述原料药加入常规辅料按常规工艺制成胶囊剂。
实施例7
天麻1kg、白芍3kg、刺五加4kg、酸枣仁5kg。
取上述原料药加入常规辅料按常规工艺制成颗粒剂。
实施例8
天麻3.5kg、白芍3kg、刺五加6kg、酸枣仁6kg。
取上述原料药加入常规辅料按常规工艺制成散剂。
实验例1
在查阅大量文献，并结合中医理论基础，筛选出一组对改善睡眠有较好作用的配方，其配方组成为：天麻、五味子、白芍、刺五加、夜交藤、酸枣仁。为精简配方组成，设计一组7因素2水平的正交试验，优选具有改善睡眠作用的配方组成。正交因素设计见表1。
表1组方考察因素水平表
1材料和方法
1.1样品：五味子、天麻、白芍、酸枣仁、夜交藤、刺五加
1.2实验动物：18～22g昆明种健康SPF级雄性小鼠，随机分为9组(空白组、8组正交试验组)，每组12只。进行延长戊巴比妥钠睡眠时间实验，以睡眠时间为指标，考察配方中对改善睡眠有较好作用的药味。
1.3试验分组：空白组；8个正交试验组分别为正交组1：天麻+酸枣仁+白芍+刺五加+夜交藤+五味子，正交组2、天麻+酸枣仁+白芍，正交组3、天麻+刺五加+夜交藤，正交组4、天麻+五味子，正交组5、酸枣仁+刺五加+五味子，正交组6、酸枣仁+夜交藤，正交组7、白芍+刺五加，正交组8、白芍+夜交藤+五味子。
1.4受试物配制：各组受试药物的生药量总量共12g，各受试药物药味均按生药量1:1的比例配比，药物用蒸馏水(已消毒)配制。
1.5给药：每日一次灌胃给药，小鼠灌胃体积为0.2mL/10g鼠重，空白组用蒸馏水(已消毒)代替受试物，每日灌胃体积与各受试物组相同。
2实验方法
延长戊巴比妥钠睡眠时间实验：连续给药30d，末次给药15min后，给各组动物按40mg/kg.BW剂量腹腔注射戊巴比妥钠，注射量为0.1ml/10g.BW，以小鼠翻正反射消失为睡眠指标，观察受试物能否延长戊巴比妥钠睡眠时间。
3数据处理
用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析，但需求按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值﹤F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正太或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
4结果
由实验统计结果发现，与空白组相比，各给药组均能明显延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间(P＜0.001、P＜0.01或P＜0.05)，结果见表2。
表2各受试药物组对戊巴比妥钠延长小鼠睡眠时间的影响
﹡：与空白组比较，P＜0.05；**：与空白组比较，P＜0.01
5各单味药的睡眠时间正交分析
表3组方筛选L8(27)正交试验表
表4方差分析(睡眠时间)
按睡眠时间对各单味药进行方差分析，天麻A、酸枣仁B、白芍C和刺五加D在配方中对睡眠时间有显著性差异，夜交藤E和五味子F无显著性差异；故精简配方为天麻、酸枣仁、白芍和刺五加。
实验例2本发明中药组合物改善睡眠功能试验
1材料和方法
1.1样品：上述实施例1中制得的组合物片剂，0.7g/片。
1.2实验动物：18～22g昆明种健康SPF级雄性小鼠，随机分为4组空白组和3个剂量组，每组12只。分别进行直接睡眠实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验和延长戊巴比妥钠睡眠时间实验。
1.3剂量：推荐剂量为成人(按60kg体重计)每日4.2g，相当于0.07g/日/kg体重。实验设人体推荐量的5倍、10倍、30倍，即每日0.35g/kg.BW、0.70g/kg.BW和2.10g/kg.BW为低、中、高剂量组。受试物用水(已消毒)配制，每日一次经口给予，连续灌胃30天后测各项指标。小鼠灌胃体积为0.1mL/10g鼠重。同时设一溶剂对照组(0g/kg.BW)，用蒸馏水(已消毒)代替受试物，每日灌胃体积与各受试物组相同。
1.4实验方法：
1.4.1直接睡眠实验
连续给药30d，末次给药后，以动物的翻正反射消失超过1min判为进入睡眠，翻正反射恢复即为动物觉醒。
1.4.2戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验
连续给药30d，末次给药15min后，各组动物按35mg/10g.BW剂量注射戊巴比妥钠，注射量为0.1ml/10g.BW，以小鼠翻正反射消失达1min以上作为入睡判断标准，记录各组入睡动物数和睡眠发生率。
1.4.3巴比妥钠睡眠潜伏期实验
连续给药30d，在末次给药15min后，给各组动物按290mg/kg.BW剂量腹腔注射巴比妥钠，注射剂量为0.1ml/10g.BW，以小鼠翻正反射消失为指标，观察受试物能否缩短巴比妥钠睡眠潜伏期。
1.4.4延长戊巴比妥钠睡眠时间实验
连续给药30d，末次给药15min后，给各组动物按40mg/kg.BW剂量腹腔注射戊巴比妥钠，注射量为0.1ml/10g.BW，以小鼠翻正反射消失为睡眠指标，观察受试物能否延长戊巴比妥钠睡眠时间。
1.5数据处理
用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析，但需求按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值﹤F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正太或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
2结果
2.1对直接睡眠的影响
通过实验观察，各组小鼠在给予受试药物60min内，均未发现有直接睡眠现象。即组合物片剂组和对照组均无直接催眠作用，可以进行1.2——1.4项的实验研究。
2.2对戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验的影响
由结果可知，组合物片剂中、高剂量组的睡眠发生率均显著高于空白对照组，并且各剂量组间有明显差异，随受试物剂量的增加，睡眠发生率逐渐增加。结果见表5。
表5对戊巴比妥钠阈下剂量小鼠睡眠发生率的影响
﹡：与0g/kg.BW组比较，P＜0.05；**：与0g/kg.BW组比较，P＜0.01
2.3对巴比妥钠睡眠潜伏期的影响
由结果可知，与空白组相比，组合物片剂各剂量组对小鼠睡眠潜伏期均有缩短，其中中剂量组的睡眠潜伏期缩短明显，差异显著(P<0.05)；高剂量组睡眠潜伏期缩短效果显著，差异非常明显(P<0.01)。结果见表6。
表6对巴比妥钠睡眠潜伏期的影响
﹡：与0g/kg.BW组比较，P＜0.05；**：与0g/kg.BW组比较，P＜0.01
2.4对戊巴比妥钠诱导睡眠时间的影响
实验结果发现，与空白组相比，高、中、低剂量组对小鼠睡眠时间均与明显提高，差异显著(P＜0.01，P＜0.05，P＜0.05)。且随着给药剂量的增加，睡眠时间越长。表明其对延长注射戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间有促进作用，结果见表7。
表7对戊巴比妥钠延长小鼠睡眠时间的影响
﹡：与0g/kg.BW组比较，P＜0.05；**：与0g/kg.BW组比较，P＜0.01
3结论
