CN105012219B - 藏灵菇菌发酵乳提取物制备及其在化妆品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种藏灵菇菌发酵乳提取物及其在化妆品中的应用，其中藏灵菇菌发酵乳提取物为藏灵菇同至少一种益生菌微生物，特别是乳酸菌属种的微生物复合发酵提取物，其通过分离和破碎技术，得到含有发酵上清液及菌体胞溶提取物的活性成份。进一步的，所述藏灵菇菌发酵乳提取物中具有美白、祛斑、保湿、舒缓皮肤刺激的功效。

Description

藏灵菇菌发酵乳提取物制备及其在化妆品中的应用

技术领域

本发明涉及一种藏灵菇菌发酵乳提取物，及其作为一种活性成份在化妆品领域的应用，特别是在美白、祛斑、保湿、舒缓皮肤刺激方面的应用。

背景技术

藏灵菇菌是源自西藏雪原的特有珍惜菌种，又被称为开菲尔粒(kefir grain)。一种乳白色胶块状物，是由多种细菌和酵母包裹在由蛋白质和多糖构成的菌团颗粒。主要成分是水、粘性多糖、少量蛋白、脂质和其他成份。

报道称，藏灵菇菌发酵乳在发酵过程中，其多种乳酸菌和酵母菌相互作用，发酵产物中产生胞外多糖、生物活性肽、蛋白水解肽及多种酶类物质，其营养比原乳有了很大提高，且表现出多种生理功能。

R.O.Diniz等人研究表明，藏灵菇菌发酵液对角叉胶引起的大鼠炎症具有抑制作用，涂抹藏灵菇菌发酵液3h内，炎症抑制率为62％。对左旋糖酐引起的炎症1h后抑制率为100％，对组织胺引起的炎症1h后抑制率为52％。

刘变芳等人从藏灵菇中分离出的乳酸菌大都具有抗氧化活性。刘慧等研究也发现藏灵菇菌发酵乳具有较强的抗氧化活性。

另有研究证明，藏灵菇菌发酵乳具有抑菌效果，能够调节面部微生态平衡及调节面部pH的功效。

CN1826917A公开了牛奶雪莲菌保健饮品，其特征在于它包含雪莲活体、牛奶，所述雪莲活体的重量份为3-8，所述牛奶的重量份为200-250，所述牛奶为新鲜纯牛奶。长期服用能提高人的免疫能力，对失眠、降血脂、降血压、去老年斑有明显疗效作用，对抗癌有一定的辅助功效。本发明还同时公布了生产这种牛奶雪莲菌保健饮品的方法。

研究表明，多种乳酸菌的发酵滤液对皮肤护理起重要作用。经过筛选得到的乳酸菌，其发酵滤液已被证实具有保湿、抗氧化、光防御、调节皮肤pH的功效。

藏灵菇菌发酵乳提取物应用于皮肤护理还鲜有报道，本发明具体阐述一种温和、天然美白、抗衰老、保湿、舒缓皮肤刺激的多重功效的化妆品功能成份。

发明人发现，与单一的藏灵菇菌发酵乳提取物相比，藏灵菇菌同益生菌混合发酵乳提取物具有提高的多重护肤功效，包括美白祛斑、延缓或消除皱纹产生、保湿、调节皮肤微生态平衡及皮肤pH、舒缓皮肤刺激。将这种发酵提取物应用到化妆品，发挥其活性功能。

发明内容

本发明涉及的藏灵菇菌发酵乳提取物是由藏灵菇菌同至少一种益生菌微生物共同混合发酵乳而来，其中益生菌微生物为乳酸菌。培养基基本为牛乳，也可为其他动物乳或脱水乳粉。发酵得到的酸乳经过菌体收集、滤液脱蛋白、菌体破碎、调节pH、灭菌等步骤得到液体形式的发酵提取物。

