CN105628942A - 人尿液α1-酸性糖蛋白检测试剂盒 - Google Patents

人尿液α1-酸性糖蛋白检测试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种人尿液α1-酸性糖蛋白检测试剂盒。该试剂盒包含试剂R1、试剂R2以及任选地校准品，试剂R1包含pH5.5-9的缓冲液，试剂R2包含包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒。包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒与抗原结合，形成可以检测到的浊度变化。本试剂盒能够精确的检测尿液中微量的α1-酸性糖蛋白，重复性、灵敏度好，能够满足快速检测样本的要求，具有临床应用价值。

Description

人尿液α1-酸性糖蛋白检测试剂盒
技术领域
本公开涉及医学免疫体外诊断领域，具体涉及一种用胶乳增强免疫透射比浊法检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒。
背景技术
α1-酸性糖蛋白(α1-acidglycoprotein，AAG，早期称之为乳清粘蛋白)分子量近40kD，含糖量约45％，pI为2.7-3.5，包括等分子的已糖、已糖胺和唾液酸。AAG是主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时增高，显然与免疫预防功能有关。AAG由肝和某些肿瘤组织合成。分解代谢首先经过唾液酸的分子降解而后蛋白质部分很快在肝中消失。AAG可以结合利多卡因和普萘洛尔，在急性心肌梗死时AAG作为一种急性时相反应蛋白可以升高，而干扰药物剂量的有效浓度(如王克夷，1991)。
AAG是目前较为敏感的急性期反应的炎症标志物，是急性时相反应物之一。其对炎症、感染反应早于体温及白细胞数的变化，故广泛用于临床。
2型糖尿病肾病是糖尿病的主要并发症之一，也是近年来糖尿病患者死亡的主要原因之一。如果能在2型糖尿病患者糖尿病肾病发生的早期及时作出诊断并进行干预性治疗，肾脏的微损病变可以得到好的控制甚至发生逆转。目前，国内外普遍将24h尿白蛋白排泄率测定作为糖尿病肾病早期诊断的重要指标。但是，最近一系列的研究报道却对尿白蛋白在预测和诊断糖尿病肾病中的可靠性提出了质疑，认为其特异性和敏感度并不是很理想。将尿中的AAG作为辅助诊断指标之一，对2型糖尿病患者糖尿病肾病的发生发展有较好的预测价值(如鞠北华等人，2013年；ChristiansenM.S等人2005；)。健康的人尿中的AAG的含量为0.29至0.68mg/24h。高于一定的阈值，则肾组织损害不可逆转，且肾功能受损加剧的几率很大。
目前，市场上检测α1-酸性糖蛋白的试剂盒由于灵敏度低，样本仅限于血清，无法检测人尿液中α1-酸性糖蛋白(例如CN103076456A和CN103529221A中所公开的试剂盒)。针对人尿中AAG含量较少，本领域所要解决的技术问题是提供一种胶乳增强免疫透射比浊法检测人尿液中酸性糖蛋白含量的试剂盒，其灵敏度高、重复性好、操作简单、能够进行批量样本检测。
发明内容
鉴于上述技术问题，本公开提供一种检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，该试剂盒包含：第一试剂、第二试剂和任选地校准品。
在一些实施方式中，所述第一试剂包含缓冲液、电解质、表面活性剂、稳定剂、防腐剂。在一些实施方式中，所述的第二试剂包含：缓冲液、包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒、电解质、防腐剂。在一些实施方式中，所述校准品包含：缓冲液、浓度已知的α1-酸性糖蛋白、稳定剂、防腐剂、抗氧化剂。
在一些实施方式中，所述第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液的pH在5.5至9.0之间；例如5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5；在一些具体的实施方式中，缓冲液的pH在6.0至7.5之间。在本申请上下文中，表述“在…之间”包含端点值。
在一些实施方式中，所述第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液的浓度在10至100mmol/L之间；例如，10、12、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100mmol/L；在一些具体的实施方式中，浓度在10至25mmol/L之间。
在一些实施方式中，第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液各自独立地选自：TRIS/HCl缓冲液、PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、巴比妥缓冲液及其组合。在一些具体的实施方式中，缓冲液是TRIS/HCl缓冲液。
在一些实施方式中，第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液的种类、浓度或pH值分别是相同的或者是不同的。
在一些具体的实施方式中，第一试剂中缓冲液是TRIS/HCl缓冲液，pH在7.0至7.5之间，且浓度在15至25mmol/L之间；优选为20mmol/LpH为7.5的TRIS/HCl缓冲液。
在一些具体的实施方式中，第二试剂中缓冲液是TRIS/HCl缓冲液，pH在7.0至7.5之间，且浓度在10至15mmol/L之间；优选为10mmol/LpH为7.5的TRIS/HCl缓冲液。
在一些具体的实施方式中，校准品中缓冲液是TRIS/HCl缓冲液，pH在6.0至6.5之间，且浓度在10至15mmol/L之间；优选为15mmol/LpH为6.0的TRIS/HCl缓冲液。
在一些实施方式中，所述第一试剂中电解质的浓度在50至500mmol/L之间，例如75、100、120、150、200、250、300、350、400、450mmol/L。在一些实施方式中，所述第二试剂中电解质的浓度在10至300mmol/L之间，例如10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、120、150、200、250、300mmol/L。在一些实施方式中，第一试剂和第二试剂中电解质各自独立地选自：氯化钠、氯化镁、氯化钾、硫酸镁及其组合。第一试剂和第二试剂中的电解质的种类或浓度是相同的或者是不同的。在一些具体的实施方式中，电解质是250mmol/L氯化钠。
在一些实施方式中，第一试剂、第二试剂和校准品中防腐剂的浓度在0.1g/100ml至1g/100ml之间；例如0.1、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0g/100ml。第一试剂、第二试剂和校准品中防腐剂各自独立地选自：叠氮钠、叠氮锂、山梨酸钾、亚硝酸钠及其组合。所述第一试剂、第二试剂和校准品中的防腐剂的种类或浓度是相同的或者是不同的。在一些具体的实施方式中，防腐剂是0.1g/100ml的叠氮钠。
在一些实施方式中，所述第一试剂和校准品中稳定剂的浓度在0.1g/100ml至3g/100ml之间，例如0.1、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0g/100ml。在一些实施方式中，第一试剂和校准品中稳定剂各自独立地选自：甘露糖、葡萄糖、壳聚糖、山梨醇及其组合。所述第一试剂和校准品中的稳定剂是相同的或者是不同的。在一些具体的实施方式中，第一试剂和校准品中稳定剂是0.1g/100ml的山梨醇。
在一些实施方式中，第一试剂的表面活性剂的浓度在0.1g/100ml至1g/100ml之间；例如0.1、0.2、0.3、0.5、0.6、0.8、1.0g/100ml。在一些实施方式中，表面活性剂选自：非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂及其组合。非离子表面活性剂选自：Tween、TritonX-100及其组合。阴离子表面活性剂选自：SDS、脂肪醇聚氧乙烯磺酸钠、聚茴脑磺酸钠及其组合。在一些具体的实施方式中，表面活性剂是0.1至0.5g/100ml的非离子表面活性剂。在一些具体的实施方式中，表面活性剂是0.1g/100ml的Tween，优选Tween-20或Tween-80。
在一些实施方式中，校准品中抗氧化剂的浓度在0.1g/100ml至5.0g/100ml之间；例如0.1、0.2、0.3、0.5、0.6、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5g/100ml。在一些实施方式中，抗氧化剂选自：没食子酸丙酯、二丁基羟基苯、叔丁基对羟基茴香醚及其组合。在一些具体的实施方式中，抗氧化剂是0.1g/100ml的二丁基羟基苯。
在一些实施方式中，α1-酸性糖蛋白抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。所述α1-酸性糖蛋白抗体选自：羊抗人抗体、兔抗人抗体、鼠抗人抗体、鸡抗人抗体和鸭抗人抗体。
在一些实施方式中，α1-酸性糖蛋白抗体在第二试剂中的浓度是10mg/L至50mg/L之间；例如10、20、24、25、30、35、40、45、50mg/L，优选15至25mg/L。
在一些实施方式中，胶乳颗粒的粒径在50nm至250nm之间，优选100nm至200nm之间，更优选100至150nm，例如100、120、130、140、150nm。所述胶乳颗粒是羧基修饰的聚苯乙烯胶乳颗粒。在一些实施方式中，包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒浓度在0.1g/100ml至5.0g/100ml之间；例如0.1、0.2、0.3、0.5、0.6、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5g/100ml。在一些具体的实施方式中，包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒浓度是0.1g/100ml或0.2g/100ml。在一些实施方式中，胶乳颗粒物理吸附至或化学交联至α1-酸性糖蛋白抗体。
在一些实施方式中，所述校准品中α1-酸性糖蛋白的浓度在0.20mg/L至6.00mg/L之间。可用于本公开试剂盒的校准品是市售校准品或者根据需要的浓度自行配制。技术人员理解，校准品的用途在于绘制标准曲线，从而使未知浓度的待测样本在标准曲线上得到对应的读值。通常而言，三个已知浓度即可绘制标准曲线。在一些实施方式中，校准品包含3至7不同的α1-酸性糖蛋白浓度。在一些实施方式中，校准品包含5不同的α1-酸性糖蛋白浓度。尽管本申请中采用了特定的浓度，但是技术人员理解α1-酸性糖蛋白的浓度分别为，但不限于0.00mg/L、0.20mg/L、1.00mg/L、3.00mg/L、4.50mg/L、6.00mg/L。
在一些具体的实施方式中，本公开涉及一种用于检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的胶乳增强免疫透射比浊试剂盒，其包含：试剂R1、试剂R2和5个已知浓度的α1-酸性糖蛋白校准品，其中：
·试剂R1，包含：
缓冲液10至100mmol/L，pH5.5-9.0；
电解质50至500mmol/L；
表面活性剂0.1g/100ml至1g/100ml；
稳定剂0.1g/100ml至3g/100ml；和
防腐剂0.1g/100ml至1g/100ml，
·试剂R2，包含：
缓冲液10至100mmol/LpH5.5-9.0；
包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒：0.1g/100ml至5.0g/100ml，其中α1-酸性糖蛋白抗体在试剂R2中的浓度为10至30mg/L；
电解质10至200mmol/L；
防腐剂0.1g/100ml至1g/100ml，以及
·校准品，包含：
缓冲液10至100mmol/LPH5.5至9.0；
α1-酸性糖蛋白0.20至6.00mg/L；
稳定剂0.1g/100ml至3.0g/100ml；
防腐剂0.1g/100ml至1g/100ml；
抗氧化剂0.1g/100ml至5.0g/100ml。
在一些具体的实施方式中，本公开涉及一种用于检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的胶乳增强免疫透射比浊试剂盒，其包含：试剂R1、试剂R2和任选地5个已知浓度的α1-酸性糖蛋白校准品，其中：
试剂R1，包含或由以下组成：
试剂R2，包含或由以下组成：
校准品，包含或由以下组成：
在另一个实施方式中，本公开涉及一种用于检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的胶乳增强免疫透射比浊试剂盒，其包含：试剂R1、试剂R2和任选地5个已知浓度的α1-酸性糖蛋白校准品，其中：
