CN105502679A - 高活性海洋酵母干粉的制备方法 - Google Patents
高活性海洋酵母干粉的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105502679A CN105502679A CN201510045345.3A CN201510045345A CN105502679A CN 105502679 A CN105502679 A CN 105502679A CN 201510045345 A CN201510045345 A CN 201510045345A CN 105502679 A CN105502679 A CN 105502679A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- yeast
- liquid
- marine
- dry powder
- tank
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 title claims abstract description 118
- 239000000843 powder Substances 0.000 title claims abstract description 49
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 32
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 80
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 52
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims abstract description 26
- 239000013535 sea water Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims abstract description 26
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 25
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 241000251511 Holothuroidea Species 0.000 claims abstract description 15
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 14
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 9
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 claims description 28
- 238000012262 fermentative production Methods 0.000 claims description 24
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 claims description 16
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 15
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 13
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims description 12
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 claims description 12
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 11
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 9
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 9
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 6
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 239000006052 feed supplement Substances 0.000 claims description 6
- WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N hypochlorite Chemical compound Cl[O-] WQYVRQLZKVEZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 5
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 5
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 claims description 5
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 claims description 5
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 5
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 5
- 241000235036 Debaryomyces hansenii Species 0.000 claims description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 claims description 3
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 claims description 3
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 claims description 3
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 claims description 3
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 claims description 3
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 3
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 claims description 3
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 claims description 3
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 3
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 claims description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 3
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 claims description 3
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 claims description 3
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 3
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 claims description 3
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 claims description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 229940045641 monobasic sodium phosphate Drugs 0.000 claims description 3
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 claims description 3
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 claims description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 3
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 abstract description 3
- 238000005507 spraying Methods 0.000 abstract description 3
- 238000009313 farming Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000011814 protection agent Substances 0.000 abstract 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract 1
- 201000009032 substance abuse Diseases 0.000 abstract 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 11
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 2
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- KIPLYOUQVMMOHB-MXWBXKMOSA-L [Ca++].CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O.CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O Chemical compound [Ca++].CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O.CN(C)[C@H]1[C@@H]2[C@@H](O)[C@H]3C(=C([O-])[C@]2(O)C(=O)C(C(N)=O)=C1O)C(=O)c1c(O)cccc1[C@@]3(C)O KIPLYOUQVMMOHB-MXWBXKMOSA-L 0.000 description 2
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 230000009571 larval growth Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 229940063650 terramycin Drugs 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 2
- -1 0.008 gram Chemical compound 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 241000269908 Platichthys flesus Species 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
