CN104721682A - 一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物,它由如下重量份数的组分制成:生黄芪5~40份、炒白术5~30份、补骨脂5~40份、益智仁5~30份、黄芩5~30份、黄连1~15份、地榆5~30份、木香3~20份、炙甘草1~15份。本发明还公开了上述治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物的制备方法。本发明为临床治疗溃疡性结肠炎这一难治性疾病提供有效的治疗药物,且经济实用,临床应用前景广阔;其制备方法,简单快速、高效,易于操作,再制成片剂、胶囊剂、颗粒剂,方便服用。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域,具体涉及一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物及其制备方法。
背景技术
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种主要累及直肠、结肠黏膜的慢性非特异性炎症,属于炎症性肠病(IBD)范畴,以腹痛、腹泻、粘液脓血便、里急后重为主要临床表现,严重影响身体健康和生活质量。因其病因尚不明确,难以治愈,容易复发和癌变,一直被世界卫生组织(WHO)列为疑难病。在亚洲UC的年发病率为1.0/10万~2.0/10万,患病率为4.0/10万~44.3/10万,我国推测UC患病率为11.6/10万。近年来随着生活水平的提高,饮食结构、生活习惯的改变,环境的变化,以及诊断技术的不断进步,我国溃疡性结肠炎的发病率逐年增高,逐渐成为消化内科的常见疑难病。
UC的内科治疗主要包括抗炎药物及免疫调节药物。旨在控制急性发作,维持缓解和减少复发。目前尚无完全根治的方法。糖皮质激素在1950年被用于IBD治疗[1],至今仍是控制急性炎症期最有效的方法之一。但是有关报道近30%IBD患者使用激素不能达到临床缓解,出现激素依赖或激素耐药。口服大剂量糖皮质激素(CS)(强的松40-60mg或相当剂量的其他类固醇激素)治疗30d内临床改善;或静脉注射大剂量CS治疗7-10d内临床改善,称之为CS治疗有效。反之,在上述限定时间内,患者对CS治疗无反应即被定义为类固醇激素抵抗(Steroid Refractoriness SR)。大部分这样的激素抵抗患者建议使用免疫抑制剂或生物制剂,然而这些制剂在很大一部分病人中仍无效。免疫抑制剂疗法仅使40-60%病人达到缓解,而代表性的生物制剂仅使40%病人诱导缓解。这部分激素耐药及免疫抑制剂治疗无效的难治性UC患者成为临床治疗的难点。干细胞移植治疗成为治疗难治性溃疡性结肠炎的新手段。
中医药治疗难治性溃疡性结肠炎具有一定的临床疗效,尤其在改善激素抵抗,维持缓解方面。中医药认为难治性溃疡性结肠炎的病因病机主要为先天肾阳亏虚,不能温煦脾阳,运化失职,水谷不化,积谷为滞,湿邪内生,蕴滞肠道。湿邪久而瘀滞化热,湿热壅滞肠道,脾胃运化失健,久泄及肾,脾肾两虚,湿浊留恋不化。故难治性溃疡性结肠炎的主要治法为健脾补肾,清肠敛疡,通过改善难治性溃疡性结肠炎患者的激素耐药,目前临床上缺乏最佳药物配比的复方药物,尚不能推广运用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种治疗难治溃疡性结肠炎的复方组合药物,该复方具有健脾补肾,清肠敛疡的功效。
本发明还要解决的技术问题是提供上述复方组合药物的制备方法。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案如下:
一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物,它由如下重量份数的组分制成:生黄芪5~40份、炒白术5~30份、补骨脂5~40份、益智仁5~30份、黄芩5~30份、黄连1~15份、地榆5~30份、木香3~20份、炙甘草1~15份。
上述治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物优选由如下重量份数的组分制成:生黄芪15份、炒白术10份、补骨脂15份、益智仁10份、黄芩10份、黄连3份、地榆10份、木香6份、炙甘草3份。
