CN105561374A - 一种利用鱿鱼制备医用伤口敷料的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种利用鱿鱼制备医用伤口敷料的制备方法，属于敷料制备领域。本发明的伤口敷料充分利用了鱿鱼软骨壳聚糖较低的灰分含量、较强的黏性以及较高的水分和脂肪结合能力，同时鱿鱼胶原的低抗原性、低过敏性、易酶解等优点使其具有可生物降解性，不仅解决了传统伤口敷料存在无法保持伤口创面润湿，更换时易引起伤口开裂的缺陷，也解决了使用后需要集中处理，容易造成交叉感染和环境污染的不足，具有极佳的应用前景。

Description

一种利用鱿鱼制备医用伤口敷料的制备方法

技术领域

本发明涉及一种利用鱿鱼制备医用伤口敷料的制备方法，属于敷料制备领域。

背景技术

胶原蛋白是一类重要的纤维蛋白家族，普遍存在于动物体中，是主要的细胞外膜蛋白，约占总蛋白的25%～30%。胶原蛋白是结缔组织的重要组成部分，几乎存在于所有器官的间质组织中，有助于组织、器官的稳定和维持其结构的完整。由于其独特的生化功能，胶原蛋白被应用于多个工业生产领域，如生物医药、医用材料、食品、化妆美容等。通常胶原蛋白是从哺乳动物、牛、猪等的皮和骨等原材料中提取。然而，在疯牛病和口蹄疫爆发后，人们对从水生环境中寻找提取胶原的替代原料产生了极大的兴趣，也因此海洋胶原蛋白替代哺乳动物胶原蛋白被应用具有重要意义。

鱿鱼属软体动物门，头足纲，枪乌贼科，是一种重要的海洋水产品。目前，鱿鱼加工已成为国内水产品加工业的重要组成部分，但加工副产物鱿鱼皮因加工工艺等所限，无良好的增值途径，一般被简单的加工成饲料或掩埋处理。鱿鱼皮含有丰富胶原蛋白，水产动物的胶原蛋白因其低抗原性、低过敏性、易酶解等优点，有着巨大的研究和应用价值。

医用敷料是一种一次性使用的医疗护理用品，使用后的敷料是一种具有高度危险性的医疗废物，容易造成交叉感染和环境污染，需要进行集中处理。我国每年产生大量的敷料废物，给处理工作和环境保护造成巨大的压力，如何对这种危险医疗废物进行减量化已引起人们的高度重视。

传统的纱布敷料存在无法保持创面润湿，创面愈合延迟，常常与伤口粘在一起，更换时易引起伤口开裂，一方面损伤新生组织，不利于伤口愈合，敷料被浸透时，病原体易通过，引起伤口感染，吸液量小，每次的使用量大，资源浪费大，产生的废物量多的问题。

发明内容

本发明主要解决的技术问题：针对目前传统伤口敷料存在无法保持伤口创面润湿，创面愈合延迟，更换时易引起伤口开裂，使病原体易通过，引起伤口感染的问题，提供了一种利用鱿鱼软骨制备壳聚糖和鱿鱼皮胶原复配改性制得的医用伤口敷料，本发明的伤口敷料充分利用了鱿鱼软骨壳聚糖较低的灰分含量、较强的黏性以及较高的水分和脂肪结合能力，同时鱿鱼胶原的低抗原性、低过敏性、易酶解等优点使其具有可生物降解性，不仅解决了传统伤口敷料存在无法保持伤口创面润湿，更换时易引起伤口开裂的缺陷，也解决了使用后需要集中处理，容易造成交叉感染和环境污染的不足，具有极佳的应用前景。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

（1）取2～3kg鱿鱼，用刀切下鱿鱼皮备用，分离出鱿鱼软骨，将其移入1L烧杯中，用质量浓度为8%的盐酸溶液浸没软骨，室温下浸泡脱钙25～35min，取出后用蒸馏水冲洗后再放入锅中，加热至90～100℃，煮沸脱脂10～20min；

（2）脱脂后按料液比为1:15将鱿鱼软骨浸入浓度为0.03mol/L的次氯酸钠溶液中，以200～300w的功率微波处理3～5min，再将处理后的混合液移入布氏漏斗抽滤得到滤渣，放入烘箱中于55～65℃下干燥9～12h得鱿鱼软骨甲壳素；

（3）取50～100g上述制得的鱿鱼软骨甲壳素放入带有搅拌器、滴液漏斗和温度计的三口烧瓶中，将烧瓶移入水浴锅加热升温至80～90℃，再按料液比为1:10向烧瓶中加入质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，启动搅拌器以300～400r/min的转速保温搅拌反应5～7h后，过滤得滤出物，用真空干燥机干燥后得鱿鱼壳聚糖；

（4）将上述备用的鱿鱼皮沥干后，按料液比为1:5和浓度为0.02mol/L的氢氧化钠溶液混合，用玻璃棒搅拌，边搅拌边向混合液中滴加物料总质量1～2%的质量浓度为30%的双氧水，继续搅拌2～3min后将混合液放入冰箱，在4～6℃下静置2～3天，脱色除杂蛋白；

（5）取500～600g预处理后的鱿鱼皮装入陶瓷罐中，向里加入1～2L食用白醋，用搅拌棒搅拌均匀后移入低温冷柜，在6～8℃下磁力搅拌2～3天，搅拌转速为200～300r/min，搅拌结束后以10000～12000r/min的转速进行离心10～15min，分离得到上清液；

（6）将上清液移入2～4℃的冰水浴中，向里逐滴滴加质量浓度为20%的氯化钠溶液，直至无沉淀物析出，将混合液放入卧式离心机，高速离心5～10min分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋中，置于10倍体积的蒸馏水中进行透析，直至透析液中用浓度为0.2mol/L的硝酸银溶液检测不到盐离子为止，得到透析袋中的鱿鱼皮胶原蛋白，经真空冻干机冻干备用；

（7）称取20～30g鱿鱼皮胶原蛋白冻干品，倒入200～300mL浓度为0.1mol/L的乙酸溶液中，再加入3～5g鱿鱼壳聚糖，用玻璃棒搅拌均匀后，于4～5℃下冷冻离心8～12min进行脱气处理，离心转速为7000～9000r/min，将脱气后的混合液倒入5×5×1cm的不锈钢模具中，放入冻干机内层板，先降温至3～5℃进行预冻1～2h，再降至-10～-5℃冻干后即得一种利用鱿鱼制备的医用伤口敷料。

本发明的具体应用方法：本发明制得的医用伤口敷料可以用于各种外科手术、整形手术的术后切口或创面，使用前先用医用酒精将创面周围皮肤擦拭干净，再选用比创面大3～5cm的本发明制得的敷料覆盖创面，之后再以无菌纱布包扎，使敷料与创面紧贴，更换时间根据创面渗出液而定，渗出液多，敷料吸收饱和应及时更换，渗出液少，可隔1～3天更换，如用在面部等特殊部位，可采取相应的方式进行固定。

本发明的有益效果是：本发明的伤口敷料充分利用了鱿鱼软骨壳聚糖较低的灰分含量、较强的黏性以及较高的水分和脂肪结合能力，同时鱿鱼胶原的低抗原性、低过敏性、易酶解等优点使其具有可生物降解性，不仅解决了传统伤口敷料存在无法保持伤口创面润湿，更换时易引起伤口开裂的缺陷，也解决了使用后需要集中处理，容易造成交叉感染和环境污染的不足，具有极佳的应用前景。

具体实施方式

取2～3kg鱿鱼，用刀切下鱿鱼皮备用，分离出鱿鱼软骨，将其移入1L烧杯中，用质量浓度为8%的盐酸溶液浸没软骨，室温下浸泡脱钙25～35min，取出后用蒸馏水冲洗后再放入锅中，加热至90～100℃，煮沸脱脂10～20min；脱脂后按料液比为1:15将鱿鱼软骨浸入浓度为0.03mol/L的次氯酸钠溶液中，以200～300w的功率微波处理3～5min，再将处理后的混合液移入布氏漏斗抽滤得到滤渣，放入烘箱中于55～65℃下干燥9～12h得鱿鱼软骨甲壳素；取50～100g上述制得的鱿鱼软骨甲壳素放入带有搅拌器、滴液漏斗和温度计的三口烧瓶中，将烧瓶移入水浴锅加热升温至80～90℃，再按料液比为1:10向烧瓶中加入质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，启动搅拌器以300～400r/min的转速保温搅拌反应5～7h后，过滤得滤出物，用真空干燥机干燥后得鱿鱼壳聚糖；将上述备用的鱿鱼皮沥干后，按料液比为1:5和浓度为0.02mol/L的氢氧化钠溶液混合，用玻璃棒搅拌，边搅拌边向混合液中滴加物料总质量1～2%的质量浓度为30%的双氧水，继续搅拌2～3min后将混合液放入冰箱，在4～6℃下静置2～3天，脱色除杂蛋白；取500～600g预处理后的鱿鱼皮装入陶瓷罐中，向里加入1～2L食用白醋，用搅拌棒搅拌均匀后移入低温冷柜，在6～8℃下磁力搅拌2～3天，搅拌转速为200～300r/min，搅拌结束后以10000～12000r/min的转速进行离心10～15min，分离得到上清液；将上清液移入2～4℃的冰水浴中，向里逐滴滴加质量浓度为20%的氯化钠溶液，直至无沉淀物析出，将混合液放入卧式离心机，高速离心5～10min分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋中，置于10倍体积的蒸馏水中进行透析，直至透析液中用浓度为0.2mol/L的硝酸银溶液检测不到盐离子为止，得到透析袋中的鱿鱼皮胶原蛋白，经真空冻干机冻干备用；称取20～30g鱿鱼皮胶原蛋白冻干品，倒入200～300mL浓度为0.1mol/L的乙酸溶液中，再加入3～5g鱿鱼壳聚糖，用玻璃棒搅拌均匀后，于4～5℃下冷冻离心8～12min进行脱气处理，离心转速为7000～9000r/min，将脱气后的混合液倒入5×5×1cm的不锈钢模具中，放入冻干机内层板，先降温至3～5℃进行预冻1～2h，再降至-10～-5℃冻干后即得一种利用鱿鱼制备的医用伤口敷料。

实例1

取2kg鱿鱼，用刀切下鱿鱼皮备用，分离出鱿鱼软骨，将其移入1L烧杯中，用质量浓度为8%的盐酸溶液浸没软骨，室温下浸泡脱钙25min，取出后用蒸馏水冲洗后再放入锅中，加热至90℃，煮沸脱脂10min；脱脂后按料液比为1:15将鱿鱼软骨浸入浓度为0.03mol/L的次氯酸钠溶液中，以200w的功率微波处理3min，再将处理后的混合液移入布氏漏斗抽滤得到滤渣，放入烘箱中于55℃下干燥9h得鱿鱼软骨甲壳素；取50g上述制得的鱿鱼软骨甲壳素放入带有搅拌器、滴液漏斗和温度计的三口烧瓶中，将烧瓶移入水浴锅加热升温至80℃，再按料液比为1:10向烧瓶中加入质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，启动搅拌器以300r/min的转速保温搅拌反应5h后，过滤得滤出物，用真空干燥机干燥后得鱿鱼壳聚糖；将上述备用的鱿鱼皮沥干后，按料液比为1:5和浓度为0.02mol/L的氢氧化钠溶液混合，用玻璃棒搅拌，边搅拌边向混合液中滴加物料总质量1%的质量浓度为30%的双氧水，继续搅拌2min后将混合液放入冰箱，在4℃下静置2天，脱色除杂蛋白；取500g预处理后的鱿鱼皮装入陶瓷罐中，向里加入1L食用白醋，用搅拌棒搅拌均匀后移入低温冷柜，在6℃下磁力搅拌2天，搅拌转速为200r/min，搅拌结束后以10000r/min的转速进行离心10min，分离得到上清液；将上清液移入2℃的冰水浴中，向里逐滴滴加质量浓度为20%的氯化钠溶液，直至无沉淀物析出，将混合液放入卧式离心机，高速离心5min分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋中，置于10倍体积的蒸馏水中进行透析，直至透析液中用浓度为0.2mol/L的硝酸银溶液检测不到盐离子为止，得到透析袋中的鱿鱼皮胶原蛋白，经真空冻干机冻干备用；称取20g鱿鱼皮胶原蛋白冻干品，倒入200mL浓度为0.1mol/L的乙酸溶液中，再加入3g鱿鱼壳聚糖，用玻璃棒搅拌均匀后，于4℃下冷冻离心8min进行脱气处理，离心转速为7000r/min，将脱气后的混合液倒入5×5×1cm的不锈钢模具中，放入冻干机内层板，先降温至3℃进行预冻1h，再降至-10℃冻干后即得一种利用鱿鱼制备的医用伤口敷料。

本发明的具体应用方法：本发明制得的医用伤口敷料可以用于各种外科手术、整形手术的术后切口或创面，使用前先用医用酒精将创面周围皮肤擦拭干净，再选用比创面大3cm的本发明制得的敷料覆盖创面，之后再以无菌纱布包扎，使敷料与创面紧贴，更换时间根据创面渗出液而定，渗出液多，敷料吸收饱和应及时更换，渗出液少，可隔1天更换，如用在面部等特殊部位，可采取相应的方式进行固定。

实例2

取3kg鱿鱼，用刀切下鱿鱼皮备用，分离出鱿鱼软骨，将其移入1L烧杯中，用质量浓度为8%的盐酸溶液浸没软骨，室温下浸泡脱钙30min，取出后用蒸馏水冲洗后再放入锅中，加热至95℃，煮沸脱脂15min；脱脂后按料液比为1:15将鱿鱼软骨浸入浓度为0.03mol/L的次氯酸钠溶液中，以250w的功率微波处理4min，再将处理后的混合液移入布氏漏斗抽滤得到滤渣，放入烘箱中于60℃下干燥10h得鱿鱼软骨甲壳素；取80g上述制得的鱿鱼软骨甲壳素放入带有搅拌器、滴液漏斗和温度计的三口烧瓶中，将烧瓶移入水浴锅加热升温至85℃，再按料液比为1:10向烧瓶中加入质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，启动搅拌器以350r/min的转速保温搅拌反应6h后，过滤得滤出物，用真空干燥机干燥后得鱿鱼壳聚糖；将上述备用的鱿鱼皮沥干后，按料液比为1:5和浓度为0.02mol/L的氢氧化钠溶液混合，用玻璃棒搅拌，边搅拌边向混合液中滴加物料总质量1%的质量浓度为30%的双氧水，继续搅拌2min后将混合液放入冰箱，在5℃下静置3天，脱色除杂蛋白；取550g预处理后的鱿鱼皮装入陶瓷罐中，向里加入1L食用白醋，用搅拌棒搅拌均匀后移入低温冷柜，在6℃下磁力搅拌2天，搅拌转速为200r/min，搅拌结束后以10000r/min的转速进行离心10min，分离得到上清液；将上清液移入2℃的冰水浴中，向里逐滴滴加质量浓度为20%的氯化钠溶液，直至无沉淀物析出，将混合液放入卧式离心机，高速离心8min分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋中，置于10倍体积的蒸馏水中进行透析，直至透析液中用浓度为0.2mol/L的硝酸银溶液检测不到盐离子为止，得到透析袋中的鱿鱼皮胶原蛋白，经真空冻干机冻干备用；称取25g鱿鱼皮胶原蛋白冻干品，倒入250mL浓度为0.1mol/L的乙酸溶液中，再加入4g鱿鱼壳聚糖，用玻璃棒搅拌均匀后，于4℃下冷冻离心10min进行脱气处理，离心转速为8000r/min，将脱气后的混合液倒入5×5×1cm的不锈钢模具中，放入冻干机内层板，先降温至4℃进行预冻1h，再降至-8℃冻干后即得一种利用鱿鱼制备的医用伤口敷料。

本发明的具体应用方法：本发明制得的医用伤口敷料可以用于各种外科手术、整形手术的术后切口或创面，使用前先用医用酒精将创面周围皮肤擦拭干净，再选用比创面大4cm的本发明制得的敷料覆盖创面，之后再以无菌纱布包扎，使敷料与创面紧贴，更换时间根据创面渗出液而定，渗出液多，敷料吸收饱和应及时更换，渗出液少，可隔2天更换，如用在面部等特殊部位，可采取相应的方式进行固定。

实例3

取3kg鱿鱼，用刀切下鱿鱼皮备用，分离出鱿鱼软骨，将其移入1L烧杯中，用质量浓度为8%的盐酸溶液浸没软骨，室温下浸泡脱钙35min，取出后用蒸馏水冲洗后再放入锅中，加热至100℃，煮沸脱脂20min；脱脂后按料液比为1:15将鱿鱼软骨浸入浓度为0.03mol/L的次氯酸钠溶液中，以300w的功率微波处理5min，再将处理后的混合液移入布氏漏斗抽滤得到滤渣，放入烘箱中于65℃下干燥12h得鱿鱼软骨甲壳素；取100g上述制得的鱿鱼软骨甲壳素放入带有搅拌器、滴液漏斗和温度计的三口烧瓶中，将烧瓶移入水浴锅加热升温至90℃，再按料液比为1:10向烧瓶中加入质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，启动搅拌器以400r/min的转速保温搅拌反应7h后，过滤得滤出物，用真空干燥机干燥后得鱿鱼壳聚糖；将上述备用的鱿鱼皮沥干后，按料液比为1:5和浓度为0.02mol/L的氢氧化钠溶液混合，用玻璃棒搅拌，边搅拌边向混合液中滴加物料总质量2%的质量浓度为30%的双氧水，继续搅拌3min后将混合液放入冰箱，在6℃下静置3天，脱色除杂蛋白；取600g预处理后的鱿鱼皮装入陶瓷罐中，向里加入2L食用白醋，用搅拌棒搅拌均匀后移入低温冷柜，在8℃下磁力搅拌3天，搅拌转速为300r/min，搅拌结束后以12000r/min的转速进行离心15min，分离得到上清液；将上清液移入4℃的冰水浴中，向里逐滴滴加质量浓度为20%的氯化钠溶液，直至无沉淀物析出，将混合液放入卧式离心机，高速离心10min分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋中，置于10倍体积的蒸馏水中进行透析，直至透析液中用浓度为0.2mol/L的硝酸银溶液检测不到盐离子为止，得到透析袋中的鱿鱼皮胶原蛋白，经真空冻干机冻干备用；称取30g鱿鱼皮胶原蛋白冻干品，倒入300mL浓度为0.1mol/L的乙酸溶液中，再加入5g鱿鱼壳聚糖，用玻璃棒搅拌均匀后，于5℃下冷冻离心12min进行脱气处理，离心转速为9000r/min，将脱气后的混合液倒入5×5×1cm的不锈钢模具中，放入冻干机内层板，先降温至5℃进行预冻2h，再降至-5℃冻干后即得一种利用鱿鱼制备的医用伤口敷料。

本发明的具体应用方法：本发明制得的医用伤口敷料可以用于各种外科手术、整形手术的术后切口或创面，使用前先用医用酒精将创面周围皮肤擦拭干净，再选用比创面大5cm的本发明制得的敷料覆盖创面，之后再以无菌纱布包扎，使敷料与创面紧贴，更换时间根据创面渗出液而定，渗出液多，敷料吸收饱和应及时更换，渗出液少，可隔3天更换，如用在面部等特殊部位，可采取相应的方式进行固定。

Claims (1)

1.一种利用鱿鱼制备医用伤口敷料的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：

（1）取2～3kg鱿鱼，用刀切下鱿鱼皮备用，分离出鱿鱼软骨，将其移入1L烧杯中，用质量浓度为8%的盐酸溶液浸没软骨，室温下浸泡脱钙25～35min，取出后用蒸馏水冲洗后再放入锅中，加热至90～100℃，煮沸脱脂10～20min；

（2）脱脂后按料液比为1:15将鱿鱼软骨浸入浓度为0.03mol/L的次氯酸钠溶液中，以200～300w的功率微波处理3～5min，再将处理后的混合液移入布氏漏斗抽滤得到滤渣，放入烘箱中于55～65℃下干燥9～12h得鱿鱼软骨甲壳素；

（3）取50～100g上述制得的鱿鱼软骨甲壳素放入带有搅拌器、滴液漏斗和温度计的三口烧瓶中，将烧瓶移入水浴锅加热升温至80～90℃，再按料液比为1:10向烧瓶中加入质量浓度为40%的氢氧化钠溶液，启动搅拌器以300～400r/min的转速保温搅拌反应5～7h后，过滤得滤出物，用真空干燥机干燥后得鱿鱼壳聚糖；

（4）将上述备用的鱿鱼皮沥干后，按料液比为1:5和浓度为0.02mol/L的氢氧化钠溶液混合，用玻璃棒搅拌，边搅拌边向混合液中滴加物料总质量1～2%的质量浓度为30%的双氧水，继续搅拌2～3min后将混合液放入冰箱，在4～6℃下静置2～3天，脱色除杂蛋白；

（5）取500～600g预处理后的鱿鱼皮装入陶瓷罐中，向里加入1～2L食用白醋，用搅拌棒搅拌均匀后移入低温冷柜，在6～8℃下磁力搅拌2～3天，搅拌转速为200～300r/min，搅拌结束后以10000～12000r/min的转速进行离心10～15min，分离得到上清液；

（6）将上清液移入2～4℃的冰水浴中，向里逐滴滴加质量浓度为20%的氯化钠溶液，直至无沉淀物析出，将混合液放入卧式离心机，高速离心5～10min分离去除沉淀物得到上清液，将上清液装入透析袋中，置于10倍体积的蒸馏水中进行透析，直至透析液中用浓度为0.2mol/L的硝酸银溶液检测不到盐离子为止，得到透析袋中的鱿鱼皮胶原蛋白，经真空冻干机冻干备用；

（7）称取20～30g鱿鱼皮胶原蛋白冻干品，倒入200～300mL浓度为0.1mol/L的乙酸溶液中，再加入3～5g鱿鱼壳聚糖，用玻璃棒搅拌均匀后，于4～5℃下冷冻离心8～12min进行脱气处理，离心转速为7000～9000r/min，将脱气后的混合液倒入5×5×1cm的不锈钢模具中，放入冻干机内层板，先降温至3～5℃进行预冻1～2h，再降至-10～-5℃冻干后即得一种利用鱿鱼制备的医用伤口敷料。