CN105548588A - 测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法 - Google Patents

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徐永莉
李力
江思华
闫志刚
张月云
赵成坚
黄勇
谷颖乐
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Abstract

本发明公开了一种测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法，该法将处理好的拟黑多刺蚁待测溶液利用全自动氨基酸分析仪对其氨基酸成分含量进行测定。研究表明，不同产地拟黑多刺蚁药材的氨基酸成分含量均较丰富，具有较高的药用价值，但其含量随产地不同而异。应用该法可帮助摸清拟黑多刺蚁不同产地药材的质量，并为评价拟黑多刺蚁药材质量提供了科学依据，可用于保证拟黑多刺蚁药材质量。

Description

测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法
技术领域
本发明属于拟黑多刺蚁药材质量检测评价领域，尤其涉及一种测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法。
背景技术
拟黑多刺蚁(PolyrhachisvicinaRoger)隶属节肢动物门(Arthropoda)、昆虫纲(ClassInsecta)、膜翅目(Hymenoptera)、细腰亚目(Apocrita)、蚁总科(Formicoidae)、蚁科(Formicidae)，主要分部于广西、云南、贵州、浙江等省。拟黑多刺蚁在我国用药历史悠久，《周礼》、《礼记》和李时珍的《本草纲目》等书籍中均有记载。传统中医药理论认为拟黑多刺蚁具补肾益精，抗炎镇痛，痛经活络，解毒消肿等功效，用于治疗风湿与类风湿性关节炎、失眠、痔疮、脱发、乙肝、神经衰弱、月经不调等疾患。拟黑多刺蚁是我国卫生部唯一批准的具有食药两用价值的蚂蚁。然而，目前关于其药材质量检测评价却缺少研究和报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供了一种方便有效的测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法，包括以下步骤：
<1>精密称定拟黑多刺蚁粉末0.30克，置长颈安瓿管中，加入6mol·L-1HCl溶液15mL，抽真空状态下封管，置于110℃烘箱中水解24h，取出，冷却，过滤，精密量取1mL滤液，水浴蒸干，残留物用水溶解，再蒸干，反复进行2次，最后残留物用水定容至25mL，用0.45μm的膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；
<2>利用全自动氨基酸分析仪对拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分含量进行测定。
步骤<2>中按以下操作制备对照品：分别精确称取各氨基酸对照品，置于同一100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，备用；临用时精密吸取2mL至10mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
步骤<2>中测试条件为：日立L-8900全自动氨基酸分析仪，分离柱4.6mm×40mm，离子交换树脂#2622SC型，分析时间为60min，缓冲液流速0.35mL·min-1，茚三酮流速0.32mL·min-1；缓冲液泵压力5～19.5MPa，茚三酮泵压力0～4MPa；缓冲液改变次数5次，柱温59℃，反应器温度135℃；氮气压力26kPa；供试品和对照品溶液进样量均为20μL。
氨基酸包括Lys、Val、Thr、Met、Leu、Ile、Phe、Arg、His、Tyr、Cys、Asp、Ser、Glu、Gly、Ala、Pro。
为便于检测和评价拟黑多刺蚁药材的质量，发明人建立了一种方便有效的测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法，该法将处理好的拟黑多刺蚁待测溶液利用全自动氨基酸分析仪对其氨基酸成分含量进行测定。研究表明，不同产地拟黑多刺蚁药材的氨基酸成分含量均较丰富，具有较高的药用价值，但其含量随产地不同而异。应用该法可帮助摸清拟黑多刺蚁不同产地药材的质量，并为评价拟黑多刺蚁药材质量提供了科学依据，可用于保证拟黑多刺蚁药材质量。
具体实施方式
由于药材氨基酸成分含量随产地不同而异，为了摸清拟黑多刺蚁不同产地药材的质量，发明人对广西15批不同产地的拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的含量进行分析，研究情况如下：
1仪器与方法
日立L-8900型全自动氨基酸分析仪；15批拟黑多刺蚁样品采集地点和时间见表1。全部样品经广西药用植物园张月云高级畜牧师鉴定为拟黑多刺蚁。各氨基酸对照品均为SIGMA公司提供，含量均为99％以上。实验所用的试剂均为分析纯或色谱纯。
表1样品来源
2方法与结果
2.1供试品溶液的制备
精密称定拟黑多刺蚁粉末(过100目塞)0.30克，置长颈安瓿管中，加入6mol·L-1HCl溶液15mL(内含草酸0.15g、巯基乙醇0.3mL)，抽真空状态下封管，置于110℃烘箱中水解24h，取出，冷却，过滤，精密量取1mL滤液，水浴蒸干，残留物用水溶解，再蒸干，反复进行2次，最后残留物用水定容至25mL，用0.45μm的膜过滤，取续滤液，即得。
2.2对照品的制备
分别精确称取各氨基酸对照品，置于同一100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，备用。临用时精密吸取2mL至10mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
2.3测试条件
仪器为日立L-8900全自动氨基酸分析仪，分离柱4.6mm×40mm，离子交换树脂#2622SC型，分析时间为60min，缓冲液流速0.35mL·min-1，茚三酮流速0.32mL·min-1；缓冲液泵压力5～19.5MPa，茚三酮泵压力0～4MPa；缓冲液改变次数5次，柱温59℃，反应器温度135℃；氮气压力26kPa；供试品和对照品溶液进样量均为20μL。
2.4测试结果
含量测定的样品以干燥品计算，各样测试结果见表2和表3。
表2总氨基酸质量分数测定结果(％)
表3总氨基酸质量分数测定结果(％)
表中可见，不同产地的拟黑多刺蚁均含有丰富的氨基酸，具有较高的药用价值，但含量随产地不同而异。15个样中均含有16种氨基酸，其中必须氨基酸和半必须氨基酸中总氨基酸的45.67％～47.98％。

Claims (4)

1.一种测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法，其特征在于包括以下步骤：
<1>精密称定拟黑多刺蚁粉末0.30克，置长颈安瓿管中，加入6mol·L-1HCl溶液15mL，抽真空状态下封管，置于110℃烘箱中水解24h，取出，冷却，过滤，精密量取1mL滤液，水浴蒸干，残留物用水溶解，再蒸干，反复进行2次，最后残留物用水定容至25mL，用0.45μm的膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；
<2>利用全自动氨基酸分析仪对拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分含量进行测定。
2.根据权利要求1所述的测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法，其特征在于步骤<2>中按以下操作制备对照品：分别精确称取各氨基酸对照品，置于同一100mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，备用；临用时精密吸取2mL至10mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
3.根据权利要求1所述的测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法，其特征在于步骤<2>中测试条件为：日立L-8900全自动氨基酸分析仪，分离柱4.6mm×40mm，离子交换树脂#2622SC型，分析时间为60min，缓冲液流速0.35mL·min-1，茚三酮流速0.32mL·min-1；缓冲液泵压力5～19.5MPa，茚三酮泵压力0～4MPa；缓冲液改变次数5次，柱温59℃，反应器温度135℃；氮气压力26kPa；供试品和对照品溶液进样量均为20μL。
4.根据权利要求1所述的测定拟黑多刺蚁药材中氨基酸成分的方法，其特征在于：所述氨基酸包括Lys、Val、Thr、Met、Leu、Ile、Phe、Arg、His、Tyr、Cys、Asp、Ser、Glu、Gly、Ala、Pro。
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