CN105381501A - 可降解生物复合止血膜及其制备方法 - Google Patents

可降解生物复合止血膜及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种可降解生物复合止血膜及其制备方法,制备方法包括如下步骤:配制含有透明质酸钠和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的交联前体溶液;将羧甲基壳聚糖溶液加入到所述交联前体溶液中,10℃~40℃下搅拌混匀后静置使得充分交联,得到交联凝胶;以及采用洗涤液将所述交联凝胶洗涤干净后定型,接着将定型后的所述交联凝胶干燥,得到可降解生物复合止血膜。这种可降解生物复合止血膜的制备方法制得的可降解生物复合止血膜中的透明质酸钠通过交联,相对于传统的材料为未交联的透明质酸钠的止血膜,能够在动物组织中较长时间残留。

Description

可降解生物复合止血膜及其制备方法

技术领域

[0001] 本发明设及医疗材料领域,特别是设及一种可降解生物复合止血膜及其制备方 法。

背景技术

[0002] 手术中出血的治疗是较为棘手的问题,目前使用的止血方法为一般压迫止血、电 凝止血、结扎止血W及传统的机械止血方法。随着各国医学界对无菌止血材料止血性能要 求的提高,近年来医用可吸收止血材料引起了各国医学界和产业界的高度重视,随着对海 绵材料性能要求的提高,开发止血效果更佳、绿色、环保、可降解、无毒、无副作用、无刺激 性、易于加工成型、具有良好的生物相容性的医用海绵材料势在必行。

[0003] 目前医用止血材料主要有纤维蛋白胶、明胶海绵、氧化纤维素、微纤维胶原、壳聚 糖及藻酸巧纤维等。多聚糖止血材料及止血海绵目前在国内没有生产,国外目前也是推出 不久。

[0004] 因此,从现有的条件出发,寻找自然界中优良的生物材料并加W加工、改进成为 一种理想的选择。其次,可根据各种止血材料不同的性能,采用多种止血材料联用的方 法,使材料发挥更好的止血性能。壳聚糖与胶原的联合,就是利用蛋白质和糖类间的氨键 作用、静电作用,再加上氨基、径基等基团间的相互交联来提高力学强度,从而更有效地达 到止血的目的。 阳〇化]传统的可降解生物复合止血膜一般采用天然透明质酸冷冻干燥制成。然而,天然 的透明质酸容易被机体中的组织酶降解,良好的水溶性使其在组织中容易被扩散,因此在 动物组织的残留时间并不令人满意,不能满足伤口愈合10天~20天的临床要求。

发明内容

[0006] 基于此,有必要提供一种能够在动物组织中较长时间残留的可降解生物复合止血 膜及其制备方法。

[0007] 一种可降解生物复合止血膜的制备方法,包括如下步骤:

[0008] 配制含有透明质酸钢和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐的交联 前体溶液;

[0009] 将簇甲基壳聚糖溶液加入到所述交联前体溶液中,l〇°C~40°C下揽拌混匀后静置 使得充分交联,得到交联凝胶;W及

[0010] 采用洗涂液将所述交联凝胶洗涂干净后定型,接着将定型后的所述交联凝胶干 燥,得到可降解生物复合止血膜。

[0011] 在一个实施例中,所述交联前体溶液中,所述透明质酸钢的浓度为15g/L~25g/ L所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐的浓度为5g/L~20g/L。

[0012] 在一个实施例中,所述交联前体溶液中还含有的N-径基班巧酷亚胺;

[0013] 所述交联前体溶液中,所述N-径基班巧酷亚胺与所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙 基)碳酷二亚胺盐酸盐的质量比为1:1~3。

[0014] 在一个实施例中,所述配制含有透明质酸钢和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳 酷二亚胺盐酸盐的交联前体溶液的操作为:将1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酷二亚胺 盐酸盐加入到抑为4. 5~5. 5的透明质酸钢溶液中,充分揽拌直至所述1-乙基-(3-二甲 基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐完全溶解,得到所述交联前体溶液。

[0015] 在一个实施例中,所述簇甲基壳聚糖溶液的浓度为15g/L~25g/L。

[0016] 在一个实施例中,所述将簇甲基壳聚糖溶液加入到所述交联前体溶液中的操作 中,所述簇甲基壳聚糖溶液与所述交联前体溶液的体积比为1 :1~3。

[0017] 在一个实施例中,所述采用洗涂液将所述交联凝胶洗涂干净后定型的操作中,所 述洗涂液为纯化水或浓度为0. 5mol/L~3mol/L的氯化钢溶液,所述洗涂的操作为:将所述 洗涂液加入到所述交联凝胶中,充分浸泡后抽滤,重复洗涂2次~5次。

[0018] 在一个实施例中,所述采用洗涂液将所述交联凝胶洗涂干净后定型的操作中,所 述定型的操作为:将洗涂干净的所述交联凝胶揽拌均匀后注入深度为5mm~15mm冷冻盒 中,待所述交联凝胶自动流平溢出后沿所述冷冻盒的上沿刮平,接着在-10~-30°C下冷冻 定型化~化。

[0019] 在一个实施例中,所述将定型后的所述交联凝胶干燥的操作中,所述干燥为 在-20~5°C下冷冻干燥24h~35h。

[0020] 一种可降解生物复合止血膜,采用如上所述的可降解生物复合止血膜的制备方法 制得。

[0021] 运种可降解生物复合止血膜的制备方法,通过含有透明质酸钢和1-乙基-(3-二 甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐的交联前体溶液与簇甲基壳聚糖溶液交联得到冷冻凝 胶,接着将冷冻凝胶定型、干燥,得到可降解生物复合止血膜。运种可降解生物复合止血膜 的制备方法制得的可降解生物复合止血膜中的透明质酸钢通过交联,相对于传统的材料为 未交联的透明质酸钢的止血膜,能够在动物组织中较长时间残留。

附图说明

[0022] 图1为一实施方式的可降解生物复合止血膜的制备方法的流程图。

具体实施方式

[0023] 下面主要结合附图及具体实施例对可降解生物复合止血膜及其制备方法作进一 步详细的说明。

[0024] 如图1所示的一实施方式的可降解生物复合止血膜的制备方法,包括如下步骤:

[0025] S10、配制含有透明质酸钢和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐的 交联前体溶液。

[0026] 交联前体溶液中,透明质酸钢的浓度可W为15g/L~25g/l,l-乙基-(3-二甲基 氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐巧DC·肥1)的浓度可W为5g/L~20g/L。

[0027] 在一个优选的实施例中,交联前体溶液中还含有的N-径基班巧酷亚胺(N服)。交 联前体溶液中,N-径基班巧酷亚胺与1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐的 质量比为1:1~3。

[0028] SIO中,配制含有透明质酸钢和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐 的交联前体溶液的操作可W为:将1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐加入 到抑为4. 5~5. 5的透明质酸钢溶液中,充分揽拌(揽拌时间可W为30min~50min)直 至1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐完全溶解,得到交联前体溶液。

[0029] 透明质酸钢溶液的抑可W采用浓度为0.Imol/L的盐酸调节。

[0030] S20、将簇甲基壳聚糖溶液加入到S10得到的交联前体溶液中,10°C~40°C下揽拌 混匀后静置使得充分交联,得到交联凝胶。 阳03US20中,簇甲基壳聚糖溶液的浓度可W为15g/L~25g/L。 阳03引 S20中,交联反应的时间可W为lOh~20h。

[0033] 将簇甲基壳聚糖溶液加入到交联前体溶液中的操作中,簇甲基壳聚糖溶液与交联 前体溶液的体积比为1 :1~3。

[0034]S30、采用洗涂液将S20得到的交联凝胶洗涂干净后定型,接着将定型后的交联凝 胶干燥,得到可降解生物复合止血膜。

[0035] 采用洗涂液将交联凝胶洗涂干净后定型的操作中,洗涂液为纯化水或浓度为 0. 5mol/L~3mol/L的氯化钢溶液,洗涂的操作为:将洗涂液加入到交联凝胶中,充分浸泡 后抽滤,重复洗涂2次~5次。

