CN105348302B - 一种噻唑并[3,2‑a]嘧啶酮衍生物及其药物组合物和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种噻唑并[3,2‑a]嘧啶酮衍生物，该衍生物的化学通式如I或Ia所示，其通式I或Ia中的R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；R₃为环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基，X为氧或硫，n为0，1或2；通式I中的Z为碳或氮。本发明还公开了一种药物组合物，以任意一种噻唑并[3,2‑a]嘧啶酮衍生物为活性成分，同时含有一种或多种药学上可以接受的载体。该类衍生物通过实验证明，其具有明显激活KCNQ通道电流，因此，该类衍生物能够在制备KCNQ钾通道开放剂中得到应用，可作为抗癫痫药物制剂的活性成分，可用于预防、抑制、缓解和治疗惊厥、癫痫发作、癫痫持续状态、癫痫综合症；作为缓解焦虑症状药物制剂以及缓解神经性疼痛药物制剂的活性成分。

Description

一种噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物及其药物组合物和用途

技术领域

本发明涉及化合物以及含有该化合物的药物组合物和其医药用途，具体地说是一种噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物及其药物组合物和其在作为KCNQ钾离子通道开放剂、制备抗癫痫、抗焦虑、缓解神经疼痛药物制剂中的应用。

背景技术

KCNQ钾通道是钾通道家族中的一个重要分支。目前，已知有许多类型的KCNQ钾通道存在于多种类型的细胞上。按其结构特性主要分为5大类，即KCNQ1、KCNQ2、KCNQ3、KCNQ4、KCNQ5。其中KCNQ1(又称KVLQT)，主要分布于心脏，KCNQ2-5主要分布于中枢及外周神经系统、内耳(KCNQ4)、肌肉组织(KCNQ5)等。研究证实KCNQ1与KCNE1共同编码组成心肌上的延迟整流钾离子通道(IKs)，该通道的突变可以引起遗传性QT间期延长综合症(LQT，Sanguinetti MC，Ann N Y Acad Sci.1999；868:406-13)；KCNQ4基因编码耳蜗外毛细胞和前庭器官1型毛细胞中和钾通道相关的分子，该基因的突变可导致遗传性耳聋；KCNQ2和KCNQ3通道共表达产生的电流是神经元M型钾电流的分子基础，M通道在调节神经细胞兴奋性方面发挥重要作用，KCNQ2/Q3基因突变导致的M通道功能改变可导致良性家族性新生儿惊厥症(BFNCs)等神经系统疾病(Maljevic S et al.,J Physiol.2008586(7):1791-801)。KCNQ2/3通道的开放剂可降低神经元兴奋性，可用于治疗与过度神经元兴奋相关的疾病，如惊厥、癫痫和神经性疼痛等。

癫痫是一种常见多发的以大脑神经元异常放电引发突然短暂反复发作为特征的神经系统疾病，严重威胁人类生命与健康。临床上癫痫的治疗主要依靠药物疗法。目前唯一一种被FDA批准上市的用于成人部分发作辅助治疗的KCNQ钾通道激动剂药物是瑞替加滨。如专利EP55454公开了一种KCNQ开放剂瑞替加滨(D-23129；N-(2-氨基-4-(4-氟苄基氨基)-苯基)氨基甲酸乙酯)，并披露了其在体内、体外具有强抗惊厥特性；具有降低癫痫发作发病率的效力(BIaler et al.,Epilepsy Research 2002,52,31-71)。神经性疼痛的动物模型实验提示KCNQ通道开放剂可用于治疗疼痛性疾病(Blackburn-Munro et al.,EuropeanJournal of Pharmacology 2003,450,109-116)。此外，KCNQ2-5通道RNA在三叉神经节、背根神经节和三叉神经尾状核的表达意味着这些通道开放剂还可能影响偏头痛的感觉过程(Goldstein et al.,Society for Neuroscience Abstracts 2003,53,8)。也有报道瑞替加滨在某些焦虑样行为动物模型中具有活性(Korsgaard et al.,J Pharmacol ExpTher.2005；314(1):282-92。同时也有研究者在与焦虑行为和 情绪行为(如双相精神障碍)有关的脑区海马和杏仁核中发现了KCNQ2、KCNQ3亚基的mRNA，由此提示KCNQ开放剂可用于治疗焦虑症和双相性神经障碍。可见，KCNQ钾通道不仅参与机体许多重要的生理功能的调节，而且在一些疾病中还具有重要作用。因此，研制开发更多可以作为KCNQ钾通道开放剂应用的新颖化合物，可以为临床用药提供更多的选择。

