CN105198635A - 大规模培养海水小球藻的大量元素营养液 - Google Patents

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李色东
刘涛
吴悦
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Abstract

本发明公开了一种适用于大规模培养海水小球藻的大量元素营养液，该营养液是由尿素9-15份、磷酸二氢钠1-3份、三氯化铁0.3-0.5份、乙二胺四乙酸二钠1.3-1.8份、水余量制成的1000倍的营养液。本发明的营养液用于海水小球藻的规模化培养，可以促进海水小球藻的生长、提高培养密度、提高培养效率，获得的海水小球藻细胞营养成分稳定，还具有培育密度高、培育持续时间长、培育成本低的特点。

Description

大规模培养海水小球藻的大量元素营养液
技术领域
本发明涉及一种微藻培养营养液，尤其是一种用于大规模培养海水小球藻的大量元素营养液，属于水产养殖领域。
背景技术
微藻作为可再生的生物质能源也得到了越来越多的关注，规模化培养微藻产业化也有相关的研究并取得一定进展，但由于规模化培养微藻容易受到光照、培养条件等因素的影响，现有的微藻产业化模式仍存在效率低、成本高的不足。
海水小球藻属绿藻门、绿藻纲，小球藻科。单细胞藻，常单生，也有多细胞聚集。细胞球形、椭圆形，内有一个周生、杯状或片状的色素体。海水小球藻是海水双壳贝类、南美白对虾等幼体的优质饵料。
目前实验室及生产上培养海水小球藻多采用基础的F/2培养基进行培养，F/2培养基主要是由NaNO3、NaH2PO4·H2O、Na2SiO3·9H2O、Na2EDTA、FeCl3·6H2O、CuSO4·5H2O、ZnSO4·7H2O、CoCl2·6H2O、MnCl·4H2O、Na2MoO4·2H2O、维生素B1、维生素B12、生物素、自然海水组成。F/2培养基存在着易受污染、培养密度低等缺点，容易导致培养效率低下，所培养的细胞营养成分不稳定，严重影响育苗进程和育苗质量。现有的技术未能解决海水小球藻培养过程中的这一不足。
发明内容
本发明的目的是针对目前海水小球藻培养的现状，提供一个适合海水小球藻大规模培养的大量元素的营养液，本发明的营养液用于海水小球藻的规模化培养，可以促进海水小球藻的生长、提高培养密度、提高培养效率，获得的海水小球藻细胞营养成分稳定，还具有培育密度高、培育持续时间长、降低养殖成本低的特点。
本发明的技术方案如下：一种适用于大规模培养海水小球藻的大量元素营养液，其特征在于：是由尿素9-15份、磷酸二氢钠1-3份、三氯化铁0.3-0.5份、乙二胺四乙酸二钠1.3-1.8份、水余量制成的1000倍的营养液，采用如下制备步骤：
（1）按配方组成分别称取尿素、磷酸二氢钠、三氯化铁、乙二胺四乙酸二钠、水；
（2）将尿素、磷酸二氢钠、三氯化铁、乙二胺四乙酸二钠在50~65℃的温度下烘干，溶解于水中，制得。
优选的营养液配方可以是：所述1000倍的营养液由尿素10份、磷酸二氢钠1.5份、三氯化铁0.45份、乙二胺四乙酸二钠1.41份、水余量制备。
优选的营养液配方还可以是：所述1000倍的营养液由尿素13份、磷酸二氢钠2份、三氯化铁0.42份、乙二胺四乙酸二钠1.50份、水余量制备。
优选的营养液配方还可以是：所述1000倍的营养液由尿素15份、磷酸二氢钠2份、三氯化铁0.39份、乙二胺四乙酸二钠1.64份、水余量制备。
本发明的营养液用于海水小球藻的大规模培养，应用时具体采用如下步骤：
（1）将用于大规模培养海水小球藻的生物反应器进行清理和消毒，而后将经过砂滤、泡沫分离、精密过滤器和紫外线消毒的海水引入经过清理和消毒的生物反应器，反应器中海水水深40cm，在海水中按照20ppm的剂量加入强氯精，消毒并曝气一昼夜；
（2）在经过步骤（1）处理的海水中，按照30ppm的剂量加入硫代硫酸钠；
（3）按照营养液与海水1:1000的体积比接入营养液，而后接入经过检测的合格的海水小球藻藻种，接种量按体积比为藻种：海水=1：50~100，使用轮浆进行搅拌。
所述的培养方法，在接入营养液后，使用轮浆搅拌均匀。
本发明具有如下有益效果：本发明的营养液及其应用方法可以促进海水小球藻的生长、提高培养密度、提高培养效率，获得的海水小球藻细胞营养成分稳定，还具有培育密度高、培育持续时间长、降低养殖成本低的特点，相对于现有技术，可以明显提高海水小球藻的细胞密度（达1×107个/ml），明显延长海水小球藻的培养时间（可达15-20天）。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加明确，下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。以下重量份对应的单位可以是g或kg。
实施例1采用以下步骤实现海水小球藻的大规模培养：
（1）将用于的生物反应器进行清理和消毒，而后将经过砂滤、泡沫分离、精密过滤器和紫外线消毒的海水引入经过清理和消毒的生物反应器，反应器中海水水深40cm，在海水中按照20ppm的剂量加入强氯精，消毒并曝气一昼夜；
（2）在经过步骤（1）处理的海水中，按照30ppm的剂量加入硫代硫酸钠；
（3）营养液配制：按配方称取尿素10份、磷酸二氢钠1.5份、三氯化铁0.45份、乙二胺四乙酸二钠1.41份、水986.64份，将尿素、磷酸二氢钠、三氯化铁、乙二胺四乙酸二钠在50℃的温度下烘干，溶解于水中，制得营养液；
（4）按照营养液与海水1:1000的体积比接入营养液，而后接入经过检测的合格的海水小球藻藻种，接种量按体积比为藻种：海水=1：50，使用轮浆进行搅拌。
实施效果：本次所培养的海水小球藻细胞密度高，达到了1.1×107个/ml，培养时间持续了16天。
实施例2采用以下步骤实现海水小球藻的大规模培养：
（1）将用于的生物反应器进行清理和消毒，而后将经过砂滤、泡沫分离、精密过滤器和紫外线消毒的海水引入经过清理和消毒的生物反应器，反应器中海水水深40cm，在海水中按照20ppm的剂量加入强氯精，消毒并曝气一昼夜；
（2）在经过步骤（1）处理的海水中，按照30ppm的剂量加入硫代硫酸钠；
（3）营养液配制：按配方称取尿素13份、磷酸二氢钠2份、三氯化铁0.42份、乙二胺四乙酸二钠1.50份、水983.08份，将尿素、磷酸二氢钠、三氯化铁、乙二胺四乙酸二钠在60℃的温度下烘干，溶解于水中，制得营养液；
（4）按照营养液与海水1:1000的体积比接入营养液，而后接入经过检测的合格的海水小球藻藻种，接种量按体积比为藻种：海水=1：75，使用轮浆进行搅拌。
实施效果：本次所培养的海水小球藻细胞密度高，达到了1.2×107个/ml，培养时间持续了15天。
实施例3采用以下步骤实现海水小球藻的大规模培养：
（1）将用于的生物反应器进行清理和消毒，而后将经过砂滤、泡沫分离、精密过滤器和紫外线消毒的海水引入经过清理和消毒的生物反应器，反应器中海水水深40cm，在海水中按照20ppm的剂量加入强氯精，消毒并曝气一昼夜；
（2）在经过步骤（1）处理的海水中，按照30ppm的剂量加入硫代硫酸钠；
（3）营养液配制：按配方称取由尿素15份、磷酸二氢钠2份、三氯化铁0.39份、乙二胺四乙酸二钠1.64份，水980.97份，将尿素、磷酸二氢钠、三氯化铁、乙二胺四乙酸二钠在65℃的温度下烘干，溶解于水中，制得营养液；
（4）按照营养液与海水1:1000的体积比接入营养液，而后接入经过检测的合格的海水小球藻藻种，接种量按体积比为藻种：海水=1：100，使用轮浆进行搅拌。
实施效果：本次所培养的海水小球藻细胞密度高，达到了1.5×107个/ml，培养时间持续了19天。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，故凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (6)

1.一种适用于大规模培养海水小球藻的大量元素营养液，其特征在于：是由尿素9-15份、磷酸二氢钠1-3份、三氯化铁0.3-0.5份、乙二胺四乙酸二钠1.3-1.8份、水余量制成的1000倍的营养液，采用如下制备步骤：
（1）按配方组成分别称取尿素、磷酸二氢钠、三氯化铁、乙二胺四乙酸二钠、水；
（2）将尿素、磷酸二氢钠、三氯化铁、乙二胺四乙酸二钠在50~65℃的温度下烘干，溶解于水中，制得。
2.根据权利要求1所述的营养液，其特征在于：所述1000倍的营养液由尿素10份、磷酸二氢钠1.5份、三氯化铁0.45份、乙二胺四乙酸二钠1.41份、水余量制备。
3.根据权利要求1所述的营养液，其特征在于：所述1000倍的营养液由尿素13份、磷酸二氢钠2份、三氯化铁0.42份、乙二胺四乙酸二钠1.50份、水余量制备。
4.根据权利要求1所述的营养液，其特征在于：所述1000倍的营养液由尿素15份、磷酸二氢钠2份、三氯化铁0.39份、乙二胺四乙酸二钠1.64份、水余量制备。
5.一种权利要求1所述的适用于大规模培养海水小球藻的大量元素营养液的应用，其特征在于：应用于海水小球藻的大规模培养，具体采用如下步骤：
（1）将用于大规模培养海水小球藻的生物反应器进行清理和消毒，而后将经过砂滤、泡沫分离、精密过滤器和紫外线消毒的海水引入经过清理和消毒的生物反应器，反应器中海水水深40cm，在海水中按照20ppm的剂量加入强氯精，消毒并曝气一昼夜；
（2）在经过步骤（1）处理的海水中，按照30ppm的剂量加入硫代硫酸钠；
（3）按照营养液与海水1:1000的体积比接入营养液，而后接入经过检测的合格的海水小球藻藻种，接种量按体积比为藻种：海水=1：50~100，使用轮浆进行搅拌。
6.如权利要求5所述的适用于大规模培养海水小球藻的大量元素营养液的应用，其特征在于：在接入营养液后，开动轮浆搅拌均匀。
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