[0036] 采用洗涂液将交联凝胶洗涂干净后定型的操作中,定型的操作为:将洗涂干净的 交联凝胶揽拌均匀后注入冷冻盒中,待交联凝胶自动流平溢出后沿冷冻盒的上沿刮平,接 着冷冻定型化~化。

[0037] 将定型后的交联凝胶干燥的操作中,干燥为冷冻干燥24h~35h。

[0038] 一般的,干燥后得到的可降解生物复合止血膜还需要经过压片、切片等操作,得到 需要的大小。

[0039] 运种可降解生物复合止血膜的制备方法,通过含有透明质酸钢和1-乙基-(3-二 甲基氨基丙基)碳酷二亚胺盐酸盐的交联前体溶液与簇甲基壳聚糖溶液交联得到冷冻凝 胶,接着将冷冻凝胶定型、干燥,得到可降解生物复合止血膜。运种可降解生物复合止血膜 的制备方法制得的可降解生物复合止血膜中的透明质酸钢通过交联,相对于传统的材料为 未交联的透明质酸钢的止血膜,能够在动物组织中较长时间残留。

[0040] 本发明还公开了一实施方式的可降解生物复合止血膜,采用上述的可降解生物复 合止血膜的制备方法制得。

[0041] 运种可降解生物复合止血膜中的透明质酸钢通过交联,相对于传统的材料为未交 联的透明质酸钢的止血膜,能够在动物组织中较长时间残留。

[0042] 运种可降解生物复合止血膜能有效防止手术中的出血现象,保护创面、防止粘连, 并能在体内完全降解,适用于各类外科手术渗出血创伤的止血。

[0043] 下面为具体实施例。 阳044] 实施例1

[0045] (1)称取4g透明质酸钢,加入到盛有200mL纯化水的容器中,在揽拌条件下使之完 全溶解,配制得到20g/L的透明质酸钢溶液,用0.Imol/L的盐酸溶液将配制好的透明质酸 钢溶液抑值调节为4. 6。

[0046] 似称取2. 2姐DC·肥L加入到步骤(1)中配制得到的透明质酸钢溶液中,揽拌使 之充分溶解,制得交联前体溶液。

[0047] (3)称取2. 2g簇甲基壳聚糖,加入到盛有lOOmL纯化水的容器中,在揽拌条件下使 之完全溶解,配制得到22g/L的簇甲基壳聚糖溶液。 W48] (4)将步骤(3)中配置好的簇甲基壳聚糖溶液加入步骤似中制得的交联前体溶 液中,在15°C溫度下揽拌30min,使之均匀,然后静置lOh,使之充分交联,得到交联凝胶。 W例 妨量取40mLl. 2mol/L氯化钢溶液加入到步骤(4)中得到的交联凝胶中进行洗 涂,浸泡15min进行抽滤,洗涂2次。

[0050] (6)将步骤妨中制得的交联凝胶注入冷冻盒中,待其自动流平溢出,然后用刮刀 沿冷冻盒上沿将其刮平,之后将冷冻盒进行冷冻定型化,冷冻定型之后的交联凝胶脱冷冻 盒后迅速放入冷冻干燥机干燥室中,冷冻干燥32h。然后压片、切片、灭菌后得到可降解生物 复合止血膜。 阳0川 实施例2 阳0巧(1)称取20g透明质酸钢,加入到盛有900mL纯化水的容器中,在揽拌条件下使之 完全溶解,配制得到22. 22g/L的透明质酸钢溶液,用0.Imol/L的盐酸溶液将配制好的透明 质酸钢溶液抑值调节为4. 5。 阳化引 似称取7. 5姐DC·肥L加入到步骤(1)中配制得到的透明质酸钢溶液中,揽拌使 之充分溶解,制得交联前体溶液。

