CN105646463B - 他克林-二甲胺基黄酮杂合物、制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药与化工领域，涉及他克林‑二甲胺基黄酮杂合物、制备方法及其应用，结构式如式I和II所示：其中，R1=H或Cl，R2=H或Cl；Y=CH2，NCH3，NH，羰基，乙二酰基，1,3‑丙二酰基，对环己烷基，或OCH2CH2O；m=0~4，n=0~4；式II的x=1~3，A=NH或O；m、n和x均取整数。本发明所涉及的他克林‑二甲胺基黄酮杂合物对乙酰胆碱酯酶（AChE）和丁酰胆碱酯酶（BChE）均有很强的抑制活性，对淀粉样蛋白（Aβ）聚集具有较强的抑制作用，而且这些化合物还具有明显的抗氧化活性，没有显示出明显的细胞毒性。它们有效用于治疗神经退行性疾病，如阿尔茨海默症。
Description
技术领域
本发明属于医药与化工领域，具体涉及一种他克林-二甲胺基黄酮杂合物、制备方法及其应用。
背景技术
阿尔茨海默症(Alzheimer disease,AD)是一种神经退行性疾病，由德国神经病理学家Alois Alzheimer于1907年发现，表现为中枢神经系统退化，神经元胞内出现神经元纤维缠结和胞外出现老年斑的病理特征。临床上患者逐渐出现记忆力减退、认知功能障碍、行为异常和社交障碍等，通常病情呈进行性加重，直到完全丧失独立生活能力。
老年痴呆是一种在老人群体中十分常见的疾病，已经成为继肿瘤、心脏病、脑血管病之后引起老年人死亡的第四大病因。随着世界人口老龄化进程的加快，AD病患者人数也将越来越多。2006年预防痴呆症国际会议上指出全世界有超过2600万AD患者，全球48％的早老性痴呆症患者在亚洲，形式非常严峻。
目前临床上治疗AD的药物主要是基于胆碱能假说而研究开发出来的乙酰胆碱脂酶抑制剂(acetylcholinesterase inhibitors,AChEIs)。该类药物的作用机制是通过抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)，提高患者脑内乙酰胆碱(acetylcholine，ACh)水平，从而提高患者的记忆和认知能力，明显改善患者神经精神症状。
他克林(Tacrine)，是第一个用于治疗AD的胆碱脂酶抑制剂，它是一种喹啉类衍生物，1993年被美国FDA批准进入临床使用。然而很快发现它具有肝毒性，能使血清中的转氨酶水平升高，使得很多患者不能耐受他克林的治疗，从而导致临床使用受限，目前该药已经退出了临床使用。但他克林对老年痴呆症的疗效肯定，特别是对胆碱酯酶抑制活性很强，所以对他克林杂合物的研究一直没有停止。老年痴呆症的成因复杂，其中涉及许多因素和相关靶点，针对这些相关靶点，科学家们采用合理的挛药设计思路，合成出许多他克林杂合物及类似物，希望能够得到对胆碱酯酶抑制活性更高，并且具有多重药效活性的新颖化合物。Pang等报道了烷烃偶联的“他克林二联体”衍生物中，活性最强的为中间七个亚甲基相连接的双他克林衍生物，其治疗效果是他克林的100倍，毒性低近10000倍，而且此类化合物合成简便，成本低(Pang,YR,et al,J.Bio.Chem.,1993,271,23646-23649和WO9721681,1997-06-19)。虽然这些化合物的活性和疗效比他克林有明显的提高，但是由于水溶性不好和人体耐受性差等因素，这些衍生物也仅停留在I期临床阶段。
发明内容
本发明的目的是提供一种他克林-二甲胺基黄酮杂合物、制备方法及其应用。
基于上述目的，本发明采取如下技术方案：
一种他克林-二甲胺基黄酮杂合物，所述杂合物具有下述式I或式II的通式结构：
其中，R1＝H或Cl，R2＝H或Cl；Y＝CH2，NCH3，NH，羰基，乙二酰基，1,3-丙二酰基，对环己烷基，或OCH2CH2O；m＝0～4，n＝0～4；式II中的x＝1～3，A＝NH或O；m、n和x均取整数。
