CN105532641B - 一种胎盘保存液及其使用方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种保存采集后的胎盘保存液及其使用方法，属于生物技术领域。一种胎盘保存液，由海藻糖、醋酸酯淀粉、卵磷脂、乙烯乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、柠檬酸三钠、聚山梨酯组成。本发明胎盘保存液，能够深入胎盘内部结构，具有降低冰点，减少冰晶形成、平衡细胞内外渗透压、减轻细胞缩水程度、避免多肽失活等作用。本发明胎盘保存液配比简单，使用方便，能大幅度减少多肽等活性物质在冷冻过程中的损害。

Description

一种胎盘保存液及其使用方法
技术领域
本发明涉及一种保存采集后的胎盘保存液及其使用方法，属于生物技术领域。
背景技术
胎盘所含成分较为复杂，包括胎盘球蛋白、胎盘血蛋白、溶菌酶、激肽酶、组胺酶、激素、促生长因子、多肽等活性物质。具有抗感染、增强机体抵抗力、激素样作用、促凝血作用等作用。低温冻存保存是胎盘保存常用的方法，一般能达到2年的保存期限。如专利文献制造胎盘多肽注射液用的原料准备方法(专利申请号：201110209777.5)通过低温实现胎盘保存。尽管低温冷冻技术能够使胎盘长期保存，但是也带来了冷冻损伤的问题。无论采用任何形式的冷冻，在冷冻过程中产生的冻结应力对生物多肽等活性物质都有破坏作用。冷冻过程中产生的冻结应力包括枝状冰晶的形成、离子浓度的增加、pH值的改变、相分离等都会导致多肽及蛋白质等活性物质变性。从而降低了胎盘的药用价值。
发明内容
针对现有冷冻法对胎盘活性物质的损伤，本发明的目的在于提供一种胎盘冷冻保护液及其使用方法，能大幅度减少多肽等活性物质在冷冻过程中的损害。
本发明采用如下技术方案：一种胎盘保存液，由海藻糖、醋酸酯淀粉、卵磷脂、乙烯乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、柠檬酸三钠组成，所述每升保存液中含有海藻糖10～20g、醋酸酯淀粉5～10g、卵磷脂1～2.5g、乙烯乙二醇0.6～1.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.8～1.3g、柠檬酸3～6g、柠檬酸三钠5～8g、聚山梨酯1～1.5g。
优选的是：每升保存液中含有海藻糖含量为13g、醋酸酯淀粉7g、卵磷脂1.5g、乙烯乙二醇0.8g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g、柠檬酸5g、柠檬酸三钠7g、聚山梨酯1.2g。
优选的是：所述的卵磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂中的至少一种。
本发明提供另一种技术方案为：一种胎盘保存液的使用方法，是将保存液预冷至2～6℃，将胎盘置于保存液中，2～6℃冷冻1～2小时，将温度降至-20℃以下，即可完成保存。
优选的是：所述胎盘为无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘。
本发明胎盘保存液，能够深入胎盘内部结构，具有降低冰点，减少冰晶形成、平衡细胞内外渗透压、减轻细胞缩水程度、避免多肽失活等作用。本发明胎盘保存液配比简单，使用方便，能大幅度减少多肽等活性物质在冷冻过程中的损害。
具体实施方式
下面进一步描述本发明的技术方案，但要求保护的范围并不局限于所述。下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，但本发明的实施方式并不局限于实施例表示的范围。这些实施例仅用于说明本发明，而非用于限制本发明的范围。此外，在阅读本发明的内容后，本领域的技术人员可以对本发明作各种修改，这些等价变化同样落于本发明所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
往10g海藻糖、5g醋酸酯淀粉、1g大豆卵磷脂、0.6g乙烯乙二醇、0.8g聚乙烯吡咯烷酮、3g柠檬酸、5g柠檬酸三钠、1g聚山梨酯中加入800mL双蒸水搅拌均匀，加水至1000mL，调节pH至6.8，使用时先将保存液预冷至2℃，将无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘置于保存液中，2℃冷冻1小时，将温度降至-25℃，即可完成保存。
实施例2
往13g海藻糖、7g醋酸酯淀粉、1.5g卵磷脂(由0.75g大豆卵磷脂、0.75g蛋黄卵磷脂组成)、0.8g乙烯乙二醇、1g聚乙烯吡咯烷酮、5g柠檬酸、7g柠檬酸三钠、1.2g聚山梨酯中加入800mL双蒸水搅拌均匀，加水至1000mL，调节pH至7，使用时先将保存液预冷至4℃，将无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘置于保存液中，2～6℃冷冻1.5小时，将温度降至-22℃，即可完成保存。
实施例3
往20g海藻糖、10g醋酸酯淀粉、2.5g蛋黄卵磷脂、1.2g乙烯乙二醇、1.3g聚乙烯吡咯烷酮、6g柠檬酸、8g柠檬酸三钠、1.5g聚山梨酯中加入800mL双蒸水搅拌均匀，加水至1000mL，调节pH至7.2，使用时先将保存液预冷至6℃，将无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘置于保存液中，6℃冷冻2小时，将温度降至-30℃，即可完成保存。
本发明人对胎盘保存液的处方用量进行了严格的研究筛选，经综合考虑，得出以上的处方用量范围，与低用量(每升保存液中含有海藻糖6g、醋酸酯淀粉3g、卵磷脂0.6g、乙烯乙二醇0.4g、聚乙烯吡咯烷酮0.5g、柠檬酸2g、柠檬酸三钠3g、聚山梨酯0.5g)和高用量(每升保存液中含有海藻糖25g、醋酸酯淀粉15g、卵磷脂3g、乙烯乙二醇1.5g、聚乙烯吡咯烷酮1.5g、柠檬酸8g、柠檬酸三钠10g、聚山梨酯2g)的处方相比，低用量时效果保存不理想，胎盘中多肽等活性物质损害较多，细胞缩水较大，有少量冰晶形成，而高用量时虽然效果可行，但没有明显比本发明处方范围内的用量有更好的效果，综合成本等因素，选择每升保存液中含有海藻糖10～20g、醋酸酯淀粉5～10g、卵磷脂1～2.5g、乙烯乙二醇0.6～1.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.8～1.3g、柠檬酸3～6g、柠檬酸三钠5～8g、聚山梨酯1～1.5g可行，每升保存液中含有海藻糖含量为13g、醋酸酯淀粉7g、卵磷脂1.5g、乙烯乙二醇0.8g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g、柠檬酸5g、柠檬酸三钠7g、聚山梨酯1.2g为最佳。

Claims (5)

1.一种胎盘保存液，其特征在于，所述保存液由海藻糖、醋酸酯淀粉、卵磷脂、乙烯乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、柠檬酸三钠、聚山梨酯组成，所述每升保存液中含有海藻糖10～20g、醋酸酯淀粉5～10g、卵磷脂1～2.5g、乙烯乙二醇0.6～1.2g、聚乙烯吡咯烷酮0.8～1.3g、柠檬酸3～6g、柠檬酸三钠5～8g、聚山梨酯1～1.5g。
2.根据权利要求1所述胎盘保存液，其特征在于，所述保存液由海藻糖、醋酸酯淀粉、卵磷脂、乙烯乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、柠檬酸三钠、聚山梨酯组成，所述每升保存液中含有海藻糖13g、醋酸酯淀粉7g、卵磷脂1.5g、乙烯乙二醇0.8g、聚乙烯吡咯烷酮1.0g、柠檬酸5g、柠檬酸三钠7g、聚山梨酯1.2g。
3.根据权利要求1或2所述胎盘保存液，其特征在于，所述的卵磷脂为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂中的至少一种。
4.权利要求1或2所述胎盘保存液的使用方法，其特征在于，所述使用方法是将保存液预冷至2～6℃，将胎盘置于保存液中，2～6℃冷冻1～2小时，将温度降至-20℃以下，即可完成保存。
5.根据权利要求4所述胎盘保存液的使用方法，其特征在于，所述胎盘为无乙肝、无丙肝、无艾滋病、无梅毒病毒的胎盘。
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