CN105267642A - 一种具有防治冠心病作用的含壳聚糖、壳寡糖的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有防治冠心病作用的含壳聚糖、壳寡糖的组合物，属于医药技术领域。该组合物的主要原料为葡萄籽提取物、壳聚糖、银杏叶提取物、壳寡糖和中药提取物，其中，中药提取物是由马齿苋、丹参、党参、黄芪、酸枣仁和麦冬按本发明处方和工艺提取而得。与现有技术相比，该组合物制成的临床应用制剂，对冠心病的预防和治疗，具有治疗效果好、无任何毒副作用、调理与治疗相结合、标本兼治等突出的技术优势，此外，本发明组合物制备工艺简便易行，适合工业化批量生产，极易推广应用。

Description

一种具有防治冠心病作用的含壳聚糖、壳寡糖的组合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种具有防治冠心病作用的组合物。

技术背景

冠状动脉粥样硬化性心脏病是冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变而引起血管腔狭窄或阻塞，造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病，常常被称为“冠心病”。导致冠心病的因素主要有：高血压，血脂异常（总胆固醇过高或低密度脂蛋白胆固醇过高、甘油三酯过高、高密度脂蛋白胆固醇过低）、超重/肥胖、高血糖/糖尿病，不良生活方式包括吸烟、不合理膳食（高脂肪、高胆固醇、高热量等）。

目前，用于冠心病治疗的药物主要有硝酸酯类、抗血栓类、纤溶药物、β－阻滞剂、钙通道阻断剂、肾素血管紧张素系统抑制剂等，这些化学药物在治疗时以消除或缓解症状为主，治标不治本，毒副作用大，治疗效果差。本发明组合从抗机体氧化入手，清除自由基，从而清除血脂异常对机体造成的损害，从根本上防治冠心病，再辅之以通络、软化血管等作用的中药提取成分，从而达到标本兼治的效果。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，以葡萄籽提取物、壳聚糖、银杏叶提取物、壳寡糖为基础原料，添加适当的中药成分，开发一种新的组合物及其制备方法，使该组合物对冠心病的预防和治疗具有显著的效果。

为解决上述技术问题，发明人在扎实的理论知识的基础上，通过反复的试验和临床实践，不断地调整、钻研，最终发明了一种全新的组合物，该组合物在上述四种原料的基础上，添加从6味中药材中提取的中药提取物，在临床实践中，对冠心病的防治表现出了优异的效果。该组合物的原料配比为（以重量份计）：

葡萄籽提取物3-12份、壳聚糖3-10份、银杏叶提取物4-13份、壳寡糖3-9份、中药提取物4-18份；其中中药提取物的原料组成为：马齿苋11-32份、丹参9-19份、党参8-17份、黄芪10-22份、酸枣仁7-18份、麦冬7-19份。

在实践过程中，优选出的具有优异的疗效的两个原料配比分别以重量份表示如下：

配比1：葡萄籽提取物7份、壳聚糖5份、银杏叶提取物8份、壳寡糖4份、中药提取物13份；其中中药提取物的原料组成为：马齿苋22份、丹参15份、党参13份、黄芪16份、酸枣仁13份、麦冬14份。

配比2：葡萄籽提取物6份、壳聚糖5份、银杏叶提取物9份、壳寡糖5份、中药提取物12份；其中中药提取物的原料组成为：马齿苋25份、丹参16份、党参12份、黄芪15份、酸枣仁14份、麦冬15份。

上述组合物的制备方法为以下步骤：

（1）按组方的原料配比，分别称取各种原料；

（2）将干燥银杏叶用6-15倍量的60%-90%乙醇溶液加热回流提取2-5次，每次0.5-2.5h，过滤，滤液弃掉后的剩余药渣，加银杏叶重量8-18倍的纯化水，加热回流提取1-5次，每次0.5-2.5h，过滤，合并滤液，浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为银杏叶提取物，备用；

（3）将葡萄籽洗净粉碎后加6-16倍的纯化水，浸泡1-4小时，回流煎煮0.5-2.5小时，过滤，滤渣再加4-12倍的纯化水，再回流煎煮0.5-2.5小时，过滤，将两次滤液合并，浓缩至65℃时相对密度为1.05-1.10的浓缩液，加适量乙醇使含乙醇体积比达70%-75%，0℃冷藏18-30小时，过滤，将滤液减压蒸馏除去乙醇，并浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为葡萄籽提取物，备用；