经口给予小鼠不同剂量的组合物片剂30天后，0.70g/kg.BW组能增加戊巴比妥钠阈下剂量小鼠睡眠发生率(P＜0.05)、缩短小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期(P＜0.05)、延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间(P＜0.05)；在2.10g/kg.BW组能增加戊巴比妥钠阈下剂量小鼠睡眠发生率(P＜0.01)、缩短小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期(P＜0.01)、延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间(P＜0.01)。
通过本实验结果，说明该中药组合物具有改善睡眠功能。
实验例3本发明中药组合物改善老年痴呆实验
1材料和方法
1.1样品：上述实施例3中制得的组合物颗粒剂，日摄入量为4.2g/60kg·BW。用蒸馏水配制各剂量浓度。
1.2实验动物：ICR种小鼠，体重18～22g。
1.3剂量选择：按人体日摄入量4.2g/60kg·BW，本试验设计了空白对照组模型组和低、中、高三个剂量组(0.35g/kg·BW、0.70g/kg·BW、1.40g/kg·BW)。即相当于人体推荐量的5倍、10倍、20倍。受试物用蒸馏水配制。每日一次，经口给予，连续灌胃30天后测定各项指标。小鼠灌胃体积为0.1mL/10g鼠重。空白对照组和模型组(0g/kg·BW)，用水(已消毒)代替受试物，每日灌胃体积与各受试物组相同。
1.4试验方法
1.4.1D-半乳糖致老年小鼠学习记忆功能的影响
除空白组注射等量生理盐水外，其余四组每天颈背部皮下注射1％D-半乳糖125mg/kg.BW。若造模过程中，因背部皮肤反复穿刺导致药液外漏严重，可酌情更换注射部位。造模2周后，各组灌胃给予相应药物，同时造模继续，治疗持续30天。
治疗25天后，进行Morris水迷宫定向航行实验，共5天，前1-2天为训练时间，后3天为学习记忆成绩。每天训练分上、下午两段进行，每段训练2次，训练前先将小鼠置于站台上适应10s，训练开始时随机选择一个入水点，将小鼠面向池壁放入水中，观察并记录小鼠寻找并爬上平台所需时间(潜伏期)。4次训练分别从不同的入水点入水，如果小鼠在120s内未找到平台，将其引至平台稳定10s，潜伏期记录为120s，每次训练间隔60s，记录每只小鼠潜伏期的平均值。最后一天把站台去掉，记录2min内小鼠穿越站台位点的次数，记为穿越次数。
1.4.2对D-半乳糖致痴呆小鼠脑内SOD、MDA，AChE(胆碱酯酶)含量的影响
实验1.4.1水迷宫实验结束后，立即脱颈椎处死动物，在冰台上快速取出部分小脑组织并置于灭菌后的冰生理盐水中漂洗，除去血迹，滤纸擦干，精确称重后，将小脑组织迅速浸入9倍生理盐水中，用匀浆器在冰裕中充分研磨，制成10％脑组织匀浆，以3000rpm离心10min，取上清液冻存，待测SOD，MDA和AChE。指标测定方案参照试剂盒说明书。
1.5数据处理
用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析，但需求按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值﹤F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正太或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
2结果
2.1对D-半乳糖致痴呆小鼠学习记忆能力的影响
由结果可知，与空白组相比，模型组的平均潜伏期时间较长，差异显著(P<0.01),且每天的进步较少，学习和记忆能力降低明显；与模型组相比，各剂量组的平均潜伏期均有缩短，其中中剂量组平均潜伏期缩短明显，差异显著(P<0.05)，高剂量组平均潜伏期缩短较明显，差异非常显著(P<0.01)；与模型组相比，各剂量组每天的潜伏期时间都在明显缩短。说明该中药组合物对痴呆小鼠的学习功能有较好的改善作用。