[0054] (3)称取12g簇甲基壳聚糖,加入到盛有750mL纯化水的容器中,在揽拌条件下使 之完全溶解,配制得到16g/L的簇甲基壳聚糖溶液。

[005引 (4)将步骤(3)中配置好的簇甲基壳聚糖溶液加入步骤似中制得的交联前体溶 液中,在32°C溫度下揽拌20min,使之均匀,然后静置lOh,使之充分交联,得到交联凝胶。

[0056] 妨量取150血2. 3mol/L氯化钢溶液加入到步骤(4)中得到的交联凝胶中进行洗 涂,浸泡15min进行抽滤,洗涂3次。

[0057] (6)将步骤巧)中制得的交联凝胶注入冷冻盒中,待其自动流平溢出,然后用刮刀 沿冷冻盒上沿将其刮平,之后将冷冻盒进行冷冻定型化,冷冻定型之后的交联凝胶脱冷冻 盒后迅速放入冷冻干燥机干燥室中,冷冻干燥30h。然后压片、切片、灭菌后得到可降解生物 复合止血膜。 阳0郎]实施例3

[0059] (1)称取13g透明质酸钢,加入到盛有720mL纯化水的容器中,在揽拌条件下使之 完全溶解,配制得到18g/L的透明质酸钢溶液,用0.Imol/L的盐酸溶液将配制好的透明质 酸钢溶液抑值调节为5. 0。 W60] 0)称取10姐DC·肥L与畑S的混合物加入到步骤(1)中配制得到的透明质酸钢 溶液中,揽拌使之充分溶解,制得交联前体溶液。

[0061] (3)称取12g簇甲基壳聚糖,加入到盛有750mL纯化水的容器中,在揽拌条件下使 之完全溶解,配制得到16g/L的簇甲基壳聚糖溶液。 阳06引(4)将步骤(3)中配置好的簇甲基壳聚糖溶液加入步骤似中制得的交联前体溶 液中,在15°C溫度下揽拌40min,使之均匀,然后静置16h,使之充分交联,得到交联凝胶。 [006引 妨量取100血纯化水加入到步骤(4)中得到的交联凝胶中进行洗涂,浸泡15min 进行抽滤,洗涂3次。 W64] (6)将步骤妨中制得的交联凝胶注入冷冻盒中,待其自动流平溢出,然后用刮刀 沿冷冻盒上沿将其刮平,之后将冷冻盒进行冷冻定型化,冷冻定型之后的交联凝胶脱冷冻 盒后迅速放入冷冻干燥机干燥室中,冷冻干燥24h。然后压片、切片、灭菌后得到可降解生物 复合止血膜。 W65] 实施例4

[0066] (1)称取8.Ig透明质酸钢,加入到盛有450mL纯化水的容器中,在揽拌条件下使之 完全溶解,配制得到18g/L的透明质酸钢溶液,用0.Imol/L的盐酸溶液将配制好的透明质 酸钢溶液抑值调节为5. 0。

[0067] 似称取3姐DC·肥L加入到步骤(1)中配制得到的透明质酸钢溶液中,揽拌使之 充分溶解,制得交联前体溶液。

[0068] (3)称取6g簇甲基壳聚糖,加入到盛有300mL纯化水的容器中,在揽拌条件下使之 完全溶解,配制得到20g/L的簇甲基壳聚糖溶液。

[0069] (4)将步骤(3)中配置好的簇甲基壳聚糖溶液加入步骤(2)中制得的交联前体溶 液中,在30°C溫度下揽拌15min,使之均匀,然后静置13h,使之充分交联,可得到交联凝胶。

[0070] (5)量取60mL纯化水加入到步骤(4)中得到的交联凝胶中进行洗涂,浸泡15min 进行抽滤,洗涂4次。

[00川 (6)将步骤妨中制得的交联凝胶注入冷冻盒中,待其自动流平溢出,然后用刮刀 沿冷冻盒上沿将其刮平,之后将冷冻盒进行冷冻定型化,冷冻定型之后的交联凝胶脱冷冻 盒后迅速放入冷冻干燥机干燥室中,冷冻干燥35h。然后压片、切片、灭菌后得到可降解生物 复合止血膜。 阳0巧实施例5

