CN105663039B - 负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备方法 - Google Patents

负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105663039B
CN105663039B CN201511013668.0A CN201511013668A CN105663039B CN 105663039 B CN105663039 B CN 105663039B CN 201511013668 A CN201511013668 A CN 201511013668A CN 105663039 B CN105663039 B CN 105663039B
Authority
CN
China
Prior art keywords
casein
nutrients
lotion
soybean polyoses
oil
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201511013668.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105663039A (zh
Inventor
姚萍
徐广锐
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fudan University
Original Assignee
Fudan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fudan University filed Critical Fudan University
Priority to CN201511013668.0A priority Critical patent/CN105663039B/zh
Publication of CN105663039A publication Critical patent/CN105663039A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105663039B publication Critical patent/CN105663039B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A23L2/66—Proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明属于药物和食品技术领域，具体涉及负载疏水药物和营养物的酪蛋白/大豆多糖复合乳液及其制备方法。本发明的负载疏水药物和营养物的蛋白/多糖复合乳液，是利用酪蛋白和多糖复合物作为乳化剂和稳定剂所制备的负载疏水药物和营养物的水包油乳液体系；所述的酪蛋白为酪蛋白、酪蛋白酸钠、α‑酪蛋白、β‑酪蛋白、κ‑酪蛋白或其他种类酪蛋白。本发明提供的负载疏水药物和营养物的酪蛋白/大豆多糖复合乳液可提高疏水药物和营养物口服生物利用度和化学稳定性。可用于制备药物制剂、食品和饮料等。

Description

负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备 方法
技术领域
本发明属于药物技术领域，具体涉及负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备方法。
背景技术
疏水性药物由于在水溶液中的溶解性不好，使得其在体内的药效降低，毒副作用增加，从而限制了这些药物在临床上的应用【Nature Reviews Drug Discovery 6 (2007)231-248】。很多脂溶性营养物，如β-胡萝卜素、姜黄素等，在预防多种慢性疾病方面具有积极的作用【Molecular pharmaceutics 4 (2007) 807-818; Journal of NanoparticleResearch 14 (2012) 1-16】，但是这些分子的水溶性和化学稳定性较差，口服生物利用度很低，极大地限制了其营养功能的发挥【Food Hydrocolloids 43 (2015) 153-164】。水包油纳米乳液可以高效地将疏水药物和营养物负载在乳滴中，增加其在水相中的溶解性和稳定性，是理想的疏水药物和营养物输送载体 【Food Hydrocolloids 35 (2014) 19-27;Journal of Controlled Release 149 (2011) 168-174】。由于食品级输送载体更为安全可靠，许多具有两亲性的可食用蛋白质分子，如乳清蛋白、大豆蛋白等是食品工业中常用的乳化剂【Food Hydrocolloids 45 (2015) 301-308; Journal of Agricultural and FoodChemistry 53 (2005) 2022-2027】。蛋白乳液的稳定性主要是通过乳液液滴之间的静电排斥作用来实现 【Colloids and Surfaces B: Biointerfaces 20 (2001) 197–210】，因此容易受到环境因素如pH、离子强度、温度等影响【Trends in Food Science & Technology8 (1997) 1-6; Current Opinion in Colloid & Interface Science 9 (2004) 305–313】。
酪蛋白是牛奶中的主要蛋白质，由4种成分组成：αs1-、αs2-、β-、κ-酪蛋白，其比例大约为4:1:4:1。酪蛋白在水溶液中的溶解性与 pH 有关，在等电点（pH 4.6）附近溶解度最小【Journal of Colloid and Interface Science 316 (2007) 405–412; Journal ofControlled Release 153 (2011) 206–216】。在中性和碱性条件下，酪蛋白形成酪蛋白酸盐，如酪蛋白酸钠而溶解于水溶液中。酪蛋白在水溶液中的行为与两亲性的嵌段聚合物相似，具有疏水和亲水相互作用【Current Opinion in Colloid and Interface Science 7(2002) 456–461】。酪蛋白具有乳化性能，可以制备乳液，但是酪蛋白乳液不能保持长期稳定【Journal of colloid and interface science 185 (1997) 515-529】，并且其稳定性与乳液的pH有关。与球蛋白不同，酪蛋白不具有加热形成凝胶的性质【Food Hydrocolloids35 (2014) 420-428】，不能通过加热的方法来固定吸附在油水界面上的酪蛋白，因此酪蛋白乳液容易发生融合、分层、破乳等现象。
天然的多糖分子由于在油-水界面的吸附力差，一般不能直接作为乳化剂，但可以作为稳定剂提高乳液的稳定性，而带有一定疏水蛋白的多糖可以直接作为乳化剂。大豆多糖是生产大豆油和大豆蛋白的主要副产物，是一种酸性多糖，在pH 3以上带负电荷，主链上共价连接了少量疏水蛋白【Food Hydrocolloids 17 (2003) 333–343】。大豆多糖在水溶液中具有高溶解性、低粘度、高温稳定性和乳化性能【Food Hydrocolloids 18 (2004) 759–803】。大豆多糖的疏水蛋白在乳化过程中可以伸入油滴并将整个多糖拉到油水界面上形成较厚的界面膜，其多糖链能够提供有效的空间位阻排斥作用，从而增加乳液的稳定性【FoodHydrocolloids 20 (2006) 1029–1038; Journal of agricultural and food chemistry52 (2004) 5506-5512】。但是，大豆多糖由于蛋白含量低而乳化能力较差，制备乳液时需要比较高的大豆多糖浓度，并且所形成的乳滴粒径较大容易发生分层现象【FoodHydrocolloids 18 (2004) 759–803】。
Maillard反应是食品加工中常用的一种绿色无毒反应【Food Chemistry 62(1998) 431-439；Trends in Food Science & Technology 11 (2001) 364-373】。蛋白与多糖可以通过Maillard反应形成新的两亲性蛋白-多糖接枝物。与蛋白和多糖相比，蛋白-多糖接枝物具有更好的溶解性和乳化性能，所制备的乳液在加热、冷藏、高电解质浓度等不利环境因素下具有更好的稳定性【Food Hydrocolloids 48 (2015) 155-164; Langmuir25 (2009) 9714-9720】。但是，Maillard反应是一个固相反应，具有反应时间长、能耗高的缺点【Langmuir 25 (2009) 9714-9720】。相比较而言，利用蛋白/多糖非共价键复合物制备乳液是一个更为方便的方法【Current Opinion in Colloid & Interface Science 12(2007) 166–178】。蛋白/多糖复合物主要通过二者之间的静电吸引力形成。蛋白/多糖复合乳液的制备有两种方式：一种是先乳化后静电吸附，即先制备蛋白乳液，然后在蛋白乳液中加入带相反电荷的多糖，通过静电吸附作用在乳滴表面形成多糖覆盖层，从而改变乳滴的表面性质，达到提高乳液稳定性的目的【Current Opinion in Colloid & InterfaceScience 17 (2012) 281-289】。但是，用这种方法制备的乳液只能在一个比较窄的pH范围内稳定，并且不能得到长期稳定的乳液 【Food Biophysics 1 (2006) 30-40】。这是因为通过静电作用覆盖在乳滴表面的多糖容易脱落，并且与蛋白乳滴带相反电荷的多糖分子会导致架桥絮凝现象发生【Journal of Agricultural and Food Chemistry 52 (2004) 3626-3632】。另一种制备蛋白/多糖复合乳液的方法是先复合后乳化，即先制备蛋白和多糖的混合溶液并且使二者发生静电作用形成复合物，然后制备蛋白/多糖复合乳液【Advances inColloid and Interface Science 167 (2011) 63–70】。对于球状蛋白，例如大豆蛋白、豌豆蛋白等，当蛋白与带相反电荷的多糖形成复合物以后可以共同吸附在油水界面上，但是这种复合界面膜并不稳定，容易解离【Soft Matter 4 (2008) 932-942】。为了得到稳定的复合界面膜，我们曾经通过对乳液进行加热来诱导球蛋白变性，使球蛋白在油水界面发生凝胶化，从而得到稳定、共价交联的蛋白/多糖复合界面膜，所制备的蛋白/多糖复合乳液可以抵抗环境pH、温度、离子强度的变化而保持长期稳定性【Journal of Colloid andInterface Science 380 (2012) 51–59】。但是，通过对乳液进行加热的方法所制备的蛋白/多糖复合乳液会限制其对热不稳定药物和营养物的负载和输送，因为在加热的过程中，负载在乳液中的药物和营养物可能会发生分解而失去其生物活性。
