CN105717097A - 基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒 - Google Patents

基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种基于牛血清白蛋白?纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒。利用牛血清白蛋白?纳米铂/铋与硫离子作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白?纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’?四甲基联苯胺盐酸盐显色，从而表现出溶液颜色和紫外吸收光谱特征的变化。吸光度测定的线性范围为0.08~4 μmol/L，检测限为50 nmol/L。水样可通过简单的预处理后，采用该方法和试剂盒能很好地测定其中的硫离子含量。

Description

基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒
技术领域
本发明涉及以牛血清白蛋白-纳米铂/铋为模拟过氧化物酶的硫离子快速含量测定方法及试剂盒，属于分析化学和纳米技术领域。
背景技术
随着工业科技的飞速发展，环境问题变得越发严重。硫化物是造纸、石化、皮革等行业常见的化工原料和化学污染物，对水生态系统和人类健康均产生危害。在酸性条件下，硫化物转变为硫化氢，可危害细胞色素、氧化酶，造成细胞组织缺氧，甚至危及生命。同时硫化氢还腐蚀金属设备和管道，并可被微生物氧化成硫酸，加剧腐蚀性。硫化物易溶于水，因此，硫化物还是水体污染的重要指标之一，水体又与人们的日常生活紧密相关，所以建立一种快速、简易、实用的方法对于水体中的硫离子进行检测非常必要。目前，硫化物的检测方法主要包括电化学、色谱等。然而，这些方法需要复杂的样品预处理过程，处理过程相对费时，费用相对较大。
近年来基于铂纳米材料的生物传感器得到了广泛的关注，这些材料的模拟过氧化物酶催化活性高，催化效果好，抗干扰能力强，因此能够应用于各种生物检测领域，更重要的是这些材料大多可提供肉眼识别信号的比色法检测，具有简单，快速，适用于实时和现场检测等优点。
本发明利用牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，提供了一种快速、简便、灵敏的硫离子检测新方法及试剂盒检测试剂盒。
发明内容
本发明的一个目的是利用牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，提供了一种快速、简便、灵敏的硫离子检测新方法。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
本发明所述的基于 牛血清白蛋白 - 纳米铂 / 铋 的硫离子测定方法，其特征是在硫离子溶液中加入牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后室温静置，在混合溶液中加入过氧化氢， 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，含有乙二胺四乙酸的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温度温浴，根据652 nm处的吸光度得到硫离子浓度；所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋是由如下方法制备的：在5 mL 浓度为50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL浓度为16 mmol/L氯铂酸溶液和0.5 mL浓度为1.5 mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80 ℃下反应2 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末，在0.6 mL浓度为23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mmol/L的硝酸铋溶液和1.8 mL 浓度为10 mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80 ℃下反应2.5 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。
所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性降低，催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色能力下降，催化反应产物在652 nm处的吸光度减小。
所述的基于 牛血清白蛋白 - 纳米铂 / 铋 的硫离子测定方法，其特征是在0.4 mL硫离子溶液中加入0.01 mL浓度为4.76 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL浓度为2 mol/L的过氧化氢，0.2 mL浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39 mL含有乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，所述缓冲溶液中乙二胺四乙酸的浓度为4 mmol/L，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，随着硫离子浓度的增大，吸光度逐渐减小。
所述的基于 牛血清白蛋白 - 纳米铂 / 铋 的硫离子测定方法，其特征是检测线性范围为0.08~4 μmol/L，检测限为50 nmol/L。
本发明采用以下具体技术方案：
（一）牛血清白蛋白-纳米铂/铋的制备：
在5 mL浓度为50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL浓度为16 mmol/L氯铂酸溶液和0.5 mL浓度为1.5 mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80 ℃下反应2 h。反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末。在0.6 mL浓度为23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mmol/L的硝酸铋溶液和1.8 mL 浓度为10 mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80 ℃下反应2.5 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液。将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。制备过程中使用的所有玻璃器皿均经过王水浸泡，并用双蒸水彻底清洗，晾干。
（二）硫离子的测定
在0.4 mL硫离子标准溶液中加入0.01 mL技术方案（一）制备的浓度为4.76 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL浓度为2 mol/L的过氧化氢，0.2 mL浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39 mL含有4 mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度。
本发明的另一个目的在于提供一种基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒。试剂盒中包括提供牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液（a液），过氧化氢溶液（b液），3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液（c液），硫化钠溶液（标准液）。
为了实现上述检测方法的目的，本发明采用以下技术方案：
本发明所述的一种基于 牛血清白蛋白 - 纳米铂 / 铋 的硫离子检测试剂盒，其特征是试剂盒中有牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液、过氧化氢溶液、3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液和硫化钠溶液，所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液作为a液，过氧化氢溶液作为b液，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液作为c液，硫化钠溶液作为标准液。
上述a液中含有浓度为0.02 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液是用含有4 mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲液配制而成的；b液中含有浓度为2 mol/L的过氧化氢水溶液；c液中含有浓度为16 mmol/L 的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐水溶液；标准液中含有浓度为0.8，1，3，5，10，20，40 μmol/L的硫化钠溶液。
所述牛血清白蛋白-纳米铂/铋是由如下方法制备而成的：在5 mL 浓度为50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL浓度为16 mmol/L氯铂酸溶液和0.5 mL浓度为1.5 mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80 ℃下反应2 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末，在0.6 mL浓度为23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mmol/L的硝酸铋溶液和1.8 mL 浓度为10 mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80 ℃下反应2.5 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。
本发明所述的基于 牛血清白蛋白 - 纳米铂 / 铋 的硫离子检测试剂盒用于硫离子检测。
本发明所述的基于 牛血清白蛋白 - 纳米铂 / 铋 的硫离子检测试剂盒的应用，其特征是在0.4 mL标准液中加入2.4 mL a液，混合后室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL b液和0.2 mL c液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，绘制硫离子标准曲线或计算回归方程；在0.4 mL样品溶液中加入2.4 mL a液，混合后室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL b液和0.2 mL c液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，根据标准曲线进行定量。
具体地说，本发明的硫离子检测试剂盒：a液包括上述技术方案（一）制备后用含有4 mmol/L乙二胺四乙酸，浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲液配制的浓度为0.02 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，b液包括浓度为2 mol/L的过氧化氢水溶液，c液包括浓度为16 mmol/L 的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐水溶液，标准液包括浓度为0.8，1，3，5，10，20，40 μmol/L的硫化钠溶液。
（四）水样品中硫离子检测方法：在0.4 mL技术方案（三）的标准液中加入2.4 mL技术方案（三）的a液，混合后室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL技术方案（三）的b液和0.2 mL技术方案（三）的c液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，绘制硫离子标准曲线或计算回归方程。在0.4 mL样品溶液中加入2.4 mL技术方案（三）的a液，混合后室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL技术方案（三）的b液和0.2 mL技术方案（三）的c液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，根据标准曲线进行定量。
本发明的优点：
（1）本发明利用牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，从而表现出溶液颜色和紫外吸收光谱特征的变化，可以直接用于硫离子的含量检测。
（2）本方法所使用的牛血清白蛋白-纳米铂/铋直接由牛血清白蛋白-纳米铂和硝酸铋一步合成，制备过程简单快速。
（3）本发明对样品的处理要求低，水样中阳离子的影响只需通过加入乙二胺四乙酸掩蔽后即可测定。
（4）本发明的检测灵敏度高，线性范围为0.08~4 μmol/L，检测限为50 nmol/L。
（5）本发明提供的硫离子检测试剂盒，检测过程简便，稳定性好，具有操作简便、检测时间短、灵敏度高、特异性强等优点，易于推广使用。
附图说明
图1为牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色的外观图
图2为牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色的紫外吸收光谱图。
图3为与硫离子作用后的牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色的外观图
图4与硫离子作用后的牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色的紫外吸收光谱图。
图5为硫离子的标准曲线图。
图6为不同的阴离子对牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色体系的影响图。
具体实施方式
实施例1：
在5 mL浓度为50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL浓度为16 mmol/L氯铂酸溶液和0.5 mL浓度为1.5 mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80 ℃下反应2 h。反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末。在0.6 mL浓度为23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mmol/L的硝酸铋溶液和1.8 mL浓度为10 mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80 ℃下反应2.5 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液。将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。制备过程中使用的所有玻璃器皿均经过王水浸泡，并用双蒸水彻底清洗，晾干。
实施例2：
在2.79 μL浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲液中依次加入1 mL浓度为2 mol/L的过氧化氢，0.2 mL浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，0.01 mL浓度为4.76 mg/mL的铋-牛血清白蛋白-铂纳米铂水溶液，混合后37 ℃温浴10分钟，目视观察溶液颜色，如图1所示，溶液为深蓝色。用紫外可见分光光度计扫描，如图2所示，在652 nm处有一吸收峰。
实施例3：
0.4 mL浓度为40 μmol/L的硫离子标准溶液中加入0.01 mL浓度为4.76 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL浓度为2 mol/L的过氧化氢，0.2 mL浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39 mL含有4 mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温浴10分钟，目视观察溶液颜色，如图3所示，溶液颜色显著浅于实施例2，用紫外可见分光光度计扫描，如图4所示，溶液吸光度显著小于实施例2，说明硫离子对牛血清白蛋白-纳米铂/铋的催化活性具有明显的抑制作用。
实施例4：
0.4 mL不同浓度的硫离子标准溶液中加入0.01 mL浓度为4.76 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL浓度为2 mol/L的过氧化氢，0.2 mL浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39 mL含有4 mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度（A），以A0-A对硫离子浓度作标准曲线，其中A0为硫离子浓度为0时的吸光度，如图5所示，检测线性范围为0.08~4 μmol/L，检测限为50 nmol/L。
实施例5：
取0.4 mL含有不同浓度的硫离子标准液并经过0.22 μm滤膜过滤的水样，加入0.01 mL浓度为4.76 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL浓度为2 mol/L的过氧化氢，0.2 mL浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39 mL含有4 mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度（A），结合实施例5计算水样中硫离子的含量，样品的测定回收率为93%~103%。
实施例6：
取0.4 mL不同浓度的阴离子标准溶液，加入0.01 mL浓度为4.76 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL浓度为2 mol/L的过氧化氢，0.2 mL浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39 mL含有4 mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度（A），取其吸光度与实施例4中所测得吸光度A0的比值为纵坐标，如图6所示，该方法具有良好的选择性，只有硫离子对牛血清白蛋白-纳米铂/铋的催化活性有明显的抑制作用。
实施例7：
一种基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋模拟过氧化物酶活性的硫离子检测试剂盒。试剂盒中包括提供牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液（a液），过氧化氢溶液（b液），3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液（c液），硫化钠溶液（标准液）。a液包括实施例1制备后用含有4 mmol/L乙二胺四乙酸，浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲液配制的浓度为0.02 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，b液包括浓度为2 mol/L的过氧化氢水溶液，c液包括浓度为16 mmol/L 的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐水溶液，标准液包括浓度为0.8，1，3，5，10，20，40 μmol/L的硫化钠溶液。
实施例8：
在0.4 mL实施例7的标准液中加入2.4 mL实施例7的a液，混合后室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL实施例7的b液和0.2 mL实施例7的c液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，绘制硫离子标准曲线或计算回归方程。在0.4 mL样品溶液中加入2.4 mL实施例7的a液，混合后室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL实施例7的b液和0.2 mL实施例7的c液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，根据标准曲线进行定量。测定的线性范围为0.08~4 μmol/L，检测限为50 nmol/L。
以上所述仅为本发明的典型实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改，等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子测定方法，其特征是在硫离子溶液中加入牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后室温静置，在混合溶液中加入过氧化氢， 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，含有乙二胺四乙酸的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温度温浴，根据652 nm处的吸光度得到硫离子浓度；所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋是由如下方法制备的：在5 mL 浓度为50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL浓度为16 mmol/L氯铂酸溶液和0.5 mL浓度为1.5 mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80 ℃下反应2 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末，在0.6 mL浓度为23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mmol/L的硝酸铋溶液和1.8 mL 浓度为10 mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80 ℃下反应2.5 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。
2.根据权利要求1所述的基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子测定方法，其特征是所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性降低，催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色能力下降，催化反应产物在652 nm处的吸光度减小。
3.根据权利要求1或2所述的基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子测定方法，其特征是在0.4 mL硫离子溶液中加入0.01 mL浓度为4.76 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL浓度为2 mol/L的过氧化氢，0.2 mL浓度为16 mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39 mL含有乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，所述缓冲溶液中乙二胺四乙酸的浓度为4 mmol/L，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，随着硫离子浓度的增大，吸光度逐渐减小。
4.根据权利要求1或2或3所述的基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子测定方法，其特征是检测线性范围为0.08~4 μmol/L，检测限为50 nmol/L。
5.一种基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子检测试剂盒，其特征是试剂盒中有牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液、过氧化氢溶液、3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液和硫化钠溶液，所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液作为a液，过氧化氢溶液作为b液，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液作为c液，硫化钠溶液作为标准液。
6.根据权利要求5所述的基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子检测试剂盒，其特征是a液中含有浓度为0.02 mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液是用含有4 mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100 mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲液配制而成的；b液中含有浓度为2 mol/L的过氧化氢水溶液；c液中含有浓度为16 mmol/L 的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐水溶液；标准液中含有浓度为0.8，1，3，5，10，20，40 μmol/L的硫化钠溶液。
7.根据权利要求5或6所述的基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子检测试剂盒，其特征是所述牛血清白蛋白-纳米铂/铋是由如下方法制备而成的：在5 mL 浓度为50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL浓度为16 mmol/L氯铂酸溶液和0.5 mL浓度为1.5 mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80 ℃下反应2 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末，在0.6 mL浓度为23.8 mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mmol/L的硝酸铋溶液和1.8 mL 浓度为10 mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80 ℃下反应2.5 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。
8.一种权利要求5-7任一所述的基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子检测试剂盒用于硫离子检测。
9.一种权利要求5-7任一所述的基于牛血清白蛋白 - 纳米铂/ 铋的硫离子检测试剂盒的应用，其特征是在0.4 mL标准液中加入2.4 mL a液，混合后室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL b液和0.2 mL c液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，绘制硫离子标准曲线或计算回归方程；在0.4 mL样品溶液中加入2.4 mL a液，混合后室温放置2分钟，在混合溶液中加入1 mL b液和0.2 mL c液，混合后37℃温浴10分钟，测定652 nm波长处的吸光度，根据标准曲线进行定量。
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