由小鼠穿越平台位置的次数可以看出，模型组的穿越次数明显少于空白组；给予该中药组合物治疗后，中剂量组和高剂量组的穿越平台次数增加明显，差异显著(P<0.05)。说明该中药组合物能改善痴呆小鼠的记忆功能。
表8对痴呆小鼠学习记忆功能影响
##：与空白组相比P<0.01；
*与模型组相比P<0.05；**与模型组相比P<0.01；
2.2对D-半乳糖致痴呆小鼠脑内SOD、MDA，AChE含量的影响
由结果可知，与空白组相比，模型组小鼠脑内SOD含量降低明显，差异显著(P＜0.01)；MDA含量升高明显，差异显著(P＜0.01)；AChE活性降低明显，差异显著(P＜0.01)；与模型组相比，各剂量组的SOD含量和AChE活性均有不同程度的回升，MDA含量有降低趋势；其中，中剂量组SOD含量和AChE活性升高明显，差异显著(P＜0.05)，MDA含量降低明显，差异显著(P＜0.05)；高剂量组脑内SOD含量和AChE活性升高明显，差异非常显著(P＜0.01)，MDA含量降低明显，差异非常显著(P<0.01)，结果见表9。
表9对痴呆小鼠脑内SOD、MDA和AChE含量的影响
##与空白组相比P<0.01
*与模型组相比P<0.05，**与模型组想比P<0.01
3.结论
本次结果显示，该中药组合物0.70g/kg.BW组能显著提升痴呆小鼠学习记忆功能，增加痴呆小鼠脑内SOD含量，降低脑内MDA含量，增强AChE活性(P＜0.05)；1.4g/kg.BW组能显著提升痴呆小鼠学习记忆功能，增加痴呆小鼠脑内SOD含量，降低脑内MDA含量，增强AChE活性(P＜0.01)。
通过本实验说明该中药组合物可通过调节脑内SOD的活性，降低MDA的含量，减轻小鼠的脑损伤，同时增强AChE的活性，增加脑内AChE的含量，从而改善痴呆小鼠的记忆功能，具有改善老年痴呆功能。
实验例4本发明中药组合物抗抑郁作用试验
1材料和方法
1.1样品：样品为上述实施例7中制得的组合物颗粒剂。人体推荐服用量为每日4.2g，相当于0.07g/kg·BW。
1.2实验动物：250-270g雄性Wistar大鼠。
1.3剂量选择：实验动物随机分为空白对照组、模型组、高、中、低剂量5组，每组10只。高、中、低剂量分别为1.40、0.70和0.35g/kg·BW，分别相当于人口服剂量的20、10、5倍，对照组同时以蒸馏水灌胃，灌胃量为1ml/100g。
1.4试验方法：
1.4.1分组和给药正常大鼠50只，24h禁水不禁食后，给予1％蔗糖水，测定1h内的消耗量。根据蔗糖水消耗量随机分成5个组，每组10只，即正常对照组、模型组、该中药组合物片剂低、中、高剂量组(0.35g/kg、0.70g/kg、1.40g/kg)。造模同时给药，每日一次，连续给药21天，各组均按1.0ml/100g体重给药，每周称一次体重。
1.4.2造模正常对照组5只/笼饲养，正常饮食饮水，不给任何刺激。其他4个组，1只/笼饲养，并接受21天的不可预知的应激刺激，包括：冰水游泳，热烘，夹尾，潮湿饲养，昼夜颠倒，禁食，禁水等。每组每天随机给予一种刺激。每种应激的具体操作方法：
(1)冰水游泳：将动物放入盛有4℃冷水(冰水混合)的桶中，水深15cm，大鼠的足尖刚能触及桶底，5min后将动物取出。(2)热烘：烘箱温度调至45℃恒定，将动物放入烘箱中，5min后将动物取出。(3)夹尾：将大鼠放入固定笼中，露出尾巴，用止血钳夹住距尾根部1cm处(用力不要过大，使大鼠发出哀嚎即可)，持续1min。(4)潮湿饲养：早上8点，往鼠笼中加入200ml水，至次日早8点换掉。(5)昼夜颠倒：早上8点，将大鼠放入黑暗箱中，晚上8点打开灯照明，至次日早8点。(6)禁食：24h断料。(7)禁水：24h断水。
1.4.3体重及行为学观察
大鼠体重测试各组大鼠每周称一次体重，记录，分析各组大鼠体重变化情况。
蔗糖水消耗量每次禁水后，测定每组动物1h内的1％蔗糖水消耗量。