Abstract
本发明公开了一种高活性海洋酵母干粉的制备方法,属海洋酵母干粉领域,方法包括:以满足海参养殖筛选试验的一种海洋酵母菌为原种,采用酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基,将原种经斜面和摇床做成种子液,将种子液接入种子罐,再将种子液接入发酵生产罐中进行培养,将培养出海洋酵母发酵液用离心机浓缩成浓缩液后,加入保护剂后经喷雾干燥塔喷成干粉,得高活性海洋酵母干粉。该方法将生产的海洋酵母发酵液,用离心机浓缩后加入保护剂,喷成海洋酵母总菌数80亿/克干粉,这样海洋酵母干粉活性菌比例达80%,避免液态培养液难于保存以及投入养殖水体中活性菌成活率低的弊病,使养殖用户在使用上更方便,效果更显著。
Description
技术领域
本发明涉及海洋酵母干粉制备领域,特别是涉及一种高活性海洋酵母干粉的制备方法。
背景技术
目前的海洋酵母大部分为在液态培养液中冷冻保存,存在难于保存,以及投入海参养殖水体中活性菌成活率低的弊病,使养殖用户在使用上不方便。
发明内容
基于上述现有技术所存在的问题,本发明提供一种高活性海洋酵母干粉的制备方法,能制备活性比例高,生长繁殖块,避免液态培养液难于保存以及投入养殖水体中活性菌成活率低的弊病,使养殖用户在使用上更方便,用在海水养殖中生长效果明显。
为解决上述技术问题,本发明提供一种高活性海洋酵母干粉的制备方法,包括以下步骤:
以满足海参养殖筛选试验的一种海洋酵母菌为原种,采用酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基,将原种经斜面和摇床做成种子液,将所述种子液接入种子罐,再将所述种子罐中的所述种子液接入发酵生产罐中进行培养,将培养出的海洋酵母发酵液用离心机浓缩成海洋酵母浓缩液,将所述海洋酵母浓缩液加入保护剂后通过喷雾干燥塔喷成干粉,即得到高活性海洋酵母干粉。
本发明的有益效果为:该方法通过发酵生产罐生产出海洋酵母发酵液,用离心机浓缩,然后用喷雾干燥塔加入保护剂后,喷成干粉,这样海洋酵母干粉活性菌比例达80%以上,避免液态培养液难于保存以及投入养殖水体中活性菌成活率低的弊病,使养殖用户在使用上更方便,效果更显著。由于原料菌种是满足海参养殖筛选试验的一种海洋酵母菌,菌体富含蛋白质、肝糖、不饱和脂肪酸、动物幼体生长激素等,利用该菌体制备的干粉既可以净化水质,又可作饵料使用,能有效促进海参生长和一定的病害防止。海洋酵母投入水体中可以复活生长繁殖、生长代谢,可以净化水中的氨氮、硫化氢等有害物质,使养殖池池底保持清洁,养殖池有自净能力,可长期不换水,对海参苗生长有明显效果。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明的保护范围。
本发明实施例提供一种高活性海洋酵母干粉的制备方法,该方法制备的海洋酵母干粉活性比例高,生长繁殖块,海参养殖中生长效果明显,具体包括以下步骤:
以满足海参养殖筛选试验的一种海洋酵母菌为原种,采用酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基,将原种经斜面和摇床做成种子液,将种子液接入种子罐,再将种子罐中的种子液接入发酵生产罐中进行培养,将培养出的海洋酵母发酵液用离心机浓缩成海洋酵母浓缩液,将海洋酵母浓缩液加入保护剂后通过喷雾干燥塔喷成干粉,即得到高活性海洋酵母干粉。该高活性海洋酵母干粉的菌数不少于80亿每克,其中活性菌不少于80%。
上述方法中,作为原种的满足海参养殖筛选试验一种海洋酵母为:
采用汉逊德巴利酵母(Debaryomyceshansenii)菌或从鲜活海参肠道中提取的一种海洋酵母菌,将酵母菌接入斜面,斜面长好后上摇床做成发酵酵母菌液,将发酵酵母菌液用于海参养殖筛选试验(可用250升塑料槽,30立方米大池,进行海参养殖筛选试验),按每5天投10ppm发酵酵母菌液,不换水,其它按正常养殖模式管理,若养殖15天海参苗成活率达95%,增重率30%,则该海洋酵母菌满足要求能作为原种留用,作为原种的菌种可用液体石蜡或冷冻干燥保藏法长期保存,以备使用。
从鲜活海参肠道中提取的一种海洋酵母菌,可按下述方式提取:
取鲜活海参肠道5厘米(或其它海洋生物(如海水黑鱼,芽鲆等肠道5厘米)放入100ml已灭菌酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基中,另加土霉素10毫克和青霉素10毫克,摇床温度30℃,每分钟170转,3天后划线分离,当单菌落酵母箘长出后,用平板分离提纯三次,得到一种海洋酵母菌。
上述方法中,采用酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基,将原种经斜面和摇床做成种子液包括:
酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基由按重量比为:酵母膏0.5、蛋白胨1、葡萄糖2和海水100混合而成;
将保存于冷冻干燥保藏法冻干粉或液体石蜡中的海洋酵母菌原种接入斜面培养基(斜面培养基为酵母膏蛋白胨葡萄糖琼脂海水海洋酵母培养基,由按重量比为酵母膏0.5、蛋白胨1、葡萄糖2、琼脂2和海水100混合而成)中,在30℃温度条件下培养48小时;将培养好的斜面菌种洗脱入装有酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基的容器中上摇床,摇床速度为每分钟170转,在30℃温度条件下培养72小时,制成种子液。
上述方法中,将种子液接入种子罐为:
种子液按重量5%接入种子罐,30℃温度条件下培养72小时,种子罐搅拌转速为120转每分钟,充气为每小时0.15立方米,种子罐中采用酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基。
上述方法中,再将种子罐中的种子液接入发酵生产罐中进行培养为:
将种子罐的种子液按重量5%接入发酵生产罐中,30℃温度条件下培养72小时,发酵罐搅拌转速为120转每分钟,充气为每小时5立方米,发酵生产罐的罐压为0.045MPa,发酵生产罐灭菌温度为121℃灭菌30分钟;发酵生产罐的培养基pH值为5.5,该培养基按重量比组成为:葡萄糖2、固体发酵大豆蛋白4、酵母膏0.5、尿素0.14、磷酸二氢钾0.015、硫酸镁0.01、硫酸亚铁0.008、豆油0.1和海水100;
其中,固体发酵大豆蛋白的制备步骤如下:
采用下述重量配比的原料:大豆蛋白100、水60、玉米粉14、麸皮8和EM菌液5;其中,EM菌液的总菌数大于或等于20亿/毫升,EM菌液内的各菌种上种子罐的菌液按重量比为:枯草芽孢杆菌液2、地衣芽孢杆菌液2、巨大芽孢杆菌液2、蜡状芽孢杆菌液2、保加利亚乳杆菌液5、乳酸杆菌液5、酿酒酵母菌液2、假丝酵母菌液2、径阳链霉菌液1和黑曲霉菌液1;EM菌液各菌种的菌液上种子罐后再接入发酵罐培育生产,种子罐与发酵罐的培养基相同,该培养基的按重量比组成为:蛋白胨2、黄腐酸4.9、酵母膏4、硫酸铵2、味精0.95、氯化钾0.85、香菇粉2、磷酸二氢钠3.2、轻质碳酸钙15.1、红糖55.9,豆油1和水1000;
将原料用微波杀菌机灭菌,工具及衣物用紫外灯和臭氧机消毒,水用次氯酸钠消毒,各原料搅拌均匀后装入发酵饲料袋中,袋口密封,挤出空气,温度30℃培养20天,即得到固体发酵大豆蛋白。
上述方法还包括:当发酵生产罐发酵48小时后向发酵生产罐内补充发酵生产罐培养基的补料步骤,补料量为培养基总重量的一半,72小时菌数大于或等于20亿/ml得到发酵生产罐培养出的海洋酵母发酵液。
上述方法中,将培养出的海洋酵母发酵液用离心机浓缩为:将培养出的海洋酵母发酵液用机械离心机离心浓缩为每毫升菌数100亿的海洋酵母浓缩液。
上述方法中,将浓缩液加入保护剂后通过喷雾干燥塔喷成干粉为:
以脱脂奶粉、海藻糖、淀粉,甘油和轻质碳酸钙作为保护剂;
将浓缩液与脱脂奶粉、海藻糖、淀粉、甘油,轻质碳酸钙按重量比为4:1:1:0.5:0.5:2混合后,用喷雾干燥塔喷雾,喷雾干燥塔空气进口温度为130℃,出口温度为60℃,即得到高活性海洋酵母干粉。
下面结合具体实施例对本发明的制备方法作进一步说明。
本发明的制备方法包括以下步骤:
1)选择原种;原种采用满足海参养殖筛选试验的汉逊德巴利酵母(Debaryomyceshansenii)菌或从鲜活海参肠道中提取的一种海洋酵母菌,以从鲜活海参肠道中提取的一种海洋酵母菌为例,取鲜活海参肠道5厘米放入100ml已灭菌酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基(由0.5克酵母膏、1克蛋白胨、2克葡萄糖和100毫升海水混合而成)中,另加土霉素10毫克,青霉素10毫克,摇床温度30℃,搅拌速度为170转/分,3天后划线分离,当单菌落酵母箘长出后,用平板分离提纯三次,再用摇床做出发酵酵母菌液,把发酵酵母菌液用250升塑料槽,30立方米大池进行海参养殖筛选试验,若每5天投10ppm菌液,不换水,其余按常规养殖方法管理,养殖15天海参苗成活率达95%,增重率30%此菌种可以留用,满足条件可作为原种,将菌种用液体石蜡或冷冻干燥保藏法长期保存;
2)将保存于冷冻干燥保藏法冻干粉或液体石蜡中原种海洋酵母接入斜面培养基(由0.5克酵母膏、1克蛋白胨、2克葡萄糖、2克琼脂和100毫升海水混合而成)中,在温度30℃的条件下培养48小时;将长好的斜面菌种洗脱入容量为500ml并装有100ml酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基的三角烧瓶中上摇床,在温度30℃的条件下培养72小时,摇床速度为每分钟170转;
3)将摇床摇好的种子液按重量5%接入20升种子罐,30℃的温度条件下培养72小时,搅拌转速为120转每分钟,通气量0.15立方米每小时,种子罐培养基为酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母;
4)将种子罐种子液按重量5%接入500升发酵生产罐中,温度30℃的条件下培养72小时,搅拌转速为120转每分钟,通气量为每小时5立方米,罐压保持0.045MPa;发酵生产罐灭菌温度121℃灭菌30分钟;发酵生产罐的培养基pH值为5.5,组成为:葡萄糖2克、固体发酵大豆蛋白4克、酵母膏0.5克、尿素0.14克、磷酸二氢钾0.015克、硫酸镁0.01克、硫酸亚铁0.008克、豆油0.1毫升,100毫升海水;
步骤4)中,所用的固体发酵大豆蛋白通过以下方式制备:发酵原料重量配比为:大豆蛋白100kg、水60kg、玉米粉14、kg麸皮8kg、EM菌液5kg;其中,EM菌液用发酵罐生产,菌液总菌数大于或等与20亿/毫升,EM菌液中各菌种上种子罐的菌液按重量比为:枯草芽孢杆菌液200ml、地衣芽孢杆菌液200ml、巨大芽孢杆菌液200ml、蜡状芽孢杆菌液200ml、保加利亚乳杆菌液500ml、乳酸杆菌液500ml、酿酒酵母菌液200ml、假丝酵母菌液200ml、径阳链霉菌液100ml和黑曲霉菌液100ml,各菌液中对应菌种的浓度与现有技术中利用该菌种惯常制成的菌液的菌种浓度相同;生产EM菌液的种子罐与发酵罐的培养基相同,该培养基按重量比组成为:蛋白胨2克、黄腐酸4.9克、酵母膏4克、硫酸铵2克、味精0.95克、氯化钾0.85克、香菇粉2克、磷酸二氢钠3.2克、轻质碳酸钙15.1克、红糖55.9克、豆油1克和水1000毫升;
各原料用微波杀菌机灭菌,工具及衣物等用紫外灯和臭氧机消毒,水用次氯酸钠消毒,搅拌均匀后装入25kg发酵饲料袋中,袋口密封,挤出空气,温度30度培养20天,即得到可以使用的固体发酵大豆蛋白;
5)当发酵生产罐发酵48小时向其中补料,补充发酵生产罐的培养基,补料量为培养基总重量的一半,72小时菌数大于或等于20亿/ml可放出海洋酵母发酵液;
6)海洋酵母发酵液经离心机离心后,浓缩成100亿每毫升的海洋酵母浓缩液;
7)海洋酵母浓缩液、脱脂奶粉、海藻糖、淀粉、甘油,轻质碳酸钙的重量比为4:1:1:0.5:0.5:2,用喷雾干燥塔喷雾,空气进口温度130度,出口温度60度;得到海洋酵母干粉总数80亿每克,其中活性海洋酵母为80%。
本发明方法制得的高活性海洋酵母干粉,通过发酵罐生产出海洋酵母培养液,用离心机浓缩,然后用喷雾干燥塔加入保护剂后,喷成干粉,由于所用的培养基均为发明人按特定配方配制,确保了制成的海洋酵母干粉活性菌比例达80%以上,有效避免了液态培养液难于保存以及投入养殖水体中活性菌成活率低的弊病,使养殖用户在使用上更方便,效果更显著。另外,由于所用的海洋酵母菌种是为满足海参养殖筛选试验的汉逊德巴利酵母(Debaryomyceshansenii)菌或从鲜活海参肠道中提取的一种海洋酵母菌,菌体富含蛋白质、肝糖、不饱和脂肪酸、动物幼体生长激素等,既可以净化水质,又可作饵料使用。海洋酵母投入水体中可以复活生长繁殖、生长代谢,可以净化水中的氨氮、硫化氢等有害物质,使养殖池池底保持清洁,养殖池有自净能力,可长期不换水,对海参苗生长有明显效果。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,可轻易想到的变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应该以权利要求书的保护范围为准。
Claims (9)
1.一种高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
以满足海参养殖筛选试验的一种海洋酵母菌为原种,采用酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基,将原种经斜面和摇床做成种子液,将所述种子液接入种子罐,再将所述种子罐中的所述种子液接入发酵生产罐中进行培养,将培养出的海洋酵母发酵液用离心机浓缩成海洋酵母浓缩液,将所述海洋酵母浓缩液加入保护剂后通过喷雾干燥塔喷成干粉,即得到高活性海洋酵母干粉。
2.根据权利要求1所述的高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,所述高活性海洋酵母干粉的菌数不少于80亿每克,其中活性菌不少于80%。
3.根据权利要求1或2所述的高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,所述方法中,作为原种的满足海参养殖筛选试验一种海洋酵母为:
采用汉逊德巴利酵母(Debaryomyceshansenii)菌或从鲜活海参肠道中提取的一种海洋酵母菌,将所述酵母菌接入斜面,斜面长好后上摇床做成发酵酵母菌液,将所述发酵酵母菌液用于海参养殖筛选试验,按每5天投10ppm所述发酵酵母菌液,不换水,其它按正常养殖模式管理,若养殖15天海参苗成活率达95%,增重率30%,则该海洋酵母菌满足要求能作为原种。
4.根据权利要求1或2所述的高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,所述采用酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基,将原种经斜面和摇床做成种子液包括:
所述酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基由按重量比为:酵母膏0.5、蛋白胨1、葡萄糖2和海水100混合而成;
将保存于冷冻干燥保藏法冻干粉或液体石蜡中的海洋酵母菌原种接入斜面培养基中,在30℃温度条件下培养48小时;将培养好的斜面菌种洗脱入装有所述酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基的容器中上摇床,摇床速度为每分钟170转,在30℃温度条件下培养72小时,制成种子液。
5.根据权利要求1或2所述的高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,所述将种子液接入种子罐为:
所述种子液按重量5%接入种子罐,30℃温度条件下培养72小时,种子罐搅拌转速为120转每分钟,充气为每小时0.15立方米,所述种子罐中采用所述酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培养基。
6.根据权利要求1或2所述的高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,所述再将种子罐中的种子液接入发酵生产罐中进行培养为:
将所述种子罐的种子液按重量5%接入发酵生产罐中,30℃温度条件下培养72小时,发酵罐搅拌转速为120转每分钟,充气为每小时5立方米,发酵生产罐的罐压为0.045MPa,发酵生产罐灭菌温度为121℃灭菌30分钟;发酵生产罐的培养基pH值为5.5,该培养基按重量比组成为:葡萄糖2、固体发酵大豆蛋白4、酵母膏0.5、尿素0.14、磷酸二氢钾0.015、硫酸镁0.01、硫酸亚铁0.008、豆油0.1和海水100;
其中,所述固体发酵大豆蛋白的制备步骤如下:
采用下述重量配比的原料:大豆蛋白100、水60、玉米粉14、麸皮8和EM菌液5;其中,所述EM菌液的总菌数大于或等于20亿/毫升,所述EM菌液内的各菌种上种子罐菌液按重量比为:枯草芽孢杆菌液2、地衣芽孢杆菌液2、巨大芽孢杆菌液2、蜡状芽孢杆菌液2、保加利亚乳杆菌液5、乳酸杆菌液5、酿酒酵母菌液2、假丝酵母菌液2、径阳链霉菌液1和黑曲霉菌液1;所述EM菌液的各菌种的菌液用种子罐接入发酵罐培育生产,种子罐与发酵罐的培养基相同,该培养基按重量比组成为:蛋白胨2、黄腐酸4.9、酵母膏4、硫酸铵2、味精0.95、氯化钾0.85、香菇粉2、磷酸二氢钠3.2、轻质碳酸钙15.1、红糖55.9、豆油1和水1000;
将原料用微波杀菌机灭菌,工具及衣物用紫外灯和臭氧机消毒,水用次氯酸钠消毒,各原料搅拌均匀后装入发酵饲料袋中,袋口密封,挤出空气,温度30℃培养20天,即得到固体发酵大豆蛋白。
7.根据权利要求6所述的高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,还包括:当发酵生产罐发酵48小时后向发酵生产罐内补充发酵生产罐培养基的补料步骤,补料量为培养基总重量一半,72小时菌数大于或等于20亿/ml得到发酵生产罐培养出的海洋酵母发酵液。
8.根据权利要求1或2所述的高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,所述将培养出的海洋酵母发酵液用离心机浓缩为:
将培养出的海洋酵母发酵液用机械离心机离心浓缩为每毫升菌数100亿的海洋酵母浓缩液。
9.根据权利要求1或2所述的高活性海洋酵母干粉的制备方法,其特征在于,所述将海洋酵母浓缩液加入保护剂后通过喷雾干燥塔喷成干粉为:
以脱脂奶粉、海藻糖、淀粉,甘油和轻质碳酸钙作为保护剂;
将所述海洋酵母浓缩液与脱脂奶粉、海藻糖、淀粉、甘油,轻质碳酸钙按重量比为4:1:1:0.5:0.5:2混合后,用喷雾干燥塔喷雾,喷雾干燥塔空气进口温度为130℃,出口温度为60℃,即得到高活性海洋酵母干粉。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510045345.3A CN105502679B (zh) | 2015-01-28 | 2015-01-28 | 高活性海洋酵母干粉的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510045345.3A CN105502679B (zh) | 2015-01-28 | 2015-01-28 | 高活性海洋酵母干粉的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105502679A true CN105502679A (zh) | 2016-04-20 |
CN105502679B CN105502679B (zh) | 2019-02-05 |
Family
ID=55711064
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510045345.3A Expired - Fee Related CN105502679B (zh) | 2015-01-28 | 2015-01-28 | 高活性海洋酵母干粉的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105502679B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106047774A (zh) * | 2016-08-09 | 2016-10-26 | 峨眉山绿地生态农业开发有限公司 | 解磷细菌培养配方 |
WO2022248540A1 (en) * | 2021-05-26 | 2022-12-01 | Prosol S.P.A. | Coated live yeast and process for the production thereof |
Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3939279A (en) * | 1969-08-22 | 1976-02-17 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | Feed and method of aquianimals cultivation |
CN1415740A (zh) * | 2002-10-15 | 2003-05-07 | 湖北安琪酵母股份有限公司 | 一种固体海洋红酵母的麸皮吸附干燥生产方法 |
CN1415739A (zh) * | 2002-10-15 | 2003-05-07 | 湖北安琪酵母股份有限公司 | 一种固体海洋红酵母的喷雾干燥生产方法 |
CN1415738A (zh) * | 2002-10-15 | 2003-05-07 | 湖北安琪酵母股份有限公司 | 一种固体海洋红酵母的淀粉吸附流化床干燥生产工艺 |
CN101148643A (zh) * | 2006-09-22 | 2008-03-26 | 中国科学院沈阳应用生态研究所 | 一种海参用海洋胶红酵母的生产方法 |
CN101748075A (zh) * | 2010-01-06 | 2010-06-23 | 大连化工研究设计院 | 高活性海洋红酵母粉的制备方法 |
CN102934735A (zh) * | 2012-11-15 | 2013-02-20 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 适用于发酵饼粕类饲料原料的益生菌发酵剂及其制备方法 |
CN103602602A (zh) * | 2013-12-01 | 2014-02-26 | 领绿生物镇江有限公司 | 一种海洋红酵母的固体发酵方法 |
CN103614307A (zh) * | 2013-11-13 | 2014-03-05 | 中国水产科学研究院南海水产研究所 | 一种固体海洋红酵母制剂及其制备方法和应用 |
CN104126734A (zh) * | 2014-08-22 | 2014-11-05 | 成都合成生物科技有限公司 | 一种兽用微生态制剂及其制备方法 |
-
2015
- 2015-01-28 CN CN201510045345.3A patent/CN105502679B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3939279A (en) * | 1969-08-22 | 1976-02-17 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | Feed and method of aquianimals cultivation |
CN1415740A (zh) * | 2002-10-15 | 2003-05-07 | 湖北安琪酵母股份有限公司 | 一种固体海洋红酵母的麸皮吸附干燥生产方法 |
CN1415739A (zh) * | 2002-10-15 | 2003-05-07 | 湖北安琪酵母股份有限公司 | 一种固体海洋红酵母的喷雾干燥生产方法 |
CN1415738A (zh) * | 2002-10-15 | 2003-05-07 | 湖北安琪酵母股份有限公司 | 一种固体海洋红酵母的淀粉吸附流化床干燥生产工艺 |
CN101148643A (zh) * | 2006-09-22 | 2008-03-26 | 中国科学院沈阳应用生态研究所 | 一种海参用海洋胶红酵母的生产方法 |
CN101748075A (zh) * | 2010-01-06 | 2010-06-23 | 大连化工研究设计院 | 高活性海洋红酵母粉的制备方法 |
CN102934735A (zh) * | 2012-11-15 | 2013-02-20 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 适用于发酵饼粕类饲料原料的益生菌发酵剂及其制备方法 |
CN103614307A (zh) * | 2013-11-13 | 2014-03-05 | 中国水产科学研究院南海水产研究所 | 一种固体海洋红酵母制剂及其制备方法和应用 |
CN103602602A (zh) * | 2013-12-01 | 2014-02-26 | 领绿生物镇江有限公司 | 一种海洋红酵母的固体发酵方法 |
CN104126734A (zh) * | 2014-08-22 | 2014-11-05 | 成都合成生物科技有限公司 | 一种兽用微生态制剂及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
唐伟强编: "《食品通用机械与设备》", 31 March 2010 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106047774A (zh) * | 2016-08-09 | 2016-10-26 | 峨眉山绿地生态农业开发有限公司 | 解磷细菌培养配方 |
WO2022248540A1 (en) * | 2021-05-26 | 2022-12-01 | Prosol S.P.A. | Coated live yeast and process for the production thereof |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN105502679B (zh) | 2019-02-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102492642B (zh) | 一株兼具硝化功能的反硝化菌株及包含该菌株的多种活性微生物的水体改良剂及制备方法 | |
CN103395890B (zh) | 用于淡水养殖水体改良的微生物制剂及其制备方法 | |
CN101082024A (zh) | 参池菌的制备和修复海参养殖池环境的方法 | |
CN101974428A (zh) | 一种能抗重茬障碍的复合微生物制剂及其制备方法 | |
CN104904994A (zh) | 三大类菌混合液体发酵、固体发酵物饲料添加剂及其制备方法 | |
CN107022355A (zh) | 一种生物酵素土壤改良剂及其制备方法 | |
CN101082028A (zh) | 调水菌的制备和修复水产养殖环境的方法 | |
CN102864114B (zh) | 一种恩拉霉素高产菌株及其制备方法和应用 | |
CN104522299A (zh) | 一种湿基生物活性制品的制备方法 | |
CN101407761B (zh) | 酵母融合菌、白地霉菌和根霉菌液体菌剂及其制备方法和应用 | |
CN103663728A (zh) | 用于淡水养殖水体改良的微生物制剂 | |
CN106801017A (zh) | 一种高产耐热蛋白酶及虫草素的蛹虫草菌株筛选及诱变方法 | |
CN103931660B (zh) | 利用柠檬酸废水生产解淀粉芽孢杆菌生防菌剂 | |
CN109468259A (zh) | 一种促进芽孢生成的培养基 | |
CN103211088A (zh) | 海参饵料的制备方法 | |
CN105255762A (zh) | 一种用于土壤调理的微生态制剂 | |
CN100467584C (zh) | 水产养殖及景观水体用复合微生态制剂及其制备方法 | |
CN109055264A (zh) | 一种用于海参养殖的微生物菌剂及其制备方法 | |
CN105821092A (zh) | 一种海南霉素发酵工艺 | |
CN105110489A (zh) | 一种高温期虾蟹养殖用净水保草生物制剂及其制备方法和应用 | |
CN104620861A (zh) | 利用桑枝种植金针菇的方法 | |
CN101195807A (zh) | 木霉菌突变株分生孢子的固体发酵方法 | |
CN102787153B (zh) | 微生物发酵补料生产恩拉霉素的方法 | |
CN105502679A (zh) | 高活性海洋酵母干粉的制备方法 | |
CN110713956B (zh) | 一株赖氨酸芽孢杆菌s12及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
TA01 | Transfer of patent application right | ||
TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20181224 Address after: 116011 46 Yihe Street, Datan Street, Pulandian District, Dalian City, Liaoning Province Applicant after: Dalian Yutuo Island Marine Biology Technology Co.,Ltd. Address before: 116000 No. 10 Xiangming Street, Zhongshan District, Dalian City, Liaoning Province Applicant before: DALIAN YUTU ISLAND SEAFOOD Co.,Ltd. |
|
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20190205 |