CN105079720A - 一种莪术醇提物乳膏及其在治疗银屑病药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种莪术醇提物乳膏及其在治疗银屑病药物中的用途，具体而言，本发明采用醇提法提取得到莪术提取物，将所得莪术醇提物与乳膏基质充分搅拌混匀，制备莪术醇提物乳膏；通过该莪术醇提物乳膏对银屑病样豚鼠耳廓组织中细胞因子(IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α)的影响和对皮损组织中免疫表达(CK14、CK16、CK17、PCNA、TLR-2、TLR-4、TLR-9)的调控研究，结果显示本发明制备得到的莪术醇提物乳膏对银屑病有良好的治疗作用，而且同现有技术相比，本发明所提供的莪术醇提物乳膏制剂具有提取方便、制备简单、药效显著、价格便宜等有益效果，具有良好的临床应用前景。

Description

一种莪术醇提物乳膏及其在治疗银屑病药物中的用途

技术领域

本发明涉及一种中草药提取物及其用途，本发明具体为一种莪术醇提物及其在制备预防和治疗银屑病药物中的用途。

背景技术

银屑病是一种常见的以角质形成细胞过度增生、炎症细胞浸润和新生血管形成为主要组织病理改变的慢性炎症性皮肤病。目前一致认为寻常型银屑病是在多基因遗传背景下，T细胞异常表达的免疫性疾病。目前治疗多以局部对症用药为主，但常用的有皮质类固醇激素、煤焦油、水杨酸等，虽然有效，但由于明显的不良反应而限制了临床应用；卡泊三醇软膏是治疗该病的国际公认药物，但因其价格昂贵，很多患者无力承担。

莪术为姜科植物蓬莪术CurcumaphaeocaulisVal.、广西莪术CurcumakwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang或温郁金CurcumawenyujinY.H.ChenetC.Liang的干燥根茎。味辛、苦，性温，归肝、脾经，具有行气破血、消积止痛的功效，主治症瘕痞块、瘀血经闭、胸痹心痛，食积胀痛。莪术是中医治疗银屑病常用的药物之一，根据从血分论治的机理，利用莪术的活血通络的功用，在临床上配伍其他药物进行治疗银屑病，已经取得了较好的疗效。

目前尚无莪术醇提物乳膏的制备方法，本方法首创莪术醇提物乳膏的制备方法。另外，在临床上利用莪术配伍其他药物进行治疗银屑病主要采用口服给药的方法，中药起效时间长，发挥作用较慢，同时作用于全身，局部效果有限。目前尚未有关于使用莪术醇提物软膏制备治疗银屑病的药物的应用和报道。

发明内容

为解决上述技术问题，通过局部给药提高莪术治疗银屑病的疗效和便捷性，降低不良反应和药品价格，本发明提供了一种莪术醇提物乳膏的制备方法及其在治疗银屑病药物中的用途。

本发明具体技术方案如下：本发明提供了一种莪术醇提物乳膏，其特征在于，该莪术醇提物乳膏由下述方法制备得到：以莪术为原料，用醇类提取获得莪术总醇提物，蒸去醇类得到粘稠液体即为莪术醇提物，与乳膏基质充分搅拌混匀，制成莪术醇提物乳膏。

具体而言，所用的莪术醇提物的提取方法包括如下步骤：

1)取50份莪术粉和70份甲醇混匀、搅拌超声、离心，收集上清提取液A；

2)所述残渣加250份甲醇混匀、搅拌超声、离心，收集上清提取液B；

3)合并A和B，45℃水浴蒸去甲醇；

4)50％乙醇50份洗出，水浴蒸去乙醇，至得5份浓缩液C即为莪术醇提物。

在上述中，由于甲醇为液体，在制备时候通常按照莪术粉、残渣等以g为单位，对应甲醇的用量以ml为单位。

在上述中，所用乳膏基质的制备方法包括如下步骤：

1)单硬脂酸甘油酯70份、硬脂酸140份、白凡士林85份、十六醇20份、羟苯乙酯1份、乙醇8份，混合加热至70℃，制得油相A；

2)甘油85份、十二烷基硫酸钠10份溶于适量纯化水中，加热至70℃，制得水相B；

3)将A缓缓加入B中，不断搅拌，制成乳膏基质，静置，冷却。

另外，本发明还提供了上述方法制备得到的莪术醇提物乳膏在制备治疗银屑病药物中的用途，其中，该预防和治疗银屑病药物的剂型优选药剂学上允许的外用乳膏。优选地，所述外用乳膏中莪术生药含量为每单位乳膏制剂中含莪术提取物1克。

通常，单位乳膏的质量可以根据实际需要进行选择，通常采用的是单位制剂10g、15g、20g等规格。优选的，在莪术醇提物乳膏中，每1份莪术醇提物对应9份乳膏基质

与现有技术相比，本发明所提供的莪术醇提物及其乳膏制剂制备简单、使用安全、价格便宜，申请人通过莪术醇提物乳膏对银屑病样豚鼠耳廓组织中细胞因子(IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α)的影响和对皮损组织中免疫表达(CK14、CK16、CK17、PCNA、TLR-2、TLR-4、TLR-9)的调控研究，结果表明莪术醇提物乳膏可降低银屑病样豚鼠耳廓组织中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α的异常升高，可抑制皮损组织中CK14、CK16、CK17、PCNA、TLR-2、TLR-4、TLR-9的异常表达，对银屑病有良好的治疗作用。

具体实施例

实施例1.莪术醇提物及其乳膏的制备

1)药物：莪术为姜科植物广西莪术CurcumakwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang的干燥根茎，购于四川新荷花中药饮片有限公司，由成都中医药大学药用植物学与中药鉴定教研室鉴定。

2)莪术醇提物的制备：称取50g莪术粉置于锥形瓶中，加入70ml甲醇，搅拌后超声10min×3次,倒出上清液离心(1500转×10min),再向锥形瓶中各加入250ml甲醇，超声10min，放置4h，取上清液离心(同上)，合并两次离心液，置于旋转蒸发器上蒸去甲醇，水浴温度控制在45度左右。带刚好蒸至无液体停止加热，用50％乙醇洗出，水浴蒸去乙醇，至基本无乙醇味，得到的醇提物为棕红色粘稠液体。

3)乳膏基质的制备：单硬脂酸甘油酯、硬脂酸、白凡士林、十六醇、羟苯乙酯混合加热至70℃，制得油相；甘油、十二烷基硫酸钠溶于适量纯化水中，加热至70℃，制得水相；将油相缓缓加入水相中，不断搅拌，制成乳膏基质，静置，冷却。

4)莪术醇提物乳膏的制备：分多次向莪术醇提物中加入乳膏基质(等量递加)，并搅拌均匀，得黄色乳膏，即为莪术醇提物乳膏，乳膏的封装量为每份乳膏制剂中含莪术提取物1g。

在上述中，单位乳膏的质量可以根据实际需要进行选择，通常采用的是单位制剂10g、15g、20g等规格。

在下述试验中，所用的如皋制剂为10g乳膏制剂中含莪术提取物1g。

实施例2.莪术醇提物乳膏对银屑病样动物模型细胞因子的调控作用

1)实验材料：莪术醇提物乳膏的制备方法见实施例1。

造模药物普萘洛尔乳膏的制备：盐酸普萘洛尔片，由山东健康药业有限公司生产。批准文号：国药准字H37020456。生产批号：1003014。规格：10mg/片×100片/瓶。研磨制成盐酸普萘洛尔药粉，分多次加入乳膏基质，并搅拌均匀，即为普萘洛尔乳膏(每克乳膏含盐酸普萘洛尔片50mg)。

阳性药物：卤米松乳膏，由香港澳美制药厂生产。医药产品注册证号：HC20100039。产品批号：1011554。规格：0.5mg/克×10克/支。

实验动物：白色豚鼠，雌雄各半，体重280-320g，由四川省医学科学院·四川省人民医院实验动物研究所提供。

实验试剂：IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-αELISA试剂盒，均购于北京雅安达生物技术有限公司。

2)实验方法：40只豚鼠随机分为空白对照组、模型对照组、基质对照组、阳性对照组、莪术醇提物乳膏组，每组8只动物。空白对照组用乳膏基质外涂双耳背皮肤，其余各组用普萘洛尔乳膏均匀外涂双耳背皮肤，0.1g/cm²，每日3次，连续涂4周。4周后，除空白对照组和模型对照组外，各组双耳背皮肤分别外涂乳膏基质、卤米松乳膏、莪术醇提物乳膏，0.1g/cm²，每日3次，连续2周。

用药两周后，处死豚鼠，手术切取各族豚鼠右侧耳部标本，生理盐水冲洗，除去杂质，切取400mg，放入2ml生理盐水试管中，匀浆，离心，取上清液，-20℃冰箱保存待测。按试剂盒说明进行IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α的测定。

实验数据资料用表示，利用SPSS15.0统计软件包采用采用One-wayANOVA进行统计分析，P<0.05认为有统计学意义。

3)实验结果：莪术醇提物乳膏对银屑病样豚鼠耳廓组织中IL-2的调控作用：模型对照组豚鼠耳廓组织中IL-2显著升高，与空白对照组比较，有统计学意义(P<0.01)；卤米松乳膏组、莪术醇提物乳膏组IL-2显著降低，与模型对照组比较，有统计学意义(P<0.01)。结果详见表1。

莪术醇提物乳膏对银屑病样豚鼠耳廓组织中IL-6的调控作用：模型对照组豚鼠耳廓组织中IL-6显著升高，与空白对照组比较，有统计学意义(P<0.01)；卤米松乳膏组、莪术醇提物乳膏组IL-6显著降低，与模型对照组比较，有统计学意义(P<0.01)。结果详见表1。

莪术醇提物乳膏对银屑病样豚鼠耳廓组织中IFN-γ的调控作用：模型对照组豚鼠耳廓组织中IFN-γ显著升高，与空白对照组比较，有统计学意义(P<0.01)；卤米松乳膏组、莪术醇提物乳膏组IFN-γ显著降低，与模型对照组比较，有统计学意义(P<0.01)。结果详见表1。

莪术醇提物乳膏对银屑病样豚鼠耳廓组织中TNF-α的调控作用：模型对照组豚鼠耳廓组织中TNF-α显著升高，与空白对照组比较，有统计学意义(P<0.01)；卤米松乳膏组、莪术醇提物乳膏组TNF-α显著降低，与模型对照组比较，有统计学意义(P<0.01)。结果详见表1。

表1莪术醇提物乳膏对银屑病样豚鼠耳廓组织中细胞因子的调控作用

注：与空白对照组比较，^*P<0.05，^**P<0.01；与模型对照组比较，^△P<0.05，^△△P<0.01。

实施例3.莪术醇提物对豚鼠银屑病样皮损中免疫表达的影响

1)实验材料：莪术醇提物乳膏的制备、造模药物普萘洛尔乳膏的制备、阳性药物卤米松乳膏、实验动物白色豚鼠，同实施例2。

实验试剂：角蛋白14、16、17试剂盒，增殖细胞核抗原(PCNA)试剂盒，TLR-2、TLR-4、TLR-9试剂盒，均购于北京雅安达生物技术有限公司。

2)实验方法：40只豚鼠随机分为空白对照组、模型对照组、基质对照组、阳性对照组、莪术醇提物乳膏组，每组8只动物。空白对照组用乳膏基质外涂双耳背皮肤，其余各组用普萘洛尔乳膏均匀外涂双耳背皮肤，0.1g/cm²，每日3次，连续涂4周。4周后，除空白对照组和模型对照组外，各组双耳背皮肤分别外涂乳膏基质、卤米松乳膏、莪术醇提物乳膏，0.1g/cm²，每日3次，连续2周。

用药两周后，处死豚鼠，手术切取各组豚鼠左侧耳部标本，10％甲醛固定，染色，切片，按试剂盒测定方法测定角蛋白14、16、17，PCNA，TLR-2、TLR-4、TLR-9的免疫表达。

实验数据资料用表示，利用SPSS15.0统计软件包采用采用One-wayANOVA进行统计分析，P<0.05认为有统计学意义。

3)实验结果：莪术醇提物对豚鼠银屑病样皮损中角蛋白14、16、17表达的影响：模型对照组豚鼠耳廓皮损中CK14、CK16、CK17表达均显著升高，与空白对照组比较，有统计学意义(P<0.01)。各组治疗后，CK14、CK16、CK17表达均不同程度降低。卤米松乳膏组CK14、CK16、CK17与模型对照组比较，有统计学意义(P<0.01或P<0.05)；其中，CK17与基质对照组比较，有统计学意义(P<0.05)。莪术醇提物组CK16、CK17与模型对照组比较，有统计学意义(P<0.01)，且与基质对照组比较，均有统计学意义(P<0.05)。结果详见表2。

莪术醇提物对豚鼠银屑病样皮损中PCNA表达的影响：模型对照组豚鼠耳廓皮损中PCNA表达显著升高，与空白对照组比较，有统计学意义(P<0.01)。各组治疗后，CK14、CK16、CK17表达均不同程度降低。卤米松乳膏组、莪术挥发油组、莪术醇提物组与模型对照组比较，均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)；其中，卤米松乳膏组与基质对照组比较，有统计学意义(P<0.05)。结果详见表2。

莪术醇提物对豚鼠银屑病样皮损中TLR-2、TLR-4、TLR-9表达的影响：模型对照组豚鼠耳廓皮损中TLR-2、TLR-4表达均显著升高，与空白对照组比较，有统计学意义(P<0.01)。各组治疗后，TLR-2、TLR-4、TLR-9表达均不同程度降低。卤米松乳膏组TLR-2、TLR-4、TLR-9与模型对照组比较，有统计学意义(P<0.01)；且与基质对照组比较，均有统计学意义(P<0.01)。莪术醇提物组TLR-2、TLR-4与模型对照组比较，有统计学意义，(P<0.01或P<0.05)；其中，莪术醇提物组TLR-2、TLR-4与与基质对照组比较，有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结果详见表2。

Claims (8)

1.一种莪术醇提物乳膏，其特征在于，该莪术醇提物乳膏由下述方法制备得到：以莪术为原料，用醇类提取获得莪术总醇提物，蒸去醇类得到粘稠液体即为莪术醇提物，与乳膏基质充分搅拌混匀，制成莪术醇提物乳膏。

2.如权利要求1所述的莪术醇提物，所述莪术醇提物的提取方法为：1)取50份莪术粉和70份甲醇混匀、搅拌超声、离心，收集上清提取液A；2)所述残渣加250份甲醇混匀、搅拌超声、离心，收集上清提取液B；3)合并A和B，45℃水浴蒸去甲醇；4)50％乙醇50份洗出，水浴蒸去乙醇，至得5份浓缩液C即为莪术醇提物。

3.如权利要求1所述的乳膏基质，所述乳膏基质的制备方法为：1)单硬脂酸甘油酯70份、硬脂酸140份、白凡士林85份、十六醇20份、羟苯乙酯1份、乙醇8份，混合加热至70℃，制得油相A；2)甘油85份、十二烷基硫酸钠10份溶于适量纯化水中，加热至70℃，制得水相B；3)将A缓缓加入B中，不断搅拌，制成乳膏基质，静置，冷却，其中，所述各份数为重量份数。

4.如权利要求1所述的莪术醇提物乳膏，所述莪术醇提物乳膏的制备方法为：根据制剂规格要求，取如权利要求2所述的莪术醇提物和如权利要求3所述的乳膏基质，分多次向莪术醇提物中加入乳膏基质，并搅拌均匀，得黄色乳膏，即为莪术醇提物乳膏，其中，所述各份数为重量份数。

5.如权利要求4所述的莪术醇提物乳膏，每1份莪术醇提物对应9份乳膏基质。

6.如权利要1-5任一项所述莪术醇提物乳膏在提取制备和治疗银屑病药物中的用途。

7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述醇提物用于制备治疗银屑病的药剂，所述药剂为药剂学上允许的外用乳膏。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述外用乳膏中莪术生药含量为每单位乳膏制剂中含莪术提取物1克。