发明内容
本发明的目的在于提供一种负载疏水药物和营养物的蛋白/多糖复合乳液及其制备方法，以提高疏水药物和营养物在水溶液中的分散性、生物利用度和化学稳定性。
本发明提供的负载疏水药物和营养物的蛋白/多糖复合乳液，是利用酪蛋白和多糖复合物作为乳化剂和稳定剂所制备的负载疏水药物和营养物的水包油乳液体系。
本发明中，所述的酪蛋白为酪蛋白、酪蛋白酸钠、α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白或其他种类酪蛋白。
本发明中，所述的多糖是带有羧基和少量疏水蛋白的水溶性多糖，如大豆多糖。
本发明中，所述的水包油乳液体系的油相为可食用的液体油脂，如中链甘油三酸酯、维生素E或者大豆油等。
本发明中，疏水药物和营养物为可以溶解在油相中的疏水性药物和营养物。
本发明中，酪蛋白与大豆多糖的质量比在1:10到10:1之间。
本发明中，酪蛋白/大豆多糖复合物水溶液与油溶液的体积比在1:1到50:1之间。
本发明所述的负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液，其制备pH条件是pH 2~5之间。
本发明所述的负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液可作为疏水药物和营养物的口服制剂。
本发明所述的负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖乳液的制备方法，具体步骤为：
（1）将酪蛋白和大豆多糖分别溶解于水中，分别调节两种水溶液的pH 值到7~8以后将二者混合，然后将混合溶液调节到pH 2~5以后得到酪蛋白/大豆多糖复合物水溶液；
（2）将疏水药物、营养物溶解在油相中，得到油溶液；
（3）将上述复合物水溶液和油溶液混合，通过高速剪切和高压均质的方法，得到稳定的负载疏水药物和营养物的水包油乳液体系；其中：
步骤（1）中，酪蛋白与大豆多糖的质量比在1:10到10:1之间，优选质量比在1:5到5:1之间；
步骤（1）中，酪蛋白在水溶液中的浓度为1~50 mg/mL，优选浓度为5~20 mg/mL；大豆多糖浓度为0.1~500 mg/mL，优选浓度为5~50 mg/mL；
步骤（1）中，酪蛋白/大豆多糖复合水溶液的pH值在2~5区间；
步骤（2）中，疏水药物、营养物在油相中的浓度为1~500 mg/mL，优选浓度1~50 mg/mL；
步骤（3）中，酪蛋白/大豆多糖复合物水溶液与油溶液的体积比在1:1到50:1之间，优选体积比在1:1到10:1之间；
步骤（3）中，高速剪切速率为1000~30000转/分钟，剪切时间为0.5~20分钟，高压均质压力为100~5000 bar，高压均质时间为1~30分钟。
本发明提供的负载疏水药物和营养物的酪蛋白/大豆多糖复合乳液，可提高疏水药物和营养物的口服生物利用度，提高疏水药物和营养物的化学稳定性。
本发明提供的负载疏水药物和营养物的酪蛋白/大豆多糖复合乳液，可用于制备药物制剂。
本发明中，用线型的酪蛋白代替球状蛋白制备蛋白/多糖复合乳液。与球蛋白相比，线型蛋白与带相反电荷的多糖在形成复合物时可以得到结构更为致密的静电复合物。在酸性条件下，酪蛋白上的疏水片段可以和大豆多糖上的疏水蛋白通过疏水作用结合，酪蛋白上带正电荷的氨基酸可以和大豆多糖上带负电荷的羧基发生静电作用而结合。在乳化过程中，酪蛋白的疏水片段和大豆多糖的疏水蛋白部分进入油相，致密的酪蛋白/大豆多糖复合物可以形成致密的油水界面膜，大豆多糖中的多糖链能够提供有效的空间位阻排斥作用，因此酪蛋白/大豆多糖复合物具有比球蛋白/多糖更好的乳化性能和稳定性。
本发明中，对制备条件进行了优化。首先，将酪蛋白和大豆多糖分别溶解在水中以后将水溶液调节到pH 7~8或者更高，使酪蛋白变为酪蛋白酸钠。在这样的条件下，酪蛋白带有比较多的负电荷，分子链比较舒展。将酪蛋白和大豆多糖溶液混合以后，调节混合溶液到pH 2~5，使酪蛋白和大豆多糖带相反电荷，形成致密的酪蛋白/大豆多糖复合物。在没有加热的条件下，利用酪蛋白/大豆多糖复合物作为乳化剂和稳定剂所制备的乳液在pH 2~7范围内保持长期稳定，可以满足储存和口服的要求。
本发明中，酪蛋白/大豆多糖复合乳液可以提高所负载药物和营养物的化学稳定性和口服生物利用度。在制备酪蛋白/大豆多糖复合乳液的过程中除了pH调节以外，没有使用化学试剂，没有加热，所使用的原料天然、安全、成本低廉，乳液的制备过程简单、绿色、省时。因此，酪蛋白/大豆多糖复合乳液可以作为疏水药物和营养物的口服制剂加以应用。
具体实施方式
下面通过具体实施例进一步描述本发明。
实施例1. 将酪蛋白（CN）加入去离子水中，加碱溶液调节pH至7~8使酪蛋白溶解；将大豆多糖（SSPS）溶解在去离子水中并调节pH至7~8，在两种溶液中分别加入终浓度为0.02%的NaN3抑制细菌生长。将大豆多糖溶液与酪蛋白溶液混合后进行3小时磁力搅拌，加酸调节溶液的pH到预定值，然后继续搅拌3小时，得到酪蛋白/大豆多糖复合水溶液，溶液中酪蛋白浓度为10 mg/mL、酪蛋白与大豆多糖质量比为1:1~1:3、pH为3.0~7.0。用中链甘油三酸酯（MCT）作为油相，按照1:5油水体积比将油相与酪蛋白/大豆多糖复合水溶液进行混合，混合溶液经10000转/分钟高速均质1分钟后，再经800 bar高压均质4分钟，得到各种酪蛋白/大豆多糖复合乳液。为了调查乳液在不同pH条件下的物理稳定性，将制备好的乳液调节到pH 3.0或者pH 7.0，然后通过动态光散射测量乳滴的水合直径（Dh）和多分散系数（PDI）。
