CN105424943A - 一种区分蚕丝种类的检测方法 - Google Patents

一种区分蚕丝种类的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105424943A
CN105424943A CN201510769490.6A CN201510769490A CN105424943A CN 105424943 A CN105424943 A CN 105424943A CN 201510769490 A CN201510769490 A CN 201510769490A CN 105424943 A CN105424943 A CN 105424943A
Authority
CN
China
Prior art keywords
antibody
silk
hole
experiment contrast
blank
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510769490.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105424943B (zh
Inventor
游秋实
王秉
万军民
胡智文
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University of Technology ZJUT
Original Assignee
Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University of Technology ZJUT filed Critical Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority to CN201510769490.6A priority Critical patent/CN105424943B/zh
Publication of CN105424943A publication Critical patent/CN105424943A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105424943B publication Critical patent/CN105424943B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

本发明公开了一种区分蚕丝种类的检测方法,利用不同特征多肽制备蚕丝素蛋白特异抗体来在间接酶联免疫的方法中检测不同种类蚕丝的丝素蛋白成分，即将蚕丝素蛋白洗脱液包被到酶标板上，然后添加兔抗丝素蛋白抗体与抗原结合形成抗原抗体复合物。洗涤后加入碱性磷酸酯酶标山羊抗兔IgG(H+L)抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物，洗涤加入TMB显色液，底物被酶催化为有色产物，根据产物颜色变化的深浅进行定性分析。该方法操作简单，灵敏度高，优于常规检测方法。

Description

一种区分蚕丝种类的检测方法
技术领域
本发明涉及一种区分蚕丝种类的检测方法，主要用于古代丝织品的检测。
背景技术
蚕丝是古代汉族文明产物之一,至今仍是我国的宝贵资源。我国出产的蚕丝有两种，一种是通常所说的桑蚕丝，就是栽桑养家蚕结的茧里抽出的蚕丝，这种蚕丝色泽白里略带黄色，手感细腻、光滑，有一股淡淡的动物纤维特有的气味。另一种蚕丝就是柞蚕丝，它是用柞蚕茧抽丝出来的。柞蚕俗称野蚕，主要生活在北方地区，它由人工放养在野外柞林之中，以柞叶为食。和桑蚕丝相比，柞蚕丝的颜色比较深，纤维较粗，其本色为黑灰色，一般经过漂白后制成成品。在蚕丝起源以及养殖研究领域，迫切需要科学严谨的检测手段。因为桑蚕丝柞蚕丝元素含量相似、仅存在氨基酸组成和结构差异；并且蚕丝作为一种有机高分子材料，长期处于墓葬或遗址环境中，必然会受到多种因素影响而出现蚕丝蛋白质发生降解及大分子链的断裂等问题。所以用常规的检测方法会出现样品前处理困难，耗时长，灵敏度低及其它蛋白质的干扰等问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：针对上述问题提供一种简单快捷、灵敏度高的蚕丝检测方法，利用不同特征多肽制备蚕丝素蛋白特异抗体来在间接酶联免疫的方法中检测不同种类蚕丝的丝素蛋白成分，即将蚕丝素蛋白洗脱液包被到酶标板上，然后添加兔抗丝素蛋白抗体与抗原结合形成抗原抗体复合物，洗涤后加入碱性磷酸酯酶标山羊抗兔IgG(H+L)抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物，洗涤加入TMB显色液，底物被酶催化为有色产物，根据产物颜色变化的深浅可进行定性分析。
为解决上述技术问题，为此采用如下的技术方案；一种区分蚕丝种类的检测方法，根据桑蚕丝素蛋白和柞蚕丝素蛋白的氨基酸序列区别设计合成序列为“MQRKNKNHGILGKC”的多肽作为桑蚕丝素蛋白特异抗体，设计合成序列为“CSHSHSYEASRISVH”的多肽作为柞蚕丝素蛋白特异抗体。
一种区分蚕丝种类的检测方法，具体包括如下步骤：
a)溶液的配制：PBS7.4缓冲液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO4·12H2O3.58g，用蒸馏水定容至1000mL；PBS9.6缓冲溶液配制：Na2CO31.5g，NaHCO32.9g，用蒸馏水定容至1000ml；
封闭液(含质量分数1％BSA)配制：BSA0.1g，加PBS7.4缓冲液定容至10mL；
底物显色液配制：TMB底物溶液与底物缓冲液以1：1体积混合；
终止液(2mol/LH2SO4)配制：蒸馏水178.90mL，逐滴加入98％硫酸21.70mL；
b)将0.01g-0.1g文物样溶解于100-1000mLPH为9.6的缓冲溶液中，混合搅拌均匀，静置，取50-120μl上清液加入到酶标板中，形成实验对照1、2；实验对照1在后续步骤添加兔抗桑蚕丝素蛋白抗体，实验对照2在后续步骤添加兔抗柞蚕丝素蛋白抗体；取50-120μlPH为7.4的PBS缓冲溶液作为空白对照1、2(空白对照与实验对照相对应)用；阴性对照设为不加一抗，其包被液和实验对照设为一样；然后将各阴性对照，空白对照,实验对照各放置于4℃冰箱中过夜；
c)各孔中加入封闭液100-300μl，37℃下封闭1-2h，然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min；
d)分别取用封闭液稀释1000-12000倍的兔抗桑蚕和柞蚕丝素蛋白多克隆抗体50-120μl，加入到酶标板中，保鲜膜封板，37℃下温育1-2h，然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min；
e)各孔中加入用封闭液稀释3000-10000倍的磷酸酯酶山羊抗兔IgG(H+L)抗体50-120μl，37℃下温育1-2h，然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤5次，每次3min；
f)各孔内加底物显色液100μl，置黑暗处使其反应10min；
g)各孔内加终止液50-120μl，终止反应；
h)将酶标板置于酶标仪中，读取λ＝450nm处的吸光度数值；
i)比较实验组测得的OD值；
将空白对照的OD均值+3个SD作为cut-off值；
若实验对照1的OD均值＞空白对照1的cut-off值，则证明所检测的样品为桑蚕丝；
若实验对照2的OD均值＞空白对照2的cut-off值，则证明所检测的样品为柞蚕丝。
本发明的有益效果是：可以以一种简单快捷灵敏度高的方式区分蚕丝的种类，并且可以避免其他蛋白质干扰，特异性强。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明。以下实施例仅对本申请进行进一步说明，不应理解为对本申请的限制。
实施例1
一种区分蚕丝种类的检测方法，具体实施步骤如下：
a)溶液的配制：PBS7.4缓冲液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO4·12H2O3.58g，用蒸馏水定容至1000mL。PBS9.6缓冲溶液配制：Na2CO31.5g，NaHCO32.9g，用蒸馏水定容至1000ml。封闭液(含质量分数1％BSA)配制：BSA0.1g，加PBS7.4缓冲液定容至10mL。底物显色液配制：TMB底物溶液与底物缓冲液以1：1体积混合。终止液(2mol/LH2SO4)配制：蒸馏水178.90mL，逐滴加入98％硫酸21.70mL。
b)将0.01g文物样溶解于100mLPH为9.6的缓冲溶液中，混合搅拌均匀，静置，取50μl上清液加入到酶标板中，形成实验对照1、2(实验对照1在后续步骤添加兔抗桑蚕丝素蛋白抗体，实验对照2在后续步骤添加兔抗柞蚕丝素蛋白抗体)。取50μlPH为7.4的PBS缓冲溶液作为空白对照1、2(空白对照与实验对照相对应)用。阴性对照设为不加一抗，其包被液和实验对照设为一样。然后将各阳性对照，阴性对照，空白对照,实验对照各放置于4℃冰箱中过夜。
