CN105708854B

CN105708854B - 一种抗癌注射液及其应用

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Publication number: CN105708854B
Application number: CN201610203379.5A
Authority: CN
Inventors: 李雪平
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2016-03-31
Filing date: 2016-03-31
Publication date: 2019-01-11
Anticipated expiration: 2036-03-31
Also published as: CN105708854A

Abstract

本发明公开了一种抗癌注射液及其应用，该抗癌注射液包括47.96份氯化钠、42.30份氯化镁和1000份水，将氯化钠和氯化镁溶解于水中，搅拌直至氯化钠、氯化镁完全溶解且混合均匀，制备的溶液即为所述的抗癌注射液。所述的抗癌注射液具有抑制癌细胞生长、增殖的作用，可作为抑制癌细胞生长、增殖药物使用。本发明所述的抗癌注射液，无需手术、化疗和放疗，仅仅注射本发明的抗癌注射液就可以达到抗癌的目的，对人的身体不构成任何毒副作用。不但具有抑制癌细胞生长、增殖和杀灭癌细胞的功效；还可以杀灭人体内异常的细胞，但是对于人类正常的、无病变的细胞不具有任何危害。

Description

一种抗癌注射液及其应用

技术领域

本发明涉及一种抗癌注射液及其应用，该抗癌注射液具有抑制癌细胞生长、增殖的作用，属于医药技术领域。

背景技术

目前，治疗癌症的方法主要有四种：其一是手术治疗，适用于早中期癌症，且没有发生局部和远处转移的癌症，该种治疗方法具有一定的风险，并且术后可能影响患者的生活自理能力。其二是放疗，主要针对实体肿瘤，如鼻咽癌等；该种治疗方法的毒副作用非常明显，比如胸部放疗可能会出现放射性肺改变。其三是化疗，主要针对乳腺癌、淋巴瘤、白血病等；化学药品进入人体后分布到全身各处，不光对实体瘤具有杀灭作用，对微小不可见转移灶也同样具有很强的杀灭作用；化疗的毒副作用极其明显，比如血象降低、恶心、呕吐、肝功受损等。其四是中医治疗，中医治疗对人体的伤害比较小，但是中医的疗效比较缓慢，疗程非常长，无形中加大了患者的经济负担。此外，也有手术、放疗、化疗和中医治疗相结合的治疗方法。

虽然治疗癌症的手段多种多样，但是手术、化疗和放疗，对病患身体的伤害比较大，不但对正常细胞具有一定的损伤，并且很容易复发和转移，而中医治疗的疗程又比较漫长，因此继续一种疗程短、疗效快、无毒副作用、不复发的新型药品问世。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的不足，而提供一种抗癌注射液，无需手术、化疗和放疗，仅仅注射本发明抗癌注射液就可以达到抗癌的目的，疗程短、可彻底杀死癌细胞、无复发；对于正常的细胞不具有任何危害，对人的身体不构成任何毒副作用。

本发明的目的之二是提供上述抗癌注射液的应用。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种抗癌注射液，由以下重量份的原料制成：47.96份氯化钠(NaCl)、42.30份氯化镁(MgCl₂·6H₂O)和1000份水，将所述比例的氯化钠和氯化镁溶解于水中，搅拌直至氯化钠、氯化镁完全溶解且混合均匀，制备的溶液即为所述的抗癌注射液。

上述技术方案中，所述的氯化钠和氯化镁，均为化学领域常见的分析纯化学品，所述的水为蒸馏水或双蒸水。

上述技术方案中，所述的抗癌注射液，按照常规工艺方法装入常规的注射针管中制成针剂。

上述技术方案中，所述的针剂，规格为1ml、2ml、2.5ml、3ml、5ml和10ml。

本发明所述抗癌注射液的使用方法为，3天内注射2次(静脉注射、动脉注射或者肌肉注射均可以)，每次1-10ml(医生根据患者病情的严重酌情处理)。最后一次注射完毕后，21天后去医院复查癌细胞，癌细胞绝大部分被杀死。

本发明还提供一种上述抗癌注射液作为抑制癌细胞生长、增殖药物的应用，所述的癌细胞为皮肤癌细胞、乳腺癌细胞、黑色素瘤细胞、结肠癌细胞、肝癌细胞、淋巴癌细胞、食道癌细胞、胃癌细胞、甲状腺癌细胞以及其他人类癌症的癌细胞。该抗癌注射液具有抑制癌细胞生长、增殖的作用。

本发明所述的抗癌注射液，无需手术、化疗和放疗，仅仅注射本发明的抗癌注射液就可以达到抗癌的目的，对人的身体不构成任何毒副作用。本发明所述的抗癌注射液具有抑制癌细胞生长、增殖和杀灭癌细胞的功效，对于人类正常的、无病变的细胞不具有任何危害。本发明所述的抗癌注射液，具有疗程短、疗效快、无毒副作用、治疗后癌细胞不复发的优点。

具体实施方式

以下对本发明技术方案的具体实施方式详细描述，但本发明并不限于以下描述内容：

实施例1：

将47.96g氯化钠(NaCl)和42.30g氯化镁(MgCl₂·6H₂O)溶解于1L(1000g)蒸馏水中，搅拌直至氯化钠、氯化镁完全溶解且混合均匀后，制备的溶液即为所述的抗癌注射液。将制备的抗癌注射液分别装入1ml、2ml、2.5ml、3ml、5ml和10ml针管，即可制成不同规格的针剂。

申请人将本发明实施例1得到的抗癌注射液进行了体外抗癌活性检测，如下所示：

检测试验一：抗癌注射液对人肝癌细胞的抗肿瘤活性测试

检测单位：大连理工大学制药学院

一、试验材料：

1.1细胞株：人肝癌细胞HepG2(大连医科大学赠与，实验室常规传代冻存)

1.2试剂：

DMEM培养基、胎牛血清FBS、青霉素G、链霉素均购自Hyclone公司，胰蛋白酶、MTT、二甲基亚砜DMSO均购自Sigma公司，新生小牛血清购自GIBCO公司，色谱纯二甲基亚砜购自天津市光复精细化工研究所。

1.3主要仪器：TH4-200(OLYMPUS)、Cell二氧化碳培养箱(Thhermo)、H1MF9酶标仪(GENE)、BV-30/70超净工作台(TELSTAR)、96孔细胞培养板(JET)。

1.4细胞培养：HepG2细胞为20-50代，细胞的培养液为DMEM培养基中含有10％新生小牛血清、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。

二、试验方法

将HepG2细胞制成单细胞悬浮液，浓度为5×10⁴个/ml，100μl接种于96孔细胞培养板中，周边孔加入100μlPBS缓冲液，培养24h过夜后加样。实验组毎孔加入培养基100μl(含有不同浓度实施例1制备抗癌注射液，如表1)，对照组加入等体积的药物溶解介质，空白组为培养液不含有细胞。各组设3个复孔。加药后将培养板放入37℃、5％CO₂细胞培养箱中培养24h后加入20μl/孔MTT溶液(5mg/ml)，再将培养板放入37℃、5％CO₂细胞培养箱中培养4h。4h后取出培养板，吸走上清液，加入100μlDMSO，酶标仪在492nm波长下测定毎孔的光密度(OD值)，并用空白组调零，计算药物对HepG2细胞的体外增殖抑制率。

三、试验结果：

抑制率的公式如下

其中，对照组OD值为对照组OD值减去空白组OD值，实验组OD值为实验组OD值减去空白组OD值。以上每个实验重复3次，求出3次实验的平均值为最终结果，结果如表1所示：

表1：不同浓度的抗癌注射液对人肝癌细胞的抑制作用

由表1可知，本发明所述的抗癌注射液对人肝癌细胞的生长和增殖具有显著的抑制作用。

检测试验二：抗癌注射液对人结肠癌细胞的抗肿瘤活性测试

检测单位：沈阳药科大学细胞实验室

一、试验材料：

1.1细胞株：人结肠癌细胞HCT116(购买于American Type Culture Collection(ATCC,Rockville,MD,USA))，接种在含有10％胎牛血清、2％谷氨酰胺的RPMI-1640培养液中，在37℃、5％CO₂细胞培养箱中培养。

1.2药品及试剂：各样品用无菌微孔滤膜过滤后，用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度。

胎牛血清(北京元亨圣马生物技术研究所)、胰蛋白酶、谷氨酰胺、青霉素、链霉素、二甲基亚砜DMSO、四甲基偶氮唑MTT购于美国Sigma公司。

1.3仪器：二氧化碳培养箱(Sanyo,Japan)、酶联反应分析仪(Tecan,Austria)、96孔细胞培养板(Corning,USA)、倒置显微镜(Motic,China)

二、试验方法

选用对数生长期的贴壁肿瘤细胞，用胰蛋白酶消化后，用含10％胎牛血清的RPMI-1640培养液配成5×10⁴个/ml的细胞悬浮液，接种在96孔细胞培养板中，毎孔100μl，37℃、5％CO₂细胞培养箱中培养24h。实验组更换新的含不同浓度被测抗癌注射液(本发明实施例1产品)的培养液，对照组更换等体积溶剂的培养液，每组设3个平行孔，37℃、5％CO₂细胞培养箱中培养48h.弃去上清液，用PBS洗2次，毎孔加入100μl新鲜配制的含0.5mg/ml MTT的培养基，37℃继续培养4h。弃去上清，并加入150μlDMSO，用微型振荡器混匀10min后用酶标仪在492nm处测定光密度值。

三、试验结果：

抑制率的公式如下

如表2所示：

表2：不同浓度的抗癌注射液对人结肠癌细胞的抑制作用

由表2可知，本发明抗癌注射液对人结肠癌细胞的生长和增殖具有显著的抑制作用。

检测试验三：抗癌注射液对人永生化皮肤细胞、人乳腺癌细胞和人黑色素瘤细胞的抗肿瘤活性测试

检测单位：辽宁师范大学辽宁省生物技术与分子药物研发重点实验室

一、试验材料：

1.1细胞株：人永生化皮肤细胞Hacat、人乳腺癌细胞MCF-7、人黑色素瘤细胞A375，购买于凯基生物。细胞接种在含有10％胎牛血清的RPMI-1640培养液中，在37℃、5％CO₂细胞培养箱中培养。

1.2药品及试剂：各样品用无菌微孔滤膜过滤后，用0.1％TFA溶液稀释至所需浓度。

胎牛血清、胰蛋白酶均购自Gibco公司，MTT(Sigma公司)，PBS缓冲液，DMSO(沈阳联邦试剂公司)，其他分析纯试剂(深圳市佳德宇化工有限公司)。

1.3仪器：311CO₂培养箱(Thermo Scientific)，BCN-1360型超级洁净工作台(哈尔冰东联仪器有限公司)、YXO-LS-30SII蒸汽灭菌锅(上海博迅有限公司医疗设备厂)、FA2004电子分析天平(上海方瑞仪器有限公司)、Multiskan Ascent microplate reader酶标仪(Thermo Labsystems)、-80℃超低温冰箱(Thermo Scientific)。

二、试验方法

细胞培养待对数期，经胰蛋白酶消化后加入培养液制成细胞悬浮液，按5×10⁴个/ml接种在96孔细胞培养板中。过夜培养且细胞贴壁后加入本发明实施例1制备的抗癌注射液，浓度选择7个浓度梯度稀释，作用时间为1h。待作用时间后毎孔加入MTT，继续37℃培养4h，弃上清，加入DMSO后振荡3min，待沉淀完全溶解，于492nm下用酶标仪测定OD值。

三、试验结果：

抑制率的公式如下

从中求出样品的半数抑制浓度(IC₅₀)，如表3所示：

表3：不同浓度的抗癌注射液对癌细胞的抑制作用

由表3可知，本发明抗癌注射液对腺癌细胞和黑色素瘤细胞的生长和增殖具有显著抑制作用，对人体正常细胞的抑制作用比较弱，即选择合适的浓度，在发挥抑制癌细胞生长的同时对正常细胞无毒副作用。

应用例：

本发明实施例1制备的抗癌注射液，研发至今治疗200多名患者，治疗后均无复发，下面列举其中一些个案：

张某某，女，54岁，2005年患乳腺癌(早期)，3天内注射本发明实施例1制备而成的抗癌注射液2次，每次注射2.5ml，最后一次注射后间隔21天，去医院检查后发现，体内癌细胞全部被杀死，治疗至今癌症无复发。

蒋某，男，52岁，2009年患肝癌(晚期)，3天内注射本发明实施例1制备而成的抗癌注射液2次，每次注射10ml，最后一次注射后间隔21天，去医院检查后发现，体内癌细胞全部被杀死，治疗至今癌症无复发。

殷某，女，45岁，2011年患结肠癌(中期)，3天内注射本发明实施例1制备而成的抗癌注射液2次，每次注射3ml，最后一次注射后间隔21天，去医院检查后发现，体内癌细胞全部被杀死，治疗至今癌症无复发。

冯某，女，44岁，2012年患鼻咽癌(早期)，3天内注射本发明实施例1制备而成的抗癌注射液2次，每次注射5ml，最后一次注射后间隔21天，去医院检查后发现，体内癌细胞全部被杀死，治疗至今癌症无复发。

单某某，男，68岁，2011年患淋巴癌(中期)，3天内注射本发明实施例1制备而成的抗癌注射液2次，每次注射5ml，最后一次注射后间隔21天，去医院检查后发现，体内癌细胞全部被杀死，治疗至今癌症无复发。

上述实例只是为说明本发明的技术构思以及技术特点，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明的实质所做的等效变换或修饰，都应该涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种抗癌注射液，由以下重量份的原料制成：47.96份氯化钠、42.30份氯化镁和1000份水，将所述比例的氯化钠和氯化镁溶解于水中，搅拌直至氯化钠、氯化镁完全溶解且混合均匀，制备的溶液即为所述的抗癌注射液。

2.一种权利要求1所述抗癌注射液在制备抑制癌细胞生长、增殖药物中的应用。