CN105420088B - 一种细胞分离管 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种细胞分离管，包括管体，还包括置于所述管体内的细胞分离胶体，所述细胞分离胶体与所述管体底部之间形成一空腔，所述细胞分离胶体在25℃时的比重为1.06‑1.09，所述细胞分离胶体在600g‑1000g的离心力作用下能触变成液体。在加入血液进行细胞分离的时候，在特定大小的离心力作用下，本发明的细胞分离管中的细胞分离胶体发生触变形成液体，在分离管中向上移动，把高于和低于细胞分离胶体密度的细胞隔开。

Description

一种细胞分离管
技术领域
本发明涉及生物医学领域的细胞分离技术，特别是涉及一种细胞分离管。
背景技术
在临床医学检验中，针对特定细胞功能和生物学特性的检查常常涉及到细胞的分离技术，从外周血液和各种体液(胸水、腹水、心包积液等)中分离单个核细胞是体外进行淋巴细胞免疫学研究和细胞学实验的重要前处理步骤，分离的目的细胞的质和量是保证后续实验可靠性的重要环节。
外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)是参与机体免疫应答反应的一类重要免疫细胞群。PBMCs主要包含淋巴细胞和单核细胞，PBMCs中大部分(80％～90％)为淋巴细胞，对不同淋巴细胞的分离、鉴别以及功能的研究对疾病的诊断乃至治疗都有十分重要的临床意义。
目前，普遍采用的是淋巴细胞分离液通过密度梯度法实现细胞分离，但是分离过程中，特别是大批量样本处理时，血液样品加入淋巴细胞分离液时，二者界面很容易发生混合，造成分离效果差，效率低。
发明内容
本发明提出一种细胞分离管，其结构简单便于制造，安全无毒且成本低廉。
本发明的技术问题通过以下的技术方案予以解决：
一种细胞分离管，包括管体和置于所述管体内的细胞分离胶体，所述细胞分离胶体与所述管体底部之间形成一空腔，所述细胞分离胶体在25℃时比重为1.06-1.09，所述细胞分离胶体在600g-1000g的离心力作用下能触变成液体。
优选地：
所述细胞分离胶体的厚度为1.0cm-2.0cm。
所述细胞分离胶体具有疏水性，由以下重量份数的各组分组成：
双环戊二烯树脂：90-100份；
海藻糖：3-4份；
山梨糖醇：0.8-1.2份；
细颗粒二氧化硅：2-2.5份；
聚乙二醇：0.5-0.8份；
聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：8-12份；
有机膨润土：5-7份。
进一步优选地：
所述细胞分离胶体由以下重量份数的各组分组成：
双环戊二烯树脂：95.00份；
海藻糖：3.20份；
山梨糖醇：0.90份；
细颗粒二氧化硅：2.25份；
聚乙二醇：0.60份；
聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：10份；
有机膨润土：5.5份。
所述细颗粒二氧化硅的平均粒度为0.05-1μm。
本发明的有益效果是：本发明中的细胞分离胶体的触变性好、稳定性强、材料相容性好，生物毒性小，耐辐照。由于细胞分离胶体本身具有伸缩性和触变性，可以依靠其自身的伸缩性而固定在管体下方，不需要任何的胶水来粘合，也可以不需要对管体做任何特殊的结构，在加入血液进行细胞分离的时候，在特定大小的离心力作用下，细胞分离胶体发生触变形成液体，在分离管中向上移动，把高于和低于细胞分离胶体密度的细胞隔开。
附图说明
图1是采用本发明的细胞分离管分离PBMCs细胞的过程示意图。
具体实施方式
下面对照附图并结合优选的实施方式对本发明作进一步说明。
如图1所示，本发明提供一种细胞分离管，在一个优选实施例中，该细胞分离管包括管体1和细胞分离胶体2，细胞分离胶体2具有伸缩性，依靠自身的伸缩性置于管体1内，无外力作用时，不会移动，将细胞分离胶体2置于管体1的中下部位置较适宜，在细胞分离胶体2与管体1的底部之间形成一空腔，细胞分离胶体在25℃时比重为1.06-1.09，在600g-1000g的离心力作用下能触变成液体，细胞分离胶体的厚度为1.0cm-2.0cm。
