CN105137100A - 一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法 - Google Patents

一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶=（1—3）:（4—6）:（9—11）；第二检测液包括4—氨基安替吡啉？、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶=（1—3）:（9—11）:（4—6）。本发明所述的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简单，准确性高，便于推广。

Description

一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法
技术领域
本发明涉及一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法。
背景技术
血中的胆固醇在正常时只在有限狭小的范围内存在，由于会随着肝实质障碍而上升，所以胆固醇成为肝功能检查重要的项目。但目前所使用的关于游离胆固醇测定试剂盒其准确性低，且操作复杂，不易推广。
发明内容
本发明的目的在于提供一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简单，准确性高，便于推广。
为了达到上述目的，本发明的技术方案是：
一种游离胆固醇测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶＝(1—3):(4—6):(9—11)；第二检测液包括4—氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶＝(1—3):(9—11):(4—6)。
第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶＝2:5:10；第二检测液包括4—氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶＝2:10:5。
一种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液3μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A1、标准A1、检测A1；接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A2、标准A2、检测A2；最后根据计算公式：
计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔA检测＝检测A2-检测A1，ΔA空白＝空白A2-空白A1，ΔA标准＝标准A2-标准A1，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。
所述孵育时的温度均为37℃。
作为第1反应，通过抗坏血酸氧化酶(AOD)将样本中的抗坏血酸去除。在第2反应中通过胆固醇氧化酶的的作用，从游离型的胆固醇中生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的存在下将4-氨基安替吡林氧化缩合成红紫色的醌色素。通过测定醌色素的吸光度求得血中游离型胆固醇的值。
本发明的有益效果是：一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简单，准确性高，便于推广。
具体实施方式
实施例1
一种游离胆固醇测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶＝2:5:10；第二检测液包括4—氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶＝2:10:5。
一种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液3μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A1、标准A1、检测A1；接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A2、标准A2、检测A2；最后根据计算公式：
计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔA检测＝检测A2-检测A1，ΔA空白＝空白A2-空白A1，ΔA标准＝标准A2-标准A1，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。所述孵育时的温度均为37℃。
本实施例的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简单，准确性高，便于推广。
实施例2
一种游离胆固醇测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶＝1:4:9；第二检测液包括4—氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶＝1:9:4。
一种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液3μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A1、标准A1、检测A1；接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A2、标准A2、检测A2；最后根据计算公式：
计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔA检测＝检测A2-检测A1，ΔA空白＝空白A2-空白A1，ΔA标准＝标准A2-标准A1，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。所述孵育时的温度均为37℃。
本实施例的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简单，准确性高，便于推广。
实施例3
一种游离胆固醇测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶＝3:6:11；第二检测液包括4—氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶＝3:11:6。
一种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液3μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A1、标准A1、检测A1；接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A2、标准A2、检测A2；最后根据计算公式：
计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔA检测＝检测A2-检测A1，ΔA空白＝空白A2-空白A1，ΔA标准＝标准A2-标准A1，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。所述孵育时的温度均为37℃。
本实施例的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简单，准确性高，便于推广。

Claims (4)

1.一种游离胆固醇测定试剂盒，其特征在于：包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶＝(1—3):(4—6):(9—11)；第二检测液包括4—氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶＝(1—3):(9—11):(4—6)。
2.根据权利要求1所述的一种游离胆固醇测定试剂盒，其特征在于：第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶＝2:5:10；第二检测液包括4—氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶＝2:10:5。
3.根据权利要求1所述的一种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，其特征在于包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液3μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液3μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A1、标准A1、检测A1；接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入80μL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A2、标准A2、检测A2；最后根据计算公式：
计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔA检测＝检测A2-检测A1，ΔA空白＝空白A2-空白A1，ΔA标准＝标准A2-标准A1，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。
4.根据权利要求3所述的一种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，其特征在于：所述孵育时的温度均为37℃。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105911047A (zh) * 2016-04-01 2016-08-31 河南工业大学 基于金/银核-壳纳米粒子比色法检测胆固醇的方法

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