CN105380986A

CN105380986A - 一种巴西菇超微复合粉及其制备方法

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Publication number: CN105380986A
Application number: CN201510874435.3A
Authority: CN
Inventors: 迟永奎; 王桂琴
Original assignee: Harbin Xiuji Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Harbin Xiuji Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2015-12-02
Filing date: 2015-12-02
Publication date: 2016-03-09

Abstract

本发明公开了一种巴西菇超微复合粉及其制备方法，属于保健品和药品领域。本发明要解决巴西菇有效成分不能充分提取、疗效不明显的技术问题。巴西菇超微复合粉主要是下述原料巴西菇、大豆、黄芪和西洋参制成的；其制备方法如下：一、将巴西菇、大豆、黄芪和西洋参分别经挑选、清洗后制成300～400目粉，然后混合；二、将步骤一获得的混合粉自然发酵；三、回流萃取；四、步骤三所述的萃取液用95％乙醇沉淀；五、向步骤四获得沉淀物中加入蒸馏水，加入D401大孔苯乙烯系螯合型离子交换树脂振荡6～12小时，分离出D401大孔苯乙烯系螯合型离子交换树脂，取上清液浓缩成膏，制粒，干燥，即得到巴西菇超微复合粉。本发明治疗效果明显。

Description

一种巴西菇超微复合粉及其制备方法

技术领域

本发明属于保健品和药品领域；具体公开了一种巴西菇超微复合粉及其制备方法。

背景技术

巴西菇又名姬松茸，在真菌分类地位上属于担子菌亚门，层菌纲，伞菌目，蘑菇科，蘑菇属。现代医学工作者通过大量的药理和临床试验，已经证明，巴西菇对癌症、慢性肝炎、心脑血管、抗氧化、白血病、糖尿病、神经衰弱等疾病有十分明显的疗效。

巴西菇的分子链大，不易充分吸收，有效成分不能被充分被提取出来；而且服用时刺激胃，各成分之间协同作用不完善，疗效不明显。

发明内容

本发明要解决巴西菇有效成分不能充分提取、疗效不明显的技术问题；而提供了一种巴西菇超微复合粉及其制备方法。

本发明中巴西菇超微复合粉主要是下述原料巴西菇、大豆、黄芪和西洋参制成的；其中西菇、大豆、黄芪和西洋参的质量比是(5～8):(1～2):(0.5～1):(0.1～0.5)。

上述巴西菇超微复合粉的制备方法是按下述步骤进行的：

步骤一、将巴西菇、大豆、黄芪和西洋参分别经挑选、清洗后制成300～400目粉，然后混合；

步骤二、将步骤一获得的混合粉自然发酵；

步骤三、然后用6～8倍重量的水回流萃取3～4次，每次回流1～3小时；

步骤四、步骤三所述的萃取液用95％(体积)乙醇(是萃取液的2-8倍)沉淀，沉淀时间(3～12小时)；

步骤五、向步骤四获得沉淀物中加入(蒸馏水的加入量为沉淀物重量的5-50倍)蒸馏水，加入D401大孔苯乙烯系螯合型离子交换树脂振荡6～12小时(去除重金属和砷)，分离出D401大孔苯乙烯系螯合型离子交换树脂，取上清液浓缩成膏，制粒，干燥，即得到巴西菇超微复合粉。

其中步骤二中自然发酵的条件：温度为25～50℃，湿度为40％～50％，时间为15天～90天(温度高了或低了有益菌酶产生的少，湿度太高了易霉变)。

步骤五中浓缩温度为60～90℃，浓缩耗时12～24小时。

步骤五中干燥温度为50～90℃，干燥时间为1～6小时。

步骤三萃取是在密闭条件下进行的，温度控制在0～60℃。

本发明通过步骤一的处理将原料的细胞壁打开，大分子变为小分子，主要成分可以充分的提取出来。

步骤二自然发酵能产生人体需要的各种酶，寡糖及多种维他命的矿物质，产生丰富的SOD氧化酶成分，易吸收，使产品在服用时不刺激胃。这个过程产品的主要成分一点不变，发酵过程产生的各种酶能使产品增效。

治疗癌症每天服用两次，每次两袋(3g/袋)，早饭前、晚饭后服用，冲服，3个月为一疗程。

治疗抗氧化每天服用两次，每次一袋(5g/袋)，早饭前、晚饭后，冲服，3个月为一疗程。

本发明严格的控制了提取温度，避免了因温度低时提取不出来巴西菇多糖，同时也避免了因温度高时则多糖变性质，甚至变为有毒的问题的发生。

本发明通过步骤五的处理后，大量的去除重金属和砷，极大的降低了对人体健康的危害。

本发明的见效快，7天可见明显效果。

本发明产品中由于各成分之间的协同作用，似的巴西菇多糖活性更强。

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式中巴西菇超微复合粉主要是下述原料巴西菇、大豆、黄芪和西洋参制成的；其中西菇、大豆、黄芪和西洋参的质量比是6:2:1:0.5；其的制备方法是按下述步骤进行的：

步骤一、将巴西菇、大豆、黄芪和西洋参分别经挑选、清洗后制成300目粉，然后混合；

步骤二、将步骤一获得的混合粉自然发酵；

步骤三、然后用6倍重量的水回流萃取3次，每次回流2小时；

步骤四、步骤三所述的萃取液用95％(是萃取液重量的2倍)乙醇沉淀，沉淀时间为12小时；

步骤五、向步骤四获得沉淀物中加入(蒸馏水的加入量为沉淀物重量的5倍)蒸馏水，加入D401大孔苯乙烯系螯合型离子交换树脂振荡10小时，分离出D401大孔苯乙烯系螯合型离子交换树脂，取上清液浓缩成膏，制粒，干燥，即得到巴西菇超微复合粉。

其中步骤二中自然发酵的条件：温度为30℃，湿度为45％，时间为60天。

步骤五中浓缩温度为90℃，浓缩耗时12小时。

步骤五中干燥温度为80℃，干燥时间为6小时。

步骤三萃取是在密闭条件下进行的，温度控制在50℃。

以中期肿瘤患者为例，验证发明效果，结果如表1

表1

由表1可知，7天可见明显效果。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：西菇、大豆、黄芪和西洋参的质量比是5:1:0.5:0.1。其它步骤和操作与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是：西菇、大豆、黄芪和西洋参的质量比是8:1:0.5:0.1。其它步骤和操作与具体实施方式一相同。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一不同的是：西菇、大豆、黄芪和西洋参的质量比是8:2:1:0.5。其它步骤和操作与具体实施方式一相同。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一不同的是：西菇、大豆、黄芪和西洋参的质量比是5:2:1:0.5。其它步骤和操作与具体实施方式一相同。

采用下述实验验证发明效果：

1、实验动物及瘤株

BALB/c雄性小鼠，SPF级，8周龄，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证编号：SCXK(京)2002～2003，隔离器内分笼饲养。S180腹水型瘤株购于黑龙江省肿瘤医院肿瘤研究所，由昆明小鼠腹水传代。

2、方法

2.1分组处理

将70只小鼠随机分为模型组、具体实施方式一组、具体实施方式二组、具体实施方式三组、具体实施方式四组、具体实施方式五组、巴西菇多糖对照组，共7组，每组10只。

2.2造模及给药

取荷腹水型S180瘤株小鼠的腹水0.2mL，接种于昆明小鼠腹腔，7d后，处死精神状态良好和腹水饱满的荷瘤小鼠，消毒腹部，与超净工作台中抽取乳白色腹水为瘤源，生理盐水洗涤，离心，稀释成单细胞悬液。台盼蓝染色检测细胞数，活细胞数为98％以上可接种。调整细胞浓度为1×10⁷/mL，每只小鼠于右后侧腋窝皮下接种0.2mL，整个过程在30min完成。小鼠接种S180肉瘤后第2天，具体实施方式一组、具体实施方式二组、具体实施方式三组、具体实施方式四组、具体实施方式五组按200mg/(kg·d)腹腔注射给药，巴西菇多糖对照组按1000mg/(kg·d)腹腔注射给药，模型对照组腹腔注射等体积的生理盐水，共7天。

2.3抑瘤率测定

小鼠颈椎脱臼吃处死，在冰台上用镊子镊住小鼠右肋肿瘤生长部位皮肤，手术剪子剪开皮肤，暴露肿瘤并用手术镊钝性剥离，电子天平称量肿瘤重量。按下列公式计算肿瘤抑制率：

肿瘤抑制率(％)＝﹝1-(平均实验组肿瘤重量/平均对照组肿瘤重量)﹞×100％

2.4LMPAB对荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡的影响

(1)细胞悬浮液制备取新鲜肿瘤组织(尽量除去血管及凝血块)，加入新鲜配置的无菌PBS(2mL，4℃)，采用剪切法分散肿瘤组织，经100目滤网过滤后，1500r/min4℃离心5min，弃上清；再加入1mLPBS制成单细胞悬液，70％冷乙醇固定。

(2)AnnexinV荧光染料检测细胞凋亡调整待测肿瘤细胞的浓度为1×10⁶/mL，取1mLPBS洗3遍，4℃1000r/min离心10min，弃上清。加入预冷的结合缓冲液重悬细胞，加入10μLPI，轻轻混匀，4℃反应30min。加入300μL预冷的结合缓冲液重悬细胞，流式细胞仪检测

3统计学方法

计量资料用表示，用STPS13.0统计软件分析(one—wayANOVA)，组间两两比较方差齐用SNK检验，方差不齐用Tambane检验。

本发明巴西菇超微复合粉对荷瘤小鼠肿瘤重量的影响

与模型组(1.132±0.096)相比较，

具体实施方式一组(0.726±0.096)、具体实施方式二组(0.788±0.125)、具体实施方式三组(0.778±0.112)、具体实施方式四组(0.752±0.102)、具体实施方式五组(0.762±0.108)肿瘤重量明显减少，巴西菇多糖对照组(0.827±0.137)的肿瘤重量与模型组比较差异均无统计学意义(p＞0.05)。

结果表明，本发明的西菇超微复合粉具有抑制肉瘤S180生长的作用，具体实施方式一组、具体实施方式二组、具体实施方式三组、具体实施方式四组、具体实施方式五组、巴西菇多糖对照组对S180的平均抑制率分别为35.9％、30.4％、31.3％、33.6％、32.7％、26.9％。具体实施方式一组、具体实施方式二组、具体实施方式三组、具体实施方式四组、具体实施方式五组抑瘤率大于30％，符合抗癌药物筛选标准。

本发明巴西菇超微复合粉对荷瘤小鼠细胞凋亡的影响

与模型对照组比较(10.98±1.55)，具体实施方式一组(40.12±3.98)、具体实施方式二组(34.96±3.14)、具体实施方式三组(35.1396±3.28)、具体实施方式四组(37.32±3.43)、具体实施方式五组(36.24±3.35)、巴西菇多糖对照组(31.69±2.94)的凋亡率明显增加，差异具有统计学意义(p＜0.05)。

与模型对照比较，具体实施方式一组、具体实施方式二组、具体实施方式三组、具体实施方式四组、具体实施方式五组的肿瘤细胞凋亡率明显增加，差异具有统计学意义(p＜0.01)，表明本发明的西菇超微复合粉具有诱导细胞凋亡作用。

Claims

1.一种巴西菇超微复合粉，其特征在于巴西菇超微复合粉主要是下述原料巴西菇、大豆、黄芪和西洋参制成的。

2.根据权利要求1所述的一种巴西菇超微复合粉，其特征在于其特征巴西菇、大豆、黄芪和西洋参的质量比是(5～8):(1～2):(0.5～1):(0.1～0.5)。

3.根据权利要求2所述的一种巴西菇超微复合粉，其特征在于巴西菇、大豆、黄芪、枸杞、西洋参的质量比是6:2:1.5:0.5。

4.如权利要求1、2或3所述的巴西菇超微复合粉的制备方法，其特征在于巴西菇超微复合粉的制备方法是按下述步骤进行的：

步骤二、将步骤一获得的混合粉自然发酵；

步骤四、步骤三所述的萃取液用95％(体积)乙醇沉淀；

步骤五、向步骤四获得沉淀物中加入蒸馏水，加入D401大孔苯乙烯系螯合型离子交换树脂振荡6～12小时，分离出D401大孔苯乙烯系螯合型离子交换树脂，取上清液浓缩成膏，制粒，干燥，即得到巴西菇超微复合粉。

5.根据权利要求4所述的巴西菇超微复合粉的制备方法，其特征在于步骤二中自然发酵的条件：温度为25～50℃，湿度为40％～50％，时间为15天～90天。

6.根据权利要求4所述的巴西菇超微复合粉的制备方法，其特征在于步骤三萃取是在密闭条件下进行的，温度控制在0～60℃。

7.根据权利要求4所述的巴西菇超微复合粉的制备方法，其特征在于步骤四沉淀时间为3～12小时。

8.根据权利要求4所述的巴西菇超微复合粉的制备方法，其特征在于步骤五中浓缩温度为60～90℃，浓缩耗时12～24小时。

9.根据权利要求4所述的巴西菇超微复合粉的制备方法，其特征在于步骤五中干燥温度为50～90℃，干燥时间为1～6小时。

10.根据权利要求4所述的巴西菇超微复合粉的制备方法，其特征在于步骤五蒸馏水的加入量为沉淀物重量的5～50倍。