表1的结果说明，在酪蛋白/大豆多糖质量比1:1~1:3的范围内都可以制备乳液，乳滴粒径大约在250~350 nm之间；在pH 5.0条件下无法制备乳液，这是因为pH 5.0接近酪蛋白等电点（pH 4.6），此时酪蛋白的溶解度降低。将制备好的乳液分别调节至pH 3.0或者pH7.0以后，乳滴粒径虽然有所变化，但是乳液未出现分层、絮凝或沉淀等现象。
表1. 不同乳化pH、不同酪蛋白和大豆多糖质量比制备的乳液以及将制备好的乳液调节到pH 3.0和pH 7.0以后的乳滴粒径（Dh）。其中，酪蛋白在水相中的浓度为10 mg/mL，油相为MCT，油水体积比为1:5
“-”表示无法成功制备乳液。
实施例2. 按实施例1中同样的方法制备乳液，但是，酪蛋白/大豆多糖复合水溶液中酪蛋白浓度变为5 mg/mL、酪蛋白与大豆多糖质量比为1:2~1:4。表2结果表明，降低酪蛋白在水相中的浓度到5 mg/mL仍然可以制备乳滴粒径分布较为均一的乳液，乳滴的粒径大约在300~400 nm之间。同样，在pH 5.0条件下无法制备乳液。
表2. 不同乳化pH、不同酪蛋白和大豆多糖质量比制备的乳液以及将制备好的乳液调节到pH 3.0和pH 7.0以后的乳滴粒径（Dh）和多分散系数（PDI）。其中，酪蛋白在水相中的浓度为5 mg/mL，油相为MCT，油水体积比为1:5
“-”表示无法成功制备乳液。
实施例3. 按实施例1中同样的方法制备乳液，但是，酪蛋白/大豆多糖复合水溶液中酪蛋白浓度变为20 mg/mL、酪蛋白与大豆多糖质量比为2:1。表3结果表明，在pH 3.0条件下制备的乳液粒径在300 nm左右，调节pH值至7.0以后，粒径减小至200 nm左右。乳化pH值为6.0和7.0的乳液样品调节至pH 3.0以后粒径显著增加，粒径分布较宽。
表3. 不同乳化pH、以及将制备好的乳液调节到pH 3和pH 7以后的乳滴粒径（Dh）和多分散系数（PDI）。其中，酪蛋白在水相中的浓度为20 mg/mL，酪蛋白与大豆多糖质量比为2:1，油相为MCT，油水体积比为1:5
。
实施例4. 按实施例1中同样的方法制备乳液，其中酪蛋白/大豆多糖复合水溶液中酪蛋白浓度为10 mg/mL、酪蛋白与大豆多糖质量比为1:1、pH为3.0~4.0，用维生素E（VE）和中链甘油三酸酯（MCT）混合物（1:1，体积比）作为油相。将制备好的乳液调节到pH 2.0，5.0或者7.0并且在4℃条件下储存，然后通过动态光散射测量乳滴的水合直径（Dh）和多分散系数（PDI）。表4结果表明，在pH 3.0~4.0范围内制备的乳液其乳滴粒径在300 nm左右，粒径分布均匀。将乳液调节至pH 2.0以后其粒径稍有增加，调节至pH 5.0和7.0之后其粒径稍有减小。乳液具有长期稳定性，各组乳液储存210天后未出现聚集、分层、絮凝或沉淀等现象，粒径也无明显变化。这些结果说明酪蛋白/大豆多糖复合物可以制备长期稳定的水包油乳液。
表4. 不同乳化pH、以及将制备好的乳液调节到pH 2.0、pH 5.0和pH 7.0以后的乳滴粒径（Dh）和多分散系数（PDI）。其中，酪蛋白在水相中的浓度为10 mg/mL，酪蛋白（CN）与大豆多糖（SSPS）质量比为1:1，油相为MCT/VE（1:1），油水体积比为1:5
。
实施例5. 用大豆油代替中链甘油三酸酯，按照实施例1中同样方法制备乳液，其中复合水溶液中酪蛋白浓度为10 mg/mL，酪蛋白与大豆多糖质量比为1:1，pH为4.0。表5结果表明，与中链甘油三酸酯/VE作为油相（表4）比较，用大豆油作为油相制备的酪蛋白/大豆多糖复合乳液的粒径有所增加。
表5. 大豆油为油相的酪蛋白/大豆多糖复合乳液以及将制备好的乳液调节到pH2.0、pH 5.0和pH 7.0以后的乳滴粒径（Dh）和多分散系数（PDI）。其中，酪蛋白在水相中的浓度为10 mg/mL，酪蛋白与大豆多糖质量比为1:1，油水体积比为1:5
。
实施例6. 用β-酪蛋白代替酪蛋白，按实施例1中同样的方法制备乳液，其中复合水溶液中β-酪蛋白浓度为10 mg/mL，β-酪蛋白与大豆多糖质量比为1:1，pH为4.0。与表4的数据比较，表6中的数据说明β-酪蛋白制备的复合乳液其粒径和酪蛋白制备的乳液没有显著差别。
表6.β-酪蛋白和大豆多糖复合乳液以及将制备好的乳液调节到pH 2.0、pH 5.0和pH 7.0以后的乳滴粒径（Dh）和多分散系数（PDI）。其中，复合水溶液中β-酪蛋白浓度为10mg/mL，β-酪蛋白与大豆多糖质量比为1:1，油相为MCT，油水体积比为1:5
。
实施例7. 负载伊曲康唑（ITZ）的酪蛋白/大豆多糖复合乳液的制备。按照实施例1中同样的方法制备乳液，其中复合水溶液中酪蛋白浓度为10 mg/mL，酪蛋白与大豆多糖质量比为1:1，pH为4；用中链甘油三酸酯/维生素E混合物（体积比1:1）作为油相，将疏水药物伊曲康唑溶解在油相中；按照1:5油水体积比将油相与酪蛋白/大豆多糖复合水溶液进行混合，然后制备负载伊曲康唑的酪蛋白/大豆多糖乳液，伊曲康唑在乳液中的浓度为1.5 mg/mL。利用氯仿萃取伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液中未包埋的伊曲康唑，利用高效液相色谱仪分析萃取样品中伊曲康唑浓度，通过以下公式计算伊曲康唑在乳液中的包埋效率：
。
表7的结果表明，包埋伊曲康唑对酪蛋白/大豆多糖乳液的粒径没有显著影响；伊曲康唑在乳液中的包埋效率大于99%，说明酪蛋白/大豆多糖乳液可以有效包埋伊曲康唑。在4°C条件下存放50天后，乳液粒径无明显增加，乳液性状均一，未出现分层、絮凝、聚集或沉淀等现象，说明伊曲康唑的负载对乳液稳定性无明显影响。
表7.在pH 4条件下制备的伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液对伊曲康唑的包埋效率、乳滴粒径（Dh）和多分散系数（PDI）
。
实施例8. 按照实施例7方法制备伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液，其中伊曲康唑在乳液中的浓度为1.5 mg/mL。将制备好的乳液分别调节至pH 2.0、pH 5.0和pH 7.0，置于4℃冰箱中保存24 h后，按照实施例7中的方法萃取和检测未包埋的伊曲康唑，计算在不同pH条件下酪蛋白/大豆多糖乳液对伊曲康唑的包埋效率。将调节至不同pH值的伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液样品在4℃条件下储存，然后通过动态光散射测量乳滴的水合直径（Dh）和多分散系数（PDI）。表8的数据表明，在pH 4.0条件下制备的乳液在pH 2~7范围内都很稳定，对伊曲康唑的包埋效率均在99%以上。同时伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液具有长期稳定性，调节到不同pH值的各组乳液在4℃存储50天后未出现聚集、分层、絮凝或沉淀等现象，粒径也无显著变化，说明伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖载药乳液能够在不同pH值条件下保持长期稳定。
表8. 在不同pH条件下存放24 小时后乳液对伊曲康唑的包埋效率以及存放50天后乳滴粒径（Dh）和多分散系数（PDI）
。
实施例9. 按照实施例7方法制备伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液，其中伊曲康唑在乳液中的浓度为1.5 mg/mL。利用超声的方法将伊曲康唑分散在去离子水中，得到伊曲康唑水分散液，其中伊曲康唑的浓度同样为1.5 mg/mL。将60只ICR雄鼠（体重约25 g）随机分为乳液组和分散液组，每组30只。小鼠在灌胃给药前禁食12小时，可自由喝水。按照伊曲康唑30 mg/kg剂量对小鼠进行灌胃给药，分别在给药后0.5、1、2、4、6、24小时的时间点从小鼠眼眶处取血约0.5 mL置于经EDTA预处理的离心管中，每组在每个时间点随机取5只小鼠取样，每只小鼠只取一次样。在5000转/分钟条件下离心血液样品10分钟后取出上层血浆，通过高效液相色谱仪分析血浆中伊曲康唑浓度。表9和表10的结果说明，口服给药后1小时，分散液组和乳液组均出现血药浓度的最大值，分散液组的最大血药浓度为195 ng/mL，血药浓度的曲线下面积AUC值为1375 ng/mL h；而乳液组最大血药浓度为2019 ng/mL，AUC值为10509 ng/mL h，即乳液组的伊曲康唑的生物利用度是分散液组的7.6倍。这些数据证明了伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液可以显著提高伊曲康唑的口服生物利用度。
表9.小鼠口服伊曲康唑分散液和伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液后在不同时间点的伊曲康唑血药浓度
。
表10. 小鼠口服伊曲康唑分散液和伊曲康唑/酪蛋白/大豆多糖乳液后的药代动力学结果
。
实施例10. 负载姜黄素（CUR）的酪蛋白/大豆多糖复合乳液的制备。用姜黄素代替伊曲康唑，按照实施例7相同的方法包埋疏水营养物姜黄素，姜黄素在乳液中的浓度为1.7mg/mL。利用氯仿萃取乳液中未包埋的姜黄素，通过紫外可见分光光度计测量萃取液中姜黄素的含量，用下面公式计算姜黄素在乳液中的包埋效率：
。
将负载姜黄素的乳液置于4℃条件下储存，然后通过动态光散射测量乳滴的水合直径（Dh）和多分散系数（PDI）。表11的结果表明姜黄素在酪蛋白/大豆多糖复合乳液中的包埋效率大于99%，说明酪蛋白/大豆多糖乳液可以有效包埋姜黄素。乳液储存80天后未出现聚集、分层、絮凝或沉淀等现象，粒径也无明显变化，说明姜黄素/酪蛋白/大豆多糖乳液具有长期稳定性。
表11. 在pH 4条件下制备的姜黄素/酪蛋白/大豆多糖乳液对姜黄素的包埋效率以及乳滴粒径（Dh）和多分散系数（PDI）
。
实施例11. 将实施例10中新鲜制备的姜黄素/酪蛋白/大豆多糖乳液分别放置于4℃、25℃和37℃在避光和不避光条件下储存。此外，将40 mg姜黄素溶解于4 mL乙醇中，再将姜黄素乙醇溶液分散于20 mL pH为4.0的去离子水中，得到浓度为1.7 mg/mL的自由姜黄素溶液，置于37℃避光储存。利用紫外可见分光光度计分析姜黄素的浓度。表12的结果显示，自由姜黄素在37℃条件下会迅速发生分解，2天以后有90%以上的姜黄素发生了分解；而将姜黄素包埋在酪蛋白/大豆多糖乳液中后，姜黄素的分解速率大大降低：同样在37℃条件下保存20天以后姜黄素只有约14%的分解，而在4℃条件下保存20天以后姜黄素没有任何分解，这充分证明酪蛋白/大豆多糖乳液可以有效保护所负载的姜黄素。
表12. 姜黄素/酪蛋白/大豆多糖乳液和自由姜黄素溶液在不同条件下储存不同时间后的姜黄素相对浓度
。

Claims (5)

1.一种负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液的制备方法，其特征在于，利用酪蛋白和多糖复合物作为乳化剂和稳定剂，制备得到负载疏水药物和营养物的水包油乳液体系，具体步骤为：
