CN105012591A - 治疗脑梗死的中药复方制剂及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗脑梗死的中药复方制剂，由下列重量份的原料药制成：人参6-30份，三七粉3-18份，石菖蒲6-45份，水蛭3-12份，益母草9-90份，胆南星6-45份，制大黄3-30份。本发明还公开了该中药复方制剂的制备方法。本发明中药制剂能改善脑梗死大鼠神经行为和缺血脑组织病理结构，降低脑系数、脑组织含水量、脑血管通透性而缓解脑水肿。此外，本发明中药制剂能显著上调脑梗死大鼠脑组织VEGF蛋白及其mRNA的表达，提示本发明中药制剂治疗脑梗死的作用机制与促进脑梗死缺血脑组织的血管修复与新生有着密切的关系。

Description

治疗脑梗死的中药复方制剂及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种治疗脑梗死的中药复方制剂；此外，本发明还涉及该中药复方制剂的制备方法和医药用途。

背景技术

根据世界卫生组织(World Health Organizations，WHO)近年来的统计，脑梗死(Acute cerebral infarction)是目前继癌症和心血管疾病后的危害人类生命的第三大疾病和第一大致残疾病，每年全球有1500万人发病，死亡率高达每年17-35％，而存活下来的病人中有3-6％的人致残。我国脑血管病60岁以上的发病率高达30-45％，因此脑梗死以其居高不下的发病率、致残率和死亡率，严重地威胁着人类健康，也日益受到国内外学者的关注。

脑梗死，中医称之为“中风”，其理论渊源最早可追溯到《黄帝内经》中。有关脑梗死的中医病机一般认为气阴两虚、瘀阻脉络居多，并与风、火、痰、虚、瘀密切相关。导师在长期临床中发现，脑梗死的发病主要以元气虚损为根本，痰瘀互结、痰热生风为病机核心。脑梗死患者大多为中老年人，《素问·上古天真论》云：“女子七七”、“男子八八”，“天癸绝’，肾元亏虚，形神俱伤，可为中风的发病基础，正如元代沈金鏊提出“元气虚为中风之根也”，并且患者病程日久，脏腑功能减退，生化衰败，无以奉养，元气衰甚。痰、瘀为元气虚所导致的中间病理产物，并且患者肥胖者众，病延日久，“胖人多痰”、“久病必瘀”，进一步促使了痰、瘀的产生，痰瘀胶结，实为贯穿脑梗死始终的病机。痰瘀互阻致使生热化风，风火相煽，遂发“中风”。

发明内容

根据本发明的实施例，希望提供一种具有治疗脑梗死的药理作用，能促进脑梗死缺血脑组织的血管修复与新生的中药复方制剂，并提供其制备方法。

根据实施例，本发明提供的一种治疗脑梗死的中药复方制剂，其创新点在于，由下列重量份的原料药制成：人参6-30份，三七粉3-18份，石菖蒲6-45份，水蛭3-12份，益母草9-90份，胆南星6-45，制大黄3-30份。

根据一个实施例，本发明前述治疗脑梗死的中药复方制剂，原料药的重量份分别为：人参18份、三七粉9份、石菖蒲24份、水蛭6份、益母草60份、胆南星40份、制大黄18份。

根据一个实施例，本发明前述治疗脑梗死的中药复方制剂，原料药的重量份分别为：人参6份，三七粉3份，石菖蒲6份，水蛭3份，益母草9份，胆南星6份，制大黄3份。

根据一个实施例，本发明前述治疗脑梗死的中药复方制剂，原料药的重量份分别为：人参30份，三七粉18份，石菖蒲45份，水蛭12份，益母草90份，胆南星45份，制大黄30份。

根据实施例，本发明前述治疗脑梗死的中药复方制剂的制备方法，包括如下步骤：

将人参、石菖蒲、水蛭、益母草、胆南星四味中药纳入非金属容器内，加入2-5倍量的纯净水，搅拌均匀，浸泡，加热至沸腾，加入制大黄，保持沸腾，分离煎出液和药渣；

药渣中加入2-5倍量的纯净水，加热至沸腾，保持沸腾，分离煎出液；

混合两次煎出液，加入三七粉，搅拌均匀，将煎出液浓缩至80℃的相对密度为1.04-1.10，备服。

本发明采取扶持元气为主，佐以逐瘀化痰、泄热熄风等促进醒脑开窍之法，方中人参大补元气为君；胆南星、石菖蒲豁痰泻浊，已故全国名中医学术继承班导师、上海市名中医、全国著名中医专家胡建华教授认为，制南星经漂洗炮制后，虽然毒性减轻，但有效成分也随之流失，其实胆南星经胆汁浸泡及煎煮后毒性即消失，在其数十年临床与动物实验中均未发现明显的毒副反应，在临床中也得到验证，并且屡见奇效；三七、益母草、水蛭活血逐瘀；大黄泻热凉血以熄风等功效。

随后的试验例将证明，本发明中药制剂能改善脑梗死大鼠神经行为和缺血脑组织病理结构，降低脑系数、脑组织含水量、脑血管通透性而缓解脑水肿。此外，本发明中药制剂能显著上调脑梗死大鼠脑组织VEGF蛋白及其mRNA的表达，提示本发明中药制剂治疗脑梗死的作用机制与促进脑梗死缺血脑组织的血管修复与新生有着密切的关系。

附图说明

图1是根据本发明试验例的各实验组的Bederson评分图。

图2是根据本发明试验例的各实验组脑组织典型的TTC染色照片(图中ABCD依次是：正常对照组、假手术组、模型组及治疗组)。

图3是根据本发明试验例的各实验组脑组织的梗死体积图。

图4是根据本发明试验例的各实验组脑组织典型的HE染色照片(左列200×，右列400×；图中ABCD依次代表正常对照组、假手术组、模型组和治疗组)。

图5是根据本发明试验例的各实验组脑组织典型的透射电镜照片(Bar值从左至右分别为1μm,2μm,2μm；图中ABCD依次代表正常对照组、假手术组、模型组和治疗组)。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。

实施例1

分别称取人参18克、三七粉9克、石菖蒲24克、水蛭6克、益母草60克、胆南星40克、制大黄18克。

将人参、石菖蒲、水蛭、益母草、胆南星四味中药纳入非金属容器内，加入常温纯净水500ml，搅拌均匀后浸泡15分钟，后加热至沸腾，煮沸后，再加入制大黄，保持沸腾5分钟后，后分离煎出液150ml和药渣。

药渣中再次加入常温纯净水500ml，加热至沸腾，煮沸后保持沸腾3分钟，分离煎出液150ml。混合两次煎出液，加入三七粉，搅拌均匀后浓缩至80℃的相对密度为1.06，浓度为388克生药/L(以下称复元醒脑汤)。

实施例2

分别称取人参60克，三七粉30克，石菖蒲60克，水蛭30克，益母草90克，胆南星60克，制大黄30克。

将人参、石菖蒲、水蛭、益母草、胆南星四味中药纳入非金属容器内，加入常温纯净水720ml，搅拌均匀后浸泡15分钟，后加热至沸腾，煮沸后，再加入制大黄，保持沸腾5分钟后，后分离煎出液150ml和药渣。

药渣中再次加入常温纯净水720ml，加热至沸腾，煮沸后保持沸腾3分钟，分离煎出液150ml。

混合两次煎出液，加入三七粉，搅拌均匀后浓缩至80℃的相对密度为1.04，浓度为388克生药/L(以下称复元醒脑汤)。

实施例3

分别称取人参300克，三七粉180克，石菖蒲450克，水蛭120克，益母草900克，胆南星450克，制大黄300克

将人参、石菖蒲、水蛭、益母草、胆南星四味中药纳入非金属容器内，加入常温纯净水13500ml，搅拌均匀后浸泡15分钟，后加热至沸腾，煮沸后，再加入制大黄，保持沸腾5分钟后，后分离煎出液1500ml和药渣。

药渣中再次加入常温纯净水13500ml，加热至沸腾，煮沸后保持沸腾3分钟，分离煎出液1500ml。

混合两次煎出液，加入三七粉，搅拌均匀后浓缩至80℃的相对密度为1.10，浓度为388克生药/L(以下称复元醒脑汤)。

实施例4

分别称取人参180克，三七粉105克，石菖蒲255克，水蛭75克，益母草495克，胆南星255克，制大黄165克。

将人参、石菖蒲、水蛭、益母草、胆南星四味中药纳入非金属容器内，加入常温纯净水5300ml，搅拌均匀后浸泡15分钟，后加热至沸腾，煮沸后，再加入制大黄，保持沸腾5分钟后，后分离煎出液1500ml和药渣。

药渣中再次加入常温纯净水5300ml，加热至沸腾，煮沸后保持沸腾3分钟，分离煎出液1500ml。

混合两次煎出液，加入三七粉，搅拌均匀后浓缩至80℃的相对密度为1.08，浓度为388克生药/L(以下称复元醒脑汤)。

试验例

1.1实验目的

阐释本发明中药制剂治疗脑梗死的作用机理与有效作用靶点。为深入探讨脑梗死的病理机制和寻求新的防治策略提供了新的思路。

1.2实验方法

1.2.1动物模型的制备--自体血栓栓塞性大鼠脑梗死模型

采用自体血栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)局灶性糖尿病脑梗死SD大鼠模型。

(1)制作血栓：将模型组、治疗组两组大鼠用3％戊巴比妥钠按0.15ml/100g剂量麻醉后，先暴露其股静脉抽取静脉血0.5ml加入预先加有75U凝血酶的EP管中，立即混匀。然后用注射器吸取沉淀部分注入2根头皮针塑料管内，静置15min再打进盛有生理盐水的培养皿中，洗掉凝血块表面的红细胞。在显微镜下选择富含纤维素(深色)的血栓剪切成1～2mm的小段，再转入pH为7.4的PBS缓冲液中恒温(37℃)静置5h使其凝缩，然后吸入EP50管中备用。

(2)制作脑梗死模型：将大鼠依前法麻醉后用眼科镊子钝性分离出左侧颈总动脉、颈内、颈外动脉。结扎颈外动脉，用动脉夹夹闭颈总动脉和颈内动脉，用提前制备好的一毫升注射器针头(将头处折一个90度的平钩)在颈外动脉上挑刺出一个小口。将吸入血栓的EP50导管由颈外动脉插入颈内动脉，松开颈内动脉上的动脉夹。缓慢将血栓注入颈内动脉，用生理盐水冲管后拔出EP50导管，结扎颈外动脉近心端。松开颈总动脉夹，缝合肌肉和皮肤。

(3)假手术组不将导管插入颈外动脉，其余操作与手术组相同，手术过程中控制动物肛温在(37±0.5)℃。

正常对照组是指正常条件下饲养的健康大鼠。模型组是指通过自体血栓栓塞性大鼠脑梗死模型造模成功的脑梗死大鼠。治疗组是指通过自体血栓栓塞性大鼠脑梗死模型造模成功后采用复元醒脑汤治疗的大鼠。假手术组是指手术中，不将导管插入颈外动脉，其余操作与手术组相同的大鼠。

1.2.2实验方法

健康雄性SD大鼠。

随机分组：正常对照组、假手术组、模型组、治疗组。

完成脑梗塞造模后，治疗组随机予以实施例1-4制得的复元醒脑汤灌胃7d；假手术组、模型组予以生理盐水灌胃7d；分别测定神经缺损行为体征评分、脑组织梗死体积、病理形态学。

1.3实验对象与分组

120只动物入组，每组30例，正常对照组因2例中途死亡而退出实验。而另外90只动物在造模成功后高脂饮料喂养四周即死亡21只，余69只平均分为3组，每组23只；其中假手术组23例因3例中途死亡而退出实验；模型组23例因9例中途死亡而退出实验；治疗组23例因9例中途死亡而退出实验。因此各实验组入组数据例数分别为正常对照组28例，假手术组20例，模型组14例，治疗组14例。详见表1。

表1.大鼠造模生存例数统计

1.4各实验组的神经缺损行为体征评分

造模结束后各实验组每只动物均进行神经缺损行为体征的Bederson评分测定。结果见表2及图1。

表2.各实验组的Bederson评分

备注：模型组vs治疗组#P<0.01；模型组vs假手术组*P<0.01；3h vs7d⊙P<0.01

由表2和图1可见，正常对照组与假手术组的神经缺损行为评分为0分。造模成功后3h模型组与治疗组的Bederson评分无统计学差异(P>0.05)；7d时治疗组的Bederson评分显著低于模型组(P<0.01)；模型组造模成功后3h与7d的Bederson评分比较统计学不存在差异(P>0.05)；治疗组造模成功后3h与7d的Bederson评分具有极显著差异(P<0.01)；模型组与假手术组比较3h与7d的Bederson评分均具有极显著统计学差异(P<0.01)。

1.5各实验组脑组织的梗死体积

造模结束后每组各取5只动物进行TTC染色测定出梗死体积]。组织的典型TTC染色见图2。梗塞体积测定结果见表3和图3。

由图2可见，正常对照组及假手术组不存在脑组织坏死。模型组及治疗组可见明显的组织坏死，其中治疗组的坏死范围较模型组有所改善。

表3.各实验组脑组织的梗死体积

备注：模型组vs治疗组#P<0.01；模型组vs假手术组*P<0.01

由表3和图3可见，正常对照组和假手术组大鼠的脑组织无梗死灶。而另外两组均存在不同程度的梗死，其中治疗组的脑梗死体积极显著小于模型组(P<0.01)；模型组与假手术组比较具有极显著统计学差异(P<0.01)。

1.5各实验组脑组织的病理形态学

造模结束取每组动物均2只进行HE染色及电镜检查以观察脑组织病理形态学改变。

1.5.1HE染色

各实验组脑组织的典型HE染色结果见图4。由图4可见，正常对照组结构完整，胞核居中，细胞排列有序，胞浆着色均质，无变性和坏死；假手术组出现部分细胞核固缩，组织结构渐变模糊破坏，胞浆着色渐不均匀，有着轻微的细胞损伤；模型组细胞稀释、排列不规则、紊乱，间质水肿疏松，胞浆着色不均匀，体积增大，细胞周围间隙增宽，胞浆疏松，细胞核固缩、破裂，部分胞核消失，组织形态结构模糊，有轻微的脑充血迹象，细胞变性坏死明显；治疗组部分组织结构得到改善，细胞结构逐渐恢复清晰，细胞排列稍微有序，胞核弥散现象减弱，体积膨大的细胞数量减少，细胞损伤有所改善。

1.5.2透射电镜结果

各实验组脑组织典型的透射电镜图见图5。由图5可见正常对照组脑内毛细血管内皮细胞之间以紧密连接或闭合小带形式连接成无间隙存在的整体，基底膜紧密连接，吞饮小泡偶见；神经元细胞膜电子密度很高，细胞内含有1个大而圆的核，表面光滑；白质中髓鞘形态层次分明线粒体及其他细胞器甚少，偶见小泡。假手术组内皮细胞增大，内皮细胞紧密连接可见微量的变化，表现为紧密连接裂开和连接不规则，基底膜疏松；神经元细胞膜电子密度降低，细胞核出现弥散，表面相对光滑；白质中髓鞘排列紊乱，密度减低，髓鞘中出现层次分离，导致裂隙形成。模型组内皮细胞变化明显，表现为内皮胞质水肿严重和细胞核弥散，伴有附近的神经元核周质和神经毡的均质化改变，内皮细胞紧密连接大量的变化，表现为紧密连接裂开和连接严重不规则，基底膜疏松；神经元细胞膜电子密度很低，细胞核弥散严重，胞质内尼氏体溶解，线粒体和核糖体等细胞器破坏严重，核周可见微空泡形成；白质中髓鞘排列进一步紊乱，可见大量大小空泡，髓鞘丧失，脱髓鞘。治疗组内皮细胞紧密连接得到恢复，表现为紧密连接裂开和连接逐渐规则化，内皮胞质水肿减轻，基底膜疏松减弱相对致密；神经元细胞膜电子密度回复升高，细胞核弥散减弱，表面相对光滑；髓鞘层次渐清晰，密度渐深，大小空泡明显减少，髓鞘丧失及脱髓鞘现象明显改善。

1.6实验结果

1.治疗组的Bederson评分及脑梗死体积均较模型组显著降低(P<0.01)；2.假手术组及模型组脑组织的病理形态学发生了明显的变性坏死改变，治疗组经复元醒脑汤治疗后有所改善。

1.7实验结论

复元醒脑汤治疗脑梗死大鼠可以改善神经缺损行为体征评分和缩小脑组织的梗死体积。

Claims (6)

1.一种治疗脑梗死的中药复方制剂，其特征在于，由下列重量份的原料药制成：人参6-30份，三七粉3-18份，石菖蒲6-45份，水蛭3-12份，益母草9-90份，胆南星6-45份，制大黄3-30份。

2.根据权利要求1所述的治疗脑梗死的中药复方制剂，其特征在于，原料药的重量份分别为：人参18份、三七粉9份、石菖蒲24份、水蛭6份、益母草60份、胆南星40份、制大黄18份。

3.根据权利要求1所述的治疗脑梗死的中药复方制剂，其特征在于，原料药的重量份分别为：人参6份，三七粉3份，石菖蒲6份，水蛭3份，益母草9份，胆南星6份，制大黄3份。

4.根据权利要求1所述的治疗脑梗死的中药复方制剂，其特征在于，原料药的重量份分别为：人参30份，三七粉18份，石菖蒲45份，水蛭12份，益母草90份，胆南星45份，制大黄30份。

5.权利要求1-4任一所述的治疗脑梗死的中药复方制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将人参、石菖蒲、水蛭、益母草、胆南星四味中药纳入非金属容器内，加入2-5倍量的纯净水，搅拌均匀，浸泡，加热至沸腾，加入制大黄，保持沸腾，分离煎出液和药渣；

药渣中加入2-5倍量的纯净水，加热至沸腾，保持沸腾，分离煎出液；

混合两次煎出液，加入三七粉，搅拌均匀，将煎出液浓缩至80℃的相对密度为1.04-1.10，备服。

6.权利要求1-4任一所述的中药复方制剂在制备治疗脑梗死的药物中的用途。