CN105567749A - 一种淀粉质原料的处理方法及其在柠檬酸制备工业上的应用 - Google Patents

一种淀粉质原料的处理方法及其在柠檬酸制备工业上的应用 Download PDF

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CN105567749A CN201610135144.7A CN201610135144A CN105567749A CN 105567749 A CN105567749 A CN 105567749A CN 201610135144 A CN201610135144 A CN 201610135144A CN 105567749 A CN105567749 A CN 105567749A
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李江华
蒋小东
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孙福新
彭艳红
王宝石
王莉
李由然
谭风玲
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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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Abstract

本发明公开一种淀粉质原料的处理方法,以柠檬酸废水为原料,包括原料粉碎、调浆、一次加酶一次喷射、闪蒸、固液分离步骤,所述酶选自耐酸型α—高温淀粉酶,该方法能适应低pH液化条件,既可大大简化操作,降低能耗和生产成本,又能保证理想的蛋白絮凝和提纯效果,减少对后续发酵和提纯造成的负面影响;将本发明方法应用柠檬酸制备工业,种子生长速率显著加快,种子培养周期缩短,发酵指标进一步提高,发酵周期缩短,转化率提高,具有重要工业应用价值。

Description

一种淀粉质原料的处理方法及其在柠檬酸制备工业上的应用
技术领域
本发明涉及淀粉质原料制备方法,尤其涉及一种适应柠檬酸废水回流工艺
的淀粉质原料处理方法,及其在柠檬酸制备工业上的应用。属于化工和生物发酵技术领域。
背景技术
柠檬酸是一种重要的有机酸,又名枸橼酸,无色无臭,有很强的酸味,易溶于水,在工业,食品业,化妆业等具有极广泛的用途。目前,柠檬酸主要通过发酵法生产获得,以玉米等淀粉质农作物作为原料。淀粉质原料处理方法通常需要经过粉粹、调浆、喷射液化、固液分离等工序。
传统工艺中,淀粉质原料粉碎调浆后,需加氢氧化钙将粉浆的pH控制在5.8~6.2;一次加酶后经过95~105℃高温喷射,保温1~4h后再经过115~135℃的二次喷射,闪蒸降温至95~99℃,二次加酶,维持0.5~2h,得到合格的液化液;为提高蛋白的絮凝效果,通常需要加酸将液化液的pH调至5.0~5.2,再进行固液分离。上述工艺存在以下缺陷:(1)采用二次加酶二次高温喷射的液化工艺,原料处理时间长,工艺设备流程长,显著增加能耗,如申请号201110220758.2的专利“一种淀粉质原料的处理方法和柠檬酸的制备方法”,申请号201110271718.0的专利“一种淀粉质原料的处理方法和应用”,以及申请号201310105118.6的专利“一种制备柠檬酸的方法”均公开了二次加酶二次高温喷射的液化工艺,均公开了二次加酶二次高温喷射的工艺手段;(2)整个原料处理过程中需进行多次pH调节,增加了酸碱消耗,费时费力,另外,还增加了液化液中的离子浓度,给后续发酵和柠檬酸提纯造成负面影响;(3)原料高温处理时间长,特别是第二次喷射温度温度大于115℃,导致液化液中糖和氮的的美拉德反应加剧,产生的有害色素增加,糖液颜色加深,不利于后续发酵和柠檬酸提纯;(4)二次喷射温度较高,导致酶失活,增加了酶用量。
目前,柠檬酸废水回流生产柠檬酸,见申请号201410321671.8的专利“柠檬酸废水回流发酵生产柠檬酸的方法”,已应用于生产。但由于柠檬酸废水pH较低,如回用的中和废糖水pH为4.5~5.2,色谱分离残液pH为2.0~3.0,导致废水回流调浆后粉浆pH无法满足高温淀粉酶的最适pH范围,需要添加更多的碱液或石灰,制约了柠檬酸废水回流工艺的应用。
综上所述,亟需开发一种适应柠檬酸废水回流工艺的能在低pH条件下进行液化,既能降低能耗,工艺简单,省时省力,又能保证蛋白絮凝和提纯效果的淀粉质原料处理方法。
发明内容
针对现有工艺存在的上述缺陷,本发明的目的之一在于提供一种适应柠檬酸废水回流工艺的淀粉质原料处理方法,该方法能适应低pH液化条件,既可简化操作,降低能耗和生产成本,又能保证理想的蛋白絮凝和提纯效果。
为了达到上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种淀粉质原料的处理方法,以柠檬酸废水为原料,包括原料粉碎、调浆、一次加酶一次喷射、闪蒸、固液分离步骤,所述酶选自耐酸型α—高温淀粉酶。