（1）将酪蛋白和大豆多糖分别溶解于水中，分别调节两种水溶液的pH 值到7-8以后将二者混合，然后将混合溶液调节到pH 2-5以后得到酪蛋白/大豆多糖复合物水溶液；
（2）将疏水药物、营养物溶解在油相中，得到油溶液；
（3）将上述复合物水溶液和油溶液混合，通过高速剪切和高压均质的方法，得到稳定的负载疏水药物和营养物的水包油乳液体系；其中：
步骤（1）中，酪蛋白与大豆多糖的质量比在1:10到10:1之间；
步骤（1）中，酪蛋白在水溶液中的浓度为1-50 mg/mL；大豆多糖的浓度为0.1-500 mg/mL；
步骤（1）中，酪蛋白/大豆多糖复合水溶液的pH值在2-5区间；
步骤（2）中，疏水药物、营养物在油相中的浓度为1-500 mg/mL；
步骤（3）中，酪蛋白/大豆多糖复合物水溶液与油溶液的体积比在1:1到50:1之间；
步骤（3）中，高速剪切速率为1000-30000转/分钟，剪切时间为0.5-20分钟，高压均质压力为100-5000 bar，高压均质时间为1-30分钟。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的酪蛋白为酪蛋白酸钠、α-酪蛋白、β-酪蛋白或κ-酪蛋白。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述油相选自中链甘油三酸酯、维生素E或者大豆油。
4.一种由权利要求1-3之一所述制备方法得到的负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液。
5.如权利要求4所述的负载疏水药物和营养物的酪蛋白/大豆多糖复合乳液在制备药物制剂方面的应用。
CN201511013668.0A 2015-12-31 2015-12-31 负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备方法 Active CN105663039B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511013668.0A CN105663039B (zh) 2015-12-31 2015-12-31 负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511013668.0A CN105663039B (zh) 2015-12-31 2015-12-31 负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105663039A CN105663039A (zh) 2016-06-15
CN105663039B true CN105663039B (zh) 2019-01-15

Family

ID=56297808

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201511013668.0A Active CN105663039B (zh) 2015-12-31 2015-12-31 负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105663039B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111012760A (zh) * 2019-12-28 2020-04-17 复旦大学 负载疏水药物、营养物的酪蛋白/阴离子多糖纳米粒子及其制备方法

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106173799B (zh) * 2016-07-08 2019-08-16 武汉轻工大学 纳他霉素微乳液及其制备方法
CN106472923B (zh) * 2016-09-09 2018-04-17 武汉轻工大学 乳铁蛋白‑高甲氧基果胶速能饮品的制备方法
CN106615141B (zh) * 2016-09-09 2018-06-05 武汉轻工大学 牛乳蛋白-阴离子多糖乳化稳定剂及其应用
CN107410829B (zh) * 2017-03-30 2020-04-24 湖北工业大学 一种提高多糖/蛋白复合物乳化稳定性的方法
CN107897915A (zh) * 2017-11-21 2018-04-13 南京师范大学 一种负载姜黄素的莲子蛋白‑果胶复合乳液及其制备方法和应用
CN108096188B (zh) * 2017-12-19 2019-11-12 复旦大学 负载疏水药物和营养物的水包油复合纳米乳液及其制备方法
CN108669550A (zh) * 2018-04-10 2018-10-19 福建农林大学 一种富含功能因子的肌原纤维蛋白乳液凝胶的制备方法
CN108634172A (zh) * 2018-04-10 2018-10-12 福建农林大学 一种富含功能因子的肌原纤维蛋白/黄原胶复合乳液
CN110367517B (zh) * 2019-08-26 2023-03-10 西南大学 一种酪蛋白-大豆多糖交联产物及其制备方法与应用
CN111317824B (zh) * 2020-02-29 2022-04-12 复旦大学 一种载多肽药物的口服纳米制剂及其制备方法
CN112515169A (zh) * 2020-11-24 2021-03-19 中国农业大学 一种亚麻籽油及其复配物乳液和高内相乳液的制备方法
