CN105349428A - 一种淡水舟形藻培养液及培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种淡水舟形藻培养液及培养方法,本发明所公开的培养液,配方组分简单易得,根据淡水舟形藻生长的营养盐、温度、pH值等的需求特性,可以有效地促进舟形藻的快速分裂增殖,促进其更好地吸收利用各种营养物质,加快舟形藻细胞的新陈代谢,提高其生产量,达到促进纯种淡水舟形藻快速生长的目的。将该培养液结合本发明提供的培养方法,培养方法操作简单,针对性强,适应淡水舟形藻的快速生长,具备广泛的市场前景,特别适合于在水产养殖领域推广应用。
Description
技术领域
本发明涉及藻类培养领域,具体涉及一种淡水舟形藻培养液及培养方法。
背景技术
舟形藻属硅藻门羽纹硅藻纲舟形藻属,是一种常用作贝类养殖的单胞藻类。其脂肪含量高,脂肪酸种类丰富。GC-MS分析结果表明,该藻富含多种不饱和脂肪酸。同时该藻株在生长过程中能分泌具有多种生物活性的硫酸化多糖,因此舟形藻不仅是水产动物理想的开口饵料,另外舟形藻还是一种具有潜在药学价值的的浮游藻类。
但在天然水体中,舟形藻与其他藻类混杂生长,种群密度很低,很难满足水产养殖的需要。目前,淡水舟形藻的培养多采用CSI培养基,在该培养基中,舟形藻生长速度较缓慢,不利于舟形藻的大规模培养。
发明内容
本发明的目的是提供一种淡水舟形藻培养液,该培养液适用于淡水舟形藻的生长。
本发明的另一个目的是提供一种舟形藻的培养方法,该方法可提高淡水舟形藻生长速率,有利于淡水舟形藻的规模化培养。
为了达到上述目的,本发明采取以下技术措施:
一种淡水舟形藻培养液(本发明或称LXN培养液),包括:
其余为双蒸水,培养液的pH范围是7.5~8。
所述的舟形藻为生长在淡水中的舟形藻。
一种舟形藻的培养方法,包括下述步骤:
1)将培养至对数期的舟形藻进行饥饿培养1~2d(培养液为不含氮、磷、硅、铁的CSI培养基),备用。
2)将经过饥饿培养的舟形藻3000~4000r/min离心5~10min,弃上清后接种至LXN培养液中,接种量为1~10×104cells/mL。25~30℃,光照强度为3000~5000lx,光暗比为12h~14h:10h~12h,每隔3h振摇锥形瓶一次。
本发明与现有技术相比,具有以下优点:
本发明所公开的培养液和培养方法,根据淡水舟形藻生长的营养盐、温度、pH值等的需求特性,达到促进纯种淡水舟形藻快速生长的目的。本发明中培养液搭配合理,可以有效地促进舟形藻的快速分裂增殖,促进其更好地吸收利用各种营养物质,加快舟形藻细胞的新陈代谢,提高其生产量。本发明中培养方法操作简单,针对性强,适应淡水舟形藻的快速生长,因此本发明具备了广泛的市场前景,特别适合于在水产养殖领域推广应用。
附图说明
图1为实施例1中的舟形藻在LXN培养液和CSI培养液中的生长曲线示意图。
具体实施方式
本发明所述技术方案,如未特别说明,均为常规技术,所述试剂或原料,如未特别说明,均来源于商业渠道。
实施例1:
一种淡水舟形藻培养液(本发明实施例或称LXN培养液),包括:
其余为双蒸水。
实施例2:
一种淡水舟形藻培养方法,包括:
(1)按照实施例1所述配方配制LXN培养液,调节pH值为8。放入灭菌锅中,120℃,灭菌20min。灭菌结束后,放入4℃冰箱中备用。
(2)将舟形藻在CSI培养基(《HandbookofMicroalgalCulture》)中培养至对数期,备用。
(3)将(2)中的舟形藻进行饥饿培养1d(培养液为不含氮、磷、硅、铁的CSI培养基),备用。
(4)将经过饥饿培养的舟形藻4000r/min离心10min,弃上清后分别接种到装有LXN培养液(试验组)和CSI培养液(对照组)的锥形瓶中,接种量为0.52×105cells/mL,然后用封口膜封口。
(5)将锥形瓶移入光照培养箱中,设定温度为25℃,光照强度为3000lx,光暗比为12h:12h。
(6)每隔3h振摇锥形瓶一次,以上所有器皿均需灭菌,操作均在超净工作台中进行。
(7)每2d取样于显微镜下观察计数。
所述的舟形藻购自中科院水生生物研究所藻种库,编号为NaviculaFACHB-1226。
细胞生长情况如表1和图1所示,试验组舟形藻在接种的第2d藻细胞开始分裂,第6d进入对数期。生长速率一直递增到接种后的第10d,最大藻细胞密度达到39.75×105cells/ml。
表1舟形藻细胞密度随时间的变化(×105cells/ml)
对照组CSI培养基中的细胞生长趋势与试验组中基本一致,但细胞生长速率显著低于试验组,在第10d达到最大细胞密度,仅有12.24×105cells/ml。
实施例3:
一种淡水舟形藻培养方法,包括:
(1)按照实施例1所述配方配置好LXN培养液,调节pH值为7.5,放入灭菌锅中,120℃,灭菌20min,灭菌结束后。放入4℃冰箱中备用。
(2)将舟形藻在CSI培养基中培养至对数期,备用。
(3)将(2)中的舟形藻进行饥饿培养1d(培养液为不含氮、磷、硅、铁的CSI培养基),备用。
(4)将经过饥饿培养的舟形藻4000r/min离心10min,弃上清后分别接种到装有LXN培养液(试验组)和CSI培养液(对照组)的锥形瓶中,接种量为0.52×105cells/mL,然后用封口膜封口。
(5)将锥形瓶移入光照培养箱中,设定温度为将25℃,光照强度为3000lx,光暗比为12h:12h。
(6)每隔3h振摇锥形瓶一次。以上所有器皿均需灭菌,操作均在超净工作台中进行。
(7)每2d取样于显微镜下观察计数。
所述的舟形藻为NaviculaFACHB-1226,购自中科院水生生物研究所藻种库。
经过10d培养,试验组细胞密度可达37.98±0.56×105cells/ml。
实施例4:
一种淡水舟形藻培养方法,包括:
(1)按照实施例1所述培养液配方配置好LXN培养液,调节pH值为8,放入灭菌锅中,120℃,灭菌20min。灭菌结束后,放入4℃冰箱中备用。
(2)将舟形藻在CSI培养基中培养至对数期,备用。
(3)将(2)中的舟形藻进行饥饿培养1d(培养液为不含氮、磷、硅、铁的CSI培养基),备用。
(4)将经过饥饿培养的舟形藻4000r/min离心10min,弃上清后分别接种到装有LXN培养液(试验组)和CSI培养液(对照组)的锥形瓶中,接种量为0.52×105cells/mL,然后用封口膜封口。
(5)将锥形瓶移入光照培养箱中,设定温度为将30℃,光照强度为3000lx,光暗比为12h:12h;
(6)每隔3h振摇锥形瓶一次。以上所有器皿均需灭菌,操作均在超净工作台中进行。
(7)每2d取样于显微镜下观察计数。
所述的舟形藻为NaviculaFACHB-1226,购自中科院水生生物研究所藻种库。
经过10d培养,试验组细胞密度可达38.23±0.33×105cells/ml。
Claims (2)
1.一种淡水舟形藻培养液,包括:
4水硝酸钙60~75mg/L
硝酸钾40~50mg/L
7水硫酸镁35~40mg/L
5水β-甘油磷酸钠20~25mg/L
4-羟乙基哌嗪乙磺酸400~500mg/L
9水偏硅酸钠200~250mg/L
6水氯化铁1~1.5mg/L
乙二胺四乙酸二钠4~4.5mg/L
4水合氯化锰0.25~0.35mg/L
7水氯化锌25~30ug/L
2水合钼酸钠20~24ug/L
6水氯化钴7~12ug/L
维生素B120.05~0.1ug/L
维生素H0.05~0.1ug/L
维生素B15~10ug/L
其余为双蒸水,培养液的pH范围是7.5~8。
2.利用权利要求1所述培养液培养舟形藻的方法,包括:
将经过饥饿培养的舟形藻3000~4000r/min离心5~10min,弃上清后接种至权利要求1所述培养液中,25~30℃,光照强度为3000~5000lx,光暗比为12h~14h:10h~12h,每隔3h振摇锥形瓶一次。
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