CN105198512B - 一种双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法 - Google Patents

一种双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法 Download PDF

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仲惟磊
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Abstract

本发明涉及一种双微生物发酵制备γ‑聚谷氨酸有机肥的方法。该方法包括：首先利用谷氨酸棒杆菌发酵固体有机物产生富含L‑谷氨酸的有机物料，再用枯草芽孢杆菌对含有L‑谷氨酸的有机物料继续发酵产生含有γ‑聚谷氨酸的有机肥。该肥料经过大田试验，取得了良好的作物增产效果。本发明方法避免直接加入纯聚谷氨酸，减少了提纯过程，降低了肥料成本。

Description

一种双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法
技术领域
本发明涉及一种双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法，属于有机肥生产技术领域。
背景技术
目前，我国传统肥料需求进入瓶颈期，开发新型肥料一直是行业内的热点。聚谷氨酸肥料是一种新兴功能性肥料，据研究报道，γ-聚谷氨酸对小白菜、玉米、烟叶的种植与栽培同样产量时肥料使用量减少10％以上，或在同样施肥量前提下提高作物产量10％以上。γ-聚谷氨酸是一种多聚氨基酸，它具有高絮凝活性，对土壤的金属离子有良好的吸附性，可有效改善土壤的重金属污染，同时提高锌、铁等离子对作物的有效性；聚谷氨酸与土壤结合还可以改善土壤结构，增加土壤保水、保肥性能，因此通过添加聚谷氨酸制备各种肥料的发明也有不少公开。例如，CN104003783A(CN201410261189)公开了一种功能性颗粒状大量元素水溶肥，其原料组分重量份是：尿素345～350份、硝酸钾210～220份、磷酸二氢钾240～250份、硫酸钾20～30份、磷酸一铵110～115份、硼酸11～11.6份、EDTA螯合锌6～6.6份、EDTA螯合铁7～7.7份、EDTA螯合锰3～3.9份、七钼酸铵0.1～0.2份、聚谷氨酸5～10份。该肥料具有保水、抗旱，肥料利用率高，改良、修复土壤等功能；CN103936521A提供一种新型高效复混肥料及其制备方法，该肥料组成是：生物增效剂2～5份、硫酸锌20～30份、硫酸镁20～30份、腐植酸15～25份、硫酸硼10～20份、硫酸锰5～15份、钼酸铵1～4份，其中，生物增效剂组分及重量份数为：聚天冬氨酸65～85份和聚谷氨酸15～35份。
以上所述现有技术中的各种肥料都是复配的组合物，所添加的是提纯的聚谷氨酸，而提纯工序会大量增加成本，不利于农业生产大量使用。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法，也即，利用两种微生物先后进行固体发酵生产含有γ-聚谷氨酸的有机肥的制备方法。
本发明还提供制备的γ-聚谷氨酸有机肥的应用及施用方法。
术语说明：
PDA斜面培养基,是对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，配方：马铃薯200份，葡萄糖20份，琼脂15～20份，自来水1000份。
食用菌培养料废渣，是栽培食用菌后废弃的培养料，培养料主要成分有棉籽壳、棉绒、玉米芯、锯末、作物秸秆、麦麸、菌丝体等。
糠醛渣，是以玉米芯、玉米秆、稻壳、棉籽壳等为原料生产糠醛(呋喃甲醛)过程中的废渣，作为一种生物质类废弃物含有大量的纤维素、半纤维素、木质素等。
γ-聚谷氨酸是水溶性多聚氨基酸，分子量分布在100kDa到10000kDa之间。
本发明的技术方案如下：
一种双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法，包括如下步骤：
(1)制备谷氨酸棒杆菌种子液
a、用PDA斜面培养基将谷氨酸棒杆菌菌种活化；
b、按质量份，取葡萄糖30份，玉米粉60份，蛋白胨2份，酵母粉2份，磷酸二氢钾1.5份，硫酸镁1份，氯化钠2份，水1000份，pH值7.0，0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制成液体培养基A；将步骤a活化后的谷氨酸棒杆菌接入制成的液体培养基A中，于28～32℃、150转/分钟的摇瓶中培养16～20小时；得谷氨酸棒杆菌种子液；种子液菌活1×108个/克～5×108个/克；备用；
(2)制备枯草芽孢杆菌种子液
a、用PDA斜面培养基将枯草芽孢杆菌菌种活化；
b、按质量份，取葡萄糖20份，玉米粉30份，蛋白胨5份，酵母粉5份，磷酸二氢钾1份，硫酸镁1份，氯化钠2份，水1000份，pH值7.0，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制成液体培养基B；将步骤a活化后的枯草芽孢杆菌接入制成的液体培养基B中，于28～30℃、150转/分钟的摇瓶中培养20～24小时；得枯草芽孢杆菌种子液；种子液菌活1×108个/克～5×108个/克；备用；
(3)制备发酵有机物料
按质量份，取食用菌培养料废渣30～45份，粉碎的作物秸秆15～30份,糠醛渣18～50份,堆置发酵30～40天，加入土豆粉5～10份,常规灭菌，得发酵有机物料；备用；
(4)谷氨酸棒杆菌的固体发酵
按质量份，取步骤(3)制备的发酵有机物料，按5～10wt％的接种量接入步骤(1)制备的谷氨酸棒杆菌种子液，混匀，调整混合物的含水量至58％～60％，于28～35℃条件下堆置发酵28～40小时，中间翻堆一次，得谷氨酸棒杆菌发酵物；
(5)取步骤(4)制备的谷氨酸棒杆菌发酵物，按6～15wt％的接种量接入步骤(2)制备的枯草芽孢杆菌种子液，混匀，于25～35℃条件下堆置发酵25～35小时，中间翻堆一次，发酵结束后烘干或凉干；得双微生物发酵的γ-聚谷氨酸有机肥。
所述谷氨酸棒杆菌选用谷氨酸棒杆菌Ⅲ型(Corynebacterium glutamicum)，优选中国工业微生物菌种保藏管理中心(China Center of Industrial Culture Collection英文缩写CICC)的CICC10111、CICC10112、CICC10113或CICC10114。谷氨酸棒杆菌种子液的制备也可按现有技术，本发明提供步骤(1)的方法是优选的。
所述枯草芽孢杆菌选用枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilissubsp.Subtilis)，优选中国工业微生物菌种保藏管理中心(China Center of IndustrialCulture Collection英文缩写CICC)的CICC20643。枯草芽孢杆菌种子液的制备也可按现有技术，本发明提供步骤(2)的方法是优选的。
根据本发明，上述步骤(3)中所述作物秸秆选用玉米、小麦、水稻、花生等作物秸秆。
根据本发明，优选的，上述步骤(3)中所述作物秸秆为玉米秸秆，粉碎至长度2厘米以下。
根据本发明，优选的，上述步骤(3)中所述食用菌培养料废渣为栽培杏鲍菇或平菇的培养料废弃菌棒，粉碎至颗粒粒径0.5厘米以下。其中优选食用菌培养料废渣为栽培杏鲍菇的培养料废弃菌棒。
根据本发明，优选的，上述步骤(3)为：取栽培杏鲍菇的培养料废渣35份，粉碎的玉米秸秆20份,糠醛渣37份,堆置发酵35天，加入土豆粉8份；
根据本发明，优选的，上述步骤(4)谷氨酸棒杆菌种子液的接种量为6wt％，33℃条件下堆置发酵30小时；
根据本发明，优选的，上述步骤(5)枯草芽孢杆菌种子液的接种量为12wt％，30℃条件下堆置发酵28小时。
上述制备方法中未详细限定的均按现有技术。
本发明方法制备的发酵有机肥产品中γ-聚谷氨酸的含量在1％wt.左右，该γ-聚谷氨酸有机肥适用于蔬菜、果树、草本水果等作物。
本发明方法制备的γ-聚谷氨酸有机肥，施用方法如下：
将本发明的γ-聚谷氨酸有机肥在作物种植前均匀撒施于土壤表面翻耕入土，或者施于栽植穴内，与土混合后在其上移栽幼苗。所述γ-聚谷氨酸有机肥的用量如下：蔬菜作物和草本水果每亩500～800公斤，果树每亩300～600公斤。
本发明首先利用谷氨酸棒杆菌发酵固体有机物产生富含L-谷氨酸的有机物料，再用枯草芽孢杆菌对含有L-谷氨酸的有机物料继续发酵产生含有γ-聚谷氨酸的有机肥。该肥料经过大田试验，取得了良好的作物增产效果。
本发明的优良效果如下：
1.采用双微生物发酵工艺，避免了直接加入L-谷氨酸
γ-聚谷氨酸主要以微生物发酵法合成制得，而合成聚谷氨酸的微生物主要是L-谷氨酸依赖型微生物，即在培养过程中需要加入培养基中L-谷氨酸才能合成γ-聚谷氨酸。本发明首先利用谷氨酸棒杆菌发酵固体有机物产生富含L-谷氨酸的有机物料，再用枯草芽孢杆菌对含有L-谷氨酸的有机物料继续发酵产生含有γ-聚谷氨酸的有机肥，避免直接加入L-谷氨酸。
2.降低肥料成本
目前，含有聚谷氨酸的肥料主要是添加纯的聚谷氨酸，而聚谷氨酸的纯化是一个复杂的工艺过程，因此聚谷氨酸价格较贵，用其生产有机肥成本较高。本发明首先利用谷氨酸棒杆菌发酵固体有机物产生富含L-谷氨酸的有机物料，避免直接加入纯L-谷氨酸；对含有L-谷氨酸的有机物料继续发酵产生含有γ-聚谷氨酸的有机肥，也避免直接加入纯聚谷氨酸，减少了提纯过程，降低了肥料成本。
3、肥料增产效果好
本发明利用两种作物进行的田间试验显示，与应用相同的有机物原料和现有发酵技术生产的有机肥相比，本发明肥料在大棚西红柿的增产率为6.9％～10.3％,白菜增产8.4％～12.5％。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不限于此。实施例中的原料用量份数均为质量份，所有的百分比均为质量百分比(wt％)。
谷氨酸棒杆菌选用谷氨酸棒杆菌Ⅲ型(Corynebacterium glutamicum)CICC10111和CICC10112、中国工业微生物菌种保藏管理中心购得，其中实施例1-2用CICC10111，实施例3-4用CICC10112。
枯草芽孢杆菌选用枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilissubsp.Subtilis)CICC20643，中国工业微生物菌种保藏管理中心购得。
玉米秸秆和花生秸秆粉碎至过2毫米孔筛，食用菌培养料废渣粉碎至粒径小于0.5厘米，土豆粉碎过20目筛。食用菌培养料废渣为栽培杏鲍菇和平菇的废弃菌棒，其中实施例1-2用栽培杏鲍菇的培养料废渣，实施例3-4用栽培平菇的培养料废渣。葡萄糖、玉米粉、蛋白胨等均为市售产品。
实施例中的含量％均为质量百分比。
实施例1：一种双微生物发酵制备含γ-聚谷氨酸有机肥的方法，步骤如下：
(1)制备谷氨酸棒杆菌种子液
a、用PDA斜面培养基将谷氨酸棒杆菌CICC10111菌种活化；
b、取葡萄糖30克，玉米粉60克，蛋白胨2克，酵母粉2克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁1克，氯化钠2克，水1000克，调pH值至7.0，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制成液体培养基；将步骤a活化后的谷氨酸棒杆菌(CICC10111)接入液体培养基中，于30℃、150转/分钟的摇瓶中培养18小时；得谷氨酸棒杆菌种子液；种子液菌活3×108个/克；备用；
(2)制备枯草芽孢杆菌种子液
a、用PDA斜面培养基将枯草芽孢杆菌菌种(CICC20643)活化；
b、取葡萄糖20克，玉米粉30克，蛋白胨5克，酵母粉5克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁1克，氯化钠2克，水1000克，调pH值至7.0，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制成液体培养基；将步骤a活化后的枯草芽孢杆菌接入液体培养基中，于28℃、150转/分钟的摇瓶中培养22小时；得枯草芽孢杆菌种子液；种子液菌活3.26×108个/克；备用；
(3)制备发酵有机物料
取栽培杏鲍菇的培养料废渣40公斤，粉碎的玉米秸秆25公斤,糠醛渣30公斤,堆置发酵30天，加入土豆粉5公斤,常规灭菌，得发酵有机物料；备用；
(4)谷氨酸棒杆菌的固体发酵
取步骤(3)制备的发酵有机物料100公斤，按8wt％的接种量接入步骤(1)制备的谷氨 酸棒杆菌种子液，混匀，调整混合物的含水量至58％～60％，于30℃条件下堆置发酵35小时，中间翻堆一次，得谷氨酸棒杆菌发酵物；
(5)取步骤(4)制备的谷氨酸棒杆菌发酵物100公斤，按10wt％的接种量接入步骤(2)制备的枯草芽孢杆菌种子液，混匀，于28℃条件下堆置发酵30小时，中间翻堆一次，发酵结束后烘干或凉干；得双微生物发酵的含γ-聚谷氨酸的有机肥。本机肥含γ-聚谷氨酸约0.9％。
实施例2：一种双微生物发酵含γ-聚谷氨酸有机肥的制备：
(1)谷氨酸棒杆菌种子液的制备同实施例1，谷氨酸棒杆菌种用CICC10111。
(2)枯草芽孢杆菌种子液的制备同实施例1，枯草芽孢杆菌菌种用CICC20643。
(3)制备发酵有机物料
取栽培杏鲍菇的培养料废渣35公斤，粉碎的玉米秸秆20公斤,糠醛渣37公斤,堆置发酵35天，加入土豆粉8公斤,常规灭菌，得发酵有机物料；备用；
(4)谷氨酸棒杆菌的固体发酵
取步骤(3)制备的发酵有机物料100公斤，按6wt％的接种量接入步骤(1)制备的谷氨酸棒杆菌种子液，混匀，调整混合物的含水量至58％～60％，于33℃条件下堆置发酵30小时，中间翻堆一次，得谷氨酸棒杆菌发酵物；
(5)取步骤(4)制备的谷氨酸棒杆菌发酵物100公斤，按12wt％的接种量接入步骤(2)制备的枯草芽孢杆菌种子液，混匀，于30℃条件下堆置发酵28小时，中间翻堆一次，发酵结束后烘干或凉干；得双微生物发酵的含γ-聚谷氨酸有机肥。本有机肥含γ-聚谷氨酸约1.1％。
实施例3：一种含γ-聚谷氨酸有机肥的制备：
(1)谷氨酸棒杆菌种子液的制备同实施例1，谷氨酸棒杆菌种用CICC10112。
(2)枯草芽孢杆菌种子液的制备同实施例1，枯草芽孢杆菌菌种用CICC20643。
(3)制备发酵有机物料
取栽培平菇的培养料废渣45公斤，粉碎的花生秸秆30公斤,糠醛渣19公斤,堆置发酵40天，加入土豆粉6公斤,常规灭菌，得发酵有机物料；备用；
(4)谷氨酸棒杆菌的固体发酵
取步骤(3)制备的发酵有机物料100公斤，按10wt％的接种量接入步骤(1)制备的谷氨酸棒杆菌种子液，混匀，调整混合物的含水量至58％～60％，于28℃条件下堆置发酵40小时，中间翻堆一次，得谷氨酸棒杆菌发酵物；
(5)取步骤(4)制备的谷氨酸棒杆菌发酵物100公斤，按8wt％的接种量接入步骤(2)制备的枯草芽孢杆菌种子液，混匀，于32℃条件下堆置发酵25小时，中间翻堆一次，发酵结束后烘干或凉干；得含γ-聚谷氨酸的有机肥。该有机肥含γ-聚谷氨酸约1.0％。
实施例4：一种双微生物发酵含γ-聚谷氨酸有机肥的制备：
(1)谷氨酸棒杆菌种子液的制备同实施例1，谷氨酸棒杆菌种用CICC10112。
(2)枯草芽孢杆菌种子液的制备同实施例1，枯草芽孢杆菌菌种用CICC20643。
(3)制备发酵有机物料
取栽培平菇的培养料废渣30公斤，粉碎的花生秸秆15公斤,糠醛渣46公斤,堆置发酵38天，加入土豆粉9公斤,常规灭菌，得发酵有机物料；备用；
(4)谷氨酸棒杆菌的固体发酵
取步骤(3)制备的发酵有机物料100公斤，按5wt％的接种量接入步骤(1)制备的谷氨酸棒杆菌种子液，混匀，调整混合物的含水量至58％～60％，于35℃条件下堆置发酵28小时，中间翻堆一次，得谷氨酸棒杆菌发酵物；
(5)取步骤(4)制备的谷氨酸棒杆菌发酵物100公斤，按6wt％的接种量接入步骤(2)制备的枯草芽孢杆菌种子液，混匀，于25℃条件下堆置发酵35小时，中间翻堆一次，发酵结束后烘干或凉干；得γ-聚谷氨酸有机肥。有机肥中含γ-聚谷氨酸0.9％。
肥效大田试验
供试肥料：本发明实施例1-4制备的γ-聚谷氨酸有机肥
对比例：分别以实施例1-4各自步骤(3)制备的发酵有机物为对比肥料，其原料来源、配比和制备过程分别与实施例1-4步骤(3)的完全相同。
试验地点及作物：山东省寿光市大棚西红柿,山东省临沂市露地白菜。
试验时间：2014年8月至2015年5月。
两处均设实施例1～4和各自的对比例共8个处理，寿光市大棚西红柿试验每个小区面积20平方米，实施例1～4的产品用量每亩800公斤；临沂市白菜试验小区面积30平方米，实施例1～4的产品用量每亩500公斤。实施例和对比例用量相同，施用方法是在西红柿和白菜移栽前施入栽培穴内，与土混合后栽植幼苗，其它肥料施用按农民习惯统一进行，所有的管理措施一致。应用效果见表1。
表1.与各自对比例发酵有机肥相比实施例1～4的应用效果
供试肥料 寿光西红柿增产效率％ 临沂白菜增产效率％
实施例1 8.6 9.5
实施例2 10.3 12.5
实施例3 6.9 10.2
实施例4 9.1 8.4

Claims (6)

1.一种双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法，包括如下步骤：
(1)制备谷氨酸棒杆菌种子液
a、用PDA斜面培养基将谷氨酸棒杆菌菌种活化；
所述谷氨酸棒杆菌选用谷氨酸棒杆菌Ⅲ型(Corynebacterium glutamicum)，中国工业微生物菌种保藏管理中心的CICC10111、CICC10112、CICC10113或CICC10114；
b、按质量份，取葡萄糖30份，玉米粉60份，蛋白胨2份，酵母粉2份，磷酸二氢钾1.5份，硫酸镁1份，氯化钠2份，水1000份，pH值7.0，0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制成液体培养基A；将步骤a活化后的谷氨酸棒杆菌接入制成的液体培养基A中，于28～32℃、150转/分钟的摇瓶中培养16～20小时；得谷氨酸棒杆菌种子液；种子液菌活1×108个/克～5×108个/克；备用；
(2)制备枯草芽孢杆菌种子液
a、用PDA斜面培养基将枯草芽孢杆菌菌种活化；
所述枯草芽孢杆菌菌种选用枯草芽孢杆菌枯草亚种(Bacillus subtilissubsp.Subtilis)，中国工业微生物菌种保藏管理中心的CICC20643；
b、按质量份，取葡萄糖20份，玉米粉30份，蛋白胨5份，酵母粉5份，磷酸二氢钾1份，硫酸镁1份，氯化钠2份，水1000份，pH值7.0，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制成液体培养基B；将步骤a活化后的枯草芽孢杆菌接入制成的液体培养基B中，于28～30℃、150转/分钟的摇瓶中培养20～24小时；得枯草芽孢杆菌种子液；种子液菌活1×108个/克～5×108个/克；备用；
(3)制备发酵有机物料
按质量份，取食用菌培养料废渣30～45份，粉碎的作物秸杆15～30份,糠醛渣18～50份,堆置发酵30～40天，加入土豆粉5～10份,常规灭菌，得发酵有机物料；备用；
(4)谷氨酸棒杆菌的固体发酵
按质量份，取步骤(3)制备的发酵有机物料，按5～10wt％的接种量接入步骤(1)制备的谷氨酸棒杆菌种子液，混匀，调整混合物的含水量至58％～60％，于28～35℃条件下堆置发酵28～40小时，中间翻堆一次，得谷氨酸棒杆菌发酵物；
(5)取步骤(4)制备的谷氨酸棒杆菌发酵物，按6～15wt％的接种量接入步骤(2)制备的枯草芽孢杆菌种子液，混匀，于25～35℃条件下堆置发酵25～35小时，中间翻堆一次，发酵结束后烘干或凉干；即得。
2.如权利要求1所述的双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法，其特征在于步骤(3)中所述作物秸杆选用玉米秸杆、小麦秸杆、水稻秸杆或花生秸杆。
3.如权利要求1所述的双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法，其特征在于步骤(3)中所述食用菌培养料废渣为栽培杏鲍菇或平菇的培养料废弃菌棒，粉碎至颗粒粒径0.5厘米以下。
4.如权利要求1所述的双微生物发酵制备γ-聚谷氨酸有机肥的方法，其特征在于步骤(3)中：
取栽培杏鲍菇的培养料废渣35份，粉碎的玉米秸杆20份,糠醛渣37份,堆置发酵35天，加入土豆粉8份；
步骤(4)谷氨酸棒杆菌种子液的接种量为6wt％，33℃条件下堆置发酵30小时；
步骤(5)枯草芽孢杆菌种子液的接种量为12wt％，30℃条件下堆置发酵28小时。
5.权利要求1-4任一项制备方法制备的γ-聚谷氨酸有机肥的应用，用于蔬菜、果树或草本水果的种植。
6.如权利要求5所述的γ-聚谷氨酸有机肥的应用，其特征在于，施用方法如下：
将所述的γ-聚谷氨酸有机肥在作物种植前均匀撒施于土壤表面翻耕入土，或者施于栽植穴内，与土混合后在其上移栽幼苗；
所述γ-聚谷氨酸有机肥的用量如下：蔬菜作物和草本水果每亩500～800公斤，果树每亩300～600公斤。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107198219A (zh) * 2017-05-02 2017-09-26 上海纳德生物科技有限公司 一种含γ‑聚谷氨酸的食品添加剂的制备方法
CN109234328B (zh) * 2017-07-10 2022-10-21 北京化工大学 一种生产γ-聚谷氨酸的方法
CN110845253B (zh) * 2019-11-20 2022-02-08 中国科学院成都生物研究所 一种γ-聚谷氨酸生物有机肥的制备及应用方法
CN115058352B (zh) * 2022-03-28 2023-08-11 四川师范大学 一种枯草芽孢杆菌及其生产农用γ-聚谷氨酸的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100999756A (zh) * 2006-12-18 2007-07-18 浙江大学 用枯草芽孢杆菌和谷氨酸棒杆菌混和培养体系制备γ－聚谷氨酸的方法
CN101417894A (zh) * 2008-04-09 2009-04-29 广东省微生物研究所 一种含γ-聚谷氨酸的肥料添加剂的生产方法
CN102249753A (zh) * 2011-05-16 2011-11-23 华中农业大学 一种生产多功能生物有机肥的方法及其应用
CN103146630A (zh) * 2013-03-13 2013-06-12 南通大学 生产γ-聚谷氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及构建方法和用途
CN104673851A (zh) * 2015-02-15 2015-06-03 南京轩凯生物科技有限公司 一种利用食用菌菌渣固体发酵产γ-聚谷氨酸的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100999756A (zh) * 2006-12-18 2007-07-18 浙江大学 用枯草芽孢杆菌和谷氨酸棒杆菌混和培养体系制备γ－聚谷氨酸的方法
CN101417894A (zh) * 2008-04-09 2009-04-29 广东省微生物研究所 一种含γ-聚谷氨酸的肥料添加剂的生产方法
CN102249753A (zh) * 2011-05-16 2011-11-23 华中农业大学 一种生产多功能生物有机肥的方法及其应用
CN103146630A (zh) * 2013-03-13 2013-06-12 南通大学 生产γ-聚谷氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及构建方法和用途
CN104673851A (zh) * 2015-02-15 2015-06-03 南京轩凯生物科技有限公司 一种利用食用菌菌渣固体发酵产γ-聚谷氨酸的方法

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