CN105039519A - 一种基于足点域杂交的dna测定新方法 - Google Patents
一种基于足点域杂交的dna测定新方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105039519A CN105039519A CN201510325830.6A CN201510325830A CN105039519A CN 105039519 A CN105039519 A CN 105039519A CN 201510325830 A CN201510325830 A CN 201510325830A CN 105039519 A CN105039519 A CN 105039519A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dna
- dna1
- magnetic bead
- target dna
- hybridization
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims abstract description 22
- 102100033072 DNA replication ATP-dependent helicase DNA2 Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 101000927313 Homo sapiens DNA replication ATP-dependent helicase DNA2 Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 5
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 4
- 230000003534 oscillatory effect Effects 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 claims description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 abstract 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 54
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000013433 optimization analysis Methods 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000005477 standard model Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
- C12Q1/682—Signal amplification
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种基于足点域杂交的DNA测定新方法，属于化学发光技术领域。将目标DNA加入DNA1修饰磁珠中，目标DNA的一端与DNA1的一端单链部分杂交形成足点域，在足点域作用下目标DNA未杂交的部分与DNA1继续进行杂交反应，将DNA1的发卡结构打开，同时形成双链DNA，再加入FITC标记DNA2探针，DNA2的一端与所形成的双链DNA的一端单链部分杂交形成足点域，在足点域的作用下DNA2未杂交的部分与双链DNA继续进行杂交反应，形成新的双链DNA，将目标DNA替换下来进行循环利用，并将大量的DNA2附着在磁珠上，利用光二极管诱导化学发光原理实现对目标DNA的测定。本发明方法简单、成本低、灵敏度高。
Description
技术领域
本发明属于化学发光技术领域，涉及一种基于足点域杂交的DNA测定新方法。
背景技术
DNA催化自组装技术是在DNA链式杂交反应技术的基础上发展而来的一种放大技术。它不同于DNA链式杂交反应技术中需要两条发卡DNA，而是涉及了一条或者多条发卡DNA。近年来DNA测定方法主要有化学发光法(ZhangX,LiuH,LiR,ZhangN,XiongY,NiuS.ChemiluminescencedetectionofDNA/microRNAbasedoncation-exchangeofCuSnanoparticlesandrollingcircleamplification.ChemCommun.2015.DOI:10.1039/C5CC01317H)；电化学法(LiuL,SongC,ZhangZ,YangJ,ZhouL,ZhangX,XieG.UltrasensitiveelectrochemicaldetectionofmicroRNA-21combininglayerednanostructureofoxidizedsingle-walledcarbonnanotubesandnanodiamondsbyhybridizationchainreaction.BiosensBioelectron.2015,28；70:351-357)；荧光法(WangQ,WangW,LeiJ,XuN,GaoF,JuH.AnalChem.FluorescencequenchingofcarbonnitridenanosheetthroughitsinteractionwithDNAforversatilefluorescencesensing.2013.17；85(24):12182-12188)；光度法(ThavanathanJ,HuangNM,ThongKL.ColorimetricdetectionofDNAhybridizationbasedonadualplatformofgoldnanoparticlesandgrapheneoxide.BiosensBioelectron.2014.15；55:91-98)；表面等离子共振法(SzuneritsS,MaalouliN,WijayaE,VilcotJP,BoukherroubR.Recentadvancesinthedevelopmentofgraphene-basedsurfaceplasmonresonance(SPR)interfaces.AnalBioanalChem.2013,405(5):1435-43)等。
但是，这些方法各有其优缺点，本发明利用有DNA1标记的磁珠为载体，以异硫氰酸荧光素FITC为标记物，利用DNA取代反应，实现了目标DNA的循环利用，从而实现了信号的循环放大，并最终实现了对目标DNA的高灵敏度测定，具有方法简单、灵敏度高，成本低的优点。
发明内容
本发明目的是提供一种基于足点域杂交的DNA测定新方法，利用DNA1标记的磁珠为载体，以异硫氰酸荧光素FITC标记DNA2为探针，当目标DNA加入DNA1修饰磁珠溶液中时，目标DNA的一端与DNA1的一端单链部分杂交形成足点域，在足点域的作用下目标DNA未杂交的部分与DNA1继续进行杂交反应，将DNA1的发卡结构打开，同时形成双链DNA，然后加入FITC标记DNA2探针，DNA2的一端与所形成的双链DNA的一端单链部分杂交又形成足点域，在足点域的作用下DNA2未杂交的部分与双链DNA继续进行杂交反应，形成新的双链DNA，将DNA2附着在磁珠上，同时，将目标DNA替换下来，被替换下来的目标DNA进行下一个双链的形成，并使另外一条DNA2附着在磁珠上，如此目标DNA被循环利用，同时将大量的DNA2附着在磁珠上，利用光二极管诱导化学发光原理，利用化学发光仪检测化学发光强度，根据化学发光强度实现对目标DNA的测定。
技术方案
一种基于足点域杂交的DNA测定新方法，其特征在于根据目标DNA序列，设计好有特定序列的发卡DNA1，发卡DNA2，并利用DNA1标记的磁珠为载体，以异硫氰酸荧光素FITC标记的DNA2为探针，利用足点域杂交反应实现目标DNA的循环使用，同时实现了信号的循环放大，最终实现了对目标DNA的测定。测定步骤如下：
(1)磁珠的前处理
取10μL链霉亲和素修饰的磁珠至1.5mL的离心管中，用100μLpH8.0的Tris-HCl缓冲溶液清洗两遍，然后将其分散到Tris-HCl缓冲溶液中。
(2)发卡DNA的前处理
发卡DNA在使用之前在95℃温度下孵化2min，并逐步降至室温。
(3)捕获DNA1在磁珠表面的固定
在含10μL链霉亲和素修饰的磁珠的1.5mL的离心管中，加入10μL1.0×10-5M的生物素修饰的DNA1，在37℃下振荡反应30min，并用100μLpH6.8的磷酸缓冲溶液洗涤两遍，得到DNA1修饰磁珠，并分散到1mL的磷酸缓冲溶液中。
(4)目标DNA检测
取(3)所得磁珠溶液100μL，并加入含有目标DNA的样品溶液100μL，然后再加入100μL含有1.0×10-7MDNA2的pH为6.8的磷酸缓冲溶液，并在37℃振荡反应1h。然后进行磁分离，除去上清液后，将磁珠用100μLpH6.8的磷酸缓冲溶液洗涤两遍，并将其分散于100μLpH6.8的磷酸缓冲溶液中。再加入200μLpH11.3的鲁米诺溶液，打开光二极管，15秒后关闭光二极管，用化学发光仪检测化学发光信号，根据化学发光信号强度对目标物进行定量分析。
本发明的化学试剂优选分析纯试剂，所有溶液均用二次蒸馏水配置。
本发明的0.2MpH6.8磷酸缓冲溶液的配制方法：称取0.2gKH2PO4、2.9gNa2HPO4·12H2O溶解于1L水中。
Tris-HCl缓冲溶液配制方法：称取2.429g三(羟甲基)氨基甲烷，用500mL超纯水溶解后，用0.1M盐酸调pH至8.0，最后用超纯水稀释至1000mL。
所用人工合成DNA序列(购自北京赛百盛生物工程有限公司)如下。
DNA的部分序列如下：
DNA1：5’-biotin-GCGGTAGGCCGTCCTAATCTCCTCCCCCAACACGGCC-3
DNA2：5’-GTTGGGGGAGGAGATTAGGACGGCC-FITC-3’
目标DNA：5’-AGATTAGGACGGCCTACCGC-3’
本发明的化学发光测定选用MPI-E型化学发光分析系统(西安瑞迈分析仪器有限公司)。
本发明的振荡孵育选用THZ-82A气浴恒温振荡器(全坛市医疗仪器厂)。
本发明的离心机选用Anke-TGL-16C飞翁牌高速离心机(上海市安亭科学仪器厂)。
本发明的pH测量选用PHS-3D型酸度计(上海雷磁仪器厂)。
本发明的显著效果
本发明实现了目标DNA的循环使用，同时实现了信号的循环放大，最终实现了对目标DNA的测定，得到了检测目标DNA的标准曲线，线性范围及线性方程。
当目标DNA的浓度在1.0pM-700pM之间时，随着目标DNA浓度的变化，化学发光强度有明显变化。经计算得到检测目标DNA的线性方程为ICL＝9.8136x+59.506(ICL是体系的化学发光强度；x是目标DNA的浓度，pM；n＝12，n表示同一浓度测定次数，R＝0.9997)，检测限是0.5pM。同时，考察了利用三明治夹心法测定目标DNA的检测限为500pM，基于足点域杂交的DNA测定方法检测限较三明治夹心法的低1000倍，表明该方法的灵敏度高。
该测定方法的精密度通过对浓度为30.0pM的目标DNA进行11次平行测定而计算得出，相对标准偏差为3.9％，表明本发明的测定方法有较好的重现性。
附图说明
图1.测定目标DNA的方法原理示意图。
图2.目标DNA标准曲线，横坐标是目标DNA浓度，单位是pM，纵坐标ICL是体系的化学发光强度。
具体实施方式
按照技术方案的步骤(1)至(4)得到目标DNA标准曲线见图2。DNA由赛百盛基因技术有限公司(上海，中国)合成。实验所用其他试剂均为分析纯，并且不用对其进一步纯化可以直接使用。
根据发明的方法对目标DNA含量进行了测定，并采用标准加入法对方法进行了评价，样品测定回收率为96.0–103.4％，测定结果见表1，本发明的方法在目标DNA检测中具有精密度高的特点。
表1.样品分析测定结果
| 编号 | 含量a,b | 标准样品加入量 | 测得量 | 回收率(％) |
| 1 | 3.2 | 5.0 | 8.1 | 96.0 |
| 2 | 27.6 | 30.0 | 58.3 | 102.3 |
| 3 | 46.9 | 50.0 | 98.6 | 103.4 |
a7次测量结果
b单位：pM
Claims (3)
1.一种基于足点域杂交的DNA测定新方法，其特征包括以下步骤：
a.发卡DNA在使用之前在95℃温度下孵化2min，并逐步降至室温；
b.取10μL链霉亲和素修饰的磁珠至1.5mL的离心管中，用100μLpH8.0的Tris-HCl缓冲溶液清洗两遍，然后将其分散到Tris-HCl缓冲溶液中；
c.在含10μL链霉亲和素修饰的磁珠的1.5mL的离心管中，加入10μL1.0×10-5M的生物素修饰的DNA1，在37℃下振荡反应30min，并用100μLpH6.8的磷酸缓冲溶液洗涤两遍，得到DNA1修饰磁珠，并分散到1mL的磷酸缓冲溶液中；
d.取c所得磁珠溶液100μL，并加入含有目标DNA的样品溶液100μL，然后再加入100μL含有1.0×10-7MDNA2的pH为6.8的磷酸缓冲溶液，并在37℃振荡反应1h；然后进行磁分离，除去上清液后，将磁珠用100μLpH6.8的磷酸缓冲溶液洗涤两遍，并将其分散于100μLpH6.8的磷酸缓冲溶液中；再加入200μLpH11.3的鲁米诺溶液，打开光二极管，15秒后关闭光二极管，用化学发光仪检测化学发光信号，根据化学发光信号强度对目标物进行定量分析。
2.根据权利要求1的测定DNA的方法，其特征在于所述的磁珠粒径为0.4-0.6μm，浓度为8-12mg/mL。
3.根据权利要求1的测定DNA的方法，其特征在于所述的DNA1、DNA2和目标DNA的部分序列如下：
DNA1：5’-biotin-GCGGTAGGCCGTCCTAATCTCCTCCCCCAACACGGCC-3
DNA2：5’-GTTGGGGGAGGAGATTAGGACGGCC-FITC-3’
目标DNA：5’-AGATTAGGACGGCCTACCGC-3’
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510325830.6A CN105039519B (zh) | 2015-06-12 | 2015-06-12 | 一种基于足点域杂交的dna测定新方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510325830.6A CN105039519B (zh) | 2015-06-12 | 2015-06-12 | 一种基于足点域杂交的dna测定新方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105039519A true CN105039519A (zh) | 2015-11-11 |
| CN105039519B CN105039519B (zh) | 2018-01-02 |
Family
ID=54446486
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510325830.6A Active CN105039519B (zh) | 2015-06-12 | 2015-06-12 | 一种基于足点域杂交的dna测定新方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105039519B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107192831A (zh) * | 2017-05-24 | 2017-09-22 | 青岛科技大学 | 一种化学发光技术检测糖化血红蛋白的方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998004739A2 (en) * | 1996-07-25 | 1998-02-05 | Navix, Inc. | Homogeneous diagnostic assay method utilizing simultaneous target and signal amplification |
| CN101936940A (zh) * | 2010-09-03 | 2011-01-05 | 江南大学 | 一种电化学发光适配体传感器检测赭曲霉毒素a的方法 |
| CN102888457A (zh) * | 2012-09-25 | 2013-01-23 | 江阴天瑞生物科技有限公司 | 一种分子信标链置换等温扩增基因芯片检测技术及试剂盒 |
| CN104655615A (zh) * | 2014-07-08 | 2015-05-27 | 青岛科技大学 | 基于CuS纳米粒子阳离子交换增强化学发光的生物传感器 |
-
2015
- 2015-06-12 CN CN201510325830.6A patent/CN105039519B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998004739A2 (en) * | 1996-07-25 | 1998-02-05 | Navix, Inc. | Homogeneous diagnostic assay method utilizing simultaneous target and signal amplification |
| CN101936940A (zh) * | 2010-09-03 | 2011-01-05 | 江南大学 | 一种电化学发光适配体传感器检测赭曲霉毒素a的方法 |
| CN102888457A (zh) * | 2012-09-25 | 2013-01-23 | 江阴天瑞生物科技有限公司 | 一种分子信标链置换等温扩增基因芯片检测技术及试剂盒 |
| CN104655615A (zh) * | 2014-07-08 | 2015-05-27 | 青岛科技大学 | 基于CuS纳米粒子阳离子交换增强化学发光的生物传感器 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| CHEN J ET AL.: "An ultrasensitive electrochemical biosensor for detection of DNA species related to oral cancer based on nuclease-assisted target recycling and amplification of DNAzyme", 《CHEM COMMUN》 * |
| LI H ET AL.: "Magnetic bead-based DNA hybridization assay with chemiluminescence and chemiluminescent imaging detection", 《ANALYST》 * |
| WANG H ET AL.: "Rapid identification of mycobacterium tuberculosis complex by a novel hybridization signal amplification method based on self-assembly of DNA-streptavidin nanoparticles", 《BRAZ J MICROBIOL》 * |
| 纪小婷: "基于DNA循环放大的肿瘤标志物传感分析研究", 《万方学位论文数据库》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107192831A (zh) * | 2017-05-24 | 2017-09-22 | 青岛科技大学 | 一种化学发光技术检测糖化血红蛋白的方法 |
| CN107192831B (zh) * | 2017-05-24 | 2019-03-05 | 青岛科技大学 | 一种化学发光技术检测糖化血红蛋白的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105039519B (zh) | 2018-01-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Vaisocherová et al. | Rapid and sensitive detection of multiple microRNAs in cell lysate by low-fouling surface plasmon resonance biosensor | |
| Nasheri et al. | An enzyme-linked assay for the rapid quantification of microRNAs based on the viral suppressor of RNA silencing protein p19 | |
| CN103913443A (zh) | 一种基于DNA-银纳米簇（DNA-Ag NCs）适体传感器，及其制备方法，用途以及检测方法 | |
| Shao et al. | Detachable nanoladders: A new method for signal identification and their application in the detection of ochratoxin A (OTA) | |
| CN103994946A (zh) | 基于气压检测的多种靶标的高灵敏定量分析方法 | |
| CN107574226B (zh) | 一种基因检测探针及基因检测方法 | |
| Yang et al. | DNA-templated ensemble for label-free and real-time fluorescence turn-on detection of enzymatic/oxidative cleavage of single-stranded DNA | |
| EP2843059B1 (en) | Nucleic acid sequence measuring method, nucleic acid sequence measuring device, manufacturing method for nucleic acid sequence measuring device, and nucleic acid sequence measuring apparatus | |
| CN105647788A (zh) | 用于核酸检测的sers传感器及其制备和多元检测方法 | |
| CN107937480B (zh) | 一种荧光生物传感器、制备方法及其检测有机磷农药的应用 | |
| Yuan et al. | An effective approach to enhanced energy-transfer efficiency from up-converting phosphors and increased assay sensitivity | |
| CN105203515A (zh) | 一种荧光生物传感器的制备方法及其应用 | |
| Yang et al. | A novel fluorescent detection for PDGF-BB based on dsDNA-templated copper nanoparticles | |
| Liu et al. | Proximity hybridization-regulated chemiluminescence resonance energy transfer for homogeneous immunoassay | |
| CN104316503A (zh) | 一种基于石墨烯量子点(GQDs)的传感器的用途以及检测方法 | |
| Chen et al. | Novel label-free fluorescence aptasensor for chloramphenicol detection based on a DNA four-arm junction-assisted signal amplification strategy | |
| Ma et al. | A sensitive strategy for the fluorescence detection of DNA methyltransferase activity based on the graphene oxide platform and T7 exonuclease-assisted cyclic signal amplification | |
| Li et al. | Highly sensitive determination of ssDNA and real-time sensing of nuclease activity and inhibition based on the controlled self-assembly of a 9, 10-distyrylanthracene probe | |
| CN105256037B (zh) | 分离式DNA支点介导的链置换反应用于17β-雌二醇的检测方法及检测试剂盒 | |
| Campuzano et al. | Viral protein-based bioanalytical tools for small RNA biosensing | |
| CN106932564A (zh) | 基于fret用于检测样品中核酸靶标的试剂盒及其应用 | |
| CN105039519A (zh) | 一种基于足点域杂交的dna测定新方法 | |
| Chen et al. | Dual-channel fluorescence detection of antibiotic resistance genes based on DNA-templated silver nanoclusters | |
| CN105021593A (zh) | 一种基于足点域和杂交链式反应测定t-2毒素的方法 | |
| CN109813703A (zh) | 基于dna行走机器人构建的电化学发光适体传感器检测赭曲霉毒素a的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20210810 Address after: 518, 91 Kefeng Road, Huangpu District, Guangzhou, Guangdong 510000 Patentee after: Guangzhou Fangwei Information Technology Co.,Ltd. Address before: 266000 Qingdao University of Science & Technology, 53 Zhengzhou Road, Shibei District, Qingdao, Shandong Patentee before: Qingdao University Of Science And Technology |
|
| TR01 | Transfer of patent right |