（4）将马齿苋、丹参、党参、黄芪、酸枣仁和麦冬分别粉碎，加初始药材6-16倍的纯化水，浸泡5-15小时，回流煎煮2-5小时，过滤；将滤渣再加入4-12倍的纯化水，回流煎煮1-4小时，过滤，合并两次滤液，减压浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为中药提取物，备用；

（5）将葡萄籽提取物、壳聚糖、银杏叶提取物、壳寡糖、中药提取物按比例混合均匀，即为组合物有效成分原料；

（6）将组合物有效成分原料，添加适当的辅料，利用现代通用的药品制剂技术，制成临床所需求的成品剂型，例如片剂、丸剂（含蜜丸）、胶囊剂（含软胶囊）、糖浆剂、颗粒剂、酊剂、散剂等剂型。

本发明所用原材料的性质特点和功效：

1、壳聚糖：

壳聚糖是甲壳素脱N-乙酰基的产物，一般而言，N-乙酰基脱去55%以上的就可称之为壳聚糖，或者说，能在1%乙酸或1%盐酸中溶解1%的脱乙酰甲壳素，这种脱乙酰甲壳素被称之为壳聚糖。胆固醇是导致冠心病的主要原因之一。壳聚糖有两个机制降低胆固醇。一个是阻止脂肪的吸收，另一个是将人体血液内的胆固醇排泄掉。首先，壳聚糖抑制那些助于脂肪吸收的脂肪酶的活性。脂肪酶分解脂肪使人体进行吸收。另外一个是排泄胆酸。一旦胆酸排泄，则血液中的胆固醇被用于制造胆酸。这两种机制使得壳聚糖成为强胆固醇清除剂。

2、壳寡糖：

壳寡糖又叫壳聚寡糖、低聚壳聚糖，是将壳聚糖经特殊的生物酶技术（也有使用化学降解、微波降解技术的报道）降解得到的一种聚合度在2-20之间寡糖产品，分子量≤3200Da，是水溶性较好、功能作用大、生物活性高的低分子量产品。它具有壳聚糖所没有的较高溶解度，全溶于水，容易被生物体吸收利用等诸多独特的功能，其作用为壳聚糖的14倍。其生理学意义与壳聚糖类似。

3、葡萄籽提取物：

葡萄籽提取物（原花青素OPC）是目前已知的抗氧化作用最强的天然食品，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍。超强的抗氧化效率具有清除自由基、提高人体免疫力的强力效果。葡萄籽精华含丰富生物类黄酮、是强力的精华分子，用于对抗自由基（游离基）与维护微丝血管的健康。（自由基是造成老化及诸多疾病的重要原因之一，具估计大约80%-90%的老化性、退化性疾病都与自由基有关，所以，葡萄籽提取物对人体抗氧化，提高免疫力有极佳的效果。）此外，OPC很好的生物利用度，易于被人体吸收；其它的抗氧化剂如硒、锗、胡萝卜素、超氧化物岐化酶（SOD）不是效力太弱就是没有体内活性。

因此，葡萄籽提取物具有以下作用：

（1）保护心脑血管，降低胆固醇，防止动脉硬化，预防脑溢血、中风、偏瘫等；

（2）维持毛细血管适度的渗透性，增加血管强度，减低毛细血管易脆性；

（3）降血脂、降血压，抑制血栓的形成，减少脂肪肝的发生；

（4）预防血管壁脆弱引起的浮肿、血丝；减轻水肿及腿部肿胀，减轻淤伤、运动受伤；

（5）改善静脉曲张、静脉机能不全、静脉炎，防治毛细血管出血。

4、银杏叶提取物：

银杏叶提取物GinkgobilobaP.E.能同时促进大脑和身体肢体的循环。银杏叶提取物GinkgobilobaP.E.的一个主要保健功能就是抑制一种称为血小板活化因子（PAF）的物质，PAF是一种从细胞中释放的介质，其会导致血小板聚集（堆积在一起）。高含量的PAF会导致神经细胞损伤，中枢神经系统血流量降低，发炎，和支气管收缩。与自由基非常相似，高PAF水平也会导致衰老。银杏内酯和白果内酯可在缺血（体内组织缺少氧气）时期内保护中枢神经系统的神经细胞不受损伤。该功能可能能对苦于中风的患者有辅助治疗的作用。除了抑制血小板粘着外，银杏提取物调节血管张力和弹力。换句话说，其可令血管循环更加有效率。该提升循环效率作用对循环系统中的大血管（动脉）和较小血管（毛细血管）都有同样作用。