敞箱实验(open-field)敞箱高40cm、长和宽均为80cm，无盖，周壁和箱底均为黑色，底面划分为面积相等的25块方格。以动物穿越方格数作为水平活动得分，以直立次数为垂直活动得分(两前肢离地1cm以上)。每只动物进行1次测定，每次3min。
跳台实验将动物放入大鼠跳台反应箱内适应环境3min，然后立即通36V交流电，动物受到电击，正常反应是跳上平台以躲避伤害性刺激。多数动物可能会再次或多次跳至铜栅上，受到电击后又迅速跳回平台，如此训练5min，大鼠受到电击的次数为错误次数。24h后重做测验，将大鼠置于平台上，通电并记时，记录5min内的错误次数。
1.4.4对CRH、ACTH、CORT含量的影响
放射免疫法(RIA)测定下丘脑促肾上腺皮质激素释放素(CRH)，血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)，血浆皮质醇(CORT)含量行为学实验结束后，所有动物断头取血后，迅速在冰上取下丘脑，称重后置组织冷冻管中用液氮快速冷冻后，放入-70℃冰箱保存至测定。使用促肾上腺皮质激素释放素放免试剂盒，促肾上腺皮质激素放免试剂盒，以及血浆皮质酮放免试剂盒，测试下丘脑CRH，血浆ACTH，血浆CORT含量。
1.4.5对单胺类神经递质的影响
经过21天的慢性应激刺激，对造模后大鼠进行行为学指标测定后，动物断头处死，迅速在冰上剥离大脑，取海马，称重后置组织冷冻管中用液氮快速冷冻后，放入-70℃冰箱保存至测定。根据脑组织的重量，加入裂解液(0.01％半胱氨酸，0.2mol/LHClO4，0.5mmol/LNa2EDTA)，裂解液中加入内标，每10mg组织加入100μl裂解液，超声破碎，匀浆液15000rpm，30min，4℃，上清液再相同转数离心30min，0.22μm滤器过滤，取20μl进行检测。
2结果
2.1对抑郁大鼠体重的影响
由结果可知，造模过程中大鼠体重增长缓慢，与模型组大鼠相比，空白组大鼠在造模第8天、造模第15天的体重增长明显，差异显著(P＜0.05)，造模第21天体重增免非常明显，差异非常显著(P＜0.01)。各组的体重较模型组略有升高趋势，差异不显著(P＞0.05)，见表10。
表10对抑郁大鼠体重的影响(N＝10，)
注：*与模型组相比较，P<0.05，**与模型组相比较，P<0.01
2.2对抑郁大鼠蔗糖水消耗量的影响
由结果可知，模型组大鼠蔗糖水消耗量明显降低。与模型组相比，空白组、该中药组合物中剂量组、高剂量组的蔗糖水消耗量增加明显，差异显著(P<0.05)，结果见表11。
表11对抑郁证大鼠蔗糖水消耗的影响(N＝10，)
注：*与模型组相比较，P<0.05，**与模型组相比较，P<0.01
2.3对抑郁大鼠行为学的影响
由结果可知，造模后，模型组大鼠对未知事物的探知欲降低，敞箱试验水平运动和垂直运动的次数明显降低。与模型组大鼠相比，高剂量组大鼠水平运动和垂直运动次数回升明显，差异显著(P＜0.05)。
造模后，模型组大鼠学习记忆能力降低明显，跳台实验的错误次数和反应时间升高明显。给药治疗后，与模型组相比，该中药组合物中剂量组反应时间降低明显，差异显著(P＜0.05)，该中药组合物高剂量组错误次数降低明显(P＜0.05)，反应时间降低非常明显，差异显著(P＜0.01)，结果见表12。
表12对抑郁大鼠行为学的影响(N＝10,)
注：*与模型组相比较，P<0.05，**与模型组相比，P<0.01
2.3对抑郁大鼠下丘脑CRH、血浆ACTH、CORT含量的影响
由结果可知，造模后，大鼠下丘脑内CRH含量会有增高。与模型组相比，该中药组合物高剂量组、该中药组合物中剂量组下丘脑内CRH的含量降低明显，差异显著(P＜0.05)。
造模后，模型组大鼠血浆内ACTH和CORT含量升高明显，与模型组相比，该中药组合物高剂量组血浆ACTH和CORT降低明显，差异显著(P＜0.05)，该中药组合物中剂量组和该中药组合物低剂量组血浆ACTH和CORT含量略有降低趋势，但是差异不明显，结果见表13。
表13对抑郁大鼠下丘脑CRH、血浆ACTH、CORT含量的影响(N＝10,)
注：*与模型组相比较，P<0.05
2.4对单胺类物质DA和5-HT含量的影响
由结果可知，造模后，模型组海马内单胺类神经递质DA含量急剧降低。与模型组相比，0.7g/kgDA含量升高明显，差异显著(P＜0.05)；1.4g/kgDA含量升高非常明显，差异显著(P＜0.01)。
造模后，造模后，模型组海马内5-HT含量急剧降低。与模型组相比，1.4g/kg5-HT含量升高明显，差异显著(P＜0.05)，结果见表14。
表14对抑郁大鼠DA和5-HT含量的影响(N＝10,)
注：*与模型组相比较，P<0.05
3结果
该中药组合物能改善抑郁模型大鼠的行为学结果，改善大鼠的记忆功能；降低下丘脑内CRH含量，降低血浆内CORT和ACTH含量，增加海马内单胺类神经递质DA和5-HT的含量，具有抗抑郁的作用。
本实验结果说明该中药组合物具有抗抑郁作用。
实验例5本发明中药组合物抗焦虑作用试验
1材料和方法
1.1样品：上述实施例8中制得的组合物散剂，日摄入量为4.2g/60kg·BW，折合0.07g/kg·BW。
1.2实验动物：雄性ICR小鼠48只。随机分为4组。
1.3剂量选择：按人体日摄入量4.2g/60kg·BW，本试验设计了对照组和低、中、高三个剂量组，分别为每日0.35g/kg·BW、0.70g/kg·BW、1.40g/kg·BW。即相当于人体推荐量的5倍、10倍、20倍。受试物用纯净水配制。每日一次，经口给予，连续灌胃14天后测定各项指标。小鼠灌胃体积为0.1mL/10g鼠重。同时设一空白对照组(0g/kg·BW)，用纯净水代替受试物，每日灌胃体积与各受试物组相同。
1.4试验方法
1.4.1小鼠高架十字迷宫行为的影响
连续给药治疗10天后，于给药后1h开始行为学试验，所有试验均在8：00-14：00进行。测试前将小鼠单独放入动物盒中，任其自由活动5min，测试时，将小鼠置于高架十字迷宫的中央区，使其头部正对开臂，分别记录5min内小鼠进入开臂次数和停留时间、进入闭臂次数和停留时间。以进入开闭此时与进入各臂总次数的百分比(OE)、在开臂内的活动时间与进入各臂的总活动时间的百分比(OT)作为抗焦虑作用的考察指标。测试过程中，小鼠一足退出某一臂则表示该次活动的完成，每次测试完成后清洁迷宫，再进行下一次测试。
1.4.2小鼠明暗箱行为的影响
连续给药治疗10天，于末次给药后1h开始测试试验。测试时将小鼠置于明暗箱的明箱中央，头朝暗箱，释放后记录下5min内小鼠穿箱次数及在明箱活动的时间。
1.4.3对小鼠自主活动的影响
连续给药治疗10天后，末次给药后1h，进行测试试验。测试时将小鼠放入自主活动仪中适应10min，记录小鼠5min内的自主活动次数。
1.4.4对尼可刹米致小鼠惊厥的影响
连续给药治疗10天，末次给药1h后，腹腔注射给药尼可刹米350mg/kg，小鼠置于笼中，分别记录各组小鼠的惊厥潜伏期及2h内小鼠死亡数。
1.5数据处理
用SPSS软件进行数据处理。采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值＜F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，带满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。
2试验结果
2.1对小鼠高架十字迷宫行为的影响
由结果可知，与空白对照组相比，0.7g/kg、1.4g/kg能明显增加小鼠高架十字迷宫OT和OE值，差异显著(P<0.05)，并且呈量效关系，提示其具有抗焦虑作用，结果见表15。
表15对小鼠高架十字迷宫行为的影响
*与空白对照组相比P<0.05
2.2对小鼠明暗箱行为的影响
由结果可知，与空白对照组相比，0.7g/kg、1.4g/kg能明显增加小鼠进入明箱的次数及在明箱的活动时间，差异显著(P<0.05)，并且呈量效关系，提示具有抗焦虑作用，结果见表16。
表16对小鼠明暗箱行为的影响
*：与0空白组比P<0.05
2.3对小鼠自主活动的影响
由结果可知，与空白对照组相比，1.4g/kg能明显降低小鼠的自主活动次数，差异显著(P＜0.05)，且呈明显的量效关系。表明具有抗焦虑作用，结果见表17。
表17对小鼠自主活动的影响
*与空白对照组相比P<0.05
2.4对尼可刹米致小鼠惊厥的影响
由结果可知，与空白对照组相比，1.4g/kg能明显降低尼可刹米致小鼠惊厥的潜伏期，差异显著(P＜0.05)，同时能降低因注射尼可刹米导致小鼠的死亡率，且呈明显的量效关系。表明具有抗焦虑作用，结果见表18。
表18对尼可刹米致小鼠惊厥的影响
*与空白对照组相比P<0.05
3.结论
由上述试验结果可知，0.7g/kg、1.4g/kg能显著增加小鼠高架十字迷宫OT和OE值、增加小鼠进入明箱的次数及在明箱的活动时间，差异显著(P＜0.05)；1.4g/kg能明显降低小鼠自主活动次数，延长因注射尼可刹米致小鼠惊厥的潜伏期并降低死亡率，差异显著(P＜0.05)。
通过本实验说明该中药组合物具有抗焦虑的作用。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (10)

1.一种治疗失眠、改善老年痴呆、提高学习记忆能力、抗抑郁、抗焦虑、安神益智作用的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为：
天麻1-10重量份、白芍2-12重量份、刺五加1-8重量份、酸枣仁1-10重量份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为：
天麻1.2-5重量份、白芍6-11重量份、刺五加1.1-4重量份、酸枣仁4.1-8重量份。
3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为：
天麻5.2-9.5重量份、白芍2.1-5重量份、刺五加4.1-8重量份、酸枣仁1.1-6重量份。
4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为：
天麻5.2-9.5重量份、白芍2.1-5重量份、刺五加4.1-8重量份、酸枣仁4.1-8重量份。
5.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为：
天麻1重量份、白芍2重量份、刺五加3重量份、酸枣仁1重量份。
6.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为：
天麻3重量份、白芍7重量份、刺五加9重量份、酸枣仁3重量份。
7.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为：
天麻6重量份、白芍4重量份、刺五加4重量份、酸枣仁5重量份。
8.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物的原料药组成为：
天麻7.5重量份、白芍5重量份、刺五加6重量份、酸枣仁5重量份。
9.根据权利要求1-8任一所述的中药组合物，其特征在于，所述组合物按照常规工艺，制成临床或药学上可接受的片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、蜜炼膏剂、口服液体制剂、缓释制剂、速释制剂等。
10.权利要求1-8任一所述的中药组合物用于制备治疗失眠、改善老年痴呆、提高学习记忆能力、抗抑郁、抗焦虑、安神益智作用的药物中的应用。
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