试剂R1，包含或由以下组成：
试剂R2，包含或由以下组成：
校准品，包含或由以下组成：
在另一个实施方式中，本公开涉及一种用于检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的胶乳增强免疫透射比浊试剂盒，其包含：试剂R1、试剂R2和任选地5个已知浓度的α1-酸性糖蛋白校准品，其中：
试剂R1，包含或由以下组成：
试剂R2，包含或由以下组成：
校准品，包含或由以下组成：
在另一个实施方式中，本公开涉及一种用于检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的胶乳增强免疫透射比浊试剂盒，其包含：试剂R1、试剂R2和任选地5个已知浓度的α1-酸性糖蛋白校准品，其中：
试剂R1，包含或由以下组成：
试剂R2，包含或由以下组成：
校准品，包含或由以下组成：
本公开的试剂盒采用胶乳增强免疫透射比浊法。胶乳增强免疫透射比浊法的反应原理是：包被了特异性抗体的胶乳颗粒与样本中的α1-酸性糖蛋白特异性结合，形成不溶性的抗原-抗体-胶乳颗粒复合物，产生一定的浊度，其浊度与样本中的α1-酸性糖蛋白抗原浓度成正比关系，在一定的波长下进行浊度测定，可测得样本中被检测的α1-酸性糖蛋白的含量。
附图说明
图1.本公开试剂盒和对照试剂盒的校准曲线。
■：本公开试剂盒1，◆：本公开试剂盒2，×：本公开试剂盒3，●：本公开试剂盒4，▲：对照试剂盒。
具体实施方式
实施例1.本公开试剂盒1的制备：
1.配制试剂R1：
2.试剂R2制备方法：
(1)称取7.5mg碳化二亚胺加入到15ml的pH7的磷酸盐缓冲溶液中溶解混匀，配成终浓度为0.5mg/mL的溶液；向其中加入1.5ml粒径100nm的聚苯乙烯胶乳混匀，配成浓度为1g/100ml的胶乳，37℃摇床反应1h，形成活化的聚苯乙烯胶乳。
(2)将0.5ml的α1-酸性糖蛋白抗体(4.2mg/ml，多抗)加入到活化的聚苯乙烯胶乳溶液中，37℃摇床3h混匀。
(3)在步骤(2)获得的溶液中加入1ml的封闭液(含有2mg/ml吐温-20的甘氨酸缓冲液，pH7.5)，常温(22至28℃)摇床过夜。
(4)4℃，15000rpm，离心40min。用5ml去离子水溶解胶乳颗粒，离心清洗。
(5)加入150ml的工作液(250mmol/L的NaCl、10mmol/LpH7.5的TRIS/HCl缓冲液、叠氮钠0.1g/100ml)，超声重悬后得到乳白色的R2试剂。R2试剂中胶乳颗粒的终浓度为0.1g/100ml，α1-酸性糖蛋白抗体的终浓度为24mg/L。
3.校准品：
按照需要的校准品浓度将α1-酸性糖蛋白(购自：EastCoastBio)添加到上述溶液中，制备得到α1-酸性糖蛋白校准品，该校准品直接配制成6个不同浓度的参考校准品。α1-酸性糖蛋白分别是：0.00mg/L、0.20mg/L、1.00mg/L、3.00mg/L、4.50mg/L、6.00mg/L。然后用0.22μm的滤膜过滤除菌，放置2-8℃保存。
试剂R1为无色透明液体，R2为乳白色液体，校准品为浅黄色透明溶液。
实施例2：本公开试剂盒2的制备
1.试剂R1同实施例1。
2.试剂R2的制备方法同实施例1，差别仅在于聚苯乙烯胶乳的粒径改为150nm。
实施例3：本公开试剂盒3的制备
1.试剂R1同实施例1。
2.试剂R2的制备方法同实施例1，差别仅在于R2中聚苯乙烯胶乳的浓度改为0.2g/100ml。
实施例4：本公开试剂盒4的制备
1.试剂R1同实施例1。
2.试剂R2的制备方法同实施例1，差别仅在于：改变条件为加入的α1-酸性糖蛋白抗体的浓度为15mg/ml，即R2中α1-酸性糖蛋白抗体的浓度为50mg/L。
实施例5：试剂盒测定方法
1.参数设置
试剂R1/R2/样本体积：150/100/5μL
主/副波长：340/700
分析方法：两点终点法
反应方向：上升反应
校准方式：Spline
测定温度：37℃
定标方法：6点定标
反应时间：10min
2.操作步骤：将样本与试剂R1混匀后在37℃孵育5min，然后加入试剂R2，测定反应两个点的吸光度值(A1、A2)，计算吸光度差值。
适用于奥林巴斯AU400、日立7080全自动生化分析仪。
实施例6：对照试剂盒的制备
1.试剂R1：
2.试剂R2制备方法如下：
3.校准品：同实施例1。
试剂R1、R2为无色透明液体。
对照试剂盒的使用方法同实施例5。
实施例7：本公开的试剂盒与对照试剂盒的对比
1.标准曲线：
使用日立7080全自动生化分析仪测得的6个不同浓度α1-酸性糖蛋白标准曲线，本公开试剂盒1-4和对照试剂盒标准曲线如图1所示。x轴表示校准品的浓度，y轴表示各个浓度对应的吸光度。
2.精密度试验
采用上述所述的标准曲线，检测高低值质控(0.32、4.13mg/L，自行配制)。每个质控重复测量10次，分别计算测量值的平均值(M)和标准差(SD)，计算变异系数(CV)，(CV＝SD/M*100％)。
表1.本公开试剂盒1精密度实验
质控(mg/L) 0.32 4.13
重复次数 10 10
M 0.317 4.139
SD 0.012 0.057
CV％ 3.66 1.39
偏差％ -0.94 0.22
表2.本公开试剂盒2精密度实验
质控(mg/L) 0.32 4.13
重复次数 10 10
M 0.313 4.215
SD 0.03 0.35
CV％ 10.56 8.42
偏差％ -2.19 2.06
表3.本公开试剂盒3精密度实验
质控(mg/L) 0.32 4.13
重复次数 10 10
M 0.22 3.473
SD 0.021 0.19
CV％ 9.68 5.55
偏差％ -32.19 -15.91
表4.本公开试剂盒4精密度实验
质控(mg/L) 0.32 4.13
重复次数 10 10
M 0.247 3.267
SD 0.02 0.09
CV％ 6.29 2.78
偏差％ -22.81 -20.9
表5.对照试剂盒精密度实验
质控(mg/L) 0.32 4.13
重复次数 10 10
M 0.240 3.082
SD 0.027 0.058
CV％ 11.11 1.88
偏差％ -25.00 -25.38
由表1-5可见，用两种试剂盒检测高低值质控的精密度实验中：
本公开的试剂盒1：高低值质控的CV均＜5％，且高低值质控的偏差＜1％。
本公开试剂盒2：低值质控的CV＜15％，高值质控的CV＜10％，高低值质控的偏差＜3％。
本公开试剂盒3：高低值质控的CV＜10％，高低值质控的偏差＞15％。
本公开试剂盒4：高低值质控的CV＜10％，高低值质控的偏差＞20％。
对照试剂盒：低值质控的CV＞10％，高低值质控的偏差＞25％。
本公开试剂盒1的精密度较高，且胶乳粒径的大小、浓度以及α1-酸性糖蛋白抗体的浓度会影响试剂盒的检测精密度。
3.灵敏度实验
以去离子水为空白样本，选取一份低值尿液。样本进行倍比稀释，配制出不同浓度的样本。本公开试剂盒和对照试剂盒对同一样本连续检测10次，计算吸光度均值和标准差，以样本的浓度-3SD大于空白吸光度3S0的样本浓度作为本公开试剂盒的灵敏度范围。
由表6和7可以看出本公开试剂盒1的生物检测线低于0.05mg/L，检测低限为0.05*4.71/29＝0.008mg/L。
由表8和9可以看出本公开试剂盒2的生物检测线低于0.05mg/L，检测低限为0.05*5.40/30.80＝0.009mg/L。
由表10和11可以看出本公开试剂盒3的生物检测线为0.1mg/L，检测低限为0.05*8.10/22.30＝0.018mg/L。
由表12和13可以看出本公开试剂盒4的生物检测线为0.1mg/L，检测低限为0.05*7.12/20.50＝0.017mg/L。
由表14和15可以看出对照试剂盒的生物检测线为0.1mg/L，检测低限为0.05*6.03/14.3＝0.021mg/L。
本公开试剂盒1和2具有最高的灵敏度，本公开试剂盒3和4次之，以及对照试剂盒的灵敏度最低。
表6.本公开试剂盒1灵敏度测试结果
表7.本公开试剂盒1灵敏度测试结果
表8.本公开试剂盒2灵敏度测试结果
表9.本公开试剂盒2灵敏度测试结果
表10.本公开试剂盒3灵敏度测试结果
表11.本公开试剂盒3灵敏度测试结果
表12.本公开试剂盒4灵敏度测试结果
表13.本公开试剂盒4灵敏度测试结果
表14.对照试剂盒的灵敏度测试结果
表15.对照试剂盒的灵敏度测试结果
参考文献
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Claims (9)

1.一种检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其包含：
第一试剂、
第二试剂、以及
任选地校准品，
其中，
所述第一试剂包含：缓冲液、电解质、表面活性剂、稳定剂和防腐剂；
所述第二试剂包含：缓冲液、包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒、电解质和防腐剂；
所述校准品包含：缓冲液、α1-酸性糖蛋白、稳定剂、防腐剂和抗氧化剂。
2.根据权利要求1所述的检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其中：
所述第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液的pH在5.5至9.0之间，浓度在10至100mmol/L之间；
第一试剂、第二试剂和校准品中缓冲液各自独立地选自：TRIS/HCl缓冲液、PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、巴比妥缓冲液及其组合；
所述第一试剂、第二试剂和校准品中的缓冲液是相同的或者是不同的。
3.根据权利要求1所述的检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其中：
所述第一试剂中电解质的浓度在50至500mmol/L之间；
所述第二试剂中电解质的浓度在10至300mmol/L之间；
所述第一试剂和第二试剂中电解质各自独立地选自：氯化钠、氯化镁、氯化钾、硫酸镁及其组合；
所述第一试剂和第二试剂中的电解质是相同的或者是不同的。
4.根据权利要求1所述的检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其中：
所述第一试剂、第二试剂和校准品中防腐剂的浓度在0.1g/100ml至1g/100ml之间；
第一试剂、第二试剂和校准品中防腐剂各自独立地选自：叠氮钠、叠氮锂、山梨酸钾、亚硝酸钠及其组合；优选叠氮钠；
所述第一试剂、第二试剂和校准品中的防腐剂是相同的或者是不同的。
5.根据权利要求1所述的检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其中：
所述第一试剂和校准品中稳定剂的浓度在0.1g/100ml至3g/100ml之间；
第一试剂和校准品中稳定剂各自独立地选自：甘露糖、葡萄糖、壳聚糖、山梨醇及其组合；
所述第一试剂和校准品中的稳定剂是相同的或者是不同的。
6.根据权利要求1所述的检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其中：
所述表面活性剂的浓度在0.1g/100ml至1g/100ml之间；
所述表面活性剂选自：非离子表面活性剂、阴离子表面活性剂及其组合，
所述非离子表面活性剂选自：Tween、TritonX-100及其组合；
所述阴离子表面活性剂选自：SDS、脂肪醇聚氧乙烯磺酸钠、聚茴脑磺酸钠及其组合；优选地，所述表面活性剂是Tween。
7.根据权利要求1所述的检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其中：
所述抗氧化剂的浓度在0.1g/100ml至5.0g/100ml之间；
所述抗氧化剂选自：没食子酸丙酯、二丁基羟基苯、叔丁基对羟基茴香醚及其组合。
8.根据权利要求1所述的检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其中：
所述α1-酸性糖蛋白抗体是单克隆抗体或多克隆抗体，并且所述α1-酸性糖蛋白抗体选自：羊抗人抗体、兔抗人抗体、鼠抗人抗体、鸡抗人抗体和鸭抗人抗体；
所述胶乳颗粒的粒径在50nm至250nm之间，优选100nm至200nm；
所述胶乳颗粒是羧基修饰的聚苯乙烯胶乳颗粒；
所述包被有α1-酸性糖蛋白抗体的胶乳颗粒浓度在0.1g/100ml至5.0g/100ml之间；
α1-酸性糖蛋白抗体的浓度：10mg/L至50mg/L之间，优选10mg/L至30mg/L之间；更优选20至25mg/L。
9.根据权利要求1所述的检测人尿液中α1-酸性糖蛋白的试剂盒，其中：
所述校准品中α1-酸性糖蛋白的浓度在0.20mg/L至6.00mg/L之间；优选所述校准品包含3至7个不同的α1-酸性糖蛋白浓度。
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