5、马齿苋：

本品为马齿苋科植物马齿苋，以全草入药。味酸，性寒；入大肠，肝、脾经；清热解毒，散血消肿。

6、丹参：

本品为唇形科植物丹参的干燥根及根茎。味苦，性微寒；归心、肝经；祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。

7、党参：

本品为桔梗科植物党参、素花党参（西党参）或川党参的干燥根。味甘，性平；归脾、肺经；补中益气，健脾益肺。

8、黄芪：

本品为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根。味甘，性温；归肺、脾经；补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮生肌。

9、酸枣仁：

本品为鼠李科植物酸枣的干燥成熟种子。味甘、酸，性平；归肝、胆、心经；补肝，宁心，敛汗，生津。

10、麦冬：本品为百合科植物麦冬（沿阶草）的干燥块根。味甘，微苦，性微寒；归心、肺、胃经；养阴生津，润肺清心。

与现有技术相比，本发明组合物有如下技术优势：

（一）治疗效果好，无任何毒副作用，调理与治疗相结合，标本兼治；

（二）对于冠心病的预防和治疗皆可用本发明组合物，可长期服用；

（三）本发明组合物制备工艺简便易行，适合工业化批量生产，极易推广应用。

本发明的另一个目的是提供了该组合物在制备治疗冠心病药物中的用途。

具体实施方式

实施例1

为了检验本发明制备方法的可行性，并为后续的试验提供受试药品，发明人以两个优选组合物配比为代表进行了丸剂的实际生产：

按优选配比1进行生产：

（1）按组方的原料配比，分别称取葡萄籽提取物7kg、壳聚糖5kg、银杏叶提取物8kg、壳寡糖4kg、中药提取物13kg、马齿苋2.2kg、丹参1.5kg、党参1.3kg、黄芪1.6kg、酸枣仁1.3kg、麦冬1.4kg；

（2）将干燥银杏叶用10倍量的80%乙醇溶液加热回流提取4次，每次1.0h，过滤，滤液弃掉后的剩余药渣，加银杏叶重量12倍的纯化水，加热回流提取3次，每次1.5h，过滤，合并滤液，浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为银杏叶提取物，备用；

（3）将葡萄籽洗净粉碎后加12倍的纯化水，浸泡2小时，回流煎煮1.5小时，过滤，滤渣再加8倍的纯化水，再回流煎煮1.0小时，过滤，将两次滤液合并，浓缩至65℃时相对密度为1.05-1.10的浓缩液，加适量乙醇使含乙醇体积比达73%，0℃冷藏23小时，过滤，将滤液减压蒸馏除去乙醇，并浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为葡萄籽提取物，备用；

（4）将马齿苋、丹参、党参、黄芪、酸枣仁和麦冬分别粉碎，加初始药材12倍的纯化水，浸泡10小时，回流煎煮3小时，过滤；将滤渣再加入8倍的纯化水，回流煎煮2小时，过滤，合并两次滤液，减压浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为中药提取物，备用；

（5）将葡萄籽提取物、壳聚糖、银杏叶提取物、壳寡糖、中药提取物按比例混合均匀，即为组合物有效成分原料；

（6）将组合物有效成分原料，添加适当的辅料，利用现代通用的药品制剂技术，制成丸剂，规格为0.7g原料/g丸剂（以折合组合物有效成分原料计）。

按优选配比2进行生产：

（1）按组方的原料配比，分别称取葡萄籽提取物6kg、壳聚糖5kg、银杏叶提取物9kg、壳寡糖5kg、中药提取物12kg、马齿苋2.5kg、丹参1.6kg、党参1.2kg、黄芪1.5kg、酸枣仁1.4kg、麦冬1.5kg；

（2）将干燥银杏叶用10倍量的80%乙醇溶液加热回流提取4次，每次1.0h，过滤，滤液弃掉后的剩余药渣，加银杏叶重量12倍的纯化水，加热回流提取3次，每次1.5h，过滤，合并滤液，浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为银杏叶提取物，备用；

（3）将葡萄籽洗净粉碎后加12倍的纯化水，浸泡2小时，回流煎煮1.5小时，过滤，滤渣再加8倍的纯化水，再回流煎煮1.0小时，过滤，将两次滤液合并，浓缩至65℃时相对密度为1.05-1.10的浓缩液，加适量乙醇使含乙醇体积比达73%，0℃冷藏23小时，过滤，将滤液减压蒸馏除去乙醇，并浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为葡萄籽提取物，备用；

（4）将马齿苋、丹参、党参、黄芪、酸枣仁和麦冬分别粉碎，加初始药材12倍的纯化水，浸泡10小时，回流煎煮3小时，过滤；将滤渣再加入8倍的纯化水，回流煎煮2小时，过滤，合并两次滤液，减压浓缩至相对密度为1.31-1.35的膏状物，即为中药提取物，备用；

（5）将葡萄籽提取物、壳聚糖、银杏叶提取物、壳寡糖、中药提取物按比例混合均匀，即为组合物有效成分原料；

（6）将组合物有效成分原料，添加适当的辅料，利用现代通用的药品制剂技术，制成丸剂，规格为0.7g原料/g丸剂（以折合组合物有效成分原料计）。

实施例2

动物毒性试验

1、试验药品：本发明实施例1所制得两种丸剂，加纯化水调制成稀糊。

试验所用动物：普通级NIH小鼠，体重21g±3g，雌雄各半，雌性小鼠均无孕；SD大鼠，初始体重219±13g，雌雄各半，雌性大鼠均无孕。两种鼠均由上海实验动物研究中心提供。

2、急性毒性试验

应用小鼠进行急性毒性实验表明：小鼠灌胃本发明的丸剂，在624.5g生药/kg剂量下，给药后小鼠出现轻微活动减少，1小时左右恢复正常，给药后连续观察7天，无一小鼠死亡，且全身状况、饮食、摄水、小便和体重增长均正常。实验结果表明：小鼠灌胃本发明丸剂的最大给药量为624.5g生药/kg/d（LD50＞624.5g生药/kg）。本发明组合物的每日临床用药总量为0.35g原料/kg/d；按体重计，小鼠灌胃本发明丸剂的耐受量为临床病人的1784.3倍。提示该药急性毒性极低，临床用药安全。

3、长期毒性试验

选用SD大鼠，给予三种剂量的本发明丸剂：63.0g原料/kg、21.0g原料/kg、7.0g原料/kg（单位体重给药量按临床用药量的20倍计算，临床用药量依据《中华人民共和国药典》2010年版一部）。每天灌胃一次，连续90天，末次给药后24小时各组活杀1/2动物（雌雄各半），其余1/2动物继续观察2周后活杀。试验期间观察动物的外观、一般行为、摄食量、体重变化；给药后90天和停药2周进行血液学（RBC、HB、网织红细胞、PLT、CT、WBC及分类）和血液生化（AST、ALT、ALP、Glu、BUN、Crea、TP、T.BIL、ALB、CHOL）、尿液生化、脏器系数、病理组织学等指标检查。

试验结果表明：本发明的丸剂在高、中、低剂量组动物一般状态良好，外观体征、行为活动、进食量和体重增长均无异常变化；三个剂量组及对照组血液学检查、血液生化学、尿液生化检查均在正常范围，组间无显著差异；各组主要脏器组织病理学检查未见明显异常。上述指标停药2周后也未见改变。本试验用药剂量分别为临床用药剂量的180、60、20倍，根据试验结果：本发明丸剂在高、中、低三个剂量（63.0g原料/kg、21.0g原料/kg、7.0g原料/kg）连续90天给药对大鼠无明显影响，无明确的毒性靶器官和敏感指标，恢复期观察也未见延迟性毒性反应，提示本发明的丸剂临床应用的剂量安全性很高。

实施例3

本发明组合物制剂对大剂量异丙肾上腺素所致大鼠慢性心肌缺血的保护实验

实验方法：取雄性大鼠50只，随机分为5组，每组10只：正常对照组：50μl/（kg·d）生理盐水皮下注射7d，同时给予生理盐水10ml/（kg·d）灌胃，分三次灌胃，连续28天。

模型组：皮下注射异丙肾上腺素5mg/（kg·d），制成慢性心肌缺血模型，连续7d；同时给予生理盐水10ml/（kg·d）灌胃，分三次灌胃，连续28天。

阳性对照组：造模同前，造模成功后，给予冠心丹参胶囊（陕西摩美得制药有限公司，国药准字Z10980161）灌胃，剂量为0.9g/kg/d，分三次灌胃，连续28天。

本发明D组：造模同前，造模成功后，灌胃本发明实施例1所生产的编号为D的丸剂，规格为0.7g原料/g丸剂（以折合组合物有效成分原料计）；剂量为7.0g原料/kg/d，分三次灌胃，连续28天。

本发明E组：造模同前，造模成功后，灌胃本发明实施例1所生产的编号为E的丸剂，规格为0.7g原料/g丸剂（以折合组合物有效成分原料计）；剂量为7.0g原料/kg/d，分三次灌胃，连续28天。

各组大鼠在灌胃28天后，锁骨下静脉取血2ml，3000r/min离心30分钟。按照试剂盒说明书中的方法检测，实验数据统计结果以表示，统计学处理方法采用组间t检验，结果参见表1：

表1本发明组合物对异丙肾上腺素所致大鼠慢性心肌缺血的保护实验结果（，n=10）

注：与正常组比较*P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01；与阳性对照组相比较&P＜0.05。

由表1数据可知，本发明组合物制剂能够明显减少异丙肾上腺素所致心肌缺损的大鼠心肌坏死程度，极显著降低血清CK-MB和乳酸脱氢酶（LDH）活性，与模型对照组相比，#P＜0.01，具有极显著性差异；并且两个编号的制剂的作用效果均显著优于阳性对照药，&P＜0.05，而编号为E的丸剂表现更加优异。因此，推测本发明组合物制剂对冠心病的防治具有良好的效果。

实施例4

临床试验

1、一般资料

本次临床试验的受试者均来自某市第三人民医院心内科，共计138位患者自愿参与了该实验，这些患者年龄37-64岁，男72人，女66人，所有受试者均被医院确诊患有冠心病。将所有受试者按年龄、性别、病情严重程度等平均分成两组，分别为对照组和试验组，使这两个组具备统计学意义上的可比性。

2、试验药品及试验方法

（1）、试验药品

对照药：冠心丹参胶囊，陕西摩美得制药有限公司，国药准字Z10980161，规格0.3g/粒。

试验药：本发明实施例1所生产的编号为E的丸剂，规格为0.7g原料/g丸剂（以折合组合物有效成分原料计）。

（2）、试验方法

对照组口服冠心丹参胶囊，每日3次，每次3粒，间隔至少4小时；试验组口服试验药，每日3次，每次10g，间隔至少4小时；4周为一个疗程，连续治疗3个疗程，治疗结束后，统计治疗结果进行计算分析。

3、疗效评价

治愈：冠心病所有症状消失，经冠状动脉造影确诊已经痊愈；

显效：冠心病部分症状消失或明显好转，经冠状动脉造影检查，冠状动脉狭窄程度明显好转；

有效：冠心病部分症状消失减轻或好转，经冠状动脉造影检查，冠状动脉狭窄程度有所减轻；

无效：冠心病所有症状均没有明显变化，甚至更加严重。

4、治疗结果统计与讨论

治疗全部结束以后，将治疗结果统计分析如表2所示。

表2治疗结果统计表

表2治疗结果数据显示，试验组的治愈率比对照组高21.7%，总有效率比对照组高27.5%，因此，与现有技术相比，本发明组合物特别是实施例1按优选配比2生产的编号为E的丸剂在治疗冠心病方面具有十分显著的技术优势，在该科研领域获得了出人意料的科学进展，其创造性不应被忽视。

Claims (4)

1.一种具有防治冠心病作用的含壳聚糖、壳寡糖的组合物，其特征在于：以重量份计，所述组合物由葡萄籽提取物3-12份、壳聚糖3-10份、银杏叶提取物4-13份、壳寡糖3-9份、中药提取物4-18份组成；

所述中药提取物的原料组成以重量份计为：马齿苋11-32份、丹参9-19份、党参8-17份、黄芪10-22份、酸枣仁7-18份、麦冬7-19份。

2.如权利要求1所述的具有防治冠心病作用的含壳聚糖、壳寡糖的组合物，其特征在于：以重量份计，所述组合物由葡萄籽提取物7份、壳聚糖5份、银杏叶提取物8份、壳寡糖4份、中药提取物13份组成；

所述中药提取物的原料组成以重量份计为：马齿苋25份、丹参16份、党参12份、黄芪15份、酸枣仁14份、麦冬15份。

3.如权利要求1所述的具有防治冠心病作用的含壳聚糖、壳寡糖的组合物，其特征在于：以重量份计，所述组合物由葡萄籽提取物6份、壳聚糖5份、银杏叶提取物9份、壳寡糖5份、中药提取物12份组成；

所述中药提取物的原料组成以重量份计为：马齿苋25份、丹参16份、党参12份、黄芪15份、酸枣仁14份、麦冬15份。

4.如权利要求1所述的具有防治冠心病作用的含壳聚糖、壳寡糖的组合物，其特征在于：所述组合物的剂型为片剂、丸剂、胶囊剂、糖浆剂、颗粒剂、酊剂或散剂。