上述治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物的制备方法,将配方量的生黄芪、炒白术、补骨脂、益智仁、黄芩、黄连、地榆、木香和炙甘草混合,加入5~15倍重量的水,浸泡30~60分钟,煎煮1~4次,每次1~3h,滤过,合并滤液,减压浓缩,离心或过滤得清液,获得液体药物。
本发明还可以将上述液体药物减压浓缩至相对密度1.20~1.35的稠膏,加入药用辅料混匀后,再制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
优选的是,将上述液体药物减压浓缩至相对密度1.20~1.35(60℃)的稠膏,称取糊精,置流化床中,取上述稠膏加水稀释至相对密度为1.15~1.18(20℃),当物料温度升至50℃时,开始喷雾,干燥,过筛,得颗粒剂。流化床的进风温度为60~95℃,进样速度为0.8kg/min以下、雾化压力为0.1~0.5MPa、进风量为800~1200m3/hr,颗粒的干燥温度为50~80℃,干燥时间为1~2小时。
上述治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物在制备治疗难治性溃疡性结肠炎药物中的应用。本发明的中药复方药物经过多年临床验证,具有健脾补肾,清肠敛疡的功效。主治溃疡性结肠炎患者,特别是难治性溃疡性结肠炎表现为反复发作的腹泻、脓血便或血便、腹痛;伴里急后重、腹胀,食少纳差、神疲乏力、腰酸膝软、晨起肠鸣即泻,舌质红,边有齿印,苔薄黄或黄腻,脉滑数或脉沉细。
本发明为临床治疗溃疡性结肠炎这一难治性疾病提供有效的治疗药物,且经济实用,临床应用前景广阔;其制备方法,简单快速、高效,易于操作,再制成片剂、胶囊剂、颗粒剂,方便服用。本发明的复方组合药物具有如下优势:
1、深化了对溃疡性结肠炎中医病机的认识:中医药认为难治性溃疡性结肠炎的病因病机主要为先天肾阳亏虚,不能温煦脾阳,运化失职,水谷不化,积谷为滞,湿邪内生,蕴滞肠道。湿邪久而瘀滞化热,湿热壅滞肠道,脾胃运化失健,久泄及肾,脾肾两虚,湿浊留恋不化。中医认为溃疡性结肠炎多为素体脾胃虚弱,加之外感湿热,或饮食不节,或情志失调,或劳倦太过,致脾胃受损,运化失常,湿热蕴结大肠,传导失司,气血凝滞,腐败成疡,化为脓血。脾胃运化失健,湿热壅滞肠道,久泄及肾,脾肾两虚,寒热错杂,虚实并见的病机特点。虚责之于脾、肾气(阳)虚,实责之于湿热壅滞。故治疗以补肾健脾、清肠化湿为主。药用生黄芪、炒白术、补骨脂、益智仁、黄芩、黄连、地榆、木香、炙甘草。黄芪归脾、肺经,益气健脾,生肌愈疡,《神农本草经》记载其“主痈疽久败创,排脓止痛,大风,痢疾,五痔,鼠瘘,补虚,小儿百病。”;白术归脾、胃经,运脾又可化湿,《药性论》记载“主多年气痢,心腹胀痛,止下泄,……及胃气虚冷痢”,炙甘草归心、肺、脾、胃经,补脾调中,与黄芪、白术合用,健脾益气以复运化之职,杜生湿之源。补骨脂归肾、脾经,功效补肾助阳,温脾止泻,《本草纲目》云“能使心胞之火与命门之火相通,故元阳坚固,骨髓充实,涩以治脱也”,益智仁入脾,肾经,温脾,暖肾,固气,涩精,王好古曰其可“益脾胃,理元气,补肾虚”,二药共起补肾之功,补肾以助气化之功,气化湿亦化。黄芩归肺、胆、脾、胃、大肠、小肠经,苦寒泄热,能清肺胃胆及大肠经之湿热,《神农木草经》谓可治“肠澼泄利”,《本草正义》亦提到:“枯者清上焦之火,……,实者凉下焦之热,能除赤痢,……便血……。”黄连入心、脾、胃、胆、大肠经,苦寒,苦能燥湿,寒能胜热,善清脾胃大肠湿热,为湿热泻痢之要药。《神农本草经》:“主肠癖腹痛下痢。”《名医别录》云:“主五脏冷热,久下泄澼脓血”。地榆苦酸涩,微寒,归大肠、肝经,长于泄热而凉血止血,《本草经疏》曰“地榆凉血止血,利肠,解毒通淋”。《药性赋》记载其“主下部积热之血痢”。肠道湿热贯穿本病始终,故以入大肠经之黄连、黄芩清肠化湿,以袪除病理因素,以入大肠经之地榆凉血止血,宁络愈疡;配伍木香行气导滞,调气则后重自除。诸药合用,共奏清肠化湿之效。黄芩、黄连、地榆与健脾补肾药配伍,寒温并用,使下利止而不致恋邪,祛邪而不伤正。
2、研究方法先进:溃疡性结肠炎间充质干细胞(MSCs)迁移分化减少是难治性溃疡性结肠炎免疫紊乱、肠黏膜屏障难以修复的重要机制,实验研究利用具有MSCs减少及免疫调节紊乱、肠屏障破坏的溃疡性结肠炎(UC)动物模型,研究健脾补肾、清肠化湿方是否促进MSCs的迁移分化,修复肠黏膜屏障的作用机制。研究结果表明:MSCs增强大鼠结肠组织中粘液基因Muc2、Muc3的表达,修复粘液屏障,中药干预后的MSCs移植组效果优于单纯MSCs移植组,并且随着时间的延长,修复效果更明显,并且能够改善结肠组织大体形态及黏膜组织病理学。本研究从肠道屏障途径观察以MSCs为枢纽,健脾补肾、清肠化湿方黏膜修复的作用机制,为临床用药提供客观依据。
3、制剂工艺合理:该制备工艺简单快速、高效,易于操作,制备出的片剂、胶囊剂、颗粒剂具有减小用药体积,增加药物稳定性,便于贮存运输、携带、服用等优点,既保持了汤剂药效发挥迅速的特点,又克服了汤剂用药体积大易变质霉败的缺点。
附图说明
图1不同时间点各组大鼠结肠组织IL-6、IL-17、TGF-β水平。其中,与模型组相比,*P<0.05;与BMSCs移植组相比,**P<0.05。
图2健脾补肾、清肠化湿方对大鼠结肠黏膜Muc2、Muc3mRNA表达量的影响。其中,与模型组相比,*P<0.05;与BMSCs移植组相比,**P<0.05。
具体实施方式
根据下述实施例,可以更好地理解本发明。然而,本领域的技术人员容易理解,实施例所描述的内容仅用于说明本发明,而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1:
一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物,它由如下重量份数组分制成:生黄芪15份、炒白术10份、补骨脂15份、益智仁10份、黄芩10份、黄连3份、地榆10份、木香6份、炙甘草3份。共九味药。
按重量份数称取以上九味药,加10倍重量水煎煮3次(第一次浸泡60min),每次1.5h,滤过,合并滤液,减压浓缩至适量,直管式高速离心机离心,再加水至规定量,混匀,分装,流通蒸汽灭菌45min,即得液体制剂。
实施例2:
一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物,它由如下重量份数的组分制成:生黄芪20份、炒白术25份、补骨脂10份、益智仁5份、黄芩15份、黄连3份、地榆15份、木香3份、炙甘草3份。共九味药。
按重量份数称取以上九味药,加15倍量水浸泡45min,煎煮2次,每次1h,滤过,合并滤液,滤液减压浓缩至适量,离心或滤过除去沉淀,再减压浓缩至相对密度1.20~1.35(60℃)的稠膏,加入微晶纤维素和糊精适量,制软材,制颗粒,真空干燥,整粒过筛,装胶囊,即得胶囊剂。
实施例3:
一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物,它由如下重量份数的组分制成:生黄芪30份、炒白术5份、补骨脂10份、益智仁20份、黄芩5份、黄连10份、地榆10份、木香10份、炙甘草1份。共九味药。
按重量份数称取以上九味药,加5倍重量水,浸泡60min,煎煮3次,每次2.5小时,合并滤液,减压浓缩至适量,离心或者过滤去除沉淀,再减压浓缩至相对密度1.20~1.35(60℃)的稠膏,加入乳糖或玉米淀粉,需要时加入硬脂酸镁,真空干燥,制粒,压片,即得片剂。
实施例4:
一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物,它由如下重量份数的组分制成:生黄芪15份、炒白术10份、补骨脂10份、益智仁15份、黄芩10份、黄连5份、地榆20份、木香15份、炙甘草10份。共九味药。
按重量份数称取以上九味药,加20倍重量水,浸泡30min,煎煮2次,每次1.5小时,合并滤液,减压浓缩至适量,离心或者过滤除去沉淀,再减压浓缩至相对密度1.20~1.35(60℃)的稠膏。取上述稠膏加水稀释至相对密度为1.15~1.18(20℃),当物料温度升至50℃时,开始进液,流化床的进风温度:60~95℃,进样速度为0.8kg/min以下、雾化压力为0.1~0.5MPa、进风量:800~1200m3/hr。喷雾,干燥(50~80℃,1~2小时),过筛,得颗粒,即为颗粒剂。
实施例5:任选上述实施例制备的复方组合药物,进行中药复方药物的基础实验。
1 材料与方法
1.1 实验材料
BMSCs提取:SPF级雄性SD大鼠,4-5周龄,体重150g,由扬州大学动物中心提供;体内实验:60只雄性SPF级SD大鼠,体重(200±20)g,6-7w鼠龄,购自扬州大学,许可证号:SCXK(苏)2013-0026,常规饲养。
5%TNBS水溶液:Sigma公司产品,购自西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司,批号1412514;水合氯醛:上海中西药业股份有限公司新冈制药厂出品,批号:080310;无水乙醇:南京化工厂产品;大鼠IL-1βELISA试剂盒(美国RD公司,Quantikine),大鼠IL-6ELISA试剂盒(美国RD公司,Quantikine),大鼠TNF-αELISA试剂盒(美国RD公司,Quantikine)。TRIzol(Invitrogen,15596-026);cDNA第一链合成试剂盒(Fermentas,Lithuania,K1622);Realltime PCR Master Mix(SYBR Green(TOYOBO,QPK201);Agarose(Biowest,111860);50×TAE电泳缓冲液(南京建成,KGM020);氯仿(南京化试);异丙醇(南京化试)酶标仪550(美国Bio-Rad公司),高速低温冷冻离心机(美国IEC公司),玻璃匀浆器(构自哈尔滨道勤生物公司),2ml离心管(美国BD公司),移液器(德国Eppendorf公司)。超净台(苏州净化,SW-CF-1FD);通风橱(苏州亿达,单柜型);立式压力锅(上海博讯,YXQ-LS-50);电热鼓风干燥箱(上海圣欣,101AS-3);分析天平(Sartorius,BL310,BL21S);组织匀浆器;EP管(PCR-02(D)-C,MCT-150-C);紫外光度仪(SHIMADZU,UV-2450);PCR循环仪(Labnet,MultiGene Gradient);荧光定量PCR循环仪(中山达安,DA7600);核酸电泳仪(北京六一,DYY-6B);凝胶成像仪(BIO-RAD,Gel Doc XR)。
1.2 实验方法
40只SD大鼠随机分为6组,A组:BMSCs联合中药组,B组:BMSCs组;C组:模型组;D组:空白组。参照Morris[5]等方法,采用TNBS灌肠法制作UC大鼠模型。造模前进食24h,,30只造模大鼠予10%水合氯醛(0.3mL/100g)腹腔注射麻醉;麻醉状态大鼠,用大鼠灌胃针管由肛门轻缓插入约8cm,缓慢推注造模液,诱导UC形成;确保注入的TNBS能在肠内弥散分布,注入后将大鼠持续倒置3min。
造模成功24h后,A组、B组分别经尾静脉注入1.0×106细胞悬液1ml,C组、D组大鼠各从鼠尾静脉回输生理盐水1ml。此外,A组另给予健脾补肾、清肠化湿方灌胃给药(实施例1),给药体积为2ml/100g,连续10d。
分别于第5天和第10天每组各处死5只,取病变明显的结肠组织一部分迅速置于液氮中保存,用于ELISA和RT-PCR检测;另一部分4%甲醛中固定,24h内石蜡包埋并HE染色切片,观察组织病理学改变。
1.3 统计学处理
采用SPSS19.0统计软件处理,实验数据以均数±标准差(x±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2 实验结果
2.1 各组大鼠结肠组织中细胞因子IL-6、IL-17、TGF-β水平的影响
治疗第5天,与空白组比较,造模后结肠组织中IL-6、IL-17水平显著增高(P<0.001),TGF-β水平降低(P<0.05);与模型组比较,A、B组IL-6水平明显降低(P<0.05),A组优于B组(P<0.05);A组IL-17水平降低、TGF-β水平升高(P<0.05);提示BMSCs以及联合中药治疗均能降低UC大鼠结肠组织中IL-6的水平,且联合治疗优于单纯BMSCs治疗。
治疗第10天,与模型组比较,A、B组IL-6、IL-17水平明显降低(P<0.05),TGF-β水平升高(P<0.05);提示随着时间延长,BMSCs以及联合中药治疗均能降低UC大鼠结肠组织中IL-6、IL-17的水平,提高TGF-β水平,且联合治疗在改善IL-6、TGF-β水平方面较单纯BMSC治疗有统计学意义(P<0.05)(见表1,表2)。
表1 治疗第5天各组大鼠结肠组织IL-6、IL-17、TGF-β水平
注:与模型组相比,*P<0.05;与MSCs移植组相比,#P<0.05。
表2 治疗第10天各组大鼠结肠组织TGF-β、IL-6、IL-17水平
注:与模型组相比,*P<0.05;与MSCs移植组相比,#P<0.05
2.2 Real time-PCR检测结肠黏膜Muc2、Muc3mRNA的表达水平
第5天,与空白组比较,模型组和各治疗组结肠组织Muc2、Muc3mRNA表达量明显降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组A、B组Muc2mRNA水平升高(P<0.05),A组Muc3mRNA水平升高(P<0.05)。
第10天,与模型组比较,A、B组Muc2、Muc3mRNA水平升高(P<0.05),且联合治疗组在升高Muc2mRNA水平方向优于BMSCs移植组。(P<0.05)。(见图1,图2)
2.3 UC模型的DAI评分和病理学观察
模型组大鼠可见黏膜、黏膜下层广泛溃疡形成,大量中性粒细胞、淋巴细胞等炎性细胞浸润,腺体破坏,结构紊乱,杯状细胞减少,隐窝脓肿形成。治疗第5天,MSCs移植组较模型组好转,治疗第10天,各组较模型组明显好转。主要表现为中度慢性炎症,部分黏膜及黏膜下层仍有少量炎细胞浸润,坏死的黏膜上皮基本修复,溃疡基本愈合,隐窝脓肿消失。
治疗第5天,MSCs移植组较模型组结肠病理组织学评分差异均有统计学意义(P<0.05),MSCs移植各组结肠病理组织学评分差异无统计学意义(P>0.05)。
治疗第10天,MSCs移植组较模型组结肠病理组织学评分差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组间比较,A组较B组、D组相比,有统计学意义(P<0.05)。
表3 第10天各组大鼠结肠病理组织学评分(x±s)
注:与模型组相比,*P<0.05。
Claims (7)
1.一种治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物,其特征在于,它由如下重量份数的组分制成:生黄芪5~40份、炒白术5~30份、补骨脂5~40份、益智仁5~30份、黄芩5~30份、黄连1~15份、地榆5~30份、木香3~20份、炙甘草1~15份。
2.根据权利要求1所述的治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物,其特征在于,它由如下重量份数的组分制成:生黄芪15份、炒白术10份、补骨脂15份、益智仁10份、黄芩10份、黄连3份、地榆10份、木香6份、炙甘草3份。
3.权利要求1所述的治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物的制备方法,其特征在于,将配方量的生黄芪、炒白术、补骨脂、益智仁、黄芩、黄连、地榆、木香和炙甘草混合,加入5~15倍重量的水,浸泡30~60分钟,煎煮1~4次,每次1~3h,滤过,合并滤液,减压浓缩,离心或过滤得清液,获得液体药物。
4.根据权利要求3所述的治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物的制备方法,其特征在于,将液体药物减压浓缩至相对密度1.20~1.35的稠膏,加入药用辅料混匀后,再制成片剂、胶囊剂或颗粒剂。
5.根据权利要求4所述的治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物的制备方法,其特征在于,将液体药物减压浓缩至相对密度1.20~1.35的稠膏,称取糊精,置流化床中,取上述稠膏加水稀释至相对密度为1.15~1.18,当物料温度升至50℃时,开始喷雾,干燥,过筛,得颗粒剂。
6.根据权利要求5所述的治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物的制备方法,其特征在于,流化床的进风温度为60~95℃,进样速度为0.8kg/min以下、雾化压力为0.1~0.5MPa、进风量为800~1200m3/hr,颗粒的干燥温度为50~80℃,干燥时间为1~2小时。
7.权利要求1所述的治疗溃疡性结肠炎的复方组合药物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
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