CN105325708A - 用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂及制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂及其制备方法和应用。由纳米蒙脱石与每克添加剂中含量不低于6亿cfu的乳酸粪肠球菌制成；其中，纳米蒙脱石50％颗粒直径小于1000纳米，30％颗粒直径小于100纳米，20％颗粒直径小于20纳米；纳米蒙脱石含量大于85％；本发明还可以添加其他有益菌群。本发明添加剂具有超大的比表面积和极强的层间离子交换定位吸附能力，能吸附多种霉菌毒素；与粪肠球菌等配合具有协同增效的作用，实现完美脱霉效果，显著改善便秘、腹泻。

Description

用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂及制备方法和应用

技术领域

本发明涉饲料工业和畜牧兽医技术领域，具体涉及一种吸附饲料中有害的霉菌毒素和治疗畜禽腹泻的无抗饲料添加剂、制备方法、应用。

背景技术

饲料脱霉剂分为粘土吸附类、酵母细胞壁类、酶解去毒类以及中草药类。

粘土吸附类，蒙脱石(水合硅铝酸盐)是目前最常用的粘土类饲料脱霉剂，是靠蒙脱石颗粒层间离子交换定位吸附能力定向吸附黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、增生镰孢霉等霉菌毒素，为表面亲和吸附。单位质量比表面积越大吸附效果越好，吸附和解吸能力的大小与蒙脱石颗粒细度及其分布有直接关系。

酵母细胞壁类，利用酵母细胞壁的葡萄糖甘露聚糖的化学结构，与同样属于有机类的霉菌毒素之间存在亲和性，吸附霉菌毒素。

酶解去毒类，酶解去除具有很大局限性。首先酶具有极强的选择性，目前还没有证据证明酶解法可以解决所有霉菌毒素的毒性，其次酶对饲料加工过程的高温十分敏感，极易失活；再次胃肠道温度与复杂的环境包括变化的PH是否适合该种酶的作用条件不确定。最后酶解的次级产物是否能保证没有毒性，有待研究。

中草药类，报道说中药药制剂通过提高肝脏本身对毒素的解毒能力，来达到解除霉菌毒素的作用。

在畜禽腹泻病防治方面，主要是靠免疫接种进行预防。除此基本使用抗生素进行治疗。

现有粘土吸附类饲料脱霉剂中：采用的蒙脱石纯度不够，颗粒细度不够，颗粒细度分布不合理，致使比表面积不够大，对霉菌毒素表面亲和吸附效果不佳，不能解除已经吸收的霉菌毒素对机体引起的免疫抑制的问题，不能发挥既能体外吸附又能体内消毒(消除毒素引起的免疫抑制)的脱霉效果；当前治疗腹泻的抗生素和益生菌，不能修复肠道粘膜损伤、不能修复受损肠细胞间桥使其紧密连接，不能从根本抑制肠道过度渗透而止泻(夏季高温蛋鸡腹泻和初产蛋鸡腹泻，畜禽常见腹泻和换料应激腹泻)和药物残留；普通和进口脱霉剂也只是起到了体外吸附一定霉菌毒素，不能让机体消除毒素引起的免疫抑制，不能消除毒素对动物肠道环境的不利影响，不能改善便秘(母猪妊娠普遍便秘)、腹泻(畜禽常见腹泻和换料应激腹泻)等症状。

发明内容

本发明根据现有技术的不足公开了一种用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂及其制备方法和应用。本发明要解决的问题是提供一种无抗生素饲料添加剂组成及其制备方法，并将其应用于饲料脱毒、治疗和预防畜禽腹泻。

本发明通过以下技术方案实现：

本发明首先提供了一种用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂：

所述添加剂由纳米蒙脱石与乳酸粪肠球菌制成；

其中，乳酸粪肠球菌在每克添加剂中含量不低于6亿cfu；

其中，纳米蒙脱石50％颗粒直径小于1000纳米，30％颗粒直径小于100纳米,20％颗粒直径小于20纳米；其平均直径为80-200纳米。

上述纳米蒙脱石含量大于85％；所述含量通过吸兰量测得，本发明蒙脱石吸兰量大于37.57。

上述乳酸粪肠球菌采用包被乳酸粪肠球菌。

上述添加剂中还可以包括枯草芽孢杆菌或/和凝结芽孢杆菌，含量均为每克添加剂中不低于10亿cfu，即加入枯草芽孢杆菌或凝结芽孢杆菌时每克添加剂中枯草芽孢杆菌或凝结芽孢杆菌均不低于10亿cfu。

上述添加剂中还可以包括酵母细胞壁，质量百分比含量不低于10％。

本发明还提供了上述添加剂的制备方法，包括以下步骤：

1)、将蒙脱石粉碎，烘干至恒重，再用纳米冲击磨粉碎至所需颗粒直径；

2)、按比例加入其他原料菌；

3)、充分混合后待用。

本发明还提供了上述添加剂在饲料制备中的应用；在饲料中的添加量为500g/吨～3000g/吨。

本发明纳米蒙脱石，平均颗粒直径80-200纳米，蒙脱石纯度(吸兰量)大于85％的含量(蒙脱石％＝吸兰量/0.442)，纳米化后50％颗粒直径小于1000纳米(1.8万目)，30％颗粒直径小于100纳米(1.8万目)，20％颗粒直径小于20纳米(90-180万目)；加入乳酸粪肠球菌，使其中乳酸粪肠球菌每克添加剂中含量不低于6亿cfu。还可以加入酵母细胞壁、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌等其他菌类。

上述所用菌剂均为市售产品，按配方中的活菌数要求换算。

本发明添加剂利用蒙脱石纳米化后超大的比表面积和极强的层间离子交换定位吸附能力，体外(消化道内)超强亲和吸附多种霉菌毒素。利用脱霉剂内益生菌代谢产物改善微循环，稳定溶酶体膜，减少组胺释放和炎性渗出，修复并提高免疫机能，增强动物免疫力和对营养物主的吸收，促进新陈代谢，解除霉菌毒素引起的免疫抑制(体内消毒)；体外吸附与体内消毒组合达到完美脱霉效果。

本发明利用蒙脱石纳米化后超大的比表面积和极强吸附力，可定向吸附带有粒编码蛋白(CS31A)的致病性病原菌及其产生的毒素，并将其固定而失去致病力，随肠道蠕动排出体外，避免肠道粘膜损伤。水合硅铝酸盐纳米化后整个晶体的结构区域保持双电荷特征，可以减轻肠道粘膜的病理损伤，修复受损肠细胞间桥，使其紧密连接，并抑制肠道过度渗透而止泻；

本发明添加剂中的粪肠球菌是人和动物肠道内主要菌群之一，在肠黏膜具有较强的耐受和定植能力的乳酸菌，能产生细菌素等抑菌物质，抑制大肠杆菌和沙门氏菌等病原菌的生长，改善肠道微环境，还能抑制肠道内产尿素酶细菌和腐败菌的繁殖，减少肠道尿素酶和内毒素的含量，可以双向调节动物肠道环境，显著改善便秘、腹泻。

本发明有益性：

1、本添加剂使用的蒙脱石含量大于85％(吸蓝量大于37.57)。采用先进工艺细化到纳米级，纳米化后50％颗粒直径小于1000纳米(1.8万目)，30％颗粒直径小于100纳米(1.8万目)，20％颗粒直径小于20纳米(90-180万目)，使其比表面积每克大于250M2的超大比表面积和静电，超强吸黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN，F-2)、呕吐毒素(DON)以及烟曲霉毒素B1(FumB1)等霉菌毒素，随肠道蠕动排出体外。

2、添加的包被粪肠球菌的代谢产物能改善微循环，稳定溶酶体膜，减少组胺释放和炎性渗出，修复并提高免疫机能，增强动物免疫力和对营养物主的吸收，促进新陈代谢，解除霉菌毒素引起的免疫抑制(体内消毒)；

3、吸蓝量大于37.57的蒙脱石纳米化后超大的比表面积和极强吸附力，可定向吸附带有粒编码蛋白(CS31A)的致病性病原菌及其产生的毒素，并将其固定而失去致病力，随肠道蠕动排出体外，避免肠道粘膜损伤；其整个纳米级的晶体的结构区域保持双电荷特征，可以减轻肠道粘膜的病理损伤，修复受损肠细胞间桥，使其紧密连接，并抑制肠道过度渗透而止泻，做到真正无抗治疗腹泻；

4、本发明添加剂使用的包被粪肠球菌在肠黏膜具有较强的耐受和定植能力的乳酸菌，能产生细菌素等抑菌物质，抑制大肠杆菌和沙门氏菌等病原菌的生长，改善肠道微环境，还能抑制肠道内产尿素酶细菌和腐败菌的繁殖，减少肠道尿素酶和内毒素的含量，可以双向调节动物肠道环境，显著改善便秘、不用抗生素治疗腹泻，让畜禽产品做到真正无抗。

5、本发明添加剂还可以配合使用凝结芽孢杆菌，使用的凝结芽孢杆菌既有芽孢杆菌耐酸、耐热、耐盐、容易培养和保存存活率高特点，也有分解糖类生成L-乳酸的乳酸菌的保健功。该菌在肠道繁殖后迅速耗氧，有利于厌氧微生物乳酸菌和双歧杆菌的生长，从而调节肠道内微生态的菌群平衡双向调节便秘与腹泻。该菌繁殖产生的乳酸和抗菌凝固素及多种酶能抑制有害菌的繁殖，有通便、止泻作用，有效改善断奶仔猪由于应激、过敏反应引起的菌群失调性腹泻，对畜禽做到无抗治疗。

6、本发明添加剂还可以配合使用枯草芽孢杆菌，使用的枯草芽孢杆菌耐酸、耐热、耐盐、容易培养和保存存活率高特点，该菌繁殖产生的的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；该菌在肠道繁殖后迅速耗氧，形成肠道低氧环境，促进有益厌氧菌和双歧杆菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌的生长，从而调节肠道内微生态的菌群平衡，双向调节便秘与腹泻，对畜禽做到无抗治疗。

7、本发明添加剂还可以配合使用酵母细胞壁，酵母细胞壁内的葡聚糖和甘露低聚糖的化学结构与同样属于有机类的霉菌毒素具有亲和性，能亲和吸附霉菌毒素，酵母细胞壁可以和纳米蒙脱石互配以提高对某些特定霉菌毒素的吸附效果尤其是对玉米赤霉烯酮(ZEN，F-2)和T-2毒素(镰刀菌属)比较有效，以及增加霉菌毒素的吸附范围。

8、本发明添加多种菌群，改善饲料微观组合，配合采用特别功能的蒙脱石，起到了协同增效的作用。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明进行具体的描述，实施例只用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术人员根据本发明的内容作出的一些非本质的改进和调整也属于本发明保护的范围。

实施例1

本实施例中所用的乳酸粪肠球菌(300亿/克)购自宜春强微生物科技有限公司，每克所述添加剂中需称取市售包被乳酸粪肠球菌(300亿/克)0.02克。按纳米蒙脱石98份与包被乳酸粪肠球菌(300亿/克)2份混合制备；根据饲料原料霉变程度和畜禽便秘、腹泻程度添加剂量为500g/吨～3000g/吨。

实施例2

纳米级蒙脱石制备过程，将重金属不超标的高纯蒙脱石，粉碎到800目以上细度，烘干至恒重，再利用高能纳米冲击磨粉碎，粉碎后的蒙脱石平均直径80-200纳米之间。

本发明粉碎时，采用低于100纳米直径时已经做到真正纳米化，此时比表面积最大，能较好抑制肠道过度渗透而止泻，但研究发现：以黄曲霉毒素b为例，虽然能吸附高达99％以上黄曲霉毒素b，但这些被吸附的黄曲霉毒素b在遇到胃酸或者其它的诸如有机溶剂甲醇等时会重新释放出5％-10％黄曲霉毒素b，即解吸率较大。而细度在100-1000纳米时，比表面积较大，对霉菌毒素吸附率较高，解吸率低。经研究发现本发明高纯蒙脱石纳米化后具有较好的吸附率，且解吸率低。

实施例3

性能比较实验，采用意大利TECNA公司的检测霉菌毒素的酶联免疫(ELISA)试剂盒对本实施例添加剂的性能进行检测，与目前一些进口的脱霉剂进行比较。方法为：粉碎已知含某种霉菌毒素(高度污染)的霉变饲料样品，分别称取5份，每份2.0000克，分别加入本添加剂、进口产品A、进口产品B、进口产品C，设空白对照，试验设3个重复。分别加入8mL配制的pH为3.0霉菌毒素缓冲液，反复颠倒混匀，后漩涡震荡3分钟，37℃，180rpm的恒温震荡水浴锅中处理60min，反应结束后，在3000-5000rpm离心机中离心10min，分别收集所有上清液。对上清液按TECNA公司的ELISA试剂盒测定方法分别测定各样品霉菌毒素的含量，计算出每个样品三个重复的平均值，计算出吸附率。收集上清液后的固体，按照TECNA公司的ELISA试剂盒测定方法分别测定霉菌毒素的含量，计算出解吸率。结果表明本添加剂对黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)以及烟曲霉毒素B1(FumB1)的吸附率显著高于其它比较样品；本添加剂在吸附剂吸附毒素后在有机溶液存在情况下依旧能较好吸附住霉菌毒素，解吸效果显著低于其它比较样品。

实验结果如下：

表1本产品与不同霉菌毒素吸附剂对霉菌毒素的吸附率比较(pH＝3.0)

霉菌毒素吸附剂	AFB1吸附率(％)	ZEN吸附率(％)	DON吸附率(％)	FumB1吸附率(％)
					本产品	99.17±1.33c	98.82±0.64d	77.12±1.76a	86.13±1.72c
进口产品A	89.45±1.49a	87.23±1.46a	74.12±2.21a	51.20±1.44a
					进口产品B	87.10±2.12a	17.29±2.45b	48.12±2.01b	40.21±1.13b
进口产品C	66.59±1.98b	21.69±2.75c	40.08±1.51c	51.72±1.45a

注：同列肩标字母相同的为差异显著(P＜0.05)，肩标字母不同的为差异不显著(P＞0.05)，下表同。

表2本产品与霉菌毒素吸附剂对霉菌毒素吸附强度(解吸率)比较(pH＝3.0)

霉菌毒素吸附剂	AFB1解吸率(％)	ZEN解吸率(％)	DON解吸率(％)	FumB1解吸率(％)
					本产品	1.60±0.12c	1.38±0.45a	1.58±0.21c	0.55±0.06d
进口产品A	16.53±0.61b	9.62±0.43ab	6.60±0.45b	3.70±0.34b
					进口产品B	11.05±0.46b	7.52±1.14b	9.51±0.34a	1.62±0.30c
进口产品C	8.95±1.30a	8.01±1.63ab	6.95±0.18a	6.71±0.53a

实施例4

断奶猪应激性腹泻临床治疗应用试验，将本添加剂添加2.5公斤每吨到教槽料和保育料中，从断奶第一天即25日龄开始记录试猪群腹泻情况，设未添加本添加剂的相同配方的教槽料和保育料为对照组。试验到70日龄结束。统计每天的拉稀头数和当天在栏头数的比率，计算平均拉稀比率、结束时平均体重。结果表明本添加剂抗腹泻效果好，能明显增加仔猪生长速度。

表3添加本产品的饲料对保育猪腹泻和生长速度的影响

组别	腹泻率	平均体重(斤)
			本产品	1.51％	56.2
对照组	6.92％	51.6

实施例5

肉鸡、蛋鸡病理性腹泻临床治疗应用试验，随机对同一栋约20000羽85日龄肉鸡和约15000羽300日龄蛋鸡的细菌性肠炎进行治疗比较试验。将同栋鸡舍即随机分A、B两组。在饲料中加入2公斤本添加剂，观察3天后肠炎的情况。统计评估方法为：在投喂72小时候后，在鸡粪便上面垫上相同长度干净薄膜，1小时后，拿出薄膜，统计鸡粪总份数，腹泻粪便总份数，计算腹泻率。结果表明本添加剂治疗肉鸡、蛋鸡肠炎效果好。

表4本产品对蛋鸡肉鸡腹泻治疗效果应用

实施例6

蛋鸡生理性水样腹泻临床治疗应用试验，随机对同一栋约20000羽150日龄初产蛋鸡(10月)和约25000羽300日龄蛋鸡(7月高温季节)的水样粪便鸡群进行治疗比较试验。100-160天龄初产蛋鸡生理发育原因和7月高温季节蛋鸡因饮水量增加原因出现水样腹泻。将同栋鸡舍即随机分A、B两组。在饲料中加入2.5公斤本添加剂，观察3天后水样腹泻的情况。统计评估方法为：在投喂72小时候后，在鸡粪便上面垫上相同长度干净薄膜，1小时后，拿出薄膜，统计鸡粪总份数，水样腹泻粪便总份数，计算水样腹泻率。结果表明本添加剂治疗蛋鸡生理性腹泻和因高温饮水量增加导致水样腹泻效果好。

表5本产品对蛋鸡肉鸡腹泻治疗效果应用

Claims (8)

1.用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂，其特征在于：

所述添加剂由纳米蒙脱石与乳酸粪肠球菌制成；

其中，乳酸粪肠球菌在每克添加剂中含量不低于6亿cfu；

其中，纳米蒙脱石50％颗粒直径小于1000纳米，30％颗粒直径小于100纳米,20％颗粒直径小于20纳米。

2.根据权利要求1所述的用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂，其特征在于：纳米蒙脱石含量大于85％。

3.根据权利要求2所述的用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂，其特征在于：所述乳酸粪肠球菌采用包被乳酸粪肠球菌。

4.根据权利要求2所述的用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂，其特征在于：所述添加剂中还包括枯草芽孢杆菌或/和凝结芽孢杆菌，含量均为每克添加剂中不低于10亿cfu。

5.根据权利要求2所述的用于脱霉和治疗腹泻的无抗饲料添加剂，其特征在于：所述添加剂中还包括酵母细胞壁，质量百分比含量不低于10％。

6.一种权利要求1至5任一项所述添加剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)、将蒙脱石粉碎，烘干至恒重，再用纳米冲击磨粉碎至所需颗粒直径；

2)、按比例加入其他原料菌；

3)、充分混合后待用。

7.一种权利要求1至5任一项所述添加剂的应用，其特征在于：权利要求1至5任一项所述添加剂在饲料制备中的应用。

8.根据权利要求7所述添加剂的应用，其特征在于：所述添加剂在饲料中的添加量为500g/吨～3000g/吨。