发明内容

本发明的目的就是提供一种噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物，同时提供了含有该类衍生物的组合物以及该类衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中，特别是抗癫痫、抗焦虑和缓解神经性疼痛药物制剂中的应用，为临床治疗提供更多用药选择。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物，该衍生物的化学通式如I所示：

其中通式I或Ia中的R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；R₃为环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基，X为氧或硫，n为0，1或2；通式I中的Z为碳或氮。

本发明更优选为化学通式I所示化学结构的化合物。

优选地，本发明化学通式I中所述R₁为甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基；R₃为环戊烷、环己烷，X为氧；Z为碳或氮；n为1或2。

较优选地：通式I中所述R₁为乙基或三氟甲基；R₂为甲基；R₃为环戊烷、环己烷，X为氧；Z为碳；n为2；

更优选为通式I中所述R₁为三氟甲基；R₂为甲基；R₃为环己烷，X为氧；Z为氮；n为2；以及通式I中所述R₁为乙基；R₂为甲基；R₃为环戊烷，X为氧；Z为碳；n为1；其结构式为：

具体为：

依据以上表述，仅例举了21种含有通式I和Ia的具体化合物，用于对上述通式及其取代基作更为详尽的解释，但其并非是本发明化合物的穷尽。

本发明所公开的衍生物通过以下方法制备，其合成总流程如下：

本发明公开的化合物可以以游离碱或盐的形式存在。游离碱在应用时，可选择生理上允许的无机酸(如盐酸、硫酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸)、有机酸(如乙酸、丙酸、柠檬酸、马来酸、苹果酸、酒石酸、甲磺酸)成盐。

本发明还提供了一种药物组合物，是以上述任意一种噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物为活性成分，同时含有一种或多种药学上可以接受的载体。所指药学上可以接受的载体或稀释剂，可选自药物制剂中常用的赋形剂、辅料或溶剂。如乳糖、蔗糖、糊精、滑石粉、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯树胶、硬脂酸镁、硬脂酸、纤维素的低级烷基醚、玉米淀粉、马铃薯淀粉、树胶、糖浆、花生油、橄榄油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、单硬脂酸甘油脂或二硬脂酸甘油脂、着色剂、矫 味剂、防腐剂、水、乙醇、丙醇、生理盐水、葡萄糖溶液等等。

具体的制备方法可按照制剂常规进行。如可以本发明化合物作为活性成份，与水、蔗糖、山梨醇糖、果糖等制备成口服液体制剂；也可以乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇糖等为赋形剂，以淀粉等为崩解剂，以硬脂酸、滑石粉等为润滑剂，明胶、聚乙烯醇为结合剂制备成片剂或胶囊剂；还可与生理盐水、葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖组成的混合载体制备成注射液。还可制成无菌粉针剂以及各种缓释剂、混悬剂、乳剂等等。

本发明所提供的噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物，通过实验证明，其具有明显激活KCNQ2、KCNQ3、KCNQ4及KCNQ5通道电流，因此，该类衍生物能够在制备KCNQ钾通道开放剂中得到应用，可作为抗癫痫药物制剂的活性成分，可用于预防、抑制、缓解和治疗惊厥、癫痫发作、癫痫持续状态、癫痫综合症；作为缓解焦虑症状药物制剂以及缓解神经性疼痛药物制剂的活性成分。

用本发明化合物制成药剂后，可经口服或非口服给药。给药量可因药物剂型、给药频率、给药方式、病程、患者个体差异以及健康状况不同而各有不同。对成年人来说，每天50～500mg比较合适。医师可依据临床的实际情况进行必要的调整。本发明所述的化合物，经毒理学试验，尚未获得对人体有明显毒性作用的提示。

附图说明

图1为化合物1和对比例铷离子流出高通量筛选量效曲线图。

图2为化合物1对不同KCNQ通道亚型的开放作用。

具体实施方式

下面实施例用于进一步详细说明本发明，但不以任何形式限制本发明。

本发明所述原料化合物均可通过商业渠道购买，其化学通式I或Ia所述的衍生物可通过下述通用合成路线按照常规化合物合成方法合成，具体步骤如下：

(1)在氮气保护下，以化合物II和化合物III为原料，在熔融PPA、冰醋酸和乙酸酐的环境体系中，100-110℃反应4h，冷却，调节pH值到4，析出固体，抽滤，的白色固体化合物IV；