本发明涉及式I和II的杂合物或其互变异构体，药用盐，前药或溶剂化物，还包括药用载体、辅剂或赋形剂。
上述他克林-二甲胺基黄酮杂合物的制备方法，包括以下步骤：
①将溶解在正戊醇中，加入催化剂碘化钾、或加热回流至原料反应完全，经后处理得到或
②将溶解在丙酮中，加入和无水碳酸钾，加热回流至原料反应完全，蒸干溶剂丙酮，加入乙酸乙酯稀释，水洗，干燥，浓缩纯化得到式I所示杂合物；
③将无水碳酸钾、催化剂碘和加入到丙酮中，加热回流至反应完全，蒸干溶剂丙酮，加入三氯甲烷稀释，水洗，干燥，浓缩纯化得到中间体
④将上述步骤③所得中间体、碳酸钠加入到DMSO和水的混合液中，加热，反应完成后，倒入稀盐酸溶液中，过滤，干燥，无水乙醇重结晶得到中间体
⑤将上述步骤④所得中间体和加入到三氯甲烷中，加入缩合剂搅拌反应，待反应完成，加入饱和食盐水洗涤，干燥，浓缩纯化得到式II所示杂合物。
步骤⑤中所述缩合剂为EDC和NHS中的至少一种。
所述杂合物或其互变异构体、药用盐类、前药或溶剂化物在制备预防、治疗胆碱酯酶或淀粉样蛋白或氧化应激介导的神经退行性疾病药物中的应用。
上文所述“药用盐，前药，溶剂化物”是指任何药用盐，脂，溶剂化物，或经施用于接受者后能够提供直接或间接本文所述化合物的其他化合物。例如，本发明提供的化合物的药用盐可以通过常规方法由母体化合物制备，该母体化合物含有碱的部分。通常该盐，例如通过将游离碱形式的这些化合物与化学计算量的适当酸在水中或在有机溶剂中或者在两者的混合物中制备。通常，非水性介质如乙醇，乙酸乙酯，乙醚乙腈或异丙醇是优选的。酸加成盐的实例包括无机酸加成盐例如，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，硫酸盐，硝酸盐，和有机酸加成盐，例如乙酸盐，马来酸盐，富马酸盐，柠檬酸盐，草酸盐，琥珀酸盐，酒石酸盐，苹果酸盐，扁桃酸盐和甲苯磺酸盐。优选的杂合物或前药是相对母体物质，当将这些化合物使用于患者时提高本发明化合物的生物利用度(例如通过使口服给药的化合物更容易被吸收到血液中)或增强母体化合物向生物区室(例如脑或淋巴系统)的传递等。式I和II杂合物前药的任何化合物属于本发明的范围内，术语“前药”以其最广泛的意义使用并且包括在体内转化为本发明化合物的那些杂合物。这些杂合物对于本领域技术人员是显而易见的，并且根据分子中存在的官能团，包括不限于本发明化合物的下列杂合物：脂，氨基酸酯，氨基甲酸酯和酰胺。
上文所述药学上可接受的“载体、辅剂或赋形剂”是指药学领域常规的药物载体，例如：稀释剂，赋形剂如水等，填充剂如淀粉蔗糖等；黏合剂如纤维素衍生物、明胶等；另外还可以以组合物中加入其他辅料如香味剂、甜味剂等。
本发明的化合物可以作为有利化合物或作为溶剂化物的晶体形式。溶剂化的方法是本领域内公知的，适当的溶剂化物是药用溶剂化物。在具体实施方案中，溶剂化物是水合物。
本发明的化合物存在两个主要单元：他克林部分和二甲胺基黄酮部分，它们通过适当的连接基团相连。一方面可以调整连接基团的长度及类型，使得杂合物能够同时与酶的双位点结合，提高对胆碱酯酶的抑制活性；另一方面，发挥二甲胺基黄酮的抑制Aβ、抗氧化的多功能，以及降低化合物的毒副作用。
9-取代氨基-1,2,3,4-四氢吖啶可以按照文献已经报道的方法合成(Luo,W,Li,YPet al Bioorg.Med.Chem.2011,19,763-770)。二甲胺基黄酮的合成可以按照文献已经报道的方法合成(Luo,W,Su,YB et al Bioorg.Med.Chem.2013,21,7275-7282)。
本发明的杂合物合成路线如下：
具体制备方法是：
①将溶解在正戊醇中，加入催化剂碘化钾和或加热回流至反应完全，蒸干溶剂，三氯甲烷稀释，碱洗，干燥，浓缩纯化得到或具体操作步骤可参考文献W.Luo,Y.P.Li,Y.He,S.L.Huang,J.H.Tan,T.M.Ou,D.Li,L.Q.Gu,Z.S.Huang,Bioorg.Med.Chem.19(2011)763-770；