该方法具体包括以下步骤:
(1)将淀粉质原料粉碎后所得粉末与柠檬酸废水混合得到粉浆,在pH4.5~5.5的条件下,加入所述耐酸性α—高温淀粉酶;
(2)将步骤(1)所制粉浆于97~108℃进行喷射,所得料液进行闪蒸,降温至95~99℃,保温1~3h,碘试合格后得到液化液。
其中,
步骤(1)所述粉末为将所述淀粉质原料进行粉碎后过40~100目筛所得。
步骤(1)所述粉浆浓度为20~30%。
步骤(1)所述耐酸性α—高温淀粉酶的添加量为10~40U/g粉末。
具体地,该方法还包括将所述液化液经过板框过滤去掉滤渣得到糖液的步骤,用于过滤的所述液化液比例为70~90%。
具体地,所述淀粉质原料包括玉米、薯干、木薯的一种或多种。
具体地,所述柠檬酸废水至少包括中和废糖水、色谱分离残液及前述两种废水与冷凝水和/或自来水的混合液中的一种。
本发明的另一目的在于提供上述方法在柠檬酸制备工业上的应用:将该方法所制液化液和糖液作为培养基主要营养成分,并以黑曲霉菌作为菌种进行二级发酵。
具体地,种子培养方法为:
用自来水将所述液化液总糖浓度稀释至8~12%,加入氮源使总氮为0.15~0.4%,制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子培养得到种子液。其中,所述氮源为无机氮源和有机氮源中一种或多种;所述无机氮源为硫酸铵和/或硝酸铵;有机氮源为玉米浆、玉米淀粉渣、玉米液化液、豆粕粉、棉籽粉、蛋白胨、酵母膏中的一种或多种;所述黑曲霉孢子接入量为终浓度为15~50万个/毫升,优选为30万个/毫升。
所述种子培养条件为:温度37℃,通过溶氧反馈调控,将氧溶度控制在初始浓度20%以上,培养24~30h。
具体地,发酵培养方法为:
将所述液化液和糖液混合,使总糖为14~18%,总氮为0.06~0.13%,制成发酵培养基;加热至85~95℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液培养得到发酵液。
所述发酵培养条件为:温度37℃,通过溶氧反馈调控,将氧溶度控制在初始浓度40%以上。
如无特殊说明,以上所述百分数均为重量百分数(wt%)。
本发明具有如下有益技术效果:
本发明采用耐酸型α—高温淀粉酶,结合特定工艺参数和条件,创造性地解决了柠檬酸废水回流生产柠檬酸受低pH条件制约的技术难题。在整个原料处理过程中几乎不用调整pH,极大地简化了操作流程,降低了能耗和生产成本,省时省力,提高了生产效率;同时,较低的pH条件增强了蛋白絮凝效果。与传统工艺相比,氢氧化钙和柠檬酸的用量分别节省2.8Kg/t粉末和0.8Kg/t粉末,钙离子浓度下降至原工艺的16%,减少对后续发酵和提纯造成的负面影响。
本发明采用一次加酶一次喷射工艺即可达到理想的液化效果。取消第二次高温喷射,原料处理时间缩短近1.1h,蒸汽消耗减少31%,在液化DE值保持不变的情况下,淀粉酶使用量下降10%;缩短液化停留时间,美拉德反应减弱,色素产生显著下降,糖液浊度下降至原工艺的43%,透光率提高至原工艺的3.9倍。
将本发明方法应用于发酵生产柠檬酸,种子生长速率显著加快,种子培养周期缩短2h,发酵指标进一步提高,发酵周期缩短3h,转化率提高0.6%,具有重要工业应用价值。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步说明。
以下实施例和对比例所涉及原料和试剂(包括耐酸型α—高温淀粉酶、普通型α—高温淀粉酶)均为市售商品;黑曲霉菌来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC),保藏编号CICC40021。如无特殊说明,均采用本领域常用设备和工艺方法。
实施例1
将玉米进行粉碎后,过80目筛;所得玉米粉与中和废糖水和冷凝水混合均匀,使粉浆浓度达到20%,在pH4.8~5.2条件下,按10U/g玉米粉的添加量加入耐酸型α—高温淀粉酶;所得粉浆先经过105℃喷射,再经过闪蒸降温至97℃,保温3h,碘试呈浅棕色后得到合格液化液;将70%的液化液经过板框过滤去掉滤渣,得到糖液。
种子培养基配制:将液化液与自来水混合,将总糖浓度稀释至8%,加入玉米浆使总氮为0.15%,配制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件:温度37℃,通过调整通风比例和罐压将氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后终浓度为30万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:将液化液与糖液混合,使得混合液总糖为14%,总氮为0.06%,制成发酵培养基;加热至85℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件:温度37℃,通过调整通风比例和罐压将氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
实施例2
将玉米进行粉碎后,过80目筛;所得玉米粉与自来水、中和废糖水和色谱残液混合均匀,使粉浆浓度达到28%,在pH4.8~5.0条件下,按25U/g玉米粉的添加量加入耐酸型α—高温淀粉酶;所得粉浆先经过108℃喷射,再经过闪蒸降温至99℃,保温2h,碘试呈浅棕色后得到合格液化液;将75%的液化液经过板框过滤去掉滤渣,得到糖液。
种子培养基配制:将液化液与自来水混合,将总糖浓度稀释至8.5%,不加其他,总氮为0.18%,配制成种子培养基。加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后终浓度为30万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:将液化液与糖液混合,使得混合液总糖为15%,总氮为0.08%,制成发酵培养基;加热至85℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
实施例3
将玉米进行粉碎后,过100目筛;所得玉米粉与中和废糖水和色谱残液混合均匀使粉浆浓度达到25%,在pH4.5~4.8条件下,按30U/g玉米粉的添加量加入耐酸型α—高温淀粉酶;所得粉浆经过102℃喷射,再经过闪蒸降温至97℃,保温2h,碘试呈浅棕色后得到合格液化液;将80%的液化液经过板框过滤去掉滤渣,得到糖液。
种子培养基配制:将液化液与自来水混合,将混合液总糖浓度稀释至10%,加入硝酸铵使得总氮为0.3%,配制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速将氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后浓度为25万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:将液化液与糖液混合,使得混合液总糖为17%,总氮为0.11%,制成发酵培养基;加热至90℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件为:温度37℃,通过调整搅拌转速将氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
实施例4
将玉米进行粉碎后,过80目筛;所得玉米粉与色谱分离残液和冷凝水混合均匀,使粉浆浓度为30%,在pH4.5~5.0条件下,按35U/g玉米粉的添加量加入耐酸型α—高温淀粉酶;所得粉浆先经过100℃喷射,再经过闪蒸降温至95℃,保温1.5h,碘试呈浅棕色后得到合格液化液;将85%的液化液经过板框过滤去掉滤渣,得到糖液。
种子培养基配制:将液化液与自来水混合,将总糖浓度稀释到11%,加入棉粕粉使得总氮为0.35%,配制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件:温度37℃,通过调整通风比例和罐压将氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后浓度为20万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:将液化液与糖液混合,使得混合液总糖为17.5%,总氮为0.12%,制成发酵培养基;加热至90℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件:温度37℃,通过调整通风比例和罐压将氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
实施例5
玉米进行粉碎后,过60目筛;所得玉米粉与中和废糖水混合均匀,使粉浆浓度达到35%,在pH5.0~5.2条件下,按40U/g玉米粉的添加量加入耐酸型α—高温淀粉酶;所得粉浆经过97℃喷射,再经过闪蒸降温至95℃,保温1h,碘试呈浅棕色后得到合格液化液;将90%的液化液经过板框过滤去掉滤渣,得到糖液。
种子培养基配制:将液化液与自来水混合,将总糖浓度稀释到12%,加入豆粕粉和硫酸铵使得总氮为0.4%,配制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速将氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后浓度为15万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:液化液与糖液混合,使得混合液总糖为18%,总氮为0.13%,制成发酵培养基;加热至95℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件为:温度37℃,通过调整搅拌转速将氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
实施例6
将玉米进行粉碎后,过80目筛;所得玉米粉与冷凝水和色谱残液混合均匀,使粉浆浓度达到30%,在pH4.5~4.7的条件下,按20U/g玉米粉的添加量加入耐酸型α—高温淀粉酶;所得粉浆先经过108℃喷射,再经过闪蒸降温至97℃,保温2h,碘试呈浅棕色后得到合格液化液;将75%的液化液经过板框过滤去掉滤渣,得到糖液。
种子培养基配制:将液化液与自来水混合,将总糖浓度稀释到9%,加入硫酸铵使得总氮为0.22%,配制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后浓度为30万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:将液化液与糖液混合,使得混合液总糖为16.5%,总氮为0.09%,制成发酵培养基;加热至95℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
实施例7
将玉米进行粉碎后,过80目筛;所得玉米粉与中和废糖水和自来水混合均匀,使粉浆浓度达到30%,在pH4.8~5.2的条件下,按18U/g玉米粉的添加量加入耐酸型α—高温淀粉酶;所得粉浆先经过108℃喷射,再经过闪蒸降温至97℃,保温2h,碘试呈浅棕色后得到合格的玉米液化液;将75%玉米液化液经过板框过滤去掉滤渣,得到糖液。
种子培养基配制:将液化液与自来水混合将总糖浓度稀释到9%,加入硫酸铵使得总氮为0.22%,配制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件为:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后浓度为30万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:将液化液与糖液混合,使得混合液总糖为16.5%,总氮为0.09%,制成发酵培养基;加热至90℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
实施例8
将玉米进行粉碎后,过80目筛;所得玉米粉与中和废糖水和自来水混合均匀,使粉浆浓度达到30%,在pH4.6~5.0的条件下,按16U/g玉米粉的添加量加入耐酸型α—高温淀粉酶;所得粉浆先经过108℃喷射,再经过闪蒸降温至97℃,保温2h,碘试呈浅棕色后得到合格的玉米液化液;将75%玉米液化液经过板框过滤去掉滤渣,得到糖液。
种子培养基配制:将液化液与自来水混合,将总糖浓度稀释到9%,加入硫酸铵使得总氮为0.22%,配制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件为:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后浓度为30万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:液化液与糖液混合,使得混合液总糖为16.5%,总氮为0.09%,制成发酵培养基;加热至90℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
对比例1
将玉米进行粉碎后,过80目筛;所得玉米粉与中和废糖水和自来水混合均匀,使得粉浆浓度达到30%,加入氢氧化钙将浆料pH调节至6.0,按20U/g玉米粉的添加量加入普通型α—高温淀粉酶;所得粉浆经过二次加酶二次喷射液化,碘试呈浅棕色后得到合格的玉米液化液;将75%玉米液化液用柠檬酸提调节pH至5.0~5.2,再经过板框过滤去掉滤渣,得到玉米糖液。
种子培养基配制:将液化液用自来水将总糖浓度稀释到9%,加入硫酸铵使得总氮为0.22%,配制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子进行种子培养。
种子培养条件:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将溶氧溶度控制在初始浓度20%以上;黑曲霉孢子接种后浓度为30万个/毫升,培养至移种标准后转接至发酵培养基。
发酵培养基配制:将糖液和液化液进行混合,使得混合液总糖为16.5%,总氮为0.09%,制成发酵培养基;加热至90℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液进行发酵培养。
发酵培养条件为:温度37℃,通过调整搅拌转速、通风比例或罐压将溶氧溶度控制在初始浓度40%以上,残还原糖低于0.5%以下或酸度不增加时停止发酵。
对比例2
按对比例1所述方法进行,将玉米粉与色谱残液和自来水混合得到粉浆,其他条件均一致。
对比例3
按对比例1所述方法进行,将玉米粉与中和废糖水、色谱残液及自来水混合得到粉浆,其他条件均一致。
实施例6~8与对比例1~3原料处理过程比较如表1所示。
表1实施例与对比例原料处理过程比较
由表1中实施例6~8与对比例1~3比较可知,在其他条件相同情况下,与原工艺相比,采用本发明所述淀粉质原料的处理方法,氢氧化钙和柠檬酸的用量分别节省2.8Kg/t粉末和0.8Kg/t粉末;液化液达到相同DE值情况下,酶用量减少10%;蒸汽消耗减少31%;原料总处理时间缩短1.1h。
实施例6~8与对比例1~3原料处理结果比较如表2所示。
表2实施例与对比例原料处理结果比较
由表2中实施例6~8与对比例1~3比较可知,在其他条件相同情况下,与原工艺相比,采用本发明所述淀粉质原料的处理方法,糖液浊度下降至原工艺的43%,透光率提高至原工艺的3.9倍,钙离子浓度下降至原工艺的16%;另外,种子培养周期平均缩短2h。
实施例1~8与对比例1~3发酵结果比较如表3所示。
表3实施例与对比例发酵结果比较
由表3中可知,采用本发明所述方法处理淀粉质原料并发酵生产柠檬酸,在不同的原料处理和发酵培养条件下,发酵转化率均能达到较高水平,平均值达到98.2%。由实施例6~8与对比例1~3结果比较可知,在相同总糖浓度下,与原工艺结果相比,发酵周期平均缩短3h,转化率提高0.6%。
如无特殊说明,以上所述百分数均为重量百分数(wt%)。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,本发明不限于以上实施例。可以理解,本领域技术人员在不脱离本发明的精神和构思的前提下直接导出或联想到的其他改进和变化,均应认为包含在本发明的保护范围之内。

Claims (17)

1.一种淀粉质原料的处理方法,其特征在于以柠檬酸废水为原料,包括原料粉碎、调浆、一次加酶一次喷射、闪蒸、固液分离步骤,所述酶选自耐酸型α—高温淀粉酶。
2.根据权利要求1所述淀粉质原料的处理方法,其特征在于具体包括以下步骤:
(1)将淀粉质原料粉碎后所得粉末与柠檬酸废水混合得到粉浆,在pH4.5~5.5的条件下,加入所述耐酸性α—高温淀粉酶;
(2)将步骤(1)所制粉浆于97~108℃进行喷射,所得料液进行闪蒸,降温至95~99℃,保温1~3h,碘试合格后得到液化液。
3.根据权利要求2所述淀粉质原料的处理方法,其特征在于:步骤(1)所述粉末为将所述淀粉质原料进行粉碎后过40~100目筛所得。
4.根据权利要求2所述淀粉质原料的处理方法,其特征在于:步骤(1)所述粉浆浓度为20~30%。
5.根据权利要求2所述淀粉质原料的处理方法,其特征在于:步骤(1)所述耐酸性α—高温淀粉酶的添加量为10~40U/g粉末。
6.根据权利要求2所述淀粉质原料的处理方法,其特征在于该方法还包括将所述液化液经过板框过滤去掉滤渣得到糖液的步骤。
7.根据权利要求6所述淀粉质原料的处理方法,其特征在于:用于过滤的所述液化液比例为70~90%。
8.根据权利要求1所述淀粉质原料的处理方法,其特征在于:所述淀粉质原料包括玉米、薯干、木薯中的一种或多种。
9.根据权利要求1所述淀粉质原料的处理方法,其特征在于所述柠檬酸废水至少包括中和废糖水、色谱分离残液及前述两种废水与冷凝水和/或自来水的混合液中的一种。
10.权利要求1~9任一项所述淀粉质原料的处理方法在柠檬酸制备工业上的应用,其特征在于:将该方法所制液化液和糖液作为培养基主要营养成分,并以黑曲霉菌作为菌种进行二级发酵。
11.根据权利要求10所述的应用,其特征在于:用自来水将所述液化液总糖浓度稀释至8~12%,加入氮源使总氮为0.15~0.4%,制成种子培养基;加热至121℃,保温15min,降温至39℃,接入黑曲霉孢子培养得到种子液。
12.根据权利要求11所述的应用,其特征在于:所述氮源为无机氮源和有机氮源中一种或多种;所述无机氮源为硫酸铵和/或硝酸铵;有机氮源为玉米浆、玉米淀粉渣、玉米液化液、豆粕粉、棉籽粉、蛋白胨、酵母膏中的一种或多种。
13.根据权利要求11所述的应用,其特征在于:所述黑曲霉孢子接入量为终浓度15~50万个/毫升。
14.根据权利要求13所述的应用,其特征在于:所述黑曲霉孢子接入量为终浓度30万个/毫升。
15.根据权利要求11所述的应用,其特征在于所述种子培养条件为:温度37℃,通过溶氧反馈调控,将氧溶度控制在初始浓度20%以上,培养24~30h。
16.根据权利要求10所述的应用,其特征在于:将所述液化液和糖液混合,使总糖为14~18%,总氮为0.06~0.13%,制成发酵培养基;加热至85~95℃时,保温30min,降温至38℃接入种子液培养得到发酵液。
17.根据权利要求16所述的应用,其特征在于所述发酵培养条件为:温度37℃,通过溶氧反馈调控,将氧溶度控制在初始浓度40%以上;
如无特殊说明,以上所述百分数均为重量百分数(wt%)。
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