[0073] 生物可降解止血材料体外降解试验

[0074] 对实施例1中制得可降解生物复合止血膜分别置于均含有溶菌酶的缓冲盐、纯化 水和质量百分浓度为0. 9%的生理盐水中,得到1周、2周和3周的降解数据,如下表1~3 所示。 阳07引其中,缓冲盐为抑值7. 4、浓度0.Imol/L的憐酸盐缓冲溶液。

[0076] 表1:实施例1制得的可降解生物复合止血膜的1周降解数据

[0077]

Figure CN105381501AD00071

阳07引表2 :实施例1制得的可降解生物复合止血膜的2周降解数据 '

[0079]

Figure CN105381501AD00072

Figure CN105381501AD00081

阳080] 表3 :实施例1制得的可降解生物复合止血膜的3周降解数据 '

[0081]

Figure CN105381501AD00082

[00間由表1~表3可W看出,实施例1中制得可降解生物复合止血膜能够在缓冲盐、纯 化水和质量百分浓度为0.9%的生理盐水中被降解。并且随着时间的增加其降解量均增多, 实施例1中制得可降解生物复合止血膜在3周后大部分被降解,此现象可避免二次手术给 病人带来的痛苦,减少感染机率,运在临床上具有重大意义。

[0083] W上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并 不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员 来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可W做出若干变形和改进,运些都属于本发明的保 护范围。因此,本发明专利的保护范围应W所附权利要求为准。

Claims (10)

1. 一种可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,包括如下步骤: 配制含有透明质酸钠和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的交联前体 溶液; 将羧甲基壳聚糖溶液加入到所述交联前体溶液中,l〇°C~40°C下搅拌混匀后静置使得 充分交联,得到交联凝胶;以及 采用洗涤液将所述交联凝胶洗涤干净后定型,接着将定型后的所述交联凝胶干燥,得 到可降解生物复合止血膜。
2. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,所述交联 前体溶液中,所述透明质酸钠的浓度为15g/L~25g/L,所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基) 碳酰二亚胺盐酸盐的浓度为5g/L~20g/L。
3. 根据权利要求2所述的可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,所述交联 前体溶液中还含有的N-羟基琥珀酰亚胺; 所述交联前体溶液中,所述N-羟基琥珀酰亚胺与所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基) 碳酰二亚胺盐酸盐的质量比为1:1~3。
4. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,所述配制 含有透明质酸钠和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的交联前体溶液的操 作为:将1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐加入到pH为4. 5~5. 5的透明 质酸钠溶液中,充分搅拌直至所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐完全 溶解,得到所述交联前体溶液。
5. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,所述羧甲 基壳聚糖溶液的浓度为15g/L~25g/L。
6. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,所述将羧 甲基壳聚糖溶液加入到所述交联前体溶液中的操作中,所述羧甲基壳聚糖溶液与所述交联 前体溶液的体积比为1 :1~3。
7. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,所述采用 洗涤液将所述交联凝胶洗涤干净后定型的操作中,所述洗涤液为纯化水或浓度为0. 5mol/ L~3mol/L的氯化钠溶液,所述洗涤的操作为:将所述洗涤液加入到所述交联凝胶中,充分 浸泡后抽滤,重复洗涤2次~5次。
8. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,所述采用 洗涤液将所述交联凝胶洗涤干净后定型的操作中,所述定型的操作为:将洗涤干净的所述 交联凝胶搅拌均匀后注入深度为5mm~15mm冷冻盒中,待所述交联凝胶自动流平溢出后沿 所述冷冻盒的上沿刮平,接着在-10~-30°C下冷冻定型3h~6h。
9. 根据权利要求1所述的可降解生物复合止血膜的制备方法,其特征在于,所述将定 型后的所述交联凝胶干燥的操作中,所述干燥为在-20~5°C下冷冻干燥24h~35h。
10. -种可降解生物复合止血膜,其特征在于,采用如权利要求1~9中任一项所述的 可降解生物复合止血膜的制备方法制得。
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