②将溶解在丙酮中，加入和无水碳酸钾，加热回流后，蒸干溶剂，加入乙酸乙酯稀释，水洗，干燥，浓缩纯化得到式I所示杂合物；
③将二甲氨基-7-羟基黄酮、无水碳酸钾、催化量的碘和加入到丙酮中，加热回流后，蒸干溶剂，加入三氯甲烷稀释，水洗，干燥，浓缩纯化得到中间体
④将上述③所得中间体、碳酸钠加入到DMSO和水的混合液中，加热反应完成后，倒入稀盐酸溶液中，过滤，干燥，得到中间体
⑤将上述④所得中间体、或加入到三氯甲烷中，加入缩合剂，反应完成后加入饱和食盐水洗涤，干燥，浓缩纯化得到式II所示杂合物。
其中9-取代氨基-1,2,3,4-四氢吖啶的纯化优选硅胶柱层析分离，所用的洗脱剂为氯仿(或二氯甲烷)、甲醇、氨水的任何比例的混合液，或者石油醚(或正己烷)、乙酸乙酯的任何比例的混合液。其中③和④所得到的中间体的纯化优选重结晶纯化，所用的溶剂优选乙醇、水、乙酸乙酯、丙酮、氯仿、二氯甲烷等，或者是以上溶剂任意比例的混合液。
其中缩合剂为成酰胺或成酯的缩合剂，如碳二亚胺类DCC(二环己基碳二亚胺)，DIC(N,N-二异丙基碳二亚胺)，EDC【1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺】，或缩合活化剂如NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)，HOBt(1-羟基苯并三氮唑)，HATU【2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯】，DMAP(4-二甲氨基吡啶)等或以上任何比例的混合物，其中EDC和NHS是优选的。
本发明的优选化合物的结构是：式(I)R1＝R2＝H,Y＝CH2，式(II)R1＝R2＝H,Y＝CH2，A＝NH或O时的结构活性优于其他结构活性。
其中式I和II化合物的纯化优选硅胶柱层析分离，所用洗脱剂为氯仿(或二氯甲烷)、甲醇、氨水的任何比例的混合液。
如果需要，可以通过常规方法如结晶法或色谱法纯化反应产物。当用于制备本发明化合物的上述方法产生立体异构体的混合物时，这些异构体可以通过常规技术和制备色谱法分离。如果存在手性中心，化合物可能以外消旋形式制备，或者可以通过对应特异性合成或通过拆分来制备单个的对映异构体。一种优选的药用形式是结晶形式，包括药物组合物中的这种形式。如果是盐和溶剂化物，另外的离子或溶剂部分也应当是非毒性的。
本发明另外提供以式I和II化合物为活性成分的药物组合物，其包含本发明的化合物或其互变异构体、药用盐类、前药或溶剂化物，以及药用载体，辅剂或赋形剂。
本发明的化合物可以与其他药物一起制备成组合物，例如制备成复方药物。
由上述结构式I和II表示的化合物或其互变异构体、药用盐类、前药或溶剂化物显示优越的胆碱酯酶抑制作用。因此本发明另一方面涉及它们以及以它们为活性成分的药物组合物，在治疗、改善或预防胆碱酯酶或淀粉样蛋白或氧化应激介导的相关疾病的药物的用途，该药物可以用来治疗、改善或预防：认知功能障碍如老年痴呆症，脑血管痴呆，轻度认知损伤，或带有异常蛋白聚集的神经退行性痴呆症，特别是阿尔茨海默症等。
本发明的他克林-二甲胺基黄酮杂合物或其互变异构体、药用盐类、前药或溶剂化物可以制备成片剂、丸剂、胶囊、注射剂、悬浮剂或乳剂等。
以上已经描述了用于制备本发明化合物的通用方法。提供下列实施例进一步举例说明本发明，而不是对本发明范围的限定。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明的技术方案做进一步举例说明，而不是对本发明范围的限定。
实施例一：
2-(4-(二甲氨基)苯基)-7-(2-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)乙基)-4H-色烯-4-酮。
具体制备方法如下：将1mmol N-(2-溴)-四氢吖啶-9-氨溶解在15mL丙酮中，加入1mmol二甲氨基-7-羟基黄酮和5mmol无水碳酸钾，加热回流4小时后，蒸干溶剂，加入20mL乙酸乙酯稀释，水洗三次，无水硫酸钠干燥，浓缩，残余物用柱层析分离，洗脱剂用氯仿︰甲醇︰氨水＝20︰1︰0.5％(体积比)。得到橙红色油状液体。
产率：50％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝8.3Hz,1H),7.84(d,J＝8.2Hz,1H),7.73(d,J＝8.9Hz,2H),7.55(d,J＝8.5Hz,1H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),7.35(d,J＝5.1Hz,1H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),6.66(dd,J＝10.8,5.5Hz,3H),6.59(dd,J＝8.5,2.1Hz,1H),4.71(s,1H),3.68(s,4H),3.03(s,6H),3.00(d,J＝6.2Hz,2H),2.70(s,2H),1.93-1.80(m,4H).ESI-MS m/z:520.3[M+H]+.
实施例二：
2-(4-(二甲氨基)苯基)-7-(3-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)乙基)-4H-色烯-4-酮。
制备方法同实施例一，所不同的是用N-(3-溴)-四氢吖啶-9-氨代替N-(2-溴)-四氢吖啶-9-氨，最终得橙红色油状液体。
产率：46％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.93(d,J＝8.2Hz,1H),7.82(d,J＝8.2Hz,1H),7.70(d,J＝8.8Hz,2H),7.55(d,J＝8.5Hz,1H),7.53(t,J＝7.6Hz,1H),7.36(d,J＝5.2Hz,1H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),6.66(m,3H),6.59(d,J＝8.2Hz,1H),4.71(s,1H),3.68(s,4H),3.32,(s,2H),3.03(s,6H),3.00(d,J＝6.2Hz,2H),2.70(s,2H),1.93-1.80(m,4H).ESI-MS m/z:534.2[M+H]+.
实施例三：
2-(4-(二甲氨基)苯基)-7-(4-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)乙基)-4H-色烯-4-酮。
制备方法同实施例一，所不同的是用N-(4-溴)-四氢吖啶-9-氨代替N-(2-溴)-四氢吖啶-9-氨，最终得橙红色油状液体。
产率：52％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(d,J＝8.2Hz,1H),7.82(d,J＝8.2Hz,1H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),7.56(d,J＝8.5Hz,1H),7.54(t,J＝7.6Hz,1H),7.36(d,J＝5.4Hz,1H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),6.66(m,4H),4.71(s,1H),3.68(s,4H),3.32,(s,2H),3.03(s,6H),3.00(m,4H),2.70(s,2H),1.93-1.80(m,4H).ESI-MS m/z:548.1[M+H]+.
