CN105122049A - Ft4电化学测定检测系统 - Google Patents

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Abstract

一些实施方案提供用于执行游离甲状腺素测定的方法。所述方法可包括提供流动池，其可包括多个传感器，所述传感器至少部分地被与游离甲状腺素结合的多个抗体包被。所述方法可以进一步提供将样品引入流动池，使样品接触传感器，并在其中将所述样品孵育一段时间。结果，样品中的至少一部分任何游离甲状腺素可与至少一些抗体结合。另外，所述方法可包括将清洗剂引入流动池以清除流动池中的任何显著量的样品。

Description

FT4电化学测定检测系统
交叉引用
本公开内容要求保护于2013年1月9日提交的美国临时申请顺序号61/750,512，名称为“ElectrochemicalDetectionSystem(电化学检测系统)”的优先权，其通过引用全部结合到本文中。
领域
本公开内容一般而言涉及用于进行电化学分析的电化学检测系统，和更尤其是电化学检测系统，其可以被构造成执行多个测定，所述测定包括检测来自未稀释的和未透析的全血的游离甲状腺素。
背景
电化学是研究发生在溶液中在电子导体和电解质的界面上的化学反应的化学分枝。该反应可能涉及电子导体和电解质之间的电子传递。例如，该电子导体可以是包含金属或半导体的电极。
在一些情况下，施加外来电压或由化学反应产生的电压可以驱动上述化学反应。在这些情况下，这些化学反应被称为电化学反应。此外，电子在一个或多个分子之间传递的一些化学反应被称为氧化/还原反应或氧化还原反应。通常，电化学涉及这样的情况：其中氧化和还原反应在空间或时间上是分开的并且由可用于理解该反应的外部电路连接。
一些电化学分析可在一次性药筒中进行，所述药筒包括引起电化学反应的试剂，所述电化学反应由一个或多个传感器监测、检测或定量检测。一些常规药筒可以被构造以操作性地接合读取装置，其例如通过药筒的机械驱动而启动方案。此外，所述读取装置可以接收数据信号以产生在药筒中发生的反应的测试结果。
举例说明，一些常规药筒可以与免疫测定法联用。例如，常规药筒的一部分可被一种或多种类型的抗体包被，所述抗体经设计以结合预选的靶分子或化合物。结果，靶分子或化合物可以与该抗体结合，不同的定量方法可以用于评价样品中的靶数量。
游离甲状腺素(一种甲状腺激素，也称为FT4)的准确和快速定量，可用于区分原发性和继发性甲状腺功能减退并诊断其它潜在医学病症。测定患者血液中循环的游离甲状腺素的常规方法可能是困难的和耗时的。例如，常规方法包括平衡透析，这可花费若干小时和大成本。
概述
因此，提供了系统，藉此可以在护理点以快速准确方式容易地评价游离甲状腺素水平。在一个实施方案中，所述电化学检测系统包括用于执行游离甲状腺素测定的方法。在某些实施方案中，所述方法可包括提供流动池，其包括多个传感器，所述传感器可以至少部分地用仅与游离甲状腺素(即，未与一个或多个血清结合蛋白结合的甲状腺素)结合的多个抗体包被。所述方法可以进一步提供将样品引入流动池，使样品接触多个传感器，并将样品在流动池中孵育一段时间，例如小于等于2分钟。作为孵育的结果，样品中所含的至少一部分游离甲状腺素可以与传感器上偶联的至少一些抗体结合。另外，所述方法可包括将清洗剂引入流动池以清除流动池中的任何显著量的样品。例如，在某些实施方案中，所述样品可以是未稀释的或未透析的全血，所述清洗剂可以是液体，例如水、水溶液、醇例如乙醇或甲醇、乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(dimethylformamide)(DMSO)或其它极性溶剂；或气体，例如空气、氮气、氩气、氦气或氧气。
一方面，所述方法可以进一步提供在引入清洗剂后，将溶液引入流动池。例如，所述溶液可以是已与酶例如辣根过氧化物酶缀合的已知量的甲状腺素溶液。将溶液引入流动池的结果是，溶液中的至少一部分甲状腺素可以与抗体结合，该抗体先前未与样品中的甲状腺素结合。
一方面，在加入溶液后，可将另一体积的清洗剂引入流动池以清除流动池中的任何显著量的溶液。在某些实施方案中，流动池清洗后，可将底物引入流动池，使底物接触多个传感器。然后，可将底物在流动池中孵育，使底物通过缀合到与抗体结合的甲状腺上的酶处理。
在某些实施方案中，所述电化学检测系统包括用于制造平台的方法，所述平台可以至少执行游离甲状腺素测定。例如，所述方法可包括提供输入端口，其可与至少一个流动池选择性流体流动相通。所述方法可以进一步提供将多个传感器与至少一个流动池一起安置并且用多个抗体包被多个传感器的至少一部分，所述抗体可以与未稀释的和未透析的全血中存在的游离甲状腺素结合。另外，所述方法可包括提供多个贮液池(reservoir)，使得多个贮液池的至少一些含有清洗剂(例如流体，例如液体或空气)、与酶(例如，辣根过氧化物酶)缀合的甲状腺素和底物。在某些实施方案中，所述方法可以进一步包括提供多个通道，其可以流动地相通流动池、输入端口和多个贮液池。在某些实施方案中，所述方法可以进一步包括用抗体至少部分地包被多个传感器，所述抗体可与其它分子结合，所述其它分子例如甲状腺刺激激素或其它形式的甲状腺素。
再一方面，所述电化学检测系统可包括用于执行游离甲状腺素测定的方法。在某些实施方案中，所述方法可包括提供流动池，其包括多个传感器，所述传感器可以至少部分地用与游离甲状腺素结合的多个抗体包被。所述方法可以进一步提供将一定体积的未稀释的和/或未透析的全血引入流动池，使得所述全血接触多个传感器。所述方法进一步提供将未稀释的全血在流动池内孵育一段时间。作为孵育的结果，全血中所含的至少一部分的任何游离甲状腺素可以与同传感器偶联的至少一些抗体结合。另外，所述方法可包括将第一体积的清洗剂引入流动池以清除流动池中的任何显著量的全血。
一方面，所述方法可以进一步包括在引入清洗剂后，将溶液引入流动池。然后，可将所述溶液在流动池中孵育一段时间。例如，所述溶液可包括与酶缀合的甲状腺素。结果，溶液中所含的甲状腺素可以与未与全血中所含的甲状腺素结合的至少一些抗体结合。然后，所述方法可提供将第二体积的清洗剂引入流动池以清除流动池中的任何显著量的溶液，将底物引入流动池，并在流动池中孵育所述底物。在某些实施方案中，所述方法可以进一步提供将第三体积的清洗剂引入流动池以清除流动池中的任何显著量的底物，施加电压到传感器上，并读取传感器以完成测定。
一方面，所述电化学检测系统可包括用于执行游离甲状腺素测定的平台。例如，所述平台可包括至少部分地安置在流动池中的多个传感器。此外，所述传感器可以至少部分地被多个抗体包被，所述抗体可以与游离甲状腺素结合。另外，所述平台可包括与流动池选择性流体流动相通的第一、第二、第三和第四流体源。例如第一流体源可以是能够含有一定体积的未稀释的和未透析的全血。第二流体源可含有清洗剂，例如空气或其它流体。第三流体源可含有包含先前与酶缀合的甲状腺素的溶液。而第四流体源可含有被与甲状腺素缀合的酶识别的底物。
额外目的、优势和新的特征将在以下描述中给出或者在检阅以下附图和发明详述后对额外目的、优势和新的特征对于本领域技术人员将是显而易见的。
附图简述
图1是简化方框图，显示所述电化学检测系统的不同部件。
图2是简化图，显示药筒和读取器排布。
图3是用于电化学检测的药筒中所用的传感器安排的顶视图。
图4是用于电化学检测的药筒中所用的传感器安排的另一实施方案的顶视图。
图5是图3所示的传感器安排的部件分解图。
图6是与流动池操作性接合的传感器的平面图。
图7是详述测试本公开内容的实施方案的实验结果的线图。
相应的参考数字指示附图图像中相应的组件。附图中使用的标题不应解释为限制权利要求书的范围。
发明详述
对患者血液中的循环游离甲状腺素的准确测量是诊断甲状腺疾病的相关组成部分。具体地讲，游离甲状腺素，另称为FT4，用于区分原发性和继发性甲状腺功能减退，一种在全世界日益增加的常见病症。在大多数人中，大部分甲状腺素在血液循环中与血清-结合蛋白例如甲状腺素-结合球蛋白、白蛋白或前白蛋白结合。在相对健康个体的甲状腺素总浓度中，大约0.03%的甲状腺素是未结合的或“游离的”。游离或未结合甲状腺素的浓度是代谢相关的并提供优于甲状腺素总浓度的诊断用途。
游离甲状腺素与结合甲状腺素平衡存在，这使测量浓度变得复杂。具体地讲，获得对游离甲状腺素的准确测量的一个困难方面是需要不显著地破坏结合和未结合的甲状腺素之间的平衡。如果该平衡被破坏，就可能发生不准确测量。
测量游离甲状腺素的至少一些现行常规方法包括使用透析膜的平衡透析。在若干小时(典型地17小时)内，可将来自患者的血液样品通过透析膜来透析以平衡样品。结果，很少有或没有游离甲状腺素被隐蔽，确保异常的血清-结合蛋白水平或亲和力不影响此方法。然而，大量时间用以产生这些结果，延迟了适当的诊断。
一些常规“快速”测定是可用的，但这些具有它们各自的缺陷。具体地讲，一些常规快速测定在测定的第一步采用稀释，并将已稀释样品暴露给抗甲状腺素抗体。因为抗甲状腺素抗体与游离甲状腺素结合，释放结合的甲状腺素，从而改变结合和未结合甲状腺素之间的天然平衡。此外，仅可达到有限稀释，因为当样品被进一步稀释时，抗体与结合蛋白的比例增加。随着此比例增加，准确确定游离甲状腺素浓度可能更困难。
因此本文提供的是电化学检测系统，其能够检测游离甲状腺素，而无需透析或稀释。例如，在某些实施方案中，所述电化学检测系统可具有至少一个带有多个传感器的流动池。所述传感器可以被一个或多个抗体或者可与游离甲状腺素结合的其它分子包被。例如，多个传感器可以用仅结合游离甲状腺素的抗甲状腺素抗体包被；也就是说，该抗体将不与同血清-结合蛋白结合的甲状腺素结合。
参考附图，阐明了所述电化学检测系统的实施方案，该系统在图1中通常指示为10。当与读取器14可操作性接合时，电化学检测系统10提供了在单个一次性药筒12上执行多个测定方案的方式。另外，电化学检测系统10可包括多个读取器14，其与虚拟实验室16操作性相通，用于在读取器14和同虚拟实验室16相关联的远程服务器18之间通信数据，例如测试结果或校准信息。如上所述，电化学检测系统10可以用于进行或执行多个测定方案，例如用于检测动物血液中存在的一个或多个分子的测定方案，所述动物例如人或陪伴动物，例如狗或猫。在某些实施方案中，电化学检测系统10可以被构造和安排用于执行测定，以确定血液样品中的甲状腺素浓度。例如，电化学检测系统10可以被构造以确定基本或完全未稀释的或未透析的全血样品中的游离甲状腺素的水平。
如图2所示，每个读取器14可包括读取器主体36，其具有控制面板48，当各个药筒12与读取器14操作性接合时，所述面板允许用户执行多个测定方案。在一个实施方案中，读取器14可包括第一系泊部位52和第二系泊部位54，用于将各个药筒12与读取器14操作性接合。读取器14的其它实施方案可包括用于结合任何数量的各个药筒12的一个或多个系泊部位。读取器14进一步包括屏幕50，其充当用户界面和通信组件(未显示)，允许读取器14通过远程服务器18与虚拟实验室16操作性地相通。
一方面，当进行测定方案时，电化学检测系统10可以通过经由流动池室94A、96A和98A对流体的连续控制释放，在药筒12内快速地执行免疫测定反应。
根据反应动力学和热力学，在在同一附近区域中的这些分子浓度越高，导致反应速率越快。例如，在典型的免疫测定中，可将试剂连续地移液至微量滴定盘小杯，所述小杯含有附着在小杯表面的抗体。靶分析物在化学反应中与该抗体结合。在此形式中，在确定可行之前，化学反应可花费30–40分钟。尤其是在微量滴定盘形式中，附着在小杯表面的抗体与靶分析物分子反应。
当最接近抗体的靶分子与抗体结合或反应时，最接近抗体的区域不可避免地耗尽靶分子。新靶分子的扩散补充该区域以允许进一步结合。然而这类扩散是缓慢的、有限的反应类型系统并使用更多时间来结合。同样，当加入也与抗体相互作用的其它试剂时，主体部分溶液（bulksolution）内的扩散速率控制反应速度。一种方法是使用搅拌棒或通过摇动微量滴定盘本身来搅拌小杯中的主体部分溶液。此搅拌行动更新了最接近抗体的区域，这提供新的靶分子。
微流体平台，例如一次性药筒，与微量滴定盘形式相比可以仅贮存小体积流体；然而，使用流动池94、96和98，快速免疫测定反应仍然是可实现的。药筒12的流动池形式允许最接近抗体的表面面积被通过经由流动池94、96和98的连续流动液体(例如试剂)补充，从而实现上述搅拌。在替代方案中，药筒12可以能够使少量液体(例如试剂)在最接近抗体的表面上前后流动。这种替代安排使用较少试剂和样品而提供同样的补充作用。这样，这两种安排快速地使得靶分析物和试剂均匀的在溶液中重新分配，从而防止反应变为扩散受限的。
电化学检测系统10的一些实施方案可以以通常类似于一些先前提到的实施方案但具有不同的物理配置的方式来操作。在某些实施方案中，代替先前提到的药筒12，电化学检测系统10可以使用通用平台(包括支持结构)来操作。例如，所述支持结构可以以基本上类似于流体支柱26的方式起作用。该支持结构可以使用不同于如上所述的配置。因此，上述或下述实施方案都不需要使用上述配置的流体支柱26。更确切地讲，电化学检测系统10的一些实施方案包括具有支持一个或多个流动池的其它配置的支持结构，所述流动池可各自包含多个传感器。
在一些示例性的实施方案中，所述传感器可以用例如链霉抗生物素等材料包被并且所述抗体可以是生物素化的，以将抗体保留在传感器上。在其它实施方案中，抗体和传感器之间的静电相互作用可以保留抗体。在某些实施方案中，上述多个传感器可用不同类型的抗体包被。例如，在一个实施方案中，多个传感器的至少一个可以至少部分地用可与游离甲状腺素结合的一个或多个抗体包被。另外，同样的多个传感器的至少一个也可至少部分地用可与不同分子(例如甲状腺刺激激素或不同形式的甲状腺素)结合的另一抗体包被。
在一个实施方案中，在多个传感器至少部分地被包被之后，可将样品引入流动池并允许其接触多个传感器。例如，所述样品可以在流动池中孵育一段时间。在某些实施方案中，所述时间可以是小于等于2分钟。在其它实施方案中，所述时间可以是达到所需效果的任何时间周期。当样品暴露于传感器和抗体时，样品中所含的任何游离甲状腺素的至少一部分可以与结合在其上的抗甲状腺素抗体结合。
在某些实施方案中，所述样品可以是未稀释的全血。因为抗体，传感器的灵敏度和样品暴露于传感器的相对短时间，与常规系统相反，在测试前可以不必透析或稀释样品。然而，在按照本公开内容进行甲状腺素测定前，可以透析或稀释全血样品。
在样品暴露给传感器和与其结合的抗体后，可将过量样品从流动池中清洗掉。如上所述，若干不同的清洗试剂中的一种可用于清除流动池。例如，因为通过流动池的空气层流，可使空气通过流动池并经过传感器以从流动池中去除样品。在其它实施方案中，其它流体例如液体可用于清洗流动池和传感器。合适的液体包括但不限于水、水溶液，例如缓冲液，例如磷酸缓冲盐水(PBS)；醇，例如乙醇或甲醇；乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)和其它极性溶剂。作为清洗结果，大部分仅与抗甲状腺素抗体结合的游离甲状腺素留在流动池中。
在一个实施方案中，当样品通过流动池和通过传感器后，然后溶液可以通过流动池。例如，所述溶液可包括先前已与酶缀合的游离甲状腺素。合适的酶包括但不限于过氧化物酶、漆酶、氧化酶、过氧化氢酶、脲酶、激酶、脱氢酶和脱亚氨酶。合适的过氧化物酶包括但不限于辣根过氧化物酶(HRP)、脱碘酶、例如碘化甲状腺氨酸脱碘酶(iodothyroninediodinase)和碘化酪氨酸脱碘酶；嗜酸性粒细胞过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶、例如GPX1、GPX2、GPX3、GPX4、GPX5、GPX6、GPX7和GPX8；卤过氧化物酶、髓过氧化物酶(MPO)、血红素蛋白、过氧化物氧还蛋白、甲状腺过氧化物酶、钒溴代过氧化物酶和乳过氧化物酶。合适的氧化酶包括但不限于漆酶、葡萄糖氧化酶、单胺氧化酶(MAO)、细胞色素P450氧化酶、NADPH氧化酶、黄嘌呤氧化酶、L-古洛糖酸内酯氧化酶和赖氨酰氧化酶。合适的激酶(也称为磷酸转移酶)包括但不限于OH受体激酶、例如己糖激酶、葡糖激酶、果糖激酶、肝果糖激酶、半乳糖激酶、磷酸果糖激酶1、肝-型磷酸果糖激酶(PFKL)、肌肉型磷酸果糖激酶(PFKM)、血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)、磷酸果糖激酶2、核黄素激酶、莽草酸激酶、胸苷激酶、ADP-胸苷激酶、NAD+激酶、甘油激酶、泛酸激酶、甲羟戊酸激酶、丙酮酸激酶、脱氧胞苷激酶、果糖-6-磷酸1-磷酸转移酶(PFP)、二酰甘油激酶、磷酸肌醇3激酶(类IPI3、abd类IIPI3)、鞘氨醇激酶和葡萄糖-1,6-二磷酸合酶；COOH接纳体激酶，例如磷酸甘油酸天冬氨酸激酶；N接纳体激酶例如肌氨酸；PO4接纳体激酶，例如磷酸甲羟戊酸激酶、腺苷酸激酶、核苷-二磷酸激酶、尿苷酸激酶、鸟苷酸激酶和硫胺素-二磷酸激酶；和二磷酸转移酶(P2O7)、例如核糖-磷酸二磷酸激酶和硫胺素二磷酸激酶。合适的脱氢酶包括但不限于醛脱氢酶、乙醛脱氢酶、醇脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、山梨醇脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、ad苹果酸脱氢酶。合适的脱亚氨酶包括但不限于精氨酸脱亚氨酶。在示例性的实施方案中，所述酶是过氧化物酶，例如辣根过氧化物酶。在其它示例性的实施方案中，所述酶是漆酶或过氧化氢酶。
当溶液通过流动池和通过传感器时，溶液中的游离甲状腺素可与未与样品中的游离甲状腺素结合的抗甲状腺素抗体结合。具体地讲，该结合通常类似于竞争性结合测定。当溶液通过流动池和通过传感器后，可以重复清洗步骤以从流动池中除去任何显著量的溶液。在某些实施方案中，所述清洗步骤可以用相同或不同清洗试剂来执行。
在第二清洗步骤后，可将底物通过流动池。具体地讲，可根据与溶液中的甲状腺素缀合的酶来选择底物。例如，就辣根过氧化物酶而言，可使用材料例如Lumigen?底物。在该步骤中，底物可被与传感器结合(例如通过加入到溶液中的甲状腺素)的酶切割，并且可按照一些先前提到的实施方案使用传感器。例如，底物与酶的反应可产生电势，其可被传感器检测到并将与此电势相关数据传送到用于计算的部件，例如软件部件19。具体地讲，在上述实例中，原先样品中的游离甲状腺素的量相对于所检测信号量可以表现出通常相反的关系。
当引入本公开内容或其实施方案的要素时，冠词“一个”、“一种”和“该”和“所述”意图指存在一个或多个要素。术语“包括”、“包含”和“具有”意图是包括性的并且是指除所列的要素之外可以有额外要素。
实施例
以下实施例详述了一些方式，其中本领域技术人员可以使用电化学检测系统10的一些实施方案。以下实施例无意限制本公开内容和权利要求书，而只是有关所述系统的一些应用的说明性讨论。
实施例1:测定方案1　游离T4　典型的竞争性免疫测定
将缀合物在Stabilzyme?辣根过氧化物酶(HRP)中稀释1:5000并且甲状腺素(T4)抗体稀释在磷酸缓冲盐水(PBS)中，以提供1.0μg/mL的终浓度。将含有T4抗体的样品(比例为25μL抗体与100μL样品)提供给流动池94、96、或98中的一个，接着是清洗缓冲液和底物。例如，PBS用作清洗缓冲液，同时提供底物，其浓度为每50mLMilliQ水加入一组SigmaFAST片的浓度。
在一个实施方案中，含抗体的样品体积为150μL，和当通过样品贮液池46至一个或多个流动池94、96和98正向替代时流速为1μL/秒。一旦样品被替代，提供150μL示踪剂，流速为lμL/秒，接着是400μL清洗缓冲液，流速为3μL/秒。最后，提供200μL底物，流速为3μL/秒。采用以下流动时间：游离T4样品在2.5分钟，缀合物在2.5分钟，清洗缓冲液在2.25分钟，底物在1.25分钟，和读取时间在1分40秒。这样，在不到10分钟内执行测定方案。
读取传感器28，使用施加电压-115mV达10秒，允许开路电势(OCP)达5秒，施加-115mV达8秒，允许OCP达8秒，再施加-115mV达8秒，和允许OCP达90秒。在90秒OCP结束时的mV读数通过软件部件19采集作为最终值。
在所述电化学检测系统的另一方面，读取器14从药筒12的一侧机械驱动药筒12。这允许读取器14提供加热源(未显示)用于热控制由读取器14机械驱动的一侧的对侧。
实施例2:测定方案2　游离甲状腺素测定
在此实施例中，将传感器28放置于或以其它方式安置于简单流动池内。首先，将抗甲状腺素抗体(克隆1H1)包被在传感器28上。具体地讲，在0.05M磷酸钾(pH8.0)中制备0.1μg/mL抗甲状腺素抗体溶液并包被在传感器28上。包被的传感器28用StabilGuard?稳定化。另外，也将先前已与辣根过氧化物酶缀合的甲状腺素(缀合物)在缀合缓冲液中以1:40000的比例稀释。
在这些最初步骤后，将样品加入到传感器28。具体地讲，第一样品是阴性对照，其是已从其中除去所有甲状腺素的血浆。第二样品含有19pmol的已知浓度的甲状腺素，而第三样品含有64pmol的已知浓度的甲状腺素。将各样品加入到含有包被的传感器28的单个流动池。
三个样品的每一个都经历相同程序。具体地讲，以0.5μL/秒的速率，吸取大约60μL样品到传感器28，达总共120秒。然后，让空气通过传感器28以除去过量样品。空气清洗后，将稀释的缀合物加入到传感器28。将稀释的缀合物加入到包被的传感器28。以0.5μL/秒速率吸取大约60μL稀释的缀合物，达120秒。然后，将空气通过传感器28以除去过量的稀释缀合物。然后，将底物加入到传感器28。例如，在此情况下，按照制造商的说明书，使用Lumigen?底物。以0.5μL/秒的速率吸取大约50μL底物，达100秒。然后，将空气通过传感器28以除去过量底物。
加入底物后，将-50mV的电压施加到传感器28达5秒。之后，以0.5μL/秒的速率吸取额外20μL底物，共40秒。采集读数，从其所得的数据示于图7。具体地讲，将自已知浓度的样品获得的数据与以mV计的反应精确关联。具体地讲，样品中的甲状腺素浓度越大，在传感器28处读取的电压就越小。例如，除去甲状腺素的血浆样品表现出大约150mV的电压，而具有最大甲状腺素浓度的第二样品表现出大约30mV的最低电压。
根据上述，应当理解，尽管已经说明和描述了具体实施方案，但在不违背本公开内容的精神和范围的情况下可对其作出各种修改，这对于本领域技术人员而言会是显而易见的。这样的改变和修改在本公开内容的范围和教义内，正如所附权利要求书所定义的一样。

Claims (20)

1.用于执行游离甲状腺素测定的方法，所述方法包括：
提供流动池，其包括至少部分地用可与游离甲状腺素结合的多个抗体包被的多个传感器；
使样品接触所述多个传感器；
将所述样品在所述流动池中孵育一段时间，使所述样品中所含任何游离甲状腺素的至少一部分与所述多个抗体的至少一些结合；和
将清洗剂引入所述流动池以清除所述流动池中的任何显著量的样品。
2.权利要求1的方法，其中所述样品包含未稀释的全血。
3.权利要求1的方法，进一步包括在引入所述清洗剂后，将溶液引入所述流动池。
4.权利要求3的方法，其中所述溶液包含与酶结合的甲状腺素。
5.权利要求3的方法，进一步包括将清洗剂引入所述流动池以清除所述流动池中的任何显著量的所述溶液。
6.权利要求5的方法，进一步包括使底物接触所述多个传感器；并让所述底物在所述流动池中孵育。
7.权利要求1的方法，其中所述时间小于等于2分钟。
8.权利要求1的方法，其中所述清洗剂是液体或空气。
9.权利要求的方法，其中所述抗体是抗甲状腺素抗体。
10.用于制造平台的方法，所述平台可以至少执行游离甲状腺素测定，所述方法包括：
提供输入端口，其与至少一个流动池选择性流体流动相通；
将多个传感器与所述至少一个流动池一起安置；
用可以与游离甲状腺素结合的多个抗体包被多个传感器的至少一部分；和
提供多个贮液池，其中多个贮液池的至少一些含有清洗剂、与酶缀合的甲状腺素和底物。
11.权利要求10的方法，其进一步包括提供多个通道，其流动地连接所述至少一个流动池、所述输入端口和所述多个贮液池。
12.权利要求10的方法，其中所述酶是辣根过氧化物酶。
13.权利要求10的方法，其中所述清洗剂是流体。
14.权利要求13的方法，其中所述清洗剂是空气或液体的至少一种。
15.用于执行游离甲状腺素测定的方法，所述方法包括：
提供流动池，所述流动池包括至少部分地用与游离甲状腺素结合的多个抗体包被的多个传感器；
将一定体积的未稀释的全血引入所述流动池，使所述未稀释的全血接触所述多个传感器；
将所述未稀释的全血在所述流动池中孵育一段时间，使所述未稀释的全血中所含的至少一部分游离甲状腺素与多个抗体的至少一些结合；
将第一体积的清洗剂引入所述流动池以清除所述流动池中的任何显著量的未稀释的全血；
将包含与酶缀合的甲状腺素的溶液引入所述流动池，其中将所述溶液引入所述流动池，使所述溶液接触所述传感器；
将所述溶液在流动池中孵育一段时间，使所述溶液中的至少一部分甲状腺素与先前未与来自所述未稀释的全血中的甲状腺素结合的多个抗体的至少一部分结合；
将第二体积的清洗剂引入所述流动池以清除流动池中的任何显著量的溶液；和
将底物引入所述流动池。
16.权利要求15的方法，进一步包括让所述底物在所述流动池中孵育一段时间。
17.权利要求16的方法，进一步包括将调节好的（conditioning）电压施加到所述传感器上达一段时间并在电压断开后的时间里读取所述传感器。
18.权利要求15的方法，其中所述清洗剂包含流体。
19.权利要求18的方法，其中所述流体是液体和空气的一种。
20.用于执行游离甲状腺素测定的系统，其包括：
至少部分地安置在流动池中的多个传感器，其中所述多个传感器至少部分地用与游离甲状腺素结合的多个抗体包被；
第一流体源，其与所述流动池选择性流体流动相通，其中所述第一流体源可含有一定体积的未稀释的和未透析的全血；
第二流体源，其与所述流动池选择性流体流动相通，其中所述第二流体源含有清洗剂；
第三流体源，其与所述流动池选择性流体流动相通，其中所述第三流体源含有包含与酶缀合的甲状腺素的溶液；和
第四流体源，其与所述流动池选择性流体流动相通，其中所述第四流体源含有被所述酶识别的底物。
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