CN112841394A (zh) * 2021-01-18 2021-05-28 江苏大学 改性豌豆蛋白与乳清蛋白复合乳液及复合凝胶的制备方法
CN112869119A (zh) * 2021-02-19 2021-06-01 吉林大学 一种可以提高β-胡萝卜素稳定性的食品级高内相乳液的制备方法
CN112956682B (zh) * 2021-03-30 2023-04-28 江南大学 一种花生来源的乳液稳定剂的制备方法
CN114831206A (zh) * 2022-03-29 2022-08-02 浙江艾兰得生物科技有限公司 一种无腥味、耐储藏dha藻油植物基凝胶糖果及其制作方法
CN115317448B (zh) * 2022-09-05 2024-03-15 贵州医科大学 一种用于负载挥发油类药物的纳米乳剂及其制备方法
CN115944043A (zh) * 2023-01-13 2023-04-11 江南大学 一种高糖型果汁饮料浓浆防腐保鲜的品控方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102108137A (zh) * 2009-02-26 2011-06-29 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 含蛋白质-多糖缀合物的脂溶性活性成分的组合物
CN102406941A (zh) * 2011-07-29 2012-04-11 沈阳药科大学 含有改性明胶肽的纳米化难溶性活性组分及其制备方法
CN102524637A (zh) * 2010-12-23 2012-07-04 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 包含植物蛋白-大豆多糖复合物的脂溶性活性成分的组合物
CN102776257A (zh) * 2012-07-13 2012-11-14 华东师范大学 一种基于酶复合改性的大豆多糖及其制备方法
CN103269605A (zh) * 2010-12-23 2013-08-28 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 包含植物蛋白-大豆多糖复合物的脂溶性活性成分的组合物
CN104872498A (zh) * 2015-05-15 2015-09-02 华南理工大学 一种植物蛋白/大豆多糖纳米乳液及其制备方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102108137A (zh) * 2009-02-26 2011-06-29 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 含蛋白质-多糖缀合物的脂溶性活性成分的组合物
CN102524637A (zh) * 2010-12-23 2012-07-04 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 包含植物蛋白-大豆多糖复合物的脂溶性活性成分的组合物
CN103269605A (zh) * 2010-12-23 2013-08-28 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 包含植物蛋白-大豆多糖复合物的脂溶性活性成分的组合物
CN102406941A (zh) * 2011-07-29 2012-04-11 沈阳药科大学 含有改性明胶肽的纳米化难溶性活性组分及其制备方法
CN102776257A (zh) * 2012-07-13 2012-11-14 华东师范大学 一种基于酶复合改性的大豆多糖及其制备方法
CN104872498A (zh) * 2015-05-15 2015-09-02 华南理工大学 一种植物蛋白/大豆多糖纳米乳液及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"负载姜黄素的豌豆蛋白/大豆多糖复合乳液";王超男等;《2015年全国高分子学术论文报告会》;20151017;第320页

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111012760A (zh) * 2019-12-28 2020-04-17 复旦大学 负载疏水药物、营养物的酪蛋白/阴离子多糖纳米粒子及其制备方法
CN111012760B (zh) * 2019-12-28 2021-10-26 复旦大学 负载疏水药物、营养物的酪蛋白/阴离子多糖纳米粒子及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105663039A (zh) 2016-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105663039B (zh) 负载疏水药物和营养物的酪蛋白/多糖复合乳液及其制备方法
Mao et al. Emulsion design for the delivery of β-carotene in complex food systems
Cheng et al. Fate of lutein-containing zein nanoparticles following simulated gastric and intestinal digestion
Luo et al. Biopolymer-based nanotechnology approaches to deliver bioactive compounds for food applications: a perspective on the past, present, and future
Zhou et al. Low density lipoprotein/pectin complex nanogels as potential oral delivery vehicles for curcumin
Fan et al. Physicochemical stability and in vitro bioaccessibility of β-carotene nanoemulsions stabilized with whey protein-dextran conjugates
Ji et al. Preparation and stabilization of emulsions stabilized by mixed sodium caseinate and soy protein isolate
Zhang et al. Improving the emulsifying property of gliadin nanoparticles as stabilizer of Pickering emulsions: Modification with sodium carboxymethyl cellulose
Lv et al. Vitamin E encapsulation in plant-based nanoemulsions fabricated using dual-channel microfluidization: Formation, stability, and bioaccessibility
Kaushik et al. Complex coacervation between flaxseed protein isolate and flaxseed gum
Ruffin et al. The impact of whey protein preheating on the properties of emulsion gel bead
CN108030088B (zh) 一种蛋白修饰植物甾醇脂质体粉末的制备方法
Liu et al. Microencapsulation properties of protein isolates from three selected Phaseolus legumes in comparison with soy protein isolate
CN109588721B (zh) 一种类胡萝卜素-蛋白微粒及其制备方法和应用
Luo et al. Food-derived biopolymers for nutrient delivery
CN109771373B (zh) 脂质体稳定的水包油Pickering乳液及其制备方法
Sani et al. Nano-enabled plant-based colloidal delivery systems for bioactive agents in foods: Design, formulation, and application
Kim et al. Formation of a novel coating material containing lutein and zeaxanthin via a Maillard reaction between bovine serum albumin and fucoidan
CN108096188B (zh) 负载疏水药物和营养物的水包油复合纳米乳液及其制备方法
Zhang et al. Pickering emulsion stabilized by gliadin nanoparticles for astaxanthin delivery
Xu et al. The stability, microstructure, and microrheological properties of monascus pigment double emulsions stabilized by polyglycerol polyricinoleate and soybean protein isolate
CN102302450B (zh) 疏水药物-白蛋白-葡聚糖纳米乳液及其制备方法和应用
Cao et al. Physical properties and stability of filled hydrogel particles based on biopolymer phase separation: Influence of the ratio of protein to polysaccharide
Giroldi et al. Encapsulation of dairy protein hydrolysates: Recent trends and future prospects
Xu et al. Improvement of emulsifying properties of potato starch via complexation with nanoliposomes for stabilizing Pickering emulsion

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant