CN105342916B - 一种植物提取物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及植物提取技术领域，公开了一种植物提取物组合物及其制备方法和应用。本发明所述植物提取物组合物由金合欢提取物和芍药提取物组成。本发明从众多植物来源中选择金合欢以及芍药作为复方，混合两者的乙醇提取物，利用两种提取物中各活性成分的系统作用，实现了以较少组分达到更加显著的酪氨酸酶抑制效果，同时具备了优异的自由基清除效果，可以应用于酪氨酸酶抑制剂、美白化妆品和抗氧化剂的制备中，以及应用在皮肤美白中。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，具体的说是涉及一种植物提取物组合物及其制备方法和应用。
背景技术
肤色是人们审美的标准之一。对于亚洲女性，白皙肤色更是一种普遍追求。为此，各种产品应运而生，如：增白产品、防紫外线产品和膜产品等。经研究，皮肤颜色由皮肤细胞中所含的各种色素综合决定。在众多色素中，黑素细胞中所含的黑色素量是最主要的决定因素。进一步研究证实，酪氨酸酶(EC1.14.18.1)是黑色素合成的关键酶。由此，通过抑制酪氨酸酶活性，以减少黑色素生成，从而达到美白的护肤效果成为研发护肤产品的重要依据之一(实用医学杂志[J]，2005，21，1364-1366；厦门大学学报(自然科学版)[J]，2007，46，274-282)。在这些产品中常用的美白剂如：氢醌、曲酸、熊果苷等几种，这些物质或多或少具有相当的细胞毒性。因此，酪氨酸酶抑制剂的安全性是美白护肤产品研发过程中需要并重考虑的因素，而植物美白成分来源于天然中草药植物，具有安全性高，成本低廉等优点，越来越受到消费者的欢迎。
此外，过多的自由基也是造成皮肤色素过度沉着的重要原因。体内过量的活性氧自由基与不饱和脂肪酸作用产生丙二醛等物质，丙二醛将与细胞膜上的蛋白质等作用生产褐色素，沉淀于皮肤便成为各种色斑。抗氧剂是具有捕捉自由基能力的物质，可以清除皮肤中的活性自由基，减轻自由基引起的皮肤氧化应激损伤，从而改善由氧化应激等造成的皮肤过度色素沉着。目前已知有维生素E、维生素C等生物体内的清除自由基型抗氧化剂，另外也报道了植物来源的抗氧化剂如莲花、梅果提取物等。
现有专利中有很多采用多种天然植物中草药为组分制成美白制剂，但是一方面这些中草药组分过多，增加使用的安全风险；另一方面相对熊果苷等现有美白剂效果不够突出。将天然植物提取物进行复配得到的组合物，可以发挥其协同作用，提高功效活性，而如何以较少植物提取物组分复配来实现更好的美白效果已成为新的研究课题，为美白化妆品应用和临床治疗色素性疾病提供新的解决方案。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种植物提取物组合物及其制备方法和应用，使得所述组合物仅以金合欢和芍药活性成分配伍，同时显著提高酪氨酸酶抑制活性，优于现有美白剂熊果苷。
本发明的另一个目的在于提供一种植物提取物组合物及其制备方法和应用，使得所述组合物具有较高的自由基清除率。
为实现上述目的，本发明提供以下技术方案：
一种植物提取物组合物，由金合欢提取物和芍药提取物组成。
金合欢，别名鸭皂树、刺球花、消息树等，以全株入药，味微酸、涩，性平，具有消痈排脓，收敛止血功效，主治肺结核，冷性脓肿，风湿性关节炎等症。
芍药，别名将离、离草，具有镇痉、镇痛、通经作用。对妇女的腹痛、胃痉挛、眩晕、痛风、利尿等病症有效。本发明芍药优选芍药根，包括白芍和赤芍。
本发明选择金合欢和芍药作为复方，利用两种植物中活性成分的协同作用，实现对酪氨酸酶的抑制作用，以及达到较高的自由基清除效果，弥补现有技术的缺陷。
其中，作为优选，所述金合欢提取物和芍药提取物均为经乙醇提取的提取物。
作为优选，所述金合欢提取物和芍药提取物的重量比为(1:10)-(10:1)；在本发明的一些具体实施方式中，所述所述金合欢提取物和芍药提取物的重量比可选择为1:10、1:2、1:1、2:1或10:1。
在本发明所述植物提取物组合物与熊果苷的对比试验中，本发明组合物在金合欢提取物和芍药提取物的重量比为(1:10)-(10:1)范围内具有明显的协同作用，在浓度一致的前提下，本发明植物提取物组合物的酪氨酸酶抑制率远高于熊果苷以及处于(1:10)-(10:1)重量比范围外的组合物。
同时，在自由基清除试验中，本发明组合物在上述配比范围内也达到了高于70％的自由基清除率。
基于上述的技术效果，本发明提供所述植物提取物组合物在制备酪氨酸酶抑制剂、制备美白化妆品以及在皮肤美白中的应用，并且也提供了所述植物提取物组合物在制备抗氧化剂中的应用。
此外，本发明还提供了所述植物提取物组合物的制备方法，包括：
将金合欢和芍药分别粉碎并加乙醇提取，提取后分离出粗提液，除去乙醇获得金合欢提取物和芍药提取物，两者混合后获得所述植物提取物组合物。
其中，作为优选，所述提取为超声提取1小时。
作为优选，所述金合欢加入70v/v％乙醇，金合欢和70v/v％的质量体积比为50g:1L。
作为优选，所述芍药加入70v/v％乙醇，芍药和70v/v％的质量体积比为100g:1L。
由以上技术方案可知，本发明从众多植物来源中选择金合欢以及芍药作为复方，混合两者的乙醇提取物，利用两种提取物中各活性成分的系统作用，实现了以较少组分达到更加显著的酪氨酸酶抑制效果，同时具备了优异的自由基清除效果，可以应用于酪氨酸酶抑制剂、美白化妆品和抗氧化剂的制备中，以及应用在皮肤美白中。
具体实施方式
本发明实施例公开了一种植物提取物组合物及其制备方法和应用。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的组合物和应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的产品及方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种植物提取物组合物及其制备方法和应用进行详细说明。
实施例1：本发明所述植物提取物组合物的制备
1、金合欢提取物的制备：
将100g金合欢粉碎后，与2L 70v/v％乙醇溶液混合(体积质量比50g:1L)，在室温下，超声提取1小时，分离出粗提液，经减压蒸出乙醇溶液后，得到金合欢提取物6g。
2、芍药提取物的制备：
将100g芍药干燥粉碎后，与1L 70％乙醇溶液混合(体积质量比100g:1L)，在室温下，超声提取1小时，分离出提取液，经减压蒸出乙醇溶液后，得到芍药提取物28.8g。
3、按照金合欢提取物和芍药提取物的1:10、1:2、1:1、2:1以及10:1的重量比混合，获得不同配比的植物提取物组合物。
实施例2：酪氨酸酶抑制活性的测定
将实施例1获得的不同配比混合而成植物提取物组合物用去离子水完全溶解后，配制成0.5mg/mL的水溶液，用于测定酪氨酸酶抑制活性，以熊果苷为对照，同时增加处于(1:10)-(10:1)金合欢提取物和芍药提取物重量比范围外的组合物为对照。
测定步骤为：磷酸盐缓冲溶液(pH6.8，30mM)70μL、1.66mM酪氨酸溶液80μL、样品溶液80μL混合均匀，在37℃恒温水槽中温育5分钟以上，加入酪氨酸酶溶液(125U/ml)10μL，在37℃恒温10min后，用酶标仪测定475nm波长的吸光度A475。用去离子水替换样品水溶液，作为参比溶液同样测定吸光度，结果见表3。
酪氨酸酶活性抑制率计算公式为：抑制率(％)＝(A0-(A475-B))/A0×100％，其中A0是参比溶液的吸光度，A475是样品溶液的吸光度，B是样品空白溶液的吸光度。
检测结果见表1。
表1 酪氨酸酶抑制活性的测定结果
| 金合欢提取物：芍药提取物 | 浓度mg/mL | 酪氨酸酶抑制率％ |
| 单一金合欢提取物 | 0.5 | 77.1 |
| 10:1 | 0.5 | 79.7 |
| 2:1 | 0.5 | 88.1 |
| 1:1 | 0.5 | 92.7 |
| 1:2 | 0.5 | 77.9 |
| 1:10 | 0.5 | 77.3 |
| 单一芍药提取物 | 0.5 | 68.4 |
| 熊果苷 | 0.5 | 43.0 |
由表1可知，金合欢提取物和芍药提取物的组合物具有对酪氨酸酶协同抑制的作用，当金合欢提取物和芍药提取物的质量配比为1：1时，抑制酪氨酸酶作用最强，抑制率最高达到92.7％，高于对照组相同浓度熊果苷对酪氨酸酶的抑制作用。同时，本发明所述植物提取物组合物的酪氨酸酶抑制率也高于处于(1:2)-(10:1)金合欢提取物和芍药提取物重量比范围外的组合物。
实施例3：自由基清除率的测定
将实施例1获得的不同配比混合而成植物提取物组合物用去离子水完全溶解后，配制成0.05mg/mL的水溶液，用DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法测定其清除自由基抗氧化活性。测定步骤为：移取2mL提取物溶液于10mL具塞试管中，加人2mL DPPH乙醇溶液(2×10-4mol/L)，充分混匀，室温静置30min后用分光光度计测定517nm波长的吸光度A517；同时测定2mL提取物溶液与2mL乙醇混合后的吸光度A0，2mL水与2mL DPPH乙醇溶液混合后的吸光度C以及2mL水与2mL乙醇溶液混合后的吸光度C0。平行测定三次，取平均值，根据以下公式计算自由基清除率，清除率越大，说明提取物的抗氧化能力越强。结果如下表2所示：
自由基清除率(％)＝[1-(A517-A0)/(C-C0)]×100％
表2 DPPH法清除自由基活性的检测结果
| 金合欢提取物：芍药提取物 | 浓度mg/mL | 自由基清除率％ |
| 单一金合欢提取物 | 0.05 | 70.1 |
| 10:1 | 0.05 | 71.8 |
| 2:1 | 0.05 | 72.3 |
| 1:1 | 0.05 | 73.6 |
| 1:2 | 0.05 | 74.5 |
| 1:10 | 0.05 | 75.3 |
| 单一芍药提取物 | 0.05 | 77.8 |
由表2可见，金合欢提取物和芍药提取物及其组合物都具有很好的抗氧化活性，可以有效清除活性自由基，清除率达到70％以上，减轻自由基引起的皮肤氧化应激损伤，从而改善由氧化应激等造成的皮肤过度色素沉着。
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
Claims (3)
1.一种植物提取物组合物，其特征在于，由金合欢乙醇提取物和芍药乙醇提取物组成，所述金合欢乙醇提取物和芍药乙醇提取物的重量比为(1:1)-(2:1)；
其中，所述金合欢乙醇提取物由以下方法制备：金合欢粉碎加入70v/v％乙醇超声提取1小时，提取后分离出粗提液，除去乙醇获得金合欢提取物；金合欢和70v/v％乙醇的质量体积比为50g:1L；
所述芍药乙醇提取物由以下方法制备：芍药粉碎加入70v/v％乙醇，超声提取1小时，提取后分离出粗提液，除去乙醇获得芍药乙醇提取物；芍药和70v/v％乙醇的质量体积比为100g:1L。
2.权利要求1所述植物提取物组合物在制备酪氨酸酶抑制剂以及制备美白化妆品中的应用。
3.权利要求1所述植物提取物组合物的制备方法，其特征在于，包括：
将金合欢和芍药分别粉碎并加乙醇超声提取1小时，提取后分离出粗提液，除去乙醇获得金合欢提取物和芍药提取物，两者混合后获得所述植物提取物组合物；所述金合欢加入70v/v％乙醇，金合欢和70v/v％的质量体积比为50g:1L；所述芍药加入70v/v％乙醇，芍药和70v/v％的质量体积比为100g:1L。
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