CN105130010B - 一株克雷伯氏菌的用途 - Google Patents
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Abstract
一株克雷伯氏菌的用途,它涉及一株克雷伯氏菌的用途。本发明的菌株用于去除水中四环素。采用本发明的克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株去除四环素的去除率可达71.68%。
Description
技术领域
本发明涉及一株克雷伯氏菌的用途。
背景技术
20世纪90年代末,抗生素作为环境中一株新型的污染物,其对环境的污染及危害开始受到国外学者的广泛关注。人体或动物用药是抗生素最主要的来源,药物经人体或动物摄入后,事实上只有少部分发生代谢,大部分以母体化合物或代谢体的形式经动物粪便和尿液排出体外,进入养殖废水或周边的水体环境介质中。水环境中抗生素类药物污染对人体健康的影响主要表现在以下两点:污染饮用水并可能有三致作用、肠道菌群失调等潜在危害;污染土壤与食物,最终间接危害人类。其中,四环素类、氟喹诺酮类等抗生素被广泛用于畜禽养殖,在预防和治疗疾病、促进动物生长以及提高饲料利用效率等方面发挥了显著的作用,成为现代畜牧养殖业不可或缺的因素,因此深入研究处理水中四环素的方法具有重要意义。由于目前的污水处理工艺无法彻底有效去除抗生素类污染物,部分未降解的药物活性成分就随处理过的污水最终排入天然水体,或者吸附于活性污泥,通过施肥等农业生产活动最终进入自然环境,因此寻找一株新方法处理水中抗生素迫在眉睫。
发明内容
本发明提供了一株克雷伯氏菌的用途。
本发明的一株克雷伯氏菌的用途,它用于去除水中四环素,所述的克雷伯氏菌为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株。
本发明包含以下有益效果:
采用本发明的克雷伯氏菌去除四环素的去除率可达70~80%。
通过进一步的响应面优化,四环素去除率范围可提高到75%~80%。
通过扫描电镜观察可以发现,微生物絮凝剂本身的比表面积较大,微孔较多,为四环素提供了较多吸附位点,吸附后的絮体则明显变得紧实,吸附位点被占据,表明吸附效果较好。
附图说明
图1实施例1中微生物絮凝剂对80μg/L四环素去除效果图。
具体实施方式
具体实施方式一:本实施方式的一株克雷伯氏菌的用途,它用于去除水中四环素,所述的克雷伯氏菌为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株。
具体实施方式二:本实施方式与具体实施方式一不同的是:该菌株为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株,保藏号:CGMCC No. 6243,保藏单位为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏日期为:2012年06月20日。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式三:本实施方式与具体实施方式一不同的是:将克雷伯氏菌用于去除水中四环素的具体操作如下:
一、向四环素水中加入微生物絮凝剂和助凝剂,得混合溶液;其中,微生物絮凝剂与四环素水的体积比为3:100;助凝剂与四环素水的体积比为9:10000;
二、调节混合溶液pH值后放入摇床,摇培0.1~90min后,取出静置5min后,即完成;
其中,微生物絮凝剂的制备过程如下:按照质量体积比为1g:480~520 mL的比例将微生物絮凝剂MFX干粉与蒸馏水混合,置于磁力搅拌器上,搅拌后得浓度为2.0 g/L的微生物絮凝剂;所述的微生物絮凝剂MFX干粉是由克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株制备得到的;
所述的四环素水的浓度为75~85μg/L。
其它与具体实施方式一相同。
本实施方式的微生物絮凝剂为微生物絮凝剂MFX,其中微生物絮凝剂MFX是由保藏号:CGMCC No. 6243,保藏单位为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏日期为:2012年06月20日的克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX产生的。
具体实施方式四:本实施方式与具体实施方式一不同的是:所述的助凝剂为质量分数为10%的CaCl2溶液。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式五:本实施方式与具体实施方式一不同的是:微生物絮凝剂MFX干粉制备方法为:
一、首先活化克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株并进行发酵,得发酵液;
二、向发酵液中加入2倍发酵液体积的质量百分含量为95%的4℃预冷后的无水乙醇,搅拌后,将溶液中的白色絮体过滤收集;
三、重复步骤二的操作,合并白色絮体;
四、将步骤三得到的白色絮体置于透析袋内,再将透析袋浸没于蒸馏水中进行透析,于室温放置24 h,之后放入设置温度为-80℃的超低温冰箱中冷冻24 h,再放入冻干机中冻成干粉,即得微生物絮凝剂MFX干粉;
所述的活化克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株采用培养基配方为:蛋白胨5.0g、葡萄糖10.0 g、麦芽膏3.0 g、酵母膏3.0 g、琼脂20.0 g和水1000 mL;
所述的发酵克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株采用的培养基配方为:葡萄糖10.0 g、K2HPO4 5.0 g、NaCl 0.1 g、MgSO4 0.2 g、尿素0.5 g、酵母膏0.5 g和水1000 mL,pH为7.2~7. 5,在112℃下灭菌30 min。
其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式六:本实施方式与具体实施方式一不同的是:四环素水的浓度为80μg/L。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式七:本实施方式与具体实施方式一不同的是:微生物絮凝剂的制备过程如下:按照质量体积比为1g:500 mL的比例将微生物絮凝剂MFX干粉与蒸馏水混合,置于磁力搅拌器上,搅拌后得浓度为2.0 g/L的微生物絮凝剂溶液。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式八:本实施方式与具体实施方式一不同的是:所述的调节混合溶液pH值是指调节混合溶液pH至8.0。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式九:本实施方式与具体实施方式一不同的是:所述的过滤是采用0.45 μm的纤维滤膜进行过滤的。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式十:本实施方式与具体实施方式一不同的是:步骤二中摇培时间为50min。其它与具体实施方式一相同。
本发明内容不仅限于上述各实施方式的内容,其中一个或几个具体实施方式的组合同样也可以实现发明的目的。
通过以下实施例验证本发明的有益效果:
实施例1
利用微生物絮凝剂去除水中四环素的方法,具体过程为:
首先活化菌株并进行发酵,从发酵液中提取微生物絮凝剂并制备冻干粉;称取1g微生物絮凝剂MFX干粉溶于500 mL蒸馏水中,置于磁力搅拌器上配制成2.0 g/L的溶液。然后,在配制的80 μg/L四环素水中加入2.0 g/L的微生物絮凝剂溶液3.0 mL、90.0 μL质量分数为10%的助凝剂CaCl2溶液,调节溶液pH值为8.0,进行摇床摇培0.1~90 min,取出静置5min时间后用0.45 μm的纤维滤膜进行过滤,采用高效液相色谱测定四环素浓度;
所述的微生物絮凝剂为微生物絮凝剂MFX,其中微生物絮凝剂MFX是由保藏号:CGMCC No. 6243,保藏单位为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏日期为:2012年06月20日的克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX产生的。
其中活化用培养基配方为:蛋白胨5.0 g、葡萄糖10.0 g、麦芽膏3.0 g、酵母膏3.0g、琼脂20.0 g、水1000 mL;发酵培养基配方为:葡萄糖10.0 g、K2HPO4 5.0 g、NaCl 0.1 g、MgSO4 0.2 g、尿素0.5 g、酵母膏0.5 g、水1000 mL,调节pH值为7.5。
经实施例1中的处理条件:絮凝剂投加量为3.0 mL,助凝剂投加量为90.0 μL,pH值为8.0,絮凝时间为50min的条件下,微生物絮凝剂对水中四环素的处理效果良好,去除率可达71.68%。
本实施例的微生物絮凝剂对80 μg/L四环素去除效果图如图1所示。
Claims (6)
1.一株克雷伯氏菌的用途,其特征在于它用于去除水中四环素,所述的克雷伯氏菌为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株;将克雷伯氏菌用于去除水中四环素的具体操作如下:
一、向四环素水中加入微生物絮凝剂和助凝剂,得混合溶液;其中,微生物絮凝剂与四环素水的体积比为3:100;助凝剂与四环素水的体积比为9:10000;
二、调节混合溶液pH值后放入摇床,摇培0.1~90min后,取出静置5min后,即完成;
其中,微生物絮凝剂的制备过程如下:按照质量体积比为1g:480~520mL的比例将微生物絮凝剂MFX干粉与蒸馏水混合,置于磁力搅拌器上,搅拌后得浓度为2.0g/L的微生物絮凝剂;所述的微生物絮凝剂MFX干粉是由克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株制备得到的;
所述的四环素水的浓度为80μg/L;
该菌株为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株,保藏号:CGMCC No.6243,保藏单位为:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏日期为:2012年06月20日;
微生物絮凝剂MFX干粉制备方法为:
一、首先活化克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株并进行发酵,得发酵液;
二、向发酵液中加入2倍发酵液体积的质量百分含量为95%的4℃预冷后的无水乙醇,搅拌后,将溶液中的白色絮体过滤收集;
三、重复步骤二的操作,合并白色絮体;
四、将步骤三得到的白色絮体置于透析袋内,再将透析袋浸没于蒸馏水中进行透析,于室温放置24h,之后放入设置温度为-80℃的超低温冰箱中冷冻24h,再放入冻干机中冻成干粉,即得微生物絮凝剂MFX干粉;
所述的活化克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株采用培养基配方为:蛋白胨5.0g、葡萄糖10.0g、麦芽膏3.0g、酵母膏3.0g、琼脂20.0g和水1000mL;
所述的发酵克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)MFX菌株采用的培养基配方为:葡萄糖10.0g、K2HPO4 5.0g、NaCl 0.1g、MgSO4 0.2g、尿素0.5g、酵母膏0.5g和水1000mL,pH为7.2~7.5,在112℃下灭菌30min。
2.根据权利要求1所述的一株克雷伯氏菌的用途,其特征在于所述的助凝剂为质量分数为10%的CaCl2溶液。
3.根据权利要求1所述的一株克雷伯氏菌的用途,其特征在于微生物絮凝剂的制备过程如下:按照质量体积比为1g:500mL的比例将微生物絮凝剂MFX干粉与蒸馏水混合,置于磁力搅拌器上,搅拌后得浓度为2.0g/L的微生物絮凝剂溶液。
4.根据权利要求1所述的一株克雷伯氏菌的用途,其特征在于所述的调节混合溶液pH值是指调节混合溶液pH至8.0。
5.根据权利要求1所述的一株克雷伯氏菌的用途,其特征在于所述的过滤是采用0.45μm的纤维滤膜进行过滤的。
6.根据权利要求1所述的一株克雷伯氏菌的用途,其特征在于步骤二中摇培时间为50min。
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