实施例四：
2-(2-(4-(二甲氨基)苯基)-4-羰基-4H-色酮-7-氧基)-N-(2-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)乙基)乙酰胺。
具体制备方法如下：将2mmol二甲氨基-7-羟基黄酮、10mmol无水碳酸钾、催化量的碘(0.2mmol)和3mmol氯乙酸乙酯加入到20mL丙酮中，加热回流4小时后，蒸干溶剂，加入30mL三氯甲烷稀释，水洗三次，无水硫酸钠干燥，蒸出溶剂得到红色固体；将此红色固体、5mmol碳酸钠加入到5mL DMSO和水的混合液中(DMSO和水体积比为1:9)，95℃加热反应4小时后，倒入20mL体积分数为10％的稀盐酸中，静置冷却到室温，待有沉淀析出，过滤，滤饼干燥，得到朱红色固体；取此朱红色固体1mmol，N1-(1,2,3,4-四氢吖啶9-氨基)乙基-1,2-乙二胺1mmol，EDC取1mmol和1mmol的NHS加入到20mL三氯甲烷中，室温搅拌24小时，反应完成后加入20mL饱和食盐水洗涤三次，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析分离，洗脱剂用氯仿：甲醇：氨水＝20：1：0.5％(体积比)，得到橘红色油状液体。
产率：61％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(d,J＝8.3Hz,1H),7.85(d,J＝8.2Hz,1H),7.72(d,J＝8.9Hz,2H),7.54(d,J＝8.5Hz,1H),7.50(t,J＝7.6Hz,1H),7.36(d,J＝5.1Hz,1H),7.30(t,J＝7.6Hz,1H),6.79(s,1H),6.65(dd,J＝10.8,5.5Hz,3H),6.58(dd,J＝8.5,2.1Hz,1H),4.70(s,1H),4.56(s,2H),3.68(s,4H),3.03(s,6H),3.00(d,J＝6.2Hz,2H),2.70(s,2H),1.93-1.80(m,4H).ESI-MS m/z:563.3[M+H]+.
实施例五：
2-(2-(4-(二甲氨基)苯基)-4-羰基-4H-色酮-7-氧基)-N-(3-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丙基)乙酰胺。
制备方法同实施例四，所不同的是用N1-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丙基-1,3-丙二胺代替N1-(1,2,3,4-四氢吖啶9-氨基)乙基-1,2-乙二胺，最终得橘红色粘稠液体。
产率：47％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(d,J＝8.4Hz,1H),7.85(d,J＝8.3Hz,1H),7.71(d,J＝8.9Hz,2H),7.58(d,J＝8.5Hz,1H),7.47(t,J＝7.6Hz,1H),7.28(t,J＝7.6Hz,1H),6.99(t,J＝5.8Hz,1H),6.77(s,1H),6.64(ddd,J＝10.6,7.1,2.8Hz,4H),4.75(s,1H),4.55(s,2H),3.54–3.44(m,4H),2.99(s,8H),2.68(s,2H),1.87-1.78(m,6H).ESI-MS m/z:577.3[M+H]+.
实施例六：
2-(2-(4-(二甲氨基)苯基)-4-羰基-4H-色酮-7-氧基)-N-(4-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丁基)乙酰胺。
制备方法同实施例四，所不同的是用N1-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丁基-1,4-丁二胺代替N1-(1,2,3,4-四氢吖啶9-氨基)乙基-1,2-乙二胺，最终得橘红色粘稠液体。
产率：52％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(t,J＝8.8Hz,2H),7.75(dd,J＝8.7,4.7Hz,2H),7.62(t,J＝8.6Hz,1H),7.53(t,J＝8.8Hz,1H),7.32(t,J＝8.9Hz,1H),6.98(dd,J＝14.6,8.7Hz,1H),6.80(d,J＝5.1Hz,1H),6.68(dt,J＝6.3,4.2Hz,4H),4.56(d,J＝4.5Hz,2H),4.10(d,J＝21.3Hz,1H),3.51(s,2H),3.42(d,J＝3.7Hz,2H),3.04(d,J＝4.6Hz,8H),2.65(s,2H),1.87(d,J＝2.9Hz,4H),1.71(d,J＝2.8Hz,4H).ESI-MS m/z:591.3[M+H]+.
实施例七：
2-(2-(4-(二甲氨基)苯基)-4-羰基-4H-色酮-7-氧基)-N-(2-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)乙基)乙酸酯。
制备方法同实施例四，所不同的是用N1-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)乙基-1-醇代替N1-(1,2,3,4-四氢吖啶9-氨基)乙基-1,2-乙二胺，最终得橘红色粘稠固体。
产率：56％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(d,J＝8.2Hz,1H),7.84(d,J＝8.2Hz,1H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(t,J＝7.6Hz,1H),7.36(d,J＝5.1Hz,1H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),6.65(m,4H),4.70(s,1H),4.56(s,2H),3.68(s,4H),3.03(s,6H),3.00(d,J＝6.2Hz,2H),2.70(s,2H),1.93-1.80(m,4H).ESI-MS m/z:563.2[M+H]+.
实施例八：
2-(2-(4-(二甲氨基)苯基)-4-羰基-4H-色酮-7-氧基)-N-(3-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丙基)乙酸酯。
制备方法同实施例四，所不同的是用N1-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丙基-1醇代替N1-(1,2,3,4-四氢吖啶9-氨基)乙基-1,2-乙二胺，最终得橘红色粘稠固体。
产率：45％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(d,J＝8.3Hz,1H),7.70(d,J＝8.9Hz,2H),7.56(d,J＝8.5Hz,1H),7.46(t,J＝7.6Hz,1H),7.28(t,J＝7.6Hz,1H),6.98(t,J＝5.8Hz,1H),6.64(m,4H),4.70(s,1H),4.50(s,2H),3.54-3.44(m,4H),2.99(s,8H),2.68(s,2H),1.87-1.78(m,6H).ESI-MS m/z:577.2[M+H]+.
实施例九：
2-(2-(4-(二甲氨基)苯基)-4-羰基-4H-色酮-7-氧基)-N-(4-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丁基)乙酸酯。
制备方法同实施例四，所不同的是用N1-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丁基-1醇代替N1-(1,2,3,4-四氢吖啶9-氨基)乙基-1,2-乙二胺，最终得橘红色粘稠固体。
产率：48％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90(t,J＝8.8Hz,2H),7.76(d,J＝8.8Hz,2H),7.62(t,J＝8.6Hz,1H),7.53(t,J＝8.8Hz,1H),7.32(t,J＝8.9Hz,1H),6.98(dd,J＝14.6,8.7Hz,1H),6.80(d,J＝5.1Hz,1H),6.68(m,3H),4.56(d,J＝4.5Hz,2H),4.10(d,J＝21.3Hz,1H),3.51(s,2H),3.42(d,J＝3.7Hz,2H),3.04(d,J＝4.6Hz,8H),2.65(s,2H),1.87(d,J＝2.9Hz,4H),1.71(d,J＝2.8Hz,4H).ESI-MS m/z:591.2[M+H]+.
实施例十：
2-(2-(4-(二甲氨基)苯基)-4-羰基-4H-色酮-7-氧基)-N-(4-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丁基)丙酸酯。
制备方法同实施例四，所不同的是用氯丙酸乙酯代替氯乙酸乙酯，用N1-(1,2,3,4-四氢吖啶-9-氨基)丁基-1醇代替N1-(1,2,3,4-四氢吖啶9-氨基)乙基-1,2-乙二胺，最终得橘红色粘稠固体。
产率：40％，1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(t,J＝8.8Hz,2H),7.76(d,J＝8.8Hz,2H),7.62(t,J＝8.6Hz,1H),7.53(t,J＝8.8Hz,1H),7.32(t,J＝8.9Hz,1H),6.98(d,J＝8.8Hz,1H),6.80(d,J＝5.1Hz,1H),6.68(m,3H),4.56(d,J＝4.5Hz,2H),4.40(d,J＝4.5Hz,2H),4.10(d,J＝6.4Hz,1H),3.51(s,2H),3.42(d,J＝3.7Hz,2H),3.04(d,J＝4.6Hz,8H),2.65(s,2H),1.87(d,J＝2.9Hz,4H),1.71(d,J＝2.8Hz,4H).ESI-MS m/z:606.3[M+H]+.
试验例一:生物学评估
乙酰胆碱脂酶(AChE)抑制实验
选择实施例一～十制备的化合物，采用Ellman(Ellman,GL,Courtney,KD,et al,Biochem.Pharmacol.1961,7,88-95)报道的比色法在37℃评估AChE抑制活性。测试溶液由以下各项组成：0.1M磷酸缓冲液pH 8.0，1mM的5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB，Ellman’s试剂)，0.01mg/mL AChE和1mM硫代乙酰胆碱作为酶促反应的底物。检测时，将待检测的化合物加入由0.1M磷酸缓冲液pH 8.0、1mM的5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB，Ellman’s试剂)和0.01mg/mL AChE组成的混合液中，使待检测的化合物与AChE在37℃下预孵育5分钟。该时间后，加入1mM硫代乙酰胆碱作为底物。用多功能酶标仪记录在412nm的吸光度变化2分钟，比较反应速率，计算由于测试化合物的存在导致的百分比抑制。用至少三次的独立测量值计算反应速率，将IC50定义为相对于没有抑制剂下将酶活性降低50％的每种化合物的浓度。结果在表1中显示。
试验例二:生物学评估
丁酰胆碱脂酶(BChE)抑制实验
选择实施例一～十制备的化合物，采用Ellman报道的比色法在37℃评估AChE抑制活性。测试溶液由以下各项组成：0.1M磷酸缓冲液pH 8.0，1mM的DTNB，0.10mg/mL的BChE，和1mM丁酰硫代胆碱作为酶促反应的底物。检测时，将待检测的化合物加入由0.1M磷酸缓冲液pH 8.0、1mM的5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB，Ellman’s试剂)和0.10mg/mLBChE组成的混合液中，使待检测的化合物与BChE在37℃下预孵育5分钟。该时间后，加入1mM丁酰硫代胆碱作为底物。用多功能酶标仪记录在412nm的吸光度变化2分钟，比较反应速率，计算由于测试化合物的存在导致的百分比抑制。用至少三次的独立测量值计算反应速率，将IC50定义为相对于没有抑制剂下将酶活性降低50％的每种化合物的浓度。结果在表1中显示。
试验例三:生物学评估
抑制Aβ自聚集作用实验
将1mg Aβ42蛋白溶解于1mL的体积分数为1％NH4OH溶液中，PBS(pH＝8.0)稀释为100μM。取5μL 100μM的Aβ42蛋白与5μL 20μM的化合物于37℃中共同孵育72h。空白对照为5μL100μM的Aβ42蛋白与5μL的无菌水；阳性对照为5μL 100μM的Aβ42蛋白与15μL 20μM的姜黄素。72h后，使用硫磺素T(thioflavin T)荧光检测方法定量测定淀粉样蛋白纤维形成。因此，在孵育之后，样品用浓度为5μM的硫磺素T的甘氨酸-NaOH缓冲液(甘氨酸浓度为50mM，用NaOH调pH值为8.50)稀释到2mL。采用300秒的荧光强度扫描(激发波长为450nm，吸收波长为482nm)，在减去背景硫磺素T荧光后算每组平均值。结果见表1。
表1、各实施化合物AChE、BChE、Aβ聚集活性结果表
由上表可以看出，实施例一～十具有优于或与他克林相近的胆碱酯酶抑制作用，而且实施例一～十具有明显高于他克林的抑制Aβ聚集活性。
试验例四:生物学评估
体外抗氧化活性
吸取20μL不同浓度的化合物、他克林、姜黄素(阳性对照)或Trolox(水溶性维生素E，标准样)，120μL浓度为136nM的荧光素钠稀释液(75mM pH 7.4的磷酸盐缓冲液配制)于96孔荧光板中，排枪混匀，37℃孵育15min后，快速加入浓度为40.0mM的AAPH60μL(75mM pH7.4的磷酸盐缓冲液配制)，以激发波长485nm，发射波长为535nm每隔1min进行测定并记录荧光值共180min，以20μL缓冲液(75mM pH 7.4的磷酸盐缓冲液)代替化合物作为空白。保护面积按照下式计算：
f0是在0min的荧光值，fi是在I min的荧光值
(2)样品的保护面积计算公式：Net AUC＝AUC样品–AUC空白
(3)ORAC-FL值计算：[(AUC样品–AUC空白)/(AUCTrolox–AUC空白)]×[Trolox的浓度/样品的浓度)]，样品ORAC值以Trolox(标准样)值当量表达。
结果表明，他克林没有抗氧化活性，ORAC值为0.1，姜黄素(阳性对照)的ORAC值为2.47，实施例一～十的ORAC值均大于他克林，数值均大于1，表明抗氧化活性比Trolox(标准样)好，数值在1.0-5.0之间，显示出明显的抗氧化活性。
试验例五:生物学评估
体内肝毒性测试
取成年SD大鼠，按照25℃，12小时的黑白夜，合适的湿度饲养。他克林盐酸水合物(购于Sigma公司)溶解在pH为7.4的PBS中，按照1.5mg/100g腹膜内给药。待测化合物(实施例六)溶解在的生理盐水中，按照与他克林等摩尔量腹腔给药。在给药后12，24，36小时后从眼后静脉丛收集肝素化血清，用常规方法检测ASST，LDH和白蛋白浓度。在给药后24和36小时处死他克林组和待测化合物组大鼠，取出肝脏根据Biuret检测组织蛋白浓度，与未给药的空白组比较。结果发现他克林组体内肝毒性各指标与空白组对照变化明显，而待测化合物组数据与空白组相近，表明化合物的肝毒性较他克林低。
尽管以上的描述具有许多特性，但只是本发明的一些优选的实施方案，并非用于限制本发明的范围。
Claims (4)
1.他克林-二甲胺基黄酮杂合物的制备方法，其特征在于，合成路线如下：
具体合成步骤是：
一、将溶解在正戊醇中，加入催化剂碘化钾和或，加热回流至反应完全，蒸干溶剂，三氯甲烷稀释，碱洗，干燥，浓缩纯化得到或；
二、将溶解在丙酮中，加入和无水碳酸钾，加热回流后，蒸干溶剂，加入乙酸乙酯稀释，水洗，干燥，浓缩纯化得到式I所示杂合物；
三、将二甲氨基-7-羟基黄酮、无水碳酸钾、催化量的碘和加入到丙酮中，加热回流后，蒸干溶剂，加入三氯甲烷稀释，水洗，干燥，浓缩纯化得到中间体；
四、将上述步骤三所得中间体、碳酸钠加入到DMSO和水的混合液中，加热反应完成后，倒入稀盐酸溶液中，过滤，干燥，得到中间体；
五、将上述步骤四所得中间体、或加入到三氯甲烷中，加入缩合剂，反应完成后加入饱和食盐水洗涤，干燥，浓缩纯化得到式II所示杂合物，上述合成路线和合成步骤中，R1=H或Cl，R2=H或Cl；Y=CH2，NCH3，NH，羰基，乙二酰基，1,3-丙二酰基，对环己烷基，或OCH2CH2O；m=0~4，n=0~4；x=1~3，A=NH或O；m、n和x均取整数。
2.根据权利要求1所述的他克林-二甲胺基黄酮杂合物的制备方法，其特征在于：所述缩合剂为EDC和NHS中的至少一种。
3.权利要求1或2所述制备方法制得的他克林-二甲胺基黄酮杂合物。
4.权利要求3所述杂合物在制备预防、治疗胆碱酯酶或淀粉样蛋白或氧化应激介导的神经退行性疾病药物中的应用。
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| Multifunctional tacrine-flavonoid hybrids with cholinergic,beta-amyloid-reducing, and metal chelating properties for the treatment of Alzheimer’s disease;Su-Yi Li，等;《European Journal of Medicinal Chemistry》;20130921;第69卷;第635-637页 * |
| 胆碱酯酶抑制剂他克林-单甲氧芳基杂合物的设计、合成及活性评价;罗稳，等;《药学学报》;20121231;第47卷(第7期);第917-918页 * |
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