所述R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；所述化合物II和化合物III的摩尔比为1:1-1.5；

(2)将化合物IV在浓硫酸-发烟硝酸体系中，室温反应1h，冷却，析出固体，抽滤，重结晶，得黄色固体化合物V；

所述R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；所述化合物IV与发烟硝酸的摩尔比为1:2；

(3)将铁粉加入到异丙醇和水中，再加入浓盐酸，加热至75℃，保持5min，冷却至室温，加入所述化合物V和浓盐酸，在75℃下保持5min，加入饱和碳酸钠溶液，保温1h，过滤，洗涤滤饼，重结晶，得白色固体化合物VI；

所述R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；所述化合物V与铁粉、浓盐酸的摩尔比为5:2:1；

(4)将化合物VI、EDC·HCl和DMAP按照摩尔比为1:1:2:0.5溶于二氯甲烷中，室温搅拌反应12-16h，依次5％盐酸洗涤，5％氢氧化钠洗涤，最后水洗涤至中性，重结晶，得化合物VII；

所述R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；R₃为环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基，n为0，1或2；

(5)将化合物VI和三乙胺按摩尔比为1:1溶于DMF中，边搅拌边加入CDI(1个当量)，搅拌1h，加入(1个当量)，室温反应10h，加水后二氯甲烷萃取，洗涤至中性，重结晶，得白色固体VIII；

所述R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；R₃为环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基；n为0，1或2；

(6)将化合物VI和三乙胺按摩尔比为1:1溶于DMF中，边搅拌边加入TCDI(1个当量)，搅拌1h，加入室温反应10h，加水后二氯甲烷萃取，洗涤至中性，重结晶，得白色固体IX；

所述R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；R₃为环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基，n为0，1或2。

实施例1

按照上述通式制备方法制备化合物1(3-环戊基-N-(3-乙基-7-甲基-5-氧-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-6-基)丙酰胺)，具体步骤为：

(1)在氮气保护下，50g PPA加热(40～50℃)使融化，加入15ml冰醋酸和5ml乙酸酐，搅拌下滴加0.15mol乙酰乙酸乙酯(化合物III)，滴毕在40～50℃搅拌10分钟，分次加入0.1mol的2-氨基-4-乙基噻唑(化合物II)，加毕100℃反应4h。反应完毕，搅拌下加入碎冰约100g，用20％氢氧化钠调pH值到4，有固体析出，冰箱中放置过夜，次日抽滤，得白色固体(化合物IV)(产率63％)；

(2)取0.02mol的上述白色固体，溶于30ml浓硫酸中，10～15℃搅拌下滴加0.04mol发烟硝酸2.6g，滴加完毕室温反应1h；反应液直接倒入大量碎冰中，有亮黄色固体析出，抽滤， 固体用适量异丙醇水溶液重结晶后得到黄色固体硝化产物(化合物V)(产率80％)；

(3)取0.06mol铁粉加入到100ml异丙醇和24ml水的混合溶剂中，剧烈搅拌下加入0.01mol的浓盐酸，加热至75℃，保持5分钟；冷却到室温，加入0.015mol硝化产物和0.02mol的浓盐酸，加热至75℃反应4h后，加入饱和碳酸钠溶液10ml，继续保温反应1h，趁热过滤，滤饼用异丙醇、氯仿依次洗涤3次，收集滤液，减压回收溶剂，异丙醇重结晶；得中间体白色还原产物3-乙基-6-氨基-7-甲基-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-5-酮(VI)(产率50％)；

(4)取中间体3-乙基-6-氨基-7-甲基-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-5-酮0.21g(1mmol)，盐酸EDC 0.38g(2mmol)，DMAP 0.061g(0.5mmol)室温溶于干燥的二氯甲烷(20ml)中，加入环戊基丙酸(1mmol)搅拌反应过夜，依次用5％氢氧化钠(15ml×3)，水(15ml)，5％盐酸(15ml×3)洗涤，最后水洗至中性，减压回收二氯甲烷，用适量稀醇重结晶，得目标化合物1。白色针状结晶0.22g(69％)；mp：纯度大于98％(HPLC-UV面积归一化)，ESI-Ms(m/z):334.2[M+H]⁺；¹H NMR(500MHz，DMSO-D6)δ：9.13(s，1H)，7.05(s，1H)，3.14(d，J＝7.5，2H)，2.30(t，J＝3，2H)，2.12(s，3H)，1.76(m，3H)，1.58(m，4H)，1.49(dd，J＝4.5，J＝5，2H)，1.18(t，J＝7，3H)，1.10(t，J＝6，2H)

其化合物的化学结构式为：

实施例2

按照实施例1所述的制备方法及原料摩尔及体积的比例关系，改变步骤(1)中原料化合物II和化合物III中的R₁和R₂基团，即可制备相对应的中间体，将该中间体与按照实施例1所述的摩尔比和制备方法，其R₁选自氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂选自甲基或三氟甲基；R₃选自环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基，n选自0，1或2；即可得到目标化合物1-9以及其他对应的化合物。

实施例3

按照上述通式制备方法制备化合物15(1-(2-环己基乙基)-3-(7-甲基-5-氧-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-6-基)脲)，具体步骤为：

以2-氨基噻唑为初始原料与乙酰乙酸乙酯进行环合反应，具体过程同实施例1；目标化合 物为浅黄色固体，总收率约30％，纯度大于98％(HPLC-UV面积归一化)ESI-Ms(m/z):196.0[M+H]⁺；其他步骤同实施例1，得到6-氨基-7-甲基-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-5-酮；在氮气保护下，中间体6-氨基-7-甲基-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-5-酮0.36g(2mmol)和三乙胺0.2g(2mmol)溶于20ml DMF中，室温搅拌加入CDI 0.32g(2mmol)，继续搅拌1小时，加入环己基乙胺0.25g(2mmol)。反应10后，倒入50ml水中，二氯甲烷萃取(25×3)，二氯甲烷层水洗近中性，回收溶剂，稀醇重结晶得目标化合物15。白色固体，0.42g(63％)；mp 148.0～149.5；纯度大于97％(HPLC-UV面积归一化)，ESI-Ms(m/z):335.1[M+H]⁺；DMSO-D6)δ：7.87(d，J＝5，1H)，7.40(d，J＝5，1H)，4.57(s，2H)，2.89(m，2H)，2.23(s，3H)，1.7～1.3(m，11H)。化合物15的化学结构为：

实施例4

按照实施例3所述的制备方法及原料摩尔及体积的比例关系，改变步骤(1)中原料化合物II和化合物III中的R₁和R₂基团，即可制备相对应的中间体，将该中间体与按照实施例3所述的摩尔比和制备方法，其R₁选自氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂选自甲基或三氟甲基；R₃选自环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基，n选自0，1或2；即可得到目标化合物10-12、14、15、17、18、20、22以及其他对应的化合物。

实施例5

按照上述通式制备方法制备化合物21(1-环己基甲基-3-(7-甲基-3-三氟甲基-5-氧-5H-噻唑并[3,2,a]嘧啶-6-基)硫脲)

以5-三氟甲基-2-氨基噻唑为起始原料，具体合成过程同实施例1，硝化反应滴加发烟硝酸完毕后，30～40℃反应2h；目标化合物为黄色固体，总产率约20％，纯度大于98％(HPLC-UV面积归一化)ESI-Ms(m/z):250.1[M+H]⁺；其他步骤同实施例1，得到中间体6-氨基-3-三氟甲基-7-甲基-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-5-酮；

以氮气保护下，中间体3-三氟甲基-6-氨基-7-甲基-5H-噻唑并[3,2-a]嘧啶-5酮0.50g(2mmol)和三乙胺0.2g(2mmol)溶于20ml DMF中，室温搅拌加入TCDI 0.32g(2mmol)，继续搅拌1小时，加入环己基甲胺0.23g(2mmol)；反应10后，倒入50ml水中，二氯甲烷萃取(25 ×3)，二氯甲烷层水洗近中性，回收溶剂，稀醇重结晶得目标化合物。白色固体，0.32g(40％)；mp 203.0～204.5；纯度大于98％(HPLC-UV面积归一化)，ESI-Ms(m/z):335.1[M+H]⁺；ESI-Ms(m/z):405.2[M+H]⁺；DMSO-D6)δ：8.26(s，1H)，4.78(s，2H)，2.89(m，2H)，2.26(s，3H)，1.7～1.3(m，11H)；其结构式为：

实施例6

按照实施例5所述的制备方法及原料摩尔及体积的比例关系，改变步骤(1)中原料化合物II和化合物III中的R₁和R₂基团，即可制备相对应的中间体，将该中间体与按照实施例3所述的摩尔比和制备方法，其R₁选自氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂选自甲基或三氟甲基；R₃选自环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基，n选自0，1或2；即可得到目标化合物13、16、19以及其他对应的化合物。

实施例7原子吸收Rb⁺流出高通量测定

以化合物1为例，通过如下方法测试：

原子吸收Rb+流出测定技术在钾离子通道调节剂的高通量筛选中更加安全快速，并且具有直接反映离子通道活性及调节剂调节作用的特点。Rb与K有相近的原子大小，并且钾离子通道对于Rb+具有通透性，可以通过检测Rb⁺流出的浓度来测定钾通道的开放或关闭。Rb在780nm有特异的原子吸收，可以通过原子吸收的方法检测的Rb+浓度。故可以采用原子吸收光谱测定法通过测定Rb⁺流出的高通量测定技术用于筛选钾通道的开放剂或关闭剂。

将处于对数生长期的稳转KCNQ2/3通道的CHO细胞以2×10⁴个/孔的密度接种于96孔培养板。每个浓度设三复孔。并设相应浓度的溶媒对照孔。贴壁生长过夜后，弃培养液，加入200μl含RbCl的装载缓冲液，在37℃、5％CO2条件下培养3小时。然后弃去装载缓冲液，用洗涤缓冲液洗涤3遍。若筛选通道开放剂，在去极化缓冲液中稀释待测化合物，并将200μl上述溶液加入细胞中，反应10分钟。孵育10分钟后，小心吸取200μl上清到另一块96孔板中，用ICR8000原子吸收测定仪测定780nm处的Rb⁺原子吸收。按公式Fsupern＝(Rb_supern/cpd/Rb_supern/d)*100计算相对流出量。

其测试结果如图1所示，原子吸收Rb⁺流出高通量测定技术测定的化合物1分别在0.1、 0.3、1、3、10和100μM浓度下对稳转KCNQ2/3钾离子通道的CHO细胞的剂量依赖性的激活作用。RTG为实验阳性对照品Retigabine EC₅₀＝0.66±0.18μM，化合物1测量组EC₅₀＝0.96±0.51μM。由此可见，化合物1为KCNQ2/3钾离子通道开放剂。

本发明公开的部分化合物Rb⁺流出高通量测定结果见表1，表明本发明所述化合物具有一定的钾通道开放活性。

表1 部分化合物性能检测

^*HPLC面积归一化法；

^**ESI MS正离子源Q1全扫描模式。

实施例9电生理膜片钳测定

以化合物1为例，其测试方法：中国仓鼠卵巢细胞(CHO)的培养：稳转了KCNQ通道的CHO细胞培养于含有10％胎牛血清，100U/ml青霉素和链霉素的DMEM培养液中，胰酶消化传代。将细胞铺于12mm的圆形盖玻片上，24孔板培养。

膜片钳技术记录细胞膜电流：膜片钳放大器采用HEKA-EPC10。电极内应用两性霉素B(终浓度0.1～0.2mg/ml)做打孔膜片钳记录。微电极抛光后，灌充电极内液，控制电阻值在2～4MΩ。记录CHO细胞时所用电极内液为(mM)：KCl 160，HEPES 5，MgCl₂ 3，CaCl₂ 1，EGTA3，用KOH调pH至7.4；细胞外液成分为(mM)：NaCl 160，KCl 2.5，HEPES 10，glucose 8，MgCl₂1，CaCl₂ 5。微电极与细胞膜形成巨阻封接后，在电压钳制下，开始进行电流记录。

测试结果如图2所示，化合物1可以明显激活KCNQ2(Kv7.2)，KCNQ3(Kv7.3)，KCNQ4(Kv7.4)及KCNQ5(Kv7.5)通道电流。

鉴于本发明化合物对KCNQ家族钾通道具有开放作用，因此认为他们可以用于增加哺乳 动物(例如人)的电压依赖性钾通道的电流。适用于治疗KCNQ家族钾离子通道电流增加敏感的疾病，如癫痫、各种焦虑症，以及各种神经性疼痛。

实施例10最大电惊厥(MES)实验模型

以化合物1和化合物20为例，阳性对照药Retigabine(RTG)

实验方法：昆明小鼠，雄性，18～22g；实验前三天将动物放置实验环境下使其适应环境，自由进食、饮水；室温23～25℃；

实验仪器为YLS-9A生理药理电子刺激仪：连续波输出；波宽20ms；间隙10ms；波数70；电压60V；限流3.5mA

实验方法：正式实验前24h，进行小鼠筛选，将刺激仪按上述参数设定，用刺激仪的鳄鱼夹夹住小鼠双耳，启动刺激，以小鼠后肢强直为阳性指标，筛选合格(阳性)小鼠，剔除不达标的小鼠。正式实验时按照实验方案随机分组，每组10只，进行电刺激，不出现后肢强直为(阳性)有效。

实验结果：空白对照组有效率0％；化合物1腹腔给药25mg/kg体重有效率80％(8/10)；化合物20腹腔给药25mg/kg体重有效率90％(9/10)；阳性对照药RTG腹腔给药15mg/kg体重有效率80％(8/10)。表明本发明化合物具有与RTG具有同样明显的抗惊厥表征作用。

实施例11

戊四唑(PTZ)诱导癫痫模型

测试化合物1和化合物20，阳性对照药Retigabine(RTG)

实验条件：室温25±1℃

实验动物：KM小鼠雌雄各半体重18-25g每组10-12只适应环境3天自由进食水

实验方法：实验前一天每只动物标记以保证每只动物给药后测定时间相一致，实验动物前一晚禁食8h以上，造模前20min腹腔给予25％羟丙基β环糊精溶解的待测药物，药物吸收后按95mg/kg PTZ(给药容积为0.1ml/10g)体重颈背部皮下给药造模。PTZ给药后计时并及时放入透明观察箱内，保持环境安静，记录发作阈值和未发作的动物例数，每只小鼠观察30min(阈值为注射PTZ后小鼠发生第一次广泛性的全身阵挛并丧失翻正反射为止的时间，如果30min内动物未发作，阈值按30min记录)，比较动物发作阈值大小和造模后12小时内小鼠未死亡比例(即保护率)。

实验结果：空白对照组(溶剂组)发作阈值465±394秒，保护率16.7％(2/12)；阳性对照组(Rtg)体重15mg/kg发作阈值：858.17±528.48s，保护率50％(6/12)；化合物1体重15mg/kg发作阈值692.58±332.79s，保护率75％(8/12)；化合物20体重15mg/kg发作阈值719.42±456.05s，保护率5％(8/12)。化合物1、化合物20的发作阈值与空白对照组比较，差异均有统计学意义，与阳性对照药比较均没有统计学意义P＞0.05。表明本发明化合物对戊四唑所致癫痫具有一定的预防及保护作用。

实施例12

按照本领域已知的方法制备片剂，每片含有下述成分：

本发明列举的实施例1-12旨在阐明本发明公开的衍生物、其制备方法以及该类化合物具有明显激活KCNQ通道电流，实施例不单是说明它本身所述的具体的化合物及其合成方法及药物活性，同时也可以用来说明改变原料的种类和数量，合成其同系物和类似物，而不对本发明的范围构成任何限制。

Claims (8)

1.一种噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中的应用；其特征在于，该噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物的化学通式如I或Ia所示：

I Ia

其中通式I或Ia中的R₁为氢、甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基或三氟甲基；R₃为环戊烷、环己烷、哌啶或叔丁基，X为氧或硫，n为0，1或2；通式I中的Z为碳或氮。

2.根据权利要求1所述的噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中的应用；其特征在于，所述应用为所述噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备抗癫痫药物制剂中的应用。

3.根据权利要求1所述的噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中的应用；其特征在于，所述应用为所述噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备抗焦虑药物制剂中的应用。

4.根据权利要求1所述的噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中的应用；其特征在于，所述应用为所述噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备缓解神经性疼痛药物制剂中的应用。

5.根据权利要求1所述的噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中的应用；其特征在于，所述噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物通式I中所述R₁为甲基、乙基或三氟甲基；R₂为甲基；R₃为环戊烷、环己烷，X为氧；Z为碳或氮；n为1或2。

6.根据权利要求5所述的噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中的应用；其特征在于，所述噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物通式I中所述R₁为乙基或三氟甲基；R₂为甲基；R₃为环戊烷、环己烷，X为氧；Z为碳；n为2。

7.根据权利要求5所述的噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中的应用；其特征在于，所述噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物通式I中所述R₁为乙基；R₂为甲基；R₃为环戊烷，X为氧；Z为碳；n为1。

8.根据权利要求6所述的噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物在制备KCNQ钾通道开放剂中的应用；其特征在于，所述噻唑并[3,2-a]嘧啶酮衍生物通式I中所述R₁为三氟甲基；R₂为甲基；R₃为环己烷，X为氧；Z为氮；n为2。