本发明所用的管体，可以根据需要采用常见的各种容量规格的离心管。在优选的实施例中，细胞分离胶体具有疏水性，并由以下重量份数的各组分组成：双环戊二烯树脂(DCPD树脂)：90-100份；海藻糖：3-4份；山梨糖醇：0.8-1.2份；细颗粒二氧化硅：2-2.5份；聚乙二醇：0.5-0.8份；聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：8-12份；有机膨润土：5-7份。其中，所述的细颗粒二氧化硅的平均粒度为0.05-1μm。
以分离淋巴细胞为例，本发明的细胞分离管工作时的具体操作过程如图1所示，其中1表示管体，2表示细胞分离胶体，3表示血液样品，4表示细胞分离液，5表示红细胞，6表示PBMCs细胞，7表示血浆。图1中，左图：将细胞分离液倒入细胞分离管内，细胞分离液最好紧贴细胞分离胶体，不能有气泡；图1中的中图：然后将血液样品倒入细胞分离管，此时，由于细胞分离胶体的隔离，血液样品与细胞分离液不会混合，旋紧盖子，放入离心机，设置常规的离心力(600g-1000g之间的任意离心力)和常规的离心时间进行离心；图1中的右图：在离心力场的作用下，细胞分离胶体触变成液体，细胞分离管内形成具有梯度的液体体系，根据密度的大小不同，细胞分离管内的液体分成清晰的五层，从下到上依次是：红细胞5、细胞分离液4、细胞分离胶体2、PBMCs细胞6以及血浆7。然后取出细胞分离管，吸去最上层的血浆层，吸出PBMCs细胞层，清洗，离心，染色，计数。
采用本发明的细胞分离管经过多次实验，发现分离血液淋巴细胞的效果非常理想，与传统的直接使用细胞分离液进行淋巴细胞分离作了对比，具体的实验数据见下方的表一，其中，本实施例中所用的细胞分离胶体由以下重量份数的各组分组成：双环戊二烯树脂：95.00份；海藻糖：3.20份；山梨糖醇：0.90份；细颗粒二氧化硅：2.25份；聚乙二醇：0.60份；聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：10份；有机膨润土：5.5份。
表一：本发明的细胞分离管、传统的细胞分离液分离全血得到的淋巴细胞得率
样品 血样体积 细胞得率 细胞总数
本实施例 细胞分离管 3mL 170w/mL 520w
传统技术 细胞分离液 3mL 145w/mL 430w
实验表明，分离相同量的血液，本发明的细胞分离管的分离效果比传统的细胞分离液的分离效果好。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干等同替代或明显变型，而且性能或用途相同，都应当视为属于本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种细胞分离管，包括管体，其特征在于：还包括置于所述管体内的细胞分离胶体，所述细胞分离胶体与所述管体底部之间形成一空腔，所述细胞分离胶体在25℃时的比重为1.06-1.09，所述细胞分离胶体在600g-1000g的离心力作用下能触变成液体，在分离管中向上移动，把高于和低于细胞分离胶体密度的细胞隔开；所述细胞分离胶体具有疏水性，由以下重量份数的各组分组成：
双环戊二烯树脂：90-100份；
海藻糖：3-4份；
山梨糖醇：0.8-1.2份；
细颗粒二氧化硅：2-2.5份；
聚乙二醇：0.5-0.8份；
聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：8-12份；
有机膨润土：5-7份。
2.如权利要求1所述的细胞分离管，其特征在于：所述细胞分离胶体的厚度为1.0cm-2.0cm。
3.如权利要求1所述的细胞分离管，其特征在于：所述细胞分离胶体由以下重量份数的各组分组成：
双环戊二烯树脂：95.00份；
海藻糖：3.20份；
山梨糖醇：0.90份；
细颗粒二氧化硅：2.25份；
聚乙二醇：0.60份；
聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物：10份；
有机膨润土：5.5份。
4.如权利要求1所述的细胞分离管，其特征在于：所述细颗粒二氧化硅的平均粒度为0.05-1μm。
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