c)各孔中加入封闭液100μl。37℃下封闭1h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min。
d)分别取用封闭液稀释1000倍的兔抗桑蚕和柞蚕丝素蛋白多克隆抗体50μl，加入到酶标板中，保鲜膜封板，37℃下温育1h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min。
e)各孔中加入用封闭液稀释3000倍的磷酸酯酶山羊抗兔IgG(H+L)抗体50μl，37℃下温育1-2h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤5次，每次3min。
f)各孔内加底物显色液100μl，置黑暗处使其反应10min。
g)各孔内加终止液50μl，终止反应。
h)将酶标板置于酶标仪中，读取λ＝450nm处的吸光度数值。
i)比较实验组测得的OD值。
将空白对照的OD均值+3个SD作为cut-off值。
若实验对照1的OD均值＞空白对照1的cut-off值，则证明所检测的样品为桑蚕丝；
若实验对照2的OD均值＞空白对照2的cut-off值，则证明所检测的样品为柞蚕丝。
实施例2
一种区分蚕丝种类的检测方法，具体实施步骤如下：
a)溶液的配制：PBS7.4缓冲液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO4·12H2O3.58g，用蒸馏水定容至1000mL。PBS9.6缓冲溶液配制：Na2CO31.5g，NaHCO32.9g，用蒸馏水定容至1000ml。封闭液(含质量分数1％BSA)配制：BSA0.1g，加PBS7.4缓冲液定容至10mL。底物显色液配制：TMB底物溶液与底物缓冲液以1：1体积混合。终止液(2mol/LH2SO4)配制：蒸馏水178.90mL，逐滴加入98％硫酸21.70mL。
b)将0.05g文物样溶解于500mLPH为9.6的缓冲溶液中，混合搅拌均匀，静置，取70μl上清液加入到酶标板中，形成实验对照1、2(实验对照1在后续步骤添加兔抗桑蚕丝素蛋白抗体，实验对照2在后续步骤添加兔抗柞蚕丝素蛋白抗体)。取70μlPH为7.4的PBS缓冲溶液作为空白对照1、2(空白对照与实验对照相对应)用。阴性对照设为不加一抗，其包被液和实验对照设为一样。然后将各阳性对照，阴性对照，空白对照,实验对照各放置于4℃冰箱中过夜。
c)各孔中加入封闭液200μl。37℃下封闭1.5h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min。
d)分别取用封闭液稀释7000倍的兔抗桑蚕和柞蚕丝素蛋白多克隆抗体70μl，加入到酶标板中，保鲜膜封板，37℃下温育1.5h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min。
e)各孔中加入用封闭液稀释7000倍的磷酸酯酶山羊抗兔IgG(H+L)抗体70μl，37℃下温育1.5h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤5次，每次3min。
f)各孔内加底物显色液100μl，置黑暗处使其反应10min。
g)各孔内加终止液70μl，终止反应。
h)将酶标板置于酶标仪中，读取λ＝450nm处的吸光度数值。
i)比较实验组测得的OD值。
将空白对照的OD均值+3个SD作为cut-off值。
若实验对照1的OD均值＞空白对照1的cut-off值，则证明所检测的样品为桑蚕丝；
若实验对照2的OD均值＞空白对照2的cut-off值，则证明所检测的样品为柞蚕丝。
实施例3
一种区分蚕丝种类的检测方法，具体实施步骤如下：
a)溶液的配制：PBS7.4缓冲液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO4·12H2O3.58g，用蒸馏水定容至1000mL。PBS9.6缓冲溶液配制：Na2CO31.5g，NaHCO32.9g，用蒸馏水定容至1000ml。封闭液(含质量分数1％BSA)配制：BSA0.1g，加PBS7.4缓冲液定容至10mL。底物显色液配制：TMB底物溶液与底物缓冲液以1：1体积混合。终止液(2mol/LH2SO4)配制：蒸馏水178.90mL，逐滴加入98％硫酸21.70mL。
b)将0.1g文物样溶解于1000mLPH为9.6的缓冲溶液中，混合搅拌均匀，静置，取100μl上清液加入到酶标板中，形成实验对照1、2(实验对照1在后续步骤添加兔抗桑蚕丝素蛋白抗体，实验对照2在后续步骤添加兔抗柞蚕丝素蛋白抗体)。取100μlPH为7.4的PBS缓冲溶液作为空白对照1、2(空白对照与实验对照相对应)用。阴性对照设为不加一抗，其包被液和实验对照设为一样。然后将各阳性对照，阴性对照，空白对照,实验对照各放置于4℃冰箱中过夜。
c)各孔中加入封闭液300μl。37℃下封闭2h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min。
d)分别取用封闭液稀释10000倍的兔抗桑蚕和柞蚕丝素蛋白多克隆抗体100μl，加入到酶标板中，保鲜膜封板，37℃下温育2h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min。
e)各孔中加入用封闭液稀释8000倍的磷酸酯酶山羊抗兔IgG(H+L)抗体100μl，37℃下温育2h。然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤5次，每次3min。
f)各孔内加底物显色液100μl，置黑暗处使其反应10min。
g)各孔内加终止液100μl，终止反应。
h)将酶标板置于酶标仪中，读取λ＝450nm处的吸光度数值。
i)比较实验组测得的OD值。
将空白对照的OD均值+3个SD作为cut-off值。
若实验对照1的OD均值＞空白对照1的cut-off值，则证明所检测的样品为桑蚕丝；
若实验对照2的OD均值＞空白对照2的cut-off值，则证明所检测的样品为柞蚕丝。

Claims (3)

1.一种区分蚕丝种类的检测方法,其特征在于利用不同特征多肽制备蚕丝素蛋白特异抗体来在间接酶联免疫的方法中检测不同种类蚕丝的丝素蛋白成分，即将蚕丝素蛋白洗脱液包被到酶标板上，然后添加兔抗丝素蛋白抗体与抗原结合形成抗原抗体复合物，洗涤后加入碱性磷酸酯酶标山羊抗兔IgG(H+L)抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物，洗涤加入TMB显色液，底物被酶催化为有色产物，根据产物颜色变化的深浅可进行定性分析。
2.根据权利要求1所述的区分蚕丝种类的检测方法，其特征是：根据桑蚕丝素蛋白和柞蚕丝素蛋白的氨基酸序列区别设计合成序列为“MQRKNKNHGILGKC”的多肽作为桑蚕丝素蛋白特异抗体，设计合成序列为“CSHSHSYEASRISVH”的多肽作为柞蚕丝素蛋白特异抗体。
3.根据权利要求1所述的区分蚕丝种类的检测方法，其特征在于包括如下步骤：
a)溶液的配制：PBS7.4缓冲液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO4·12H2O3.58g，用蒸馏水定容至1000mL；PBS9.6缓冲溶液配制：Na2CO31.5g，NaHCO32.9g，用蒸馏水定容至1000ml；
封闭液(含质量分数1％BSA)配制：BSA0.1g，加PBS7.4缓冲液定容至10mL；
底物显色液配制：TMB底物溶液与底物缓冲液以1：1体积混合；
终止液(2mol/LH2SO4)配制：蒸馏水178.90mL，逐滴加入98％硫酸21.70mL；
b)将0.01g-0.1g文物样溶解于100-1000mLPH为9.6的缓冲溶液中，混合搅拌均匀，静置，取50-120μl上清液加入到酶标板中，形成实验对照1、2；实验对照1在后续步骤添加兔抗桑蚕丝素蛋白抗体，实验对照2在后续步骤添加兔抗柞蚕丝素蛋白抗体；取50-120μlPH为7.4的PBS缓冲溶液作为空白对照1、2(空白对照与实验对照相对应)用；阴性对照设为不加一抗，其包被液和实验对照设为一样；然后将各阴性对照，空白对照,实验对照各放置于4℃冰箱中过夜；
c)各孔中加入封闭液100-300μl，37℃下封闭1-2h，然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min；
d)分别取用封闭液稀释1000-12000倍的兔抗桑蚕和柞蚕丝素蛋白多克隆抗体50-120μl，加入到酶标板中，保鲜膜封板，37℃下温育1-2h，然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤3次，每次3min；
e)各孔中加入用封闭液稀释3000-10000倍的磷酸酯酶山羊抗兔IgG(H+L)抗体50-120μl，37℃下温育1-2h，然后吸出孔内液体，用PH为7.4的PBS缓冲溶液洗涤5次，每次3min；
f)各孔内加底物显色液100μl，置黑暗处使其反应10min；
g)各孔内加终止液50-120μl，终止反应；
h)将酶标板置于酶标仪中，读取λ＝450nm处的吸光度数值；
i)比较实验组测得的OD值；
将空白对照的OD均值+3个SD作为cut-off值；
若实验对照1的OD均值＞空白对照1的cut-off值，则证明所检测的样品为桑蚕丝；
若实验对照2的OD均值＞空白对照2的cut-off值，则证明所检测的样品为柞蚕丝。
CN201510769490.6A 2015-11-12 2015-11-12 一种区分蚕丝种类的检测方法 Active CN105424943B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510769490.6A CN105424943B (zh) 2015-11-12 2015-11-12 一种区分蚕丝种类的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510769490.6A CN105424943B (zh) 2015-11-12 2015-11-12 一种区分蚕丝种类的检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105424943A true CN105424943A (zh) 2016-03-23
CN105424943B CN105424943B (zh) 2017-07-28

Family

ID=55503282

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510769490.6A Active CN105424943B (zh) 2015-11-12 2015-11-12 一种区分蚕丝种类的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105424943B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107057683A (zh) * 2016-12-28 2017-08-18 浙江大学 一种丝素荧光探针的制备方法
CN110057811A (zh) * 2018-10-26 2019-07-26 国家纺织服装产品质量监督检验中心（浙江桐乡） 一种快速判定桑蚕丝是否接枝的方法

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108918861A (zh) * 2018-03-21 2018-11-30 浙江理工大学 一种探究碱老化过程中桑蚕丝素蛋白一级结构变化的方法
CN109541218B (zh) * 2018-12-17 2022-07-12 浙江理工大学 一种基于酶联免疫鉴别丝织品残片的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101881776A (zh) * 2010-06-12 2010-11-10 苏州大学 一种鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法
CN103308616A (zh) * 2013-05-30 2013-09-18 中国丝绸博物馆 一种基于氨基酸分析的丝绸文物纤维材质鉴别方法
CN103509107A (zh) * 2013-08-07 2014-01-15 浙江大学 利用特征多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法
CN103575908A (zh) * 2013-10-30 2014-02-12 浙江理工大学 一种古代文物材料中胶原蛋白的检测方法
CN104459163A (zh) * 2014-12-31 2015-03-25 浙江理工大学 一种古代丝织品的检测方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101881776A (zh) * 2010-06-12 2010-11-10 苏州大学 一种鉴别桑蚕丝和柞蚕丝的定量分析方法
CN103308616A (zh) * 2013-05-30 2013-09-18 中国丝绸博物馆 一种基于氨基酸分析的丝绸文物纤维材质鉴别方法
CN103509107A (zh) * 2013-08-07 2014-01-15 浙江大学 利用特征多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法
CN103575908A (zh) * 2013-10-30 2014-02-12 浙江理工大学 一种古代文物材料中胶原蛋白的检测方法
CN104459163A (zh) * 2014-12-31 2015-03-25 浙江理工大学 一种古代丝织品的检测方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ABHIK DATTA ET AL.: "Differential expression of the fibroin gene in developmental stages of silkworm, Antheraea mylitta(Saturniidae)", 《COMPARATIVE BIOCHEMISTRY AND PHYSIOLOGY PART B: BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY》 *
郑秦等: "利用丝素蛋白抗体鉴定古代丝织品", 《蚕业科学》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107057683A (zh) * 2016-12-28 2017-08-18 浙江大学 一种丝素荧光探针的制备方法
CN107057683B (zh) * 2016-12-28 2019-04-12 浙江大学 一种丝素荧光探针的制备方法
CN110057811A (zh) * 2018-10-26 2019-07-26 国家纺织服装产品质量监督检验中心（浙江桐乡） 一种快速判定桑蚕丝是否接枝的方法
CN110057811B (zh) * 2018-10-26 2021-11-02 国家纺织服装产品质量监督检验中心（浙江桐乡） 一种快速判定桑蚕丝是否接枝的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105424943B (zh) 2017-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105424943A (zh) 一种区分蚕丝种类的检测方法
CN103509107B (zh) 利用特征多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法
CN104792991B (zh) 一种基于单克隆抗体的检测食品中沙门氏菌属的特异性双抗体夹心法
Li et al. Expression of COX-2, iNOS, p53 and Ki-67 in gastric mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma
Zheng et al. Development of an enzyme-linked-immunosorbent-assay technique for accurate identification of poorly preserved silks unearthed in ancient tombs
CN104459163A (zh) 一种古代丝织品的检测方法
CN103575908B (zh) 一种古代文物材料中胶原蛋白的检测方法
CN101561433B (zh) 一种原料乳和乳制品中总蛋白含量的酶联免疫检测方法及试剂盒
CN113683702A (zh) 条纹斑竹鲨单域抗体的多克隆抗体的制备方法及其应用
CN110646614A (zh) Ibdv抗体的elisa试剂盒和测试方法、有效抗体效价确定方法
Kalmar et al. Determination of muscle fiber type in rodents
CN101285839B (zh) 快速检测新城疫病毒的方法及其免疫胶体金测试卡
CN105353118A (zh) 一种古代羊毛织品中角蛋白的检测方法
CA2991093A1 (en) Method for assessing cell surface receptors of blood cells
CN106093403A (zh) 一种优化的用双抗体夹心ELISA法检测β‑内酰胺酶的方法
CN108359642B (zh) 一种虾原肌球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞及其应用
Chikazawa et al. Development of a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay to detect and measure serum levels of canine ferritin
CN103777021A (zh) 狂犬疫苗糖蛋白含量的检测方法
Corrales et al. Diagnosis and risk factors of bovine and human fascioliasis in cattle farms from a Venezuelan Andean rural area
Datta et al. Diagnosis of mixed gastrointestinal nematode infection in goat by an indirect-ELISA
CN104316689A (zh) 一种髓过氧化物酶定量检测方法及检测试剂
CN105738632A (zh) 一种区分羊皮种类的检测方法
CA2386675A1 (en) Assays for mastitis detecting haptoglobin in milk
JP2012210159A (ja) タマウミヒドラプラヌラ幼生を特定する方法
CN108037279A (zh) 一种提高elisa试剂盒信噪比的通用型酶标板洗涤液及其使用方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant