CN105440149A - 利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及黄芪药物提取技术领域，具体说是利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺。该方法步骤取干燥黄芪根清洗、干燥、粉碎后加入水，加热沸腾提取3次，合并提取液静置放凉，加入天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC，静置后旋转蒸发浓缩粗提液得到浸膏粗品；浸膏粗品中加入乙醇，搅拌浸膏进行溶解，静置沉淀，离心去除上清液得到沉淀物，再次重复加入乙醇搅拌离心得到纯品黄芪多糖。本发明在酶解提取微波作用的基础上，引入植物中药澄清技术实现高品质黄芪多糖的提取纯化，提高黄芪多糖中有效成分提取产率，改进后的方法黄芪多糖提取率为15.5%以上。

Description

利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺
技术领域
本发明属于黄芪药物提取技术领域，尤其涉及利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺。
背景技术
黄芪为豆科植物的，味甘，性微温，归肺、脾经，具有补气升阳、益味固表、利尿消肿、生津养血、托毒排脓、敛疮生肌等功效。黄芪多糖（APS）是从中药黄芪中提取的多糖，主要由果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、己糖醛酸、葡萄糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成。因其具有增强免疫系统功能、抗肿瘤、保肝、降血糖、抗病毒、抗氧化延缓衰老等作用。在兽医临床中，黄芪多糖在免疫调节、抗病毒、抗菌方面有明显的功效，以免疫增强剂和免疫佐剂被广泛应用，可用来防止仔猪腹泻、猪圆环病毒病、猪流感、蓝耳病等。此外，黄芪多糖还能促进畜禽生长，提高动物生产性能，缩短家兔养殖周期等。近年来随着黄芪多糖临床应用的扩大，许多学者对黄芪多糖的提取分离工艺进行了大量研究，但仍存在黄芪多糖提取率普遍较低、提取成本高、提取过程繁琐、耗能高等问题。
黄芪多糖可溶于水，不溶于醇。目前水提法是提取中药多糖的传统方法，水提法方法简单，操作简便易行，但是能耗较大，提取方法不稳定，提取得到的多糖纯度不高，多含有蛋白质、核酸、淀粉等杂质。本发明为了解决上述的水提法提取到的黄芪多糖纯度不高、提取能耗大问题，根据黄芪多糖中大部分有效成分的理化特性及为了节约成本，引入澄清剂除杂过程，有效除去药物成分中的杂质，降低提取过程因需要高温过程产生的能耗，并使提取技术工艺流程趋于稳定，方法重复性好。
发明内容
本发明的目的是克服现有药用甘草提取黄芪多糖纯度、提取率低等缺点，提供一种利用水提技术生产黄芪多糖的工艺。
本发明的实现技术方案为，一种利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺，以黄芪为原料，其特征在于，该方法步骤包括：
1）粗提液获取：干燥黄芪根原料1kg，清洗、干燥、粉碎后加入3~6倍水，投入60~100U/g料液比的酶液，在微波功率为200~350W条件下进行酶解反应2~3h，提取2次，合并提取液静置得到粗提液；
2）浓缩蒸发：在步骤1）得到的粗提液中加入加入天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC，加入量为5~10g/L，静置20~30min后旋转蒸发浓缩粗提液，得到浸膏粗品；
3）溶解除杂：在步骤2）得到的浸膏粗品中加入乙醇，搅拌浸膏进行溶解，静置沉淀，离心去除上清液得到沉淀物，沉淀物再加入乙醇进行搅拌后静置，离心收集沉淀物，得纯品黄芪多糖。
作为本发明的进一步限定条件，所述的清洗为用清水清洗2~3次；所述的粉碎为黄芪粉碎至50~100目。
作为本发明的进一步限定条件，所述的旋转蒸发浓缩为将粗提液蒸发至水比重d为1.0~1.50的浸膏。
作为本发明的进一步限定条件，所述的步骤3）中乙醇的加入量为浸膏的2~5倍体积。
作为本发明的进一步限定条件，所述的天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC为由科立尔生物科技有限公司生产的澄清剂。
本发明取得了以下实质性进步和突出效果：
以药用黄芪开始，经过一系列工序提取优质黄芪多糖，在酶解提取微波作用的基础上，引入植物中药澄清技术实现高品质黄芪多糖的提取纯化，引入的澄清除杂过程能够高效去除黄芪多糖中的蛋白质、核酸、淀粉等大分子杂质，并提高黄芪多糖中有效成分提取产率，改进后的方法黄芪多糖提取率为15.5%以上，得到的黄芪多糖可用于兽医临床中对动物免疫调节、抗病毒、抗菌方面等药物治疗。
本发明黄芪多糖按照一定的比例拌入动物的喂养饲料中，一日三餐中喂养一餐，可以显著提高动物的免疫力，发病率从最初的32%降低到了20.5%，实现动物的健康饲养，减少抗生素、激素药物的治疗，实现生态饲养，提高畜牧养殖经济价值。
具体实施方式
以下实施例描述本发明利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺，这些描述并不是对本发明内容作进一步的限定，以下实施例中所用到的所有试剂均可通过商业手段购买。
本实施例以干燥黄芪为原料，制备方法步骤包括：
1）粗提液获取：干燥黄芪根原料1kg，清洗、干燥、粉碎后加入3倍水（清洗为用清水清洗3次，粉碎为黄芪粉碎至50目），投入100U/g料液比的酶液，在微波功率为200W条件下进行酶解反应3h，提取2次，合并提取液静置放凉，得到粗提液；酶液成分为半纤维素酶、、纤维素酶按照重量份1:1的混合。
2）浓缩蒸发：在步骤1）得到的粗提液中加入由科立尔生物科技有限公司生产的天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC，加入量为5g/L，静置30min后旋转蒸发浓缩粗提液，至水比重d为1.50的浸膏，得到浸膏粗品；
3）溶解除杂：在步骤2）得到的浸膏粗品中加入乙醇，乙醇的加入量为浸膏的5倍体积，搅拌浸膏进行溶解，静置沉淀，离心去除上清液得到沉淀物，沉淀物再加入乙醇进行搅拌后静置，离心收集沉淀物，得纯品黄芪多糖。
本是实施例黄芪多糖的提取率为15.0%。
实施例2
1）粗提液获取：干燥黄芪根原料1kg，清洗、干燥、粉碎后加入6倍水（清洗为用清水清洗2次，粉碎为黄芪粉碎至100目），投入60U/g料液比的酶液，在微波功率为350W条件下进行酶解反应2h，提取2次，合并提取液静置放凉，得到粗提液；酶液成分为真菌淀粉酶。
2）浓缩蒸发：在步骤1）得到的粗提液中加入由科立尔生物科技有限公司生产的天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC，加入量为10g/L，静置20min后旋转蒸发浓缩粗提液，至水比重d为1.0的浸膏，得到浸膏粗品；
3）溶解除杂：在步骤2）得到的浸膏粗品中加入乙醇，乙醇的加入量为浸膏的2倍体积，搅拌浸膏进行溶解，静置沉淀，离心去除上清液得到沉淀物，沉淀物再加入乙醇进行搅拌后静置，离心收集沉淀物，得纯品黄芪多糖。
本是实施例黄芪多糖的提取率为14.5%。
实施例3
1）粗提液获取：干燥黄芪根原料1kg，清洗、干燥、粉碎后加入5倍水（清洗为用清水清洗3次，粉碎为黄芪粉碎至75目），投入80U/g料液比的酶液，在微波功率为250W条件下进行酶解反应3h，提取2次，合并提取液静置放凉，得到粗提液；酶液成分为纤维素酶。
2）浓缩蒸发：在步骤1）得到的粗提液中加入由科立尔生物科技有限公司生产的天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC，加入量为7.5g/L，静置25min后旋转蒸发浓缩粗提液，至水比重d为1.20的浸膏，得到浸膏粗品；
3）溶解除杂：在步骤2）得到的浸膏粗品中加入乙醇，乙醇的加入量为浸膏的3倍体积，搅拌浸膏进行溶解，静置沉淀，离心去除上清液得到沉淀物，沉淀物再加入乙醇进行搅拌后静置，离心收集沉淀物，得纯品黄芪多糖。
本是实施例黄芪多糖的提取率为15.5%。
应用实施例1
黄芪多糖按照一定的比例拌入猪的喂养饲料中（1kg的饲料中添加50g黄芪多糖），一日三餐中喂养一餐，可以显著提高动物的免疫力，发病率从最初的30%降低到了18.5%，实现动物的健康饲养，减少抗生素、激素药物的治疗，实现生态饲养，提高畜牧养殖经济价值。
应用实施例2
黄芪多糖按照一定的比例拌入牛的喂养饲料中（1kg的饲料中添加65g黄芪多糖），一日三餐中喂养一餐，可以显著提高动物的免疫力，发病率从最初的32%降低到了20.5%，实现动物的健康饲养，减少抗生素、激素药物的治疗，实现生态饲养，提高畜牧养殖经济价值。
本发明上述实施例方案仅是对本发明的说明而不能限制本发明，权利要求中指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出本发明的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应当认为是包括在权利要求书的范围内。
本发明是经过多位黄芪多糖提取加工人员长期工作经验积累，并通过创造性劳动创作而出，其在在实际黄芪多糖的提取过程中，该方法可得到黄芪多糖提取率为6.5%以上，得到的黄芪多糖可用于兽医临床中对动物免疫调节、抗病毒、抗菌方面等药物预防治疗。

Claims (6)

1.一种利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺，以黄芪为原料，其特征在于，该方法步骤包括：
1）粗提液获取：干燥黄芪根原料1kg，清洗、干燥、粉碎后加入3~6倍水，投入60~100U/g料液比的酶液，在微波功率为200~350W条件下进行酶解反应2~3h，提取2次，合并提取液静置得到粗提液；
2）浓缩蒸发：在步骤1）得到的粗提液中加入加入天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC，加入量为5~10g/L，静置20~30min后旋转蒸发浓缩粗提液，得到浸膏粗品；
3）溶解除杂：在步骤2）得到的浸膏粗品中加入乙醇，搅拌浸膏进行溶解，静置沉淀，离心去除上清液得到沉淀物，沉淀物再加入乙醇进行搅拌后静置，离心收集沉淀物，得纯品黄芪多糖。
2.根据权利要求1所述的利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺，其特征在于，所述的清洗为用清水清洗2~3次；所述的粉碎为黄芪粉碎至50~100目。
3.根据权利要求1所述的利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺，其特征在于，所述的旋转蒸发浓缩为将粗提液蒸发至水比重d为1.0~1.50的浸膏。
4.根据权利要求1所述的利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺，其特征在于，所述的步骤3）中乙醇的加入量为浸膏的2~5倍体积。
5.根据权利要求1所述的利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺，其特征在于，所述的步骤1）中酶液成分为半纤维素酶、真菌淀粉酶、纤维素酶中的一种或是它们的组合物。
6.根据权利要求1所述的利用酶解微波技术生产黄芪多糖的工艺，其特征在于，所述的天然植物提取液澄清剂KBT-ZTC为由科立尔生物科技有限公司生产的澄清剂。
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