藏灵菇菌发酵乳提取物的制备方法是通过以下步骤实现的：

(1)培养基加热灭菌，

(2)将藏灵菇菌及至少一种益生菌微生物接种到培养基中，

(3)发酵，获得发酵乳，

(4)将发酵乳过滤或离心处理，过滤物用纯净水洗涤，得藏灵菇菌团备用，滤液备用，

(5)步骤(4)的滤液加热灭菌，离心获得滤液备用，

(6)将步骤(5)滤液与步骤(4)藏灵菇菌团混合，进行菌体破碎，均质，得发酵提取物。

其中：

培养基为乳基培养基，优选牛乳，步骤(1)的灭菌温度为70℃～120℃，时间为10～30min，

藏灵菇菌接种量基于100重量份的培养基的量为0.1～10重量份，优选0.5～5重量份，更优选为1～3重量份，

益生菌微生物接种量基于100重量份的培养基的量为0.1～10重量份，优选0.5～5重量份，更优选为1～3重量份，

发酵温度为10℃～43℃，优选15℃～40℃，更优选为20℃～37℃，

发酵时间为4h～48h，优选8h～40h，更优选为16h～24h，

步骤(5)的滤液灭菌温度为60℃～100℃，优选为70℃～90℃，更优选为80℃，加热时间为10min～30min，优选为15min～25min，更优选为20min，

离心转速为3000r/min～10000r/min，优选为4000r/min～9000r/min,更优选为6000～7000r/min，离心时间为15min～35min，更优选为20～30min，

所述的菌体破碎通过组织匀浆器处理来实现，处理时间为0.5～5min，优选1～4min，更有选2～3min，

所述均质处理为高压均质，其中压力为50～150Mpa，优选为80～120Mpa，更优选为100～110Mpa。

进一步的，发酵pH控制在4.0～7.0。优选4.5～6.5。

进一步的调节pH值为5.5-6.5。

本发明的组织匀浆器为本领域常规的设备，适合的设备包括单不限于：常州华冠JJ-2B型组织捣碎匀浆机。

所述微生物选自嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、唾液乳杆菌(Lactobacillus sali varius)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)乳酸链球菌(Streptococcus lactis)、瑞士乳杆菌(lactobacillus helveticus)植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)及其混合物。

发酵培养基中进一步添加营养物质，所述营养物质选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和/或乳糖，优选葡萄糖。

本发明的藏灵菇菌发酵乳提取物在制备化妆品中的用途，所述用途包括处理皮肤黯沉、保湿、舒缓皮肤刺激、皱纹相关障碍的皮肤问题。

进一步的，本发明的藏灵菇菌培养液用于预防或处理皮肤色素沉着、肤色黯沉、肤色不均和/或美白皮肤。

进一步的，本发明的藏灵菇菌培养液用于预防或处理皮肤由生理或物理条件造成的皮肤皱纹、细纹。

进一步的，本发明的藏灵菇菌培养液用于预防或处理皮肤干燥、粗糙。

进一步的，本发明的藏灵菇菌培养液用于预防或处理皮肤过敏。

当其应用于化妆品时，藏灵菇菌发酵乳提取物的量为0.1％～10％重量，优选为0.5％～8％重量，更优选为1％～5％重量。

本发明还涉及含有藏灵菇菌发酵乳提取物的化妆品组合物，其中藏灵菇菌发酵乳提取物含量基于化妆品组合物总重量为0.1％～10％重量。

进一步的，本发明的化妆品组合物组合物在所有类型的化妆品载体中是有效的。适合的化妆品载体的非限制性实例包括，乳剂、膏霜、化妆水、溶液(水性或水-醇)、凝胶，其对本领域普通技术人员是已知的。

本申请的组合物还可以含有其他化妆品已知的其他组分。

这些组分选自但不限于保湿剂、润肤剂、防晒剂包括有机或者无机防晒剂、表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂或者凝胶剂等成分。

保湿剂

可用于本发明组合物的保湿剂的非限制性实例包括：氨基酸、糖类例如：赤藻糖醇、果糖、葡萄糖、麦芽糖、甘露醇，多元醇例如：甘油、甘油聚合物、丙二醇、乙二醇、1，3-丁二醇，天然来源的物质，例如蜂蜜、透明质酸、氢化蜂蜜、聚合物保湿剂，例如聚乙二醇、聚甘油基山梨糖醇、聚吡咯烷酮羧酸及其盐、或其混合物。

润肤剂

可用于本发明组合物的润肤剂包括：植物来源、动物来源、矿物来源和或者合成来源的油脂，或者硅氧烷化合物。优选植物来源、矿物来源或者合成来源的油脂或者硅氧烷化合物及其混合物。

本发明的植物来源的油脂选自：甜杏仁油、油菜籽油、小茴香油、橄榄油、橙油、低芥酸菜子油、洋甘菊花油、黄瓜油、石栗种子油、肉桂油、玉米油、牛蒡种子油、芝麻油、米糠油、大米胚芽油、山茶种子油、红花种子油、牛油树脂油、薏苡种子油、薄荷油、大豆油、茶子油、山茶种子油、蔷薇果果实油、杏仁油、棕榈仁油、棕榈油、混合红花种子油、混合向日葵油、花生油、向日葵籽油、葡萄籽油、霍霍巴油、夏威夷核果油、池花籽油、椰子油、桉树油、迷迭香叶油、月见草油以及它们的混合物。

合成来源的油脂选自：异壬酸十三烷基酯、异硬脂酸异硬脂醇酯、异硬脂酸异十六烷基酯、异硬脂酸异丙酯、异壬酸异癸酯、辛酸鲸蜡酯、异壬酸异壬酯、肉豆蔻酸二异丙酯、肉豆蔻酸异十六烷基酯、肉豆蔻酸异十三烷基酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异硬脂醇酯、棕榈酸异十六烷基酯、棕榈酸异癸酯、棕榈酸异丙酯、棕榈酸辛酯、辛酸/癸酸甘油三酯、三-2-乙基己酸甘油酯、癸二酸二甘油酯、二(2-乙基己酸)新戊二醇酯、二聚体酸二异丙酯、生育酚、生育酚乙酸酯、蓖麻油、海龟油、水貂油、卵黄油、蓖麻油、三辛酸甘油酯、三异棕榈酸甘油酯、聚甘油基-2-三异硬脂酸酯、三异硬脂酸三羟甲基丙烷酯、肉豆蔻酸异丙酯以及它们的混合物。

硅氧烷化合物选自：如环己硅氧烷、环戊硅氧烷、环丁硅氧烷、二甲基硅氧烷和这些的混台物。

防晒剂

适合本发明的防晒剂包括包括苯甲酮及其衍生物，例如二苯甲酮、二苯甲酮-1、二苯甲酮-2、二苯甲酮-3、二苯甲酮-4、二苯甲酮-5、二苯甲酮-6、二苯甲酮-7、二苯甲酮-8、二苯甲酮-9、二苯甲酮-10、二苯甲酮-11、二苯甲酮-12、水杨酸类，如水杨酸苄酯、丁基PABA、肉桂酸酯类例如甲氧桂乙酯、DEA-甲氧基肉桂酸酯、肉桂酸二异丙基甲酯、乙基二羟基丙基PABA、二异丙基肉桂酸乙基酯、甲氧基肉桂酸乙基酯、乙基PABA、尿刊酸乙酯、甘油辛酸酯二甲氧基肉桂酸酯、甘油PABA、水杨酸乙二醇酯、水杨酸三甲环己酯、对-甲氧基肉桂酸异戊基酯、PABA、PABA酯、Parsol1789、和水杨酸异丙基苄酯。

表面活性剂

本发明的表面活性剂是指具有亲水和疏水部分的化合物，其包括非离子、阳离子、阴离子和两性离子表面活性剂。

非限制性实例包括甘油的酯类、丙二醇的酯类、聚乙二醇的脂肪酸酯类、聚丙二醇的脂肪酸酯类、山梨糖醇的酯类、失水山梨糖醇酐的酯类、羧酸共聚物、葡萄糖的酯和醚类、乙氧基化醚类、乙氧基化醇类、磷酸烷基酯类、酰基乳酸酯类、皂类、及其混合物。

抗氧化剂

可用于本发明组合物的抗氧剂的非限制性实例包括抗坏血酸及其衍生物例如：抗坏血酸多肽、抗坏血酸基二棕榈酸酯、抗坏血酸基甲基甲硅烷醇果胶酸酯、抗坏血酸基棕榈酸酯、抗坏血酸基硬脂酸酯、抗坏血酸镁、抗坏血酸磷酸镁、甲基甲硅烷醇抗坏血酸酯，BHA、BHT，阿魏酸乙酯、阿魏酸，天然植物抗氧化剂、如绿茶或葡萄籽提取物。

增稠剂或者凝胶剂

增稠剂或胶凝剂包括可增加组合物粘度或者形成凝胶形式的物质。优选的增稠剂包括可增加组合物的粘度，增稠剂可以增加本发明组合物的稳定性。

可用于本发明全文的增稠剂的非限制性实例包括羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖和树胶。

羧酸聚合物的实例包括丙烯酸类聚合物，商购可得的羧酸聚合物的实例包括卡波姆类，交联的聚丙烯酸酯聚合物的非限制性实例包括阳离子和非离子聚合物，聚丙烯酰胺聚合物，选自聚丙烯酰胺、异链烷烃和月桂基聚氧乙烯醚、丙烯酰胺的多嵌段共聚物。多糖类的非限制性实例包括纤维素、羧甲基羟乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟乙基乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、微晶纤维素，可用于本发明的树胶的非限制性实例包括阿拉伯胶、琼脂、藻胶、藻酸、藻酸钠、支链淀粉、角叉菜胶钙、明胶、胶凝糖胶、瓜尔胶、瓜尔羟丙基三甲基氯化铵、水合二氧化硅、羟丙基壳聚糖、羟丙基瓜尔胶、刺梧桐树胶、豆角胶、黄原胶及其混合物。

本发明的藏灵菇菌发酵乳提取物用在化妆品中，化妆品的pH值优选4～7，优选为5.5～6.5，这样更接近皮肤正常酸碱度，有利于保持皮肤的正常生理功能。

本发明所述的藏灵菇菌应用到化妆品中，通过皮肤局部施用此类化妆品，持续使用所需时间，可以达到改善皮肤的部分效果。特别是对美白、祛斑、保湿、抗老化、舒缓皮肤刺激的特别有效。

附图说明

图1为志愿者面部皮肤皱纹数量变化情况。

图2为志愿者面部皮肤黑素变化情况。

图3为志愿者面部皮肤水合度变化情况。

图4为志愿者面部皮肤接受乳酸刺激实验刺痛程度变化情况。

具体实施方式

为更好的理解本发明的内容，结合一些具体实施例子做进一步说明。

实施例1

藏灵菇菌发酵乳提取物的制备

取1000g牛乳，加热到80℃，灭菌20min时间，将藏灵菇菌接种量为20g和乳酸链球菌(Streptococcus lactis)活化液接种量为10g加入到无菌牛乳中，25～37℃静置培养24h，此时牛乳状态变得粘稠，用滤网过滤，拦截下藏灵菇菌团，无菌水清洗。滤液经80℃加热20min，离心去除沉淀，离心条件为6000r/min，处理20min，取滤液，将藏灵菇菌菌体同滤液混合后，经细胞匀浆机破碎菌体处理5min，将匀浆液经高压均质机均质，均质条件为100Mpa,均质3遍，制得藏灵菇菌发酵乳提取物，以下简称Kerfir.SLA。

实施例2

通实施例1，区别在于将乳酸链球菌(Streptococcus lactis)替换为

肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)。以下简称Kerfir.LME

实施例3

通实施例1，区别在于将乳酸链球菌(Streptococcus lactis)替换为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。以下简称Kerfir.LPA.

实施例4

通实施例1，区别在于将乳酸链球菌(Streptococcus lactis)替换为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。以下简称Kerfir.LPL.

对比例1

单一藏灵菇菌发酵乳提取物的制备

取1000g牛乳，加热到80℃度，灭菌20min时间，将藏灵菇菌接种量20g接种到无菌牛乳中，25～37℃静置培养24h，此时牛乳状态变得粘稠，用滤网过滤，拦截下藏灵菇菌团，无菌水清洗。滤液经80℃加热20min，离心去除沉淀，离心条件为6000r/min，处理20min，取滤液，将藏灵菇菌菌体同滤液混合后，经细胞匀浆机破碎菌体处理5min，将匀浆液经高压均质机均质，均质条件为100Mpa,均质3遍，制得单一藏灵菇菌发酵乳提取物物。

对比例2

普通藏灵菇菌发酵乳提取物的制备

取1000g牛乳，加热到80℃度，灭菌20min时间，将藏灵菇菌20g接种到无菌牛乳中，25～37℃静置培养24h，此时牛乳状态变得粘稠，用滤网过滤，去除菌体，保留滤液。滤液经80℃加热20min，离心去除沉淀，离心条件为6000r/min，处理20min，制得普通藏灵菇菌发酵乳提取物。

实施例5

含有藏灵菇菌发酵乳提取物物精华露，用于皮肤功效测试。

藏灵菇菌发酵乳提取物的皮肤功效测试

由40名志愿者组成的测试组(年龄30～58岁)，平均分为4组，分别为藏灵菇菌发酵乳提取物组、单一藏灵菇菌发酵乳提取物组、普通藏灵菇菌发酵乳提取物组和空白对照组。本测试遵循随机和双盲测试原则。

测试周期为8周，测试期间，受试者每日早晚于面部使用含提取物的精华露或安慰剂精华露，分别于0周、4周、6周、8周对志愿者进行面部皮肤测试。

面部皮肤测试是通过VISIA全脸分析仪拍照分析面部皱纹变化情况，MPA580皮肤测试仪分析面部黑素、水合度变化情况，乳酸刺激实验测定皮肤敏感度变化情况。

其中乳酸刺激实验是这样操作的，试验前志愿者统一使用温和清洁剂清洗面部皮肤，然后用含有10％乳酸的滤纸片贴于鼻唇沟处，用4分法分别记录志愿者在2.5min和5min时的刺痛感觉，无剌痛为0分、轻度刺痛为1分、中度刺痛为2分、重度刺痛为3分。两次结果相加作为评价皮肤敏感度的结果。

实验结果显示，使用含有藏灵菇菌发酵乳提取物精华露的各实验组面部皱纹数量和深度优于其他实验组，其中含有植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的藏灵菇提取物组皱纹数量下降达20％。空白组下降4％，普通藏灵菇菌发酵提取物下降8％，单一藏灵菇菌发酵提取物下降12％。说明藏灵菇菌发酵乳提取物作为有效活性成份，应用于化妆品中，能有效抚平皱纹和预防皱纹产生。

实验结果显示，使用含有藏灵菇菌发酵乳提取物精华露的实验组面部黑色素含量下降幅度由于其他实验组，其中含有副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)的藏灵菇菌提取物组黑色素下降可达22％，而空白组下降4％，普通藏灵菇菌发酵提取物下降8％，单一藏灵菇菌发酵提取物下降12％，说明该藏灵菇菌发酵乳提取物作为有效的活性成份，应用于化妆品中，能有效和显著地提亮与增白肤色。

实验结果显示，使用含有藏灵菇菌发酵乳提取物精华露的实验组面部皮肤水合度上升10％～15％，Kerfir.LME组最优。而空白组上升3.3％，普通藏灵菇菌发酵提取物上升5.2％，单一藏灵菇菌发酵提取物上升8％。说明该提取物作为有效的活性成份，应用于化妆品中，能预防和克服皮肤干燥问题。

实验结果显示，使用含有藏灵菇菌发酵乳提取物精华露的实验组面部皮肤接敏感度下降了约66％～76％，Kerfir.SLA组最优。而空白组下降44％，普通藏灵菇菌发酵提取物下降52％，单一藏灵菇菌发酵提取物下降58％。说明藏灵菇菌提取物作为有效的活性成份，应用于化妆品中，可以降低皮肤敏感度，增强皮肤屏障功能。，

实施例4：化妆水

实施例5：保湿霜

实施例6：防晒霜

上述仅选自本发明的具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均属于侵犯本发明保护范围的行为。

Claims (34)

1.一种含有藏灵菇菌发酵乳提取物的化妆品组合物，其中藏灵菇菌发酵乳提取物含量基于化妆品组合物总重量为0.1％～10％重量，所述藏灵菇菌提取物由藏灵菇菌同至少一种益生菌微生物在发酵培养基中，通过培养得到的提取物，所述的藏灵菇菌发酵乳提取物，通过下述步骤制备：

(1)培养基加热灭菌，

(2)将藏灵菇菌及至少一种益生菌微生物接种到培养基中，

(3)发酵，获得发酵乳，

(4)将发酵乳过滤或离心处理，过滤物用纯净水洗涤，得藏灵菇菌团备用，滤液备用，

(5)步骤(4)的滤液加热灭菌，离心获得滤液备用，

(6)将步骤(5)滤液与步骤(4)藏灵菇菌团混合，进行菌体破碎，均质，得发酵提取物。

2.如权利要求1所述的化妆品组合物，其中：

培养基为乳基培养基，步骤(1)的灭菌温度为70℃～120℃，时间为10～30min，

藏灵菇菌接种量基于100重量份的培养基的量为0.1～10重量份，

益生菌微生物接种量基于100重量份的培养基的量为0.1～10重量份，

发酵温度为10℃～43℃，

发酵时间为4h～48h，

步骤(5)的滤液灭菌温度为60℃～100℃，加热时间为10min～30min，

离心转速为3000r/min～10000r/min，离心时间为15min～35min，

所述的菌体破碎通过组织匀浆器处理来实现，处理时间为0.5～5min，

所述均质处理为高压均质，其压力为50～150Mpa。

3.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，培养基为牛乳。

4.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，藏灵菇菌接种量基于100重量份的培养基的量为0.5～5重量份。

5.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，藏灵菇菌接种量基于100重量份的培养基的量为1～3重量份。

6.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，益生菌微生物接种量基于100重量份的培养基的量为0.5～5重量份。

7.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，益生菌微生物接种量基于100重量份的培养基的量为1～3重量份。

8.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，发酵温度为15℃～40℃。

9.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，发酵温度为20℃～37℃。

10.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，发酵时间为8h～40h。

11.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，发酵时间为16h～24h。

12.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，步骤(5)的滤液灭菌温度为70℃～90℃。

13.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，步骤(5)的滤液灭菌温度为80℃。

14.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，步骤(5)的滤液的加热时间为15min～25min。

15.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，步骤(5)的滤液的加热时间为20min。

16.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，离心转速为4000r/min～9000r/min。

17.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，离心转速为6000～7000r/min。

18.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，离心时间为20～30min。

19.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，组织匀浆器处理时间为1～4min。

20.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，组织匀浆器处理时间为2～3min。

21.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，高压均质压力为80～120Mpa。

22.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，高压均质压力为100～110Mpa。

23.如权利要求2所述的化妆品组合物，发酵pH控制在4.0～7.0。

24.如权利要求23所述的化妆品组合物，发酵pH控制在4.5～6.5。

25.如权利要求2所述的化妆品组合物，进一步的调节pH值为5.5-6.5。

26.如权利要求2所述的化妆品组合物，其中，益生菌微生物选自嗜酸乳杆菌、副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、短乳杆菌、保加利亚乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳杆菌、嗜热链球菌、肠球菌、肠膜明串珠菌、乳酸乳球菌及其混合物。

27.如权利要求2所述的化妆品组合物，发酵培养基中进一步添加营养物质，所述营养物质选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和/或乳糖。

28.如权利要求27所述的化妆品组合物，所述营养物质为葡萄糖。

29.藏灵菇菌发酵乳提取物在制备化妆品中的用途，所述化妆品用于处理包括皮肤黯沉、保湿、舒缓皮肤刺激、皱纹相关障碍的皮肤问题，

所述藏灵菇菌提取物由藏灵菇菌同至少一种益生菌微生物在发酵培养基中，通过培养得到的提取物，所述的藏灵菇菌发酵乳提取物，通过下述步骤制备：

(1)培养基加热灭菌，

(2)将藏灵菇菌及至少一种益生菌微生物接种到培养基中，

(3)发酵，获得发酵乳，

(4)将发酵乳过滤或离心处理，过滤物用纯净水洗涤，得藏灵菇菌团备用，滤液备用，

(5)步骤(4)的滤液加热灭菌，离心获得滤液备用，

(6)将步骤(5)滤液与步骤(4)藏灵菇菌团混合，进行菌体破碎，均质，得发酵提取物。

30.如权利要求29所述的用途，其中藏灵菇菌发酵乳提取物的量为0.1％～10％。

31.如权利要求30所述的用途，其中藏灵菇菌发酵乳提取物的量为1％～10％重量。

32.如权利要求30所述的用途，其中藏灵菇菌发酵乳提取物的量为1％～5％重量。

33.如权利要求1所述的化妆品组合物，其中藏灵菇菌发酵乳提取物含量基于化妆品组合物总重量为1％～10％重量。

34.如权利要求33所述的化妆品组合物，其中藏灵菇菌发酵乳提取物含量基于化妆品组合物总重量为1％～5％重量。