CN105168260A - 拟无枝酸菌wp1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用 - Google Patents

拟无枝酸菌wp1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105168260A
CN105168260A CN201510535262.2A CN201510535262A CN105168260A CN 105168260 A CN105168260 A CN 105168260A CN 201510535262 A CN201510535262 A CN 201510535262A CN 105168260 A CN105168260 A CN 105168260A
Authority
CN
China
Prior art keywords
amycolatosis
fermentation
artificial seawater
medium
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510535262.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105168260B (zh
Inventor
王鸿
吴祺豪
陈苏
张改云
李钰金
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University of Technology ZJUT
Original Assignee
Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University of Technology ZJUT filed Critical Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority to CN201510535262.2A priority Critical patent/CN105168260B/zh
Publication of CN105168260A publication Critical patent/CN105168260A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105168260B publication Critical patent/CN105168260B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

本发明提供了一种拟无枝酸菌WP1在制备革兰氏致病菌活性抑制剂中的应用；本发明拟无枝酸菌WP1营养要求简单、容易培养，且发酵培养代谢产物具有抑菌活性；本发明拟无枝酸菌WP1的次级代谢产物，即发酵液乙酸乙酯浸提制备的总浸膏分别对金黄色葡萄球菌，蜡样芽胞杆菌，大肠杆菌，铜绿假单胞菌的生长均有一定的抑制活性。

Description

拟无枝酸菌WP1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用
(一)技术领域
本发明涉及一株海洋放线菌-拟无枝酸菌(Amycolatopsissp.)WP1在制备抑菌活性物质中的应用。
(二)背景技术
致病菌是能够引起疾病的微生物，寻找抑菌活性强的物质成为人类攻克疾病的主要工作之一，海洋微生物代谢产物研究是近年来国际上新兴的研究课题。
随着陆生资源的开发，人类面临资源匮乏的危机，开发海洋资源成为热潮。海洋微生物的生长环境苛刻，使其具有与陆地生物完全不同的代谢系统，加之物种的多样性，便决定了其能产生许多结构新颖、活性特异的次级代谢产物。研究表明，它们中许多成分也具有抗菌，抗癌等药用价值。因此海洋微生物代谢产物的研究成为了发现新型抑菌活性物质的新途径，为新药研制开发和海洋资源利用打下坚实基础。
抑菌圈法是筛选抑菌活性比较常用的一种筛选方法，常用的有牛津杯法等。
(三)发明内容
本发明目的是提供一株具有抑菌活性的海洋放线菌—拟无枝酸菌Amycolatopsissp.WP1在筛选抑菌活性物质中的应用，特别是在制备革兰氏致病菌活性抑制剂中的应用。
本发明采用的技术方案是：
本发明提供一种拟无枝酸菌(Amycolatopsissp.)WP1在制备革兰氏致病菌活性抑制剂中的应用。所述拟无枝酸菌(Amycolatopsissp.)WP1保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址：中国，北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，保藏编号：(CGMCCNo.10738)，保藏日期(2015年04月23日)，所述拟无枝酸菌(Amycolatopsissp.)WP1已在专利申请中公开，专利申请号：201510356936.2。
本发明所述拟无枝酸菌WP1由西南印度洋63.50E，27.89S，2945米以下的泥土样品中分离筛选得到，菌落特征如下：涂布或划线接种于放线菌2号平板培养基上生长迅速，30～37℃培养24～48h后长出圆形、白色、直径约0.1～0.2cm的菌落；该菌株的菌体生长特征如下：在放线菌2号液体培养基中，30～37℃培养24～48h后菌体呈细小颗粒状生长。
优选的，所述革兰氏致病菌为革兰氏阳性致病菌或革兰氏阴性致病菌活性抑制剂，更优选革兰氏阳性致病菌为金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)或蜡样芽胞杆菌(Bacilluscereus)；革兰氏阴性致病菌为大肠杆菌(Escherichiacoli)或铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)。
本发明所述活性抑制剂制备方法为：将拟无枝酸菌WP1经发酵培养获得的发酵液超声破碎(优选4℃下超声破碎)，将破碎混合液离心(或过滤)(优选4℃、8000r/min条件下离心10min)，取上清液用乙酸乙酯萃取，将上层有机相减压浓缩至浸膏，获得活性抑制剂。
本发明所述拟无枝酸菌WP1发酵液制备方法为：将拟无枝酸菌WP1接种至发酵培养基中，于30～37℃、150～200r/min振荡条件下培养3～7d，得到发酵液；所述发酵培养基组成为：酵母提取物3～7g/L，麦芽提取物7～15g/L，葡萄糖3～7g/L，溶剂为人工海水，pH7.2～8.0；优选所述发酵培养基组成为：酵母提取物4.0g/L，麦芽提取物10.0g/L，葡萄糖4.0g/L，溶剂为人工海水，pH7.2～8.0；所述每100mL人工海水组成为：NaCl2.448g，Na2SO40.3917g，KCl0.0664g，KBr0.0096g，SrCl20.0024g，MgCl·6H2O0.4981g，CaCl2·H2O0.1102g，NaHCO30.0192g，H3BO30.0026g，NaF0.0004g，蒸馏水100mL。
所述菌株在发酵培养前，通常需要先经斜面培养活化，然后经种子培养，获得种子液，再接入发酵培养基进行培养，具体为：(1)斜面培养为：将拟无枝酸菌WP1接种至斜面培养基，30～37℃培养24～48h，得到活化后的菌种；所述的斜面培养基组成为：酵母提取物3.0～7.0g/L，麦芽提取物7.0～15.0g/L，葡萄糖3.0～7.0g/L，琼脂15～35g/L，溶剂为人工海水，pH7.2～8.0，所述人工海水组成同发酵培养基；(2)将步骤(1)活化培养后的菌株接种至液体种子培养基中，于30～37℃，150～200r/min振荡条件下培养24～48h，得到种子液；所述的种子培养基组成为：酵母提取物3.0～7.0g/L，麦芽提取物7.0～15.0g/L，葡萄糖3.0～7.0g/L，溶剂为人工海水，pH7.2～8.0，所述人工海水组成同发酵培养基；(3)将步骤(2)种子液以体积浓度5％～10％的接种量，移种到发酵培养基中，于30～37℃、150～200r/min振荡条件下培养3～7d后，得到发酵液。
本发明所述革兰氏致病菌活性抑制剂以浓度为6～7mg/mL甲醇溶液的形式进行抑菌反应，优选6.4mg/mL，每1×106～1×107CFU待测菌所需抑菌剂为0.6～0.7mg。
本发明的有益效果主要体现在：(1)本发明拟无枝酸菌WP1营养要求简单、容易培养，且发酵培养代谢产物具有抑菌活性；(2)本发明拟无枝酸菌WP1的次级代谢产物，即发酵液乙酸乙酯浸提制备的总浸膏分别对金黄色葡萄球菌，蜡样芽胞杆菌，大肠杆菌，铜绿假单胞菌的生长均有一定的抑制活性。
(四)附图说明
图1为平板培养基上拟无枝酸菌WP1的菌落形态；
图2为光学显微镜下拟无枝酸菌WP1的菌体形态，显微放大1000倍。
(五)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：
实施例1：拟无枝酸菌WP1的筛选及分离鉴定
1，生物材料及培养基：用于分离海洋拟无枝酸菌WP1的生物材料为采自西南印度洋63.50E，27.89S，2945米深的沉积物样品。用于菌株WP1分离所用的培养基为海水琼脂培养基，配方为：人工海水1L，琼脂粉15g，pH7.2-7.6；人工海水配方为：NaCl24.477g、MgCl2·6H2O4.981g、Na2SO43.917g、CaCl2·2H2O1.102g、KCl0.664g、NaHCO30.192g、KBr0.096g、H3BO30.026g、SrCl20.024g、NaF0.0039g及蒸馏水1000mL。
2，样品处理：称取1g沉积物样品，溶于45ml人工海水中(内加10颗左右玻璃珠)，28℃摇床中200rpm振荡2h，取200μl涂布至含终浓度为50μg/mL制霉菌素和50μg/mL萘啶酮酸的海水琼脂培养基上。
3，拟无枝酸菌WP1的纯培养：将涂布悬浊液的分离培养基置于28℃恒温培养箱中倒置培养，培养14天左右开始挑取培养基上生长的单菌落进行转接纯化，将纯化好的WP1单菌落，接种于海水琼脂培养基中，于28℃培养箱中培养后，置于4℃冰箱保存备用。
4，拟无枝酸菌WP1的分子鉴定：用热破壁法提取菌株的基因组DNA，采用国际细菌鉴定通用引物(27F：5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’和1492R：5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’)，以基因组DNA为模板进行PCR扩增，然后利用胶回收试剂盒回收纯化PCR产物，之后进行克隆、转化，筛选阳性克隆，经扩大培养后委托上海生工生物工程技术服务有限公司进行测序。测序结果显示：菌株WP1的16SrDNA序列长度为1482bp，该序列与拟无枝酸菌属成员的16SrDNA序列的同源性最高，相似性为93.9％-97.8％。结合菌株形态特征初步确定菌株WP1属于假诺卡氏菌科(Pseudonocardiaceae)拟无枝酸菌属(Amycolatopsis)，为拟无枝酸菌WP1(Amycolatopsissp.WP1)。
实施例2：Amycolatopsissp.WP1菌株的活化及大规模培养
(1)将Amycolatopsissp.WP1接种于斜面培养基，于30℃培养24h，得到活化后的菌株，所述斜面培养基按如下组成配制：酵母提取物4.0g/L，麦芽提取物10.0g/L，葡萄糖4.0g/L，琼脂20g/L，溶剂为人工海水，pH7.3。所述每100ml人工海水组成为：NaCl2.448g，Na2SO40.3917g，KCl0.0664g，KBr0.0096g，SrCl20.0024g，MgCl·6H2O0.4981g，CaCl2·H2O0.1102g，NaHCO30.0192g，H3BO30.0026g，NaF0.0004g，蒸馏水100mL。
(2)将步骤(1)活化培养后的菌株接种至液体种子培养基中，于37℃、180r/min振荡条件下培养24h，得到种子液，所述液体种子培养基组成为：酵母提取物4.0g/L，麦芽提取物10.0g/L，葡萄糖4.0g/L，溶剂为人工海水(人工海水组成同斜面培养基)，pH7.3。
(3)将步骤(2)种子液以体积浓度5％的接种量，移种到1L发酵培养基中，于37℃、180r/min振荡条件下发酵培养5d后，得到发酵液；所述发酵培养基组成为：酵母提取物4.0g/L，麦芽提取物10.0g/L，葡萄糖4.0g/L，溶剂为人工海水(人工海水组成同斜面培养基)，pH7.3。
实施例3：Amycolatopsissp.WP1抑菌活性研究
(1)将实施例1中培养所得的1L发酵液先于超声波细胞破碎仪中进行菌体破碎20min，然后于4℃条件下离心(8000r/min，10min)或者过滤，除去菌体，清液用乙酸乙酯进行萃取，对萃取相进行旋蒸，所得浸膏即为该菌株的次级代谢产物总浸膏(即发酵液总浸膏)12.8mg，溶解于2mL甲醇，获得浸膏浓度为6.4mg/mL的发酵液总浸膏的甲醇溶液。
(2)采用杯碟法将步骤(1)所得的发酵液总浸膏甲醇溶液进行抑菌活性测定，具体步骤如下：将已灭菌的LB培养基倒入培养皿中，待其凝固。此外，选取四株常见致病菌：金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)，蜡样芽胞杆菌(Bacilluscereus)，大肠杆菌(Escherichiacoli)，铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，经LB平板活化后制成菌悬液，无菌水稀释至1×107CFU/mL，制成指示菌液。将100μL指示菌液混入20ml冷却至50℃的LB培养基中，将混有指示菌的培养基加到已凝固的LB培养基上，待凝固。所述LB培养基组成为：蛋白胨10g，NaCl10g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH值7.4。在所述凝固LB培养基上垂直放上牛津杯，取步骤(1)中浓度为6.4mg/mL发酵液总浸膏的甲醇溶液100μL，加入牛津杯中(0.64mg/管)，阴性对照组加100μL不含发酵液总浸膏的甲醇，氨苄青霉素钠(0.4mg/mL)作为阳性对照组，指示菌平板在恒温培养箱(37℃)培养24h，使用游标卡尺测量抑菌圈大小(直径单位mm)，并做相应记录。每株供试菌株的含菌平板作3个平行样，结果见表1。
表1：发酵液总浸膏(6.4mg/mL)对4种致病菌的抑制作用
从表1中可以看出，拟无枝酸菌WP1发酵样品对两株革兰氏阳性菌(蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌)，两株革兰氏阴性菌(大肠杆菌、铜绿假单胞菌)均具有较强的抑制作用。表1中A为蜡状芽孢杆菌；B为金黄色葡萄球菌；C为大肠杆菌；D为铜绿假单胞菌。所述蜡样芽胞杆菌(Bacilluscereus)，金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)，大肠杆菌(Escherichiacoli)，铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)均购买自浙江省食品药品检验研究院。

Claims (5)

1.一种拟无枝酸菌(Amycolatopsissp.)WP1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用，所述拟无枝酸菌WP1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCCNo.10738，保藏日期2015年04月23日，保藏地址：中国，北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述革兰氏菌为金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、大肠杆菌或铜绿假单胞菌。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述活性抑制剂制备方法为：将拟无枝酸菌WP1经发酵培养获得的发酵液超声破碎，将破碎混合液离心，取上清液用乙酸乙酯萃取，将上层有机相减压浓缩至浸膏，获得活性抑制剂。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述拟无枝酸菌WP1发酵液制备方法为：将拟无枝酸菌WP1接种至液体发酵培养基中，于30～37℃、150～200r/min振荡条件下培养3～7d，得到发酵液；所述发酵培养基组成为：酵母提取物3～7g/L，麦芽提取物7～15g/L，葡萄糖3～7g/L，溶剂为人工海水，pH7.2～8.0；所述每100ml人工海水组成为：NaCl2.448g，Na2SO40.3917g，KCl0.0664g，KBr0.0096g，SrCl20.0024g，MgCl·6H2O0.4981g，CaCl2·H2O0.1102g，NaHCO30.0192g，H3BO30.0026g，NaF0.0004g，蒸馏水100ml。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述发酵液制备方法为：(1)斜面培养为：将拟无枝酸菌WP1接种至斜面培养基，30～37℃培养24～48h，得到活化后的菌种；所述的斜面培养基组成为：酵母提取物3.0～7.0g/L，麦芽提取物7.0～15.0g/L，葡萄糖3.0～7.0g/L，琼脂15～35g/L，溶剂为人工海水，pH7.2～8.0；所述人工海水组成同发酵培养基；(2)将步骤(1)活化培养后的菌株接种至种子培养基中，于30～37℃，150～200r/min振荡条件下培养24～48h，得到种子液；所述的种子培养基组成为：酵母提取物3.0～7.0g/L，麦芽提取物7.0～15.0g/L，葡萄糖3.0～7.0g/L，溶剂为人工海水，pH7.2～8.0，所述人工海水组成同发酵培养基；(3)将步骤(2)种子液以体积浓度5％～10％的接种量移种到发酵培养基中，于30～37℃、150～200r/min振荡条件下培养3～7d后，得到发酵液。
CN201510535262.2A 2015-08-27 2015-08-27 拟无枝酸菌wp1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用 Active CN105168260B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510535262.2A CN105168260B (zh) 2015-08-27 2015-08-27 拟无枝酸菌wp1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510535262.2A CN105168260B (zh) 2015-08-27 2015-08-27 拟无枝酸菌wp1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105168260A true CN105168260A (zh) 2015-12-23
CN105168260B CN105168260B (zh) 2018-08-17

Family

ID=54891028

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510535262.2A Active CN105168260B (zh) 2015-08-27 2015-08-27 拟无枝酸菌wp1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105168260B (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105802895A (zh) * 2016-05-17 2016-07-27 中国极地研究中心 一种北极海洋放线菌的发酵培养基及发酵方法
CN106085894A (zh) * 2016-04-14 2016-11-09 浙江工业大学 一种拟无枝酸菌在降解炔雌醚中的应用
CN113786418A (zh) * 2021-09-18 2021-12-14 哈尔滨工业大学 一种深海菌代谢产物抑菌液的制备方法
CN115044501A (zh) * 2022-05-27 2022-09-13 湖南大学 促进植物生长的内生稀有放线菌及其用途

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107557306A (zh) * 2017-10-11 2018-01-09 浙江海洋大学 一种具有抑菌活性的底泥微生物

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20010100063A (ko) * 2001-08-21 2001-11-14 정수련 반코마이신 생성 아미코라톱시스 오리엔탈리스 변이주 및이를 이용한 반코마이신의 발효 제조방법
CN101921300A (zh) * 2009-06-10 2010-12-22 上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司 一种异黄酮苷类化合物及其制备方法
CN102899268A (zh) * 2012-09-03 2013-01-30 常州大学 万古霉素菌株及其发酵产万古霉素的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20010100063A (ko) * 2001-08-21 2001-11-14 정수련 반코마이신 생성 아미코라톱시스 오리엔탈리스 변이주 및이를 이용한 반코마이신의 발효 제조방법
CN101921300A (zh) * 2009-06-10 2010-12-22 上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司 一种异黄酮苷类化合物及其制备方法
CN102899268A (zh) * 2012-09-03 2013-01-30 常州大学 万古霉素菌株及其发酵产万古霉素的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
陈代杰等: "万古霉素的研究开发", 《中国抗生素杂志》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106085894A (zh) * 2016-04-14 2016-11-09 浙江工业大学 一种拟无枝酸菌在降解炔雌醚中的应用
CN106085894B (zh) * 2016-04-14 2019-05-28 浙江工业大学 一种拟无枝酸菌在降解炔雌醚中的应用
CN105802895A (zh) * 2016-05-17 2016-07-27 中国极地研究中心 一种北极海洋放线菌的发酵培养基及发酵方法
CN113786418A (zh) * 2021-09-18 2021-12-14 哈尔滨工业大学 一种深海菌代谢产物抑菌液的制备方法
CN115044501A (zh) * 2022-05-27 2022-09-13 湖南大学 促进植物生长的内生稀有放线菌及其用途
CN115044501B (zh) * 2022-05-27 2023-08-25 湖南大学 促进植物生长的内生稀有放线菌及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN105168260B (zh) 2018-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11459593B2 (en) Dendrobium officinale endophytic fungus strain and extracellular polysaccharide produced thereby, and extraction method and application of extracellular polysaccharide
CN105168260A (zh) 拟无枝酸菌wp1在制备革兰氏菌活性抑制剂中的应用
CN105820981B (zh) 一株高地芽孢杆菌菌剂的制备及应用
CN101302482B (zh) 一株具有广谱抗菌活性的海洋链霉菌s187
CN103421717B (zh) 一种蜡状芽孢杆菌及其应用
CN103667132A (zh) 一株蜡样芽孢杆菌及其在提高植物抗旱能力中的应用
CN106148232A (zh) 一株拮抗植物病原细菌的细菌菌株及其应用
CN108300677B (zh) 一株白色链霉菌及其在制备微生物源防腐剂中的应用
CN108795794B (zh) 一种短小芽孢杆菌及其筛选方法、菌剂的制备方法和应用
CN107142229B (zh) 一种防治辣椒疫病的生防放线菌菌株及其应用
CN109929777B (zh) 一种盐单胞菌株h6、组合物及其在耐盐促生中的应用
CN103602621B (zh) 一种绿针假单胞菌及其应用
CN109576177B (zh) 一种中华微杆菌株sm8及其在耐盐促生中的应用
CN107286941B (zh) 一种海涂土壤增加降水入渗和减少地表蒸发的生物基覆盖材料及其制备方法
CN115960777B (zh) 一株假真菌样芽孢杆菌及其在蔬菜疫病防治中的应用
CN102021120B (zh) 一种宛氏拟青霉菌株及其应用
CN103525710B (zh) 草酸青霉bam-1及其分离纯化方法与应用
CN108004271B (zh) 一种具有溶藻活性的链霉菌及其应用
CN105132334A (zh) 一种防治烟草黑胫病的短短芽孢杆菌及其应用
CN112625923B (zh) 类棘孢木霉及其应用
CN109182216A (zh) 一株对多肉植物茎腐病具有抑制作用的海洋链霉菌scfj-05
CN101845406B (zh) 一种海绵共生放线菌的分离筛选方法
CN111548940B (zh) 一种筛选产生物表面活性剂兼性厌氧菌的方法
CN103589660A (zh) 一株产雷公藤甲素的内生细菌
CN108330085B (zh) 一种适用于低温环境的解钾菌株及基于该菌株制备微生态制剂的发酵方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant