CN105198789B - 取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂及制备方法和应用 - Google Patents
取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂及制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105198789B CN105198789B CN201510702363.4A CN201510702363A CN105198789B CN 105198789 B CN105198789 B CN 105198789B CN 201510702363 A CN201510702363 A CN 201510702363A CN 105198789 B CN105198789 B CN 105198789B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- methyl
- indoles
- chloro
- formamides
- yls
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
- C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
- C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
- C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
- C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
- C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
- C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种取代3‑吲哚类Bcl‑2蛋白抑制剂及其制备方法和应用，化合物具有如通式I或II所示的结构。本发明的化合物对于Bcl‑2蛋白有较强的抑制活性，可预防或治疗因Bcl‑2蛋白表达异常导致的相关哺乳动物疾病，本发明还涉及具有通式I或II结构化合物的组合物的制药用途。
Description
技术领域
本发明涉及一种取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂及其制备、药物组合物与医药用途，属于医药技术领域。
背景技术
B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell leukemia/lymphoma-2,Bcl-2)蛋白家族是细胞凋亡内源性途径中重要的调控因子，在细胞凋亡通路中起着重要的调节作用。根据结构与功能不同，Bcl-2蛋白家族可分为抗凋亡家族蛋白和促凋亡家族蛋白。在正常的细胞中，促凋亡家族蛋白和抗凋亡家族蛋白异二聚体化，使细胞保持正常生长状态，既避免细胞过早凋亡又避免细胞因不发生凋亡而转化为肿瘤细胞。但在一些恶性肿瘤中，Bcl-2蛋白家族的抗凋亡蛋白成员过度表达，导致一般的化疗手段无法使肿瘤细胞发生凋亡，从而影响肿瘤的治疗效果，产生耐药性。因此，针对Bcl-2蛋白家族抗凋亡成员的抑制剂研究已经成为近年来抗肿瘤药物的研究热点。
目前在哺乳动物体内已经发现超过25个Bcl-2蛋白家族成员，这些成员根据结构与功能不同可分为两个亚族：抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白。抗凋亡蛋白成员包括Bcl-2，Bcl-xl，Mcl-1，Al，Bcl-w，Bcl-RAMBO和Boo。该亚族成员能够抑制细胞凋亡，大部分(除了Mcl-1和A1)都含有四个Bcl-2同源区(Bcl-2 homology,BH)BH1-BH4。促凋亡蛋白又可分为两个亚家族：含有2-3个保守区域的多区域促凋亡蛋白亚家族(Bak、Bax等)和只含有一个保守BH3区域的BH3-only蛋白(Bad、Bik、Bid、Bim、Hrk、Bmf、Puma、Noxa等)。
Bcl-2蛋白家族是细胞凋亡线粒体途径中关键调节因子，通过调节线粒体膜通透性调控细胞凋亡。正常情况下，Bax和Bak与Bcl-2蛋白家族抗凋亡成员(如Bcl-2、Mcl-1等)相互结合以非活性的单体形式存在。非活性的Bax主要分布于细胞质中，而Bak则主要镶嵌在线粒体外膜上。当细胞接受凋亡信号之后，一些BH3-only蛋白(如Bad、Noxa等)竞争性与Bcl-2抗凋亡成员的疏水结合域相结合，释放出被抑制的Bax和Bak蛋白。此后，另一些BH3-only蛋白(如Bim、Puma等)可直接与Bax和Bak蛋白相互作用使其活化。活化的Bax和Bak蛋白在线粒体外膜上发生寡聚化，使细胞通透性孔打开，膜通透性增大而释放细胞色素c等细胞凋亡因子，诱导细胞凋亡。因此，抑制肿瘤细胞的Bcl-2蛋白家族抗凋亡成员可促进肿瘤细胞的凋亡。
目前，约有五类Bcl-2抑制剂，其中大部分已处于临床研究例如Gossypol处于I/II期临床等，但是经过临床研究发现，由于细胞凋亡途径的多样性，部分抑制剂仍无法使肿瘤细胞发生凋亡，从而影响肿瘤的治疗效果，产生耐药性，从而导致该类药物的临床应用受到很大限制。因此，发展新型有效的Bcl-2抑制剂是抗肿瘤药物研究中具有挑战性和研究价值的课题。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂，本发明还提供该化合物的制备方法。本发明进一步还提供该化合物的药物组合物及医药用途。
本发明的技术方案如下：
一、取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂
一种取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂，是具有通式I或通式II结构的化合物，以及其立体异构体、药学上可接受的盐，
通式I中，R1是异丙基或-A-R6；
其中，A是CH2、NH、O、S原子，优选为CH2；R6为任选取代的芳基，杂芳基；R6优选为任选取代的C5-C15芳基，以及含有5或6个环原子的单杂环芳基，或具有8至15个环原子的双杂环芳基，杂环芳基含有1-4个杂原子，所述杂原子独立地选自O、S、N或氧化的S或N；碳原子或氮原子是杂芳环结构的连接点，保持稳定的芳环；
基团或者取代基选自羟基，卤素，硝基，氰基，胍基，羧基，卤C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C6-C10芳基，芳烷氧基，含有1-2个杂原子的环原子数为5-10的杂芳基，1-3个上述基团或取代基在任何可及的位置连接以产生稳定的化合物。
通式I中，R2为任选取代的芳基，杂芳基；R2优选为任选取代的C5-C15芳基，以及含有5或6个环原子的单杂环芳基，或具有8至15个环原子的双杂环芳基，杂环芳基含有1-4个杂原子，所述杂原子独立地选自O、S、N或氧化的S或N；碳原子或氮原子是杂芳环结构的连接点，保持稳定的芳环；
基团或者取代基选自羟基，卤素，硝基，氰基，胍基，羧基，卤C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C6-C10芳基，芳烷氧基，含有1-2个杂原子的环原子数为5-10的杂芳基，1-3个上述基团或取代基在任何可及的位置连接以产生稳定的化合物。
通式I中，R3是氢或甲氧基；
通式I中，R4是氢或甲基；
通式I中，R5是溴或任选取代的芳基，杂芳基；R5优选为任选取代的C5-C15芳基，以及含有5或6个环原子的单杂环芳基，或具有8至15个环原子的双杂环芳基，杂环芳基含有1-4个杂原子，所述杂原子独立地选自O、S、N或氧化的S或N；碳原子或氮原子是杂芳环结构的连接点，保持稳定的芳环；
基团或者取代基选自羟基，卤素，硝基，氰基，胍基，羧基，卤C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷基，C3-C8环烷基，C6-C10芳基，芳烷氧基，含有1-2个杂原子的环原子数为5-10的杂芳基，1-3个上述基团或取代基在任何可及的位置连接以产生稳定的化合物。
通式I中，X1不含或为—CH2—；
通式I中，X2为羰基或—CH2—；
通式II中，R1与R5同通式I中所述。
根据本发明优选的，通式I中，
R1是异丙基或-CH2-R6；其中，R6是3-吲哚基和含有1-2个取代基或没有取代的苯基、萘基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、中氮茚基、喹唑啉基、嘌呤基、吲哚基、喹啉基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、噻唑基、苯并噻唑基、噻吩基、苯并[b]噻吩基、异恶唑基、恶噻二唑基、异噻唑基、四氮唑基、咪唑基、三嗪基、呋喃基、苯并呋喃基和吲哚基；取代基是羟基、卤素、硝基、氰基、胍基、羧基，卤C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C5-C10芳基，取代的芳烷氧基，含有1-2个杂原子的环原子数为5-10的杂芳基；
R2是被1-2个羟基、卤素、硝基、氰基取代基取代或没有取代的吗啉基团、哌嗪基团连接的芳香基团Ar，―NH―R4；Ar是含有1个取代基或没有取代基的苯基、萘基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、中氮茚基、喹唑啉基、嘌呤基、吲哚基、喹啉基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、噻唑基、苯并噻唑基、噻吩基、苯并[b]噻吩基、异恶唑基、恶噻二唑基、异噻唑基、四氮唑基、咪唑基、三嗪基、呋喃基、苯并呋喃基和吲哚基；R4是1-2个羟基、卤素、硝基、氰基取代基取代或没有取代的C1-C6烷基，以及C1-C3亚烷基连接的上述芳香基团Ar；取代基是羟基、卤素、硝基、氰基、胍基、羧基，卤C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C5-C10芳基，含有1-2个杂原子的环原子数为5-10的杂芳基；
R3是氢或甲氧基；
R4是氢或甲基；
R5是被1-2个羟基、卤素、硝基、氰基取代基取代或没有取代的吗啉基团、哌嗪基团连接的芳香基团Ar，―NH―R4；Ar是含有1个取代基或没有取代基的苯基、萘基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、中氮茚基、喹唑啉基、嘌呤基、吲哚基、喹啉基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、噻唑基、苯并噻唑基、噻吩基、苯并[b]噻吩基、异恶唑基、恶噻二唑基、异噻唑基、四氮唑基、咪唑基、三嗪基、呋喃基、苯并呋喃基和吲哚基；R4是1-2个羟基、卤素、硝基、氰基取代基取代或没有取代的C1-C6烷基，以及C1-C3亚烷基连接的上述芳香基团Ar；取代基是羟基、卤素、硝基、氰基、胍基、羧基，卤C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C5-C10芳基，含有1-2个杂原子的环原子数为5-10的杂芳基；
X1不含或为—CH2—；
X2为羰基或—CH2—；
其中，当R3为甲氧基时，R4为甲基，X1为—CH2—，X2为羰基；当R3为氢时，R4为氢，X1不含，X2为—CH2—；
通式II中，R1与R5同通式I中所述。
根据本发明，进一步优选的，上述通式I或通式II化合物是下列之一：
(R)-1-(4-溴苄基)-N-(1-(4-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(9)、
(R)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(10)、
(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯-[1，1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(11)、
(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(12)、
(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(1-(4-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(13)、
(S)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)甲基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(14)、
(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(15)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(16)、
(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(17)、
(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(18)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(19)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(20)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(21)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(22)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(23)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(24)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(25)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(26)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(27)、
(S)-3-(4-(苄氧基)苯基)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯羰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰氨基丙酰胺(28)、
(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-氧代-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(29)、
(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(30)、
(S)-3-(4-溴苯基)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯基羰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰氨基丙酰胺(31)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(32)、
(S)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯基羰基)-5-甲氧基-2-甲基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰基)-3-(4-(4-硝基苄氧基)苯基)丙酰胺(33)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(34)、
(S)-2-(1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰基)-3-苯基丙酸(35)、
(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(4-甲基-1-氧代-1-(苯磺酰基)戊-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(36)、
(S)-N-(3-(1H-吲哚-3-基)-1-(4-甲基苯磺酰基)-1-氨基丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(37)。
以上优选化合物，后面的括号内的编号是对应于下面反应路线及表1中的化合物结构的编号。
发明详述
本文中所用的术语和定义含义如下：
“芳基”是指是指含有环系统的芳烃，如苯基或萘基，其可选地与环烷基稠合，所述环烷基优选地具有5-7个环原子，更优选具有5-6个环原子。优选的芳基含有5-15个碳原子。
“杂芳基”是芳族杂环，可以是单环或双环基团。它们含有一个或多个，优选1-4个、更优选1-3个、甚至更优选1-2个杂原子，所述杂原子独立地选自O、S和N。杂芳基包括氧化的S或N，如亚磺酰基、磺酰基和三环氮的N氧化物。碳原子或氮原子是杂芳环结构的连接点，由此保持稳定的芳环。杂芳基的例子包括但不限于吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、中氮茚基、苯并[b]噻吩基、喹唑啉基、嘌呤基、吲哚基、喹啉基、嘧啶基、吡咯基、恶唑基、噻唑基、噻吩基、异恶唑基、恶噻二唑基、异噻唑基、四唑基、咪唑基、三嗪基、呋喃基、苯并呋喃基和吲哚基。
“芳基烷基”是指C1-C6亚烷基连接的芳基。
“杂芳基烷基”是指C1-C6亚烷基连接的杂芳基。
“芳基烯基”是指C1-C6烯基连接的芳基。
“杂芳基烯基”是指C1-C6烯基连接的杂芳基。
“烷基(Alkyl)”，单独地或联合地，是指衍生于烷烃的基团，含有1至20个碳原子，优选地含有1至12个碳原子(如果没有特别指明)。其为直链烷基或支链烷基，并且包括含有环烷基部分或者被环烷基部分中断的直链烷基或支链烷基。直链烷基或支链烷基在任何可及部位(available point)连接以产生稳定的化合物。其示例包括但不限于，4-(异丙基)-环己基乙基或2-甲基-环丙基戊基。在许多实施方案中，烷基是含有1至15个碳原子、1至8个碳原子、1至6个碳原子、1至4个碳原子或1至2个碳原子的直链烷基或支链烷基，如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基和类似烷基。
“亚烷基”是二价的烷烃衍生的碳原子基团，是直链或支链的，在其中，从相同的碳原子或不同的碳原子移去两个氢原子。亚烷基的例子包括但不限于-CH2-、-CH2CH2-和-CH2CH(CH3)-。
“烯基(Alkenyl)”，单独或联合地，文中所指为直链烃或支链烃，其含有2-6个，优选,为2-4个碳原子，并且含有1-2个，优选为一个碳碳双键。烯基的例子包括但不仅限于乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基。
“环烷基”是取代或未取代的，饱和或不饱和的环状基团，其含有碳原子和/或一个或多个杂原子。该环可以是单环或稠环，桥环或螺环的环系。每个环中的环原子数是3-8个、更优选3-6个，如环丙基、环戊基、环己基、金刚烷基和类似基团。
“烷氧基”表示基团–O–烷基。
“卤素”单独地或联合地，是指所有卤素，即氯(Cl)、氟(F)、溴(Br)或碘(I)。
“药学上可接受的盐”是指通式I化合物具有疗效且无毒的盐形式。其可由任一酸性基团(如羧基)形成阴离子盐，或由任一碱性基团(如氨基)形成阳离子盐。本领域已知许多这样的盐。在任何酸性基团(如羧基)上形成的阳离子盐，或是在任何碱性基团(如氨基)上形成的阴离子盐。这些盐有许多是本领域已知的，如阳离子盐包括碱金属(如钠和钾)和碱土金属(如镁和钙)的盐以及有机盐(如铵盐)。还可通过使用相应的酸处理碱性形式的I方便地获得阴离子盐，这样的酸包括无机酸如硫酸、硝酸、磷酸等；或有机酸如乙酸、丙酸、羟基乙酸、2-羟基丙酸、2-氧代丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、2-羟基-1,2,3-丙三酸、甲磺酸、乙磺酸、苯甲磺酸、4-甲基苯磺酸、环己基亚磺酸、2-羟基苯甲酸、4-氨基-2-羟基苯甲酸等。这些盐是熟练技术人员熟知的，熟练的技术人员可制备本领域知识所提供的任何盐。此外，熟练技术人员可根据溶解度、稳定性、容易制剂等因素取某种盐而舍另一种盐。这些盐的测定和最优化在熟练技术人员的经验范围内。
本文所用的“立体异构体”定义了本发明化合物或其生理上的衍生物所有可能的立体异构体的形式。除非另有指示，本发明化合物的化学命名包括所有可能的立体化学形式的混合物，所属混合物包含基本结构分子的所有非对映体和对映体，以及基本纯净的本发明化合物的单个异构体形式，即其中含有低于10％，优选低于5％，特别是低于2％，最优选低于1％的其它异构体。本发明类肽化合物各种立体异构体形式均明显包含于本发明的范围内。
通式I化合物还可以其它被保护的形式或衍生物的形式存在，这些形式对本领域技术人员而言是显而易见的，均应该包含于本发明的范围内。
如上所述的取代基自身还可被一个或多个取代基取代。这样的取代基包括在C.Hansch和A.Leo,Substituent Constants for Correlation Analysis in Chemistryand Biology(1979)中列出的那些取代基。优选的取代基包括烷基，烯基，烷氧基，羟基，氧基，硝基，氨基，氨基烷基(如氨甲基等)，氰基，卤素，羧基，羰基烷氧基(如羰基乙氧基等)，硫基，芳基，环烷基，杂芳基，杂环烷基(如哌啶基，吗啉基，吡咯基等)，亚氨基，羟烷基，芳基氧基，芳基烷基及其结合。
“药物组合物(pharmaceutical composition)”是指含有治疗上显著量的活性药剂的制备物，其以适于给予患者的形式被制备。因此，所述制备物不含有这样量的任何一种组分或多种组分，即，适当谨慎的医疗实施者发现所述制备物不适于给予普通对象。在许多情况下，这种药物组合物是无菌制备物。
室温是指实验操作所处的环境温度，控制在25～30℃范围内。
二、取代3-吲哚类Bcl-2抑制剂的制备方法
取代3-吲哚类Bcl-2抑制剂的制备方法，为以下四种合成路线之一：
合成路线一：3-吲哚甲酸甲酯与对溴溴卞反应得到中间体2A，2A与各种取代的苯硼酸通过铃木反应得到中间体3B-3E，然后3B-3E在碱性条件下脱甲酯得到中间体4B-4E，各种取代的氨基酸5A-5G，与各种取代的苯磺酰胺通过酰胺缩合反应得到中间体7A-7K，然后脱Boc得到8A-8K，最后重要中间体4B-4E与8A-8K通过酰胺缩合反应得到目标产物10-27，29-30，32，34，36-37。
合成路线一：
合成路线二：各种取代的氨基酸5A-5G，与各种取代的苯磺酰胺6A-6D通过酰胺缩合反应得到中间体7A-7K，然后脱Boc得到8A-8K，最后吲哚美辛1H与8A-8K通过酰胺缩合反应得到目标产物28，31，33。
合成路线二：
合成路线三：3-吲哚甲酸甲酯与对溴溴卞反应得到中间体2A，2A与各种取代的苯硼酸通过铃木反应得到中间体3B-3E，然后中间体3B-3E在碱性条件下脱甲酯得到中间体4B-4E，4B-4E与各种氨基酸甲酯盐酸盐反应得到中间体5K，5K在碱性环境下脱甲酯得到目标产物35。
合成路线三：
合成路线四：3-吲哚甲酸甲酯与对溴溴卞反应得到中间体2A，然后在碱性条件下脱甲酯得到重要中间体4A，各种取代的氨基酸5A-5G与各种取代的苯磺酰胺通过酰胺缩合反应得到中间体7A-7K，然后脱Boc得到8A-8K，最后重要中间体4A与8A通过酰胺缩合反应得到目标产物9。
合成路线四：
其中，R1-R5的定义同上通式I所述；
试剂和条件：a)碳酸钾，二甲基亚砜，对溴溴卞，30℃；b)醋酸钯，三苯基膦，各种取代的苯硼酸，80℃；c)甲醇，氢氧化钠，浓盐酸，四氢呋喃；d)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N-二异丙基乙胺，二氯甲烷，0℃–室温；e)乙酸乙酯饱和氯化氢；f)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N-二异丙基乙胺，二氯甲烷，0℃–室温；g)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N-二异丙基乙胺，二氯甲烷，0℃–室温；h)甲醇，氢氧化钠，浓盐酸，四氢呋喃。
所述的氨基酸甲酯盐酸盐是指亮氨酸甲酯盐酸盐；各种取代的苯硼酸是指苯硼酸、对甲基苯硼酸、对氯苯硼酸、对甲氧基苯硼酸。
合成路线中目标化合物的结构式如下表1所示：
表1 目标化合物的结构式
所述化合物的具体操作步骤将在实施例中将加以详细说明。
本领域技术人员可以对上述步骤进行变动以提高收率，他们可据本领域的基本知识确定合成的路线，如选择反应物，溶剂和温度，可以通过使用各种常规保护基以避免副反应的发生从而提高收率。这些常规的保护方法可参见例如T.Greene,Protecting Groupsin Organic Synthesis.
三、取代3-吲哚类Bcl-2抑制剂的应用
本发明还提供了该系列化合物在制备预防或治疗因Bcl-2蛋白表达异常导致的相关哺乳动物疾病药物中的应用。所述的与Bcl-2蛋白异常表达相关的哺乳动物疾病包括癌症、神经变性疾病、病毒感染、炎症、白血病、疟疾和糖尿病等。
此外，本发明还包括一种适于口服给予哺乳动物的药物组合物，包含上述通式I和II的任一化合物，和药学上可接受载体，任选包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。
此外，本发明还包括一种适于胃肠外给予哺乳动物的药物组合物，包含上述通式I和II的任一化合物，和药学上可接受载体，任选包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。
进行抑制酶活性和细胞活性两方面测试评价化合物在体外的生物活性。
体外抑酶实验中，利用了荧光偏振实验测定方法，在具体测量体系中，采用5-FAM标记的Bid-BH3多肽为荧光标记分子，该分子能够与Bcl-2家族蛋白(Bcl-xl，Bcl-2和Mcl-1)发生特异性结合，其解离常数(Kd)在30-60nM左右，二者结合后产生较高的极化值。如果待测化合物也能够与这些Bcl-2抗凋亡蛋白特异性结合，则会竞争性的抑制荧光标记多肽与这些蛋白的结合，从而导致极化值降低。将加入待测化合物产生的极化值与阴性对照和阳性对照比较，如果极化值相对阴性对照的降低水平达到阴性与阳性值之差的一半左右，则认为待测化合物有明显活性，可以进一步准确测定其IC50值，进而导出其竞争性抑制常数Ki。
化合物的细胞活性的测试使用MTT检测方法，肿瘤细胞悬液(人乳腺癌细胞株MDA-MB-231，前列腺癌细胞株PC-3，慢性粒细胞白血病细胞株K562)分别接种于96孔板，每孔中加入含不同浓度化合物的培养基，经孵育后，用MTT染色，继续孵育后，于酶标仪上在570nm处测定每孔的吸光度OD值，计算出细胞生长抑制率，从而确定化合物的活性。
体外抑酶实验表明，本发明中的部分化合物对于Bcl-2蛋白有较强的抑制活性，37、33、10等活性与阳性对照WL-276相当，而化合物12抑制活性则优于WL-276；同时，体外抗肿瘤细胞增殖的试验中，化合物37、33、10和12对测试的所有肿瘤细胞均有抑制活性，尤其是化合物37，对实验的所有肿瘤细胞株均有显著抑制，活性与阳性对照药棉酚相当，有很大的开发前景，并可用于指导发现新型Bcl-2蛋白抑制剂。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
实施例1. 1-(4-溴苄基)-1H-吲哚-3-甲酸甲酯(2A)的合成
化合物0.7g 1H-吲哚-3-甲酸甲酯1A溶于20mL DMSO中，加入1.1g K2CO3置于30℃下搅拌，缓慢滴入1.88g对溴溴卞的DMSO溶液，反应过夜。反应结束后加入5倍体积的水，后用乙酸乙酯萃取，硫酸镁干燥，浓缩，柱层析(P/E＝30：1)得到白色产物(1.1g，80％)。m.p.117-119℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ8.58(s,1H),8.03-8.01(m,1H),7.72-7.41(m,3H),7.24-7.20(m,4H),5.50(s,2H),3.81(s,3H).
1–((4'-氯–[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酸甲酯(3B)的合成
将化合物0.69g 2A，0.004g醋酸钯，0.016g三苯基膦，0.25g碳酸钠，0.33g对氯苯硼酸置于二颈瓶中，加25mL DMSO，用N2保护抽真空后于80℃下搅拌，过夜后反应完毕，加入5倍体积的水，后用乙酸乙酯萃取，柠檬酸洗，硫酸镁干燥，浓缩，用乙醇重结晶。得到白色固体(0.7g,93％),m.p.130-132℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ8.38(s,1H),8.05-8.02(m,1H),7.66-7.57(m,5H),7.51-7.47(m,2H),7.39(d,J＝8.0Hz,2H),7.26-7.20(m,2H),5.56(s,2H),3.82(s,3H).
化合物3C-3E参照3B的方法进行合成。
(S)-叔丁基(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)氨基甲酸酯(7B)的合成
0.8g Boc-L-苯丙氨酸5B，溶于30mL二氯甲烷中，冰浴下加入0.78g DIEA，搅拌10分钟后加入1.37g HATU，搅拌半小时后加入0.78g 3-硝基-4-氯苯磺酰胺，转为常温反应过夜，反应完毕，将二氯甲烷旋除，用乙酸乙酯提取，柠檬酸洗，无水硫酸镁干燥，浓缩后柱层析(P/E＝6:1)得到白色固体(0.8g,55％)，m.p.147-150℃；1H-NMR(300MHz,CDCl3),δ9.50(s,1H),8.48(d,J＝2.1Hz,1H),8.19(dd,J1＝8.4Hz,J2＝2.1Hz,1H),7.73(d,J＝8.4Hz,1H),7.26-7.28(m,3H),7.07-7.10(m,2H),4.81(d,J＝6.6Hz,1H),4.20-4.27(m,1H),3.07(dd,J1＝14.1Hz,J2＝6.3Hz,1H),2.96(dd,J1＝14.1Hz,J2＝7.8Hz,1H),1.40(s,9H).
化合物7A，7C-7K参照7B的方法进行合成。
(R)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(10)的合成
用乙酸乙酯饱和HCl脱去化合物7B的BOC基团得到7B化合物的盐酸盐(8B)备用，化合物3B溶于少量THF，加入NaOH液(2mol/L)，回流一夜脱去甲酯，反应完毕，旋掉THF，用浓盐酸调PH到酸性，析出白色固体，过滤得粗品(4B)备用。将化合物0.36g 4B溶于30mL二氯甲烷中，冰浴下加入0.39g DIEA，十分钟后加入0.46g HATU，转为常温搅拌，半小时后加入0.46g8B，搅拌过夜，反应完毕，旋除二氯甲烷，用乙酸乙酯萃取，柠檬酸洗，无水硫酸镁干燥，浓缩后柱层析(P/E＝3:1)得淡黄色固体(0.6g,95％)，m.p.136-138℃；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6),δ12.89(s,1H),8.53(d,J＝2.1Hz,1H),8.18-8.12(m,3H),8.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(d,J＝7.2Hz,1H),7.67-7.62(m,4H),7.56-7.48(m,3H),7.33-7.09(m,10Hz),5.61-5.46(m,2H),4.69-4.62(m,1H),3.06-2.86(m,2H).
化合物11-27，29-30，32，34，36-37参照10的方法进行合成。
实施例2.(S)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯基羰基)-5-甲氧基-2-甲基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰基)-3-(4-(4-硝基苄氧基)苯基)丙酰胺(33)的合成
将化合物0.36g 4H溶于30mL二氯甲烷中，冰浴下加入0.39g DIEA，十分钟后加入0.46g HATU，转为常温搅拌，半小时后加入0.46g 8F，搅拌过夜，反应完毕，旋除二氯甲烷，用乙酸乙酯萃取，柠檬酸洗，无水硫酸镁干燥，浓缩后柱层析(P/E＝1:1)得淡黄色固体(0.25g,23％)，m.p.122-124℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.83(s,1H),8.53(d,J＝2.0Hz,1H),8.34(d,J＝6.8Hz,1H),8.26(d,J＝6.8Hz,1H),8.13(dd,J1＝8.8Hz,J2＝2.0Hz,2H),7.80(d,J＝8.4Hz),7.72-7.59(m,5H),7.05(d,J＝8.4Hz,1H),6.92(d,J＝8.4Hz,1H),6.76-6.67(m,3H),5.33-5.13(m,2H),4.46-4.41(m,1H),3.90(s,3H),3.53-3.45(m,3H),2.91(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.4Hz,1H),2.70(dd,J1＝13.8Hz J2＝9.6Hz,1H),2.08(s,3H).
化合物28，31参照33的方法进行合成，原料合成同实施例1。
实施例3.(S)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(1-(甲氧基羰基)-3-苯基丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(5K)的合成
0.72g化合物4C，溶于60mL二氯甲烷中，冰浴下加入0.78g DIEA，十分钟后加入0.92g HATU，转为常温搅拌，半小时后加入0.47g L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐，搅拌过夜，反应完毕，旋掉二氯甲烷，用乙酸乙酯萃取，柠檬酸洗，无水硫酸镁干燥，浓缩后柱层析(P/E＝1:1)得白色固体5K(0.36g,35％)，m.p.160-162℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ8.33(d,J＝8.0Hz,2H),8.22(s,1H),8.07(d,J＝8.0Hz,2H),7.60-7.56(m,5H),7.31-7.10(m,9H),7.01(d,J＝8.0Hz,2H),5.54-5.46(m,2H),4.71-4.65(m,1H),3.78(s,3H),3.62(s,3H),3.18-3.05(s,2H).
(S)-2-(1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰基)-3-苯基丙酸(35)的合成
化合物0.35g 5K溶于10mL THF中，加入0.11g氢氧化钠溶液，回流4h后反应完毕，旋除THF，用浓盐酸调PH到1-2，过滤得粗品，后用乙醇与水重结晶得到白色固体35(0.2g,57％)，m.p.152-154℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.68(s,1H),8.23(s,1H),8.17(d,J＝8.0Hz,1H),8.08(d,J＝8.0Hz,1H),7.60-7.56(m,5H),7.38-7.10(m,9H),7.02(d,J＝12.0Hz,2H),5.55-5.33(m,2H),4.68-4,63(m,1H),3.78(s,3H),3.20(dd,J1＝12.0Hz,J2＝4.0Hz,1H),3.08(dd,J1＝12.0Hz,J2＝8.0Hz,1H).
原料4C合成同实施例1。
实施例4.(R)-1-(4-溴苄基)-N-(1-(4-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(9)的合成
化合物2A溶于THF中，加入氢氧化钠溶液，回流4h后反应完毕，旋除THF，用浓盐酸调PH到1-2，过滤得粗品，后用乙醇与水重结晶得到白色固体，得到的0.39g白色固体溶于40mL二氯甲烷中，冰浴下加入0.46g DIEA，十分钟后加入0.54g HATU，转为常温搅拌，半小时后加入0.58g 8A，搅拌过夜，反应完毕，旋掉二氯甲烷，用乙酸乙酯萃取，柠檬酸洗，无水硫酸镁干燥，浓缩后柱层析(P/E＝4:1)得白色固体9(0.11g,13％),m.p.130-133℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.85(s,1H),8.66(s,1H),8.50(s,1H),8.43-8.40(m,2H),8.17-7.95(m,5H),7.62-7.47(m,3H),7.37-7.07(m,5H),6.76(d,J＝8.7Hz,1H),6.78(d,J＝8.7Hz,1H),5.59-5.39(m,2H),4.66-4.58(m,1H),3.89-3.73(m,2H),2.97-2.72(m,2H),1.74-1.60(m,2H),0.97-0.83(m,1H).
原料8A[(S)-2-氨基-N-((4-硝基苯基)磺酰基)-3-(4-丙氧基苯基)丙酰胺盐酸盐]合成同实施例1。
实施例5.(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯-[1，1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(11)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率12％；m.p.184–185℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.78(s,1H),8.55(s,1H),8.18-8.16(m,3H),8.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.67(t,J＝7.2Hz,4H),7.57-7.49(m,3H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.20-7.10(m,4H),5.56-5.47(m,2H),4.04-4.02(m,1H),3.03(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.8Hz,1H),2.90(dd,J1＝13.8Hz,J2＝4.8Hz,1H).
实施例6.(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(12)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率31％；m.p.136–138℃；1H–NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.55(s,1H),8.18-8.12(m,2H),8.01(d,J＝7.6Hz,1H),7.94(d,J＝7.6Hz,1H),7.73-7.49(m,10H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.31-7.10(m,9H),5.56-5.47(m,2H),4.73-4.68(m,1H),3.02(dd,J1＝13.2Hz,J2＝4.0Hz,1H),2.86(dd,J1＝13.8Hz,J2＝4.8Hz,1H).
实施例7.(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(1-(4-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(13)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率27％；m.p.170–172℃；1H–NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.84(s,1H),8.42(d,J＝8.0Hz,2H),8.18(m,4H),7.99(d,J＝7.6Hz,1H),7.66(t,J＝8.0Hz,4H),7.57(d,J＝8.0Hz,2H),7.51(d,J＝8。0Hz,2H),7.32(d,J＝8。0Hz,2H),4.63-4.60(m,1H),3.83(t,J＝8.0Hz,2H),2.96(dd,J1＝14.0Hz,J2＝4.4Hz,1H),2.84(dd,J1＝14.0Hz,J2＝8.0Hz,1H),1.67(m,2H),0.95(t,J＝8.0Hz,3H).
实施例8.(S)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(14)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率31％；m.p.204–206℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.54(s,1H),8.18-8.11(m,2H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.73-7.54(m,8H),7.30-7.11(m,9H),7.01(d,J＝8.8Hz,2H),5.53-5.43(m,2H),4.73-4.67(m,1H),3.78(s,3H),3.02(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.4Hz,1H),2.90(dd,J1＝13.8Hz,J2＝10.4Hz,1H).
实施例9.(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(15)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率12％；m.p.120-123℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.93(s,1H),8.52(s,1H),8.18-8.13(m,2H),8.00-7.97(m,3H),7.65-7.10(m,17H),7.83(d,J＝8.0Hz,2H),5.55-5.47(m,2H),5.00(s,2H),4.58-4.57(m,1H),2.99(dd,J1＝10.0Hz,J2＝8.8Hz,1H),2.90(dd,J1＝10.0Hz,J2＝9.6Hz,1H).
实施例10.(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(16)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率6％；m.p.130-134℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.63(s,1H),8.55(d,J＝2.0Hz,1H),8.18-7.96(m,5H),7.67(t,J＝9.6Hz,4H),7.57-7.48(m,3H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.20-7.10(m,4H),6.75(d,J＝8.8Hz,2H),5.56-5.47(m,2H),4.62-4.56(m,1H),3.84(t,J＝8.4Hz,2H),2.97(dd,J1＝13.6Hz,J2＝5.2Hz,1H),2.90(dd,J1＝13.8Hz,J2＝4.0Hz,1H),1.69-1.64(m,2H),0.98-0.77(m,3H).
实施例11.(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(17)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率18％；m.p.119-121℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.91(s,1H),8.55(s,1H),8.18-8.15(m,3H),8.04(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(t,J＝8.0Hz,5H),7.41-7.12(m,11H),6.99(d,J＝8.8Hz,2H),6.86(d,J＝8.8Hz,2H),5.53-5.45(m,2H),5.01(s,1H),4.60-4.59(m,1H),3.77(s,3H),2.98(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.8Hz,1H),2.86(dd,J1＝13.8Hz,J2＝9.6Hz,1H).
实施例12.(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(18)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率25％；m.p.180-182℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.81(s,1H),8.78(s,1H),8.23-8.11(m,3H),8.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.59(t,J＝8.0Hz,5H),7.43(d,J＝8.4Hz,2H),7.29-7.12(m,6H),7.01(d,J＝8.8Hz,2H),5.54-5.45(m,2H),4.66-4.60(m,1H),3.77(s,1H),3.03(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.8Hz,1H),2.90(dd,J1＝13.8Hz,J2＝10.5Hz,1H).
实施例13.(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(19)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率29％；m.p.164-166℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.94(s,1H),8.55(d,J＝2.0Hz,1H),8.24-8.13(m,5H),8.04(d,J＝8.8Hz,1H),7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.67(d,J＝8.8Hz,2H),7.58(t,J＝8.8Hz,5H),7.29(d,J＝8.0Hz,2H),7.58-7.54(m,5H),7.30(d,J＝8.0Hz,2H),7.22-7.10(m,4H),7.00(d,J＝8.8Hz,2H),6.70(d,J＝8.8Hz,2H),5.53-5.44(m,2H),5.19(s,1H),4.63-4.57(m,1H),3.03(s,3H),3.00(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.8Hz,1H),2.86(dd,J1＝13.6Hz,J2＝9.6Hz,1H).
实施例14.(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(20)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率21％；m.p.120-123℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.84(s,1H),8.75(s,1H),8.20-8.13(m,3H),8.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.59-7.48(m,5H),7.29-7.10(m,9H),7.01(d,J＝8.8Hz,2H),5.53-5.32(m,2H),4.68-4.62(m,1H),3.77(s,3H),3.05(dd,J1＝13.6Hz,J2＝5.2Hz,1H),2.90(dd,J1＝13.8Hz,J2＝4.0Hz,1H).
实施例15.(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(21)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率8％；m.p.154-156℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.98(s,1H),8.55(d,J＝1.6Hz,1H),8.18-8.16(m,3H),8.04(d,J＝8.8Hz,1H),7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.59(t,J＝5.6Hz,5H),7.29(d,J＝8.0Hz,2H),7.20-7.10(m,4H),7.00(d,J＝8.8Hz,2H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),5.53-5.45(m,2H),4.61-4.56(m,1H),3.84-3.78(m,5H),2.97(dd,J1＝13.6Hz,J2＝5.2Hz,1H),2.90(dd,J1＝13.8Hz,J2＝5.2Hz,1H),1,71-1.63(m,2H),0.95(t,J＝5.8Hz,3H).
实施例16.(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯基磺酰)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(22)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率49％；m.p.120-122℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.55(s,1H),8.18(s,1H),8.12(d,J＝8.0Hz,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.73-7.55(m,8H),7.46(t,J＝7.2Hz,2H),7.37-7.10(m,12H),5.56-5.46(m,2H),4.73-4.67(m,1H),3.03(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.4Hz,1H),2.86(dd,J1＝13.8Hz,J2＝10.4Hz,1H).
实施例17.(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(23)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率29％；m.p.150-153℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.86(s,1H),8.54(d,J＝2.0Hz,1H),8.21-8.15(m,3H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.64-7.55(m,5H),7.46(t,J＝8.0Hz,2H),7.37-7.10(m,10H),5.56-5.47(m,2H),4.68-4.63(m,1H),3.05(dd,J1＝13.6Hz,J2＝5.2Hz,1H),2.90(dd,J1＝13.8Hz,J2＝10.0Hz,1H).
实施例18.(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(24)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率24％；m.p.174-176℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.91(s,1H),8.56(d,J＝2.0Hz,1H),8.24-8.16(m,5H),8.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.69-7.56(m,7H),7.45(t,J＝7.2Hz,2H),7.36-7.12(m,7H),6.90(d,J＝8.8Hz,2H),5.56-5.32(m,2H),5.01(s,2H),4.63-4.58(m,1H),3.00(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.8Hz,1H),2.87(dd,J1＝13.8Hz,J2＝4.0Hz,1H).
实施例19.(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(25)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率19％；m.p.134-136℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.88(s,1H),8.56(d,J＝2.0Hz,1H),8.20-8.16(m,3H),8.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,1H),7.64-7.56(m,5H),7.43-7.05(m,14H),6.87(d,J＝8.4Hz,2H),5.56-5.47(m,2H),5.02(s,2H),4.68-4.58(m,1H),2.99(dd,J1＝14.0Hz,J2＝5.2Hz,1H),2.86(dd,J1＝14.0Hz,J2＝10.0Hz,1H).
实施例20.(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(26)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率34％；m.p.179-181℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.99(s,1H),8.55(d,J＝1.6Hz,1H),8.24-8.16(m,5H),8.04(d,J＝8.8Hz,1H),7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.68-7.62(m,6H),7.57(t,J＝8.8Hz,1H),7.53-7.46(m,2H),7.32(d,J＝8.4Hz,2H),7.22-7.10(m,6H),6.89(d,J＝8.8Hz,2H),5.56-5.47(m,2H),5.19(s,2H),4.63-4.57(m,1H),3.00(dd,J1＝13.6Hz,J2＝5.2Hz,1H),2.87(dd,J1＝13.8Hz,J2＝10.0Hz,1H).
实施例21.(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(27)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率9％；m.p.166-168℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.89(s,1H),8.54(d,J＝1.6Hz,1H),8.19-8.13(m,3H),8.04(d,J＝8.8Hz,1H),7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.64-7.56(m,5H),7.44-7.30(m,5H),7.20-7.10(m,4H),6.75(d,J＝8.4Hz,2H),5.56-5.47(m,2H),4.61-4.56(m,1H),3.84(t,J＝7.2Hz,2H),2.98(dd,J1＝13.6Hz,J2＝5.2Hz,1H),2.8(dd,J1＝13.8Hz,J2＝9.6Hz,1H),1.71-1.62(m,2H),0.95-0.85(m,3H).
实施例22.(S)-3-(4-(苄基)苯基)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯羰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰氨基丙酰胺(28)的合成
中间体制备方法如实施例1。目标化合物制备方法如实施例2。产率13％；m.p.122-124℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.88(s,1H),8.54(d,J＝2.0Hz,1H),8.39(d,J＝6.4Hz,1H),8.20-8.11(m,3H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),8.14(dd,J1＝8.4Hz,J2＝2.0Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.66-7.61(m,3H),7.42-7.34(m,5H),7.05-7.02(m,3H),6.94(d,J＝8.8Hz,1H),6.74-6.68(m,3H),5.01-4.95(m,1H),4.46-4.41(m,1H),3.73-3.71(m,3H),3.54-3.50(m,3H),2.90(dd,J1＝14.0Hz,J2＝4.8Hz,1H),2.70(dd,J1＝13.8Hz,J2＝9.2Hz,1H),2.09(s,3H).
实施例23.(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-氧代-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(29)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率9％；m.p.134-136℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.55(s,1H),8.16(s,2H),8.01(d,J＝3.2Hz,1H),7.94(d,J＝3.2Hz,1H),7.81(d,J＝3.6Hz,1H),7.71(d,J＝3.6Hz,1H),7.71-7.12(m,11H),5.56-5.47(m,2H),4.67(s,1H),3.00(d,J＝11.6Hz,1H),2.84(m,1H).
实施例24.(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(30)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率31％；m.p.145-147℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.90(s,1H),8.56(d,J＝2.0Hz,1H),8.19-8.15(m,3H),8.04-7.97(m,3H),7.61-7.50(m,5H),7.42-7.12(m,13H),7.46(t,J＝8.0Hz,2H),6.87(d,J＝8.4Hz,2H),5.54-5.46(m,2H),5.01(s,2H),4.63-4.57(m,1H),2.98(dd,J1＝13.6Hz,J2＝5.2Hz,1H),2.86(dd,J1＝13.8Hz,J2＝9.6Hz,1H),2.15(s,3H).
实施例25.(S)-3-(4-溴苯基)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯基羰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰氨基丙酰胺(31)的合成
中间体制备方法如实施例1，目标化合物制备方法如实施例2。产率10％；m.p.146-148℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ8.76(s,1H),8.42(d,J＝6.8Hz,1H),8.14-8.11(m,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.64(s,3H),7.27(d,J＝8.4Hz,1H),7.07-6.93(m,4H),7.71(dd,J1＝8.8Hz,J2＝2.4Hz,1H),4.48-4.43(m,1H),3.73(s,3H),3.52-3.45(m,3H),2.95-2.89(m,1H),2.73(dd,J1＝14.0Hz,J2＝10.0Hz,1H),2.07(s,3H).
实施例26.(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(32)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率32％；m.p.146-149℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.67(s,1H),8.55(s,1H),8.21-8.17(m,3H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.98(d,J＝8.8Hz,1H),7.64-7.56(m,5H),7.46-7.10(m,11H),5.56-5.47(m,2H),4.63(s,1H),3.04(dd,J1＝13.6Hz,J2＝4.8Hz,1H),2.90(dd,J1＝13.8Hz,J2＝10.0Hz,1H).
实施例27.(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(34)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率33％；m.p.148-150℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.91(brs,1H),10.85(s,1H),8.54(s,1H),8.19(s,1H),8.12(dd,J1＝8.0Hz,J2＝4.0Hz,2H),7.97(dd,J1＝8.0Hz,J2＝4.0Hz,2H),7.68(d,J＝8.0Hz,1H),7.62-7.48(m,5H),7.32-6.94(m,10H),5.53-5.44(m,2H),4.74-4.68(m,1H),3.78(s,3H),3.20(dd,J1＝12.0Hz,J2＝4.0Hz,1H),3.07(dd,J1＝12.0Hz,J2＝8.0Hz,1H).
实施例28.(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(4-甲基-1-氧代-1-(苯磺酰基)戊-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(36)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率8％；m.p.200-203℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.39(s,1H),8.26(s,1H),8.12(d,J＝8.0Hz,1H),8.03(d,J＝8.0Hz,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.72-7.49(m,10H),7.34(d,J＝8.0Hz,2H),7.21-7.13(m,2H),4.54-4.48(m,1H),1.64-1.38(m,2H),0.90(dd,J1＝16.0Hz,J2＝8.0Hz,6H).
实施例29.(S)-N-(3-(1H-吲哚-3-基)-1-(4-甲基苯磺酰基)-1-氨基丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(37)的合成
中间体和目标化合物制备方法如实施例1。产率22％；m.p.138-140℃；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ12.47(s,1H),10.81(s,1H),8.26(s,1H),7.99-7.96(m,1H),7.81(d,J＝8.0Hz,2H),7.74(d,J＝8.0Hz,2H),7.59-7.54(m,5H),7.40(d,J＝8.0Hz,2H),7.32-7.26(m,3H),7.17-6.97(m,7H),5.52-5.43(m,2H),4.79-4.74(m,1H),3.79(s,3H),3.16(dd,J1＝16.0Hz,J2＝4.0Hz,1H),3.01(dd,J1＝16.0Hz,J2＝8.0Hz,1H),2.38(s,3H).
以下为目标化合物活性评价实验：
实验例1、目标化合物对Bcl-2蛋白抑制试验(体外)
1.[实验试剂]N端用5-FAM进行了荧光标记的Bid-BH3多肽
(5-FAM-QEDIIRNIARHLAQVGDSMDRSIPPG)，溶于1×PBS；
测试缓冲液：1×PBS；
校正溶液：1nM fluorescein，10mM NaOH；
2.[实验仪器]TECAN Genios Pro型多功能酶标仪。
实验步骤：
(1)在测试缓冲液中加入靶蛋白和待测小分子化合物，混匀后室温避光孵育30min。再加入荧光标记的Bid BH3多肽，使各溶液的总体积均为200μL，混匀后室温避光孵育20min。
(2)将上述溶液及校正溶液各取60μL转移至黑色384孔板中(平行三组)，立即在酶标仪上进行荧光偏振的检测，以485nm为激发波长，535nm为发射波长，将校正溶液的荧光偏振值定为20mP。
(3)所有化合物首先在三个典型浓度下(1μM、10μM、50μM)进行初筛，每个化合物在同一块板上做3个复孔的平行测定，极化值的测定结果取平均值。根据阴性对照、阳性对照以及受测化合物极化值的测定结果推算抑制率。测定中通常采用的靶蛋白浓度为300～500nM，荧光标记多肽采用5-FAM-Bid-BH3多肽，阳性化合物采用Gossypol或ABT-263。如果测试结果显示化合物在50μM浓度下抑制率大于50％，而且其抑制率在测试的三个浓度下表现出明显的剂量依赖关系，则认为该化合物与靶蛋白具有特异性结合，需要进一步测定比较准确的IC50数值。
(4)对在初筛中显示出明显活性的化合物，在7个不同浓度下(1nM,10nM,100nM,1μM,10μM,50μM,100μM)进行完整结合曲线的测定。每个化合物均在同一块板上做3个复孔的平行测定，极化值测定结果取平均值。用GraphPad Prism软件处理数据和做图，得出该化合物的IC50值。
(5)根据测量中所使用的蛋白总浓度、荧光多肽的总浓度、蛋白-多肽复合物的解离常数以及检测化合物的IC50值，使用下列文献中的计算方法得出检测化合物的竞争性抑制常数Ki(Nikolovska-Coleska,Z.；et al.Development and optimization of abinding assay for the XIAP BIR3domain using fluorescence polarization.AnalBiochem.2004,332,261-273).实验结果见表2。
表2.目标化合物对Bcl-2蛋白体外抑制实验结果
a表中数值为三次试验结果的平均值。
从表中可以看出，当吲哚环上2位、5位接有取代基时对Bcl-2蛋白抑制活性有所提高，如果吲哚3位链接的氨基酸片段没有接苯磺酰胺基团则没有明显的抑酶活性。并且整体来看，引入给电子的苯磺酰胺片段，则化合物的活性会提高，例37明显好于34，14活性优于35等。化合物37活性高于阳性对照WL-276，对于进一步开发活性更高的Bcl-2蛋白抑制剂有很重要的指导意义。
实验例2.目标化合物抑制细胞增殖的活性试验(体外)
从中选取酶活性较好的4个化合物进行体外抑制癌细胞增殖的活性试验，结果见表3。
术语说明：
人乳腺癌细胞株MDA-MB-231，前列腺癌细胞株PC-3，慢性粒细胞白血病细胞株K562。
IC50：半数抑制浓度。
1.[材料]PC-3，MDA-MB-231和K562细胞株，四甲基偶氮唑蓝MTT，10％胎牛血清，96孔板
2.[方法]
细胞培养 肿瘤细胞株采用常规培养。实验时均用对数生长期细胞。
细胞生长检测(MTT法)将肿瘤细胞悬液调整至5×104/mL(悬浮细胞调整至105/mL)，分别接种于96孔板(100μL/孔)，5000个细胞/孔(悬浮细胞10000个细胞/孔)。铺板4h后，每孔中加入100μL含不同浓度化合物的培养基，每个浓度设三个复孔，不加细胞的孔读数时作空白，加细胞不加化合物的孔作化合物空白孔，棉酚作化合物阳性对照。于37℃，5％CO2中孵育48h，每孔加入10μL 0.5％的MTT染色液，继续孵育。4h后，2500rpm，离心30min，然后抛弃板孔中培养基，每孔加入150μL DMSO，37℃恒温震摇5-10min。酶标仪上于570nm处测定每孔的吸光度OD值，细胞生长抑制率按下式计算：
表3 化合物10、12、33和37的抗肿瘤细胞增殖实验结果
a表中数值为三次试验的平均值，“±”后的数值表示标准偏差
对酶活性较好的4个化合物进行MDA-MB-231、PC-3和K562三株肿瘤细胞的体外抗增殖活性实验，上表测试数据表明，测试的4个目标化合物对于实验的肿瘤细胞均有抑制作用，在体外抗肿瘤细胞增殖试验中37显示出与阳性对照棉酚相近的活性，表明取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂具有良好的开发前景，可进行深入的活性研究，开发出更有活性的化合物用于制备预防和治疗因Bcl-2蛋白表达异常导致的相关哺乳动物疾病的药物。
Claims (6)
1.一种取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂，是具有通式I或通式II结构的化合物，以及其立体异构体、药学上可接受的盐，
通式I中，
R1是异丙基或-CH2-R6；其中，R6是含有1-2取代基或无取代的苯基，取代基为羟基、卤素、硝基、氰基、胍基、羧基；R2是被1-2个羟基、卤素、硝基取代或没有取代的吗啉基团、哌嗪基团连接的芳香基团Ar；Ar选自苯基、萘基和吲哚基；
R3是氢或甲氧基；
R4是氢或甲基；
R5是被1-2个羟基、卤素、硝基取代或没有取代的吗啉基团、哌嗪基团连接的芳香基团Ar；Ar选自苯基、萘基和吲哚基；
X1不含或为—CH2—；
X2为羰基或—CH2—；
其中，当R3为甲氧基时，R4为甲基，X1为—CH2—，X2为羰基；当R3为氢时，R4为氢，X1不含，X2为—CH2—；
通式II中，R1与R5同通式I中所述。
2.取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂，其特征在于，为下列化合物之一：
(R)-1-(4-溴苄基)-N-(1-(4-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(9)、
(R)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(10)、
(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯-[1，1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(11)、
(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(12)、
(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(1-(4-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(13)、
(S)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)甲基-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(14)、
(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(15)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(16)、
(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(17)、
(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(18)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(19)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(20)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(21)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-氧代-3-苯基-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(22)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(23)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(24)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(25)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(4-((4-硝基苄基)氧基)苯基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-氯[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(26)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧代-3-(4-丙氧基苯基)丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(27)、
(S)-3-(4-(苄氧基)苯基)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯羰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰氨基丙酰胺(28)、
(S)-N-(3-(4-溴苯基)-1-氧代-1-(苯磺酰基)丙-2-基)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(29)、
(S)-N-(3-(4-(苄氧基)苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(30)、
(S)-3-(4-溴苯基)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯基羰基)-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰氨基丙酰胺(31)、
(S)-1-([1,1'-联苯]-4-基甲基)-N-(3-(4-溴苯基)-1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-1-氧丙-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(32)、
(S)-N-((4-氯-3-硝基苯基)磺酰基)-2-(2-(1-(4-氯苯基羰基)-5-甲氧基-2-甲基-2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙酰基)-3-(4-(4-硝基苄氧基)苯基)丙酰胺(33)、
(S)-N-(1-(4-氯-3-硝基苯磺酰基)-3-(1H-吲哚-3-基)-1-氧丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(34)、
(S)-2-(1-((4'-甲氧基[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰基)-3-苯基丙酸(35)、
(S)-1-((4'-氯-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-N-(4-甲基-1-氧代-1-(苯磺酰基)戊-2-基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(36)、
(S)-N-(3-(1H-吲哚-3-基)-1-(4-甲基苯磺酰基)-1-氨基丙-2-基)-1-((4'-甲氧基-[1,1'联苯基]-4-基)甲基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(37)。
3.如权利要求1-2任一所述的取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂的制备方法，其特征在于，为以下四种合成路线之一：
合成路线一：3-吲哚甲酸甲酯与对溴溴苄反应得到中间体2A，2A通过铃木反应得到中间体3B-3E，然后3B-3E在碱性条件下脱甲酯得到中间体4B-4E，5A-5G与6A-6D通过酰胺缩合反应得到中间体7A-7K，然后脱Boc得到8A-8K，最后重要中间体4B-4E与8A-8K通过酰胺缩合反应得到目标产物10-27，29-30，32，34，36-37；
合成路线一：
其中，R1、R2、R5如权利要求1中所定义；
合成路线二：5A-5G与3-硝基-4-氯取代的苯磺酰胺通过酰胺缩合反应得到中间体7A-7K，然后脱Boc得到8A-8K，最后吲哚美辛1H与8A-8K通过酰胺缩合反应得到目标产物28，31，33；
合成路线二：
合成路线三：3-吲哚甲酸甲酯与对溴溴苄反应得到中间体2A，2A与4-甲氧基取代的苯硼酸通过铃木反应得到中间体3B-3E，然后中间体3B-3E在碱性条件下脱甲酯得到中间体4B-4E，4B与苯丙氨酸甲酯盐酸盐反应得到中间体5K，5K在碱性环境下脱甲酯得到目标产物35；
合成路线三：
合成路线四：3-吲哚甲酸甲酯与对溴溴苄反应得到中间体2A，然后在碱性条件下脱甲酯得到重要中间体4A，5A与4-硝基苯磺酰胺通过酰胺缩合反应得到中间体7A，然后脱Boc得到8A，最后重要中间体4A与8A通过酰胺缩合反应得到目标产物9；
合成路线四：
其中，R1、R2如权利要求1中所定义；
试剂和条件：a)碳酸钾，二甲基亚砜，对溴溴苄，30℃；b)醋酸钯，三苯基膦，各种取代的苯硼酸，80℃；c)甲醇，氢氧化钠，浓盐酸，四氢呋喃；d)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N-二异丙基乙胺，二氯甲烷，0℃–室温；e)乙酸乙酯饱和氯化氢；f)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N-二异丙基乙胺，二氯甲烷，0℃–室温；g)2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，N,N-二异丙基乙胺，二氯甲烷，0℃–室温；h)甲醇，氢氧化钠，浓盐酸，四氢呋喃；
所述的各种取代的苯硼酸是指苯硼酸、对甲基苯硼酸、对氯苯硼酸或对甲氧基苯硼酸。
4.权利要求1-2任一所述的化合物在制备预防或治疗因Bcl-2蛋白表达异常导致的相关哺乳动物疾病药物中的应用；所述的与Bcl-2蛋白异常表达相关的哺乳动物疾病为癌症、神经变性疾病、病毒感染、炎症、疟疾或糖尿病。
5.一种适于口服给予哺乳动物的药物组合物，包含权利要求1-2任一所述的化合物和一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。
6.一种适于胃肠外给予哺乳动物的药物组合物，包含权利要求1-2任一所述的化合物和一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510702363.4A CN105198789B (zh) | 2015-10-26 | 2015-10-26 | 取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂及制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510702363.4A CN105198789B (zh) | 2015-10-26 | 2015-10-26 | 取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂及制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105198789A CN105198789A (zh) | 2015-12-30 |
| CN105198789B true CN105198789B (zh) | 2018-06-05 |
Family
ID=54946790
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510702363.4A Active CN105198789B (zh) | 2015-10-26 | 2015-10-26 | 取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂及制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105198789B (zh) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2975682A1 (en) * | 2015-02-13 | 2016-08-18 | Oxford Drug Design Limited | N-acyl-arylsulfonamide derivatives as aminoacyl-trna synthetase inhibitors |
| GB201617064D0 (en) | 2016-10-07 | 2016-11-23 | Inhibox Limited And Latvian Institute Of Organic Synthesis The | Compounds and their therapeutic use |
| CN109879790B (zh) * | 2017-12-06 | 2022-09-20 | 华东师范大学 | 以吲哚或吲哚类似物为母核结构的酰胺类小分子有机化合物、用途及其制备方法 |
| CN108251104B (zh) * | 2018-02-27 | 2019-11-05 | 山东大学 | 一种取代吲哚-2-羧酸类Bcl-2小分子荧光探针及其应用 |
| CN109020846B (zh) * | 2018-07-25 | 2020-12-29 | 山东大学 | O-取代酪氨酸类Bcl-2蛋白抑制剂及制备方法和应用 |
| CN111423379B (zh) * | 2020-05-21 | 2021-08-03 | 湖南科技大学 | 取代3-吲唑类Mcl-1蛋白抑制剂及制备方法和应用 |
| CN111808079A (zh) * | 2020-08-05 | 2020-10-23 | 中国药科大学 | 吲哚类ask1小分子抑制剂及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LT2376480T (lt) * | 2008-12-05 | 2016-09-12 | Abbvie Inc. | Sulfonamido dariniai kaip bcl-2-selektyviąją apoptozę sukeliantys agentai, skirti vėžio ir imuninių ligų gydymui |
| US20150306232A1 (en) * | 2012-11-08 | 2015-10-29 | Brandeis University | Hydrogelators comprising d-amino acids |
| CN103044311B (zh) * | 2012-12-26 | 2015-04-22 | 山东大学 | 一种多取代吲哚类化合物及其制备方法和应用 |
| CN103396351B (zh) * | 2013-08-09 | 2015-10-21 | 山东大学 | 吡咯烷类Bcl-2蛋白小分子抑制剂化合物及其制备、药物组合物与制药用途 |
| CN103467359B (zh) * | 2013-09-27 | 2015-04-22 | 山东大学 | 一种含有吲哚的肉桂酰胺类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用 |
| CN103864793B (zh) * | 2014-03-12 | 2016-08-17 | 山东大学 | 取代嘌呤-9-乙酰氨基异羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及制备方法和应用 |
-
2015
- 2015-10-26 CN CN201510702363.4A patent/CN105198789B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105198789A (zh) | 2015-12-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105198789B (zh) | 取代3-吲哚类Bcl-2蛋白抑制剂及制备方法和应用 | |
| Altıntop et al. | Design, synthesis, in vitro and in silico evaluation of a new series of oxadiazole-based anticancer agents as potential Akt and FAK inhibitors | |
| CA2536954C (en) | C-kit modulators and methods of use | |
| CN102977014B (zh) | 新的喹啉类化合物及其用途 | |
| CN107383004B (zh) | 2-氨基咪唑并吡啶类衍生物及制备和应用 | |
| CN106478606B (zh) | N-取代吲哚类衍生物及其应用 | |
| Küçükbay et al. | Synthesis and carbonic anhydrase inhibitory properties of novel 4-(2-aminoethyl) benzenesulfonamide-dipeptide conjugates | |
| CN104610166A (zh) | 嘧啶苄基异羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及制备方法和应用 | |
| CN106810559A (zh) | 成纤维细胞生长因子受体选择性抑制剂及其应用 | |
| CN106866548B (zh) | 6-环已甲基嘧啶酮类hiv逆转录酶抑制剂、其制备方法和用途 | |
| CN109678884A (zh) | 双-氟喹诺酮噻二唑脲类n-甲基环丙沙星衍生物的制备和应用 | |
| CN111556749A (zh) | 靶向凋亡抑制蛋白的新型药物 | |
| CN109020846B (zh) | O-取代酪氨酸类Bcl-2蛋白抑制剂及制备方法和应用 | |
| CN103396351B (zh) | 吡咯烷类Bcl-2蛋白小分子抑制剂化合物及其制备、药物组合物与制药用途 | |
| CN111875583B (zh) | 三氮唑衍生物及其制备方法和用途 | |
| CN111018860B (zh) | 吡咯并三嗪类化合物及其应用 | |
| CN104592114B (zh) | 取代喹啉类组蛋白去乙酰化酶抑制剂及制备方法和应用 | |
| AU2021100660A4 (en) | Substituted 3-Indazole MCL-1 Inhibitor, Preparation Method and Use Thereof | |
| CN109593064A (zh) | 作为btk抑制剂的氨基二硫代甲酸酯类化合物 | |
| CN104557764B (zh) | 3,5‑二取代绕丹宁类抗凋亡蛋白Bcl‑2抑制剂及制备方法和应用 | |
| CN108239081B (zh) | 一种抑制rock的化合物及其应用 | |
| JP2024514015A (ja) | アルキニルフェニルベンズアミド化合物およびその使用 | |
| CN109134433B (zh) | 一种抑制rock的化合物及其应用 | |
| Liu et al. | Design, synthesis and broad-spectrum Bcr-Abl inhibitory activity of novel thiazolamide–benzamide derivatives | |
| CN115477684A (zh) | 取代3-噻唑烷-2,4-二酮类Mcl-1蛋白抑制剂及制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |